CN114736150B - 一种芳硒基吲哚类化合物的off-DNA和on-DNA合成方法 - Google Patents

一种芳硒基吲哚类化合物的off-DNA和on-DNA合成方法 Download PDF

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Abstract

本发明的芳硒基吲哚类化合物的合成方法仅需添加催化量的路易斯酸催化剂，催化剂便宜易得，反应体系简单；反应对空气和水都耐受，无需惰性气体保护，反应溶剂无需除水，操作简便；反应条件温和；反应收率高且具有优异的官能团耐受性；本合成方法还适用于多孔板平行合成。本发明提供的on‑DNA合成方法可实现在DNA编码化合物库中通过On‑DNA吲哚类化合物得到On‑DNA 3‑芳硒基吲哚类化合物，能大规模引入各种取代的苯并异硒唑酮类化合物作为合成模块。该方法收率高，产物单一，能够在有机溶剂/水相的混合相中进行，操作简单，不引入金属类试剂，环境友好，适合使用多孔板进行的DNA编码化合物库的合成。

Description

一种芳硒基吲哚类化合物的off-DNA和on-DNA合成方法
技术领域
本发明属于药物化学领域，涉及一种芳硒基吲哚类化合物及其off-DNA和on-DNA合成方法和应用，具体涉及一种经路易斯酸催化off-DNA制备芳硒基吲哚类化合物的方法、该类化合物在制备抗肿瘤药物中的用途和一种on-DNA合成3-芳硒基吲哚类化合物的方法及制得的on-DNA 3-芳硒基吲哚类化合物。
背景技术
含硒有机小分子化合物由于其独特的物理化学特性(J Med Chem.2022；65:4436)，在药物化学中有着非常重要的应用价值。其中，芳硒基吲哚是一种重要的含硒类化合物母核，在药物化学领域有广泛的应用前景。芳硒基吲哚衍生物具有较强的生物活性，例如化合物1具有良好的抗炎活性(Free Radic Biol Med.2017；113:395)；化合物2对人胃癌SGC7901细胞和人纤维肉瘤HT1080细胞的IC50分别为9.5nM和2.4nM(Eur J Med Chem.2015；90:184)；化合物3对人胃癌SGC7901细胞、人肺癌A549细胞和人纤维肉瘤HT1080细胞的IC50分别为98nM、150nM和130nM(Eur J Med Chem.2014；87:306)具有抗肿瘤活性。
Figure BDA0003642224070000011
由于芳硒基吲哚类化合物的重要药理活性，因此吸引了众多研究人员专注于该类化合物的合成新方法研究。目前已报到的合成方法主要采用二芳基二硒醚类化合物(Chem.Eur.J.2018,24,4173；Org.Biomol.Chem.2018,16,4958；Angew.Chem.Int.Ed.2015,54,5772)、芳基硒氯(J.Org.Chem.2009,74,6802)、芳基硒腈(J.Org.Chem.2021,86,9317)和N-芳硒基邻苯二甲酰亚胺(Org.Lett.2007,9,5263)四类化合物作为硒源，但这些硒源都含有一部分离去基团，反应后会生成副产物，不但影响反应的原子经济性和产物的分离纯化，而且还对环境不友好。此外，已报道方法还有一个或多个以下缺点：反应温度高、反应时间长、当量氧化剂或碱的使用、生成有毒的氰根离子、官能团耐受性差等。
Figure BDA0003642224070000021
另外，合成方法如果适用于在多孔板上进行平行合成，则通过采用m种原料A和n种原料B，可以快速构建含有m×n种化合物的分子库，反应结束无需分离纯化即可用于原位的高通量活性筛选，大大加速先导化合物的发现速度。适合多孔板平行合成的反应应具有体系简单、原子经济性高、副产物少、高效且高收率的特点，通常需要满足反应收率≥70％(Nature 2019,574,86)。
因此，开发一种反应条件温和、体系简单、原子经济性高、反应迅速、环境友好的芳硒基吲哚类化合物的合成方法十分必要。
此外，DNA编码化合物库技术通过组合化学快速产生巨型化合物库，并且能高通量地筛选出先导化合物，使得先导化合物的筛选变得前所未有的快捷和高效。构建DNA编码化合物库的挑战之一就是需要在DNA上高收率地合成具有化学多样性的小分子。由于DNA需要在一定的条件下(溶剂、pH,温度、离子浓度)才能维持稳定，同时应用于DNA编码化合物库构建的On-DNA反应还需要有较高的产率。因此DNA上进行的化学反应(简称On-DNA反应)的试剂种类、反应种类、反应条件直接影响到DNA编码化合物库的丰富度和可选择性。因此开发能够与DNA兼容的化学反应也成为目前DNA编码化合物库技术的长期探索和研究方向，也直接影响了DNA编码化合物库的应用及商业价值。
3-芳硒基吲哚是一类重要的药物化合物骨架或中间体结构，将3-芳硒基吲哚化合物骨架引入到DNA编码化合物库中能进一步扩展化合物库的多样性，有利于提高筛选到有效化合物的概率。目前on-DNA合成3-芳硒基吲哚的反应仅有一例报道(Chem.Sci.2022,13,2604)，但采用了添加过量氧化剂的反应条件。针对这一现状，我们希望开发一种反应条件温和、产率高、反应的底物普适性好，适合于使用多孔板进行的DNA编码化合物库的合成过程，增加DNA编码化合物库的多样性，进一步提升DNA编码化合物库技术的应用价值。
发明内容
针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于提供一种芳硒基吲哚类化合物的绿色合成方法(off-DNA合成方法，指常规的有机合成方法，以示与后文中on-DNA合成的区别)，这种方法采用100％原子性的苯并异硒唑酮类化合物作为硒源，采用廉价易得的路易斯酸作为催化剂，在没有其他任何添加剂的情况下即可高效地合成芳硒基吲哚类化合物。此外，该方法还适用于多孔板的平行合成，从而可以高效构建3-芳硒基吲哚类化合物库。另外，本发明的又一目的在于提供了一种on-DNA硒化反应方法，该方法以on-DNA吲哚化合物和苯并异硒唑酮类化合物为原料，在三(五氟苯)硼促进下，在有机溶剂/水相的混合水相中进行，得到on-DNA 3-芳硒基吲哚类化合物。本发明合成方法原子经济性高、原料和催化剂廉价易得、条件温和、操作简便、官能团耐受性好，具有较大的应用价值。
为了实现上述目的，本发明技术方案如下：
第一方面，本发明提供一种式III所示的3-芳硒基吲哚类化合物的绿色合成方法，所述的方法为：
将式(Ⅰ)所示吲哚类化合物、式(Ⅱ)所示苯并异硒唑酮类化合物和路易斯酸溶解于溶剂中，-20～65℃(优选为15～50℃)下搅拌反应1～12小时(优选为1～3小时)，所得反应液A经后处理A，得到如式(Ⅲ)所示3-芳硒基吲哚类化合物；
所述路易斯酸为三(五氟苯基)硼、三氟化硼乙醚、三氟甲磺酸铜、三氟甲磺酸锌、三氟甲磺酸铟、三氟甲磺酸镱中的一种或两种以上的混合物；所述路易斯酸与原料的理论反应量的物质的量之比为1～50：100(优选为5-10：100)，所述原料的理论反应量以所述式I所示吲哚类化合物或式II所示苯并异硒唑酮类化合物中投入物质的量较小的化合物计(当所述式I所示吲哚类化合物与式II所示苯并异硒唑酮类化合物的物质的量之比为1:1时，以任一原料计)；所述式I所示吲哚类化合物与式II所示苯并异硒唑酮类化合物的物质的量之比为1:0.5～4(优选为1:0.5～2)；
Figure BDA0003642224070000031
其反应通式如下：
Figure BDA0003642224070000041
式(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)中，
R1选自氢、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、卤素、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、甲醛基、C1-C4烷羰基、C2-C6炔基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的苄氧基、硝基、羧基、C1-C4烷氧羰甲基中的一种；
R2选自氢、C1-C4烷基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的苯基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的苄基、C1-C4烷酰基、
Figure BDA0003642224070000042
中的一种，n为0-5之间的整数；
R3选自氢、卤素、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、硝基、羧基、C1-C4烷氧羰基中的一种；
R4选自氢、C3-C8环烷基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的C6-C10芳基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的C6-C10杂芳基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的五元或六元杂芳基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的苄基、烯丙基、
Figure BDA0003642224070000043
中的一种。
具体地，所述式III所示含硒苯甲酰胺类化合物为下列之一：
Figure BDA0003642224070000051
/>
Figure BDA0003642224070000061
进一步，所述溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二氧六环、1,2-二氯乙烷、1,4-二氯丁烷、二氯甲烷、六氟异丙醇、乙腈、三氟甲苯、水中的一种或两种以上的混合溶剂。所述溶剂的体积以所述式(Ⅱ)所示苯并异硒唑酮类化合物的物质的量计为0.5-50mL/mmol，优选为5～20mL/mmol。
进一步，所述后处理A为：对所述反应液A进行硅胶柱色谱纯化，收集含目标化合物的洗脱液，减压旋蒸得到所述式III所示含硒苯甲酰胺类化合物；所述硅胶柱色谱纯化的洗脱剂为体积比为1-10:1的石油醚与乙酸乙酯的混合溶剂或体积比为10-200:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂。
所述合成式(Ⅲ)的合成方法反应活性高，在低反应规模和低反应浓度的微量反应体系中仍能顺利发生并保持高收率，因此适用于多微孔板(如96孔板)平行合成，通过采用m种式(I)所示吲哚类化合物和n种式(Ⅱ)所示苯并异硒唑酮类化合物，可以快速构建含有mx n种式(Ⅲ)所示3-芳硒基吲哚类化合物的化合物库，从而用于原位的活性筛选。
上述反应在进行多孔板平行合成时，所述式(Ⅱ)所示苯并异硒唑酮类化合物的物质的量为1～100μmol，优选为10～50μmol。
在进行多孔板平行合成时，溶剂优选自二甲基亚砜、1,2-二氯乙烷、二氯甲烷、六氟异丙醇中的一种，所述溶剂的体积以所述式(Ⅱ)所示苯并异硒唑酮类化合物的物质的量计为0.5-50mL/mmol，优选为5～20mL/mmol。
另外，本发明还提供一种式4所示的2-芳硒基吲哚类化合物的绿色合成方法，所述的方法为：
将3-甲基吲哚、1,2-苯并异硒唑-3-酮和路易斯酸溶解于溶剂中，-20～65℃(优选为15～50℃)下搅拌反应1～12小时(优选为1～3小时)，所得反应液B经后处理B，得到如式4所示2-芳硒基吲哚类化合物；
所述路易斯酸为三(五氟苯基)硼、三氟化硼乙醚、三氟甲磺酸铜、三氟甲磺酸锌、三氟甲磺酸铟、三氟甲磺酸镱中的一种或两种以上的混合物；所述路易斯酸与原料的理论反应量的物质的量之比为1～50：100(优选为5-10：100)，所述原料的理论反应量以所述2-甲基吲哚和式II所示苯并异硒唑酮类化合物中投入物质的量较小的化合物计；所述2-甲基吲哚和式II所示苯并异硒唑酮类化合物的物质的量之比为1:0.5～4(优选为1:0.5～2)；
Figure BDA0003642224070000071
进一步，所述溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二氧六环、1,2-二氯乙烷、1,4-二氯丁烷、二氯甲烷、六氟异丙醇、乙腈、三氟甲苯、水中的一种或两种以上的混合溶剂。
进一步，所述后处理B为：对所述反应液B进行硅胶柱色谱纯化，收集含目标化合物的洗脱液，减压旋蒸得到所述式4所示的2-芳硒基吲哚类化合物；所述硅胶柱色谱纯化的洗脱剂为体积比为50:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂。
所述合成式4的合成方法反应活性高，在低反应规模和低反应浓度的微量反应体系中仍能顺利发生并保持高收率，因此适用于多微孔板(如96孔板)平行合成从而用于原位的活性筛选。
上述反应在进行多孔板平行合成时，所述苯并异硒唑酮类化合物的物质的量为1～100μmol，优选为10～50μmol。
在进行多孔板平行合成时，溶剂优选自二甲基亚砜、1,2-二氯乙烷、二氯甲烷、六氟异丙醇中的一种，所述苯并异硒唑酮类化合物的反应浓度为10～200mM，优选为50～100mM。
第二方面，本发明提供一种On-DNA芳硒基吲哚类化合物的合成方法，所述方法为：
将式(IV)所示On-DNA吲哚类化合物、式(V)所示苯并异硒唑酮类化合物和路易斯酸溶解于溶剂中构建反应体系，15-50℃(优选为25～40℃)下反应0.5～24小时(优选为1～20小时)，所得反应液C经后处理C，得到式(VI)所示on-DNA 3-芳硒基吲哚类化合物；所述路易斯酸为三(五氟苯基)硼；所述溶剂为缓冲水溶液、NH4Cl水溶液(优选pH4.8～5.5)之一与乙腈、1,2-二氯乙烷、二氯甲烷、六氟异丙醇、三氟乙醇、二甲亚砜中一种或两种以上的混合溶液；所述式(IV)所示On-DNA吲哚类化合物、式(V)所示苯并异硒唑酮类化合物与路易斯酸的物质的量之比为1:5-1000：5-50；
其中，结构式中DNA包含由人工修饰的和/或未修饰的核苷酸单体聚合得到的单链或双链的核苷酸链；
Figure BDA0003642224070000081
R5的骨架由0-10个原子构成，R5的骨架由0个原子构成时，羰基与吲哚基直接连接；R5的骨架由1-10个原子构成时，选自下列之一：
Figure BDA0003642224070000082
其中，n1、n2、n3分别为0-9之间的整数；
R6选自氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基、硝基中的一种；
R7选自氢、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、苯基、卤代苯基、苄基、卤代苄基等中的一种。
R8选自氢、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基等中的一种。
R9选自氢、C6-C10芳基、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基、
Figure BDA0003642224070000083
等中的一种。
进一步，所述式(IV)所示On-DNA吲哚类化合物(On-DNA吲哚类化合物)选自下列之一：
Figure BDA0003642224070000091
优选地，所述缓冲水溶液选自下列之一：H3PO4–NaH2PO4缓冲液(优选pH 1.0～4.2)、Na2HPO4–NaH2PO4缓冲液(优选pH 5.8～8.0)、Tris-盐酸缓冲液(优选pH 7.0-9.0)、硼砂-NaOH缓冲液(优选pH 9.3～10.1)、Na2HPO4-NaOH缓冲液(优选pH 10.9-12.0)、醋酸-醋酸钠缓冲液(优选pH 3.7～5.8)、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(优选pH 3.0～6.2)、硼砂-Na2CO3缓冲液(优选pH 10.8～11.2)、甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(优选pH 8.6～10.6)、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液(优选pH4.1～5.9)、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(优选pH 5.8～8.0)、巴比妥-盐酸缓冲液(优选pH 6.8～9.6)、硼砂-硼酸缓冲液(优选pH 7.4～9.0)、碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(优选pH 9.2～10.8)、磷酸氢二钠-氢氧化钠缓冲液(pH 11.0～11.9)、氯化钾-氢氧化钠缓冲液(优选pH 12.0～13.0)、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(优选pH2.6～7.6)等。
优选地，所述缓冲水溶液为H3PO4–NaH2PO4(PBS)缓冲溶液；所述H3PO4–NaH2PO4缓冲液的pH为1.0～4.2；优选地，pH为4.2。
本发明尤其推荐所述溶剂为pH 4.2的H3PO4–NaH2PO4缓冲液与1,2-二氯乙烷或六氟异丙醇的混合溶液，优选体积比为1:1。
进一步，所述反应体系中，所述式(IV)所示on-DNA吲哚类化合物的浓度为100nM～1mM(优选300nM～600nM)。
进一步地，上述方法用于批量的多孔板操作。在多孔板上进行微量反应时，优选将式(IV)所示吲哚类化合物、式(V)所示苯并异硒唑酮类化合物、路易斯酸分别溶于所述溶剂后，混合，再进行反应。
进一步地，上述方法可用于在多孔板上进行DNA编码化合物库的合成。
进一步，所述后处理C为：向所述反应液C中加入所述反应液总体积10％的5M的氯化钠溶液，然后再加入所述反应液总体积的2.5倍的无水乙醇，振荡均匀后，于-80℃冷冻0.5-6小时，4℃、12000rpm离心半小时，弃上清液，所得沉淀即式(VI)所示3-芳硒基吲哚类化合物。
在本发明的一个实施例中，所得沉淀用去离子水溶解，即得到On-DNA芳硒基吲哚类化合物的溶液，通过酶标仪OD定量后，进而通过LCMS确认每个反应的转化率。
另外，本发明所使用的on-DNA原料所述式(IV)所示On-DNA吲哚类化合物按如下方法合成：
Figure BDA0003642224070000101
将溶解于缓冲水溶液中的DNA-NH2、溶解于溶剂中的式(VII)所示吲哚羧酸类化合物、缩合剂、碱性物质相继加入到反应微孔中构建反应体系，15-50℃(优选为25～40℃)下反应3～24小时(优选为6～12小时)，所得反应液D经后处理D，得到式(IV)所示on-DNA吲哚类化合物；所述DNA-NH2、式(VII)所示吲哚羧酸类化合物、缩合剂与碱性物质的物质的量之比为1:10-100：10-100:10-100；
所述溶剂为缓冲水溶液、NH4Cl水溶液(优选pH4.8～5.5)之一与乙腈、六氟异丙醇、三氟乙醇、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺(DMA)、二甲亚砜中一种或两种以上的混合溶液；
所述缩合剂选自2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)、O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)、4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐(DMTMM)中的一种；所述碱性物质选自三乙胺、二异丙基乙胺、三乙烯二胺、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯、4-二甲氨基吡啶、吡啶、N-甲基吗啉、四甲基乙二胺、乌洛托品等有机碱中的一种。
优选地，所述缓冲水溶液选自下列之一：Na2HPO4–NaH2PO4缓冲液(优选pH 5.8～8.0)、Tris-盐酸缓冲液(优选pH 7.0-9.0)、硼砂-NaOH缓冲液(优选pH9.3～10.1)、Na2HPO4-NaOH缓冲液(优选pH 10.9-12.0)、醋酸-醋酸钠缓冲液(优选pH 3.7～5.8)、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(优选pH 3.0～6.2)、硼砂-Na2CO3缓冲液(优选pH 10.8～11.2)、甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(优选pH 8.6～10.6)、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液(优选pH 4.1～5.9)、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(优选pH 5.8～8.0)、巴比妥-盐酸缓冲液(优选pH 6.8～9.6)、硼砂-硼酸缓冲液(优选pH 7.4～9.0)、碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(优选pH 9.2～10.8)、磷酸氢二钠-氢氧化钠缓冲液(优选pH 11.0～11.9)、氯化钾-氢氧化钠缓冲液(优选pH 12.0～13.0)、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液(优选pH 2.6～7.6)等。
优选地，所述缓冲水溶液为硼砂-NaOH缓冲溶液；所述缓冲水溶液的pH为9.3-10.1；优选地，pH为9.4。
本发明尤其推荐所述溶剂为pH9.4的硼砂-NaOH缓冲液与二甲基乙酰胺的混合溶液，优选体积比为10:3。
进一步，所述反应体系中，所述DNA-NH2的终浓度为500nM～500mM(优选100mM～500mM)。
进一步，所述后处理D为：向所述反应液D中加入所述反应液总体积10％的5M的氯化钠溶液，然后再加入所述反应液总体积的2.5倍的无水乙醇，振荡均匀后，于-80℃冷冻0.5-6小时，4℃、12000rpm离心半小时，弃上清液，所得沉淀即式(IV)所示on-DNA吲哚类化合物。
通过采用以上技术，与现有技术相比，本发明的有益效果主要体现在：
(1)选用苯并异硒唑酮作为硒化试剂，原子经济性高，原子转化率高达100％；反应体系除了两种原料之外，仅需要添加催化量的路易斯酸催化剂，催化剂便宜易得，反应体系简单；反应对空气和水都耐受，无需惰性气体保护，反应溶剂无需除水，操作简便；反应条件温和，在室温条件下即可高效进行；反应收率高且具有优异的官能团耐受性，尤其是可以通过R4基团引入芳基、杂芳基、脂肪基、高度官能团化的氨基酸侧链和腺苷侧链。此外，本发明的方法还适用于多孔板平行合成。
(2)本发明提供的on-DNA合成方法可以实现在DNA编码化合物库中通过On-DNA吲哚类化合物得到On-DNA 3-芳硒基吲哚类化合物，可广泛应用于各种On-DNA吲哚类化合物底物，并且能大规模引入各种取代的苯并异硒唑酮类化合物作为合成模块。该方法收率高，产物单一，能够在有机溶剂/水相的混合水相中进行，操作简单，不引入金属类试剂，环境友好，适合使用多孔板进行的DNA编码化合物库的合成。
附图说明
图1：实施例45用于平行合成的6种吲哚和6种苯并异硒唑酮化合物的结构
图2.实施例45平行合成产物的收率
图3.On-DNA吲哚化合物的结构和收率
图4.On-DNA 3-芳硒基吲哚类化合物的结构和收率
图5～图34：多孔板平行合成产物的液相分析图
图35～图52：on-DNA吲哚化合物的液相分析和Mass图谱
图53～图88：on-DNA 3-芳硒基吲哚类化合物的液相分析和Mass图谱
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明做详细说明，但是本发明的保护范围不仅仅限制于此。
缩写对照表
DMA 二甲基乙酰胺
HATU 2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯
HBTU O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯
DMTMM 4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐
DIPEA 二异丙基乙胺
Bn 苄基
Boc 叔丁氧羰基
Ac 乙酰基
Tris 三羟甲基氨基甲烷
实施例1
Figure BDA0003642224070000121
将吲哚(28mg,0.24mmol)、1,2-苯并异硒唑-3-酮(40mg,0.2mmol)、三(五氟苯)硼烷(5mg,0.01mmol)和2mL 1,2-二氯乙烷相继加入反应管中，室温反应2小时后，加硅胶拌样后经硅胶柱色谱(二氯甲烷：甲醇的体积比为50:1)纯化，收集含目标化合物的洗脱液，减压旋蒸得到白色固体产物1(60mg，收率95％，液相纯度99％)，产物为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.62(s,1H),8.05(s,1H),7.74(d,J＝7.5Hz,1H),7.64(d,J＝2.0Hz,1H),7.49(d,J＝8.0Hz,2H),7.31(d,J＝8.0Hz,1H),7.16(t,J＝7.5Hz,1H),7.13(t,J＝7.5Hz,1H),7.08(t,J＝7.5Hz,1H),7.03(t,J＝7.5Hz,1H),6.79(d,J＝8.0Hz,1H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ＝169.42,137.33,136.87,132.95,132.12,130.59,129.91,128.25,128.12,124.36,121.83,119.81,119.14,112.01,97.46.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C15H13N2OSe]+317.0188,found 317.0197.
实施例2
将吲哚(28mg,0.24mmol)、1,2-苯并异硒唑-3-酮(40mg,0.2mmol)、三(五氟苯)硼烷(5mg,0.01mmol)和2mL 1,2-二氯乙烷相继加入反应管中，65℃反应1小时后，按实施例1所述后处理方法分离纯化得到白色固体产物1(61mg，收率97％，液相纯度99％)。
实施例3
将吲哚(28mg,0.24mmol)、1,2-苯并异硒唑-3-酮(40mg,0.2mmol)、三(五氟苯)硼烷(5mg,0.01mmol)和2mL 1,2-二氯乙烷相继加入反应管中，-10℃反应1小时后，按实施例1所述后处理方法分离纯化得到白色固体产物1(59mg，收率93％，液相纯度99％)。
实施例4
将吲哚(28mg,0.24mmol)、1,2-苯并异硒唑-3-酮(40mg,0.2mmol)、三氟甲磺酸铜(3.6mg,0.01mmol)和2mL 1,2-二氯乙烷相继加入反应管中，室温反应2小时后，按实施例1所述后处理方法分离纯化得到白色固体产物1(59mg，收率93％，液相纯度99％)。
实施例5
将吲哚(28mg,0.24mmol)、1,2-苯并异硒唑-3-酮(40mg,0.2mmol)、三氟甲磺酸锌(3.6mg,0.01mmol)和2mL 1,2-二氯乙烷相继加入反应管中，室温反应2小时后，按实施例1所述后处理方法分离纯化得到白色固体产物1(59mg，收率93％，液相纯度99％)。
实施例6
将吲哚(28mg,0.24mmol)、1,2-苯并异硒唑-3-酮(40mg,0.2mmol)、三(五氟苯)硼烷(5mg,0.01mmol)和2mL 1,4-二氯丁烷相继加入反应管中，室温反应2小时后，按实施例1所述后处理方法分离纯化得到白色固体产物1(57mg，收率91％，液相纯度99％)。
实施例7
将吲哚(28mg,0.24mmol)、1,2-苯并异硒唑-3-酮(40mg,0.2mmol)、三(五氟苯)硼烷(5mg,0.01mmol)和2mL六氟异丙醇相继加入反应管中，室温反应2小时后，按实施例1所述后处理方法分离纯化得到白色固体产物1(60mg，收率95％，液相纯度99％)。
实施例8
将吲哚(28mg,0.24mmol)、1,2-苯并异硒唑-3-酮(40mg,0.2mmol)、三(五氟苯)硼烷(5mg,0.01mmol)和2mL乙腈相继加入反应管中，室温反应2小时后，按实施例1所述后处理方法分离纯化得到白色固体产物1(54mg，收率85％，液相纯度99％)。
实施例9
Figure BDA0003642224070000141
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为2-甲基吲哚(39mg,0.3mmol)，得到黄色固体产物2(65mg，收率99％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.57(s,1H),8.05(s,1H),7.73(dd,J＝7.5,1.5Hz,1H),7.51(s,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,1H),7.23(dd,J＝7.5,1H),7.12(td,J＝7.0,1.5Hz,1H),7.08(td,J＝7.5,1.5Hz,2H),6.97(td,J＝8.0,1.0Hz,1H),6.69(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H),2.43(s,3H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ169.52,141.99,136.94,136.23,132.30,130.97,130.70,128.45,127.75,124.37,121.17,119.62,118.57,111.06,95.67,12.67.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C16H15N2OSe]+331.0344,found331.0351.
实施例10
Figure BDA0003642224070000142
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为吲哚-2-乙酸甲酯(61mg,0.3mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为60:1的洗脱剂，得到黄色油状产物3(76mg，收率95％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.72(s,1H),8.08(s,1H),7.74(d,J＝7.5Hz,1H),7.54(s,1H),7.44(d,J＝8.5Hz,1H),7.24(d,J＝8.0Hz,1H),7.13(d,J＝7.0Hz,2H),7.03(dt,J＝28.0,8.0Hz,2H),6.71(d,J＝8.0Hz,1H),4.00(d,J＝7.5Hz,2H),3.94(s,2H),1.09(t,J＝7.5Hz,3H).13C NMR(151MHz,DMSO-d6)δ169.44,169.39,138.11,136.61,136.50,132.09,130.59,130.31,128.34,128.16,124.47,121.86,119.83,119.10,111.58,97.84,60.59,32.92,13.94.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C19H19N2O3Se]+403.0555,found 403.0563.
实施例11
Figure BDA0003642224070000151
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为3-甲基吲哚(39mg,0.3mmol)，得到黄色固体产物4(65mg，收率98％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.22(s,1H),8.14(s,1H),7.83(dd,J＝6.0,3.5Hz,1H),7.60(s,1H),7.56(d,J＝7.5Hz,1H),7.32(d,J＝8.0Hz,1H),7.20(m,2H),7.13(td,J＝7.0,1.5Hz,1H),7.04(t,J＝8.0Hz,1H),6.63(m,1H),2.29(s,3H).13C NMR(126MHz,DMSO)δ169.21,137.89,136.44,131.42,131.37,128.58,128.23,127.72,125.01,122.24,120.75,118.84,118.59,118.19,111.13,10.07.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C16H15N2OSe]+331.0344,found 331.0350.
实施例12
Figure BDA0003642224070000152
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为4-甲氧基吲哚(44mg,0.3mmol)，得到黄色固体产物5(60mg，收率87％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.51(d,J＝2.5Hz,1H),8.00(s,1H),7.74–7.66(m,1H),7.44(s,1H),7.40(d,J＝2.5Hz,1H),7.12–7.01(m,4H),6.96–6.89(m,1H),6.49(dd,J＝7.0,2.0Hz,1H),3.57(s,3H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ169.52,154.13,140.02,138.80,131.98,131.60,130.38,128.79,127.83,123.88,122.71,119.24,105.20,100.67,95.82,55.15.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C16H15N2O2Se]+347.0293,found 347.0300.
实施例13
Figure BDA0003642224070000153
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为4-甲基吲哚(39mg,0.3mmol)，得到白灰色固体产物6(60mg，收率91％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.56(s,1H),8.04(s,1H),7.75(dd,J＝6.0,3.5Hz,1H),7.54(d,J＝2.5Hz,1H),7.48(s,1H),7.33(d,J＝8.0Hz,1H),7.14(dd,J＝6.0,3.5Hz,2H),7.03(t,J＝7.5Hz,1H),6.87(dd,J＝6.0,3.5Hz,1H),6.75(d,J＝7.0Hz,1H),2.48(d,J＝12.0Hz,3H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ169.33,139.92,137.34,133.70,131.51,130.81,130.39,128.44,128.16,127.35,124.27,121.83,121.25,110.03,96.80,18.25.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C16H15N2OSe]+331.0344,found 331.0349.
实施例14
Figure BDA0003642224070000161
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为4-溴吲哚(59mg,0.3mmol)，得到黄色固体产物7(67mg，收率85％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.08(s,1H),8.06(s,1H),7.80–7.73(m,1H),7.69(s,1H),7.54(dd,J＝8.0,1.0Hz,1H),7.46(s,1H),7.21(dd,J＝7.5,0.5Hz,1H),7.15–7.10(m,2H),7.06(t,J＝8.0Hz,1H),6.86–6.80(m,1H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ169.44,140.25,138.19,135.79,131.36,130.76,128.81,128.08,126.50,124.32,124.17,122.99,113.95,111.95,97.93.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C15H12BrN2OSe]+394.9293,found 394.9297.
实施例15
Figure BDA0003642224070000162
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为5-氟吲哚(40mg,0.3mmol)，得到白色固体产物8(64mg，收率96％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.74(s,1H),8.07(s,1H),7.75(dd,J＝7.5,2.0Hz,1H),7.73(d,J＝2.5Hz,1H),7.52(s,1H),7.50(dd,J＝9.0,4.5Hz,1H),7.15(td,J＝7.5,1.5Hz,1H),7.11(td,J＝7.5,2.0Hz,1H),7.01(td,J＝9.0,2.5Hz,1H),6.97(dd,J＝9.5,2.0Hz,1H),6.76(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H).13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ169.42,157.58(d,J＝233.1Hz),137.01,135.07,133.53,132.09,130.79,130.68(d,J＝9.9Hz),128.36,128.00,124.56,113.31(d,J＝9.8Hz),110.18(d,J＝26.3Hz),103.70(d,J＝23.3Hz),97.59(d,J＝4.8Hz).HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C15H12FN2OSe]+335.0093,found 335.0101.
实施例16
Figure BDA0003642224070000171
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为5-氯吲哚(45mg,0.3mmol)，得到黄色固体产物9(69mg，收率99％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.83(s,1H),8.09(s,1H),7.80–7.71(m,2H),7.55–7.50(m,2H),7.24(s,1H),7.21–7.08(m,2H),6.75(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ169.41,136.89,135.44,134.88,132.07,131.30,130.86,128.40,127.98,124.66,124.62,121.97,118.18,113.80,97.32.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C15H12ClN2OSe]+350.9798,found 350.9805.
实施例17
Figure BDA0003642224070000172
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为5-溴吲哚(59mg,0.3mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为60:1的洗脱剂，得到黄色固体产物10(78mg，收率99％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.85(s,1H),8.09(s,1H),7.76(dd,J＝7.5,1.5Hz,1H),7.73(d,J＝2.5Hz,1H),7.54(s,1H),7.48(d,J＝8.5Hz,1H),7.39(d,J＝2.0Hz,1H),7.28(dd,J＝9.0,2.0Hz,1H),7.14(m,2H),6.74(dd,J＝7.5,1.5Hz,1H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ169.40,136.88,135.69,134.72,132.04,131.95,130.88,128.41,127.96,124.63,124.49,121.22,114.24,112.60,97.20.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C15H12BrN2OSe]+394.9293,found 394.9298.
实施例18
Figure BDA0003642224070000181
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为5-碘吲哚(73mg,0.3mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为60:1的洗脱剂，得到黄色固体产物11(84mg，收率95％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.83(s,1H),8.10(s,1H),7.76(dd,J＝7.0,1.5Hz,1H),7.67(d,J＝2.5Hz,1H),7.60(d,J＝1.5Hz,1H),7.55(s,1H),7.43(dd,J＝8.5,1.5Hz,1H),7.36(d,J＝8.5Hz,1H),7.19–7.09(m,2H),6.74(dd,J＝7.5,1.5Hz,1H).13CNMR(151MHz,DMSO)δ169.39,136.96,136.06,134.21,132.73,131.99,130.88,129.90,128.42,127.95,127.43,124.61,114.64,96.81,83.91.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C15H12IN2OSe]+442.9154,found 442.9159.
实施例19
Figure BDA0003642224070000182
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为5-甲氧基吲哚(44mg,0.3mmol)，得到黄色固体产物12(68mg，收率99％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.61(s,1H),8.09(s,1H),7.75(dd,J＝7.5,2.0Hz,1H),7.56(d,J＝3.0Hz,1H),7.51(s,1H),7.40(d,J＝8.5Hz,1H),7.12(m,2H),6.81(d,J＝2.0Hz,1H),6.81(d,J＝2.0Hz,1H),6.80(d,J＝2.0Hz,1H),3.67(s,3H).13CNMR(126MHz,DMSO-d6)δ169.45,154.13,137.51,133.46,132.03,131.81,130.72,130.67,128.34,128.05,124.38,112.88,112.00,100.59,96.95,55.25.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C16H15N2O2Se]+347.0293,found 347.0299.
实施例20
Figure BDA0003642224070000191
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为5-硝基吲哚(49mg,0.3mmol)，得到黄色固体产物13(65mg，收率90％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.35(s,1H),8.18(d,J＝2.5Hz,1H),8.15(s,1H),8.07(dd,J＝9.0,2.5Hz,1H),7.97(d,J＝2.0Hz,1H),7.80(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H),7.70(d,J＝9.0Hz,1H),7.60(s,1H),7.17(td,J＝7.0,1.0Hz,1H),7.12(td,J＝8.0,1.5Hz,1H),6.75(dd,J＝8.0,1.0Hz,1H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ169.38,141.43,140.35,137.19,136.56,131.90,131.10,129.61,128.55,128.00,124.84,117.40,115.80,112.90,100.64.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C15H12N3O3Se]+362.0038,found 362.0047.
实施例21
Figure BDA0003642224070000192
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为5-羧基吲哚(48mg,0.3mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为20:1的洗脱剂，得到黄色固体产物14(68mg，收率95％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.97(s,1H),8.11(s,1H),7.99(s,1H),7.87–7.69(m,3H),7.57(d,J＝8.5Hz,2H),7.15(t,J＝7.5Hz,1H),7.10(t,J＝7.5Hz,1H),6.76(d,J＝8.0Hz,1H).13C NMR(126MHz,DMSO)δ169.51,168.15,139.59,137.02,134.89,132.03,130.95,129.63,128.51,128.06,124.69,123.22,122.51,121.81,112.05,99.15.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C16H13N2O3Se]+361.0086,found 361.0091.
实施例22
Figure BDA0003642224070000201
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为7-甲基吲哚(39mg,0.3mmol)，得到棕色固体产物15(65mg，收率99％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.61(s,1H),8.04(s,1H),7.73(d,J＝7.5Hz,1H),7.62(t,J＝2.5Hz,1H),7.50(s,1H),7.15–7.05(m,3H),6.98–6.91(m,2H),6.79(d,J＝8.0Hz,1H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ169.42,137.35,136.34,132.59,132.12,130.58,129.65,128.20,128.18,124.33,122.36,121.23,119.99,116.78,97.93,16.63.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C16H15N2OSe]+331.0344,found331.0347.
实施例23
Figure BDA0003642224070000202
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为N-甲基吲哚(39mg,0.3mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为80:1的洗脱剂，得到橙色固体产物16(61mg，收率93％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.10–8.05(m,1H),7.75(dd,J＝7.6,1.6Hz,1H),7.65(s,1H),7.55–7.52(m,2H),7.32(dt,J＝8.0,1.0Hz,1H),7.23(m,1H),7.13(td,J＝7.5,1.5Hz,1H),7.08(m,2H),6.81(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H),3.87(s,3H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ169.45,137.50,137.36,136.87,132.03,130.74,130.37,128.34,128.16,124.50,121.98,120.05,119.44,110.39,96.47,32.70.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C16H15N2OSe]+331.0344,found 331.0352.
实施例24
Figure BDA0003642224070000203
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为1-(4-甲基苄基)吲哚(66mg,0.3mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为150:1的洗脱剂，得到黄色固体产物17(83mg，收率99％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ7.60(d,J＝8.0Hz,1H),7.56(dd,J＝7.5,1.5Hz,1H),7.39(s,1H),7.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.24(d,J＝7.5Hz,1H),7.18–7.12(m,3H),7.11–7.06(m,4H),7.04(td,J＝8.0,1.5Hz,1H),6.16(s,2H),5.34(s,2H),2.33(s,3H).13C NMR(126MHz,CDCl3)δ170.38,138.28,137.62,137.27,135.62,133.65,131.40,131.18,131.13,129.51,127.64,127.00,124.65,122.53,120.67,120.54,110.11,97.93,50.20,21.06.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C23H21N2OSe]+421.0814,found421.0820.
实施例25
Figure BDA0003642224070000211
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为N-苯基吲哚(58mg,0.3mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为100:1的洗脱剂，得到白色固体产物18(73mg，收率93％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.13(s,1H),7.99(s,1H),7.80(dd,J＝7.5,2.0Hz,1H),7.71–7.65(m,2H),7.65–7.56(m,4H),7.46–7.43(m,1H),7.41(dt,J＝7.5,1.0Hz,1H),7.28(m,J＝8.3,1H),7.21–7.11(m,3H),6.95(dd,J＝8.0,1.5Hz,1H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ169.44,138.39,136.73,136.23,135.35,132.01,131.11,130.96,129.90,128.44,128.40,126.95,124.70,124.09,123.25,121.22,120.15,110.98,100.60.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C21H17N2OSe]+393.0501,found 393.0508.
实施例26
Figure BDA0003642224070000212
按照实施例1所述的方法，不同的是将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为N-苄基-6-溴-苯并[1,2-d]异硒唑-3-酮(73mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用石油醚：乙酸乙酯的体积比为5:1的洗脱剂，得到淡黄色固体产物19(78mg，收率81％，液相纯度99％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.73(d,J＝2.8Hz,1H),9.23(t,J＝6.0Hz,1H),7.72(d,J＝2.4Hz,1H),7.69(d,J＝8.4Hz,1H),7.52(d,J＝8.0Hz,1H),7.43–7.29(m,6H),7.30–7.24(m,1H),7.22–7.16(m,1H),7.11–7.04(m,1H),6.88(d,J＝2.0Hz,1H),4.52(d,J＝6.0Hz,2H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ166.74,140.02,139.30,136.89,133.42,131.55,130.32,129.76,129.52,128.35,127.50,127.31,126.89,124.87,122.16,120.18,118.94,112.25,96.64,42.72.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C22H18BrN2OSe]+484.9762,found 484.9764.
实施例27
Figure BDA0003642224070000221
按照实施例1所述的方法，不同的是将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为5-甲氧基-苯并[1,2-d]异硒唑-3-酮(46mg,0.2mmol)，得到黄色固体产物20(68mg，收率99％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.58(s,1H),8.07(s,1H),7.62(s,1H),7.51(s,1H),7.48(d,J＝8.0Hz,1H),7.31(d,J＝9.0Hz,2H),7.15(t,J＝6.5Hz,1H),7.03(t,J＝7.0Hz,1H),6.74(d,J＝7.5Hz,1H),6.67(d,J＝8.5Hz,1H),3.70(s,3H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ169.26,156.75,136.90,132.97,132.91,130.01,129.29,126.90,121.89,119.85,119.27,117.27,113.71,112.04,97.77,55.36,39.50.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C16H15N2O2Se]+347.0293,found 347.0298.
实施例28
Figure BDA0003642224070000222
按照实施例1所述的方法，不同的是将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为N-环己基-苯并[1,2-d]异硒唑-3-酮(56mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用石油醚：乙酸乙酯的体积比为5:1的洗脱剂，得到黄色固体产物21(76mg，收率95％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.63(s,1H),8.33(d,J＝7.5Hz,1H),7.65(d,J＝2.5Hz,1H),7.63(d,J＝6.5Hz,1H),7.49(d,J＝8.0Hz,1H),7.32(d,J＝8.0Hz,1H),7.16(t,J＝7.5Hz,1H),7.12(t,J＝7.5Hz,1H),7.09–7.02(m,2H),6.78(d,J＝8.0Hz,1H),3.83–3.74(m,1H),1.92–1.86(m,2H),1.79–1.73(m,2H),1.66–1.55(m,1H),1.40–1.27(m,4H),1.20–1.11(m,J＝12.9,1H).13CNMR(126MHz,DMSO-d6)δ166.72,136.87,136.44,133.44,133.04,130.34,129.89,128.11,127.91,124.45,121.92,119.88,119.16,112.07,97.11,48.46,32.40,25.27,24.90.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C21H23N2OSe]+399.0970,found 399.0979.
实施例29
Figure BDA0003642224070000231
按照实施例1所述的方法，不同的是将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为N-苄基-6-硝基-苯并[1,2-d]异硒唑-3-酮(67mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用石油醚：乙酸乙酯的体积比为5:1的洗脱剂，得到黄色固体产物22(75mg，收率83％，液相纯度99％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.82(s,1H),9.48(t,J＝6.4Hz,1H),8.01(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.95(d,J＝8.8Hz,1H),7.80(d,J＝2.4Hz,1H),7.61(d,J＝2.0Hz,1H),7.54(d,J＝8.4Hz,1H),7.45–7.33(m,5H),7.32–7.25(m,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(t,J＝7.2Hz,1H),4.57(d,J＝6.0Hz,2H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ166.18,148.54,139.64,138.96,138.02,136.93,133.69,129.38,129.16,128.37,127.36,126.97,122.56,122.23,120.27,119.67,118.81,112.27,96.01,42.83.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C22H18N3O3Se]+452.0508,found452.0509.
实施例30
Figure BDA0003642224070000232
按照实施例1所述的方法，不同的是将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为N-(4-溴苯基)-苯并[1,2-d]异硒唑-3-酮(71mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用石油醚：乙酸乙酯的体积比为5:1的洗脱剂，得到黄色固体产物23(83mg，收率88％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.67(s,1H),10.57(s,1H),7.79(d,J＝8.5Hz,3H),7.70(d,J＝2.5Hz,1H),7.58(d,J＝8.5Hz,2H),7.50(d,J＝8.5Hz,1H),7.33(d,J＝8.0Hz,1H),7.23(t,J＝7.5Hz,1H),7.20–7.14(m,3H),7.05(t,J＝7.5Hz,1H),6.87(d,J＝8.0Hz,1H).13C NMR(126MHz,DMSO)δ166.63,138.49,136.90,136.67,133.43,133.25,131.56,131.10,129.74,128.56,128.51,124.85,122.13,122.04,120.02,119.12,115.52,112.16,96.54.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C21H16BrN2OSe]+470.9606,found 470.9613.
实施例31
Figure BDA0003642224070000241
按照实施例1所述的方法，不同的是将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为已知化合物原料24(75mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用石油醚：乙酸乙酯的体积比为3:1的洗脱剂，得到灰色固体产物24(92mg，收率93％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ8.59(s,1H),7.57(d,J＝7.5Hz,1H),7.49–7.44(m,2H),7.40(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),7.26(d,J＝7.5Hz,1H),7.15(t,J＝7.5Hz,1H),7.08–7.00(m,4H),6.97(dd,J＝7.5,1.5Hz,1H),6.77(d,J＝8.0Hz,2H),6.64(d,J＝7.0Hz,1H),5.18(s,1H),5.13(m,1H),3.80(s,3H),3.32(dd,J＝14.0,6.0Hz,1H),3.21(dd,J＝14.0,5.0Hz,1H),1.61(s,1H).13C NMR(151MHz,DMSO)δ172.21,168.05,155.12,137.37,136.65,132.07,131.85,131.32,130.54,130.11,129.54,127.35,127.13,124.87,122.82,120.74,120.33,115.65,111.49,98.80,53.90,52.55,36.99.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C25H23N2O4Se]+495.0818,found 495.0822.
实施例32
Figure BDA0003642224070000242
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为N-甲基吲哚，将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为已知化合物原料25(80mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用石油醚：乙酸乙酯的体积比为3:1的洗脱剂，得到黄色固体产物25(93mg，收率90％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ8.20(s,1H),7.60(d,J＝8.0Hz,1H),7.57(d,J＝7.5Hz,1H),7.40(d,J＝8.5Hz,1H),7.36(d,J＝8.5Hz,1H),7.31(m,3H),7.17(m,2H),7.11(d,J＝7.5Hz,1H),7.08(d,J＝2.5Hz,1H),6.99(m,3H),6.73(d,J＝7.5Hz,1H),5.26–5.21(m,1H),3.86(s,3H),3.75(s,3H),3.57(dd,J＝15.0,5.5Hz,1H),3.49(dd,J＝15.0,5.0Hz,1H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ172.35,167.79,137.99,137.76,136.24,136.14,131.83,131.12,130.95,129.46,127.76,127.24,124.64,122.99,122.42,122.25,120.65,120.37,119.73,118.82,111.23,110.13,109.53,97.28,53.59,52.45,33.04,27.66.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C28H26N3O3Se]+532.1134,found 532.1145.
实施例33
Figure BDA0003642224070000251
将邻氯硒基苯甲酰氯(200mg,0.79mmol)的乙腈溶液，滴加到含有丝氨酸甲酯盐酸盐(134mg,0.86mmol)和碳酸钾(162mg,1.17mmol)的乙腈溶液中。然后室温反应过夜，加水和乙酸乙酯萃取，分离有机相，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，经硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯的体积比为1:1)。收集含目标化合物的洗脱液，减压旋蒸得到白色固体原料26(83mg，收率35％，液相纯度99％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.11(d,J＝8.0Hz,1H),7.82(d,J＝7.6Hz,1H),7.66–7.54(m,1H),7.46–7.33(m,1H),5.70(t,J＝4.8Hz,1H),5.16(t,J＝3.6Hz,1H),4.09(dt,J＝11.2,4.0Hz,1H),3.81–3.71(m,1H),3.66(s,3H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ＝169.96,167.31,141.55,131.43,127.05,126.94,125.71,125.39,61.76,57.43,52.14.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C11H12NO4Se]+301.9926,found301.9935.
Figure BDA0003642224070000252
按照实施例1所述的方法，不同的是将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为原料26(60mg,0.2mmol)，得到白色固体产物26(55mg，收率91％，液相纯度99％)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.79(s,1H),7.61(dd,J＝7.6,1.6Hz,1H),7.56(d,J＝8.0Hz,1H),7.47(s,1H),7.46(d,1.6Hz,1H),7.29–7.19(m,2H),7.14(t,J＝7.6Hz,1H),7.07(td,J＝7.2,1.6Hz1H),7.06–6.93(m,2H),4.95(t,J＝3.6Hz,1H),4.14(d,J＝3.2Hz,2H),3.83(s,3H),2.84(s,1H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ171.03,168.56,137.49,136.68,132.05,131.65,131.43,130.14,129.61,127.48,124.91,122.86,120.78,120.35,111.47,98.86,63.36,55.24,52.89.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C19H19N2O4Se]+419.0505,found 419.0511.
实施例34
Figure BDA0003642224070000261
按照实施例33原料26所述的方法，不同的是所用底物为半胱氨酸甲酯盐酸盐(160mg,0.86mmol)，且过硅胶柱时采用石油醚：乙酸乙酯的体积比为2:1的洗脱剂，得到黄色固体原料27(89mg，收率34％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ8.06(d,J＝8.0Hz,1H),7.64(d,J＝7.5Hz,1H),7.60(td,J＝7.0,1.5Hz,1H),7.44–7.39(m,1H),5.60(dd,J＝7.5,6.0Hz,1H),3.80(s,3H),3.09–2.97(m,2H),2.17(s,3H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ170.63,167.90,139.66,132.34,128.87,126.31,126.15,123.77,54.87,52.76,36.98,16.10.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C12H14NO3SSe]+331.9854,found331.9863.
Figure BDA0003642224070000262
按照实施例1所述的方法，不同的是将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为原料27(66mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为60:1的洗脱剂，得到黄色油状产物27(78mg，收率87％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ8.88(s,1H),7.62(d,J＝8.0Hz,1H),7.58(d,J＝8.0Hz,1H),7.47(dd,J＝5.5,3.0Hz,2H),7.28–7.24(m,1H),7.12(m,3H),7.04(t,J＝8.0Hz,1H),6.99(d,J＝78.0Hz,1H),5.13(d,J＝6.5Hz,1H),3.84(s,3H),3.23(dd,J＝14.0,5.0Hz,1H),3.14(dd,J＝14.0,5.0Hz,1H),2.19(s,3H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ171.37,167.99,137.74,136.69,132.08,131.55,131.39,130.14,129.55,127.32,124.83,122.78,120.70,120.34,111.47,98.84,52.74,52.26,36.49,16.37.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C20H21N2O3SSe]+449.0433,found 449.0439.
实施例35
Figure BDA0003642224070000271
/>
按照实施例33原料26所述的方法，不同的是所用底物为谷氨酸二甲酯盐酸盐得(182mg,0.86mmol)，到黄色固体原料28(90mg,收率32％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ8.04(d,J＝7.5,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.59(td,J＝7.0,1.5Hz,1H),7.44–7.36(m,1H),5.40(dd,J＝9.5,4.5Hz,1H),3.76(s,3H),3.63(s,3H),2.49–2.27(m,3H),2.17–2.07(m,1H).13C NMR(151MHz,CDCl3)δ172.51,171.16,167.83,139.13,132.36,128.92,126.43,126.22,123.83,77.00,55.04,52.72,51.80,30.16,28.14.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C14H16NO5Se]+358.0188,found 358.0197.
Figure BDA0003642224070000272
按照实施例1所述的方法，不同的是将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为原料28(71mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用石油醚：乙酸乙酯的体积比为1:1的洗脱剂，得到黄色固体产物28(91mg，收率96％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ8.75(s,1H),7.58(dd,J＝7.5,1.5Hz,2H),7.48(s,1H),7.47(d,J＝5.5Hz,1H),7.25(t,J＝7.5,1H),7.13(m,2H),7.03(m,2H),6.98(d,J＝8.0Hz,1H),4.92(m,1H),3.81(s,3H),3.68(s,3H),2.66–2.48(m,2H),2.46–2.33(m,1H),2.20(m,1H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ173.58,172.36,168.10,137.81,136.70,132.01,131.55,131.33,130.22,129.54,127.25,124.79,122.84,120.76,120.44,111.42,99.15,52.66,52.30,51.88,30.22,27.40.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C23H25N2O5Se]+489.0923,found 489.0931.
实施例36
Figure BDA0003642224070000273
按照实施例33原料26所述的方法，不同的是所用底物为甘氨酰-L-亮氨酸甲酯(174mg,0.86mmol)且过硅胶柱时采用石油醚：乙酸乙酯的体积比为1:1的洗脱剂，得到黄色固体原料29(212mg，收率70％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ8.04(dd,J＝8.0,0.5Hz,1H),7.65(dt,J＝8.0,1.0Hz,1H),7.60(td,J＝8.0,1.0Hz,1H),7.44–7.38(m,1H),7.12(d,J＝8.5Hz,1H),4.66–4.62(m,1H),4.60(d,J＝1.0Hz,2H),3.69(s,3H),1.68–1.53(m,4H),0.93–0.85(m,6H).13C NMR(126MHz,CDCl3)δ172.90,168.11,167.72,139.82,132.38,128.67,126.20,125.99,123.93,52.33,50.93,47.91,41.18,24.81,22.70,21.82.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C16H21N2O4Se]+385.0661,found 385.0669.
Figure BDA0003642224070000281
/>
按照实施例1所述的方法，不同的是将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为原料29(77mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为30:1的洗脱剂，得到白色固体产物29(93mg，收率93％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.63(s,1H),8.78(t,J＝5.5Hz,1H),8.36(d,J＝7.5Hz,1H),7.78(d,J＝7.5Hz,1H),7.65(d,J＝2.0Hz,1H),7.49(d,J＝8.0Hz,1H),7.32(d,J＝8.0Hz,1H),7.16(t,J＝7.5Hz,2H),7.10(t,J＝7.5Hz,1H),7.03(t,J＝7.5Hz,1H),6.80(d,J＝7.5Hz,1H),4.41–4.34(m,1H),4.04–3.92(m,2H),3.64(s,3H),1.78–1.36(m,3H),0.89(dd,J＝18.0,6.5Hz,6H).13C NMR(126MHz,DMSO)δ13C NMR(126MHz,DMSO)δ172.98,169.06,167.65,137.37,136.92,133.09,131.90,130.83,129.90,128.22,128.16,124.54,121.96,119.92,119.20,112.10,97.23,51.90,50.29,48.02,42.21,24.18,22.80,21.39.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C24H28N3O4Se]+502.1240,found502.1249.
实施例37
Figure BDA0003642224070000282
按照实施例33原料26所述的方法，不同的是所用底物为Boc-赖氨酸甲酯(224mg,0.86mmol)，且过硅胶柱时采用石油醚：乙酸乙酯的体积比为4:1的洗脱剂，得到黄色固体原料30(153mg,收率51％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.05(d,J＝8.0Hz,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),7.59(td,J＝7.5,1.5Hz,1H),7.44–7.37(m,1H),5.37(dd,J＝10.0,5.0Hz,1H),4.58(s,1H),3.76(s,3H),3.14–2.98(m,2H),2.10–1.95(m,1H),1.88–1.78(m,1H),1.60–1.44(m,2H),1.44–1.28(m,11H).13C NMR(126MHz,CDCl3)δ171.76,167.76,155.91,139.13,132.23,128.89,126.66,126.11,123.79,79.00,55.45,52.55,40.10,32.90,29.17,28.35,22.91.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C19H27N2O5Se]+443.1080,found443.1090.
Figure BDA0003642224070000291
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为N-甲基吲哚(39mg,0.3mmol)，1,2-苯并异硒唑-3-酮改为原料30(88mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为100:1的洗脱剂，得到白色固体产物30(113mg，收率99％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.83(d,J＝7.3Hz,1H),7.77(d,J＝7.4Hz,1H),7.54(d,J＝8.2Hz,1H),7.32(d,J＝7.9Hz,1H),7.23(t,J＝7.6Hz,1H),7.17(t,J＝7.3Hz,1H),7.12(t,J＝7.5Hz,1H),7.08(t,J＝7.5Hz,1H),6.82(d,J＝8.0Hz,1H),6.80(t,J＝5.2Hz,1H),4.45(dd,J＝14.0,7.4Hz,1H),3.87(s,3H),3.69(s,3H),2.99–2.88(m,2H),1.88–1.76(m,2H),1.48–1.39(m,4H),1.36(s,9H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ172.71,167.85,155.64,137.51,137.07,136.96,131.95,130.95,130.31,128.41,128.25,124.59,122.05,120.11,119.39,110.45,95.92,77.39,52.80,51.94,32.74,30.26,29.14,28.28,23.11.HRMS(ESI)calcdfor[M+H]+[C28H36N3O5Se]+574.1815,found 574.1822.
实施例38
Figure BDA0003642224070000292
按照实施例33原料26所述的方法，不同的是所用底物为2,3,5-三乙线腺苷(338mg,0.86mmol)，得到黄色固体原料31(153mg,收率34％，液相纯度99％)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.72(s,1H),8.30(s,1H),8.15(d,J＝8.0Hz,1H),7.66(m,2H),7.44(m,1H),6.30(d,J＝5.6Hz,1H),5.97(t,J＝5.6Hz,1H),5.65(t,J＝4.0Hz,1H),4.46(t,J＝4.0Hz,1H),4.44–4.37(m,2H),2.15(s,3H),2.14(s,3H),2.07(s,3H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ＝170.27,169.52,169.22,164.38,153.02,151.78,149.05,141.22,139.47,133.52,129.57,128.73,126.45,124.66,123.85,86.25,80.55,72.94,70.73,63.05,20.73,20.48,20.30.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C23H22N5O8Se]+576.0628,found 576.0635.
Figure BDA0003642224070000301
按照实施例1所述的方法，不同的是将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为原料31(115mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为60:1的洗脱剂，得到黄色固体产物31(131mg，收率95％，液相纯度99％)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.28(s,1H),8.94(s,1H),8.83(s,1H),8.21(s,1H),7.82(d,J＝7.6Hz,1H),7.54(m,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,1H),7.25(d,J＝8.0Hz,1H),7.16–7.06(m,4H),6.28(d,J＝5.6Hz,1H),5.97(t,J＝5.6Hz,1H),5.67(t,J＝4.8Hz,1H),4.48(t,J＝3.6Hz,1H),4.46–4.36(m,2H),2.17(s,3H),2.13(s,3H),2.09(s,3H).13C NMR(126MHz,Chloroform-d)δ170.33,169.57,169.36,141.33,139.77,136.70,132.17,132.13,130.14,124.90,122.81,120.74,120.41,111.42,86.34,80.54,73.14,70.67,63.03,20.74,20.50,20.34.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C31H29N6O8Se]+693.1207,found 693.1218.
实施例39
Figure BDA0003642224070000302
将2-氯硒基苯甲酰氯(200mg,0.79mmol)溶解在10mL乙腈中，然后滴入含有3-氨基-5-甲基吡唑(83mg,0.86mmol)和三乙胺(28mg,1.18mmol)的15mL乙腈溶液中，室温反应过夜后经硅胶柱色谱纯化(石油醚：乙酸乙酯的体积比为3:2)，收集含目标化合物的洗脱液，减压旋蒸，得到白色固体原料32(55mg，收率25％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.27(s,1H),8.04(d,J＝8.0Hz,1H),7.86(d,J＝7.5Hz,1H),7.64(t,J＝7.5Hz,1H),7.44(t,J＝7.5Hz,1H),6.64(s,1H),2.25(s,3H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ163.97,148.40,139.84,139.12,132.20,128.91,127.31,126.01,125.88,95.20,10.87.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C11H10N3OSe]+279.9984,found 279.9987.
Figure BDA0003642224070000311
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为6-乙氧基吲哚(48mg,0.3mmol)，1,2-苯并异硒唑-3-酮改为原料32(56mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为40:1的洗脱剂，得到黄色固体产物32(81mg，收率92％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.46(s,1H),11.17(s,1H),7.86(d,J＝7.0Hz,1H),7.52(d,J＝2.0Hz,1H),7.21–7.10(m,3H),6.98(d,J＝2.5Hz,1H),6.87(dd,J＝8.0,1.0Hz,1H),6.68(dd,J＝8.5,2.0Hz,1H),6.42(s,1H),4.03(q,J＝7.0Hz,2H),2.29(s,3H),1.34(t,J＝7.0Hz,3H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ165.72,155.40,145.49,140.49,137.66,137.61,131.88,131.28,128.80,128.49,124.72,123.85,119.76,110.68,96.68,96.29,95.81,63.25,14.85,10.86.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C21H21N4O2Se]+441.0824,found 441.0832.
实施例40
Figure BDA0003642224070000312
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为7-甲氧基吲哚(44mg,0.3mmol)，1,2-苯并异硒唑-3-酮改为原料32(56mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用二氯甲烷：甲醇的体积比为40:1的洗脱剂，得到黄色固体产物33(80mg，收率94％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),11.20–11.10(m,1H),7.86(d,J＝7.0Hz,1H),7.55(d,J＝2.5Hz,1H),7.24–7.10(m,2H),6.97(t,J＝8.0Hz,1H),6.92(d,J＝8.0Hz,1H),6.83(d,J＝7.8Hz,1H),6.74(d,J＝7.5Hz,1H),6.42(s,1H),3.94(s,3H),2.29(s,3H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ165.70,146.47,145.58,140.38,137.54,132.68,131.83,131.45,131.27,128.80,128.45,126.95,124.71,120.64,111.85,102.52,97.28,96.30,55.29,10.85.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C20H19N4O2Se]+427.0668,found 427.0675.
实施例41
Figure BDA0003642224070000321
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为7-乙酰氧基吲哚(52mg,0.3mmol)，1,2-苯并异硒唑-3-酮改为原料24(75mg,0.2mmol)，得到黄色固体产物34(94mg，收率85％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.90(s,1H),9.26(s,1H),8.90(d,J＝8.0Hz,1H),7.71(d,J＝2.5Hz,1H),7.67(d,J＝7.0Hz,1H),7.19–7.11(m,5H),7.02(d,J＝8.0Hz,1H),6.92(d,J＝7.5Hz,1H),6.81(d,J＝8.0Hz,1H),6.69(d,J＝8.5Hz,2H),4.65–4.58(m,1H),3.68(s,3H),3.09(dd,J＝14.0,5.5Hz,1H),3.02(dd,J＝14.0,10.0Hz,1H),2.37(s,3H).13CNMR(126MHz,DMSO-d6)δ172.24,169.08,167.60,155.99,136.91,136.47,133.67,132.51,131.86,131.04,130.10,129.51,128.29,127.64,124.67,120.10,116.98,115.11,114.54,97.79,54.70,52.02,35.55,20.95.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C27H25N2O6Se]+553.0872,found 553.0879.
实施例42
Figure BDA0003642224070000322
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为5-羧基吲哚(48mg,0.3mmol)，1,2-苯并异硒唑-3-酮改为5-三氟甲基-苯并[1,2-d]异硒唑-3-酮(53mg,0.2mmol)，得到黄色固体产物35(82mg，收率95％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.06(s,1H),8.39(s,1H),8.11(s,1H),7.97(s,1H),7.84(d,J＝2.3Hz,1H),7.81(d,J＝8.7Hz,1H),7.77(s,1H),7.58(d,J＝8.6Hz,1H),7.48(dd,J＝8.5,0.9Hz,1H),6.96(d,J＝8.4Hz,1H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ168.35,168.16,143.55,139.63,135.19,132.36,129.34,129.07,127.20(q,J＝3.4Hz),125.54(q,J＝32.6Hz),125.12(q,J＝4.2Hz),124.12(q,J＝272.0Hz),123.39,122.84(d,J＝0.6Hz),121.53,112.19,98.47.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C17H12N2O3Se]+428.9960,found 428.9964.
实施例43
Figure BDA0003642224070000331
在100mL圆底烧瓶中依次加入1-吲哚乙酸(875mg,5mmol)、3-丁烯-1-胺盐酸盐(646mg,6mmol)、EDCI(1432mg,7.5mmol)、DMAP(1525mg,12.5mmol)和DCM(20mL)，室温下搅拌过夜。然后依次用20mL水、20mL HCl(1N)和20mL饱和盐溶液洗涤DCM溶液，然后用Na2SO4干燥蒸发。粗品经硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝25:1，体积比)，收集含目标化合物的洗脱液，减压旋蒸得到白色固体原料36(833mg，收率73％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.13(t,J＝5.0Hz,1H),7.54(d,J＝7.8Hz,1H),7.33(dd,J＝8.2,0.4Hz,1H),7.30(d,J＝3.1Hz,1H),7.15–7.09(m,1H),7.05–6.99(m,1H),6.43(dd,J＝3.1,0.6Hz,1H),5.76(ddt,J＝17.0,10.2,6.7Hz,1H),5.09–4.96(m,2H),4.79(s,2H),3.15(q,J＝6.9Hz,2H),2.17(q,J＝6.9Hz,2H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ167.41,136.25,135.85,129.88,128.20,121.10,120.37,119.15,116.53,109.76,100.76,48.80,38.14,33.39.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C14H17N2O]+229.1335,found 229.1357.
Figure BDA0003642224070000332
按照实施例1所述的方法，不同的是将吲哚改为原料36(68mg,0.3mmol)，1,2-苯并异硒唑-3-酮改为N-烯丙基-苯并[1,2-d]异硒唑-3-酮(48mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用石油醚：乙酸乙酯的体积比为5:1的洗脱剂，得到黄色固体产物36(49mg，收率53％，液相纯度99％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.59(d,J＝7.9Hz,1H),7.51(d,J＝7.6Hz,1H),7.37–7.29(m,3H),7.22–7.17(m,1H),7.12(t,J＝7.3Hz,1H),7.05(t,J＝7.5Hz,1H),7.00(d,J＝7.9Hz,1H),6.27(s,1H),5.99(ddd,J＝22.4,10.7,5.6Hz,1H),5.56–5.45(m,2H),5.33(d,J＝17.1Hz,1H),5.23(d,J＝10.2Hz,1H),4.87–4.77(m,3H),4.70(d,J＝17.1Hz,1H),4.12(t,J＝5.5Hz,2H),3.26(q,J＝6.5Hz,2H),2.10(q,J＝6.5Hz,2H).13C NMR(126MHz,CDCl3)δ168.06,167.41,137.00,136.77,135.20,134.28,133.95,132.62,131.09,130.99,129.59,127.07,125.05,123.56,121.45,121.10,117.68,116.96,109.65,100.40,50.13,42.51,38.06,33.44.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C24H26N3O2Se]+468.1185,found 468.1189.
实施例44
Figure BDA0003642224070000341
按照实施例1所述的方法，不同的是将1,2-苯并异硒唑-3-酮改为N-(喹啉-8-基)-6-甲氧羰基-苯并[1,2-d]异硒唑-3-酮(77mg,0.2mmol)，且过硅胶柱时采用石油醚：乙酸乙酯的体积比为2:1的洗脱剂，得到淡黄色固体产物37(98mg，收率98％，液相纯度99％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.76(d,J＝2.8Hz,1H),10.73(s,1H),8.99(dd,J＝4.0,1.6Hz,1H),8.75(d,J＝7.2Hz,1H),8.49(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),8.08(d,J＝8.0Hz,1H),7.85(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.82(d,J＝7.6Hz,1H),7.79(d,J＝2.4Hz,1H),7.72(d,J＝7.6Hz,1H),7.69(t,J＝4.4Hz,1H),7.60(d,J＝1.6Hz,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.05(t,J＝7.6Hz,1H),3.67(s,3H).13C NMR(126MHz,DMSO-d6)δ165.17,165.11,149.29,138.48,137.90,136.88,136.79,136.75,133.77,133.50,131.71,129.67,129.58,128.06,127.89,126.97,125.93,123.01,122.38,122.07,120.10,118.99,117.41,112.12,95.97,52.32.HRMS(ESI)calcd for[M+H]+[C26H20N3O3Se]+502.0664,found 502.0667.
实施例45
多孔板平行合成(6x6)：在多孔板的每个孔中进行一个反应，每个反应平行进行，操作如下：将10μmol硒啉(图1：Se1-Se6)、11μmol吲哚底物(图1：A1-A6)和5mol％三(五氟苯基)硼催化剂相继加入孔中，然后加入100μL DCE溶剂(反应体系中硒啉的浓度为100mM)，随后体系在室温反应12小时。反应结束后，用LC-MS检测反应。每孔的反应收率和产物分子量分别见图2和表1。
表1.平行合成产物的分子量
Figure BDA0003642224070000342
Figure BDA0003642224070000351
实施例46
On-DNA 3-芳硒基吲哚类化合物的合成：本发明中DNA-NH2是单链或双链DNA与接头基团形成的带有“-NH2”接头的DNA结构，例如下述结构：
Figure BDA0003642224070000352
其中，A为腺嘌呤，T为胸腺嘧啶，C为胞嘧啶，G为鸟嘌呤。
步骤1、On-DNA吲哚化合物的合成
Figure BDA0003642224070000353
在96孔板中进行on-DNA平行合成：在合适数量的孔中分别将DNA-NH2(300nmol)溶解于硼酸盐缓冲液(600μL,250mM,pH＝9.4)中，然后向溶液中相继加入溶解于二甲基乙酰胺(DMA)中的HATU(60μL,200mM)、DIPEA(60μL,200mM)和吲哚羧酸化合物(60μL,200mM)，混合均匀后在25℃下振荡反应8小时。
反应完毕后进行乙醇沉淀：反应后向每个孔的溶液中加入反应液总体积10％的5M的氯化钠溶液(78μL)，然后再加入反应液总体积的3倍的无水乙醇(2.34mL)，振荡均匀后，将反应置于-80℃冷冻0.5小时，之后在4℃下以12000rpm的转速离心半小时，倒掉上清液，余下沉淀用去离子水(300μL)溶解，即得到On-DNA吲哚化合物(HPi1-HPi9)的溶液，通过酶标仪OD定量后，进而通过LCMS确认每个反应的转化率，随后未经纯化而直接用于后续的on-DNA硒化反应。
本发明合成的9个on-DNA吲哚化合物，结果见图3。
步骤2、On-DNA 3-芳硒基吲哚类化合物
Figure BDA0003642224070000354
在96孔板中进行on-DNA平行合成：在合适数量的孔中分别将on-DNA吲哚化合物(5μL,10nmol,1mM in ddH2O)与2μL磷酸盐缓冲液(pH＝4.2)混合，然后向混合溶液中相继加入溶解于1,2-二氯乙烷(图4：D1-D9)或六氟异丙醇(图4：D10-D18)中的B(C6F5)3溶液(1μL,10mM)和溶解于1,2-二氯乙烷(图4：D1-D9)或六氟异丙醇(图4：D10-D18)中的苯并异硒唑酮类化合物溶液(1μL,1M,1000equiv)，混合均匀后在室温(约25℃)振荡反应5小时。
反应完毕后进行乙醇沉淀：反应后向每个孔的溶液中加入反应液总体积10％的5M的氯化钠溶液，然后再加入反应液总体积的2.5倍的无水乙醇，振荡均匀后，将反应置于-80℃冷冻至少0.5小时，之后在4℃下以12000rpm的转速离心半小时，倒掉上清液，余下沉淀用去离子水(300μL)溶解，即得到On-DNA芳硒基吲哚类化合物(D1-D18)的溶液，通过酶标仪OD定量后，进而通过LCMS确认每个反应的转化率。
本发明合成的18个on-DNA吲哚化合物，结果见图4。
体外抗肿瘤活性实验
采用CCK-8法并选取人乳腺癌MCF-7细胞进行体外抗肿瘤活性评价(采用雷公藤甲素作为阳性对照)，操作如下：
1、在96孔板中接种100μL MCF-7细胞悬液，每孔细胞密度为1×104个，设不含细胞的空白对照，将96孔板在培养箱预培养24小时(37℃,5％CO2)使细胞贴壁；
2、向培养孔中加入10μL浓度为50μM的待测化合物，每个浓度设3个平行孔(设不含药物的对照组)。在培养箱中孵育72小时后，向每孔加入10μLCCK-8溶液，将96孔板在培养箱内孵育1-4小时；
3、用酶标仪测定在450nM处的吸光度：
细胞活力(％)＝(A加药-A空白)/(A0加药-A空白)×100％
A加药：含有细胞悬液、CCK-8溶液和待测化合物溶液的孔的吸光度
A空白：不含细胞悬液，含有培养基溶液、CCK-8溶液和待测化合物溶液的孔的吸光度
A0加药：不含待测化合物溶液，含有细胞悬液、CCK-8溶液和培养基溶液的孔的吸光度
细胞抑制率(％)＝(A0加药-A加药)/(A0加药-A空白)×100％
表2、部分化合物在50μM浓度下对MCF-7细胞的抑制率
Figure BDA0003642224070000361
Figure BDA0003642224070000371
表2的结果表明：所测的19个化合物中有8个化合物在50μM时对MCF-7细胞的抑制率大于30％，有3个化合物的抑制率大于60％。可见，这一类3-芳硒基吲哚类化合物具有良好的抗肿瘤活性。
进一步选取活性最好的化合物产物32和产物33测试它们对人乳腺癌MCF-7细胞和人卵巢癌SKOV-3细胞的半数抑制浓度IC50。结果如表3所示：产物32对MCF-7和SKOV-3细胞的IC50分别为0.82和0.95μM；产物33对MCF-7和SKOV-3细胞的IC50分别为1.92和5.26μM。这些良好的结果进一步说明这类化合物具有显著的抗肿瘤活性。
表3、产物32和产物33对MCF-7和SKOV-3细胞的抑制活性
Figure BDA0003642224070000372
a每个实验采用9个浓度且至少重复三遍
上述实例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人员能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所做的等效变换或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种式III所示的3-芳硒基吲哚类化合物的绿色合成方法，其特征在于所述的方法为：
将式(Ⅰ)所示吲哚类化合物、式(Ⅱ)所示苯并异硒唑酮类化合物和路易斯酸溶解于溶剂中，-20～65℃下搅拌反应1～12小时，所得反应液A经后处理A，得到如式(Ⅲ)所示3-芳硒基吲哚类化合物；
所述路易斯酸为三(五氟苯基)硼、三氟化硼乙醚、三氟甲磺酸铜、三氟甲磺酸锌、三氟甲磺酸铟、三氟甲磺酸镱中的一种或两种以上的混合物；所述路易斯酸与原料的理论反应量的物质的量之比为5～10：100，所述原料的理论反应量以所述式I所示吲哚类化合物或式II所示苯并异硒唑酮类化合物中投入物质的量较小的化合物计；所述式I所示吲哚类化合物与式II所示苯并异硒唑酮类化合物的物质的量之比为1:0.5～4；
Figure FDA0003934064720000011
式(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)中，
R1选自氢、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、卤素、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、甲醛基、C1-C4烷羰基、C2-C6炔基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的苄氧基、硝基、羧基、C1-C4烷氧羰甲基中的一种；
R2选自氢、C1-C4烷基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的苯基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的苄基、C1-C4烷酰基、
Figure FDA0003934064720000012
中的一种，n为0-5之间的整数；
R3选自氢、卤素、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、硝基、羧基、C1-C4烷氧羰基中的一种；
R4选自氢、C3-C8环烷基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的C6-C10芳基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的C6-C10杂芳基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的吡唑基或吡啶基、未取代或被卤素、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷氧基、硝基取代的苄基、烯丙基、
Figure FDA0003934064720000021
中的一种。
2.如权利要求1所述的式III所示的3-芳硒基吲哚类化合物的绿色合成方法，其特征在于：所述溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二氧六环、1,2-二氯乙烷、1,4-二氯丁烷、二氯甲烷、六氟异丙醇、乙腈、三氟甲苯、水中的一种或两种以上的混合溶剂。
3.如权利要求1所述的式III所示的3-芳硒基吲哚类化合物的绿色合成方法，其特征在于所述后处理A为：对所述反应液A进行硅胶柱色谱纯化，收集含目标化合物的洗脱液，减压旋蒸得到所述式III所示含硒苯甲酰胺类化合物；所述硅胶柱色谱纯化的洗脱剂为体积比为1-10:1的石油醚与乙酸乙酯的混合溶剂或体积比为10-200:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂。
4.如权利要求1所述的式III所示的3-芳硒基吲哚类化合物的绿色合成方法，其特征在于：所述合成方法采用多孔板平行合成，所述式(Ⅱ)所示苯并异硒唑酮类化合物的物质的量为1～100μmol；所述溶剂的体积以所述式(Ⅱ)所示苯并异硒唑酮类化合物的物质的量计为0.5-50mL/mmol。
5.一种式4所示的2-芳硒基吲哚类化合物的绿色合成方法，其特征在于所述的方法为：
将3-甲基吲哚、1,2-苯并异硒唑-3-酮和路易斯酸溶解于溶剂中，-20～65℃下搅拌反应1～12小时，所得反应液B经后处理B，得到如式4所示2-芳硒基吲哚类化合物；
所述路易斯酸为三(五氟苯基)硼、三氟化硼乙醚、三氟甲磺酸铜、三氟甲磺酸锌、三氟甲磺酸铟、三氟甲磺酸镱中的一种或两种以上的混合物；所述路易斯酸与原料的理论反应量的物质的量之比为5～10：100，所述原料的理论反应量以所述2-甲基吲哚和式II所示苯并异硒唑酮类化合物中投入物质的量较小的化合物计；所述2-甲基吲哚和式II所示苯并异硒唑酮类化合物的物质的量之比为1:0.5～4；
Figure FDA0003934064720000031
6.如权利要求5所述的式4所示的2-芳硒基吲哚类化合物的绿色合成方法，其特征在于：所述溶剂选自N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二氧六环、1,2-二氯乙烷、1,4-二氯丁烷、二氯甲烷、六氟异丙醇、乙腈、三氟甲苯、水中的一种或两种以上的混合溶剂；
所述后处理B为：对所述反应液B进行硅胶柱色谱纯化，收集含目标化合物的洗脱液，减压旋蒸得到所述式4所示的2-芳硒基吲哚类化合物；所述硅胶柱色谱纯化的洗脱剂为体积比为50:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶剂。
7.一种On-DNA芳硒基吲哚类化合物的合成方法，其特征在于所述方法为：
将式(IV)所示On-DNA吲哚类化合物、式(V)所示苯并异硒唑酮类化合物和路易斯酸溶解于溶剂中构建反应体系，15-50℃下反应0.5～24小时，所得反应液C经后处理C，得到式(VI)所示on-DNA芳硒基吲哚类化合物；所述路易斯酸为三(五氟苯基)硼；所述溶剂为缓冲水溶液、NH4Cl水溶液之一与乙腈、1,2-二氯乙烷、二氯甲烷、六氟异丙醇、三氟乙醇、二甲亚砜中一种或两种以上的混合溶液；所述式(IV)所示On-DNA吲哚类化合物、式(V)所示苯并异硒唑酮类化合物与路易斯酸的物质的量之比为1:5-1000：5-50；
其中，结构式中DNA包含由人工修饰的和/或未修饰的核苷酸单体聚合得到的单链或双链的核苷酸链；
Figure FDA0003934064720000032
R5的骨架由0-10个原子构成，R5的骨架由0个原子构成时，羰基与吲哚基直接连接；R5的骨架由1-10个原子构成时，选自下列之一：
Figure FDA0003934064720000033
其中，n1、n2、n3分别为0-9之间的整数；
R6选自氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基、硝基中的一种；
R7选自氢、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、苯基、卤代苯基、苄基、卤代苄基中的一种；
R8选自氢、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基中的一种；
R9选自氢、C6-C10芳基、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C3-C6环烷基、
Figure FDA0003934064720000041
中的一种。
8.如权利要求7所述的On-DNA芳硒基吲哚类化合物的合成方法，其特征在于所述缓冲水溶液选自下列之一：H3PO4–NaH2PO4缓冲液、Na2HPO4–NaH2PO4缓冲液、Tris-盐酸缓冲液、硼砂-NaOH缓冲液、Na2HPO4-NaOH缓冲液、醋酸-醋酸钠缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、硼砂-Na2CO3缓冲液、甘氨酸-氢氧化钠缓冲液、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液、巴比妥-盐酸缓冲液、硼砂-硼酸缓冲液、碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液、磷酸氢二钠-氢氧化钠缓冲液、氯化钾-氢氧化钠缓冲液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液。
9.如权利要求7所述的On-DNA芳硒基吲哚类化合物的合成方法，其特征在于：所述反应体系中，所述式(IV)所示on-DNA吲哚类化合物的浓度为100nM～1mM。
10.如权利要求7所述的On-DNA芳硒基吲哚类化合物的合成方法，其特征在于所述后处理C为：向所述反应液C中加入所述反应液总体积10％的5M的氯化钠溶液，然后再加入所述反应液总体积的2.5倍的无水乙醇，振荡均匀后，于-80℃冷冻0.5-6小时，4℃、12000rpm离心半小时，弃上清液，所得沉淀即式(VI)所示芳硒基吲哚类化合物。
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