CN114732130A - 含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物及其应用，属于保健品领域，本发明按照重量份计包括以下成分：雨生红球藻初次提取物40‑60份、雨生红球藻二次提取物60‑80份、银杏叶提取物50‑70份、亚麻籽油300‑500份；本发明雨生红球藻初次提取物、雨生红球藻二次提取物、银杏叶提取物这三种植物提取物的组合物有抑制胃粘膜受损的作用，亚麻籽油的添加对这三种植物提取物的组合物有明显的协同增效的作用。本发明能起到抑制胃粘膜受损的作用。

Description

含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物及其应用
技术领域
本发明属于保健品领域，具体的说，涉及一种含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物及其应用。
背景技术
胃黏膜损伤可能会导致人民出现呕吐、黑便、腹胀腹痛、食欲不振等症状，对人们的日常生活造成不良影响。此外，胃黏膜损伤是导致胃溃疡及急慢性胃炎的主要病理生理学环节。目前，在抑制胃粘膜受损的中药组合物中，大多使用黄芪、当归、厚朴、黄连、木香、干姜等传统中药组成，其制备方法较为简单，无法提取到有效成分。
雨生红球藻隶属于绿藻纲Chlorophyceae、团藻目Volvocales，是一种广泛分布于自然界中的单细胞淡水绿藻，在高光、氮缺失等胁迫条件下可以大量积累虾青素。虾青素具有强大的抗氧化能力，但不具备其他类胡萝素所具有的典型的助氧化作用。另外，虾青素不是维生素的前体，过量摄入也不会使生物体遭受维生素过多症的威胁。因此，基于虾青素的安全性及其对人类和动物健康的有益效果，已经成为最重要的类胡萝卜素生产对象之一，并被广泛应用于食品保健中。
此外，目前雨生红球藻的研究主要集中在虾青素的高效生产，提取完虾青素后的藻渣作为动物饲料或直接丢弃，雨生红球藻资源未得到充分利用。
因此，进一步开发富含虾青素，且能够安全、有效抑制胃粘膜受损的组合物是十分必要的。
发明内容
为了克服背景技术中存在的问题，本发明提供了一种含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物及其应用，抑制胃粘膜受损，减少胃溃疡及急慢性胃炎的发生。
为实现上述目的，本发明是通过如下技术方案实现的：所述的含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物按照重量份计包括以下成分：雨生红球藻初次提取物40-60份、雨生红球藻二次提取物60-80份、银杏叶提取物50-70份、亚麻籽油300-500份。
进一步的，所述的雨生红球藻初次提取物按照以下步骤制备得到：(1)取干燥雨生红球藻与浓度为4mol/L的盐酸溶液混合，雨生红球藻与盐酸溶液的质量体积比为1:20，在60-80℃下搅拌破壁20-50min，调pH至中性，过滤去掉滤液，留滤渣；(2)将滤渣与浓度为80％的乙醇混合，滤渣与乙醇的质量体积比为1:20，在10-30℃搅拌脱水30min，过滤去掉滤液，得破壁雨生红球藻；(3)将破壁雨生红球藻与有机溶剂混合，破壁雨生红球藻与有机溶剂的质量体积比为1:10，搅拌30min，过滤，滤液浓缩，回收溶剂，得虾青素提取物，收集经过初次提取的雨生红球藻渣。
更进一步的，所述的有机溶剂为乙醇、丙酮、食用大豆油的混合液，有机溶剂中三者体积比为：乙醇：丙酮：食用大豆油＝1:2:3；乙醇溶液浓度为80％。
进一步的，所述的雨生红球藻二次提取物按照以下方法制备得到：将经过初次提取的雨生红球藻渣进行干燥，加入蒸馏水，破壁雨生红球藻渣与蒸馏水的质量体积比为1:50，在超声功率，500W条件下提取30min，然后置于80℃的恒温水浴浸提2h，冷却，4000r/min离心10min，取上清液浓缩，加入浓缩后的上清液3倍体积的无水乙醇，静置过夜，再经4000r/min离心10min后取沉淀，用无水乙醇洗涤，冷冻干燥得雨生红球藻二次提取物。
进一步的，所述的银杏叶提取物通过以下方法制备：将银杏叶清洗，晾干，剪碎，加入沸点为60-90℃的石油醚，银杏叶与石油醚质量体积比为1:5，90℃加热回流提取8h，过滤，滤液备用，取滤渣；再加入沸点为60-90℃的石油醚，滤渣与石油醚质量体积比为1:3，90℃加热回流提取3h，过滤，滤液合并，渣弃掉；滤液用单效浓缩器回收石油醚，得石油醚萃取的银杏叶提取物。
进一步的，所述的亚麻籽油制备方法为：将亚麻籽去壳，榨油，既得亚麻籽油。
所述的一种含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物在制备用于抑制抑制胃粘膜受损的产品中的应用。
本发明的有益效果：
本发明包括雨生红球藻初次提取物、雨生红球藻二次提取物、银杏叶提取物、亚麻籽油。其中雨生红球藻初次提取物为虾青素，在虾青素分子中，有很长的共轭双键，有羟基和在共轭双键链末端的不饱和酮，其中羟基和酮基又构成α-羟基酮。虾青素的结构特点使其极易与自由基反应而清除自由基，起到抗氧化作用。虾青素的抗氧化性比β-胡萝卜素高了10倍以上，同时它还比维生素E的抑制脂质过氧化反应特性高100倍以上，被誉为“超级抗氧化剂”，可显著提高人体的免疫力，具有显著的抗疲劳和抗衰老作用，天然虾青素的稳定性、抗氧化活性、生物利用安全性及生物效价等性能均显著优于人工合成产品。虾青素通过抗氧化作用能保护胃黏膜免受损伤，对溃疡形成有抑制作用。
本发明中的雨生红球藻二次提取物为雨生红球藻多糖，雨生红球藻二次提取物可以通过本发明中经过初次提取的雨生红球藻渣制得，也可以通过其他途径提取过虾青素的雨生红球藻渣制得，其他途径包括但不限于：匀浆破壁提取法、超声波破壁提取法、低温研磨法等。雨生红球藻多糖中含有多种多糖组分，具有较好的免疫活性。
银杏叶提取物(GBE)含有黄酮类、内酯类、酚类、萜类、多糖等多种活性物质，具有抗氧化、抑菌、提高免疫、抗炎、抗病毒、降血糖、降血脂、抗肿瘤和抗癌等多种生物活性。亚麻籽油中含有较高含量的α-亚麻酸含量，α-亚麻酸是人体必需脂肪酸。
雨生红球藻初次提取物、雨生红球藻二次提取物、银杏叶提取物这三种植物提取物的组合物有抑制胃粘膜受损的作用，亚麻籽油的添加对这三种植物提取物的组合物有明显的协同增效的作用。
本发明使用雨生红球藻初次提取物、雨生红球藻二次提取物、银杏叶提取物以及亚麻籽油制备产品，能起到抑制胃粘膜受损的作用。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，下面将对本发明的优选实施例进行详细的说明，以方便技术人员理解。
实施例1-3的组合物组份及重量份数如表1所示。
表1实施例1-3组合物组份及重量份数
Figure BDA0003584255420000041
对比例1-4的组合物组份及重量份数如表2所示。
表2对比例1-4的组合物组份及重量份数
Figure BDA0003584255420000051
按照下列方法制备实施例1-3组合物、对比例1-4组合物中的各个组分。
雨生红球藻初次提取物按照以下步骤制备得到：(1)取干燥雨生红球藻与浓度为4mol/L的盐酸溶液混合，雨生红球藻与盐酸溶液的质量体积比为1:20，在60-80℃下搅拌破壁20-50min，调pH至中性，过滤去掉滤液，留滤渣；(2)将滤渣与浓度为80％的乙醇混合，滤渣与乙醇的质量体积比为1:20，在10-30℃搅拌脱水30min，过滤去掉滤液，得破壁雨生红球藻；(3)将破壁雨生红球藻与有机溶剂混合，破壁雨生红球藻与有机溶剂的质量体积比为1:10，搅拌30min，过滤，滤液浓缩，回收溶剂，得虾青素提取物，收集经过初次提取的雨生红球藻渣。有机溶剂为乙醇、丙酮、食用大豆油的混合液，有机溶剂中三者体积比为：乙醇：丙酮：食用大豆油＝1:2:3；乙醇溶液浓度为80％。
雨生红球藻二次提取物按照以下方法制备得到：将经过初次提取的雨生红球藻渣进行干燥，加入蒸馏水，破壁雨生红球藻渣与蒸馏水的质量体积比为1:50，在超声功率，500W条件下提取30min，然后置于80℃的恒温水浴浸提2h，冷却，4000r/min离心10min，取上清液浓缩，加入浓缩后的上清液3倍体积的无水乙醇，静置过夜，再经4000r/min离心10min后取沉淀，用无水乙醇洗涤，冷冻干燥得雨生红球藻二次提取物。
银杏叶提取物通过以下方法制备：将银杏叶清洗，晾干，剪碎，加入沸点为60-90℃的石油醚，银杏叶与石油醚质量体积比为1:5，90℃加热回流提取8h，过滤，滤液备用，取滤渣；再加入沸点为60-90℃的石油醚，滤渣与石油醚质量体积比为1:3，90℃加热回流提取3h，过滤，滤液合并，渣弃掉；滤液用单效浓缩器回收石油醚，得石油醚萃取的银杏叶提取物。
亚麻籽油制备方法为：将亚麻籽去壳，榨油，既得亚麻籽油。
效果验证部分
实施例与对比例对胃黏膜前列腺素E2(PGE2)含量的影响
胃黏膜上皮细胞不断地合成和释放内源性PGE2，PGE2具有防止各种有害物质对消化道上皮细胞损伤和致坏死作用。
一、试剂与药品
吲哚美辛购自安徽酷尔生物工程有限公司。
二、实验方法
雄性昆明种小鼠18-22g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。
小鼠随机分为9组每组8只，包括空白对照组、造模对照组，实施例1-3组，对比例1-4组，实验前空白对照组、造模对照组给予生理盐水灌胃，每日2次，每次0.2ml，共5d；实施例1-3组，对比例1-4组分别给予实施例1-3、对比例1-4所制得的组合物，每日2次，每次0.2ml，共5d。实验前禁食24h自由饮水。
三、造模
吲哚美辛诱发的胃损伤模型：在最后一次给予生理盐水、实施例1-3组合物、对比例1-3组合物灌胃后1h每只小鼠肌肉注射吲哚美辛(40mg/kg)0.2ml，5h后处死小鼠，空白对照组注射生理盐水，剂量为0.2ml。
四、胃黏膜损伤评价
将小鼠胃固定于10％甲醛溶液中20min后沿大弯剪开冲洗，放置于显微镜下观察，借助测微尺(精确度0.011mm)计数损伤面积。胃粘膜损伤程度用损伤指数表示。粘膜条索状损伤的长度大于1mm者测量其长度，每毫米计1分，若其宽度大于1mm者，将其计分加倍；若其长度与宽度均小于1mm者，计0.5分。将计分相加即为该只动物损伤指数
PGE2含量采用紫外分光光度法进行测定。
五、结果
组别 胃损伤指数 PGE<sub>2</sub>含量
空白对照组 0 0.331±0.041
造模对照组 100±10.31 0.076±0.024
实施例1 40.89±9.24 0.320±0.045
实施例2 42.71±9.61 0.317±0.031
实施例3 42.31±8.33 0.327±0.034
对比例1 75.62±8.64 0.176±0.037
对比例2 76.31±9.12 0.197±0.026
对比例3 75.48±8.66 0.192±0.032
对比例4 76.03±9.04 0.190±0.024
从以上数据可以看出，使用实施例1-3的组合物预防性给药，胃损伤指数显著低于造模对照组和对比例1-4组。
本实验采用吲哚美辛诱发的模型发现小鼠肌肉注射吲哚美辛后5h胃黏膜出现明显糜烂、出血和坏死脱落，并且胃黏膜中PGE2含量明显减少而使用实施例1-3的组合物预防性给药可明显改善胃黏膜损伤状况，同时显著提高肌肉注射吲哚美辛后，小鼠胃黏膜中降低的PGE2水平，本发明可以抑制胃粘膜的损伤。
最后说明的是，以上优选实施例仅用于说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。

Claims (7)

1.含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物，其特征在于：所述的组合物按照重量份计包括以下成分：雨生红球藻初次提取物40-60份、雨生红球藻二次提取物60-80份、银杏叶提取物50-70份、亚麻籽油300-500份。
2.根据权利要求1所述的一种含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物，其特征在于：所述的雨生红球藻初次提取物按照以下步骤制备得到：(1)取干燥雨生红球藻与浓度为4mol/L的盐酸溶液混合，雨生红球藻与盐酸溶液的质量体积比为1:20，在60-80℃下搅拌破壁20-50min，调pH至中性，过滤去掉滤液，留滤渣；(2)将滤渣与浓度为80％的乙醇混合，滤渣与乙醇的质量体积比为1:20，在10-30℃搅拌脱水30min，过滤去掉滤液，得破壁雨生红球藻；(3)将破壁雨生红球藻与有机溶剂混合，破壁雨生红球藻与有机溶剂的质量体积比为1:10，搅拌30min，过滤，滤液浓缩，回收溶剂，得雨生红球藻初次提取物，收集经过初次提取的雨生红球藻渣。
3.根据权利要求2所述的一种含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物，其特征在于：所述的有机溶剂为乙醇、丙酮、食用大豆油的混合液，有机溶剂中三者体积比为：乙醇：丙酮：食用大豆油＝1:2:3；乙醇溶液浓度为80％。
4.根据权利要求1所述的一种含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物，其特征在于：所述的雨生红球藻二次提取物按照以下方法制备得到：将经过初次提取的雨生红球藻渣进行干燥，加入蒸馏水，破壁雨生红球藻渣与蒸馏水的质量体积比为1:50，在超声功率，500W条件下提取30min，然后置于80℃的恒温水浴浸提2h，冷却，4000r/min离心10min，取上清液浓缩，加入浓缩后的上清液3倍体积的无水乙醇，静置过夜，再经4000r/min离心10min后取沉淀，用无水乙醇洗涤，冷冻干燥得雨生红球藻二次提取物。
5.根据权利要求1所述的一种含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物，其特征在于：所述的银杏叶提取物通过以下方法制备：将银杏叶清洗，晾干，剪碎，加入沸点为60-90℃的石油醚，银杏叶与石油醚质量体积比为1:5，90℃加热回流提取8h，过滤，滤液备用，取滤渣；再加入沸点为60-90℃的石油醚，滤渣与石油醚质量体积比为1:3，90℃加热回流提取3h，过滤，滤液合并，渣弃掉；滤液用单效浓缩器回收石油醚，得石油醚萃取的银杏叶提取物。
6.根据权利要求1所述的一种含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物，其特征在于：所述的亚麻籽油制备方法为：将亚麻籽去壳，榨油，既得亚麻籽油。
7.根据权利要求1-6任一项所述的一种含雨生红球藻且抑制胃粘膜受损的组合物在制备用于抑制抑制胃粘膜受损的产品中的应用。
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