CN114728917B - 草酰胺类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用 - Google Patents

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Abstract

属于化学药物技术领域，涉及草酰胺类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。具体而言，提供式(I)的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐。这些化合物是选择性因子XIa(Factor XIa，简称FXIa)的抑制剂，还涉及包含这些化合物的药物组合物以及使用该化合物治疗血栓栓塞等疾病的药物中的用途。

Description

草酰胺类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
技术领域
本发明属于化学药物技术领域，涉及草酰胺类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。具体而言，本发明提供式(I)的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其中所有变量如本文所定义。这些化合物是选择性因子XIa(Factor XIa，简称FXIa)的抑制剂。本发明还涉及包含这些化合物的药物组合物以及使用该化合物治疗血栓栓塞等疾病的药物中的用途。
背景技术
全球每年脑血管、脑梗塞、心肌梗塞、冠心病、动脉硬化等心脑血管疾病夺走近1200万人的生命，接近世界总死亡人数的1/4，成为人类健康的头号大敌。中国每年死于心血管疾病的人数达到260万人以上，存活的患者75％致残，其中40％以上重残。由心脑血管疾病和糖尿病及其并发症引起的血栓问题，成为当今要解决的刻不容缓的问题。
人体血液凝固过程由内源性途径(intrinsic pathway)、外源性途径(extrinsicpathway)和共同通路组成(Annu.Rev.Med.2011.62:41-57)，是通过多种酶原被顺序激活而过程不断得到加强和放大的一种连锁反应。凝血级联反应由内源性途径(又称接触激活途径)及外源性途径(又称组织因子途径)启动生成FXa，再经共同途径生成凝血酶(FIIa)，最终形成纤维蛋白。
内源性途径是指由XII因子被激活形XIa-VIIIa-Ca2+-P L复合物、并激活X因子的过程,外源性凝血途径则是从组织因子(TF)释放到TF-VIIa-Ca2+复合物形成并激活因子Ⅹ的过程。共同通路是指因子Xa形成后,两条途径合二为一,激活凝血酶原并最终生成纤维蛋白的过程，其中FXI是维持内源性途径所必需的，而且在凝血级联反应放大过程中发挥关键作用。在凝血级联反应中，凝血酶可反馈激活FXI，活化的FXI(FXIa)又促使凝血酶的大量产生，从而使凝血级联反应放大。因此，FXI的拮抗剂被广泛开发，用于各种血栓的治疗。
传统的抗凝药物，如华法林、肝素、低分子量肝素(LMWH)，以及近年上市的新药，如FXa抑制剂(利伐沙班、阿哌沙班等)和凝血酶抑制剂(达比加群酯、水蛭素等)，对减少血栓形成均具有较好效果，以其显著有效性占据广大心脑血管市场，然而其副作用也越来越显著，其中“出血风险(bleeding risk)”是首当其冲最为严峻的问题之一(N Engl JMed1991；325:153-8、Blood.2003；101:4783-4788)。
研究发现，在血栓模型中，抑制FXIa因子可以有效抑制血栓的形成，但在更为严重的血栓情况下，FXIa的作用微乎其微(Blood.2010；116(19):3981-3989)。临床统计显示，提高FXIa的量会增加VTE的患病率(Blood 2009；114:2878-2883)，而FXIa严重不足者其患有DVT的风险性减少(Thromb Haemost 2011；105:269-273)。
FXIa作为目前抑制血栓的新兴靶点，公开具有FXIa抑制活性的化合物的专利申请有WO96/30396、WO99/41276、WO2013/093484、WO2004/002405、WO2013/056060、WO2017/005725、WO2017/023992、WO2018/041122等。其中，目前仅拜耳公司的反义寡核苷酸BAY-2306001进入了临床二期研究。
本发明化合物具有更高的活性。特别是本发明化合物表现出优异的对人血液的抗凝血作用，并具有良好的药代活性，可用于有效治疗和/或预防心脑血管疾病及血栓症状。
发明内容
本发明提供了一系列的草酰胺类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。
具体而言，本发明提供式(I)的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其中所有变量如本文所定义。
这些化合物是选择性因子XIa(Factor XIa，简称FXIa)的抑制剂。本发明还涉及包含这些化合物的药物组合物以及使用该化合物治疗血栓栓塞等疾病的药物中的用途。
具体的，本发明通过以下技术方案来实现：
式(I)的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐：
R1选自R3取代或者未取代的四氮唑、R3取代或者未取代的三氮唑；
R2选自R4取代或者未取代的苯环、-(CH2)n-CO-R5，其中R4选自-NR5-(CH2)n-CO-(CH2)n-NR6R7、-NR5-SO2-NR6R7、-NR5-SO2-R13；
Ar选自至少一个R8取代或者未取代的以下基团：
其中，R3选自氢、卤素、C1-4的烷基、卤素取代的C1-4的烷基；
R5、R6、R7独立的选自氢、苯基、C1-4的烷基、C1-4的烷氧基-C1-4烷基、-SO2-C1-4烷、-SO2-苯、-C1-6的一元或者二元醇、-(CH2)n-C3-12的脂肪环，或者其中NR5与NR6R7之中的任意一个以上通过-(CH2)n-成环；或者NR6R7一起构成C3-12的脂肪环；前述C3-12的脂肪环环上的一个以上碳原子被0-2个N、O、S原子所替代，所述脂肪环进一步被一个以上的R9所取代；
R8选自氢、卤素、C1-4的烷基、羟基、-C1-4的羧酸、-C1-4的羧酸-C1-4醇酯；
R9选自氢、-(CH2)n-OH、-SO2-C1-4烷、-CO-NR10、-CONR10R11、-CONR10-SO2-C1-4烷、氰基、-NR10R11、NR10R11-C1-4的烷氧基、-C1-4的羧酸、C1-4的烷基、C1-4的烷氧基、C1-4的烷氧-C1-4烷氧基、-CO-吗啉、吗啉、-O-C1-6的一元或者二元醇、HOOC-C1-4烷氧基、
R10、R11、R12独立选自氢、C1-4烷基、-(CH2)n-OH；
R13选自C1-4的烷基取代或者未取代的苯基；
前述n＝0-6的自然数。
作为本发明的一种优选技术方案，-NR5-(CH2)n-CO-(CH2)n-NR6R7包括
包括/>
其中，R7和R9如上定义。
作为本发明的一种优选技术方案，所述C1-4的烷基选自甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、环丁基；
-C1-4的羧酸选自甲酸、乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、叔丁酸；
-C1-4的羧酸-C1-4醇酯选自甲酸甲酯、甲酸乙酯、甲酸丙酯、甲酸丁酯、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酸甲酯、丙酸乙酯、丙酸丙酯、丙酸丁酯、丁酸甲酯、丁酸乙酯、丁酸丙酯、丁酸丁酯。
作为本发明的一种优选技术方案，所述卤素选自氟、氯、溴、碘。
作为本发明的一种优选技术方案，所述C1-4的烷选自甲烷、乙烷、丙烷、异丙烷、环丙烷、正丁烷、异丁烷、仲丁烷、叔丁烷、环丁烷；
所述C1-4的烷氧基选自甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基；
所述(CH2)n-OH选自羟基、甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇；
所述C1-6的一元或者二元醇选自甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇、叔丁醇、1,3-丁二醇、3-甲基丁-1-醇、3-甲基戊-1-醇、4-甲基戊-1醇、3-甲基己-1醇、4-甲基己-1醇；
所述NR10R11选自氨基、甲胺、乙胺、丙胺、丁胺、二甲胺、甲乙胺、甲丙胺、甲丁胺、二乙胺、乙丙胺、乙丁胺、二丙胺、丙丁胺、二丁胺。
作为本发明的一种优选技术方案，所述C3-12的脂肪环选自环丙烷、环丁烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、环辛烷、环壬烷、环癸烷、螺[3,3]庚环、螺[3,5]壬环、螺[4,5]癸环；
所述C3-12的脂肪的一个以上碳原子被0-2个N、O、S原子所替代，选自：
作为本发明的一种优选技术方案，n＝0、1、2、3、4、5、6。
作为本发明的一种优选技术方案，
R1选自四氮唑、三氮唑；
R2选自苯环、
Ar选自以下基团：
作为本发明的一种优选技术方案，选自以下化合物：
/>
/>
/>
/>
。
作为本发明的一种优选技术方案，所述药学上可接受的盐是指化合物与药学上可接受的酸或碱制备。
作为本发明的一种优选方案，所述化合物的一个以上的氢原子上被同位素氘取代。
本发明另一目的提供了一种药物组合物，包括前述的式(I)的化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐和一种以上药学上可接受的载体。
本发明另一目的在于提供所述的式(I)的化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、以及含有所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐的药物组合物在制备用于制备治疗FXIa相关疾病的药物用途，具体地，涉及血栓相关疾病的药物用途。
除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。这里所采用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与药学上可接受的酸或碱制备。
所述为连接键。
除了盐的形式，本发明所提供的化合物还存在前药形式。本文所描述的化合物的前药容易地在生理条件下发生化学变化从而转化成本发明的化合物。此外，前体药物可以在体内环境中通过化学或生化方法被转换到本发明的化合物。
本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式或者溶剂化形式存在，包括水合物形式。一般而言，溶剂化形式与非溶剂化的形式相当，都包含在本发明的范围之内。
本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。
可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体，以及D和L异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。
本发明化合物分子的原子是同位素，通过同位素衍生化通常可以延长半衰期、降低清除率、增强代谢稳定和提高体内活性等效果。并且，包括一个实施方案，其中至少一个原子被具有相同原子数(质子数)和不同质量数(质子和中子和)的原子取代。本发明化合物中包括的同位素的实例包括氢原子、碳原子、氮原子、氧原子、磷原子、硫原子、氟原子、氯原子，其分别包括2H、3H、13C、14C、15N、17O、18O、31P、32P、35S、18F、36Cl。特别的是，随其衰退而发射辐射的放射性同位素例如3H或14C可用于药物制剂或者体内化合物的局部解剖学检验。稳定的同位素既不随其量衰减或变化，也不具有放射性，因此其可以安全使用。当构成本发明化合物分子的原子是同位素时，通过用包含相应同位素的试剂替代合成中所用的试剂，可以根据通用方法转化同位素。
本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氘(2H)，碘-125(125I)或C-14(14C)。本发明的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本发明的范围之内。
进一步地，本发明的化合物一个或多个氢原子上被同位素氘(2H)取代，本发明化合物氘代后，具有延长半衰期、降低清除率、增强代谢稳定和提高体内活性等效果。
所述同位素衍生物的制备方法通常包括：相转移催化方法。例如，优选的氘化方法采用相转移催化剂(例如，四烷基铵盐，NBu4HSO4)。使用相转移催化剂交换二苯基甲烷化合物的亚甲基质子，导致比在酸(例如，甲磺酸)存在下用氘化硅烷(例如三乙基氘化甲硅烷)或用路易斯酸如三氯化铝采用氘化硼酸钠还原而引入较高的氘。
术语“药学上可接受的载体”是指能够递送本发明有效量活性物质、不干扰活性物质的生物活性并且对宿主或者患者无毒副作用的任何制剂载体或介质，代表性的载体包括水、油、蔬菜和矿物质、膏基、洗剂基质、软膏基质等。这些基质包括悬浮剂、增粘剂、透皮促进剂等。它们的制剂为化妆品领域或局部药物领域的技术人员所周知。关于载体的其他信息，可以参考Remington:The Science and Practice of Pharmacy,21st Ed.,Lippincott,Williams&Wilkins(2005)，该文献的内容通过引用的方式并入本文。
术语“赋形剂”通常是指配制有效的药物组合物所需要载体、稀释剂和/或介质。
针对药物或药理学活性剂而言，术语“有效量”或“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药剂的足够用量。对于本发明中的口服剂型，组合物中一种活性物质的“有效量”是指与该组合物中另一种活性物质联用时为了达到预期效果所需要的用量。有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。
术语“活性成分”、“治疗剂”，“活性物质”或“活性剂”是指一种化学实体，它可以有效地治疗目标紊乱、疾病或病症。
“任选”或“任选地”指的是随后描述的事件或状况可能但不是必需出现的，并且该描述包括其中所述事件或状况发生的情况以及所述事件或状况不发生的情况。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但发明的实施方式不限于此。
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-III核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)，氘代氯仿(CDCl3)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
MS的测定用ISQ EC质谱仪(生产商:Thermo,型号:ISQ EC)。
高效液相色谱法(HPLC)分析使用Thermo U3000 HPLC DAD高效液相色谱仪。
CombiFlash快速制备仪使用CombiFlash Rf+LUMEN(TELEDYNE ISCO)。
薄层层析硅胶板使用烟台银龙HSGF254或GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.17mm～0.23mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。
硅胶柱色谱法一般使用乳山上邦硅胶100～200目硅胶为载体。
实施例1
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-氯-2-(1H-四唑-1-基)硝基苯
室温下，将5-氯-2-氟硝基苯(5.0克，28.5毫摩尔)、四氮唑(2.4克，34.2毫摩尔)和碳酸钾(5.9克，42.7毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，N2保护下，80摄氏度反应3.0小时。
反应结束，加入乙酸乙酯30毫升，有机相混合物用饱和食盐水(20毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。有机相减压浓缩所得残余物直接进行下一步反应。
步骤B：合成5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯胺
室温下，将5-氯-2-(1H-四唑-1-基)硝基苯粗品加入乙酸乙酯(50毫升)中，冰浴下，分批加入氯化亚锡二水合物(67.0克，300毫摩尔)，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，再加入过量碳酸氢钠固体，调pH至弱碱性，垫硅藻土抽滤，滤饼用50毫升乙酸乙酯洗涤，滤液用乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/5，得到副产物，乙酸乙酯/正己烷＝1/2，得到产物).得到3.0克黄色油状液体5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯胺(收率：54.1)。LCMS:RT＝3.59min,[M+H]+＝196.09。
步骤C：合成2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
N2保护、冰浴下，向含有5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯胺(3.0克，15.4毫摩尔)和吡啶(2.4克，30.8毫摩尔)的二氯甲烷(50毫升)中滴加草酰氯单甲酯(2.3克，18.5毫摩尔)，滴毕，室温反应1.0小时。
反应结束，有机相先用饱和食盐水(40毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。有机相减压浓缩，得到白色块状固体2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯，直接用于下一步反应。
步骤D：合成2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸
冰浴下，向含有2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯粗品的四氢呋喃(40毫升)中滴加氢氧化锂(1.3克，30.8毫摩尔)水溶液(20毫升)，滴毕，室温反应30分钟。
反应结束，用稀盐酸水溶液(1.0摩尔/升)调pH至3，用滤纸过滤混合物，滤饼用蒸馏水(30毫升)洗涤，干燥后得到3.2克白色絮状固体2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸。无需纯化，直接用于下一步反应。LCMS:RT＝1.52min,[M-H]-＝266.01。
步骤E：合成4-(2-甲氧基丙基)哌嗪-2-酮
室温下，将2-氧代哌嗪(1.0毫克，10.0毫摩尔)、2-乙氧基乙基-1-溴乙烷(1.7克，11.0毫摩尔)和碳酸钾(3.5克，25.0毫摩尔)加入乙腈(20毫升)中，氮气保护下，冷凝回流，加热80摄氏度过夜。
反应结束，垫无水硫酸镁抽滤，滤饼用20毫升二氯甲烷洗涤，合并有机相，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到602.0毫克白色固体4-(3-甲氧基丙基)哌嗪-2-酮(收率：35.0％)。
步骤F：合成(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-溴-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(700.0毫克，1.8毫摩尔)、4-(2-乙氧基乙基)哌嗪-2-酮(602.0毫克，3.5毫摩尔)、碳酸铯(1.4克，4.4毫摩尔)、碘化亚铜(332.0毫克，1.8毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(308.0毫克，3.5毫摩尔)加入甲苯(15毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(30毫升)，混合物用饱和食盐水(20毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到610.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(收率：70.6％)。LCMS:RT＝3.07min,[M+H]+＝492.27。
步骤G：合成(S)-2-氨基-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(610.0毫克，1.2毫摩尔)加入乙酸乙酯(16.0毫升)中，搅拌下滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液(2.0摩尔/升，4.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)，混合物用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到327.0毫克白色固体(S)-2-氨基-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.07min,[M+H]+＝392.26。
步骤H：合成(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-氨基-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(327.0毫克，0.8毫摩尔和碳酸钠(355.0毫克，3.4毫摩尔)加入四氢呋喃(3.0毫升)和水(3.0毫升)的混合溶剂中，搅拌下加入芴甲氧羰酰氯(259.0毫克，1.0毫摩尔)，氮气保护下室温反应3.0小时。
反应结束，加入饱和氯化钠溶液(20毫升)，混合物用二氯甲烷(20毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/20)。得到336.0毫克白色固体(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(收率：65.5％)。LCMS:RT＝3.44min,[M+H]+＝614.30。
步骤I：合成(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸
室温下，将(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(336.0毫克，0.6毫摩尔)加入二氯甲烷(4.0毫升)中，搅拌下滴加三氟乙酸(2.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，得到黄色油状液体(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.01min,[M+H]+＝558.16。
步骤J：合成(S)-4-(2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸粗品和4-氨基-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，搅拌下滴加N,N-二异丙基乙胺，调节pH值至碱性。然后加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(312.0毫克，0.8毫摩尔)和N,N-二甲基甲酰胺(142.0毫克，1.1毫摩尔)，于氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(15毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/20)。得到436.4毫克白色固体(S)-4-(2-芴甲氧羰基氨基-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯(收率：90.9％)。LCMS:RT＝4.03min,[M+H]+＝872.55。
步骤K：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-芴甲氧羰基氨基-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯(436.4毫克，0.5毫摩尔)加入二氯甲烷(6.0毫升)中，搅拌下滴加4-甲基哌啶(1.5毫升)，于氮气保护下室温反应1.0小时。
反应结束，直接减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/20)。得到186.2毫克白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯(收率：68.1％)。LCMS:RT＝2.89min,[M+H]+＝650.49。
步骤L：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(220.0毫克，0.8毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯(186.2毫克，0.4毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(390.0毫克，1.0毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(4.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(175.0毫克，1.4毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应1.0小时。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.26min,[M+H]+＝799.23。
步骤M：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯粗品加入二氯甲烷(10.0毫升)中，滴加三氟乙酸(5.0毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到82.9毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸。LCMS:RT＝2.86min,[M+H]+＝743.29。
实施例2
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(2-乙氧基乙基)哌嗪-2-酮
室温下，将2-氧代哌嗪(1.0毫克，10.0毫摩尔)、3-甲氧基-1-溴乙烷(1.7克，11.0毫摩尔)和碳酸钾(3.5克，25.0毫摩尔)加入乙腈(20毫升)中，氮气保护下，冷凝回流，加热80摄氏度过夜。
反应结束，垫无水硫酸镁抽滤，滤饼用20毫升二氯甲烷洗涤，合并有机相，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到668.0毫克白色固体4-(3-甲氧基丙基)哌嗪-2-酮(收率：38.9％)。
步骤B：合成(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-溴-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(700.0毫克，1.8毫摩尔)、4-(2-乙氧基乙基)哌嗪-2-酮(668.0毫克，3.8毫摩尔)、碳酸铯(1.4克，4.4毫摩尔)、碘化亚铜(369.0毫克，1.8毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(343.0毫克，3.5毫摩尔)加入甲苯(15毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(30毫升)，混合物用饱和食盐水(20毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到663.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(收率：77.6％)。LCMS:RT＝3.17min,[M+Na]+＝514.21。
步骤C：合成(S)-2-氨基-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(3-甲氧基丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(663.0毫克，1.4毫摩尔)加入乙酸乙酯(16.0毫升)中，搅拌下滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液(2.0摩尔/升，4.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)，混合物用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到217.0毫克白色固体(S)-2-氨基-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。
步骤D：合成(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-氨基-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(217.0毫克，0.4毫摩尔)和碳酸钠(148.0毫克，1.4毫摩尔)加入四氢呋喃(3.0毫升)和水(3.0毫升)的混合溶剂中，搅拌下加入芴甲氧羰酰氯(122.0毫克，0.4毫摩尔)，氮气保护下室温反应3.0小时。
反应结束，加入饱和氯化钠溶液(20毫升)，混合物用二氯甲烷(20毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到343.0毫克白色固体(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(收率：100.0％)。LCMS:RT＝3.64min,[M+H]+＝614.30。
步骤E：合成(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸
室温下，将(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(343.0毫克，0.4毫摩尔)加入二氯甲烷(4.0毫升)中，搅拌下滴加三氟乙酸(2.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，得到黄色油状液体(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.14min,[M+H]+＝558.24。
步骤F：合成(S)-4-(2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸粗品和4-氨基-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，搅拌下滴加N,N-二异丙基乙胺，调节pH值至碱性。然后加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(251.0毫克，0.7毫摩尔)和N,N-二甲基甲酰胺(170.0毫克，1.3毫摩尔)，于氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(15毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯)。得到221.0毫克白色固体(S)-4-(2-芴甲氧羰基氨基-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯(收率：43.6％)。LCMS:RT＝4.17min,[M+H]+＝872.45。
步骤G：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-芴甲氧羰基氨基-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯(221.0毫克，0.2毫摩尔)加入二氯甲烷(6.0毫升)中，搅拌下滴加4-甲基哌啶(1.5毫升)，于氮气保护下室温反应1.0小时。
反应结束，直接减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯)。得到147.0毫克白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯(收率：89.0％)。LCMS:RT＝2.94min,[M+H]+＝550.28。
步骤H：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(125.0毫克，0.5毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯(147.0毫克，0.2毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(175.0毫克，0.5毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(4.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(75.0毫克，0.6毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应1.0小时。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.32min,[M+H]+＝799.33。
步骤I：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯粗品加入二氯甲烷(10.0毫升)中，滴加三氟乙酸(5.0毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到43.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-乙氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸。LCMS:RT＝2.93min,[M+H]+＝743.10。
实施例3
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧代哌嗪
室温下，将2-氧代哌嗪(1.0克，10.0毫摩尔)和四氢-2H-吡喃-4-酮(1.6克，16.0毫摩尔)加入甲醇(20毫升)和乙酸(0.4毫升)的混合溶剂中，氮气保护下，室温搅拌1.0小时。然后在冰浴下，缓慢加入氰基硼氢化钠(800.0毫克，13.0毫摩尔)，升至室温后，反应过夜。
反应结束，垫无水硫酸镁抽滤，滤饼用40毫升二氯甲烷洗涤，合并有机相，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到1.5克白色固体4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧代哌嗪(收率：89.6％)。
步骤B：合成(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-溴-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(500.0毫克，1.3毫摩尔)、4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-2-酮(460.0毫克，2.5毫摩尔)、碳酸铯(1.1克，3.1毫摩尔)、碘化亚铜(238.0毫克，1.3毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(220.0毫克，2.5毫摩尔)加入甲苯(15毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(30毫升)，混合物用饱和食盐水(20毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到371.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(收率：58.9％)。LCMS:RT＝3.07min,[M+Na]+＝526.17。
步骤C：合成(S)-2-氨基-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(371.0毫克，0.8毫摩尔)加入乙酸乙酯(16.0毫升)中，搅拌下滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液(2.0摩尔/升，4.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)，混合物用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到217.0毫克白色固体(S)-2-氨基-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝0.56min,[M+H]+＝426.16。
步骤D：合成(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-氨基-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(197.0毫克，0.5毫摩尔)和碳酸钠(212.0毫克，2.0毫摩尔)加入四氢呋喃(3.0毫升)和水(3.0毫升)的混合溶剂中，搅拌下加入芴甲氧羰酰氯(155.0毫克，0.6毫摩尔)，氮气保护下室温反应3.0小时。
反应结束，加入饱和氯化钠溶液(20毫升)，混合物用二氯甲烷(20毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到224.0毫克白色固体(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(收率：73.2％)。LCMS:RT＝3.60min,[M+H]+＝626.28。
步骤E：合成(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸
室温下，将(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(224.0毫克，0.4毫摩尔)加入二氯甲烷(4.0毫升)中，搅拌下滴加三氟乙酸(2.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，得到黄色油状液体(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.03min,[M+H]+＝570.23。
步骤F：合成(S)-4-(2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸粗品和4-氨基-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，搅拌下滴加N,N-二异丙基乙胺，调节pH值至碱性。然后加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(205.0毫克，0.5毫摩尔)和N,N-二甲基甲酰胺(96.0毫克，0.7毫摩尔)，于氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(15毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到95.0毫克白色固体(S)-4-(2-芴甲氧羰基氨基-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯(收率：43.6％)。LCMS:RT＝4.17min,[M+H]+＝884.35。
步骤G：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-芴甲氧羰基氨基-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯(95.0毫克，0.2毫摩尔)加入二氯甲烷(6.0毫升)中，搅拌下滴加4-甲基哌啶(1.5毫升)，于氮气保护下室温反应1.0小时。
反应结束，直接减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到130.0毫克白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯。LCMS:RT＝1.42min,[M-H]-＝560.26。
步骤H：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(75.0毫克，0.3毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯(130.0毫克，0.2毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(137.0毫克，0.4毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(4.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(60.0毫克，0.5毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应1.0小时。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.26min,[M+H]+＝811.33。
步骤I：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯粗品加入二氯甲烷(10.0毫升)中，滴加三氟乙酸(5.0毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到43.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸。LCMS:RT＝2.86min,[M-H]-＝753.09。
实施例4
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧代哌嗪
室温下，将2-氧代哌嗪(1.0克，10.0毫摩尔)和3-氧代四氢呋喃(1.3克，15.1毫摩尔)加入甲醇(20毫升)和乙酸(0.4毫升)的混合溶剂中，氮气保护下，室温搅拌1.0小时。然后在冰浴下，缓慢加入氰基硼氢化钠(800.0毫克，13.0毫摩尔)，升至室温后，反应过夜。
反应结束，垫无水硫酸镁抽滤，滤饼用40毫升二氯甲烷洗涤，合并有机相，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到819.0毫克白色固体4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧代哌嗪(收率：51.2％)。
步骤B：合成(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-溴-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(500.0毫克，1.3毫摩尔)、4-(四氢呋喃-3-基)哌嗪-2-酮(425.0毫克，2.5毫摩尔)、碳酸铯(1.1克，3.1毫摩尔)、碘化亚铜(238.0毫克，1.3毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(220.0毫克，2.5毫摩尔)加入甲苯(15毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(30毫升)，混合物用饱和食盐水(20毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到538.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(收率：86.0％)。LCMS:RT＝3.44min,[M+H]+＝512.15。
步骤C：合成(S)-2-氨基-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(538.0毫克，0.8毫摩尔)加入乙酸乙酯(16.0毫升)中，搅拌下滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液(2.0摩尔/升，4.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)，混合物用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到386.0毫克白色固体(S)-2-氨基-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝0.65min,[M+H]+＝412.73。
步骤D：合成(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-氨基-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(386.0毫克，1.0毫摩尔)和碳酸钠(424.0毫克，4.0毫摩尔)加入四氢呋喃(4.0毫升)和水(4.0毫升)的混合溶剂中，搅拌下加入芴甲氧羰酰氯(310.0毫克，1.2毫摩尔)，氮气保护下室温反应3.0小时。
反应结束，加入饱和氯化钠溶液(20毫升)，混合物用二氯甲烷(20毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到391.0毫克白色固体(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(收率：64.3％)。LCMS:RT＝3.97min,[M+H]+＝634.29。
步骤E：合成(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸
室温下，将(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(391.0毫克，0.6毫摩尔)加入二氯甲烷(4.0毫升)中，搅拌下滴加三氟乙酸(2.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，得到黄色油状液体(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.35min,[M+H]+＝556.30。
步骤F：合成(S)-4-(2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯
/>
室温下，将(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸粗品和4-氨基-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，搅拌下滴加N,N-二异丙基乙胺，调节pH值至碱性。然后加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(365.0毫克，1.0毫摩尔)和N,N-二甲基甲酰胺(165.0毫克，1.3毫摩尔)，于氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(15毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到465.0毫克白色固体(S)-4-(2-芴甲氧羰基氨基-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯(收率：94.5％)。LCMS:RT＝4.62min,[M+H]+＝871.25。
步骤G：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-芴甲氧羰基氨基-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯(465.0毫克，0.8毫摩尔)加入二氯甲烷(6.0毫升)中，搅拌下滴加4-甲基哌啶(1.5毫升)，于氮气保护下室温反应1.0小时。
反应结束，直接减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到263.0毫克白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯。LCMS:RT＝2.65min,[M-H]-＝546.24。
步骤H：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(155.0毫克，0.6毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯(263.0毫克，0.5毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(274.0毫克，0.7毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(4.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(124.0毫克，1.0毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应1.0小时。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.62min,[M+H]+＝797.49。
步骤I：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯粗品加入二氯甲烷(10.0毫升)中，滴加三氟乙酸(5.0毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到288.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢呋喃-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸。LCMS:RT＝3.06min,[M-H]-＝739.12。
实施例5
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(4-甲氧基环己基)-2-氧代哌嗪
/>
室温下，将2-氧代哌嗪(900.0毫克，8.5毫摩尔)和4-甲氧基环己酮(2.2克，17.0毫摩尔)加入甲醇(40毫升)和乙酸(0.8毫升)的混合溶剂中，氮气保护下，室温搅拌1.0小时。然后在冰浴下，缓慢加入氰基硼氢化钠(1.2克，18.7毫摩尔)，升至室温后，反应过夜。
反应结束，垫无水硫酸镁抽滤，滤饼用40毫升二氯甲烷洗涤，合并有机相，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到2.2克白色固体4-(4-甲氧基环己基)-2-氧代哌嗪。
步骤B：合成(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-溴-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(1.0克，2.5毫摩尔)、4-(4-甲氧基环己基)哌嗪-2-酮(1.0克，5.0毫摩尔)、碳酸铯(1.6克，5.0毫摩尔)、碘化亚铜(476.0毫克，5.0毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(440.0毫克，5.0毫摩尔)加入甲苯(15毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(30毫升)，混合物用饱和食盐水(20毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到787.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(收率：60.5％)。LCMS:RT＝3.16min,[M+H]+＝529.28。
步骤C：合成(S)-2-氨基-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(300.0毫克，0.8毫摩尔)加入乙酸乙酯(8.0毫升)中，搅拌下滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液(2.0摩尔/升，2.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)，混合物用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到217.0毫克白色固体(S)-2-氨基-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝0.56min,[M+H]+＝432.28。
步骤D：合成(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-氨基-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯粗品和碳酸钠(297.0毫克，2.8毫摩尔)加入四氢呋喃(2.0毫升)和水(2.0毫升)的混合溶剂中，搅拌下加入芴甲氧羰酰氯(176.0毫克，0.7毫摩尔)，氮气保护下室温反应3.0小时。
反应结束，加入饱和氯化钠溶液(20毫升)，混合物用二氯甲烷(20毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到240.0毫克白色固体(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(收率：72.0％)。LCMS:RT＝3.39min,[M+H]+＝654.29。
步骤E：合成(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸
室温下，将(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸叔丁酯(240.0毫克，0.4毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，搅拌下滴加三氟乙酸(2.5毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，得到黄色油状液体(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.03min,[M+H]+＝598.27。
步骤F：合成(S)-4-(2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-((芴甲氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸粗品和4-氨基-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，搅拌下滴加N,N-二异丙基乙胺，调节pH值至碱性。然后加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(285.0毫克，0.8毫摩尔)和N,N-二甲基甲酰胺(129.0毫克，1.0毫摩尔)，于氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(15毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到304.0毫克白色固体(S)-4-(2-芴甲氧羰基氨基-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯。LCMS:RT＝3.90min,[M+H]+＝912.36。
步骤G：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-芴甲氧羰基氨基-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1-叔丁氧羰基-吲哚-2-酸叔丁酯(304.0毫克，0.3毫摩尔)加入二氯甲烷(6.0毫升)中，搅拌下滴加4-甲基哌啶(1.5毫升)，于氮气保护下室温反应1.0小时。
反应结束，直接减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到153.0毫克白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯。LCMS:RT＝1.51min,[M+H]+＝624.23。
步骤H：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(129.0毫克，0.4毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯(153.0毫克，0.4毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(228.0毫克，0.6毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(4.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(104.0毫克，0.8毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应1.0小时。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.23min,[M+H]+＝839.26。
步骤I：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸叔丁酯粗品加入二氯甲烷(10.0毫升)中，滴加三氟乙酸(5.0毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到93.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-酸。LCMS:RT＝2.87min,[M+H]+＝783.00。
实施例6
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧代哌嗪
室温下，将2-氧代哌嗪(500毫克，5.0毫摩尔)和氧杂环丁-3-酮(720.0毫克，10.0毫摩尔)加入甲醇(20毫升)和乙酸(0.4毫升)的混合溶剂中，氮气保护下，室温搅拌1.0小时。然后在冰浴下，缓慢加入氰基硼氢化钠(692.0毫克，11.0毫摩尔)，升至室温后，反应过夜。
反应结束，垫无水硫酸镁抽滤，滤饼用40毫升二氯甲烷洗涤，合并有机相，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到351.0毫克白色固体4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧代哌嗪(收率：45.0％)。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(582.0毫克，1.1毫摩尔)、4-(氧杂环丁烷-3-基)哌嗪-2-酮(351.0毫克，2.3毫摩尔)、碳酸铯(738.0毫克，2.3毫摩尔)、碘化亚铜(214.0毫克，1.1毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(198.0毫克，2.3毫摩尔)加入甲苯(10毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(30毫升)，混合物用饱和食盐水20毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到167.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：25.0％)。LCMS:RT＝3.90min,[M-H]-＝617.24。
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(167.0毫克，0.4毫摩尔)加入二氯甲烷(20.0毫升)中，搅拌下滴加三氟乙酸(912毫克)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)，混合物用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝2.77min,[M+H]+＝517.22。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(64.0毫克，0.2毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(95.0毫克，0.2毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(114.0毫克，0.3毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(52.0毫克，0.4毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到78.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯。LCMS:RT＝3.90min,[M+H]+＝744.25。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(78.0毫克，0.1毫摩尔)加入二氯甲烷(8.0毫升)中，滴加三氟乙酸(4.0毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到49.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(氧杂环丁烷-3-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯。LCMS:RT＝3.30min,[M+H]+＝688.17。
实施例7
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧代哌嗪
室温下，将2-氧代哌嗪(500毫克，5.0毫摩尔)和四氢-2H-吡喃-4-酮(550.0毫克，5.5毫摩尔)加入甲醇(20毫升)和乙酸(0.4毫升)的混合溶剂中，氮气保护下，室温搅拌1.0小时。然后在冰浴下，缓慢加入氰基硼氢化钠(408.0毫克，6.5毫摩尔)，升至室温后，反应过夜。
反应结束，垫无水硫酸镁抽滤，滤饼用40毫升二氯甲烷洗涤，合并有机相，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到552.4毫克白色固体4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧代哌嗪(收率：54.5％)。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(779.0毫克，1.5毫摩尔)、4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-2-酮(552.4毫克，3.0毫摩尔)、碳酸铯(984.0毫克，3.0毫摩尔)、碘化亚铜(286.0毫克，1.5毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(265.0毫克，3.0毫摩尔)加入甲苯(10毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(30毫升)，混合物用饱和食盐水20毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/5)。得到258.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：27.5％)。LCMS:RT＝3.32min,[M+H]+＝623.35。
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(258.0毫克，0.4毫摩尔)加入乙酸乙酯(16.0毫升)中，搅拌下滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液(2.0摩尔/升，4.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)，混合物用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝1.70min,[M+H]+＝523.25。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(107.0毫克，0.4毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(173.0毫克，0.3毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(190.0毫克，0.5毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(85.0毫克，0.7毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到145.6毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：56.8％)。LCMS:RT＝3.37min,[M+H]+＝772.31。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(145.6毫克，0.2毫摩尔)加入二氯甲烷(8.0毫升)中，滴加三氟乙酸(4.0毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到62.3毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：52.9％)。LCMS:RT＝2.89min,[M+H]+＝716.18。
实施例8
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(4-羟基-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-羟基-2-氧代哌啶
冰浴下，将硼氢化钠(35.0毫克，0.9毫摩尔)加入含有2,4-二氧代哌啶(339.4毫克，3.0毫摩尔)乙醇(6毫升)中，冰浴下搅拌15分钟。
反应结束，直接减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/正二氯甲烷＝1/9)。得到212.0毫克无色油状液体4-羟基-2-氧代哌啶(收率：61.4％)。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-羟基-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(478.0毫克，0.9毫摩尔)、4-羟基-2-氧代哌啶(212.0毫克，1.8毫摩尔)、碳酸铯(604.0毫克，1.8毫摩尔)、碘化亚铜(176.0毫克，0.9毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(163.0毫克，1.8毫摩尔)加入甲苯(5毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合物用饱和食盐水10毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/8)。得到201.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-羟基-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：45.1％)。LCMS:RT＝3.86min,[M-H]-＝552.22。
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-羟基-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-羟基-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(201.0毫克，0.4毫摩尔)加入乙酸乙酯(16.0毫升)中，搅拌下滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液(2.0摩尔/升，4.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)，混合物用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-羟基-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝2.77min,[M-H]-＝452.14。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(4-羟基-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(139.0毫克，0.3毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-羟基-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯粗品和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(175.0毫克，0.5毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(79.0毫克，0.6毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物通过进行硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)。得到135.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-羟基-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率62.8％)。LCMS:RT＝3.97min,[M+H]+＝703.26。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(4-羟基-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(4-羟基-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(129.0毫克，0.1毫摩尔)加入二氯甲烷(4.0毫升)中，滴加三氟乙酸(2毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到40.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(4-羟基-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸。LCMS:RT＝3.30min,[M+H]+＝647.10。
实施例9
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(389.0毫克，0.8毫摩尔)、3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷(232.8毫克，1.5毫摩尔)、碳酸铯(488.5毫克，1.5毫摩尔)、碘化亚铜(143.0毫克，0.8毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(135.0毫克，1.5毫摩尔)加入甲苯(5毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合物用饱和食盐水10毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝2/1)。得到453.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：76.3％)。LCMS:RT＝4.16min,[M-H]-＝593.35。
步骤B：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(453.0毫克，0.8毫摩尔)加入乙酸乙酯(16.0毫升)中，搅拌下滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液(2.0摩尔/升，4.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)，混合物用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝2.90min,[M]+＝493.17。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(114.0毫克，0.2毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯粗品和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(122.0毫克，0.3毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(56.0毫克，0.4毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物通过进行硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝30/1)。得到118.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯。LCMS:RT＝4.14min,[M-H]-＝741.15。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(118.0毫克，0.1毫摩尔)加入二氯甲烷(8.0毫升)中，滴加三氟乙酸(4毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到40.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(3-氧代-8-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸。LCMS:RT＝4.14min,[M-H]-＝741.15。
实施例10
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(2,2,2-三氟乙基)哌嗪-2-酮
室温下，将2-氧代哌嗪(3.0克，30.0毫摩尔)、2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(6.5克，28.0毫摩尔)和碳酸铯(15.0克，46.2毫摩尔)加入乙腈(40毫升)中，氮气保护下，冷凝回流，加热80摄氏度过夜。
反应结束，垫无水硫酸镁抽滤，滤饼用40毫升二氯甲烷洗涤，合并有机相，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到2.4克白色固体4-(2,2,2-三氟乙基)哌嗪-2-酮(收率：47.1％)。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(779.0毫克，1.5毫摩尔)、4-(2,2,2-三氟乙基)哌嗪-2-酮(546.4毫克，3.0毫摩尔)、碳酸铯(977.0毫克，3.0毫摩尔)、碘化亚铜(285.0毫克，1.5毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(270.0毫克，3.0毫摩尔)加入甲苯(10毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(30毫升)，混合物用饱和食盐水20毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/30)。得到742.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：79.8％)。LCMS:RT＝4.25min,[M-H]-＝619.23。
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(742.0毫克，1.2毫摩尔)加入乙酸乙酯(16.0毫升)中，搅拌下滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液(2.0摩尔/升，4.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应4.0小时。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)，混合物用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.04min,[M]+＝520.80。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(320.0毫克，1.2毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(515.0毫克，1.0毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(570.0毫克，1.5毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(258.0毫克，2.0毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到264.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：34.3％)。LCMS:RT＝4.23min,[M-H]-＝770.34。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(51.0毫克，0.06毫摩尔)加入二氯甲烷(4.0毫升)中，滴加三氟乙酸(2毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到19.8毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2,2,2-三氟乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：56.5％)。LCMS:RT＝3.72min,[M-H]-＝712.18。
实施例11
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(779.0毫克，1.5毫摩尔)、3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷(459.0毫克，3.0毫摩尔)、碳酸铯(975.0毫克，3.0毫摩尔)、碘化亚铜(286.0毫克，1.5毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(270.0毫克，3.0毫摩尔)加入甲苯(5毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合物用饱和食盐水10毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到598.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：67.4％)。LCMS:RT＝4.76min,[M-H]-＝590.25。
步骤B：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(598.0毫克，1.1毫摩尔)加入乙酸乙酯(16.0毫升)中，搅拌下滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液(2.0摩尔/升，4.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应过夜。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)，混合物用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.22min,[M-H]-＝490.21。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(375.0毫克，1.4毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯粗品和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(685.0毫克，1.8毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(300.0毫克，2.4毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物通过进行硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝3/5)。得到455.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯。LCMS:RT＝4.62min,[M+H]+＝763.29。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(100毫克，0.1毫摩尔)加入二氯甲烷(8.0毫升)中，滴加三氟乙酸(4毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到68.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸。LCMS:RT＝4.06min,[M-H]-＝707.15。
实施例12
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-2-酮
室温下，将2-氧代哌嗪(500.0毫克，5.0毫摩尔)、4-(2-溴乙基)四氢-2H-吡喃(1.0克，5.5毫摩尔)和碳酸钾(1.8克，12.5毫摩尔)加入乙腈(15毫升)中，氮气保护下，冷凝回流，加热80摄氏度过夜。
反应结束，垫无水硫酸镁抽滤，滤饼用20毫升二氯甲烷洗涤，合并有机相，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到444.0毫克白色固体4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-2-酮(收率：44.8％)。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(571.0毫克，1.1毫摩尔)、4-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-2-酮(444.0毫克，2.2毫摩尔)、碳酸铯(717.0毫克，2.2毫摩尔)、碘化亚铜(209.5毫克，1.1毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(194.0毫克，2.2毫摩尔)加入甲苯(4毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合物用饱和食盐水10毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到583.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：83.3％)。LCMS:RT＝3.46min,[M-H]-＝636.35。
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(566.0毫克，1.1毫摩尔)加入乙酸乙酯(8.0毫升)中，搅拌下滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液(2.0摩尔/升，2.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应3.0小时。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(30毫升)，混合物用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝2.13min,[M+H]+＝538.24。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(370.0毫克，1.4毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯粗品和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(570.0毫克，1.5毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(260.0毫克，2.0毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应3小时。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物通过进行硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/20)。得到75.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：9.5％)。LCMS:RT＝3.48min,[M+H]+＝786.23。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(75.0毫克，0.09毫摩尔)加入二氯甲烷(8.0毫升)中，滴加三氟乙酸(4毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到24.6毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代-4-(((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸。LCMS:RT＝2.93min,[M-H]-＝728.15。
实施例13
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-2-酮
室温下，将2-氧代哌嗪(500.0毫克，5.0毫摩尔)、2-甲氧基-1-溴乙烷(0.7克，5.0毫摩尔)和碳酸钾(1.7克，12.5毫摩尔)加入乙腈(20毫升)中，氮气保护下，冷凝回流，加热80摄氏度过夜。
反应结束，垫无水硫酸镁抽滤，滤饼用20毫升二氯甲烷洗涤，合并有机相，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/9)。得到765.0毫克白色固体4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-2-酮(收率：97.0％)。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
氮气保护下，将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(777.0毫克，1.5毫摩尔)、4-(2-甲氧基乙基)哌嗪-2-酮(465.0毫克，2.9毫摩尔)、碳酸铯(945.0毫克，2.9毫摩尔)、碘化亚铜(285.0毫克，1.5毫摩尔)和N,N’-二甲基乙二胺(255.6毫克，2.9毫摩尔)加入甲苯(10毫升)中，氮气置换三次，冷凝回流下110摄氏度加热反应过夜。
反应结束，加入乙酸乙酯(30毫升)，混合物用饱和食盐水20毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/20)。得到395.0毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：44.0％)。LCMS:RT＝1.98min,[M-H]-＝597.34。
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(2-甲氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(200.0毫克，0.3毫摩尔)加入乙酸乙酯(4.0毫升)中，搅拌下滴加氯化氢的乙酸乙酯溶液(2.0摩尔/升，1.0毫升)，滴加完毕后，氮气保护下室温反应4.0小时。
反应结束，加入饱和碳酸氢钠溶液(15毫升)，混合物用二氯甲烷(20毫升×3次)萃取，有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得到白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(2-甲氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝1.75min,[M+H]+＝497.24。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(175.0毫克，0.7毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(2-甲氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(100.0毫克，0.6毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(342.0毫克，0.9毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(155.0毫克，1.2毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应3小时。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物通过制备液相色谱仪分离。得到35.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：23.3％)。LCMS:RT＝3.39min,[M+H]+＝746.27。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(35.0毫克，0.05毫摩尔)加入二氯甲烷(3.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.5毫升)，室温反应1.0小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到18.3毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：56.5％)。LCMS:RT＝2.91min,[M-H]-＝690.19。
实施例14
合成(S)-4-(2-(2-(((5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)硝基苯
室温下，将5,6-二氯-2-氟硝基苯(1.0克，4.8毫摩尔)、四氮唑(407.0毫克，5.8毫摩尔)和碳酸钾(993.6毫克，7.2毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，N2保护下，80摄氏度反应1.5小时。
反应结束，加入乙酸乙酯30毫升，有机相混合物用饱和食盐水(20毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。有机相减压浓缩所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/5)。得到539.0毫克白色固体5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)硝基苯(收率：44.9％)。
步骤B：合成5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯胺
室温下，将5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)硝基苯(539.0毫克，2.1毫摩尔)加入乙酸乙酯(20毫升)中，冰浴下，分批加入氯化亚锡二水合物(4.6克，20.4毫摩尔)，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，再加入过量碳酸氢钠固体，调pH至弱碱性，垫硅藻土抽滤，滤饼用30毫升乙酸乙酯洗涤，滤液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到376.0毫克黄色固体5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯胺，直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.52min,[M+H]+＝230.07。
步骤C：合成2-((5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
N2保护、冰浴下，向含有5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯胺(100.0毫克，0.4毫摩尔)和吡啶(70.0毫克，0.9毫摩尔)的二氯甲烷(10毫升)中滴加草酰氯单甲酯(65.0毫克，0.5毫摩尔)，滴毕，室温反应30分钟。
反应结束，加入二氯甲烷(10毫升)，有机相先用饱和食盐水(15毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥。有机相减压浓缩所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/3).得到320毫克白色固体2-((5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(收率：48.9％)。LCMS:RT＝3.21min,[M-H]-＝314.02。
步骤D：合成2-((5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸
冰浴下，向含有2-((5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(150.0毫克，0.5毫摩尔)的四氢呋喃(4毫升)中滴加氢氧化锂(43.0毫克，1.0毫摩尔)水溶液(2毫升)，滴毕，室温反应45分钟。
反应结束，加水(5毫升)稀释，用稀盐酸水溶液(1.0摩尔/升)调pH至3，混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取，合并有机相，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得到140.0毫克黄色固体2-((5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸，无需纯化，直接用于下一步反应。LCMS:RT＝1.06min,[M-H]-＝299.98。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将2-((5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(140.0毫克，0.5毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(174.0毫克，0.5毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(263.0毫克，0.7毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(120.0毫克，0.9毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应3小时。
反应结束，加入乙酸乙酯(10毫升)，混合液用饱和食盐水(10毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/5)。得到255.0毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：88.9％)。LCMS:RT＝4.19min,[M-H]-＝624.15。
步骤F：合成(S)-4-(2-(2-(((5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-(((5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(80.0毫克，0.3毫摩尔)加入二氯甲烷(2.5毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应0.5小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用制备液相色谱仪分离，得到8.4毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5,6-二氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：5.5％)。LCMS:RT＝3.58min,[M+H]+＝568.08。
实施例15
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(环丙基甲氧基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-氯-2-(环丙基甲氧基)硝基苯
室温下，将5-氯-2-氟硝基苯(1.8克，10.3毫摩尔)、环丙基甲醇(879.0毫克，12.2毫摩尔)和碳酸铯(6.8克，20.9毫摩尔)加入四氢呋喃(20.0毫升)中，N2保护下，室温反应6小时。
反应结束，加入饱和食盐水50毫升，用乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，然后用无水硫酸镁干燥，最后减压浓缩得到2.1克金色油状物4-氯-1-(环丙基甲氧基)-2-硝基苯，无需纯化，直接用于下一步反应。
步骤B：合成5-氯-2-(环丙基甲氧基)苯胺
室温下，5-氯-2-(环丙基甲氧基)硝基苯(2.1克，9.3毫摩尔)加入乙酸乙酯(100毫升)中，冰浴下，分批加入氯化亚锡二水合物(23.6克，10.5毫摩尔)，N2保护下，室温搅拌过夜。
反应结束，用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，再加入过量碳酸氢钠固体，调pH至弱碱性，垫硅藻土抽滤，滤饼用50毫升乙酸乙酯洗涤，滤液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸镁干燥，最后减压浓缩。得到1.2克黄色油状5-氯-2-(环丙基甲氧基)苯胺，粗品直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.99min,[M+H]+＝198.12。
步骤C：合成2-((5-氯-2-(环丙基甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
N2保护、冰浴下，向含有5-氯-2-(环丙基甲氧基)苯胺(1.2克，5.9毫摩尔)和吡啶(948.0毫克，12.0毫摩尔)的二氯甲烷(25毫升)中滴加草酰氯单甲酯(878.0毫克，7.2毫摩尔)，滴毕，室温反应1.5小时。
反应结束，加饱和碳酸氢钠溶液淬灭，混合液用二氯甲烷(50毫升×3次)萃取。合并有机相，有机相用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得到2.1克棕色固体2-((5-氯-2-(环丙基甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯粗品，无需纯化，直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.43min,[M-CH3]-＝268.10。
步骤D：合成2-((5-氯-2-(环丙基甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸
冰浴下，向含有2-((5-氯-2-(环丙基甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(2.1克，7.4毫摩尔)的四氢呋喃(10毫升)中滴加氢氧化锂(0.7克，16.2毫摩尔)水溶液(5毫升)，滴毕后升至室温搅拌3.0小时。
反应结束，加水稀释，用稀盐酸水溶液(1.0摩尔/升)调pH至3，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得到623.0毫克棕黄色固体2-((5-氯-2-(环丙基甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸，无需纯化，直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.41min,[M-H]-＝268.10。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(环丙基甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将2-((5-氯-2-(环丙基甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(117.0毫克，0.4毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(140.0毫克，0.4毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(277.0毫克，0.7毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(8.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(114.0毫克，0.8毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加入25毫升乙酸乙酯，混合液用饱和食盐水(20毫升×3次)洗涤，然后有机相用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/3)。得到87.0毫克白色粉末固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(环丙基甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：33.9％)。LCMS:RT＝4.91min,[M+H]+＝611.18。
步骤F：合成(S)-4-(2-(2-(((环丙基甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
/>
室温下，将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(环丙基甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯叔丁酯(87.0毫克，0.1毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应0.5小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(3.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到65.3毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(环丙基甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：83.2％)。LCMS:RT＝4.18min,[M-H]-＝579.53。
实施例16
合成(S)-N1-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-N2-(1-氧代-1-((3-氧代异吲哚-5-基)氨基)-3-苯基丙烷-2-基)草酰胺
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-2-氨基-N-(1-氧代异吲哚-5-基)-3-苯基丙酰胺
室温下，将(叔丁氧羰基)-L-苯丙氨酸(200毫克，0.75毫摩尔)、6-氨基异吲哚-1-酮(112毫克，0.75毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(430克，1.13毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(4.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(195毫克，1.5毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。反应结束，倒入40毫升水中，固体析出，抽滤，干燥得白色固体直接用于下一步反应。
将上述粗产物溶于5毫升HCl/EA溶液(2摩尔/升)，室温搅拌3小时，反应完全。抽滤，并用少量EA洗一次，干燥得121毫克白色固体(S)-2-氨基-N-(3-氧代异吲哚-5-基)-3-苯基丙酰胺。MS(ESI)M/Z：296.18[M+H]+。
步骤B：合成(S)-N1-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-N2-(1-氧代-1-((3-氧代异吲哚-5-基)氨基)-3-苯基丙烷-2-基)草酰胺
室温下，将2-((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(80毫克，0.30毫摩尔)、(S)-2-氨基-N-(1-氧代异吲哚-5-基)-3-苯基丙酰胺(100毫克，0.34毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(171克，0.45毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(116毫克，0.90毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化。得到73毫克白色固体(S)-N1-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-N2-(1-氧代-1-((3-氧代异吲哚-5-基)氨基)-3-苯基丙烷-2-基)草酰胺(收率：44.6％)。MS(ESI)M/Z：545.19[M+H]+。
实施例17
合成(S)-N1-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-N2-(1-氧代-1-((1-氧代异吲哚-5-基)氨基)-3-苯基丙烷-2-基)草酰胺
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-2-氨基-N-(1-氧代异吲哚-5-基)-3-苯基丙酰胺
室温下，将(叔丁氧羰基)-L-苯丙氨酸(200毫克，0.75毫摩尔)、5-氨基异吲哚-1-酮(112毫克，0.75毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(430克，1.13毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(4.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(195毫克，1.5毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。反应结束，倒入40毫升水中，固体析出，抽滤，干燥得白色固体直接用于下一步反应。
将上述粗产物溶于5毫升HCl/EA溶液(2摩尔/升)，室温搅拌3h，反应完全。抽滤，并用少量EA洗一次，干燥得110毫克白色固体(S)-2-氨基-N-(1-氧代异吲哚-5-基)-3-苯基丙酰胺。MS(ESI)M/Z：296.16[M+H]+。
步骤B：合成(S)-N1-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-N2-(1-氧代-1-((1-氧代异吲哚-5-基)氨基)-3-苯基丙烷-2-基)草酰胺
室温下，将2-((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(80毫克，0.30毫摩尔)、(S)-2-氨基-N-(1-氧代异吲哚-5-基)-3-苯基丙酰胺(100毫克，0.34毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(171克，0.45毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(116毫克，0.90毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化。得到70毫克白色固体(S)-N1-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-N2-(1-氧代-1-((1-氧代异吲哚-5-基)氨基)-3-苯基丙烷-2-基)草酰胺(收率：42.8％)。MS(ESI)M/Z：545.18[M+H]+。
实施例18
合成(S)-N1-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-N2-(1-氧代-1-((2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氨基)-3-苯基丙-2-基)草酰胺
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-2-氨基-N-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-苯基丙酰胺
/>
室温下，将(叔丁氧羰基)-L-苯丙氨酸(200毫克，0.75毫摩尔)、6-氨基异吲哚-1-酮(113毫克，0.75毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(430克，1.13毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(4.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(195毫克，1.5毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。反应结束，倒入40毫升水中，固体析出，抽滤，干燥得白色固体直接用于下一步反应。
将上述粗产物溶于5毫升HCl/EA溶液(2摩尔/升)，室温搅拌3小时，反应完全。抽滤，并用少量EA洗一次，干燥得125毫克白色固体(S)-2-氨基-N-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-苯基丙酰胺。MS(ESI)M/Z：297.15[M+H]+。
步骤B：合成(S)-N1-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-N2-(1-氧代-1-((2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氨基)-3-苯基丙-2-基)草酰胺
室温下，将2-((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(80毫克，0.30毫摩尔)、(S)-2-氨基-N-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-3-苯基丙酰胺(110毫克，0.37毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(171克，0.45毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(116毫克，0.90毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化。得到68毫克白色固体(S)-N1-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-N2-(1-氧代-1-((2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氨基)-3-苯基丙-2-基)草酰胺(收率：41.6％)。MS(ESI)M/Z：546.14[M+H]+。
实施例19
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯
室温下，将(S)-3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸(2.5克，7.3毫摩尔)、4-氨基苯甲酸甲酯(1.1克，7.3毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(4.15克，10.9毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(25毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(2.8克，21.7毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应16h。
反应结束，倒入30毫升水中，固体析出，抽滤，干燥得3.5克白色固体(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯(收率100％)。MS(ESI)M/Z:476.20[M+H]+。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯
氮气保护下，向含有(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯(2.0克，4.19毫摩尔)、4-甲基哌嗪-2-酮(956毫克，8.38毫摩尔)的二氧六环(25毫升)溶液中加入碘化亚铜(797毫克，4.19毫摩尔)，碳酸铯(2.73克，8.38毫摩尔)，N1,N2-二甲基乙二胺(738毫克，8.38毫摩尔)，加毕，加热至120摄氏度回流反应过夜。
反应结束，加水(20毫升)淬灭，乙酸乙酯萃取(150毫升×2次)，合并有机相，用饱和食盐水(100毫升)洗，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝9/1)。得到900毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯(42.1％)。MS(ESI)M/Z:511.26[M+H]+。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯
室温下，将(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯(900毫克，1.76毫摩尔)溶于盐酸/乙酸乙酯溶液(12毫升，2摩尔/升)，室温反应3小时。抽滤，干燥，得1.0克淡黄色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯二盐酸盐。
室温下，将2-((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(268毫克，1.0毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯二盐酸盐(507毫克，1.05毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(570毫克，1.5毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(8.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(516毫克，4.0毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。反应结束，倒入20毫升水中，固体析出，抽滤，干燥，得到360毫克淡黄色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯(收率：54.5％)。MS(ESI)M/Z:660.30[M+H]+。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯(330毫克，0.50毫摩尔)溶于四氢呋喃/水溶液(10毫升/5毫升)，加入一水合氢氧化锂(42毫克，1.0毫摩尔)，加热至40摄氏度反应过夜。
反应完全后减压蒸除有机溶剂，用2摩尔/升盐酸调节pH至7-8，析出固体，抽滤，烘干得240毫克淡黄色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：74.4％)。MS(ESI)M/Z:644.10[M-H]-。
实施例20
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-(吡啶-3-基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(吡啶-3-基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(吡啶-3-基)丙酸(532毫克，2.0毫摩尔)、4-氨基苯甲酸叔丁酯(386毫克，2.0毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(1.14克，3.0毫摩尔)加入N,N-二甲基乙酰胺(8毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(774毫克，6.0毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应16h。
反应结束，倒入20毫升水中，固体析出，抽滤，干燥得882克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(吡啶-3-基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率100％)。MS(ESI)M/Z:442.25[M+H]+。
步骤B：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(吡啶-3-基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(吡啶-3-基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(882毫克，2.0毫摩尔)溶于乙酸乙酯(15毫升)，向该溶液加入盐酸/乙酸乙酯溶液(8毫升，2摩尔/升)，室温反应2小时。抽滤，干燥，得800毫克淡黄色固体(S)-4-(2-氨基-3-(吡啶-3-基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯。
室温下，将2-((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(120毫克，0.45毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(205毫克，0.50毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(257毫克，0.68毫摩尔)加入N,N-二甲基乙酰胺(3.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(232毫克，1.8毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，倒入20毫升水中，固体析出，抽滤，干燥，得到150毫克淡黄色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(吡啶-3-基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：56.4％)。MS(ESI)M/Z:591.23[M+H]+。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-(吡啶-3-基)丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(吡啶-3-基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(80毫克，0.14毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中，加入三乙基硅烷(40毫克，0.34毫摩尔)，缓慢滴加三氟乙酸(0.4毫升)，室温反应过夜。
反应结束，减压蒸干溶剂，粗产物进行制备HPLC，得53毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-(吡啶-3-基)丙酰胺基)苯甲酸(收率73.4％)。MS(ESI)M/Z:533.09[M-H]-。
实施例21
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯
室温下，将(叔丁氧羰基)-L-苯丙氨酸(265毫克，1.0毫摩尔)、5-氨基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(204毫克，1.0毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(570毫克，1.5毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(387毫克，3.0毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应16h。
反应结束，倒入80毫升饱和食盐水中，固体析出，抽滤，干燥得450毫克灰白色固体(S)-5-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(收率100％)。MS(ESI)M/Z:452.25[M+H]+。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯
室温下，将(S)-5-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(450毫克，1.0毫摩尔)溶于乙酸乙酯(5毫升)，向其中加入盐酸/乙酸乙酯溶液(5毫升，2摩尔/升)，室温反应4小时。抽滤，干燥，得110毫克淡黄色固体(S)-5-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯盐酸盐。
室温下，将2-((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(70毫克，0.26毫摩尔)、(S)-5-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯盐酸盐(110毫克，0.26毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(148毫克，0.39毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(134毫克，1.04毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，倒入20毫升水中，固体析出，抽滤，干燥，得到150毫克淡黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(收率：96.0％)。MS(ESI)M/Z:601.20[M+H]+。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(70毫克，0.12毫摩尔)溶于四氢呋喃/水溶液(3毫升/1.5毫升)，加入一水合氢氧化锂(10毫克，0.23毫摩尔)，加热至40摄氏度反应过夜。
反应完全后减压蒸除有机溶剂，用2摩尔/升盐酸调节pH至5-6，析出固体，抽滤，粗品进行HPLC进一步纯化，得7毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：10.2％)。MS(ESI)M/Z:571.09[M-H]-。
实施例22
合成(S)-N1-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-N2-(1-氧代-1-((4-(5-氧代-2,5-二氢-1H-吡唑-3-基)苯基)氨基)-3-苯基丙-2-基)草酰胺
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-(4-硝基苯基)-1,2-二氢-3H-吡唑-3-酮
室温下，将3-(4-硝基苯基)-3氧代丙酸乙酯(237毫克，1.0毫摩尔)溶于乙醇(4毫升)，滴加一水合肼(94毫克，1.5毫摩尔)，加热至90摄氏度反应3小时。
反应完全后减压蒸除有机溶剂，所得固体加水(5毫升)打浆，抽滤，烘干，得183毫克淡红色固体5-(4-硝基苯基)-1,2-二氢-3H-吡唑-3-酮(收率：89.3％)。MS(ESI)M/Z:206.11[M+H]+。
步骤B：合成5-(4-硝基苯基)-3-氧代-2,3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯
室温下，向5-(4-硝基苯基)-1,2-二氢-3H-吡唑-3-酮(193毫克，0.75毫摩尔)的四氢呋喃/水(6毫升/3毫升)溶液中加入二碳酸二叔丁酯(409毫克，1.88毫摩尔)和氢氧化钠(75毫克，1.88毫摩尔)，室温反应过夜。
减压蒸除有机溶剂，残余物用乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(正己烷/乙酸乙酯＝4：1)，得到190毫克油状物5-(4-硝基苯基)-3-氧代-2,3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(收率：83.1％)。MS(ESI)M/Z:306.14[M+H]+。
步骤C：合成5-(4-氨基苯基)-3-氧代-2,3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯
室温下，向5-(4-硝基苯基)-3-氧代-2,3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(150毫克，0.49毫摩尔)的甲醇(10毫升)溶液中加入钯/碳(30毫克)，体系置换为氢气，室温反应过夜。
反应完全后，反应液经硅藻土过滤，滤饼用少量甲醇洗涤三次，合并滤液，减压蒸除有机溶剂，得到110毫克油状物5-(4-氨基苯基)-3-氧代-2,3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(收率：81.6％)。MS(ESI)M/Z:276.14[M+H]+。
步骤D：合成(S)-3-(4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯基)-5-氧代-2,5-二氢-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯
室温下，向(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰基)-L-苯丙氨酸(42毫克，0.10毫摩尔)的二氯甲烷(2毫升)溶液中加入草酰氯(38毫克，0.30毫摩尔)，室温反应2小时。减压蒸干溶剂即得酰氯。
5-(4-氨基苯基)-3-氧代-2,3-二氢-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(34毫克，0.12毫摩尔)溶于二氯甲烷(3毫升)，加入吡啶(24毫克，0.30毫摩尔)，将该溶液以冰水浴冷却，滴加上述酰氯的二氯甲烷(2毫升)溶液，加毕移除冷浴，室温反应2小时。
加水(5毫升)淬灭，用乙酸乙酯(20毫升×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(正己烷/乙酸乙酯＝1：2)，得到24毫克油状物(S)-3-(4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯基)-5-氧代-2,5-二氢-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯(收率：35.8％)。MS(ESI)M/Z:672.25[M+H]+。
步骤E：合成(S)-N1-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-N2-(1-氧代-1-((4-(5-氧代-2,5-二氢-1H-吡唑-3-基)苯基)氨基)-3-苯基丙-2-基)草酰胺
室温下，将(S)-3-(4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯基)-5-氧代-2,5-二氢-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯(24毫克，0.036毫摩尔)溶于乙酸乙酯(2毫升)，向该溶液加入盐酸/乙酸乙酯溶液(1.0毫升，2摩尔/升)，室温反应过夜。
减压蒸除溶剂，残余物用制备HPLC纯化，得2.8毫克白色固体(S)-N1-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-N2-(1-氧代-1-((4-(5-氧代-2,5-二氢-1H-吡唑-3-基)苯基)氨基)-3-苯基丙-2-基)草酰胺(收率13.6％)。MS(ESI)M/Z:570.10[M-H]-。
实施例23
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((5-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸
室温下，向5-氯-2-(三氟甲氧基)苯胺(211毫克，1.0毫摩尔)的二氯甲烷(3毫升)溶液依次加入吡啶(119毫克，1.5毫摩尔)，氯草酸单甲酯(184毫克，1.5毫摩尔)，室温反应2小时。加水(5毫升)淬灭，用乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩，所得粗产物直接用于下一步反应。
将上述粗产物溶于四氢呋喃/水(10毫升/5毫升)，室温反应2小时。减压蒸除有机溶剂，用2摩尔/升盐酸调节pH至1-2，析出固体，抽滤，滤饼用少量水洗涤3次，烘干得250毫克淡黄色固体2-((5-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(收率：88.3％)。MS(ESI)M/Z:281.97[M-H]-。
步骤B：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将2-((5-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(85毫克，0.30毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(146毫克，0.30毫摩尔)和1-丙基磷酸酐(394毫克，0.60毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(155毫克，1.20毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加水(5毫升)淬灭，用乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩，残余物用制备HPLC纯化，得14毫克无色油状物(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：7.7％)。MS(ESI)M/Z:606.20[M+H]+。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
室温下，向(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(14毫克，0.023毫摩尔)的二氯甲烷(1.5毫升)溶液中加入三氟乙酸(0.4毫升)中，加毕，室温反应2小时。减压蒸干溶剂，得10毫克淡黄色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：79.1％)。
MS(ESI)M/Z:548.08[M-H]-。
实施例24
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
/>
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-(4-氯-2-硝基苯基)-1H-1,2,4-三唑
室温下，将5-氯-2-氟硝基苯(1.0克，5.7毫摩尔)、1,2,4-三氮唑(462.5毫克，6.7毫摩尔)和碳酸钾(945.4毫克，6.8毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，N2保护下，80摄氏度反应1.5小时。
反应结束，垫无水硫酸钠抽滤，滤饼用50.0毫升乙酸乙酯洗涤，滤液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得到1.1克棕色油状物1-(4-氯-2-硝基苯基)-1H-1,2,4-三唑，无需纯化，直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.28min,[M+H]+＝225.06。
步骤B：合成5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯胺
室温下，将1-(4-氯-2-硝基苯基)-1H-1,2,4-三唑(1.1克，4.9毫摩尔)加入乙酸乙酯中，冰浴下，分批加入氯化亚锡二水合物(11.1克，49.0毫摩尔)，N2保护下，室温反应2小时。
反应结束，用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，再加入过量碳酸氢钠固体，调pH至弱碱性，垫硅藻土抽滤，滤饼用50毫升乙酸乙酯洗涤，滤液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：纯正己烷)。得到820.0毫克乳白色固体5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯胺(收率：86.2％)。LCMS:RT＝3.07min,[M+H]+＝195.09。
步骤C：合成2-((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
N2保护、冰浴下，向含有5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯胺(820.0毫克，4.2毫摩尔)和吡啶(332.2毫克，4.2毫摩尔)的二氯甲烷(30毫升)中滴加草酰氯单甲酯(624.7毫克，5.1毫摩尔)，滴毕，室温反应30分钟。
反应结束，加水淬灭，混合液用二氯甲烷(50毫升×3次)萃取。合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得到1.1克白色固体2-((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯，无需纯化，直接用于下一步反应。LCMS:RT＝3.29min,[M-H]-＝281.09。
步骤D：合成2-((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸
冰浴下，向含有2-((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(1.1克，3.9毫摩尔)的四氢呋喃(100毫升)中滴加氢氧化锂(3.2克，7.8毫摩尔)水溶液(50毫升)，滴毕即反应结束。
反应结束，加水淬灭，用稀盐酸水溶液(0.5摩尔/升)调pH至4，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得到810.5毫克淡黄色固体2-((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸，无需纯化，直接用于下一步反应。LCMS:RT＝1.76min,[M-H]-＝265.01。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将2-((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(500.0毫克，1.9毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(646.0毫克，1.9毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(1.1克，2.9毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(736.7毫克，5.7毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝2/1)。得到458.2毫克黄色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：40.9％)。LCMS:RT＝4.33min,[M-H]-＝587.21。
步骤F：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(60.0毫克，0.1毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应2小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到35.1毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：65.9％)。LCMS:RT＝3.67min,[M-H]-＝531.06。1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.75(s,1H),11.17(s,1H),10.43(s,1H),9.17(d,J＝8.2Hz,1H),9.09(s,1H),8.38(s,1H),8.36(d,J＝2.3Hz,1H),7.91(d,J＝8.7Hz,2H),7.78(d,J＝8.6Hz,1H),7.70(d,J＝8.7Hz,2H),7.49(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.28(dt,J＝15.2,7.5Hz,4H),7.23-7.16(m,1H),4.79-4.69(m,1H),3.25-3.13(m,2H)。
实施例25
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(120.0毫克，0.16毫摩尔)和哌啶(136.2毫克，1.6毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加N,N-二异丙基乙胺(206.8毫克，1.6毫摩尔)，滴毕，65摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到62毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：51.3％)。LCMS:RT＝4.11min,[M-H]-＝753.35。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(62.0毫克，0.08毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到28毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：50.1％)。LCMS:RT＝3.53min,[M+H]+＝699.22。
实施例26
合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基))-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧咪二氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(3-(4-(1H-咪唑-1-羧酰亚胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，将(S)-5-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(500.0毫克，0.78毫摩尔)和二(1H-咪唑基)甲亚胺(388.0毫克，2.4毫摩尔)加入到N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，90摄氏度反应5小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)。得到232毫克白色固体(S)-5-(3-(4-(1H-咪唑-1-羧酰亚胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：40.4％)。LCMS:RT＝3.61min,[M+H]+＝737.29。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧咪二胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，将(S)-5-(3-(4-(1H-咪唑-1-羧酰亚胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(120.0毫克，0.16毫摩尔)和4-氰基哌啶(53.8毫克，0.48毫摩尔)加入四氢呋喃(3.0毫升)中，65摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到54毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧咪二胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：43.3％)。LCMS:RT＝3.82min,[M-H]-＝777.27。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基))-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧咪二氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧咪二胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(54.0毫克，0.07毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到17毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基))-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧咪二氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：50.1％)。LCMS:RT＝3.53min,[M-H]-＝722.32。
实施例27
合成(S,Z)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(N',4-二氰基哌啶-1-羧咪二氨基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S,Z)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(((氰基氨基)(苯氧基)甲基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，将(S)-5-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(120.0毫克，0.19毫摩尔)和N-氰基羰亚胺二苯基酯(135.7毫克，0.57毫摩尔)加入到异丙醇(5.0毫升)中，60摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝2/1)。得到70毫克白色固体(S,Z)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(((氰基氨基)(苯氧基)甲基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：46.7％)。LCMS:RT＝4.11min,[M+H]+＝788.28。
步骤B：合成(S,Z)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(N',4-二氰基哌啶-1-羧咪二氨基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S,Z)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(((氰基氨基)(苯氧基)甲基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(70.0毫克，0.09毫摩尔)和4-氰基哌啶(19.8毫克，0.18毫摩尔)的乙腈(3.0毫升)中滴加三乙胺(9.2毫克，0.09毫摩尔)，滴毕，60摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到58毫克白色固体(S,Z)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(N',4-二氰基哌啶-1-羧咪二氨基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：80.1％)。LCMS:RT＝3.90min,[M+H]+＝804.28。
步骤C：合成(S,Z)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(N',4-二氰基哌啶-1-羧咪二氨基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S,Z)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(N',4-二氰基哌啶-1-羧咪二氨基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(58.0毫克，0.07毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到23毫克白色固体(S,Z)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(N',4-二氰基哌啶-1-羧咪二氨基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：44.0％)。LCMS:RT＝2.83min,[M+H]+＝748.19。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.95(s,1H),11.73(s,1H),10.72(s,1H),10.68(s,1H),10.07(s,1H),9.86(s,1H),9.83(s,1H),8.90(d,J＝8.4Hz,1H),7.96(d,J＝2.3Hz,1H),7.94(d,J＝1.6Hz,1H),7.78(d,J＝8.6Hz,1H),7.63(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.38(d,J＝9.3Hz,1H),7.36-7.29(m,2H),7.09(d,J＝8.3Hz,2H),7.06(d,J＝2.0Hz,1H),4.77-4.66(m,1H),3.82-3.55(m,4H),3.17(d,J＝7.9Hz,2H),2.11-1.83(m,5H)。
实施例28
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-苯基脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成异氰酸苯酯
冰浴下，向含有苯胺(50.0毫克，0.54毫摩尔)的乙酸乙酯(5.0毫升)中滴加三光气(240.37毫克，0.81毫摩尔)，滴毕，80摄氏度反应4小时。
反应结束，减压浓缩得到58毫克棕色油状物异氰酸苯酯，无需纯化，直接用于下一步反应。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-苯基脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
冰浴下，将异氰酸苯酯(32.0毫克，0.27毫摩尔)的四氢呋喃(1.0毫升)滴加入(S)-5-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(58.0毫克，0.09毫摩尔)和三乙胺(36.5毫克，0.36毫摩尔)的四氢呋喃(2.0毫升)中，室温反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝2/1)。得到47毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-苯基脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：68.5％)。LCMS:RT＝4.14min,[M+H]+＝763.27。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-苯基脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-苯基脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(47.0毫克，0.06毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到18毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-苯基脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：42.4％)。LCMS:RT＝3.72min,[M-H]-＝705.15。
实施例29
合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-氧吡咯烷-1-基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-(1-苄基哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮
室温下，将4-氨基-1-苄基哌啶(3.0克，15.8毫摩尔)、4-溴丁酸乙酯(3.1克，15.8毫摩尔)和碳酸钾(2.6克，19.0毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(20.0毫升)中，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，垫无水硫酸钠抽滤，滤饼用100.0毫升二氯甲烷洗涤，滤液用二氯甲烷(50毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝4/1)。得到1.9克类白色油状物1-(1-苄基哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮(收率：46.5％)。LCMS:RT＝0.93min,[M+H]+＝259.22。
步骤B：合成1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮
室温下，将1-(1-苄基哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮(200.0毫克，0.77毫摩尔)溶于甲醇(5.0毫升)中，加入钯碳(20.0毫克)，安装氢气球，室温反应10小时。
反应结束，过滤钯碳，滤饼用甲醇洗涤，滤液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)。得到100毫克棕色固体1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮(收率：77.2％)。LCMS:RT＝0.65min,[M+H]+＝169.13。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-氧吡咯烷-1-基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(120.0毫克，0.16毫摩尔)和1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮(80.7毫克，0.48毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加N,N-二异丙基乙胺(82.7毫克，0.64毫摩尔)，滴毕，65摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到95毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-氧吡咯烷-1-基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：70.8％)。LCMS:RT＝3.82min,[M-H]-＝836.27。
步骤D：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-氧吡咯烷-1-基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-氧吡咯烷-1-基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(95.0毫克，0.11毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到35毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-氧吡咯烷-1-基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：40.7％)。LCMS:RT＝3.36min,[M-H]-＝780.19。
实施例30
合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1,1-二氧化四氢-2H-硫代吡喃-4-基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1,1-二氧化四氢-2H-硫代吡喃-4-基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(120.0毫克，0.16毫摩尔)和4-氨基四氢-2H-噻喃-1,1-二氧化物盐酸盐(89.1毫克，0.48毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加N,N-二异丙基乙胺(124.1毫克，0.96毫摩尔)，滴毕，65摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到61毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1,1-二氧化四氢-2H-硫代吡喃-4-基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：46.5％)。LCMS:RT＝4.24min,[M-H]-＝817.24。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1,1-二氧化四氢-2H-硫代吡喃-4-基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1,1-二氧化四氢-2H-硫代吡喃-4-基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(61.0毫克，0.075毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到24毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1,1-二氧化四氢-2H-硫代吡喃-4-基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：41.9％)。LCMS:RT＝3.30min,[M-H]-＝761.07。
实施例31
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(120.0毫克，0.16毫摩尔)和4-甲磺酰基哌啶(78.4毫克，0.48毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加N,N-二异丙基乙胺(124.1毫克，0.96毫摩尔)，滴毕，65摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到81毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：60.8％)。LCMS:RT＝4.27min,[M-H]-＝831.27。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(81.0毫克，0.10毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到43毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：55.3％)。LCMS:RT＝3.38min,[M-H]-＝774.98。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.92(s,1H),11.73(s,1H),10.74(s,1H),10.05(s,1H),9.85(s,1H),8.78(d,J＝8.4Hz,1H),8.53(s,1H),8.00(d,J＝2.3Hz,1H),7.95(s,1H),7.78(d,J＝8.6Hz,1H),7.62(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.34(ddd,J＝10.7,10.2,5.4Hz,4H),7.14(d,J＝8.5Hz,2H),7.07(d,J＝1.5Hz,1H),4.73-4.63(m,1H),4.25(d,J＝13.3Hz,2H),3.08(d,J＝7.8Hz,2H),2.95(s,3H),2.83(t,J＝12.3Hz,2H),2.03(d,J＝11.2Hz,2H),1.62-1.44(m,2H)。
实施例32
合成5-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-羟基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-醇三氟乙酸盐
室温下，将N-叔丁氧羰基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-醇(100毫克，0.39毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应2小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸得到79毫克黄色油状物1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-醇三氟乙酸盐，无需纯化，直接用于下一步反应。LCMS:RT＝0.62min,[M-H]-＝158.13。
步骤B：合成5-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-羟基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(50.0毫克，0.065毫摩尔)和1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-醇三氟乙酸盐(66.3毫克，0.26毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加N,N-二异丙基乙胺(84.0毫克，0.65毫摩尔)，滴毕，65摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到46毫克白色固体5-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-羟基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：85.5％)。LCMS:RT＝4.23min,[M-H]-＝825.37。
步骤C：合成5-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-羟基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将5-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-羟基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(46.0毫克，0.056毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到18毫克白色固体5-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-羟基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：41.7％)。LCMS:RT＝3.32min,[M+H]+＝771.17。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.72(s,1H),10.73(s,1H),10.04(s,1H),9.84(s,1H),8.76(d,J＝8.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.99(d,J＝2.3Hz,1H),7.94(d,J＝1.1Hz,1H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.61(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.43-7.28(m,4H),7.11(d,J＝8.7Hz,2H),7.06(d,J＝1.6Hz,1H),4.71-4.63(m,1H),4.38-4.27(m,1H),3.81(dd,J＝9.1,4.7Hz,1H),3.62-3.50(m,2H),3.40-3.28(m,2H),3.07(d,J＝7.0Hz,2H),2.08-1.95(m,1H),1.87(dd,J＝13.2,6.7Hz,1H),1.78-1.56(m,3H),1.49(t,J＝5.8Hz,2H)。
实施例33
合成(S)-5-(3-(4-(4-氨基甲酰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
室温下，将1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸(1.0克，4.4毫摩尔)、甲磺酰胺(376.2毫克，4.0毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(2.3克，6.0毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(1.5克，11.8毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)。得到700毫克黄色固体4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：57.1％)。LCMS:RT＝3.36min,[M-H]-＝305.08。
步骤B：合成N-(甲基磺酰基)哌啶-4-羧酰胺三氟乙酸盐
室温下，将4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(700毫克，2.3毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸得到240毫克黄色油状物N-(甲基磺酰基)哌啶-4-羧酰胺三氟乙酸盐，无需纯化，直接用于下一步反应。LCMS:RT＝0.73min,[M-H]-＝205.04。
步骤C：合成(S)-5-(3-(4-(4-氨基甲酰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(120.0毫克，0.16毫摩尔)和N-(甲基磺酰基)哌啶-4-羧酰胺三氟乙酸盐(153.7毫克，0.48毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加N,N-二异丙基乙胺(124.1毫克，0.96毫摩尔)，滴毕，65摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到68毫克白色固体(S)-5-(3-(4-(4-氨基甲酰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：53.2％)。LCMS:RT＝4.16min,[M+H]+＝798.15。
步骤D：合成(S)-5-(3-(4-(4-氨基甲酰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(3-(4-(4-氨基甲酰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(68.0毫克，0.09毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到42毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：62.9％)。LCMS:RT＝3.26min,[M+H]+＝742.48。
实施例34
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
室温下，将1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸(2.0克，8.7毫摩尔)、甲磺酰胺(752.3毫克，7.9毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(4.5克，11.9毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(20.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(3.1克，23.7毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)。得到1.5克黄色固体4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：62.0％)。LCMS:RT＝3.36min,[M-H]-＝305.08。
步骤B：合成N-(甲基磺酰基)哌啶-4-羧酰胺三氟乙酸盐
室温下，将4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.5克，5.0毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸得到500毫克黄色油状物N-(甲基磺酰基)哌啶-4-羧酰胺三氟乙酸盐，无需纯化，直接用于下一步反应。LCMS:RT＝0.73min,[M-H]-＝205.04。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(120.0毫克，0.16毫摩尔)和N-(甲基磺酰基)哌啶-4-羧酰胺三氟乙酸盐(153.7毫克，0.48毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加N,N-二异丙基乙胺(124.1毫克，0.96毫摩尔)，滴毕，65摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到75毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：53.5％)。LCMS:RT＝3.68min,[M-H]-＝875.37。
步骤D：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(75.0毫克，0.09毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到48毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：65.6％)。LCMS:RT＝3.38min,[M-H]-＝818.18。
实施例35
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
室温下，将1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸(2.0克，8.7毫摩尔)、甲磺酰胺(861.1毫克，7.9毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(4.5克，11.9毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(20.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(3.1克，23.7毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)。得到1.4克黄色固体4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：62.4％)。LCMS:RT＝1.53min,[M-H]-＝283.12。
步骤B：合成(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)(哌啶-4-基)甲酮三氟乙酸盐
室温下，将4-((甲基磺酰基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.4克，4.9毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸得到475毫克黄色油状物(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)(哌啶-4-基)甲酮三氟乙酸盐，无需纯化，直接用于下一步反应。LCMS:RT＝0.67min,[M-H]-＝183.11。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(120.0毫克，0.16毫摩尔)和(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)(哌啶-4-基)甲酮三氟乙酸盐(135.4毫克，0.48毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加N,N-二异丙基乙胺(124.1毫克，0.96毫摩尔)，滴毕，65摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝4/1)。得到57毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：41.7％)。LCMS:RT＝3.67min,[M-H]-＝854.31。
步骤D：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(57.0毫克，0.07毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到32毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：57.3％)。LCMS:RT＝3.19min,[M+H]+＝798.20。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.85(s,1H),11.73(s,1H),10.74(s,1H),10.05(s,1H),9.84(s,1H),8.78(d,J＝8.4Hz,1H),8.42(s,1H),7.99(d,J＝2.4Hz,1H),7.95(d,J＝1.7Hz,1H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.62(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.48-7.27(m,4H),7.12(d,J＝8.7Hz,2H),7.06(d,J＝2.7Hz,1H),4.72-4.63(m,1H),4.53-4.41(m,2H),4.41-4.32(m,2H),4.14-3.98(m,4H),3.90(dd,J＝9.2,4.3Hz,1H),3.56(dd,J＝10.2,4.1Hz,1H),3.08(d,J＝5.5Hz,2H),1.61(d,J＝13.6Hz,2H),1.50-1.35(m,2H)。
实施例36
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(3-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-3-(3-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸
将(S)-2-氨基-3-(3-溴苯基)丙酸(2.0克，8.20毫摩尔)，二碳酸二叔丁酯(1.97克，9.02毫摩尔)和氢氧化钠(656毫克，16.40毫摩尔)溶解于四氢呋喃(20毫升)和水(10毫升)的混合溶剂中，室温搅拌过夜。
用1M盐酸将反应液淬灭，调节pH至3左右，用乙酸乙酯(200毫升)将反应液稀释，分别用水(30毫升×2次)和饱和食盐水(30毫升)洗，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品(S)-3-(3-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸直接用于下一步反应。MS(ESI)M/Z：342.04[M-H]-。
步骤B：合成(S)-4-(3-(3-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基苯甲酸叔丁酯
将S)-3-(3-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸粗品和对氨基苯甲酸叔丁酯(1.90克，9.84毫摩尔)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(4.68克，12.30毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(4.07毫升，24.60毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(200毫升)稀释，分别用水(30毫升×2次)和饱和食盐水(30毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5/1)。得到3.65克白色固体(S)-4-(3-(3-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基苯甲酸叔丁酯(收率：两步85.7％)。MS(ESI)M/Z：519.14[M+H]+。
步骤C：合成(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(3-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基苯甲酸叔丁酯(604毫克，1.17毫摩尔)，4-甲基哌嗪-2-酮(266毫克，2.33毫摩尔)，碘化亚铜(222毫克，1.00毫摩尔)，碳酸铯(760毫克，2.33毫摩尔)和N,N-二甲基乙二胺(206毫克，233毫摩尔)溶解于1,4-二氧六环(6毫升)，氮气保护，120摄氏度条件下搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(200毫升)稀释，分别用水(30毫升×2次)和饱和食盐水(30毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到479毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：74.4％)。MS(ESI)M/Z：553.30[M+H]+。
步骤D：合成(S)-4-(2-氨基-3-(3-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基叔丁基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(3-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(205毫克，0.37毫摩尔)溶解于乙酸乙酯(2.24毫升)，室温条件下缓慢滴加2.0M盐酸乙酸乙酯溶液(557微升)，室温条件下搅拌反应2小时。
反应液用胺甲醇溶液淬灭至碱性，所得混合溶液将溶剂旋干后用制备硅胶板分离(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到100毫克(S)-4-(2-氨基-3-(3-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基叔丁基)苯甲酸叔丁酯(收率：59.6％)。MS(ESI)M/Z：453.30[M+H]+。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(3-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-氨基-3-(3-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基叔丁基)苯甲酸叔丁酯(100毫克，0.22毫摩尔)，2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(54毫克，0.20毫摩尔)，1-丙基磷酸酐(210毫克，0.66毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(110微升，0.66毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到50毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(3-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：35.2％)。MS(ESI)M/Z：702.30[M+H]+。
步骤F：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(3-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(3-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(50毫克，0.071毫摩尔)和三乙基硅烷(21毫克，0.178毫摩尔)溶解于二氯甲烷(1.0毫升)，室温条件下缓慢滴加三氟乙酸(0.2毫升)，室温条件反应3小时。
将反应液用旋转蒸发仪浓缩，粗品用制备硅胶板分离(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到20毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(3-(4-甲基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：21.7％)。MS(ESI)M/Z：646.20[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.77-10.58(m,2H),9.85(s,1H),9.01(s,1H),7.99(s,1H),7.90(d,J＝8.7Hz,2H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.72(s,2H),7.62(s,1H),7.31(t,J＝7.6Hz,1H),7.24(d,J＝14.1Hz,2H),7.16(d,J＝7.9Hz,1H),5.77(s,1H),4.74(s,2H),3.53(dd,J＝14.0,5.6Hz,3H),3.19-3.14(m,2H),3.08(s,2H),2.73-2.62(m,2H),2.27(s,3H)。
实施例37
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-氯-2-硝基-1-(2,2,2-三氟乙氧基)苯
将4-氯-1-氟-2-硝基苯(2.10克，12.0毫摩尔)，2,2,2-三氟乙醇(1.44克，14.4毫摩尔)和碳酸铯(7.82克，24.0毫摩尔)溶解于四氢呋喃(20毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用水(10毫升)淬灭，将四氢呋喃用旋蒸拉干，剩余水溶液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品直接用于下一步反应。
步骤B：合成4-氯-2-氨基-1-(2,2,2-三氟乙氧基)苯
将4-氯-2-硝基-1-(2,2,2-三氟乙氧基)苯粗品，二氯化锡二水合物(10.8克，48.0毫摩尔)溶解于乙酸乙酯(20毫升)，室温条件下搅拌反应过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品直接用于下一步反应。
步骤C：合成2-((5-氯-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸
将4-氯-2-氨基-1-(2,2,2-三氟乙氧基)苯粗品，草酰氯单甲酯(883微升，9.6毫摩尔)，吡啶(968微升，12.0毫摩尔)溶解于二氯甲烷(25毫升)，室温搅拌反应5小时。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品和氢氧化锂(1.0克，24.0毫摩尔)溶解于四氢呋喃(30毫升)/水(10毫升)混合溶液，室温反应5小时。
将反应液中四氢呋喃拉干，用乙酸乙酯洗(5毫升×2次)。用1M稀盐酸将pH调节至2左右，用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝15/1)。得到150毫克白色固体2-((5-氯-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(收率：三步4.2％)。MS(ESI)M/Z：296.00[M-H]-。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(71毫克，0.24毫摩尔)，(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(82毫克，0.24毫摩尔)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(182毫克，0.48毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(167微升，0.96毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(1.5毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝10/1)。得到80毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：54.1％)。MS(ESI)M/Z：620.20[M+H]+。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(80毫克，0.13毫摩尔)和三氟乙酸(0.5毫升)溶解于二氯甲烷(2.5毫升)，室温搅拌2小时。
将反应液用旋转蒸发仪浓缩，待用油泵进一步抽干后用甲醇溶解，然后向溶液体系中滴加正己烷，有大量固体析出，室温继续搅拌1小时，过滤得30毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：41.2％)。LCMS：RT＝4.0min，[M-H]-＝562.10。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.77(s,1H),10.47(s,1H),9.77(s,1H),9.27(d,J＝8.3Hz,1H),8.19(d,J＝2.0Hz,1H),7.98-7.86(m,2H),7.72(d,J＝8.8Hz,2H),7.40-7.25(m,6H),7.20(t,J＝7.1Hz,1H),4.91(q,J＝9.0Hz,2H),4.78(td,J＝8.8,6.0Hz,1H),3.25-3.18(m,2H)。
实施例38
合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(106毫克，0.139毫摩尔)，4-氰基-哌啶盐酸盐(41毫克，0.277毫摩尔)和三乙胺(58微升，0.416毫摩尔)溶解于四氢呋喃(2毫升)，60摄氏度条件下搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1/1)。得到60毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：55.4％)。LCMS：RT＝3.83min，[M-H]-＝778.29。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(60毫克，0.077毫摩尔)溶解于二氯甲烷(5毫升)，室温条件下缓慢滴加入三氟乙酸(1毫升)，继续搅拌反应3小时。
将反应液用旋转蒸发仪浓缩，粗品用制备硅胶板分离纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1/5)。得到20毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：35.9％)。LCMS：RT＝3.35min，[M-H]-＝722.26。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.92(s,1H),11.71(s,1H),10.72(s,1H),9.98(d,J＝39.4Hz,1H),9.83(s,1H),8.75(d,J＝8.4Hz,1H),8.47(s,1H),8.03-7.90(m,1H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.61(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),7.42-7.26(m,3H),7.12(d,J＝8.5Hz,1H),7.05(d,J＝1.5Hz,1H),4.67(dd,J＝14.2,7.9Hz,1H),3.68(dd,J＝9.8,6.2Hz,2H),3.25(dd,J＝11.6,7.8Hz,2H),3.07(d,J＝4.7Hz,2H),2.57-2.53(m,1H),2.00(dd,J＝14.7,7.0Hz,1H),1.86(d,J＝6.5Hz,1H),1.66(dt,J＝13.4,7.1Hz,1H)。
实施例39
合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-吗啉基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-吗啉基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(60毫克，0.079毫摩尔)，4-哌啶基-吗啉盐酸盐(66毫克，0.316毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(69微升，0.395毫摩尔)溶解于四氢呋喃(1.5毫升)，65摄氏度条件下搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-吗啉基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯直接用于下一步反应。LCMS：RT＝3.67min，[M+H]+＝840.39。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-吗啉基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将粗品(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-吗啉基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯溶解于二氯甲烷(5毫升)，室温条件下缓慢滴加入三氟乙酸(1毫升)，继续搅拌反应3小时。
将反应液用旋转蒸发仪浓缩，粗品用制备高效液相分离。得到9毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-吗啉基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：两步14.6％)。LCMS：RT＝3.01min，[M+H]+＝784.33。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.93(s,1H),11.73(s,1H),10.74(s,1H),10.04(s,1H),9.84(s,1H),9.59(s,1H),8.74(d,J＝8.2Hz,1H),8.58(s,1H),7.98(d,J＝2.3Hz,1H),7.93(s,1H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.62(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),7.39-7.27(m,3H),7.12(d,J＝8.5Hz,2H),7.05(d,J＝1.7Hz,1H),4.67(dd,J＝14.2,7.6Hz,1H),4.25(d,J＝13.2Hz,2H),4.01(d,J＝12.6Hz,2H),3.64(t,J＝11.9Hz,2H),3.08(d,J＝5.1Hz,3H),2.77(t,J＝12.6Hz,2H),2.07(d,J＝10.2Hz,2H),2.00(dd,J＝14.5,6.8Hz,2H),1.55-1.40(m,2H)。
实施例40
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-乙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
步骤A：合成4-乙基-哌啶-2-酮
将3-氧杂哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.02克，5.1毫摩尔)溶解于二氯甲烷(10毫升)，室温条件下缓慢加入三氟乙酸(4毫升)，继续搅拌反应1.5小时。将反应液浓缩干，所得粗品与碘乙烷(800毫克，5.1毫摩尔)和碳酸钾(1.76克，12.75毫摩尔)溶解于乙腈(10毫升)，氮气保护，50摄氏度条件下搅拌反应4小时。
将反应液用乙酸乙酯(200毫升)稀释，分别用水(10毫升×2次)和饱和食盐水(10毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到390毫克白色固体4-乙基-哌啶-2-酮(收率：两步59.7％)。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-乙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(965毫克，1.86毫摩尔)，4-乙基-哌啶-2-酮(477毫克，3.73毫摩尔)，碘化亚铜(355毫克，1.86毫摩尔)，N,N-二甲基乙二胺(366微升，3.73毫摩尔)和碳酸铯(1.22克，3.73毫摩尔)溶解于甲苯(8毫升)，氮气保护，110摄氏度条件下搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(150毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到556毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-乙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：52.8％)。LCMS：RT＝3.16min，[M+H]+＝567.28。
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-乙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-乙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(556毫克，0.98毫摩尔)溶解于乙酸乙酯(8毫升)，室温条件下滴加入2M盐酸乙酸乙酯溶液(2.0毫升)。室温条件下搅拌反应2小时。
将反应液过滤得到425毫克白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-乙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：62.9％)。LCMS：RT＝3.14min，[M+H]+＝467.22。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-乙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(175毫克，0.65毫摩尔)，(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-乙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(270毫克，0.50毫摩尔)，1-丙基磷酸酐(286毫克，0.75毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(349微升，2.0毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到90毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-乙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：25.1％)。LCMS：RT＝3.21min，[M+H]+＝716.17。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-乙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-乙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(90毫克，0.13毫摩尔)溶解于二氯甲烷(5毫升)，室温条件下缓慢滴加入三氟乙酸(1毫升)，继续搅拌反应2小时。
将反应液用旋转蒸发仪浓缩，粗品用制备高效液相分离。得到30毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-乙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：36.2％)。LCMS：RT＝2.80min，[M+H]+＝660.19。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.89-12.67(m,1H),10.74(s,1H),10.50(s,1H),9.83(s,1H),9.06(d,J＝8.2Hz,1H),7.97(d,J＝2.3Hz,1H),7.93(d,J＝8.7Hz,2H),7.78(d,J＝8.6Hz,1H),7.70(d,J＝8.8Hz,2H),7.63(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.36(d,J＝8.5Hz,2H),7.29(d,J＝8.5Hz,2H),5.77(s,1H),4.74(dd,J＝14.3,8.2Hz,1H),4.00-3.80(m,2H),3.40-3.15(m,4H),1.30-1.22(m,3H)。
实施例41
合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
步骤A：合成4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.0克，15.0毫摩尔)，和钠氢(2.4克，60.0毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(20毫升),0摄氏度搅拌30分钟。将2-溴-N,N-二甲基乙-1-胺氢溴酸盐(4.2克，17.9毫摩尔)加入，室温条件下搅拌反应5小时。
将反应液用水冰淬灭，用乙酸乙酯(300毫升)稀释，分别用水(50毫升×2次)和饱和食盐水(50毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到778毫克白色固体4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：19.2％)。
步骤B：合成N,N-二甲基-2-(哌啶-4-基氧基)乙-1-胺
将4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(778毫克，2.86毫摩尔)和三氟乙酸(4毫升)溶解于二氯甲烷(10毫升)，室温条件下搅拌反应3小时，所得N,N-二甲基-2-(哌啶-4-基氧基)乙-1-胺二三氟乙酸盐粗品直接用于下一步反应。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(128毫克，0.168毫摩尔)，N,N-二甲基-2-(哌啶-4-基氧基)乙-1-胺二三氟乙酸盐(201毫克，0.503毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(234微升，0.395毫摩尔)溶解于四氢呋喃(3.0毫升)，60摄氏度条件下搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(10毫升×2次)和饱和食盐水(10毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯直接用于下一步反应。LCMS：RT＝3.17min，[M-H]-＝840.32。
步骤D：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将粗品(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯溶解于三氟乙酸(1毫升)和二氯甲烷(5毫升)混合溶剂，室温条件下搅拌反应2小时。
将反应液用旋转蒸发仪浓缩，粗品用制备高效液相分离。得到19毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：两步14.4％)。LCMS：RT＝2.85min，[M+H]+＝786.22。
实施例42
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
步骤A：合成(S)-2-(((叔丁氧羰基)氨基)叔丁基-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸酯
将(S)-3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸叔丁酯(1.06克，2.65毫摩尔)，4-异丙基哌嗪-2-酮(753毫克，5.30毫摩尔)，碘化亚铜(505毫克，2.65毫摩尔)，N,N-二甲基乙二胺(519微升，5.30毫摩尔)和碳酸铯(1.73克，5.30毫摩尔)溶解于甲苯(10毫升)，氮气保护，110摄氏度条件下搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(150毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到780毫克白色固体(S)-2-(((叔丁氧羰基)氨基)叔丁基-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸酯(收率：63.8％)。LCMS：RT＝2.98min，[M+Na]+＝484.24。
步骤B：合成(S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)叔丁基-3-(4-(4-异丙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酸酯
将(S)-2-(((叔丁氧羰基)氨基)叔丁基-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸酯(680毫克，1.47毫摩尔)溶解于三氟乙酸(1.4毫升)和二氯甲烷(7.0毫升)的混合溶剂，室温搅拌3小时。浓缩所得粗品与氯甲酸-9-芴基甲酯(419毫克，1.62毫摩尔)和碳酸钠(624毫克，5.88毫摩尔)溶解于四氢呋喃(6毫升)和水(6毫升)的混合溶剂，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(150毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品(S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)叔丁基-3-(4-(4-异丙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酸酯直接用于下一步反应。LCMS：RT＝3.31min，[M+H]+＝584.25。
步骤C：合成(S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸
将(S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)叔丁基-3-(4-(4-异丙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酸酯粗品溶解于三氟乙酸(3毫升)和二氯甲烷(6毫升)的混合溶剂，室温搅拌反应3小时。浓缩得(S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸粗品直接用于下一步反应。
步骤D：合成(S)-5-(2-氨基-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基叔丁基)-1H-吲哚-2-羧酸酯
将(S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酸粗品(1.47毫摩尔)，5-氨基-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(488毫克，1.47毫摩尔)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(839毫克，2.21毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(770微升，4.42毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品与4-甲基哌啶(1.5毫升)溶解于二氯甲烷(6.0毫升)，室温搅拌5小时。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到610毫克白色固体(S)-5-(2-氨基-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基叔丁基)-1H-吲哚-2-羧酸酯(收率：四步80.0％)。LCMS：RT＝2.83min，[M+H]+＝520.20。
步骤E：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(264毫克，0.99毫摩尔)，(S)-5-(2-氨基-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基叔丁基)-1H-吲哚-2-羧酸酯(610毫克，0.99毫摩尔)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(565毫克，1.49毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(519微升，2.98毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(4毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到100毫克(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：13.2)。LCMS：RT＝3.54min，[M+H]+＝769.29。
步骤F：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(100毫克，0.13毫摩尔)溶解于三氟乙酸(1毫升)和二氯甲烷(5毫升)混合溶剂，室温搅拌1.5小时。
将反应液用旋转蒸发仪浓缩，粗品用制备高效液相分离。得到20毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：21.6％)。LCMS：RT＝2.82min，[M+H]+＝713.39。
实施例43
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-羟乙基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
步骤A：合成4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌嗪-2-酮
将哌嗪-2-酮三氟乙酸盐(4.0克，18.7毫摩尔)，(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(5.4克，22.4毫摩尔)和碳酸钾(6.5克，46.8毫摩尔)溶解于乙腈(20毫升)，80摄氏度条件下搅拌过夜。
将反应液过滤，浓缩后用用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到1.72克白色固体4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌嗪-2-酮(收率：35.7％)。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(982毫克，1.89毫摩尔)，4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)哌嗪-2-酮(979毫克，3.79毫摩尔)，碘化亚铜(360毫克，1.89毫摩尔)，N,N-二甲基乙二胺(372微升，3.79毫摩尔)和碳酸铯(1.24克，3.79毫摩尔)溶解于甲苯(8毫升)，氮气保护，110摄氏度条件下搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(150毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝15/1)。得到1.0克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-乙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：75.7％)。LCMS：RT＝4.36min，[M+H]+＝697.39。
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(2-羟乙基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-乙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(1.0克，1.44毫摩尔)溶解于乙酸乙酯(8.8毫升)，室温条件下滴加入2M盐酸乙酸乙酯溶液，继续搅拌1小时。
过滤得476毫克白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(2-羟乙基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：55.6％)。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-羟乙基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(230毫克，0.86毫摩尔)，(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(2-羟乙基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(476毫克，0.86毫摩尔)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(490毫克，1.29毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(600微升，3.44毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到387毫克白色固体(S)-4-(3-(4-(4-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：61.6％)。LCMS：RT＝3.23min，[M+H]+＝732.24。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-羟乙基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(3-(4-(4-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(387毫克，0.53毫摩尔)溶解于三氟乙酸(1毫升)和二氯甲烷(5毫升)混合溶剂，室温搅拌2小时。
将反应液用旋转蒸发仪浓缩，粗品用制备高效液相分离。得到40毫克白色固体(S)-4-(3-(4-(4-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：11.2％)。LCMS：RT＝2.81min，[M-H]-＝674.13。
实施例44
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代咪唑烷-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
步骤A：合成(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(2-氧代咪唑啉-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(320毫克，0.62毫摩尔)，咪唑啉-2-酮(107毫克，1.24毫摩尔)，碘化亚铜(119毫克，0.62毫摩尔)，N,N-二甲基乙二胺(122微升，1.24毫摩尔)和碳酸铯(404毫克，1.24毫摩尔)溶解于甲苯(3毫升)，氮气保护，110摄氏度条件下搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(150毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝15/1)。得到75毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(2-氧代咪唑啉-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：23.2％)。LCMS：RT＝4.12min，[M+Na]+＝547.21。
步骤B：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(2-氧代咪唑啉-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(2-氧代咪唑啉-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(600毫克，1.15毫摩尔)溶解于乙酸乙酯(6.9毫升)，室温下滴加入2M盐酸乙酸乙酯溶液(1.7毫升)，继续搅拌4小时。
将反应液过滤得380毫克白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(2-氧代咪唑啉-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：78.3％)。LCMS：RT＝2.82min，[M+Na]+＝447.22。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代咪唑烷-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(221毫克，0.825毫摩尔)，(S)-4-(2-氨基-3-(4-(2-氧代咪唑啉-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(380毫克，0.825毫摩尔)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(471毫克，1.238毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(431微升，2.475毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(3毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到132毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代咪唑烷-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：23.7％)。LCMS：RT＝4.03min，[M+H]+＝674.21。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代咪唑烷-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代咪唑烷-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(132毫克，0.20毫摩尔)溶解于三氟乙酸(1毫升)和二氯甲烷(5毫升)的混合溶剂，室温搅拌1.5小时。
将反应液用旋转蒸发仪浓缩，粗品用制备高效液相分离。得到20毫克(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(2-氧代咪唑烷-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：16.6％)。LCMS：RT＝3.45min，[M-H]-＝616.08。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.75(s,1H),10.72(s,1H),10.49(s,1H),9.82(d,J＝1.7Hz,1H),8.92(d,J＝8.2Hz,1H),7.97(d,J＝2.3Hz,1H),7.95-7.89(m,2H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.74-7.68(m,2H),7.62(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.47(d,J＝8.8Hz,1H),7.20(d,J＝8.7Hz,1H),6.90(s,1H),5.76(s,1H),4.69(dd,J＝14.6,8.1Hz,1H),3.82(dd,J＝10.9,7.6Hz,2H),3.39(t,J＝8.2Hz,2H),3.10(d,J＝6.7Hz,2H)。
实施例45
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(环丙基甲基)-2-氧代咪唑啉-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸
步骤A：合成1-(环丙基甲基)咪唑啉-2-酮
将咪唑啉-2-酮(1.02克，11.86毫摩尔)，(溴甲基)环丙烷(1.21毫升，12.45毫摩尔)和钠氢(522毫克，13.05毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)，氮气保护，35摄氏度条件下搅拌反应过夜。
将反应液用乙酸乙酯(200毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝10/1)。得到400毫克油状物1-(环丙基甲基)咪唑啉-2-酮(收率：24.1％)。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(3-(环丙基甲基)-2-氧代咪唑啉-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(847毫克，1.63毫摩尔)，1-(环丙基甲基)咪唑啉-2-酮(400毫克，2.86毫摩尔)，碘化亚铜(311毫克，1.63毫摩尔)，N,N-二甲基乙二胺(320微升，3.27毫摩尔)和碳酸铯(1.07克，3.27毫摩尔)溶解于甲苯(8毫升)，氮气保护，110摄氏度条件下搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(300毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝2/1)。得到600毫克白色固体(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(3-(环丙基甲基)-2-氧代咪唑啉-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：63.6％)。LCMS：RT＝2.69min，[M+H]+＝579.46。
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(3-(环丙基甲基)-2-氧代咪唑啉-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(3-(环丙基甲基)-2-氧代咪唑啉-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(600毫克，1.04毫摩尔)溶解于乙酸乙酯(10毫升)，室温下滴加入2M盐酸乙酸乙酯溶液(2.5毫升)，继续搅拌反应3小时。
过滤得到510毫克白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(3-(环丙基甲基)-2-氧代咪唑啉-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：100％)。LCMS：RT＝3.09min，[M+Na]+＝501.19。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(环丙基甲基)-2-氧代咪唑啉-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(268毫克，1.0毫摩尔)，(S)-4-(2-氨基-3-(4-(3-(环丙基甲基)-2-氧代咪唑啉-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(510毫克，1.0毫摩尔)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(570毫克，1.5毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(523微升，3.0毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1/1)。得到410毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(环丙基甲基)-2-氧代咪唑啉-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：56.3％)。LCMS：RT＝4.37min，[M-H]-＝725.99。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(环丙基甲基)-2-氧代咪唑啉-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(环丙基甲基)-2-氧代咪唑啉-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(410毫克)溶解于三氟乙酸(1.5毫升)和二氯甲烷(7.5毫升)的混合溶剂，室温搅拌1.5小时。
将反应液用旋转蒸发仪浓缩，粗品用制备高效液相分离。得到50毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(环丙基甲基)-2-氧代咪唑啉-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：13.2％)。LCMS：RT＝3.85min，[M+Na]+＝694.14。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.72(s,1H),10.48(s,1H),9.82(s,1H),8.93(d,J＝8.4Hz,1H),7.97(d,J＝2.3Hz,1H),7.92(d,J＝8.8Hz,2H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.70(d,J＝8.8Hz,2H),7.62(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.48(d,J＝8.7Hz,2H),7.21(d,J＝8.7Hz,2H),4.69(dd,J＝14.5,7.9Hz,1H),3.79(dd,J＝11.3,7.6Hz,2H),3.53(t,J＝8.0Hz,2H),3.10(d,J＝7.5Hz,2H),3.04(d,J＝7.0Hz,2H),0.97-0.87(m,1H),0.52-0.44(m,2H),0.23-0.17(m,2H)。
实施例46
合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]噻吩-2-羧酸
步骤A：合成(S)-5-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]噻吩-2-羧酸叔丁酯
将(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-L-苯丙氨酸(280毫克，0.72毫摩尔)，5-氨基苯并[b]噻吩-2-羧酸叔丁酯(150毫克，0.60毫摩尔)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(342毫克，0.90毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(210微升，1.20毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(3毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品溶解于4-甲基哌啶(1毫升)和二氯甲烷(4毫升)混合溶剂，室温搅拌反应3小时。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1/2)。得到650毫克白色固体(S)-5-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]噻吩-2-羧酸叔丁酯(收率：两步100％)。LCMS：RT＝3.14min，[M+H]+＝397.16。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]噻吩-2-羧酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(277毫克，1.03毫摩尔)，(S)-5-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]噻吩-2-羧酸叔丁酯(450毫克，1.14毫摩尔)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(590毫克，1.55毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(397微升，2.28毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1/1)。得到340毫克(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]噻吩-2-羧酸叔丁酯(收率：50.9％)。LCMS：RT＝4.54min，[M+H]+＝646.10。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]噻吩-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]噻吩-2-羧酸叔丁酯(340毫克，0.53毫摩尔)溶解于三氟乙酸(1.5毫升)和二氯甲烷(7.5毫升)的混合溶剂，室温搅拌3小时。
将反应液用旋转蒸发仪浓缩，粗品用制备高效液相分离。得到50毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]噻吩-2-羧酸(收率：16.1％)。LCMS：RT＝4.54min，[M+H]+＝589.96。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.61-13.31(m,1H),10.72(s,1H),10.36(s,1H),9.82(s,1H),8.95(d,J＝8.3Hz,1H),8.31(d,J＝2.0Hz,1H),8.11(d,J＝0.5Hz,1H),7.99(d,J＝8.8Hz,1H),7.97(d,J＝2.3Hz,1H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.61(ddd,J＝8.7,6.2,2.2Hz,2H),7.33-7.24(m,4H),7.24-7.18(m,1H),4.73(dd,J＝14.5,8.0Hz,1H),3.17(d,J＝7.7Hz,2H)。
实施例47
合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]呋喃-2-羧酸
步骤A：合成(S)-5-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]呋喃-2-羧酸叔丁酯
将(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-L-苯丙氨酸(439毫克，1.133毫摩尔)，5-氨基苯并[b]噻吩-2-羧酸叔丁酯(220毫克，0.944毫摩尔)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(539毫克，1.416毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(329微升，1.888毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品溶解于4-甲基哌啶(1毫升)和二氯甲烷(4毫升)混合溶剂，室温搅拌反应3小时。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1/2)。得到650毫克白色固体(S)-5-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]呋喃-2-羧酸叔丁酯(收率：两步100％)。LCMS：RT＝3.01min，[M-H]-＝379.23。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]呋喃-2-羧酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(353毫克，1.31毫摩尔)，(S)-5-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]呋喃-2-羧酸叔丁酯(650毫克，1.71毫摩尔)，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(742毫克，1.95毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(457微升，2.62毫摩尔)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)，室温搅拌过夜。
将反应液用乙酸乙酯(100毫升)稀释，分别用水(20毫升×2次)和饱和食盐水(20毫升)，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩，所得粗品用硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1/1)。得到100毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]呋喃-2-羧酸叔丁酯(收率：12.1％)。LCMS：RT＝4.35min，[M+H]+＝630.10。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]呋喃-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]呋喃-2-羧酸叔丁酯(100毫克，0.16毫摩尔)溶解于三氟乙酸(1毫升)和二氯甲烷(5毫升)的混合溶剂，室温搅拌3小时。
将反应液用旋转蒸发仪浓缩，粗品用制备高效液相分离。得到20毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯并[b]呋喃-2-羧酸(收率：22.0％)。LCMS：RT＝3.97min，[M+Na]+＝596.04。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.56(s,1H),10.72(s,1H),10.30(s,1H),9.82(s,1H),8.92(d,J＝8.3Hz,1H),8.12(d,J＝2.0Hz,1H),7.97(d,J＝2.3Hz,1H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.71-7.65(m,2H),7.62(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.53(dd,J＝9.0,2.1Hz,1H),7.29(dd,J＝7.9,5.5Hz,3H),7.24-7.19(m,1H),4.72(dd,J＝14.5,7.9Hz,1H),3.17(d,J＝7.3Hz,2H)。
实施例48
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-氯-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯胺
将2-溴-5-氯苯胺(4.10克,20.0毫摩尔),4,4,4'，4'，5,5,5'，5'-八甲基-2,2'-(1,3,2-二氧杂硼烷)(9.2克,36.2毫摩尔)和醋酸钾(3.9克,39.8毫摩尔)溶于二甲基亚砜(30.0毫升)中。氮气保护后,加[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(59毫克,0.07毫摩尔),置换氮气,加热升温到80℃并恒温搅拌2.5小时后,LCMS监测至反应完全,将反应液冷却至室温。
将反应液缓慢滴加到水(150.0毫升)中,混合液用乙酸乙酯(60毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚＝1/20)得到5.0克黄色固体5-氯-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯胺(收率：98.4％)。LCMS：RT＝4.38min,[M+H]+＝254.15。
步骤B：合成5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯胺
将5-氯-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯胺(1.0克,4.1毫摩尔)和2-溴-1H-咪唑(882.0毫克,6.1毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(12.0毫升)中，然后将碳酸铯(2.7克,8.0毫摩尔)溶于水(3.0毫升)加入反应液中,氮气保护后,四三苯基膦钯(462.0毫克,0.4毫摩尔),在70℃下搅拌过夜,LCMS监测至反应完全。
反应液冷却至室温,垫硅藻土过滤,滤饼用乙酸乙酯(10毫升×3次)洗涤,合并滤液及洗涤液,有机相经水和饱和食盐水各洗一次,减压浓缩，残渣经硅胶柱层析纯化得到250毫克黄色固体5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯胺(收率：32.0％)。LCMS：RT＝2.84min,[M+H]+＝213.12。
步骤C：合成2-((5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
氮气保护下,将5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯胺(580毫克,3.0毫摩尔)和吡啶(0.6毫升,9.0毫摩尔)溶于二氯甲烷(3.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中缓慢滴加草酰氯单甲酯(442毫克,3.5毫摩尔)的二氯甲烷溶液(3.0毫升),冰水浴中搅拌1小时。
向反应液中加水(10.0毫升)淬灭反应,用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到660毫克黄色固体2-((5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(收率：78.0％)。
步骤D：合成2-((5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸
将2-((5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(660.0毫克,2.4毫摩尔)溶于四氢呋喃(18.0毫升)和水(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入氢氧化锂一水合物(99毫克,2.37毫摩尔)。在室温下搅拌1小时。
加稀盐酸调节pH至弱酸性,减压浓缩除去大部分溶剂,加稀盐酸调节pH至3,析出大量白色固体,过滤,收集滤饼得到400毫克黄色固体2-((5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(收率：63％)。LCMS：RT＝0.98min,[M+H]+＝266.08。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(230毫克,0.98毫摩尔),2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(494毫克,1.3毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(0.2毫升,1.3毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(220毫克,0.65毫摩尔),在室温下搅拌2小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到110毫克黄色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：31.0％)。LCMS：RT＝4.42min,[M+H]+＝588.21。
步骤F：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(110毫克,0.11毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到7.7毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-咪唑-2-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：8.0％)。LCMS：RT＝3.66min,[M+H]+＝530.20。
实施例49
合成(S)-4-(2-(2-(((3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-氯-3-氟-2-硝基苯胺
将3-氟-2-硝基苯胺(9.0克,57.7毫摩尔),和N-氯代丁二酰亚胺(15.6克,69.2毫摩尔)溶于乙腈(150.0毫升)中。氮气保护后,加热升温到50℃并恒温搅拌2.5小时后,LCMS监测至反应完全,将反应液冷却至室温。
将反应液缓慢滴加到水(150.0毫升)中,混合液用乙酸乙酯(60毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到6.8克红棕色固体4-氯-3-氟-2-硝基苯胺(收率：62.3％)。LCMS：RT＝3.66min。
步骤B：合成2-(4-氯-3-氟-2-硝基苯基)异吲哚啉-1,3-二酮
将4-氯-3-氟-2-硝基苯胺(1.1克,6.0毫摩尔)和异苯并呋喃-1,3-二酮(1.8克,12.1毫摩尔)溶于冰醋酸(20.0毫升)中，氮气保护后,在130℃下搅拌8小时,LCMS监测至反应完全。
反应液缓慢滴加到冰水中,析出大量固体,过滤,滤饼用水(10毫升×3次)洗涤,滤饼用乙酸乙酯(10毫升)溶解，滴加到正己烷(150毫升),析出大量固体,过滤,滤饼用正己烷(10毫升×3次)洗涤,收集滤饼得到1.4克灰色固体2-(4-氯-3-氟-2-硝基苯基)异吲哚啉-1,3-二酮(收率：32.0％)。LCMS：RT＝4.08min。
步骤C：合成2-(2-氨基-4-氯-3-氟苯基)异吲哚啉-1,3-二酮
将2-(4-氯-3-氟-2-硝基苯基)异吲哚啉-1,3-二酮(740毫克,2.3毫摩尔)溶于甲醇(30.0毫升)和冰醋酸(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入还原性铁粉(1.3克,23.0毫摩尔),在65℃下搅拌2小时。
反应液冷却至室温。加碳酸氢钠中合,混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到205毫克黄色固体2-(2-氨基-4-氯-3-氟苯基)异吲哚啉-1,3-二酮(收率54.0％)。LCMS：RT＝3.83min,[M+H]+＝291.08。
步骤D：合成2-(4-氯-2-(二烯丙基氨基)-3-氟苯基)异吲哚啉-1,3-二酮
将2-(2-氨基-4-氯-3-氟苯基)异吲哚啉-1,3-二酮(1.4克,8.4毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(6.5毫升,42.0毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入3-溴丙-1-烯(3.2毫升,33.6毫摩尔)。在90℃下搅拌10小时。
向反应液中加水(30.0毫升)淬灭反应,用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到1.4克黄色油状物2-(4-氯-2-(二烯丙基氨基)-3-氟苯基)异吲哚啉-1,3-二酮(收率：86％)。LCMS：RT＝4.69min,[M+H]+＝371.12。
步骤E：合成N1,N1-二烯丙基-5-氯-6-氟苯-1,2-二胺
将2-(4-氯-2-(二烯丙基氨基)-3-氟苯基)异吲哚啉-1,3-二酮(1.4克,3.9毫摩尔)溶于乙醇(20.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入水合肼(1.9毫升,39.2毫摩尔)。在85℃下搅拌2小时。
反应液趁热过滤,滤液经减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到990毫克黄色固体N1，N1-二烯丙基-5-氯-6-氟苯-1,2-二胺(收率：86％)。LCMS：RT＝4.46min,[M+H]+＝241.11。
步骤F：合成N,N-二烯丙基-3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯胺
将N1，N1-二烯丙基-5-氯-6-氟苯-1,2-二胺(760毫克,3.2毫摩尔)溶于冰醋酸(4.0毫升)中。氮气保护后,冰水浴中搅拌15分钟,加入原甲酸三甲酯(1.6毫升,13.9毫摩尔),搅拌15分钟后,加入叠氮化钠(824毫克,12.7毫摩尔),氮气保护后,在85℃下搅拌16小时。
将反应液缓慢滴加到水(20.0毫升)中,过滤,滤液用亚硝酸钠处理后倒入废液,收集滤饼得到800毫克黄色固体N，N-二烯丙基-3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯胺(收率：88％)。LCMS：RT＝4.29min,[M+Na]+＝316.97。
步骤G：合成3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯胺
将N，N-二烯丙基-3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯胺(800毫克,2.7毫摩尔)和1,3-二甲基巴比妥酸(2.1克,13.7毫摩尔)溶于二氯甲烷(20.0毫升)中。氮气保护后,加入四三苯基膦钯(120毫克,0.1毫摩尔),在40℃下搅拌2小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到700毫克黄色固体3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯胺(收率：96％)。LCMS：RT＝3.45min,[M-H]-＝214.01。
步骤H：合成2-((3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
氮气保护下,将3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯胺(700毫克,3.3毫摩尔)和吡啶(0.6毫升,9.0毫摩尔)溶于二氯甲烷(10.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中缓慢滴加草酰氯单甲酯(480毫克,3.5毫摩尔)的二氯甲烷溶液(3.0毫升),冰水浴中搅拌1小时。
向反应液中加水(10.0毫升)淬灭反应,用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到860毫克黄色固体2-((3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(收率：87.0％)。LCMS：RT＝3.21min,[M+H]+＝300.07。
步骤I：合成2-((3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸
将2-((3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(860.0毫克,2.9毫摩尔)溶于四氢呋喃(18.0毫升)和水(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入氢氧化锂一水合物(120毫克,2.9毫摩尔)。在室温下搅拌1小时。
加稀盐酸调节pH至弱酸性,减压浓缩除去大部分溶剂,加稀盐酸调节pH至3,析出大量白色固体,过滤,收集滤饼得到520毫克黄色固体2-((3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(收率：63％)。LCMS：RT＝3.14min,[M-H]-＝285.13。
步骤J：合成叔丁基(S)-4-(2-(2-(((3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸酯
将2-((3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(230毫克,0.81毫摩尔),2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(462毫克,1.2毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(0.4毫升,2.4毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(330毫克,0.97毫摩尔),在室温下搅拌2小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到220毫克黄色固体叔丁基(S)-4-(2-(2-(((3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸酯(收率：45.0％)。LCMS：RT＝4.27min,[M-H]-＝606.10。
步骤K：合成(S)-4-(2-(2-(((3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将叔丁基(S)-4-(2-(2-(((3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸酯(88毫克,0.15毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到9.3毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((3-氯-2-氟-6-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：12.0％)。LCMS：RT＝3.72min,[M-H]-＝550.11。
实施例50
合成(S)-5-(2-(4-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-2,3-二氧代哌嗪-1-基)-3-(4-(4-羟基哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(2-甲氧基乙氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
将4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(402毫克,2.0毫摩尔)溶于乙腈(10.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中加钠氢(104毫克,2.6毫摩尔),然后室温搅拌1小时。随后,向上述溶液中加入1-溴-2-甲氧基乙烷(550毫克,4.0毫摩尔),在50℃下搅拌5小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到280毫克无色油状物4-(2-甲氧基乙氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：54.0％)。
步骤B：合成4-(2-甲氧基乙氧基)哌啶的三氟乙酸盐
将4-(2-甲氧基乙氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(280毫克,1.1毫摩尔)溶于二氯甲烷(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(2.0毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩,得到250毫克黄色固体4-(2-甲氧基乙氧基)哌啶的三氟乙酸盐(收率：90.0％)。
步骤C：合成(S)-5-(2-(4-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-2,3-二氧代哌嗪-1-基)-3-(-4-(4-羟基哌啶-1-甲酰氨基)苯基)丙酰氨基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将二叔丁基(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(120毫克,0.16毫摩尔)和4-(2-甲氧基乙氧基)哌啶的三氟乙酸盐(203毫克,0.96毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升,2.6毫摩尔)。在60℃反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩得到110毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：60％)。LCMS：RT＝3.97min,[M+Na]+＝851.08。
步骤D：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(110毫克,0.12毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到8毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：8.6％)。LCMS：RT＝3.51min,[M+H]+＝773.24。
实施例51
合成(S)-5-(2-(4-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-2,3-二氧代哌嗪-1-基)-3-(4-(4-羟基哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(吗啉-4-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
将1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸(902毫克,3.9毫摩尔)和和N,N-二异丙基乙胺(1.9毫升,11.8毫摩尔)溶于1,2-二氯乙烷(3.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(2.2克,5.9毫摩尔)和吗啉(513毫克,5.9毫摩尔)。在室温下搅拌2小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到1.2克黄色固体4-(吗啉-4-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：99.0％)。
步骤B：合成吗啉代(哌啶-4-基)甲酮的三氟乙酸盐
将4-(吗啉-4-羰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.2克,3.9毫摩尔)溶于二氯甲烷(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(2.0毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩,得到1.1克白色固体吗啉代(哌啶-4-基)甲酮的三氟乙酸盐(收率：93.0％)。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(吗啉-4-羰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将二叔丁基(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(100毫克,0.12毫摩尔)和4-(2-甲氧基乙氧基)哌啶的三氟乙酸盐(100毫克,0.35毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.2毫升,1.4毫摩尔)。在60℃反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到59毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(吗啉-4-羰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：53％)。LCMS：RT＝4.26min,[M+H]+＝968.47。
步骤D：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(吗啉-4-羰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(吗啉-4-羰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(59毫克,0.06毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到12毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(吗啉-4-羰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：24％)。LCMS：RT＝3.36min,[M-H]-＝810.28。
实施例52
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸(902毫克,3.9毫摩尔)和和N,N-二异丙基乙胺(1.9毫升,11.8毫摩尔)溶于1,2-二氯乙烷(3.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(2.2克,5.9毫摩尔)和二甲胺四氢呋喃溶液(4.0毫升,8.0毫摩尔)。在室温下搅拌2小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到1.0克黄色固体4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：100％)。
步骤B：合成N,N-二甲基哌啶-4-羧酰胺的三氟乙酸盐
将4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0克,3.9毫摩尔)溶于二氯甲烷(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(2.0毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩,得到1.0克黄色固体N，N-二甲基哌啶-4-羧酰胺的三氟乙酸盐(收率：100％)。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将二叔丁基(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(200毫克,0.23毫摩尔)和N，N-二甲基哌啶-4-羧酰胺的三氟乙酸盐(175毫克,0.69毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.4毫升,2.8毫摩尔)。在60℃反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到120毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：56％)。LCMS：RT＝4.28min,[M+H]+＝926.28。
步骤D：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(120毫克,0.06毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到25毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(二甲基氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：25％)。LCMS：RT＝3.38min,[M-H]-＝768.22。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.91(s,1H),11.72(s,1H),10.73(s,1H),10.04(s,1H),9.84(s,1H),8.77(d,J＝8.4Hz,1H),8.41(s,1H),7.99(d,J＝2.3Hz,1H),7.94(d,J＝1.8Hz,1H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.61(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.41-7.29(m,4H),7.12(d,J＝8.6Hz,2H),7.07-7.04(m,1H),4.67(dd,J＝14.5,7.8Hz,1H),4.10(d,J＝13.2Hz,2H),3.12-3.05(m,2H),3.04(s,3H),2.85(d,J＝11.0Hz,2H),2.81(s,3H),δ2.53(d,J＝1.9Hz,1H),δ1.63(d,J＝10.7Hz,2H),1.45(dd,J＝20.9,12.1Hz,2H).
实施例53
合成(S)-5-(2-(4-(5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)-2,3-二氧代哌嗪-1-基)-3-(4-(4-羟基哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
将4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.32克,10.0毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中加钠氢(520毫克,13.0毫摩尔),然后室温搅拌1小时。随后,向上述溶液中加入2-溴乙酸叔丁酯(2.9毫升,20.0毫摩尔),在50℃下搅拌5小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到600毫克无色油状物4-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：19.0％)。
步骤B：合成2-(哌啶-4-基氧基)乙酸叔丁酯盐酸盐
将4-(2-(叔丁氧基)-2-氧代乙氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(280毫克,1.1毫摩尔)溶于乙酸乙酯(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入2.0M盐酸的乙酸乙酯溶液(2.0毫升),在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩,得到250毫克白色固体2-(哌啶-4-基氧基)乙酸叔丁酯盐酸盐(收率：52％)。
步骤C：合成(S)-5-(3-(4-(4-(2-(叔丁氧基)-2-氧乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(170毫克,0.2毫摩尔)和2-(哌啶-4-基氧基)乙酸叔丁酯盐酸盐(200毫克,0.8毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升,2.6毫摩尔)。在60℃反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到132毫克黄色固体(S)-5-(3-(4-(4-(2-(叔丁氧基)-2-氧乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：67％)。LCMS：RT＝4.62min,[M-H]-＝984.24。
步骤D：合成(S)-5-(3-(4-(4-(羧基甲氧基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将二叔丁基(S)-5-(3-(4-(4-(2-(叔丁氧基)-2-氧乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(132毫克,0.13毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到12毫克黄色固体(S)-5-(3-(4-(4-(羧基甲氧基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：12％)。LCMS：RT＝3.39min,[M+H]+＝773.08。
实施例54
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(苯基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(苯磺酰基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将二叔丁基(S)-5-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(160毫克,0.2毫摩尔)和苯磺酰基异氰酸酯(183毫克,1.0毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升,2.6毫摩尔)。在60℃反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到122毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(苯磺酰基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：59％)。LCMS：RT＝4.06min,[M+H]+＝827.23。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(苯基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(苯磺酰基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(122毫克,0.15毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到26毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(苯基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：23％)。LCMS：RT＝3.65min,[M-H]-＝770.08。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.93(s,1H),11.73(s,1H),10.71(s,1H),10.04(s,1H),9.82(s,1H),8.80(s,1H),8.01-7.91(m,4H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.69(d,J＝7.5Hz,1H),7.66-7.59(m,3H),7.37(d,J＝8.9Hz,1H),7.31(d,J＝1.9Hz,1H),7.24(d,J＝8.6Hz,2H),7.16(d,J＝8.6Hz,2H),7.05(d,J＝1.4Hz,1H),4.65(dd,J＝14.0,8.2Hz,1H),3.12-3.02(m,2H),2.53(d,J＝1.9Hz,1H)。
实施例55
合成5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((S)-2,3-二羟基丙氧基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-(2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)4-甲基苯磺酸甲酯
将(R)-(2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲醇(1.32克,10.0毫摩尔),4-二甲氨基吡啶(122毫克,1.0毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(4.5毫升,30毫摩尔)溶于二氯甲烷(20.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中加对甲基苯磺酰氯(1.9克,10.0毫摩尔),然后室温搅拌3小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到1.0克无色油状物(S)-(2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)4-甲基苯磺酸甲酯(收率：35.0％)。
步骤B：合成(R)-4-(((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
/>
将4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(460毫克,3.5毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中加钠氢(183毫克,4.6毫摩尔),然后室温搅拌1小时。随后,向上述溶液中加入(S)-(2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)4-甲基苯磺酸甲酯(1.0克,3.5毫摩尔),在50℃下搅拌5小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到620毫克无色油状物(R)-4-(((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：56％)。
步骤C：合成(R)-4-(((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶盐酸盐
将(R)-4-(((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(620毫克,2.0毫摩尔)溶于乙酸乙酯(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入2.0M盐酸的乙酸乙酯溶液(2.0毫升),在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩,得到400毫克白色固体(R)-4-(((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶盐酸盐(收率：80％)。
步骤D：合成5-((S)-2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)-3-(4-(4-(((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将二叔丁基(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(200毫克,0.23毫摩尔)和(R)-4-(((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶盐酸盐(170毫克,0.7毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升,2.6毫摩尔)。在60℃反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到160毫克黄色固体5-((S)-2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)-3-(4-(4-(((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：71％)。LCMS：RT＝4.53min,[M-H]-＝983.23。
步骤E：合成5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((S)-2,3-二羟基丙氧基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将5-((S)-2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)-3-(4-(4-(((R)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(150毫克,0.13毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到21毫克白色固体5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((S)-2,3-二羟基丙氧基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：19％)。LCMS：RT＝3.25min,[M-H]-＝787.07。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.03-12.76(m,1H),11.73(s,1H),10.73(s,1H),10.05(s,1H),9.84(s,1H),8.77(d,J＝8.3Hz,1H),8.43(s,1H),7.99(d,J＝2.3Hz,1H),7.95(s,1H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.62(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.43-7.28(m,2H),7.18-7.04(m,2H),5.76(s,1H),4.79-4.41(m,2H),3.76(d,J＝13.7Hz,2H),3.48(ddd,J＝14.7,10.4,5.1Hz,3H),3.10(dd,J＝15.8,7.2Hz,2H),2.55(s,2H),1.80(s,1H),1.38(d,J＝9.0Hz,1H)。
实施例56
合成5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((R)-2,3-二羟基丙氧基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(R)-(2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)4-甲基苯磺酸甲酯
/>
将(S)-(2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲醇(1.32克,10.0毫摩尔),4-二甲氨基吡啶(122毫克,1.0毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(4.5毫升,30毫摩尔)溶于二氯甲烷(20.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中加对甲基苯磺酰氯(1.9克,10.0毫摩尔),然后室温搅拌3小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到1.0克无色油状物(R)-(2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)4-甲基苯磺酸甲酯(收率：35.0％)。
步骤B：合成(S)-4-(((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(460毫克,3.5毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中加钠氢(183毫克,4.6毫摩尔),然后室温搅拌1小时。随后,向上述溶液中加入(R)-(2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)4-甲基苯磺酸甲酯(1.0克,3.5毫摩尔),在50℃下搅拌5小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到620毫克无色油状物(S)-4-(((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：56％)。
步骤C：合成(S)-4-(((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶盐酸盐
将(S)-4-(((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(620毫克,2.0毫摩尔)溶于乙酸乙酯(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入2.0M盐酸的乙酸乙酯溶液(2.0毫升),在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩,得到400毫克白色固体(S)-4-(((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶盐酸盐(收率：80％)。
步骤D：合成5-((S)-2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)-3-(4-(4-(((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将二叔丁基(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(200毫克,0.23毫摩尔)和(S)-4-(((2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶盐酸盐(170毫克,0.7毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.5毫升,2.6毫摩尔)。在60℃反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩得到160毫克黄色固体5-((S)-2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)二叔丁基)-3-(4-(4-(((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(收率：71％)。LCMS：RT＝4.53min,[M-H]-＝983.23。
步骤E：合成5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((R)-2,3-二羟基丙氧基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将5-((S)-2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)-3-(4-(4-(((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(150毫克,0.13毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到21毫克白色固体5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((R)-2,3-二羟基丙氧基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：19％)。LCMS：RT＝3.25min,[M-H]-＝787.07。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.03-12.76(m,1H),11.73(s,1H),10.73(s,1H),10.05(s,1H),9.84(s,1H),8.77(d,J＝8.3Hz,1H),8.43(s,1H),7.99(d,J＝2.3Hz,1H),7.95(s,1H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.62(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.43-7.28(m,2H),7.18-7.04(m,2H),5.76(s,1H),4.79-4.41(m,2H),3.76(d,J＝13.7Hz,2H),3.48(ddd,J＝14.7,10.4,5.1Hz,3H),3.10(dd,J＝15.8,7.2Hz,2H),2.55(s,2H),1.80(s,1H),1.38(d,J＝9.0Hz,1H)。
实施例57
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-羟乙基)(甲基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-((2-羟乙基)(甲基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
将1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸(902毫克,3.9毫摩尔)和和N,N-二异丙基乙胺(1.9毫升,11.8毫摩尔)溶于1,2-二氯乙烷(3.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(2.2克,5.9毫摩尔)和2-(甲基氨基)乙-1-醇(585毫克,7.8毫摩尔)。在室温下搅拌2小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到1.0克黄色固体4-((2-羟乙基)(甲基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(收率：100％)。
步骤B：合成N-(2-羟乙基)-N-甲基哌啶-4-羧酰胺的三氟乙酸盐
将4-((2-羟乙基)(甲基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0克,3.9毫摩尔)溶于二氯甲烷(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(2.0毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩,得到1.0克黄色固体N-(2-羟乙基)-N-甲基哌啶-4-羧酰胺的三氟乙酸盐(收率：100％)。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-羟乙基)(甲基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将二叔丁基(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(120毫克,0.14毫摩尔)和N-(2-羟乙基)-N-甲基哌啶-4-羧酰胺的三氟乙酸盐(160毫克,0.56毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.3毫升,1.7毫摩尔)。在60℃反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到78毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-羟乙基)(甲基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：57％)。LCMS：RT＝4.16min,[M-H]-＝954.33。
步骤D：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-羟乙基)(甲基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-羟乙基)(甲基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(78毫克,0.08毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到14毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-羟乙基)(甲基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：22％)。LCMS：RT＝3.26min,[M+H]+＝799.98。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.91(s,1H),11.72(s,1H),10.72(s,1H),10.04(s,1H),9.84(s,1H),8.76(d,J＝8.4Hz,1H),8.40(s,1H),8.00(d,J＝2.2Hz,1H),7.94(s,1H),7.78(dd,J＝8.6,2.1Hz,1H),7.62(dt,J＝8.6,2.5Hz,1H),7.34(ddd,J＝10.8,10.1,5.4Hz,4H),7.12(d,J＝8.6Hz,2H),7.06(d,J＝2.1Hz,1H),4.72-4.59(m,2H),4.20-4.00(m,2H),3.59-3.39(m,3H),3.08(s,3H),2.95-2.83(m,2H),2.81(s,2H),2.77(s,1H),2.61(s,1H),2.06-1.85(m,2H),1.62(s,2H)。
实施例58
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-((2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
将1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸(902毫克,3.9毫摩尔)和和N,N-二异丙基乙胺(1.9毫升,11.8毫摩尔)溶于1,2-二氯乙烷(3.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(2.2克,5.9毫摩尔)和2-氨基乙醇(476毫克,7.8毫摩尔)。在室温下搅拌2小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物直接用于下一步。
步骤B：合成N-(2-羟乙基)-哌啶-4-羧酰胺的三氟乙酸盐
将4-((2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0克,3.9毫摩尔)溶于二氯甲烷(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(2.0毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩,得到0.8克黄色固体N-(2-羟乙基)哌啶-4-羧酰胺的三氟乙酸盐(收率：100％)。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将二叔丁基(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(180毫克,0.21毫摩尔)和N-(2-羟乙基)哌啶-4-羧酰胺的三氟乙酸盐(160毫克,0.56毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.3毫升,1.7毫摩尔)。在60℃反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到150毫克黄色固体二叔丁基(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(收率：76％)。LCMS：RT＝4.08min,[M-H]-＝942.23。
步骤D：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(150毫克,0.14毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到22毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：17％)。LCMS：RT＝3.22min,[M-H]-＝784.20。LCMS：RT＝3.22min,[M-H]-＝784.20。1HNMR(400MHz,DMSO)δ12.93(s,1H),11.73(s,1H),10.73(s,1H),10.05(s,1H),9.84(s,1H),8.78(d,J＝8.3Hz,1H),8.41(s,1H),8.11-7.90(m,1H),7.79(dd,J＝11.1,7.1Hz,1H),7.61(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.44-7.26(m,2H),7.16-7.02(m,2H),4.67(dd,J＝14.5,7.8Hz,1H),4.10(d,J＝13.1Hz,2H),3.10(dt,J＝11.4,5.8Hz,2H),2.83-2.65(m,1H),2.55(s,1H),2.53-2.52(m,1H),2.40-2.26(m,1H),1.67(d,J＝10.4Hz,1H),1.47(dd,J＝21.5,12.1Hz,1H)。
实施例59
合成(S)-5-(3-(4-(4-(双(2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(双(2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
将1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸(902毫克,3.9毫摩尔)和和N,N-二异丙基乙胺(1.9毫升,11.8毫摩尔)溶于1,2-二氯乙烷(3.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(2.2克,5.9毫摩尔)和2,2'-氮杂二基双(乙烷-1-醇)(820毫克,7.8毫摩尔)。在室温下搅拌2小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物直接用于下一步。
步骤B：合成N,N-双(2-羟乙基)哌啶-4-羧酰胺的三氟乙酸盐
将4-(双(2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0克,3.9毫摩尔)溶于二氯甲烷(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(2.0毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩,得到1.2克黄色固体N，N-双(2-羟乙基)哌啶-4-羧酰胺的三氟乙酸盐(收率：100％)。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(双(2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将二叔丁基(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(150毫克,0.17毫摩尔)和N，N-双(2-羟乙基)哌啶-4-羧酰胺的三氟乙酸盐(220毫克,0.70毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.3毫升,1.7毫摩尔)。在60℃反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到110毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(双(2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：26％)。LCMS：RT＝4.13min,[M+Na]+＝964.24。
步骤D：合成(S)-5-(3-(4-(4-(双(2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(双(2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(150毫克,0.14毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到4毫克白色固体(S)-5-(3-(4-(4-(双(2-羟乙基)氨基甲酰基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：4％),LCMS：RT＝2.85min,[M-H]-＝828.20。以及3毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-((2-((2-羟乙基)氨基)乙氧基)羰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：3％)。LCMS：RT＝3.21min,[M-H]-＝828.20。
实施例60
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(甲基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(甲基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将二叔丁基(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(170毫克,0.2毫摩尔)和甲磺酰胺(80毫克,0.8毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.3毫升,2.4毫摩尔)。在60摄氏度反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到220毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(甲基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：53％)。LCMS：RT＝4.32min,[M+H]+＝863.18。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(甲基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(甲基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(220毫克,0.13毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到13毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(甲基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：14％)。LCMS：RT＝3.44min,[M+H]+＝709.07。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.72(s,1H),10.73(s,1H),10.05(s,1H),9.89-9.77(m,1H),8.79(d,J＝8.3Hz,1H),8.71(s,1H),7.98(dd,J＝11.6,9.3Hz,2H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.62(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.34(ddd,J＝11.6,10.9,5.4Hz,4H),7.18(d,J＝8.5Hz,2H),7.08(t,J＝10.4Hz,1H),6.67(s,1H),5.33(t,J＝5.1Hz,1H),4.68(dd,J＝14.0,8.2Hz,1H),4.10(d,J＝4.9Hz,1H),3.24-3.14(m,3H),3.10(s,2H),2.55(d,J＝2.9Hz,2H),2.01(dd,J＝14.4,6.9Hz,2H),1.47(s,1H)。
实施例61
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(乙基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(乙基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(170毫克,0.2毫摩尔)和乙磺酰胺(90毫克,0.8毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.3毫升,2.4毫摩尔)。在60摄氏度反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到86毫克黄色固体二叔丁基(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(乙基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(收率：49％)。LCMS：RT＝4.67min,[M+H]+＝886.22。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(乙基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
/>
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(乙基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(86毫克,0.1毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到15毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(乙基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：21％)。LCMS：RT＝3.48min,[M+H]+＝721.21。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.06-12.83(m,1H),11.73(s,1H),10.73(s,1H),10.06(s,1H),9.84(d,J＝5.1Hz,1H),8.87-8.76(m,2H),8.04-7.91(m,2H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.62(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.44-7.28(m,4H),7.21(d,J＝8.5Hz,2H),7.07(t,J＝5.7Hz,1H),5.76(s,1H),4.68(dd,J＝14.1,8.2Hz,1H),3.49-3.40(m,2H),3.12(s,1H),2.57-2.52(m,2H),1.24(dt,J＝11.3,7.4Hz,3H)。
实施例62
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(甲基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(环丙基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(170毫克,0.2毫摩尔)和环丙基磺酰胺(96毫克,0.8毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.3毫升,2.4毫摩尔)。在60摄氏度反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到50毫克黄色固体二叔丁基(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(环丙基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯(收率：28％)。LCMS：RT＝4.33min,[M+Na]+＝913.08。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(环丙基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(环丙基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(50毫克,0.06毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到5毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(环丙基磺酰基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：13％)。LCMS：RT＝3.52min,[M-H]-＝733.15。
实施例63
合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1,1-二氧化四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-3-(2-羟乙基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(((2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基)四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物
室温下,将4-氨基四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物(500毫克,3.3毫摩尔)和碳酸铯(2.2克,6.6毫摩尔)溶于乙腈(20.0毫升)中。随后,向上述溶液中加(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(960毫克,4.0毫摩尔)。在80℃反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到600毫克黄色液体4-(((2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基)四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物(收率：60％)。
步骤B：合成(S)-5-(3-(4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3-(1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)脲基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下,将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(150毫克,0.17毫摩尔)和4-(((2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基)四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物(210毫克,0.68毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中N,N-二异丙基乙胺(0.3毫升,2.4毫摩尔)。在60℃反应12小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩得到94毫克黄色固体(S)-5-(3-(4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3-(1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)脲基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：51％)。LCMS：RT＝4.98min,[M+H]+＝1077.33。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1,1-二氧化四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-3-(2-羟乙基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(3-(4-(3-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3-(1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)脲基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(94毫克,0.09毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到26毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1,1-二氧化四氢-2H-硫代吡喃-4-基)-3-(2-羟乙基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：37％)。LCMS：RT＝3.36min,[M+H]+＝807.18。1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.92(s,1H),11.72(s,1H),10.72(s,1H),10.04(s,1H),9.83(s,1H),8.91(s,1H),8.76(d,J＝8.0Hz,1H),7.98(d,J＝2.3Hz,1H),7.94(s,1H),7.77(d,J＝8.6Hz,1H),7.61(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),7.37(d,J＝8.9Hz,1H),7.31(dd,J＝8.9,1.9Hz,1H),7.25(d,J＝8.5Hz,2H),7.13(d,J＝8.5Hz,2H),7.05(d,J＝1.5Hz,1H),5.32(t,J＝4.7Hz,1H),4.66(dd,J＝14.0,8.2Hz,1H),4.23(t,J＝12.2Hz,1H),3.58(t,J＝5.0Hz,2H),3.06(t,J＝10.6Hz,4H),2.54(s,2H),2.18(dd,J＝25.4,12.0Hz,2H),2.03-1.90(m,4H)。
实施例64
合成(S)-5-(2-(2-(((2-乙酰基5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-(2-氨基-4-氯苯基)乙-1-酮
将1-(4-氯-2-硝基苯基)乙-1-酮(1.2克,6毫摩尔)溶于乙酸乙酯(50.0毫升)中。氮气保护后,冰水浴下加氯化亚锡二水合物(13.5克,60毫摩尔),缓慢升温到室温并搅拌12小时后。
将反应液缓慢滴加到15％碳酸钠水溶液(150.0毫升)中,混合液用乙酸乙酯(60毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到0.7克黄色固体1-(2-氨基-4-氯苯基)乙-1-酮(收率：70％)。LCMS：RT＝3.85min,[M+H]+＝170.11。
步骤B：合成2-((2-乙酰基-5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯
氮气保护下,将1-(2-氨基-4-氯苯基)乙-1-酮(700毫克,4.0毫摩尔)和吡啶(0.6毫升,9.0毫摩尔)溶于二氯甲烷(13.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中缓慢滴加草酰氯单甲酯(612毫克,5.0毫摩尔)的二氯甲烷溶液(3.0毫升),冰水浴中搅拌1小时。
向反应液中加水(10.0毫升)淬灭反应,用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到330毫克黄色固体2-((2-乙酰基-5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(收率：31％)。LCMS：RT＝3.83min,[M+H]+＝256.00。
步骤C：合成2-((2-乙酰基-5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酸
将2-((2-乙酰基-5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(330毫克,1.4毫摩尔)溶于四氢呋喃(18.0毫升)和水(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入氢氧化锂一水合物(56毫克,1.4毫摩尔)。在室温下搅拌1小时。
加稀盐酸调节pH至弱酸性,减压浓缩除去大部分溶剂,加稀盐酸调节pH至3,析出大量固体,过滤,收集滤饼得到200毫克黄色固体2-((2-乙酰基-5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酸(收率：63％)。LCMS：RT＝4.96min,[M-H]-＝239.92。
步骤D：合成(S)-5-(2-(2-(2-((2-乙酰基-5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
将2-((2-乙酰基-5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酸(120毫克,0.8毫摩尔),2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(470毫克,1.2毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(0.4毫升,2.4毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入(S)-5-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁基酯(470毫克,1.2毫摩尔),在室温下搅拌2小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到55毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(2-((2-乙酰基-5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：31.0％)。LCMS：RT＝4.49min,[M+H]+＝603.15。
步骤E：合成(S)-5-(2-(2-(((2-乙酰基5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(2-((2-乙酰基-5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(55毫克,0.09毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到15毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((2-乙酰基5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：31％)。LCMS：RT＝4.03min,[M-H]-＝545.08。1H NMR(500MHz,DMSO)δ12.80(s,1H),11.74(s,1H),10.07(s,1H),9.08(d,J＝8.5Hz,1H),8.67(dd,J＝10.6,2.2Hz,1H),8.15(d,J＝8.6Hz,2H),7.97(s,1H),7.41-7.36(m,2H),7.36-7.30(m,3H),7.28(t,J＝7.6Hz,2H),7.19(dd,J＝9.9,4.5Hz,1H),7.06(d,J＝1.4Hz,1H),5.32(t,J＝4.9Hz,1H),4.77(td,J＝8.7,5.3Hz,1H),3.22(d,J＝5.3Hz,1H),3.10(dt,J＝7.2,2.4Hz,1H),2.64(s,3H)。
实施例65
合成(S)-5-(2-(2-(((2-(氨基甲基)-5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成N-烯丙基-N-(4-氯-2-硝基苄基)丙-2-烯-1-胺
将4-氯-2-硝基苯甲醛(2.2克,12毫摩尔)和醋酸(2.0毫升,36毫摩尔)溶于甲醇(40.0毫升)中。氮气保护后,加二烯丙基胺(2.3克,24毫摩尔),室温下搅拌2小时后,加氰基硼氢化钠(3.8克,60毫摩尔),
将反应液缓慢滴加到15％碳酸钠水溶液(150.0毫升)中,混合液用乙酸乙酯(60毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到1.5克无色油状物N-烯丙基-N-(4-氯-2-硝基苄基)丙-2-烯-1-胺(收率：46％)。LCMS：RT＝2.73min,[M+H]+＝267.09。
步骤B：合成5-氯-2-((二烯丙基氨基)甲基)苯胺
/>
将N-烯丙基-N-(4-氯-2-硝基苄基)丙-2-烯-1-胺(1.1克,4毫摩尔)溶于乙酸乙酯(50.0毫升)中。氮气保护后,冰水浴下加氯化亚锡二水合物(9.2克,41毫摩尔),缓慢升温到室温并搅拌12小时后。
将反应液缓慢滴加到15％碳酸钠水溶液(150.0毫升)中,混合液用乙酸乙酯(60毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到840毫克油状物5-氯-2-((二烯丙基氨基)甲基)苯胺(收率：65％)。LCMS：RT＝1.57min,[M+H]+＝237.10。
步骤C：合成2-((5-氯-2-(((二烯丙基氨基)甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
氮气保护下,将5-氯-2-((二烯丙基氨基)甲基)苯胺(840毫克,3.6毫摩尔)和吡啶(0.5毫升,7.1毫摩尔)溶于二氯甲烷(30.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中缓慢滴加草酰氯单甲酯(0.4毫克,4.3毫摩尔)的二氯甲烷溶液(3.0毫升),冰水浴中搅拌1小时。
向反应液中加水(10.0毫升)淬灭反应,用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到700毫克黄色液体2-((5-氯-2-(((二烯丙基氨基)甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(收率：31％)。LCMS：RT＝4.13min,[M+H]+＝323.11。
步骤D：合成2-((5-氯-2-(((二烯丙基氨基)甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸
将2-((5-氯-2-(((二烯丙基氨基)甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(700毫克,2.2毫摩尔)溶于四氢呋喃(18.0毫升)和水(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入氢氧化锂一水合物(91毫克,2.2毫摩尔)。在室温下搅拌1小时。
加稀盐酸调节pH至弱酸性,减压浓缩除去大部分溶剂,加稀盐酸调节pH至3,析出大量固体,过滤,收集滤饼得到340毫克白色固体2-((5-氯-2-(((二烯丙基氨基)甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(收率：50％)。LCMS：RT＝2.70min,[M-H]-＝309.23。
步骤D：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-((二烯丙基氨基)甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚1,2-二羧酸二叔丁酯
将2-((5-氯-2-(((二烯丙基氨基)甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(160毫克,0.5毫摩尔),2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(285毫克,0.75毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(0.2毫升,1.2毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入(S)-5-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁基酯(228毫克,0.6毫摩尔),在室温下搅拌2小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到40毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-((二烯丙基氨基)甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：12％)。LCMS：RT＝4.49min,[M-H]-＝603.15。
步骤E：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-((二烯丙基氨基)甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚1,2-二羧酸二叔丁酯
将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-((二烯丙基氨基)甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚1,2-二羧酸二叔丁酯(180毫克,0.27毫摩尔)和1,3-二甲基巴比妥酸(220毫克,1.4毫摩尔)溶于二氯甲烷(20.0毫升)中。氮气保护后,加入四三苯基膦钯(69毫克,0.06毫摩尔),在60摄氏度下搅拌12小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到86毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((2-(氨基甲基)-5-氯苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯盐(收率：53％)和55毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((2-(氨基甲基)-5-羟基苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)二叔丁基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸盐(收率：34％)。
步骤F：合成(S)-5-(2-(2-(((2-(氨基甲基)-5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
/>
将(S)-5-(2-(2-(((2-(氨基甲基)-5-氯苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)二叔丁基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸盐(86毫克,0.09毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到38毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((2-(氨基甲基)-5-氯苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：57％)。LCMS：RT＝2.86min,[M-H]-＝533.15。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.95(s,1H),11.75(s,1H),10.59(s,1H),10.12(s,1H),8.89(d,J＝8.6Hz,1H),8.08(s,2H),7.98(d,J＝1.9Hz,1H),7.54(dd,J＝5.3,3.1Hz,1H),7.48(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),7.40(d,J＝8.8Hz,1H),7.33(ddd,J＝20.1,9.7,4.7Hz,3H),7.23(dt,J＝9.4,4.2Hz,1H),7.07(dd,J＝2.1,0.8Hz,1H),4.86-4.73(m,1H),3.96(d,J＝5.0Hz,1H),3.22-3.17(m,1H),2.55(s,1H),2.53-2.52(m,1H)。
实施例66
合成(S)-5-(2-(2-(((2-(氨基甲基)-5-羟基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤F：合成(S)-5-(2-(2-(((2-(氨基甲基)-5-羟基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((2-(氨基甲基)-5-羟基苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(55毫克,0.08毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到21毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((2-(氨基甲基)-5-羟基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：50％)。LCMS：RT＝3.75min,[M-H]-＝514.09。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.08-12.75(m,1H),11.74(s,1H),10.16(s,1H),9.03(s,1H),7.94(d,J＝1.8Hz,1H),7.38(d,J＝8.9Hz,1H),7.29(dd,J＝8.2,3.1Hz,5H),7.25-7.10(m,4H),7.06(d,J＝1.4Hz,1H),5.76(s,1H),4.86(dd,J＝14.1,8.0Hz,1H),4.72(s,2H),3.14(ddd,J＝21.7,13.7,7.1Hz,3H),2.54-2.52(m,1H)。
实施例67
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((N-乙基氨磺酰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((N-乙基氨磺酰基)氨基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
0摄氏度下,将(S)-5-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(100毫克,0.16毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(0.3毫升,2.4毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加乙基氨磺酰氯(30毫克,0.2毫摩尔)。在0摄氏度反应1小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到80毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((N-乙基氨磺酰基)氨基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：69％)。LCMS：RT＝3.96min,[M-H]-＝749.13。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((N-乙基氨磺酰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((N-乙基氨磺酰基)氨基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(80毫克,0.1毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到51毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((N-乙基氨磺酰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：68％)。LCMS：RT＝3.53min,[M+H]+＝695.11。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.15-12.80(m,1H),11.73(s,1H),10.73(s,1H),10.03(s,1H),9.85(s,1H),9.56(s,1H),8.82(d,J＝8.3Hz,1H),8.06-7.89(m,2H),7.76(t,J＝11.1Hz,1H),7.62(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H),7.33(ddd,J＝13.2,10.8,5.4Hz,3H),7.17(d,J＝8.5Hz,2H),7.06(dd,J＝5.4,3.2Hz,3H),5.76(s,1H),4.67(dd,J＝14.6,7.6Hz,1H),3.09(d,J＝6.3Hz,2H),2.88-2.74(m,2H),2.53-2.52(m,1H),1.30-1.22(m,1H),0.92(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例68
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((N，N-二甲基氨磺酰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((N，N-二甲基氨磺酰基)氨基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
0摄氏度下,将(S)-5-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(100毫克,0.16毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(0.3毫升,2.4毫摩尔)溶于四氢呋喃(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加N，N-二甲基氨磺酰氯(30毫克,0.2毫摩尔)。在0℃反应1小时。
向反应液中加水淬灭,混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(20毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到55毫克黄色固体叔丁基(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((N，N-二甲基氨磺酰基)氨基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸酯(收率：69％)。RT＝4.02min,[M-H]-＝749.13。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((N，N-二甲基氨磺酰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
/>
将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((N，N-二甲基氨磺酰基)氨基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(55毫克,0.07毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到11毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((N，N-二甲基氨磺酰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：22％)。LCMS：RT＝3.57min,[M-H]-＝693.04。
实施例69
合成4-((S)-2-(2-((5-氯-2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(R)-1-(4-氯-2-硝基苯基)吡咯烷-3-醇
将4-氯-1-氟-2-硝基苯(1.75克,10.0毫摩尔),(R)-吡咯烷丁-3-醇(1.0毫升,36.2毫摩尔)和碳酸铯(6.5克,20.0毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3.0毫升)中。加热升温到50℃并恒温搅拌5小时后,LCMS监测至反应完全,将反应液冷却至室温。
将反应液缓慢滴加到水(15.0毫升)中,混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(10毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到2.2克黄色固体(R)-1-(4-氯-2-硝基苯基)吡咯烷-3-醇(收率：92.0％)。
步骤B：合成(R)-1-(2-氨基-4-氯苯基)吡咯烷-3-醇
/>
将(R)-1-(4-氯-2-硝基苯基)吡咯烷-3-醇(2.2克,9.1毫摩尔)和醋酸(1.0毫升)溶于甲醇(15.0毫升)中，然后将铁粉(5.1克,91.0毫摩尔)加入反应液中,在50℃下搅拌2小时,LCMS监测至反应完全。
反应液冷却至室温,垫硅藻土过滤,滤饼用乙酸乙酯(10毫升×3次)洗涤,合并滤液及洗涤液,有机相经水和饱和食盐水各洗一次,减压浓缩，残渣经硅胶柱层析纯化得到1.9克黄色固体(R)-1-(2-氨基-4-氯苯基)吡咯烷-3-醇(收率：32.0％)。LCMS：RT＝2.84min,[M+H]+＝213.07。
步骤C：合成(R)-2-(((5-氯-2-(3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
氮气保护下,将(R)-1-(2-氨基-4-氯苯基)吡咯烷-3-醇(1.9克,9.0毫摩尔)和吡啶(1.8毫升,18.0毫摩尔)溶于二氯甲烷(20.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中缓慢滴加草酰氯单甲酯(1.7毫升,10.7毫摩尔)的二氯甲烷溶液(3.0毫升),冰水浴中搅拌1小时。
向反应液中加水(10.0毫升)淬灭反应,用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到2.4克黄色固体(R)-2-(((5-氯-2-(3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(收率：90.0％)。LCMS：RT＝3.46min,[M+H]+＝299.07。
步骤D：合成(R)-2-(((5-氯-2-(3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸
将(R)-2-(((5-氯-2-(3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(2.4克,8.0毫摩尔)溶于四氢呋喃(18.0毫升)和水(6.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入氢氧化锂一水合物(320毫克,8.0毫摩尔)。在室温下搅拌1小时。
加稀盐酸调节pH至弱酸性,减压浓缩除去大部分溶剂,加稀盐酸调节pH至3,析出大量白色固体,过滤,收集滤饼得到2.0克黄色固体(R)-2-(((5-氯-2-(3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(收率：63％)。LCMS：RT＝4.04min,[M+H]+＝285.07。
步骤E：合成4-((S)-2-(2-((5-氯-2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(R)-2-(((5-氯-2-(3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(680毫克,2.4毫摩尔),2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(1.4克,3.6毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(1.2毫升,7.2毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(20.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(1.0克,3.0毫摩尔),在室温下搅拌1小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到960毫克黄色固体叔丁基4-((S)-2-(2-((5-氯-2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸酯(收率：66.0％)。LCMS：RT＝4.52min,[M+H]+＝607.08。
步骤F：合成4-((S)-2-(2-((5-氯-2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将4-((S)-2-(2-((5-氯-2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(80毫克,0.13毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到13毫克白色固体4-((S)-2-(2-((5-氯-2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：18.0％)。LCMS：RT＝3.92min,[M-H]-＝549.09。1HNMR(400MHz,DMSO)δ13.05-12.62(m,1H),10.49(s,1H),10.01(s,1H),9.02(d,J＝8.4Hz,1H),8.01-7.88(m,2H),7.81-7.66(m,2H),7.55(d,J＝2.6Hz,1H),7.37-7.25(m,3H),7.21(dt,J＝9.3,4.2Hz,1H),7.15(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),6.95(d,J＝8.9Hz,1H),4.83-4.73(m,1H),4.36-4.25(m,1H),3.38-3.12(m,3H),3.05(ddd,J＝12.9,8.5,4.2Hz,1H),2.87(dd,J＝9.9,2.1Hz,1H),1.95(dt,J＝13.4,7.7Hz,1H),1.83-1.71(m,1H)。
实施例70
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(3-氧吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-((S)-2-(2-((5-氯-2-(3-氧吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将4-((S)-2-(2-((5-氯-2-((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(350毫克,0.6毫摩尔),碳酸氢钠(100毫克,1.2毫摩尔)溶于二氯甲烷(13.0毫升)中,冰水浴中搅拌10分钟后,加戴斯-马丁试剂(1.0克,2.4毫摩尔),室温反应1小时。
将反应液缓慢滴加到水(15.0毫升)中,混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(10毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到280毫克黄色固体4-((S)-2-(2-((5-氯-2-(3-氧吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：80.0％)。LCMS：RT＝4.52min,[M+H]+＝605.13。
步骤B：合成4-((S)-2-(2-((5-氯-2-(3-氧吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将4-((S)-2-(2-((5-氯-2-(3-氧吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(80毫克,0.13毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到13毫克白色固体4-((S)-2-(2-((5-氯-2-(3-氧吡咯烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：18.0％)。LCMS：RT＝4.07min,[M-H]-＝548.15。
实施例71
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成3-(4-氯-2-硝基苯基)恶唑烷-2-酮
将4-氯-1-氟-2-硝基苯(0.5克,2.9毫摩尔),恶唑烷丁-2-酮(500毫克,5.7毫摩尔)和碳酸钾(790毫克,5.7毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3.0毫升)中。加热升温到50℃并恒温搅拌15小时后,LCMS监测至反应完全,将反应液冷却至室温。
将反应液缓慢滴加到水(15.0毫升)中,混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(10毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到0.6克黄色固体3-(4-氯-2-硝基苯基)恶唑烷-2-酮(收率：92.0％)。
步骤B：合成3-(4-氯-2-氨基苯基)恶唑烷-2-酮
将3-(4-氯-2-硝基苯基)恶唑烷-2-酮(0.5克,2.0毫摩尔)和醋酸(1.0毫升)溶于甲醇(15.0毫升)中，然后将铁粉(560毫克,10.0毫摩尔)加入反应液中,在50℃下搅拌2小时,LCMS监测至反应完全。
反应液冷却至室温,垫硅藻土过滤,滤饼用乙酸乙酯(10毫升×3次)洗涤,合并滤液及洗涤液,有机相经水和饱和食盐水各洗一次,减压浓缩，残渣经硅胶柱层析纯化得到0.4克黄色液体3-(4-氯-2-氨基苯基)恶唑烷-2-酮(收率：92.0％)。
步骤C：合成2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯
氮气保护下,将(R)-1-(2-氨基-4-氯苯基)吡咯烷-3-醇(0.4克,1.9毫摩尔)和吡啶(0.3毫升,2.8毫摩尔)溶于二氯甲烷(5.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中缓慢滴加草酰氯单甲酯(280毫克,2.3毫摩尔)的二氯甲烷溶液(3.0毫升),冰水浴中搅拌1小时。
向反应液中加水(10.0毫升)淬灭反应,用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到560毫克黄色固体2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(收率：100.0％)。LCMS：RT＝3.30min,[M-H]-＝298.99。
步骤D：合成2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸
将2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(560毫克,1.9毫摩尔)溶于四氢呋喃(12.0毫升)和水(4.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入氢氧化锂一水合物(76毫克,1.9毫摩尔)。在室温下搅拌1小时。
加稀盐酸调节pH至弱酸性,减压浓缩除去大部分溶剂,加稀盐酸调节pH至3,析出大量白色固体,过滤,收集滤饼得到0.5克黄色固体2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(收率：93％)。LCMS：RT＝3.69min,[M-H]-＝282.92。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(100毫克,0.35毫摩尔),2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(0.2克,0.5毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(0.2毫升,1.2毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(144毫克,0.42毫摩尔),在室温下搅拌1小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到150毫克黄色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：66.0％)。LCMS：RT＝4.36min,[M-H]-＝605.14。
步骤F：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(150毫克,0.25毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到69毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：51.0％)。LCMS：RT＝3.80min,[M-H]-＝549.01。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.99-12.60(m,1H),10.51(s,1H),10.12(s,1H),9.13(d,J＝8.3Hz,1H),8.00-7.89(m,2H),7.86(d,J＝2.4Hz,1H),7.77-7.67(m,2H),7.53(d,J＝8.7Hz,1H),7.39(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.31(dt,J＝14.9,4.6Hz,3H),7.21(t,J＝7.1Hz,1H),4.76(dd,J＝15.2,7.3Hz,1H),4.45(dd,J＝9.6,7.5Hz,2H),3.99(dd,J＝9.4,7.4Hz,2H),3.19(d,J＝7.4Hz,2H),2.53-2.52(m,1H)。
实施例72
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2-氧吡咯烷基-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成3-(4-氯-2-硝基苯基)恶唑烷-2-酮
将4-氯-1-氟-2-硝基苯(0.5克,2.9毫摩尔),吡咯烷-2-酮(500毫克,5.7毫摩尔)和碳酸钾(790毫克,5.7毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3.0毫升)中。加热升温到50℃并恒温搅拌15小时后,LCMS监测至反应完全,将反应液冷却至室温。
将反应液缓慢滴加到水(15.0毫升)中,混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(10毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到0.6克黄色固体1-(2-硝基-4-氯苯基)吡咯烷-2-酮(收率：92.0％)。
步骤B：合成1-(2-氨基-4-氯苯基)吡咯烷-2-酮
将1-(2-硝基-4-氯苯基)吡咯烷-2-酮(0.5克,2.0毫摩尔)和醋酸(1.0毫升)溶于甲醇(15.0毫升)中，然后将铁粉(560毫克,10.0毫摩尔)加入反应液中,在50℃下搅拌2小时,LCMS监测至反应完全。
反应液冷却至室温,垫硅藻土过滤,滤饼用乙酸乙酯(10毫升×3次)洗涤,合并滤液及洗涤液,有机相经水和饱和食盐水各洗一次,减压浓缩，残渣经硅胶柱层析纯化得到0.4克黄色液体1-(2-氨基-4-氯苯基)吡咯烷-2-酮(收率：92.0％)。
步骤C：合成2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯
氮气保护下,将1-(2-氨基-4-氯苯基)吡咯烷-2-酮(0.4克,1.9毫摩尔)和吡啶(0.3毫升,2.8毫摩尔)溶于二氯甲烷(5.0毫升)中,冰水浴中搅拌5分钟,向反应液中缓慢滴加草酰氯单甲酯(280毫克,2.3毫摩尔)的二氯甲烷溶液(3.0毫升),冰水浴中搅拌1小时。
向反应液中加水(10.0毫升)淬灭反应,用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相,减压浓缩,所得残余物用硅胶柱层析纯化得到560毫克黄色固体2-((5-氯-2-(2-氧吡咯烷基-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(收率：100.0％)。LCMS：RT＝3.34min,[M-H]-＝295.01。
步骤D：合成2-((5-氯-2-(2-氧杂恶唑烷-3-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸
将2-((5-氯-2-(2-氧吡咯烷基-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(560毫克,1.9毫摩尔)溶于四氢呋喃(12.0毫升)和水(4.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入氢氧化锂一水合物(76毫克,1.9毫摩尔)。在室温下搅拌1小时。
加稀盐酸调节pH至弱酸性,减压浓缩除去大部分溶剂,加稀盐酸调节pH至3,析出大量白色固体,过滤,收集滤饼得到0.5克黄色固体2-((5-氯-2-(2-氧吡咯烷基-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(收率：93％)。LCMS：RT＝3.93min,[M-H]-＝280.98。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2-氧吡咯烷基-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(2-氧吡咯烷基-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(200毫克,0.7毫摩尔),2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(0.4克,1.0毫摩尔)和N,N-二异丙基乙胺(0.3毫升,2.2毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(220毫克,0.64毫摩尔),在室温下搅拌1小时。
向反应液中加水淬灭反应。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相,有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化得到150毫克黄色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2-氧吡咯烷基-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：40.0％)。LCMS：RT＝3.88min,[M-H]-＝603.13。
步骤F：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2-氧吡咯烷基-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2-氧吡咯烷基-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(150毫克,0.25毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中。随后,向上述溶液中加入三氟乙酸(0.5毫升),在室温下搅拌1小时。
将反应液空气浴中减压浓缩。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化,得到43毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(2-氧吡咯烷基-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：32.0％)。LCMS：RT＝3.84min,[M-H]-＝547.08。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.85-12.68(m,1H),10.48(s,1H),9.92(s,1H),9.13(d,J＝8.3Hz,1H),7.97-7.87(m,3H),7.77-7.68(m,2H),7.45(d,J＝8.7Hz,1H),7.41-7.25(m,5H),7.22(dt,J＝9.4,4.2Hz,1H),4.75(dd,J＝14.5,8.1Hz,1H),3.79(t,J＝7.3Hz,2H),3.19(d,J＝7.5Hz,2H),2.53-2.52(m,1H),2.44(t,J＝8.5Hz,2H),2.10(dd,J＝14.5,7.4Hz,2H)。
实施例73
合成(S)-2-(4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯基)乙酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-2-(4-(2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-苯基丙酰胺基)苯基)乙酸叔丁酯
室温条件下，将2-(4-氨基苯基)乙酸叔丁酯(414毫克，2毫摩尔)，(((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)-L-苯丙氨酸(774毫克，2毫摩尔)，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(1.14克，3毫摩尔)，依次加入25毫升圆底烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺4毫升将底物全部溶解，最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.99毫升，6毫摩尔)，室温条件下反应12小时。
反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将乙酸乙酯转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化后得到白色固体粗品2.0克(S)-2-(4-(2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-苯基丙酰胺基)苯基)乙酸叔丁酯，该粗品直接用于下一步反应。
步骤B：合成(S)-2-(4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯基)乙酸叔丁酯
室温条件下，将(S)-2-(4-(2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-苯基丙酰胺基)苯基)乙酸叔丁酯粗品(2.0克)溶于二氯甲烷(9.3毫升)中，再加入4-甲基哌啶(2.32毫升，19.6毫摩尔)，室温条件下反应12小时，TLC监测反应结束后，加入二氯甲烷(50毫升)稀释反应液并转移到分液漏斗中，用饱和碳酸氢钠溶液洗三次(50毫升*4)，剩余的二氯甲烷转移到锥形瓶中，加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)纯化后得到600毫克产物(S)-2-(4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯基)乙酸叔丁酯(收率：86％)。LCMS:RT＝3.09min,[M+H]+＝355.24。
步骤C：合成(S)-2-(4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯基醋酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(91毫克，0.34毫摩尔)，(S)-2-(4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯基)乙酸叔丁酯(121毫克，0.34毫摩尔)，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(194毫克，0.51毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺3毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.17毫升，1.0毫摩尔)，室温条件下反应12小时。
反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升*4)，将乙酸乙酯转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)纯化后得到121毫克产物(S)-2-(4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯基醋酸叔丁酯(收率：59％)。LCMS:RT＝4.19min,[M-H]-＝602.23。
步骤D：合成(S)-2-(4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯基)乙酸
取(S)-2-(4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯基醋酸叔丁酯(100毫克，0.166毫摩尔)加入二氯甲烷(2.5毫升)中，再逐滴加入三氟乙酸(0.5毫升，6.7毫摩尔)，室温条件下反应四小时，反应结束后直接浓缩蒸干得到白色固体，白色固体用二氯甲烷洗三次，过滤后得到26毫克产物，二氯甲烷母液浓缩后得到40毫克粗品。LCMS:RT＝3.64min,[M-H]-＝546.18。
实施例74
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(甲基氨基甲酰基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-氨基-4-氯-N-甲基苯甲酰胺
取2-氨基-4-氯苯甲酸(1.71克，10毫摩尔)加入四氢呋喃(10毫升)中，再加入N,N'-羰基二咪唑(1.82克，11毫摩尔)，室温条件下反应1小时，1小时后，逐滴加入30％的甲胺甲醇溶液(2.24毫升，20毫摩尔)，反应12小时后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗1次，乙酸乙酯溶液用无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析纯化分离(正己烷/乙酸乙酯＝1/1)，得到1.0克产物(收率：54％)。LCMS:RT＝3.03min,[M+H]+＝185.09。
步骤B：合成2-((5-氯-2-(甲基氨基甲酰基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
将2-氨基-4-氯-N-甲基苯甲酰胺(1.0克，5.4毫摩尔)溶解于二氯甲烷(10.8毫升)中，加入吡啶(0.87毫升，10.8毫摩尔)，冰水浴条件下，逐滴加入草酰氯单甲酯(0.6毫升，6.5毫摩尔)，加入完成后逐渐升至室温反应一小时。
反应结束后，加入二氯甲烷稀释反应液，用饱和氯化铵溶液洗一次，二氯甲烷溶液用无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析纯化分离(正己烷/乙酸乙酯＝1/1)，得到600毫克产物(收率：41％)。LCMS:RT＝3.33min,[M+H]+＝271.09。
步骤B：合成2-((5-氯-2-(甲基氨基甲酰基)苯基)氨基)-2-氧乙酸
将2-((5-氯-2-(甲基氨基甲酰基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(250毫克，0.92毫摩尔)溶解于四氢呋喃/水的混合溶液中(12毫升/6毫升)中，加入氢氧化锂(39毫克，0.92毫摩尔)。
反应结束后，加入二氯甲烷稀释反应液，水相用2N的盐酸溶液调Ph至2-3，二氯甲烷萃取三次，浓缩后得到56毫克白色固体，粗品直接投下一步反应。LCMS:RT＝3.00min,[M-H]-＝255.07。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(甲基氨基甲酰基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-(甲基氨基甲酰基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(56毫克，0.218毫摩尔)，(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(74毫克，0.218毫摩尔)，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(125毫克，0.33毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺2毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.1毫升，0.65毫摩尔)，室温条件下反应2小时。
反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将乙酸乙酯层转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化后得到30毫克产物(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(甲基氨基甲酰基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：22％)。LCMS:RT＝4.34min,[M+H]+＝579.15。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(甲基氨基甲酰基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(甲基氨基甲酰基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(30毫克，0.05毫摩尔)加入二氯甲烷(2.5毫升)中，再逐滴加入三氟乙酸(0.4毫升，5.4毫摩尔)，室温条件下反应四小时，反应结束后直接浓缩蒸干得到白色固体，白色固体用二氯甲烷洗三次，过滤后得到12.9毫克产物。LCMS:RT＝3.69min,[M-H]-＝521.15,1H NMR(400MHz,DMSO)δ(ppm)12.79(s,1H),12.74(s,1H),10.45(s,1H),9.09(d,J＝6.4Hz,1H),8.08(d,J＝3.6Hz,1H),8.06(d,J＝2.4Hz,1H),7.92(d,J＝6.8Hz,2H),7.79(d,J＝6.8Hz,1H),7.72(d,J＝6.8Hz,2H),7.42-7.22(m,5H),7.29(t,J＝6.0Hz,1H),4.78-4.70(m,1H),3.25-3.15(m,2H),2.77(d,J＝4.0Hz,3H)。
实施例75
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
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具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-(((叔丁氧羰基)氨基)-3.-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯
将(叔丁氧羰基)-L-苯丙氨酸(300毫克，0.75毫摩尔)和4-氨基苯甲酸甲酯(95毫克，0.62毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(358毫克,0.94毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(162毫克，1.2毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
将反应液缓慢滴加到饱和氯化铵溶液(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(15毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到300毫克黄色油状(S)-4-(2-(((叔丁氧羰基)氨基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯(收率：120％)。MS(ESI)M/Z：399.18[M+H]+。
步骤B：合成(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯盐酸盐
将(S)-4-(2-(((叔丁氧羰基)氨基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯(300毫克，0.75毫摩尔)溶于乙酸乙酯(4毫升)。随后，向上述溶液中加入盐酸乙酸乙酯溶液(2摩尔/升，4毫升,)。在室温下搅拌4小时。
将反应液减压浓缩。得到150毫油状物(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯盐酸盐(收率：59.0％)。MS(ESI)M/Z：299.18[M+H]+。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯
将(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯盐酸盐(100毫克，0.33毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(98毫克，0.33毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入50％质量分数的1-丙基磷酸酐N,N-二甲基甲酰胺溶液(523毫克,1.68毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(129毫克，1.01毫摩尔)，在室温下搅拌4个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(20毫升)。混合液用乙酸乙酯(25毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到120毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯(收率：67.0％)。MS(ESI)M/Z：548.15[M+H]+。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯(50毫克，91微摩尔)溶于四氢呋喃/水(2/1，3毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化锂(8.3毫克,0.18毫摩尔)，在室温下搅拌3个小时。
向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液，调pH至3。混合液用乙酸乙酯(150毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(100毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到18毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：36.9％)。MS(ESI)M/Z：534.22[M+H]+。
实施例76
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(吡啶-4-基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(吡啶-4-基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯
将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(吡啶-4-基)丙酸(400毫克，1.5毫摩尔)和4-氨基苯甲酸甲酯(206毫克，1.37毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入1-丙基磷酸酐N,N-二甲基甲酰胺溶液(1.28克,4.1毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(264毫克，2.06毫摩尔)，在室温下搅拌3个小时。
将反应液缓慢滴加到饱和氯化铵溶液(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(15毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)得到220毫克黄色油状(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(吡啶-4-基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯(收率：40.0％)。MS(ESI)M/Z：400.04[M+H]+。
步骤B：合成(S)-4-(2-氨基-3-(吡啶-4-基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯盐酸盐
将(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(吡啶-4-基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯(220毫克，0.37毫摩尔)溶于乙酸乙酯(4毫升)。随后，向上述溶液中加入盐酸乙酸乙酯溶液(2摩尔/升，4毫升,)。在室温下搅拌4小时。
将反应液减压浓缩。得到190毫油状物(S)-4-(2-氨基-3-(吡啶-4-基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯盐酸盐(收率：92.6％)。MS(ESI)M/Z：300.13[M+H]+。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(吡啶-4-基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯
将(S)-4-(2-氨基-3-(吡啶-4-基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯盐酸盐(100毫克，0.66毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(196毫克，0.73毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入50％质量分数的1-丙基磷酸酐N,N-二甲基甲酰胺溶液(834毫克,2.6毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(337毫克，2.67毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(50毫升)。混合液用乙酸乙酯(25毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝100/0)。得到50毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(吡啶-4-基)丙酰胺基)苯甲酸甲酯(收率：34.0％)。MS(ESI)M/Z：549.21[M+H]+。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(吡啶-4-基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯(50毫克，91微摩尔)溶于四氢呋喃/水(2/1，3毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化锂(7.6毫克,0.18毫摩尔)，在室温下搅拌3个小时。
向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液，调pH至3。有大量固体析出，过滤，用水洗涤。滤饼干燥得到15.9毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(吡啶-4-基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：32.6％)。MS(ESI)M/Z：533.22[M-H]-。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.78(s,1H),10.78(s,1H),10.68(s,1H),9.81(s,1H),9.27(d,J＝8.6Hz,1H),8.80(d,J＝6.1Hz,2H),7.92(d,J＝8.9Hz,4H),7.75(t,J＝8.5Hz,3H),7.62(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),4.90(td,J＝10.3,4.0Hz,1H),3.71(d,J＝89.9Hz,2H)。
实施例77
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-氰基苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((5-氯-2-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯
将2-氨基-4-氯苄腈(300毫克，1.97毫摩尔)和2-氯-2-氧代乙酸甲酯(361毫克，2.95毫摩尔)溶于二氯甲烷(10.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入三乙胺(394毫克,3.94毫摩尔)，在室温下搅拌2个小时。
将反应液缓慢滴加到饱和氯化铵溶液(20毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(15毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到460毫克黄色油状2-((5-氯-2-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(收率：98.0％)。MS(ESI)M/Z：239.01[M+H]+。
步骤B：合成2-((5-氯-2-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸
将(2-((5-氯-2-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(460毫克，1.93毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(2/1，15毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化锂(161毫克,3.86毫摩尔)，在室温下搅拌1个小时。
向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液，调pH至3。混合液用乙酸乙酯(150毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(100毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到250毫克白色固体2-((5-氯-2-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸(收率：57.7％)。MS(ESI)M/Z：223.20[M-H]-。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将2-((5-氯-2-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸(101毫克，0.45毫摩尔)和(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯盐酸盐(200毫克，0.41毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入50％质量分数的1-丙基磷酸酐N,N-二甲基甲酰胺溶液(513毫克,1.63毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(159毫克，1.23毫摩尔)，在室温下搅拌5个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(50毫升)。混合液用乙酸乙酯(25毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/5)。得到100毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：44.0％)。MS(ESI)M/Z：547.20[M+H]+。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-氰基苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(80毫克，146微摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1毫升)，在室温下搅拌3个小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用乙酸乙酯10(毫升)打浆，过滤。得到20毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-氰基苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：27.8％)。MS(ESI)M/Z：489.10[M-H]-。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.75(s,1H),10.87(s,1H),10.51(s,1H),9.20(d,J＝8.2Hz,1H),7.92(dd,J＝8.6,3.7Hz,3H),7.79(d,J＝1.9Hz,1H),7.71(d,J＝8.7Hz,2H),7.53(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),7.36-7.24(m,4H),7.20(t,J＝7.1Hz,1H),4.78(dd,J＝15.1,7.4Hz,1H),3.19(d,J＝7.2Hz,2H).
实施例78
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-甲基丁酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酰氨基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酸(1.72克，3.98毫摩尔)和4-氨基苯甲酸甲酯(700毫克，3.6毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(15.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(2.07克,5.43毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(936毫克，7.24毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
将反应液缓慢滴加到饱和氯化铵溶液(100毫升)中。混合液用乙酸乙酯(40毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(30毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到1.8克黄色固体(S)-4-(2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酰氨基)苯甲酸叔丁酯(收率：81.8％)。MS(ESI)M/Z：608.23[M+H]+。
步骤B：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-硝基苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(4-硝基苯基)丙酰氨基)苯甲酸叔丁酯(1.8克，2.9毫摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升)。随后，向上述溶液中加入4-甲基哌啶(1毫升,)。在室温下搅拌18小时。
将反应液缓慢滴加到饱和氯化铵溶液(20毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(15毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到1.0克白色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-硝基苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：87.0％)。MS(ESI)M/Z：386.20[M+H]+。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-硝基苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-氨基-3-(4-硝基苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(1.0克，2.6毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(764毫克，2.8毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入50％质量分数的1-丙基磷酸酐N,N-二甲基甲酰胺溶液(3.2克,5.2毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(1.1克，7.6毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到400毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-硝基苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：25.0％)。MS(ESI)M/Z：635.21[M+H]+。
步骤D：合成(S)-4-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-硝基苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(400毫克，1.57毫摩尔)溶于乙酸乙酯(20毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入10％质量分数的湿Pd/C(80毫克)，在氢气球的条件下室温搅拌18个小时。
将反应液过滤，滤饼用乙酸乙酯(50毫升)洗涤，滤液减压浓缩。得到300毫克黄色油状物(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：78.0％)。MS(ESI)M/Z：605.20[M+H]+。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-甲基丁二胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
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将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(100毫克，0.49毫摩尔)和吡啶(78毫克，0.99毫摩尔)溶于二氯甲烷(10.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入3-甲基丁酰氯(89毫克,0.74毫摩尔)，在室温下搅拌5个小时。
向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(15毫升)。混合液用乙酸乙酯(15毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到50毫克棕色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-甲基丁二胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：44.0％)。MS(ESI)M/Z：689.33[M+H]+。
步骤F：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-甲基丁酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-甲基丁二胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(50毫克，72微摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1毫升)，在室温下搅拌4个小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用甲醇(3毫升)打浆，过滤，得到18.9毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-甲基丁酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：41.0％)。MS(ESI)M/Z：633.20[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.71(s,1H),10.45(s,1H),9.87-9.69(m,2H),8.91(d,J＝7.9Hz,1H),7.97(d,J＝2.2Hz,1H),7.90(d,J＝8.7Hz,2H),7.76(d,J＝8.6Hz,1H),7.68(d,J＝8.7Hz,2H),7.60(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H),7.48(d,J＝8.5Hz,2H),7.17(d,J＝8.5Hz,2H),4.67(dd,J＝14.8,7.2Hz,1H),3.08(d,J＝7.0Hz,2H),2.18-1.98(m,3H),0.87(dd,J＝28.4,7.6Hz,6H).
实施例79
合成(S)-4-(2-(2-(((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯
将3-氯-2-氟苯胺(300毫克，2毫摩尔)溶于二氯甲烷(10.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入2-氯-2-氧代乙酸甲酯(376毫克，3.0毫摩尔)和三乙胺(413毫克，4.1毫摩尔)。在室温下搅拌2小时。
向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(15毫升)。混合液用乙酸乙酯(15毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到280毫克棕色油状物2-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(收率：60.0％)。
步骤B：合成2-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-氧乙酸
将2-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(280毫克，1.2毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(2/1，9毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化锂(11毫克，1.3毫摩尔)。在室温下搅拌0.5个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(15毫升)。混合液用乙酸乙酯(15毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到180毫克白色固体2-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-氧乙酸(收率：66.0％)。MS(ESI)M/Z：216.00[M-H]-。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-(((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将2-((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-氧乙酸(70毫克，0.32毫摩尔)和(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(187毫克，0.38毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(183毫克，0.48毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(83毫克，0.64毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(20毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到40毫克无色油状物(S)-4-(2-(2-(((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：23.0％)。MS(ESI)M/Z：540.25[M+H]+。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-(((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-(((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(40毫克，0.07毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。用甲醇(3毫升)打浆，过滤得27.4毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((3-氯-2-氟苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：76.4％)。MS(ESI)M/Z：482.10[M-H]-。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.75(s,1H),10.49(d,J＝10.3Hz,2H),9.11(d,J＝8.2Hz,1H),7.92(d,J＝8.6Hz,2H),7.71(d,J＝8.6Hz,2H),7.55(t,J＝7.2Hz,1H),7.47(t,J＝7.0Hz,1H),7.38-7.16(m,6H),4.77(dd,J＝15.2,7.4Hz,1H),3.18(d,J＝7.1Hz,2H)。
实施例80
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-甲基哌嗪-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(30毫克，49微摩尔)溶于四氢呋喃(3毫升)溶液中。随后，向上述溶液中加入氯甲酸苯酯(15.5毫克，99微摩尔)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。得到37毫克固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：103％)。MS(ESI)M/Z：725.22[M+H]+。
步骤B：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-哌嗪-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(37毫克，0.51毫摩尔)和1-甲基哌嗪(10.2毫克，0.10毫摩尔)溶于乙腈(5.0毫升)的溶液中。在50摄氏度下搅拌3个小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用甲醇(3毫升)打浆，过滤。得到31毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-哌嗪-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：96.0％)。MS(ESI)M/Z：731.31[M+H]+。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-甲基哌嗪-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-哌嗪-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(31毫克，0.028毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用乙酸乙酯(3毫升)打浆，过滤，得到22.5毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-甲基哌嗪-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：76.0％)。MS(ESI)M/Z：675.21[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO)δ10.96(s,1H),10.68(d,J＝30.2Hz,2H),9.83(s,1H),8.87(d,J＝8.3Hz,1H),8.77(s,1H),7.96(d,J＝2.3Hz,1H),7.90(d,J＝8.7Hz,2H),7.73(dd,J＝20.4,8.7Hz,3H),7.60(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H),7.36(d,J＝8.5Hz,2H),7.15(d,J＝8.5Hz,2H),4.69(dd,J＝14.2,7.9Hz,1H),4.20(s,2H),3.08(d,J＝6.3Hz,3H),2.96(s,3H),2.69(d,J＝23.7Hz,3H)。
实施例81
合成(S)-4-(3-(4-苯甲酰胺基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(3-(4-苯甲酰胺基苯基)-2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(30毫克，49微摩尔)溶于二氯甲烷(3毫升)溶液中。随后，向上述溶液中加入苯甲酰氯(8.3毫克，59微摩尔)和吡啶(5毫克，59微摩尔)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。得到30毫克固体(S)-4-(3-(4-苯甲酰胺基苯基)-2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：121％)。MS(ESI)M/Z：709.22[M+H]+。
步骤B：合成(S)-4-(3-(4-苯甲酰胺基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(3-(4-苯甲酰胺基苯基)-2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(30毫克，0.042毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用甲醇(3毫升)打浆，过滤，得到18毫克白色固体(S)-4-(3-(4-苯甲酰胺基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：56.0％)。MS(ESI)M/Z：653.16[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.74(s,1H),10.71(s,1H),10.48(s,1H),10.19(s,1H),9.82(s,1H),8.95(d,J＝8.1Hz,1H),8.01-7.87(m,4H),7.76(d,J＝8.6Hz,1H),7.69(t,J＝8.8Hz,3H),7.63-7.48(m,3H),7.25(d,J＝8.5Hz,2H),4.71(dd,J＝14.8,7.1Hz,1H),3.13(d,J＝7.0Hz,2H).
实施例82
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-(4-氯-2-硝基苯基)-3,3-二氟氮杂环丁烷
将4-氯-1-氟-2-硝基苯(500毫克，2.8毫摩尔)和3,3-二氟氮杂环丁烷(318毫克，3.4毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)溶液中。随后，向上述溶液中加入碳酸钾(787毫克，5.8毫摩尔)。在50摄氏度下搅拌4小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(50毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到650毫克无色油状物1-(4-氯-2-硝基苯基)-3,3-二氟氮杂环丁烷(收率：91.2％)。MS(ESI)M/Z：249.02[M+H]+。
步骤B：合成5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯胺
将1-(4-氯-2-硝基苯基)-3,3-二氟氮杂环丁烷(650毫克，2.6毫摩尔)溶于乙酸乙酯(15毫升)中。随后，向上述溶液中加入二水合氯化亚锡(5.6毫克，26毫摩尔)。在室温下搅拌18小时。
向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(100毫升)。混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到600毫克无色油状物5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯胺(收率：105％)。MS(ESI)M/Z：219.10[M+H]+。
步骤C：合成2-((5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
将5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯胺(600毫克，2.7毫摩尔)溶于二氯甲烷(10.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入2-氯-2-氧代乙酸甲酯(403毫克，3.2毫摩尔)和吡啶(434毫克，5.5毫摩尔)。在室温下搅拌2小时。
向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(15毫升)。混合液用乙酸乙酯(15毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)，得到320毫克无色油状物2-((5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(收率：38.5％)。MS(ESI)M/Z：305.10[M+H]+。
步骤D：合成2-((5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸
将2-((5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(320毫克，1毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(2/1，15毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化锂(88毫克，2.1毫摩尔)。在室温下搅拌3个小时。
向反应液中加入1M盐酸，调pH值至3。混合液用乙酸乙酯(25毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到21毫克白色固体2-((5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(收率：68.7％)。MS(ESI)M/Z：289.10[M-H]-。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将合成2-((5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(100毫克，0.34毫摩尔)和(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(106毫克，0.31毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(178毫克，0.47毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(80毫克，0.62毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(25毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到38毫克无色油状物(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：20.0％)。MS(ESI)M/Z：613.20[M+H]+。
步骤F：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(38毫克，0.06毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。用甲醇(3毫升)打浆，过滤得12.2毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：35.3％)。MS(ESI)M/Z：557.10[M+H]+。
实施例83
合成(S)-4-(2-(2-(((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯
将3-氨基-5-氯苄腈(1.0克，6.5毫摩尔)溶于二氯甲烷(10.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入2-氯-2-氧代乙酸甲酯(1.2克，9.6毫摩尔)和吡啶(868毫克，11毫摩尔)。在室温下搅拌2小时。
向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(50毫升)。混合液用乙酸乙酯(25毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)，得到1.4克无色油状物2-((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(收率：91.2％)。MS(ESI)M/Z：239.01[M+H]+。
步骤B：合成2-((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸
将2-((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(1.42克，5.9毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(2/1，15毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化锂(284毫克，11.8毫摩尔)。在室温下搅拌1个小时。
向反应液中加入1M盐酸，调溶液pH值至3。混合液用乙酸乙酯(25毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到839毫克白色固体2-((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸(收率：63.7％)。MS(ESI)M/Z：223.10[M-H]-。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-(((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将2-((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸(100毫克，0.44毫摩尔)和(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(137毫克，0.4毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(230毫克，0.6毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(104毫克，0.8毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(25毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到75毫克无色油状物(S)-4-(2-(2-(((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：33.9％)。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-(((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-(((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(75毫克，0.13毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。用甲醇(3毫升)打浆，过滤得63.5毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：94.2％)。MS(ESI)M/Z：547.20[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.75(s,1H),10.52(s,1H),10.34(s,1H),9.22(d,J＝8.3Hz,1H),8.24(d,J＝1.7Hz,1H),7.91(d,J＝8.7Hz,2H),7.76(ddd,J＝18.4,17.2,8.5Hz,3H),7.37-7.24(m,3H),7.20(t,J＝7.2Hz,1H),4.78(dd,J＝15.1,7.4Hz,1H),3.19(d,J＝7.2Hz,2H).
实施例84
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(异烟酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(异烟酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(70毫克，115微摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升)溶液中。随后，向上述溶液中加入异烟酰氯(19毫克，138微摩尔)和吡啶(18毫克，231微摩尔)。在室温下搅拌3小时。
将反应液过滤，滤饼用二氯甲烷(10毫升)洗涤，干燥。得到55毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(异烟酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：67.5％)。LCMS：RT＝3.91min，[M+H]+＝710.22。
步骤B：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(异烟酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(异烟酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(55毫克，0.077毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用甲醇(3毫升)打浆，过滤，得到23.7毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(异烟酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：46.0％)。LCMS：RT＝3.28min，[M+H]+＝654.24。1H NMR(500MHz,DMSO)δ10.70(s,1H),10.47(d,J＝4.9Hz,2H),9.81(s,1H),8.95(d,J＝8.2Hz,1H),8.79(d,J＝5.7Hz,2H),7.96(d,J＝2.2Hz,1H),7.89(dd,J＝9.5,7.4Hz,4H),7.78-7.72(m,1H),7.72-7.57(m,5H),7.27(d,J＝8.4Hz,2H),4.71(dd,J＝14.4,7.9Hz,1H),3.20-3.06(m,3H),1.99(dd,J＝17.4,7.6Hz,1H),1.16(t,J＝7.1Hz,1H),0.84(t,J＝6.8Hz,1H).
实施例85
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(烟酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(烟酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(70毫克，115微摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升)溶液中。随后，向上述溶液中加入异烟酰氯(19毫克，138微摩尔)和吡啶(18毫克，231微摩尔)。在室温下搅拌3小时。
将反应液过滤，滤饼用二氯甲烷(10毫升)洗涤，干燥。得到62毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(烟酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：75.4％)。LCMS：RT＝3.93min，[M+H]+＝710.22。
步骤B：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(烟酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(烟酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(62毫克，0.086毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用甲醇(3毫升)打浆，过滤，得到30.1毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(烟酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：52.6％)。LCMS：RT＝3.30min，[M+H]+＝654.20。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.70(s,1H),10.47(s,1H),10.38(s,1H),9.81(s,1H),9.08(d,J＝2.1Hz,1H),8.95(d,J＝8.3Hz,1H),8.74(dd,J＝4.8,1.6Hz,1H),8.27(d,J＝8.0Hz,1H),7.97(d,J＝2.3Hz,1H),7.90(d,J＝8.7Hz,2H),7.79-7.73(m,1H),7.72-7.52(m,6H),7.26(d,J＝8.5Hz,2H),4.71(dd,J＝14.6,7.8Hz,1H),3.13(d,J＝7.0Hz,3H),1.99(dd,J＝14.7,7.0Hz,2H),0.84(t,J＝6.8Hz,1H).
实施例86
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(吡啶并氨基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(吡啶并氨基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
/>
将(S)-4-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(70毫克，115微摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升)溶液中。随后，向上述溶液中加入异烟酰氯(19毫克，138微摩尔)和吡啶(18毫克，231微摩尔)。在室温下搅拌3小时。
将反应液过滤，滤饼用二氯甲烷(10毫升)洗涤，干燥。得到90毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(吡啶并氨基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：109％)。LCMS：RT＝3.92min，[M+H]+＝710.22。
步骤B：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(吡啶并氨基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(吡啶并氨基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(90毫克，0.126毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用甲醇(3毫升)打浆，过滤，得到18.8毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(吡啶并氨基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：22.0％)。LCMS：RT＝3.58min，[M+H]+＝654.44。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.69(s,1H),10.56(s,1H),10.47(s,1H),9.81(d,J＝3.6Hz,1H),8.97(d,J＝8.2Hz,1H),8.72(d,J＝4.3Hz,1H),8.14(d,J＝7.8Hz,1H),8.05(td,J＝7.7,1.6Hz,1H),7.96(dd,J＝6.0,2.3Hz,1H),7.90(t,J＝6.8Hz,2H),7.83-7.72(m,3H),7.67(ddd,J＝8.5,7.5,5.0Hz,3H),7.59(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.26(d,J＝8.5Hz,2H),4.70(dd,J＝15.0,7.2Hz,1H),3.13(d,J＝7.0Hz,2H),1.99(dd,J＝14.6,6.9Hz,1H),0.84(t,J＝6.9Hz,1H).
实施例87
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-氧代吗啉代)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
/>
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸(5.0克，14.5毫摩尔)和4-氨基苯甲酸叔丁酯(2.55克，13.2毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(55.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(7.5克，19.8毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(3.4克，26.4毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(250毫升)。混合液用乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(30毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/10)。得到7克无色油状物(S)-4-(2-(2-(((3-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：100％)。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(3-氧代吗啉代)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(400毫克，0.77毫摩尔)和3-吗啉酮(155毫克，1.54毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入碳酸铯(501毫克，1.54毫摩尔)，N1，N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(136毫克，1.54毫摩尔)，碘化亚铜(146毫克，0.77毫摩尔)。在100摄氏度下搅拌18小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(10毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到220毫克棕色固体(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(3-氧代吗啉代)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：53.4％)。LCMS：RT＝3.90min，[M+H]+＝540.25。
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(3-氧代吗啉代)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(3-氧代吗啉代)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(220毫克，0.4毫摩尔)溶于乙酸乙酯(3.2毫升)中。随后，向上述溶液中加入2摩尔/升的盐酸乙酸乙酯溶液(0.8毫升,1.6毫摩尔)。在室温下搅拌18小时。
向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(10毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到90毫克棕色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(3-氧代吗啉代)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：53.0％)。LCMS：RT＝2.65min，[M+H]+＝440.25。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-羟基吗啉代)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-氨基-3-(4-(3-氧代吗啉代)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(90毫克，0.2毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(60毫克，0.22毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(205毫克，0.3毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(52毫克，0.4毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(10毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到92毫克无色油状物(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-羟基吗啉代)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：65.2％)。LCMS：RT＝3.83min，[M+H]+＝688.25。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-羟基吗啉代)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-羟基吗啉代)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(92毫克，0.13毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化得到11.2毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-羟基吗啉代)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：13.5％)。LCMS：RT＝3.29min，[M+H]+＝633.22。LCMS：RT＝3.29min，[M+H]+＝633.22。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.69(s,1H),10.60(s,1H),9.81(s,1H),9.01(d,J＝8.3Hz,1H),7.97-7.93(m,1H),7.90(d,J＝8.7Hz,1H),7.73(dd,J＝16.4,8.7Hz,2H),7.60(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.31(s,2H),4.72(d,J＝7.6Hz,2H),3.99-3.89(m,2H),3.73-3.64(m,2H),3.16(d,J＝6.9Hz,2H).
实施例88
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(吗啉-4-甲酰胺基)基)苯基)丙酰氨基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(吗啉-4-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
/>
将叔丁基(S)-4-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸酯(70毫克，115微摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升)溶液中。随后，向上述溶液中加入异烟酰氯(22毫克，138微摩尔)和吡啶(18毫克，231微摩尔)。在室温下搅拌3小时。
将反应液过滤，滤饼用二氯甲烷(10毫升)洗涤，干燥。得到82毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(吗啉-4-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：100％)。LCMS：RT＝3.73min，[M+H]+＝717.20。
步骤B：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(吗啉-4-甲酰胺基)基)苯基)丙酰氨基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(吗啉-4-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(82毫克，0.11毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用甲醇(3毫升)打浆，过滤，得到31毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(吗啉-4-甲酰胺基)基)苯基)丙酰氨基)苯甲酸(收率：40.5％)。LCMS：RT＝3.30min，[M+H]+＝662.20。1HNMR(300MHz,DMSO)δ12.68(s,1H),10.70(s,1H),10.45(s,1H),9.81(s,1H),8.89(d,J＝8.2Hz,1H),8.44(s,1H),7.93(dd,J＝20.8,5.5Hz,3H),7.65(ddd,J＝15.8,11.0,5.5Hz,4H),7.34(d,J＝8.5Hz,2H),7.11(d,J＝8.5Hz,2H),4.65(dd,J＝14.9,7.2Hz,1H),3.64-3.53(m,4H),3.43-3.35(m,4H),3.06(d,J＝6.6Hz,2H)。
实施例89
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将叔丁基(S)-4-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸酯(70毫克，115微摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升)溶液中。随后，向上述溶液中加入1-哌啶酰氯(20毫克，138微摩尔)和吡啶(18毫克，231微摩尔)。在室温下搅拌3小时。
将反应液过滤，滤饼用二氯甲烷(10毫升)洗涤，干燥。得到41毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：100％)。LCMS：RT＝3.91min，[M+H]+＝715.20
步骤B：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(41毫克，0.057毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用甲醇(3毫升)打浆，过滤，得到17.3毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(哌啶-1-甲酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：45.3％)。LCMS：RT＝3.55min，[M+H]+＝660.22。1HNMR(500MHz,DMSO)δ12.66(s,1H),10.70(s,1H),10.45(s,1H),9.83(d,J＝18.8Hz,1H),8.87(d,J＝8.2Hz,1H),8.33(s,1H),7.97(d,J＝2.3Hz,1H),7.90(d,J＝8.7Hz,2H),7.75(d,J＝8.6Hz,1H),7.68(d,J＝8.7Hz,2H),7.62-7.57(m,1H),7.33(d,J＝8.5Hz,2H),7.10(d,J＝8.5Hz,2H),4.66(dd,J＝14.9,7.2Hz,1H),3.37(dd,J＝11.5,6.1Hz,4H),3.05(d,J＝6.9Hz,2H),1.98(dt,J＝12.4,6.9Hz,1H),1.61-1.52(m,2H),1.51-1.38(m,4H),1.22(s,4H)。
实施例90
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(68毫克，0.093毫摩尔)和盐酸哌啶-4-甲腈(27毫克，0.18毫摩尔)溶于乙腈(5.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(39毫克，0.3毫摩尔)在室温下搅拌5小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(10毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到22毫克无色油状物(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：35.4％)。LCMS：RT＝3.85min，[M+H]+＝740.21
步骤B：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(22毫克，0.029毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用乙酸乙酯(3毫升)打浆，过滤，得到3.9毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-氰基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：20.0％)。LCMS：RT＝3.40min，[M+H]+＝685.21
实施例91
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-异丙基哌嗪-2-酮
将哌嗪-2-酮(500毫克，5毫摩尔)和丙酮(580毫克，10毫摩尔)溶于甲醇(10毫升)中.随后向上述溶液中加入醋酸(0.5毫升)和氰基硼氢化钠(627毫克，10毫摩尔)。在50摄氏度下搅拌18小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到250毫克棕色固体4-异丙基哌嗪-2-酮(收率：23.1％)。LCMS：RT＝0.83min，[M+H]+＝143.11。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(300毫克，0.57毫摩尔)和4-异丙基哌嗪-2-酮(164毫克，1.14毫摩尔)溶于甲苯(15.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入碳酸铯(376毫克，1.14毫摩尔)，N1，N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(101毫克，1.14毫摩尔)，碘化亚铜109毫克，0.57毫摩尔)。在110摄氏度下搅拌18小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(10毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到180毫克棕色固体(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：31.8％)。LCMS：RT＝3.53min，[M+H]+＝580.33。
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(180毫克，0.31毫摩尔)溶于乙酸乙酯(2.5毫升)中。随后，向上述溶液中加入2摩尔/升的盐酸乙酸乙酯溶液(0.6毫升,1.2毫摩尔)。在室温下搅拌4小时。
向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(10毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到70毫克棕色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：47.0％)。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(70毫克，0.14毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(50毫克，0.18毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(85毫克，0.22毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(40毫克，0.3毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(10毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到70毫克无色油状物(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：66.3％)。LCMS：RT＝3.50min，[M+H]+＝729.33。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(70毫克，0.09毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化得到5.1毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：8.2％)。LCMS：RT＝2.84min，[M+H]+＝674.27。
实施例92
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(环丙基甲基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸三氟乙酸盐
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(环丙基甲基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
/>
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(300毫克，0.57毫摩尔)和4-(环丙基甲基)哌嗪-2-酮(178毫克，1.14毫摩尔)溶于甲苯(15.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入碳酸铯(376毫克，1.14毫摩尔)，N1，N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(101毫克，1.14毫摩尔)，碘化亚铜109毫克，0.57毫摩尔)。在110摄氏度下搅拌18小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(10毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到260毫克棕色固体(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(环丙基甲基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：45.2％)。LCMS：RT＝3.63min，[M+H]+＝592.21。
步骤B：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(环丙基甲基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(环丙基甲基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(260毫克，0.44毫摩尔)溶于乙酸乙酯(3.5毫升)中。随后，向上述溶液中加入2摩尔/升的盐酸乙酸乙酯溶液(0.87毫升,1.7毫摩尔)。在室温下搅拌4小时。
向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(10毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到40毫克棕色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(环丙基甲基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：18.3％)。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(环丙基甲基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(环丙基甲基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(40毫克，0.08毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(24毫克，0.09毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(46毫克，0.12毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(21毫克，0.16毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(10毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到40毫克无色油状物(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-异丙基-2-氧代哌嗪-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：65.0％)。LCMS：RT＝3.52min，[M+H]+＝741.28。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(环丙基甲基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(环丙基甲基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(40毫克，0.05毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化得到34毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(环丙基甲基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸三氟乙酸盐(收率：92.4％)。LCMS：RT＝2.92min，[M+H]+＝685.27。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.78(s,1H),10.72(s,1H),10.48(s,1H),9.82(s,1H),9.04(d,J＝8.1Hz,1H),7.95(d,J＝2.3Hz,1H),7.91(d,J＝8.7Hz,2H),7.76(d,J＝8.6Hz,1H),7.69(d,J＝8.8Hz,2H),7.61(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.34(d,J＝8.5Hz,2H),7.27(d,J＝8.5Hz,2H),5.75(s,1H),4.72(dd,J＝14.2,7.9Hz,1H),3.18(d,J＝6.7Hz,3H),1.12(d,J＝16.1Hz,1H),0.66(d,J＝6.8Hz,2H),0.39(s,2H)。
实施例93
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸三氟乙酸盐
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(4-甲基环己基)哌嗪-2-酮
将哌嗪-2-酮(500毫克，5毫摩尔)和4-甲氧基环己-1-酮(1.28克，10毫摩尔)溶于甲醇(10毫升)中.随后向上述溶液中加入醋酸(0.5毫升)和氰基硼氢化钠(627毫克，10毫摩尔)。在50摄氏度下搅拌18小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到100毫克棕色固体4-(4-甲基环己基)哌嗪-2-酮(收率：10.7％)。LCMS：RT＝0.95min，[M+H]+＝213.15。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(500毫克，1毫摩尔)和4-(4-甲基环己基)哌嗪-2-酮(170毫克，0.8毫摩尔)溶于甲苯(15.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入碳酸铯(522毫克，1.6毫摩尔)，N1，N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(141毫克，1.6毫摩尔)，碘化亚铜109毫克，0.8毫摩尔)。在110摄氏度下搅拌18小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(30毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到280毫克棕色固体(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：53.6％)。LCMS：RT＝3.65min，[M+H]+＝650.13。
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
/>
将(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(280毫克，0.43毫摩尔)溶于乙酸乙酯(16毫升)中。随后，向上述溶液中加入2摩尔/升的盐酸乙酸乙酯溶液(4毫升)。在室温下搅拌4小时。
将反应液减压浓缩。得到200毫克棕色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：84.2％)。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(200毫克，0.36毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(116毫克，0.43毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(207毫克，0.54毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(94毫克，0.72毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(20毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到150毫克无色油状物(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：55.1％)。LCMS：RT＝3.60min，[M+H]+＝799.21。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(150毫克，0.18毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化得到33毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸三氟乙酸盐(收率：23.5％)。LCMS：RT＝2.89min，[M+H]+＝744.29。1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.72(s,1H),10.48(s,1H),9.84(d,J＝12.6Hz,1H),9.05(d,J＝8.1Hz,1H),7.93(dd,J＝17.5,5.5Hz,3H),7.76(d,J＝8.6Hz,1H),7.68(d,J＝8.8Hz,2H),7.62(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),7.34(d,J＝8.5Hz,2H),7.27(d,J＝8.5Hz,2H),4.72(dd,J＝14.2,8.0Hz,1H),3.23(d,J＝8.0Hz,3H),2.10(s,2H),1.85(s,1H),1.65(s,1H),1.44(dd,J＝31.0,16.6Hz,3H),1.27-1.10(m,2H)。
实施例94
合成4-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-((2S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(500毫克，1毫摩尔)和4-(4-甲基环己基)哌嗪-2-酮(103毫克，0.8毫摩尔)溶于甲苯(15.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入碳酸铯(522毫克，1.6毫摩尔)，N1，N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(141毫克，1.6毫摩尔)，碘化亚铜109毫克，0.8毫摩尔)。在110摄氏度下搅拌18小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(30毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到75毫克棕色固体4-((2S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：13.6％)。LCMS：RT＝3.70min，[M+H]+＝567.30。
步骤B：合成4-((2S)-2-氨基-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将4-((2S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(70毫克，0.13毫摩尔)溶于乙酸乙酯(16毫升)中。随后，向上述溶液中加入2摩尔/升的盐酸乙酸乙酯溶液(4毫升)。在室温下搅拌4小时。
将反应液减压浓缩。得到60毫克棕色固体4-((2S)-2-氨基-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：98.1％)。
步骤C：合成4-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将4-((2S)-2-氨基-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(60毫克，0.12毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(41毫克，0.15毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(73毫克，0.19毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(31毫克，0.24毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(20毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到22毫克无色油状物4-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：24.0％)。LCMS：RT＝3.65min，[M+H]+＝716.30。
步骤D：合成4-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲氧基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(22毫克，0.03毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化得到9.7毫克白色固体4-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：4.4％)。LCMS：RT＝2.96min，[M+H]+＝660.30。1HNMR(500MHz,DMSO)δ11.74(s,1H),10.15(s,1H),9.78(s,1H),8.01(s,1H),7.95(d,J＝1.8Hz,1H),7.80(dt,J＝8.7,5.4Hz,2H),7.37(dt,J＝19.8,8.6Hz,5H),7.08(t,J＝4.1Hz,1H),5.40(s,1H),3.49-3.31(m,4H),3.25(dd,J＝9.9,6.2Hz,4H),3.15(dd,J＝14.4,10.0Hz,2H),2.14(d,J＝12.3Hz,2H),2.02(d,J＝12.8Hz,1H),1.89(s,1H),1.70(s,1H),1.55(s,1H),1.45(t,J＝13.0Hz,2H)。
实施例95
合成4-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(羟甲基)哌啶-2-酮
将2-氧过哌啶-4-羧酸甲酯(500毫克，3.18毫摩尔)溶于甲醇(15.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入硼氢化锂(138毫克，6.36毫摩尔)。在50摄氏度下搅拌1小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到450毫克棕色固体4-(羟甲基)哌啶-2-酮(收率：109％)。LCMS：RT＝0.98min，[M+H]+＝130.10。
步骤B：合成(2-氧代哌啶-4-基)4-甲基苯磺酸甲酯
将4-(羟甲基)哌啶-2-酮(450毫克，3.4毫摩尔)溶于乙腈(15.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三乙胺(705毫克，6.9毫摩尔)和4-甲基苯磺酰氯(1.33克，6.9毫摩尔)。在室温下搅拌18小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到90毫克棕色油状物4-(羟甲基)哌啶-2-酮(收率：9.8％)。LCMS：RT＝1.33min，[M+H]+＝284.10。
步骤C：合成4-(乙基甲基)哌啶-2-酮
将(2-氧代哌啶-4-基)4-甲基苯磺酸甲酯(90毫克，0.3毫摩尔)溶于乙醇(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入氢化钠(15毫克，0.6毫摩尔)。在70摄氏度下搅拌18小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到180毫克棕色固体4-(羟甲基)哌啶-2-酮(收率：190％)。LCMS：RT＝1.16min，[M+H]+＝157.10。
步骤D：合成4-((2S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(乙氧基甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(320毫克，0.6毫摩尔)和4-(乙基甲基)哌啶-2-酮(193毫克，1.2毫摩尔)溶于甲苯(15.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入碳酸铯(401毫克，1.2毫摩尔)，N1，N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(108毫克，1.2毫摩尔)，碘化亚铜117毫克，0.6毫摩尔)。在110摄氏度下搅拌18小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(30毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到140毫克棕色固体4-((2S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(乙氧基甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：38.0％)。LCMS：RT＝3.98min，[M+H]+＝596.43。
步骤E：合成4-((2S)-2-氨基-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将4-((2S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(4-(4-(乙氧基甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(140毫克，0.21毫摩尔)溶于乙酸乙酯(16毫升)中。随后，向上述溶液中加入2摩尔/升的盐酸乙酸乙酯溶液(4毫升)。在室温下搅拌4小时。
将反应液减压浓缩。得50毫克棕色固体4-((2S)-2-氨基-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：42.5％)。
步骤F：合成4-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(乙氧基甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将4-((2S)-2-氨基-3-(4-(4-(羟甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(50毫克，0.1毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(29毫克，0.11毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(57毫克，0.15毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(26毫克，0.2毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(20毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到6毫克无色油状物4-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(乙氧基甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：8.7％)。LCMS：RT＝3.93min，[M+H]+＝744.33。
步骤G：合成4-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(乙氧基甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将4-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(乙氧基甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(6毫克，0.008毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化得到2.8毫克白色固体4-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(乙氧基甲基)-2-氧代哌啶-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：42.1％)。LCMS：RT＝3.64min，[M+H]+＝689.20
实施例96
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-羟基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(4-羟基环己基)哌嗪-2-酮
将哌嗪-2-酮(500毫克，5毫摩尔)和4-羟基环己-1-酮(1.1克，10毫摩尔)溶于甲醇(10毫升)中.随后向上述溶液中加入醋酸(0.5毫升)和氰基硼氢化钠(627毫克，10毫摩尔)。在室温下搅拌18小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到400毫克棕色固体4-(4-羟基环己基)哌嗪-2-酮(收率：90％)。LCMS：RT＝0.82，[M+H]+＝199.14。
步骤B：合成(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-羟基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(200毫克，0.38毫摩尔)和4-(4-羟基环己基)哌嗪-2-酮(152毫克，0.77毫摩尔)溶于甲苯(15.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入碳酸铯(250毫克，0.77毫摩尔)，N1，N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(67毫克，0.77毫摩尔)，碘化亚铜73毫克，0.38毫摩尔)。在110摄氏度下搅拌18小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(30毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到160毫克棕色固体(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-羟基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：38.0％)。LCMS：RT＝3.13min，[M+H]+＝636.35
步骤C：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(4-羟基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(4-(4-羟基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(160毫克，0.25毫摩尔)溶于乙酸乙酯(16毫升)中。随后，向上述溶液中加入2摩尔/升的盐酸乙酸乙酯溶液(4毫升)。在室温下搅拌4小时。
将反应液减压浓缩。得40毫克棕色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(4-羟基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：33.4％)。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-羟基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-氨基-3-(4-(4-(4-羟基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(40毫克，0.07毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(21毫克，0.08毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(42毫克，0.11毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(19毫克，0.15毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(20毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到46毫克无色油状物(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-羟基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：83.2％)。LCMS：RT＝3.06min，[M+H]+＝785.31。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-羟基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸三氟乙酸盐
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-羟基环己基)-2-氧哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(46毫克，0.058毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化得到14毫克白色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-羟基环己基)-2-氧代哌嗪-1-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸三氟乙酸盐(收率：33.6％)。LCMS：RT＝2.79min，[M+H]+＝728.35。1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.75(s,1H),10.72(s,1H),10.48(s,1H),9.82(s,1H),9.05(d,J＝8.0Hz,1H),7.97(d,J＝2.3Hz,1H),7.92(d,J＝8.7Hz,2H),7.78(d,J＝8.6Hz,1H),7.70(d,J＝8.8Hz,2H),7.63(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.38-7.32(m,2H),7.28(dd,J＝8.5,2.8Hz,2H)，4.72(dd,J＝13.8,7.6Hz,1H),3.17(s,2H),2.53(s,1H),2.09-1.87(m,2H),1.79(s,2H),1.46(s,2H),1.18(dd,J＝19.3,12.2Hz,2H),0.83(dd,J＝8.9,6.6Hz,1H)。
实施例97
合成(S)-4-(3-([[1,1'-联苯]-4-基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(3-([[1,1'-联苯]-4-基]-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(500毫克，0.96毫摩尔)和苯硼酸(140毫克，1.4毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(15.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入碳酸钾399毫克，1.93毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(78毫克，0.09毫摩尔)。在100摄氏度下搅拌18小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(30毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到270毫克棕色固体(S)-4-(3-([[1,1'-联苯]-4-基]-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：38.0％)。
步骤B：合成(S)-4-(3-([(1,1'-联苯]-4-基)-2-氨基丙酰胺)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-([[1,1'-联苯]-4-基]-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(270毫克，0.52毫摩尔)溶于乙酸乙酯(8毫升)中。随后，向上述溶液中加入2摩尔/升的盐酸乙酸乙酯溶液(2毫升)。在室温下搅拌4小时。
将反应液减压浓缩。得220毫克棕色固体(S)-4-(3-([(1,1'-联苯]-4-基)-2-氨基丙酰胺)苯甲酸叔丁酯(收率：100％)。
步骤C：合成(S)-4-(3-([[1,1'-联苯]-4-基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-([(1,1'-联苯]-4-基)-2-氨基丙酰胺)苯甲酸叔丁酯(220毫克，0.5毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(170毫克，0.6毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(300毫克，0.76毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(136毫克，1.02毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(30毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(15毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到180毫克无色油状物(S)-4-(3-([[1,1'-联苯]-4-基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：54.3％)。LCMS：RT＝4.53min，[M-H]-＝663.27。
步骤D：合成(S)-4-(3-([[1,1'-联苯]-4-基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(3-([[1,1'-联苯]-4-基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(180毫克，0.27毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化得到14毫克白色固体(S)-4-(3-([[1,1'-联苯]-4-基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：8.5％)。LCMS：RT＝4.11min，[M-H]-＝608.08。
实施例98
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(呋喃-3-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(呋喃-3-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(500毫克，0.96毫摩尔)和呋喃-3-基硼酸(129毫克，1.1毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(15.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入碳酸钾266毫克，1.93毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(70毫克，0.09毫摩尔)。在100摄氏度下搅拌18小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(30毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到370毫克棕色固体(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(呋喃-3-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：76.3％)。
步骤B：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(呋喃-3-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(呋喃-3-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(200毫克，0.40毫摩尔)溶于乙酸乙酯(8毫升)中。随后，向上述溶液中加入2摩尔/升的盐酸乙酸乙酯溶液(2毫升)。在室温下搅拌4小时。
将反应液减压浓缩。得130毫克棕色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(呋喃-3-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：80.2％)。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(呋喃-3-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-氨基-3-(4-(呋喃-3-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(130毫克，0.32毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(102毫克，0.38毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(182毫克，0.48毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(82毫克，0.6毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(30毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(15毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到150毫克无色油状物(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(呋喃-3-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：71.8％)。LCMS：RT＝4.14min，[M-H]-＝653.20。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(呋喃-3-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(呋喃-3-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(150毫克，0.22毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化得到5.2毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(呋喃-3-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：3.9％)。LCMS：RT＝3.93min，[M-H]-＝598.08。
实施例99
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(呋喃-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(呋喃-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(3-(4-溴苯基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(500毫克，0.96毫摩尔)和呋喃-2-基硼酸(129毫克，1.1毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(15.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入碳酸钾266毫克，1.93毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(70毫克，0.09毫摩尔)。在100摄氏度下搅拌18小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(30毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝1/10)。得到420毫克棕色固体(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(呋喃-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：86.1％)。
步骤B：合成(S)-4-(2-氨基-3-(4-(呋喃-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-(呋喃-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(250毫克，0.49毫摩尔)溶于乙酸乙酯(8毫升)中。随后，向上述溶液中加入2摩尔/升的盐酸乙酸乙酯溶液(2毫升)。在室温下搅拌4小时。
将反应液减压浓缩。得170毫克棕色固体(S)-4-(2-氨基-3-(4-(呋喃-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：85.2％)。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(呋喃-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
将(S)-4-(2-氨基-3-(4-(呋喃-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(170毫克，0.4毫摩尔)和2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(123毫克，0.4毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(238毫克，0.6毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(108毫克，0.8毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(30毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(15毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到180毫克无色油状物(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(呋喃-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：68.0％)。LCMS：RT＝4.13min，[M-H]-＝653.20。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(呋喃-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(呋喃-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(180毫克，0.27毫摩尔)溶于二氯甲烷(4.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1.0毫升)。在室温下搅拌2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用制备HPLC纯化得到8.7毫克白色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(呋喃-2-基)苯基)丙酰胺基)苯甲酸(收率：5.3％)。LCMS：RT＝3.92min，[M-H]-＝598.08
实施例100
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-氯-1-环丁氧基-2-硝基苯
室温下，将4-氯-1-氟-2-硝基苯(800.0毫克，4.56毫摩尔)、环丁醇(394.0毫克，5.47毫摩尔)和碳酸铯(3.0克，9.12毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(20.0毫升)中，N2保护下，50摄氏度反应1.5小时。
反应结束，垫无水硫酸钠抽滤，滤饼用50.0毫升乙酸乙酯洗涤，滤液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷：乙酸乙酯＝20：1)得到460.2毫克淡黄色固体4-氯-1-环丁氧基-2-硝基苯(收率：44.0％)。LCMS:RT＝4.31min,[M+H]+＝228.14。
步骤B：合成5-氯-2-环丁氧基苯胺
室温下，将4-氯-1-环丁氧基-2-硝基苯(460.0毫克，2.02毫摩尔)加入乙酸乙酯中，冰浴下，分批加入氯化亚锡二水合物(4.6克，20.21毫摩尔)，N2保护下，室温反应2小时。
反应结束，用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，再加入过量碳酸氢钠固体，调pH至弱碱性，垫硅藻土抽滤，滤饼用50毫升乙酸乙酯洗涤，滤液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷：乙酸乙酯＝20：1)。得到349.0毫克乳白色固体5-氯-2-环丁氧基苯胺(收率：87.0％)。LCMS:RT＝4.17min,[M+H]+＝198.14。
步骤C：合成2-((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯
N2保护、冰浴下，向含有5-氯-2-环丁氧基苯胺(349.0毫克，1.77毫摩尔)和吡啶(280.0毫克，3.54毫摩尔)的二氯甲烷(5.0毫升)中滴加2-氯-2-氧代乙酸甲酯(258.7毫克，2.21毫摩尔)，滴毕，室温反应30分钟。
反应结束，加水淬灭，混合液用二氯甲烷(50毫升×3次)萃取。合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷：乙酸乙酯＝20：1)得到356.0毫克白色固体2-((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(收率：87.0％)。LCMS:RT＝3.86min,[M-H]-＝282.12。
步骤D：合成2-((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酸
冰浴下，向含有((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(356.0毫克，1.25毫摩尔)的四氢呋喃(14.0毫升)中滴加氢氧化锂(105.0毫克，2.50毫摩尔)水溶液(7.0毫升)，滴毕即反应结束。
反应结束，加水淬灭，用稀盐酸水溶液(0.5摩尔/升)调pH至4，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得到333.0毫克淡黄色固体合成2-((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酸，无需纯化，直接用于下一步反应(收率：98.8％)。LCMS:RT＝4.08min,[M-H]-＝268.33。
步骤E：合成4-(2-(2-(((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将2-((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酸(100.0毫克，0.37毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(115.0毫克，0.34毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(192.0毫克，0.51毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(87.0毫克，0.67毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝5/1)。得到129.0毫克黄色固体4-(2-(2-(((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：40.9％)。LCMS:RT＝4.33min,[M-H]-＝590.43。
步骤F：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将4-(2-(2-(((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(65.0毫克，0.11毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应2小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到23.6毫克白色固体合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：40.0％)。LCMS:RT＝3.25min,[M+H]+＝536.69。
实施例101
合成(S)-4-(3-(4-([[1,4'-联哌啶]-1'-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-酰基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(3-(4-(1,4'-双哌啶)-1'-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(50.0毫克，0.08毫摩尔)、[1,4'-联哌啶]-1'-羰基氯盐酸盐(26.5毫克，0.10毫摩尔)和吡啶(20.0毫克，0.25毫摩尔)加入二氯甲烷(3.0毫升)中，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用二氯甲烷(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)。得到49.0毫克黄色固体(S)-4-(3-(4-(((1,4'-双哌啶)-1'-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：71.9％)。LCMS:RT＝4.28min,[M-H]-＝797.63。
步骤B：合成(S)-4-(3-(4-(((1,4'-双哌啶]-1'-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(3-(4-(((1,4'-双哌啶)-1'-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(49.0毫克，0.06毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应2小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到42.3毫克白色固体合成(S)-4-(3-(4-(((1,4'-双哌啶)-1'-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：92.0％)。LCMS:RT＝3.04min,[M-H]-＝743.27。
实施例102
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-(4-氯-2-硝基苯基)-1H-咪唑
室温下，将5-氯-2-氟硝基苯(2.0克，11.40毫摩尔)、1H-咪唑(892.0毫克，131.10毫摩尔)和碳酸钾(1.9克，13.70毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(14.0毫升)中，N2保护下，90摄氏度反应1.5小时。
反应结束，垫无水硫酸钠抽滤，滤饼用50.0毫升乙酸乙酯洗涤，滤液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)得到791.0毫克棕色油状物1-(4-氯-2-硝基苯基)-1H-咪唑。LCMS:RT＝4.37min,[M+H]+＝224.15。
步骤B：合成5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯胺
室温下，将1-(4-氯-2-硝基苯基)-1H-咪唑(741.0毫克，3.31毫摩尔)加入乙酸乙酯中，冰浴下，分批加入氯化亚锡二水合物(7.5克，33.12毫摩尔)，N2保护下，室温反应2小时。
反应结束，用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，再加入过量碳酸氢钠固体，调pH至弱碱性，垫硅藻土抽滤，滤饼用50毫升乙酸乙酯洗涤，滤液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(50毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷：乙酸乙酯＝1：1)。得到569.0毫克乳白色固体5-氯-2-环丁氧基苯胺(收率：88.6％)。LCMS:RT＝4.22min,[M+H]+＝194.17。
步骤C：合成2-((5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
N2保护、冰浴下，向含有5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯胺(469.0毫克，2.42毫摩尔)和吡啶(382.0毫克，4.84毫摩尔)的二氯甲烷(10.0毫升)中滴加2-氯-2-氧代乙酸甲酯(354.0毫克，2.91毫摩尔)，滴毕，室温反应30分钟。
反应结束，加水淬灭，混合液用二氯甲烷(50毫升×3次)萃取。合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30毫升×3次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷：乙酸乙酯＝1：1)得到594.0毫克白色固体2-((5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(收率：79.3％)。LCMS:RT＝3.97min,[M+H]+＝280.33。
步骤D：合成2-((5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸
冰浴下，向含有2-((5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(594.0毫克，2.12毫摩尔)的四氢呋喃(28.0毫升)中滴加氢氧化锂(179.0毫克，4.25毫摩尔)水溶液(14.0毫升)，滴毕即反应结束。
反应结束，加水淬灭，用稀盐酸水溶液(0.5摩尔/升)调pH至4，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得到538毫克淡黄色固体合成2-((5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸，无需纯化，直接用于下一步反应(收率：95.5％)。LCMS:RT＝4.26min,[M-H]-＝264.11。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将2-((5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸(25.0毫克，0.10毫摩尔)、(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(38.0毫克，0.11毫摩尔)和1-丙基磷酸酐(120.0毫克，0.38毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(36.4毫克，0.30毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝5/1)。得到93毫克黄色固体(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：37.2％)。LCMS:RT＝4.37min,[M-H]-＝586.23。
步骤F:合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-咪唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(24.0毫克，0.04毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应2小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到23.6毫克白色固体合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-环丁氧基苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：97.6％)。LCMS:RT＝3.21min,[M+H]+＝532.15。
实施例103
合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲氧基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)-3-甲氧基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将N-(叔丁氧羰基)-O-甲基-L-丝氨酸(1.0克，4.56毫摩尔)、4-氨基苯甲酸叔丁酯(801.0毫克，4.15毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(2.4克，6.23毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(1.1毫克，8.30毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝5/1)。得到1.4克黄色固体(S)-4-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)-3-甲氧基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：85.8％)。LCMS:RT＝4.23min,[M-H]-＝393.26。
步骤B：合成(S)-4-(2-氨基-3-甲氧基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
冰浴条件下，将(S)-4-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)-3-甲氧基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(800.0毫克，2.03毫摩尔)、4-氨基苯甲酸叔丁酯(801.0毫克，4.15毫摩尔)加入盐酸乙酸乙酯混合液(盐酸2.0毫升，乙酸乙酯8.0毫升)中，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，混合液中加乙酸乙酯(50毫升)，冰浴下调pH至8.0，萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝10/1)。得到356.0毫克黄色固体(S)-4-(2-氨基-3-甲氧基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：86.1％)。LCMS:RT＝4.39min,[M-H]-＝293.31。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲氧基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-4-(2-氨基-3-甲氧基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(604.0毫克，2.05毫摩尔)、2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(659.0毫克，2.46毫摩尔)和1-丙基磷酸酐(2.6克，8.20毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(15.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(793.0毫克，6.15毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝2/1)。得到113.0毫克黄色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲氧基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：10.1％)。LCMS:RT＝4.41min,[M-H]-＝542.28。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲氧基丙酰胺基)苯甲酸
室温下，将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲氧基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(106.0毫克，0.20毫摩尔)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，滴加三氟乙酸(0.5毫升)，室温反应2小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到12.7毫克白色固体合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-甲氧基丙酰胺基)苯甲酸(收率：93.1％)。LCMS:RT＝3.34min,[M-H]-＝486.12。
实施例104
合成5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(225.0毫克，0.30毫摩尔)、(S)-N,N-二甲基吡咯烷-3-胺盐酸盐(165.0毫克，0.90毫摩尔)溶于四氢呋喃中，滴加N,N-二异丙基乙胺(304.0毫克，2.36毫摩尔)，滴毕，N2保护下，60摄氏度过夜反应。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝2/1)。得到204.0毫克黄色固体5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：53.0％)。LCMS:RT＝4.09min,[M+H]+＝784.06。
步骤B：合成5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((S)-3(S)-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((S)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(204.0毫克，0.26毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应2小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵拉干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到35.2毫克白色固体5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((S)-3(S)-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：93.7％)。LCMS:RT＝3.31min,[M-H]-＝726.15。
实施例105
合成5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((R)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((R)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，将5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((R)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(127.0毫克，0.17毫摩尔)、叔丁基5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-(R)-N,N-二甲基吡咯烷-3-胺(57.0毫克，0.50毫摩尔)溶于四氢呋喃(3.0毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(98.0毫克，0.91毫摩尔)，N2保护下，60摄氏度反应5小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到133.0毫克黄色固体5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((R)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：40.9％)。LCMS:RT＝4.16min,[M+H]+＝784.46。
步骤B：合成5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((R)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((R)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(133.0毫克，0.02毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应2小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到18.2毫克白色固体5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((R)-3-(二甲氨基)吡咯烷-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：93.2％)。LCMS:RT＝3.85min,[M-H]-＝726.18。
实施例106
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-羟基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成哌啶-4-醇的三氟乙酸盐
室温下，将4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.0克，24.8毫摩尔)加入二氯甲烷(20.0毫升)中，滴加三氟乙酸(10.0毫升)，滴毕，N2保护下，室温反应5小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝2/1)，得到1.8克黄色固体哌啶-4-醇的三氟乙酸盐(收率：35.9％)。LCMS:RT＝4.21min,[M-H]-＝198.18。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-羟基哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有叔丁基(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸酯(100.0毫克，0.13毫摩尔)和哌啶-4-醇的三氟乙酸盐(86.2毫克，0.40毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)溶液中滴加N,N-二异丙基乙胺(76.0毫克，0.60毫摩尔)，滴毕，60摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/6)。得到165.0毫克白色固体叔丁基(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-羟基哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸酯(收率：51.3％)。LCMS:RT＝4.05min,[M+H]+＝771.55。
步骤C：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-羟基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-羟基哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(165.0毫克，0.20毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到12.4毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-羟基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：96.1％)。LCMS:RT＝4.12min,[M-H]-＝713.08。
实施例107
合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有叔丁基(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸酯(100.0毫克，0.13毫摩尔)和1-甲基-4-(哌啶-4-基)哌嗪盐酸盐(86.2毫克，0.40毫摩尔)的四氢呋喃溶液中滴加N,N-二异丙基乙胺(76.8毫克，0.61毫摩尔)，滴毕，60摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到177.0毫克白色固体叔丁基(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸酯(收率：47.3％)。LCMS:RT＝3.98min,[M+H]+＝853.27。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将叔丁基(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸酯(177.0毫克，0.20毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到113毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：76.1％)。LCMS:RT＝2.73min,[M+H]+＝797.29。
实施例108
合成(S)-5-(3-(4-(4-羧基哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A:合成(S)-5-(3-(4-(4-(叔丁氧基羰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(80.0毫克，0.11毫摩尔)和哌啶-4-羧酸叔丁酯盐酸盐(70.2毫克，0.31毫摩尔)的四氢呋喃溶液中滴加N,N-二异丙基乙胺(61.0毫克，0.47毫摩尔)，滴毕，60摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/3)。得到124毫克白色固体(S)-5-(3-(4-(4-(叔丁氧基羰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：53.2％)。LCMS:RT＝4.11min,[M+H]+＝856.02。
步骤B：合成(S)-5-(3-(4-(4-(叔丁氧基羰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，将(S)-5-(3-(4-(4-(叔丁氧基羰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(124.0毫克，0.15毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到9.5毫克白色固体叔丁基(S)-5-(3-(4-(4-(叔丁氧基羰基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：97.5％)。LCMS:RT＝3.40min,[M-H]-＝741.17。
实施例109
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(87.0毫克，0.14毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应2小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到15.3毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：80.9％)。LCMS:RT＝3.90min,[M-H]-＝572.02。
实施例110
合成(S)-5-(3-(4-(2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(3-(4-(2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将叔丁基(S)-5-(3-(4-(2-氧-7-氮杂螺环[3.5]壬烷-7-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四氮唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)丙胺基)-1H-吲哚-2-羧酸盐(56.0毫克，0.07毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应2小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到6.3毫克白色固体(S)-5-(3-(4-(2-氧代-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酰胺基)苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰氨基)丙胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：90.4％)。LCMS:RT＝3.44min,[M+H]+＝741.14。
实施例111
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰氨基)-3-(4-(4-(2-羟基乙氧基)哌啶-1-甲酰胺)苯基)丙胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-羟基乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(80.0毫克，0.01毫摩尔)和2-(哌啶-4-氧基)乙烷-1-醇(448.2毫克，1.85毫摩尔)的四氢呋喃中滴加N,N-二异丙基乙胺(299.8毫克，2.31毫摩尔)，滴毕，60摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/8)。得到151.2毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-羟基乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：45.3％)。LCMS:RT＝3.86min,[M+H]+＝815.77。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-羟基乙氧基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-羟基乙氧基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(42.0毫克，0.05毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到37.0毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(2-羟基乙氧基)哌啶-1-羧酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：92.1％)。LCMS:RT＝3.33min,[M-H]-＝757.18。
实施例112
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((4-甲基苯基)磺酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((4-甲基苯基)磺酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
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室温下，将(S)-5-(3-(4-氨基苯基)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(200.0毫克，0.31毫摩尔)、三乙醇胺(79.0毫克，0.78毫摩尔)、4-甲苯磺酰氯(89.0毫克，0.47毫摩尔)加入二氯甲烷(3.0毫升)中，室温过夜反应。
反应结束，加水淬灭，混合液用二氯甲烷(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/乙酸乙酯＝4/1)。得到37.0毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((4-甲基苯基)磺酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯。(收率：9.1％)。LCMS:RT＝4.33min,[M+H]+＝798.19。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((4-甲基苯基)磺酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-甲基苯基)磺酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(37.0毫克，0.05毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到7.7毫克白色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((4-甲基苯基)磺酰胺基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：97.0％)。LCMS:RT＝3.77min,[M-H]-＝740.06。
实施例113
合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(4-羟基-2-甲基丁烷-2-基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(4-羟基-2-甲基丁烷-2-基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(80.0毫克，0.11毫摩尔)和3-氨基-3-甲基丁-1-醇(32.0毫克，0.31毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加N,N-二异丙基乙胺(27.0毫克，0.21毫摩尔)，滴毕，60摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/3)。得到131.0毫克白色固体叔丁基(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(4-羟基-2-甲基丁烷-2-基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸酯(收率：51.0％)。LCMS:RT＝4.24min,[M+H]+＝774.12。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(4-羟基-2-甲基丁烷-2-基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(4-羟基-2-甲基丁烷-2-基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(131.0毫克，0.17毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到26.4毫克白色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(4-羟基-2-甲基丁烷-2-基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：96.6％)。LCMS:RT＝3.44min,[M-H]-＝715.31。
实施例114
合成5-((S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-((2S,3S)-1-羟基-3-甲基戊基-2-基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1-羟基-3-甲基戊基-2-基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(80.0毫克，0.11毫摩尔)和2-氨基-3-甲基戊-1-醇(37.0毫克，0.31毫摩尔)的四氢呋喃(1.0毫升)中滴加N,N-二异丙基乙胺(27毫克，0.20毫摩尔)，滴毕，60摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(20毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/3)。得到142毫克白色固体5-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1-羟基-3-甲基戊基-2-基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：45.0％)。LCMS:RT＝4.05min,[M+H]+＝787.02。
步骤B：合成5-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1-羟基-3-甲基戊基-2-基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
室温下，将5-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1-羟基-3-甲基戊基-2-基)脲基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(142.0毫克，0.18毫摩尔)加入二氯甲烷(5.0毫升)中，滴加三氟乙酸(1.0毫升)，室温反应3小时。
反应结束，蒸干二氯甲烷并用油泵抽干三氟乙酸，所得残余物用溶于二氯甲烷(1.0毫升)中，将其滴加入正己烷(10.0毫升)中，析出白色固体，抽滤，滤饼用正己烷洗涤，干燥得到142.0毫克白色固体5-((2S)-2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(3-(1-羟基-3-甲基戊基-2-基)脲基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：92.0％)。LCMS:RT＝3.81min,[M-H]-＝730.24。
实施例115
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-苯并[d]咪唑-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-苯并[d]咪唑-2-羧酸叔丁酯
室温下，将(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酰基)-L-苯丙氨酸(19毫克，0.045毫摩尔),5-氨基-1H-苯并[d]咪唑-2-羧酸叔丁酯(13毫克，0.055毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(26毫克，0.068毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(18毫克，0.137毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝10/1)。得到7毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-苯并[d]咪唑-2-羧酸叔丁酯(收率：31.2％)。MS(ESI)M/Z：630.19[M+H]+。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-苯并[d]咪唑-2-羧酸
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将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-苯并[d]咪唑-2-羧酸叔丁酯(27毫克，0.03毫摩尔)溶于二氯甲烷(4毫升)。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1毫升)。室温反应3小时。
将反应液减压蒸馏。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下，色谱柱：X select C18 19mm*150mm；流动相：水(含有0.05％的三氟乙酸)和乙腈；流速：25毫升/分钟；梯度：在7分钟内，乙腈从5％升到100％；检测波长：254nm。纯化后，纯化得5.4毫克浅黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-苯并[d]咪唑-2-羧酸(收率：84.7％)。MS(ESI)M/Z：[M+H]+＝574.13。
实施例116
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-5-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-氯-2-(四唑-5-基)胺
将2-氨基-4-氯苄腈(500毫克，3.28毫摩尔)，三乙胺盐酸盐(588毫克，4.27毫摩尔)，叠氮化钠(277.5毫克，4.27毫摩尔)溶于甲苯(10毫升)中，升温至100度，于氮气氛围下反应过夜。
将反应液冷却到室温，反应液水洗(10ml×3)，所得水相收集用浓盐酸滴加，有类白色固体析出，过滤，得滤饼600毫克类白色固体5-氯-2-(四唑-5-基)胺(收率：93.6％)。LCMS:RT＝3.23min,[M+H]+＝196.06。
步骤B:合成2-((5-氯-2-(1H-四唑-5-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯
将5-氯-2-(四唑-5-基)胺(600毫克，3.07毫摩尔)溶于二氯甲烷(10毫升，)中，加入吡啶(368毫克，4.6毫摩尔)，2-氯-2-氧代乙酸甲酯(486毫克，3.99毫摩尔)，室温反应10分钟
加水淬灭反应，旋掉二氯甲烷，乙酸乙酯溶解(30毫升)饱和氯化铵溶液洗(10毫升×3次)，无水硫酸钠干燥得650毫克类白色固体2-((5-氯-2-(1H-四唑-5-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(收率：75.2％)。LCMS:RT＝3.32min,[M+H]+＝282.06。
步骤C：合成2-((5-氯-2-(1H-四唑-5-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸
冰浴下，向含有2-((5-氯-2-(1H-四唑-5-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酸甲酯(650毫克，2.3毫摩尔)的四氢呋喃(10毫升)中滴加氢氧化锂(185毫克，4.6毫摩尔)水溶液(2.5毫升)，滴毕反应一小时结束。
反应结束，加乙腈有类白色固体析出，过滤，得滤饼600毫克白色固体2-((5-氯-2-(1H-四唑-5-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(收率：97.2％)。LCMS:RT＝2.50min,[M-H]-＝266.02。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-5-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将2-((5-氯-2-(1H-四唑-5-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(300毫克，1.12毫摩尔),(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(400毫克，1.18毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(638毫克，1.68毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(433毫克，3.36毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应3小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到260毫克黄色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-5-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：39.3％)。LCMS:RT＝4.24min,[M+H]+＝590.21。
步骤E：合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-5-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-5-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(260毫克，0.44毫摩尔)溶于二氯甲烷(4毫升)。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1毫升)。室温反应3小时。
于反应液中加入大量无水乙醚放冰箱冷冻30分钟，有浅红色固体析出，过滤得滤饼5.45毫克浅红色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)-1H-苯并[d]咪唑-2-羧酸(收率：85.5％)。LCMS:RT＝3.63min,[M+H]+＝534.19。
实施例117
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯
室温下，向含有(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(100毫克，0.13毫摩尔)和N，N-二甲基哌啶-4-胺(105毫克，0.52毫摩尔)的四氢呋喃(3.0毫升)中滴加N,N-二异丙基乙胺(168毫克，1.3毫摩尔)，滴毕，65摄氏度反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/2)。得到90毫克淡黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(收率：86.2％)。LCMS:RT＝4.23min,[M+H]+＝798.28。
步骤B：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸叔丁酯(90毫克，0.11毫摩尔)溶于二氯甲烷(10毫升)。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(2.0毫升)。室温反应3小时。
将反应液减压蒸馏。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下，色谱柱：X select C18 19mm*150mm；流动相：水(含有0.05％的三氟乙酸)和乙腈；流速：25毫升/分钟；梯度：在7分钟内，乙腈从5％升到100％；检测波长：254nm。纯化后，纯化得51毫克浅黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-(4-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-甲酰胺基)苯基丙酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：61.0％)。LCMS:RT＝2.83min,[M+H]+＝742.25。
实施例118
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧杂戊酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
步骤A：合成(S)-2-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧代丁酸甲酯
室温下，将(S)-3-((叔丁氧羰基)氨基)-4-甲氧基-4-氧代丁酸(620毫克，2.5毫摩尔),1-甲基哌嗪(275毫克，2.75毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(1.43克，3.76毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(967毫克，7.5毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到650毫克黄色固体(S)-2-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧代丁酸甲酯(收率：78.8％)。LCMS:RT＝1.37min,[M+H]+＝330.18。
步骤B：合成(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧代丁酸
冰浴下，向含有(S)-2-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧代丁酸甲酯(650毫克，1.97毫摩尔)的四氢呋喃(10毫升)中滴加氢氧化锂(162毫克，3.95毫摩尔)水溶液(2.5毫升)，滴毕反应20分钟结束。
反应结束，加水淬灭，用稀盐酸水溶液(0.5摩尔/升)调pH至4，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。最后减压浓缩得到600毫克淡黄色固体(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧代丁酸。LCMS:RT＝0.77min,[M-H]-＝314.10。
步骤C：合成(S)-5-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧杂戊酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁基酯
室温下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧代丁酸(620毫克，2.5毫摩尔),5-氨基-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(275毫克，2.75毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(1.43克，3.76毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(967毫克，7.5毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到650毫克黄色固体(S)-2-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧代丁酸甲酯(收率：78.8％)。LCMS:RT＝3.32min,[M+H]+＝630.28。
将(S)-2-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧代丁酸甲酯(650毫克，1.03毫摩尔)溶于乙酸乙酯(10毫升)。随后，向上述溶液中加入2摩尔的盐酸乙酸乙酯溶液(2.0毫升)。室温反应3小时。
将反应液减压蒸馏旋干得粗品500毫克浅黄色固体(S)-5-(2-氨基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧杂烟酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：91.0％)。LCMS:RT＝2.75min,[M+H]+＝530.29。
步骤E：合成(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧杂戊酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯二叔丁酯
室温下，将(S)-5-(2-氨基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧杂烟酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(500毫克，0.94毫摩尔),2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(277毫克，1.04毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(539毫克，1.42毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(8毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(366毫克，2.84毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝10/1)。得到300毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧杂戊酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯二叔丁酯(收率：40.8％)。LCMS:RT＝3.35min,[M+H]+＝779.29。
步骤F：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧杂戊酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-(((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧杂戊酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸酯二叔丁酯(90毫克，0.11毫摩尔)溶于二氯甲烷(10毫升)。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(2.0毫升)。室温反应3小时。
将反应液减压蒸馏。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下，色谱柱：X select C18 19mm*150mm；流动相：水(含有0.05％的三氟乙酸)和乙腈；流速：25毫升/分钟；梯度：在7分钟内，乙腈从5％升到100％；检测波长：254nm。纯化后，纯化得25毫克浅黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)-4-氧杂戊酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：34.7％)。LCMS:RT＝2.59min,[M+H]+＝623.15。
实施例119
合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧代戊酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-甲氧基-5-氧戊酸
将(S)-2-氨基-5-甲氧基-5-氧戊酸(1.6克，10毫摩尔)溶于二氧六环(10毫升，)中，加入水(10毫升)，三乙胺(3.03克，30毫摩尔)，二碳酸二叔丁酯(3.27克，15毫摩尔)，室温反应三个小时。
向反应液中加入10％柠檬酸调节PH到3，混合液用乙酸乙酯(100毫升×3次)萃取浓缩得1.1克类白色固体(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-甲氧基-5-氧戊酸(收率：42.5％)，LCMS:RT＝3.22min,[M+H]-＝260.06。
步骤B：合成(S)-5-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-甲氧基-5-氧戊二酰氨基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁基酯
室温下，将(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-甲氧基-5-氧戊酸(1.1克，4.2毫摩尔),5-氨基-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(1.4克，4.2毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(3.2克，8.4毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(1.6克，12.6毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应一小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(40毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。得到1.1克黄色固体(S)-5-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-甲氧基-5-氧戊二酰氨基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁基酯(收率：45.5％)。LCMS:RT＝4.56min,[M+H]+＝576.21。
步骤C：合成(S)-5-((1,2-双(叔丁氧羰基)-1H-吲哚-5-基)氨基)-4-((叔丁氧羰基)氨基)-5-氧戊酸
冰浴下，向含有(S)-5-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-甲氧基-5-氧戊二酰氨基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁基酯(1.1克，1.9毫摩尔)的四氢呋喃(10毫升)中滴加氢氧化锂(153毫克，3.83毫摩尔)水溶液(2.5毫升)，滴毕反应30分钟结束。
反应结束，加水淬灭，用稀盐酸水溶液(0.5摩尔/升)调pH至4，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。最后减压浓缩得到600毫克淡黄色固体(S)-5-((1,2-双(叔丁氧羰基)-1H-吲哚-5-基)氨基)-4-((叔丁氧羰基)氨基)-5-氧戊酸(收率：56.1％)。LCMS:RT＝4.32min,[M-H]-＝560.23。
步骤D：合成(S)-5-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧戊二酰氨基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁基酯
室温下，将(S)-5-((1,2-双(叔丁氧羰基)-1H-吲哚-5-基)氨基)-4-((叔丁氧羰基)氨基)-5-氧戊酸(600毫克，1.07毫摩尔),1-甲基哌嗪(160毫克，1.60毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(608克，1.60毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(412毫克，3.2毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应2小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩得到粗品629毫克(S)-5-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧戊二酰氨基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁基酯(收率：91.55％)。LCMS:RT＝3.32min,[M+H]+＝644.36。
步骤E：合成(S)-5-(2-氨基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧戊二酰胺)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁基酯
将(S)-5-(2-((叔丁氧羰基)氨基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧戊二酰氨基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁基酯(629毫克，0.97毫摩尔)溶于乙酸乙酯(12毫升)。随后，向上述溶液中加入2摩尔的盐酸乙酸乙酯溶液(3.0毫升)。室温反应3小时。
将反应液减压蒸馏旋干得粗品320毫克浅黄色固体(S)-5-(2-氨基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧戊二酰胺)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁基酯(收率：60.3％)。LCMS:RT＝2.73min,[M+H]+＝544.29。
步骤F：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧代戊酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯
室温下，将(S)-5-(2-氨基-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧戊二酰胺)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁基酯(119毫克，0.2毫摩尔),2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(53毫克，0.2毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(152毫克，0.4毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(3毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(27毫克，0.6毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应过夜。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：甲醇/二氯甲烷＝10/1)。得到90毫克黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧代戊酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(收率：55.5％)。LCMS:RT＝3.39min,[M+H]+＝793.33。
步骤G：合成(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧代戊酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸
将(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧代戊酰胺基)-1H-吲哚-1,2-二羧酸二叔丁酯(27毫克，0.03毫摩尔)溶于二氯甲烷(4毫升)。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1毫升)。室温反应3小时。
将反应液减压蒸馏。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下，色谱柱：X select C18 19mm*150mm；流动相：水(含有0.05％的三氟乙酸)和乙腈；流速：25毫升/分钟；梯度：在7分钟内，乙腈从5％升到100％；检测波长：254nm。纯化后，纯化得10毫克浅黄色固体(S)-5-(2-(2-((5-氯-2-(1H-四唑-1-基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-5-氧代戊酰胺基)-1H-吲哚-2-羧酸(收率：46.3％)。LCMS:RT＝2.66min,[M+H]+＝637.17。
实施例120
合成(S)-4-(2-(2-(((2-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((2-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯
将3-氨基-4-氯苄腈(200毫克，1.3毫摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升，)中，加入吡啶(135毫克，1.7毫摩尔)，2-氯-2-氧代乙酸甲酯(193毫克，1.5毫摩尔)，室温反应一小时
加水淬灭反应，旋掉二氯甲烷，乙酸乙酯溶解(30毫升)饱和氯化铵溶液洗(10毫升×3次)，无水硫酸钠干燥得311毫克类白色固体2-((2-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(收率：99.3％)。MS(ESI)M/Z：239.01[M+H]+。
步骤B：合成2-((2-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸
冰浴下，向含有2-((2-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(311毫克，1.3毫摩尔)的四氢呋喃(15毫升)中滴加氢氧化锂(109毫克，2.6毫摩尔)水溶液(7.5毫升)，滴毕反应一小时结束。
反应结束，旋走四氢呋喃，于体系中滴加一摩尔稀盐酸调节PH至2，有大量白色固体析出，过滤，得滤饼230毫克白色固体2-((2-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸(收率：79％)。MS(ESI)M/Z：222.99[M-H]-。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-(((2-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯
室温下，将2-((2-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧乙酸(70毫克，0.31毫摩尔),(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(152毫克，0.312毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(178毫克，0.46毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(121毫克，0.93毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应3小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/6)。得到29毫克黄色固体(S)-4-(2-(2-(((2-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(收率：17.1％)。MS(ESI)M/Z：547.17[M+H]+。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-(((2-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
将(S)-4-(2-(2-(((2-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸叔丁酯(29毫克，0.05毫摩尔)溶于二氯甲烷(4毫升)。随后，向上述溶液中加入三氟乙酸(1毫升)。室温反应3小时。
将反应液减压蒸馏。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下，色谱柱：X select C18 19mm*150mm；流动相：水(含有0.05％的三氟乙酸)和乙腈；流速：25毫升/分钟；梯度：在7分钟内，乙腈从5％升到100％；检测波长：254nm。纯化后，纯化得15毫克浅黄色固体(S)-4-(2-(2-(((2-氯-5-氰基苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：57.6％)。MS(ESI)M/Z：491.1[M+H]+。
实施例121
合成(S)-4-(2-(2-(((5-氯-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-2-氧乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((5-氯-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-2-氧乙酸酯
将5-氯-2-(三氟甲基)苯胺(200毫克，1.0毫摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升，)中，加入吡啶(150毫克，1.2毫摩尔)，2-氯-2-氧代乙酸甲酯(105毫克，1.3毫摩尔)，室温反应一小时
加水淬灭反应，旋掉二氯甲烷，乙酸乙酯溶解(30毫升)饱和氯化铵溶液洗(10毫升×3次)，无水硫酸钠干燥得280毫克类白色固体2-((5-氯-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-2-氧乙酸酯(收率：97.2％)。MS(ESI)M/Z：282.01[M+H]+。
步骤B：合成2-((5-氯-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-2-氧乙酸
冰浴下，向含有2-((5-氯-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-2-氧乙酸酯(280毫克，0.99毫摩尔)的四氢呋喃(10毫升)中滴加氢氧化锂(84毫克，1.9毫摩尔)水溶液(5毫升)，滴毕反应一小时结束。
反应结束，旋走四氢呋喃，于体系中滴加一摩尔稀盐酸调节PH至2，有大量白色固体析出，过滤，得滤饼110毫克白色固体2-((5-氯-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(收率：41％)。MS(ESI)M/Z：265.99[M-H]-。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯
室温下，将2-((5-氯-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-2-氧乙酸(110毫克，0.41毫摩尔),(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯(123毫克，0.35毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(197毫克，0.52毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(4毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(134毫克，1.04毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应3小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(10毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/6)。得到56毫克黄色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯(收率：24.6％)。MS(ESI)M/Z：548.11[M+H]+。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
冰浴下，向含有(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯(56毫克，0.1毫摩尔)的四氢呋喃(3毫升)中滴加氢氧化锂(9毫克，0.2毫摩尔)水溶液(1.5毫升)，滴毕反应一小时结束。
反应结束，将反应液减压蒸馏。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下，色谱柱：X select C1819mm*150mm；流动相：水(含有0.05％的三氟乙酸)和乙腈；流速：25毫升/分钟；梯度：在7分钟内，乙腈从5％升到100％；检测波长：254nm。纯化后，纯化得15毫克浅黄色固体(S)-4-(2-(2-((5-氯-2-(三氟甲基)苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：27％)。MS(ESI)M/Z：534.10[M+H]+。
实施例122
合成(S)-4-(2-(2-(2-(((4-氯苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-((4-氯苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯
将4-氯苯胺(500毫克，3.92毫摩尔)溶于二氯甲烷(10毫升，)中，加入吡啶(576毫克，4.7毫摩尔)，2-氯-2-氧代乙酸甲酯(403毫克，5.09毫摩尔)，室温反应一小时
加水淬灭反应，旋掉二氯甲烷，乙酸乙酯溶解(30毫升)饱和氯化铵溶液洗(10毫升×3次)，无水硫酸钠干燥得810毫克类白色固体2-((4-氯苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(收率：96.6％)。MS(ESI)M/Z：214.02[M+H]+。
步骤B：合成2-((4-氯苯基)氨基)-2-氧乙酸
冰浴下，向含2-((4-氯苯基)氨基)-2-氧乙酸甲酯(810毫克，3.79毫摩尔)的四氢呋喃(20毫升)中滴加氢氧化锂(319毫克，7.59毫摩尔)水溶液(10毫升)，滴毕反应一小时结束。
反应结束，旋走四氢呋喃，于体系中滴加一摩尔稀盐酸调节PH至2，有大量白色固体析出，过滤，得滤饼757毫克白色固体2-((4-氯苯基)氨基)-2-氧乙酸(收率：99％)。MS(ESI)M/Z：198.01[M-H]-。
步骤C：合成(S)-4-(2-(2-(2-(((4-氯苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯
/>
室温下，将2-((4-氯苯基)氨基)-2-氧乙酸(757毫克，3.79毫摩尔),(S)-4-(2-氨基-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯(1.27克，3.79毫摩尔)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(2.16克，5.68毫摩尔)加入N,N-二甲基甲酰胺(15毫升)中，滴加N,N-二异丙基乙胺(1.47克，11.37毫摩尔)，滴毕，N2保护下，室温反应3小时。
反应结束，加水淬灭，混合液用乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取，合并有机相，有机相先用饱和食盐水(30毫升×2次)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/正己烷＝1/6)。得到1.2克黄色固体(S)-4-(2-(2-(2-(((4-氯苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯(收率：66.6％)。MS(ESI)M/Z：480.15[M+H]+。
步骤D：合成(S)-4-(2-(2-(2-(((4-氯苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸
冰浴下，向含有(S)-4-(2-(2-(2-(((4-氯苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸甲酯(150毫克，0.3毫摩尔)的四氢呋喃(5毫升)中滴加氢氧化钠(50毫克，1.25毫摩尔)水溶液(2.5毫升)，滴毕反应一小时结束。
反应结束，将反应液减压蒸馏。将所得残余物用制备型高效液相色谱纯化。分离条件如下，色谱柱：X select C1819mm*150mm；流动相：水(含有0.05％的三氟乙酸)和乙腈；流速：25毫升/分钟；梯度：在7分钟内，乙腈从5％升到100％；检测波长：254nm。纯化后，纯化得60毫克浅黄色固体(S)-4-(2-(2-(2-(((4-氯苯基)氨基)-2-氧代乙酰胺基)-3-苯基丙酰胺基)苯甲酸(收率：41.3％)。MS(ESI)M/Z：466.15[M+H]+。
测试例1：吸收光法检测本发明化合物对人凝血因子XIa抑制的生物活性
1、实验材料
酶：Human Factor XIa(ENZYME RESEARCH，货号HFXIa 1111a)
底物：S-2366TM：(CHROMOGENIX，货号82109039)
缓冲液：145mM NaCl，5mM KCl，1mg/mL PEG 8000,，30mM HEPES，PH7.4
2、实验步骤
将溶于100％DMSO的10mM受试化合物用100％DMSO稀释至1000、200、40、8、1.6、0.32、0.064、0.0128、0.00256、0.00128μM；在96孔板中每孔加入98μL(77.7ng/mL)的FXIa酶溶液，空白孔加入98μL缓冲液代替，再加入2μL不同浓度的化合物，空白和对照孔用DMSO代替，用振荡器混匀，37℃孵育20min。
最后每孔加入800μM的底物100μL，在405nm处测其吸光度。
3、数据处理
用GraphPad Prism软件进行曲线拟合，计算IC50值，见表一。
表一：本发明化合物对人FXIa抑制的IC50
结论：本发明化合物对人FXIa具有明显的抑制活性。
测试例2本发明化合物对人血浆体外抗凝血作用的测定
1、实验材料
血浆：人血收集于含3.2％柠檬酸钠(体积比1:9)的真空采血管中，室温3000rpm离心10min，收集血浆，分装在EP管中，-80℃保存。
试剂：APTT测定试剂盒(活化部分凝血活酶时间检测定剂盒，mindray)、氯化钙溶液。
仪器：凝血仪(mindray，C2000-A)
2、实验方法
取分装的冻存人血浆室温融化后，混合均匀。将溶于100％DMSO的10mM受试化合物用100％DMSO稀释至1500、750、375、187.5、93.75、46.88、23.44、11.72μM；在1.5mL EP管中加入98μL人血浆，再加入2μL不同浓度的化合物，空白组加入2μL 100％DMSO，37℃水浴孵育10min，将样品放入凝血仪中对应的位置，进行化合物的APTT测定。
3、数据处理
用GraphPad Prism软件进行曲线拟合，分别计算EC1.5×和EC2×值，即1.5倍和2倍空白对照组的APTT所对应的化合物的浓度，结果见表二。
表二：本发明化合物对人血浆体外抗凝血作用
结论：从表二中可以看出本发明化合物对人血浆具有明显的抗凝血作用。
测试例3本发明化合物的大鼠药代动力学特征考察
1、实验材料
SD大鼠：雄性，180-250g，购于广东省医学实验动物中心。
试剂：DMSO(二甲亚砜)，PEG-400(聚乙二醇400)，生理盐水，肝素，乙腈，甲酸，普萘洛尔(内标)均为市售可得。
仪器：赛默飞LC-MS(U300 UPLC，TSQ QUANTUMN ULTRA三重四级杆质谱)。
2、实验方法
称取化合物溶于DMSO-PEG-400-生理盐水(5：60：35，v/v/v)体系中，大鼠静脉给药后，于5min、15min、30min、1h、2h、4h、6h、8h、24h采集静脉血200μL于肝素化EP管中，12000rpm离心2min，取血浆-80℃冻存待测。精密称取一定量供试品用DMSO溶解至1mg/mL，作为储备液。准确吸取适量的化合物储备液，加入乙腈稀释制成标准系列溶液。准确吸取上述标准系列溶液各20μL，加入空白血浆180μL，涡旋混匀，配制成相当于血浆浓度为1、3、10、30、100、300、1000、3000和5000ng/mL的血浆样品，每一浓度进行双样本分析，建立标准曲线。取20μL血浆，加入内标普萘洛尔(5ng/mL)的乙腈溶液200μL，涡旋混匀后4000rpm离心5min，取上清LC-MS分析。LC-MS检测条件如下：
色谱柱：赛默飞HYPERSIL GOLD C-18UPLC柱，100*2.1mm，1.9μm。
流动相：水(0.1％甲酸)-乙腈按下表进行梯度洗脱
时间(min) 水(含0.1％甲酸) 乙腈
0 90％ 10％
0.6 90％ 10％
1 10％ 90％
2.6 10％ 90％
2.61 90％ 10％
4 90％ 10％
3、数据处理
LC-MS检测血药浓度后，采用WinNonlin 6.1软件，非房室模型法计算药动学参数。结果见表三、四。
表三 本发明化合物的大鼠药代动力学参数(iv给药/0.5mg/kg)
结论：本发明化合物在大鼠静注给药后半衰期较短，表观分布容积较低，清除率偏快。静滴给药后能迅速达稳，药物主要分布在血液中，靶向性较好，且停药后药物能迅速从体内清除，适合开发成临床静滴给药且主要靶点在血液中的药物。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物选自：
。
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述药学上可接受的盐是指所述化合物与药学上可接受的酸或碱制备得到。
3.一种药物组合物，其特征在于，包括前述权利要求1-2任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，和一种以上药学上可接受的载体。
4.根据权利要求3所述的一种药物组合物，其特征在于，为口服或者注射给药的药物组合物。
5.根据权利要求1-2任一项所述化合物或其药学上可接受的盐在制备治疗FXIa相关疾病的药物中的应用，所述FXIa相关疾病为血栓相关疾病。
6.根据权利要求3所述的药物组合物在制备治疗FXIa相关疾病的药物中的应用，所述FXIa相关疾病为血栓相关疾病。
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