CN114668742B - 仿细菌纳米药物递送系统及其制备方法和应用 - Google Patents

仿细菌纳米药物递送系统及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114668742B
CN114668742B CN202210263791.1A CN202210263791A CN114668742B CN 114668742 B CN114668742 B CN 114668742B CN 202210263791 A CN202210263791 A CN 202210263791A CN 114668742 B CN114668742 B CN 114668742B
Authority
CN
China
Prior art keywords
nano
delivery system
tumor
preparation
drug delivery
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202210263791.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114668742A (zh
Inventor
王育才
李敏
周汉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of Science and Technology of China USTC
Original Assignee
University of Science and Technology of China USTC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of Science and Technology of China USTC filed Critical University of Science and Technology of China USTC
Priority to CN202210263791.1A priority Critical patent/CN114668742B/zh
Publication of CN114668742A publication Critical patent/CN114668742A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114668742B publication Critical patent/CN114668742B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5063—Compounds of unknown constitution, e.g. material from plants or animals
    • A61K9/5068—Cell membranes or bacterial membranes enclosing drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/5123—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5192—Processes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明属于药物载体技术领域，公开了一种仿细菌纳米药物递送系统及其制备方法和应用，该系统在由生物可降解聚合物、阳离子脂质和siRNA药物制得的纳米颗粒浓缩液基础上，混合细菌外膜囊泡，经超声，制得仿细菌纳米药物递送系统；本发明的制备方法简单温和，原料易得，适于大规模生产，制得的仿细菌纳米药物载体用作抗肿瘤药物，构建形成的药物递送系统结构稳定，在肿瘤部位高富集和长期滞留，能够双重靶向树突状细胞和肿瘤细胞，显著提高抗肿瘤药物的作用效果。

Description

仿细菌纳米药物递送系统及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于药物载体技术领域，涉及一种仿细菌纳米药物递送系统，具体地说是仿细菌纳米药物递送系统及其制备方法和应用。
背景技术
恶性肿瘤是严重危害人类健康的难治疾病之一，除临床上常用的手术、放疗、化疗等常规治疗手段外，肿瘤免疫疗法已显示出强大潜力，其机理是利用机体的免疫系统攻击肿瘤细胞。理想的肿瘤免疫疗法应至少具有高效性和低的毒副作用等特点，即高效激活抗肿瘤免疫应答、实现对肿瘤细胞的有效杀伤，而不对机体的正常组织产生损伤，或影响极小。但目前的肿瘤免疫疗法的肿瘤靶向性较弱，一方面限制了治疗效果，另一方面也易引起副反应。
为解决上述问题，利用药物递送系统对肿瘤组织和特定种类免疫细胞和肿瘤细胞进行靶向递送，是提高疗效，减低毒副作用的重要途径，在此基础上，抗肿瘤药物递送系统的相关研究十分活跃，作为递送系统药物载体的成分也多种多样。
目前相关的药物载体研究大多集中在动物水平。单独的药物很难实现高水平的肿瘤富集，纳米载体可通过增强的渗透和滞留效应(EPR效应)增加药物在肿瘤部位的富集，但提高水平和靶向能力仍较为有限。通过在纳米载体表面修饰靶向性配体等方式可在一定程度上增强纳米载体的靶向性，但进入体内后表面快速形成的蛋白冠显著削弱其靶向功能。另外，如何实现对免疫细胞和肿瘤细胞的双重靶向，增强肿瘤免疫疗法的高效性、降低毒副作用是肿瘤免疫治疗领域亟待解决的难题。
因此，研发一种能够在肿瘤部位高富集长滞留、靶向作用于目标免疫细胞和肿瘤细胞的药物载体，构建形成稳定的药物递送系统，将极大提高抗肿瘤药物的作用效果。
发明内容
本发明的一个目的，是要提供一种仿细菌纳米药物递送系统，记为BNMs，采用生物可降解聚合物、阳离子脂质、siRNA药物和细菌外膜囊泡为原料，制得在肿瘤部位高富集长滞留、树突状细胞和肿瘤细胞双重靶向的仿细菌纳米药物递送系统；
本发明的另一个目的，是要提供上述仿细菌纳米药物递送系统的制备方法，以达到高效制备的目的；
本发明还有一个目的，是提供仿细菌纳米药物递送系统用作制备抗肿瘤药物的应用。
为实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：
一种仿细菌纳米药物递送系统，制成它的有效成分的原料，包括：生物可降解聚合物、阳离子脂质、siRNA药物和细菌外膜囊泡。
作为一种限定，所述生物可降解聚合物，为PEG-PLA和/或PEG-PLGA；优选为PEG5K-PLGA11K或PEG5K-PLA25K。
作为本发明的另一种限定，所述siRNA药物为含YTH结构域的家族蛋白1siRNA的药物(记为siYthdf1)或含程序性死亡因子配体1siRNA的药物(记为siPd-l1)。
作为本发明的第三种限定，所述阳离子脂质为(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺(记为DOTAP)或N，N-二羟乙基-N-甲基-N-2-(胆固醇氧羰基氨基)乙基溴化铵(记为BHEM-胆固醇)。
本发明还提供了上述仿细菌纳米药物递送系统的一种制备方法，包括依次进行的以下步骤：
S1.纳米颗粒浓缩液的制备
向含有生物可降解聚合物和阳离子脂质的氯仿中，加入siRNA药物，经第一次超声后加水，再经第二次超声，除去氯仿，经过滤、浓缩，得纳米颗粒浓缩液；
S2.仿细菌纳米药物递送系统的制备
取纳米颗粒浓缩液和细菌外膜囊泡混合，经第三次超声，得仿细菌纳米药物递送系统；
其中，生物可降解聚合物、阳离子脂质、氯仿、siRNA药物和水的比例关系为20～30g:2～3g:0.4～0.6L:10～15μmol:4～6L。
作为一种限定，所述细菌外膜囊泡，是由减毒沙门氏菌培养及后续分离所得。
作为进一步限定，取减毒沙门氏菌经增殖培养所得的培养液离心，得上清液，上清液经浓缩，分离，洗涤，得沉淀，即为细菌外膜囊泡。
作为再进一步限定，所述上清液经浓缩前，还需经0.45μm滤膜过滤。
作为本发明的另一种限定，所述纳米颗粒浓缩液中的纳米颗粒和细菌外膜囊泡的质量比为10g:2mg。
本发明还提供了上述仿细菌纳米药物递送系统的一种应用，即所述仿细菌纳米药物递送系统用作抗肿瘤药物。
本发明的仿细菌纳米药物递送系统可增强药物在肿瘤的富集和滞留，并可实现树突状细胞和肿瘤细胞的双重靶向。
由于采用了上述的技术方案，本发明与现有技术相比，所取得的技术进步在于：可实现同时向树突状细胞和肿瘤细胞递送药物，进而实现对其的有效干预，成功激活了抗肿瘤免疫应答，显著抑制肿瘤生长。
本发明的仿细菌纳米药物递送系统，是采用生物可降解聚合物、阳离子脂质、siRNA药物和细菌外膜囊泡为原料制得。其中，生物可降解聚合物中两亲性嵌段共聚物具有良好的生物亲和性及自组装特性，能够在进入机体后自行降解；阳离子脂质可以促进siRNA药物的包载；细菌外膜囊泡帮助药物在肿瘤的富集和滞留，实现对树突状细胞和肿瘤细胞的双重靶向。
本发明的仿细菌纳米药物递送系统，能够在肿瘤部位高富集长滞留、靶向作用树突状细胞和肿瘤细胞，构建形成的药物递送系统结构稳定，显著提高抗肿瘤药物的作用效果，肿瘤细胞摄取BNMs的细胞比例为61.0％，约为摄取对照纳米颗粒(记为NPs)的细胞的3.2倍。因此，仿细菌纳米药物递送系统能双重靶向树突状细胞和肿瘤细胞，通过增强肿瘤抗原在DC和肿瘤细胞中的提呈，促进抗原特异性T细胞的交叉激活、提高T细胞对肿瘤细胞的识别和杀伤。
本发明的仿细菌纳米药物递送系统，制备过程简单温和，原料易得，所制仿细菌纳米药物递送系统可用作抗肿瘤药物，易大规模生产，具有工业和实际应用的潜力。
下面结合附图及具体实施例对本发明作更进一步详细说明。
附图说明
图1为本发明实施例8中动态光散射测定NPs和BNMs的表面电势结果图；
图2为本发明实施例8中动态光散射测定NPs和BNMs的粒径结果图；
图3为本发明实施例8中动态光散射测定NPs和BNMs的血清稳定性结果图；
图4为本发明实施例8中Xenogen IVIS成像分析血液中NPs或BNMs结果图；
图5为本发明实施例8中NPs或BNMs的血液动力学结果图。
图6为本发明实施例8中荷瘤小鼠的全身荧光图像；
图7为本发明实施例8中荷瘤小鼠的肿瘤部位荧光值量化图；
图8为本发明实施例8中荷瘤小鼠的肿瘤、肝脏、脾脏、肺、肾脏及心脏组织荧光图像；
图9为本发明实施例8中荷瘤小鼠的肿瘤、肝脏、脾脏、肺、肾脏及心脏组织荧光值量化图；
图10为本发明实施例8中小鼠淋巴结中树突状细胞流式细胞术分析结果图；
图11为本发明实施例8中小鼠肿瘤组织中树突状细胞流式细胞术分析结果图；
图12为本发明实施例8中小鼠肿瘤细胞流式细胞术分析结果图。
具体实施方式
实施例1一种仿细菌纳米药物递送系统的制备方法
该制备方法包括依次进行的以下步骤：
S1.纳米颗粒浓缩液的制备
向含有25g PEG5K-PLGA11K(生物可降解聚合物)和2.5g(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺(阳离子脂质)的0.5L氯仿中，加入siYthdf1(siRNA药物)12.5μmol水溶液(25mL)，在冰浴中经第一次超声1min，对超声后所得混合物加5L水，置于冰浴环境，经第二次超声2min，悬蒸除去氯仿，经超滤浓缩至0.5L，得纳米颗粒浓缩液(标记代码为NPs)；
S2.仿细菌纳米药物递送系统的制备
细菌外膜囊泡的制备：将减毒沙门氏菌VNP20009接种至LB培养基中，在37℃下200rpm振荡培养12h；将振荡培养后所得培养液按1:100的稀释倍数加入1000L新鲜LB培养基中，培养至菌悬液的OD600达到1.0；收集培养悬液，4000g离心10min，得上清液；取上清液经0.45μm滤膜过滤，而后进行超滤浓缩至80L；对浓缩液150000g离心分离2h，分离所得沉淀即为细菌外膜囊泡(标记代码为OMVs)；
称取含10g纳米颗粒的纳米颗粒浓缩液和2mg的细菌外膜囊泡混合，冰浴中经第三次超声30min，得仿细菌纳米药物递送系统(标记代码为BNMs)。
实施例2～7仿细菌纳米药物递送系统的制备方法
实施例2～7分别为一种仿细菌纳米药物递送系统的制备方法，它们的制备方法中的工艺步骤与实施例1相似，与实施例1的不同之处仅在于：
实施例2中，生物可降解聚合物为PEG5K-PLA25K；siRNA药物为siPd-l1；阳离子脂质为BHEM-胆固醇；生物可降解聚合物、阳离子脂质、氯仿、siRNA药物和水的比例关系为20g:2g:0.48L:14μmol:4L。
实施例3中，生物可降解聚合物为PEG5K-PLA25K；siRNA药物为siPd-l1；生物可降解聚合物、阳离子脂质、氯仿、siRNA药物和水的比例关系为23g:3g:0.5L:15μmol:5L。
实施例4中，siRNA药物为siPd-l1；生物可降解聚合物、阳离子脂质、氯仿、siRNA药物和水的比例关系为30g:2.5g:0.4L:12μmol:6L。
实施例5中，生物可降解聚合物为PEG5K-PLA25K；阳离子脂质为BHEM-胆固醇；生物可降解聚合物、阳离子脂质、氯仿、siRNA药物和水的比例关系为27g:3g:0.57L:10μmol:4L。
实施例6中，生物可降解聚合物为PEG5K-PLA25K；siRNA药物为siPd-l1；生物可降解聚合物、阳离子脂质、氯仿、siRNA药物和水的比例关系为25g:2.4g:0.58L:14.3μmol:4.3L。
实施例7中，阳离子脂质为BHEM-胆固醇；生物可降解聚合物、阳离子脂质、氯仿、siRNA药物和水的比例关系为20g:2.5g:0.6L:10.67μmol:5.2L。
实施例2～7的制备方法中其它部分内容与实施例1相同，或为本领域技术人员根据实施情况的常规调整。
实施例8仿细菌纳米药物递送系统性能检测
(一)仿细菌纳米药物递送系统的表面电势、粒径和稳定性
通过动态光散射测定NPs和BNMs的表面电势、粒径及结构稳定性。
NPs和BNMs的表面电势结果如图1所示，其中，NPs的表面电势约28.33mV，BNMs的表面电势约26.67mV。粒径如图2所示，NPs和BNMs的粒径均为180nm左右。
动态光散射测定NPs和BNMs在生理溶液(含2％FBS的生理盐水)中的颗粒稳定性，如图3所示，NPs和BNMs在72h内粒径变化较小，表明在生理溶液环境下，本发明的仿细菌纳米药物递送系统结构稳定性好。
(二)仿细菌纳米药物递送系统的血液动力学
选择10只8周龄雄性ICR小鼠，随机分为两组，每组5只，分别注射6μg DiR标记的NPs或BNMs，在注射后的0min、5min、3h、6h、12h、24h、36h、48h和72h，通过眼眶后静脉丛取小鼠静脉血，2350g离心10min收集血浆，采用Xenogen IVIS成像分析其中DiR的相对含量，结果如图4所示，随着时间的延长NPs和BNMs在血液中的荧光均呈现降低的趋势。统计图4中的荧光强度，如图5所示，NPs和BNMs在12小时内荧光强度下降超过50％，但是72小时后血液中仍能检测到纳米颗粒荧光。
(三)仿细菌纳米药物递送系统的体内分布检测
通过检测实施例1制得的仿细菌纳米药物递送系统在肿瘤模型小鼠的体内分布情况，验证仿细菌纳米药物递送系统在肿瘤部位的高富集和长期滞留特性。
实验方法：6～8周龄C57BL/6小鼠皮下注射106个MC38细胞，待MC38肿瘤达到100mm3，随机抽取10只荷瘤小鼠，平均分为NPs和BNMs两组，分别按每只鼠5μg(DiR的剂量)静脉注射DiR标记的纳米颗粒浓缩液(实施例1制得的NPs)或仿细菌纳米药物递送系统(实施例1制得的BNMs)，在注射后3h、6h、12h、24h、36h、48h和72h，采用Xenogen IVIS成像系统观察全身荧光图像，抽取1只代表性小鼠拍摄结果进行展示，结果如图6，对各小鼠肿瘤部位荧光值进行量化分析，结果如图7；72h后取材小鼠肿瘤、肝脏、脾脏、肺、肾脏及心脏组织采用Xenogen IVIS成像系统进行成像，其中1只代表性小鼠结果如图8，对各小鼠肿瘤和脏器荧光值进行量化分析，结果如图9；
结果表明，相较于纳米颗粒浓缩液中的纳米颗粒，本发明实施例1制得的仿细菌纳米药物递送系统在肿瘤组织富集更多，且滞留时间更长，最终在肿瘤部位的富集量约是纳米颗粒的2.1倍。
(四)仿细菌纳米药物递送系统的双重靶向活性
通过流式细胞术检测树突状细胞(DC，为白细胞的一种)和肿瘤细胞对实施例1制得的纳米颗粒和仿细菌纳米药物递送系统的摄取情况，检测仿细菌纳米药物递送系统的双重靶向活性。
实验方法：将按照(一)中方法构建模型小鼠20只，随机分为A、B、C、D四组，每组5只，其中A组静脉注射DiO标记的纳米颗粒浓缩液(实施例1制得的NPs)，B组静脉注射DiO标记的仿细菌纳米药物递送系统(实施例1制得的BNMs)；C组静脉注射DiD标记的纳米颗粒浓缩液(实施例1制得的NPs)，D组静脉注射DiD标记的仿细菌纳米药物递送系统(实施例1制得的BNMs)；注射剂量为每只小鼠5μg(DiO或DiD的剂量)；注射24h后牺牲小鼠，收集肿瘤、腹股沟引流淋巴结，分离得单细胞悬液，用BV510-anti-CD11c、APC-Cy7-anti-CD45.2和PE-anti-IA/IE对肿瘤细胞和白细胞进行染色，用于流式细胞术分析。
分析结果如图10、图11和图12，结果表明，与纳米颗粒相比，肿瘤和淋巴结中树突状细胞均更多地摄取仿细菌纳米药物递送系统；另一方面，肿瘤细胞摄取BNMs的细胞比例为61.0％，约为摄取NPs的细胞的3.2倍。因此，仿细菌纳米药物递送系统能双重靶向树突状细胞和肿瘤细胞，通过增强肿瘤抗原在DC和肿瘤细胞中的提呈，促进抗原特异性T细胞的交叉激活、提高T细胞对肿瘤细胞的识别和杀伤。
上述结果表明，本发明的仿细菌纳米药物递送系统能够双重靶向树突状细胞和肿瘤细胞，在肿瘤部位高富集和长期滞留，构建形成的药物递送系统结构稳定，显著提高抗肿瘤药物的作用效果。
需要说明的是，以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域技术人员来说，其依然可以对上述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明权利要求保护的范围之内。

Claims (4)

1.一种仿细菌纳米药物递送系统的制备方法，其特征在于，制成该仿细菌纳米药物递送系统的有效成分的原料，包括：
生物可降解聚合物、阳离子脂质、siRNA药物和细菌外膜囊泡；
其中，所述生物可降解聚合物，为PEG-PLGA；
所述siRNA药物为含YTH结构域的家族蛋白1 siRNA的药物；
所述阳离子脂质为(2,3-二油酰基-丙基)-三甲胺；
该仿细菌纳米药物递送系统的制备方法包括依次进行的以下步骤：
S1.纳米颗粒浓缩液的制备
向含有生物可降解聚合物和阳离子脂质的氯仿中，加入siRNA药物，经第一次超声后加水，再经第二次超声，除去氯仿，经过滤、浓缩，得纳米颗粒浓缩液；
S2.仿细菌纳米药物递送系统的制备
取纳米颗粒浓缩液和细菌外膜囊泡混合，经第三次超声，得仿细菌纳米药物递送系统；
其中，生物可降解聚合物、阳离子脂质、氯仿、siRNA药物和水的比例关系为20～30g:2～3g:0.4～0.6L:10～15μmol:4～6L；
其中，所述细菌外膜囊泡，是由减毒沙门氏菌分离所得；
步骤S2中，所述纳米颗粒浓缩液中的纳米颗粒和细菌外膜囊泡的质量比为10g:2mg。
2.根据权利要求1所述的仿细菌纳米药物递送系统的制备方法，其特征在于，所述细菌外膜囊泡的制备方法为：取减毒沙门氏菌经增殖培养所得的培养液离心，得上清液，上清液经浓缩，分离，洗涤，得沉淀，即为细菌外膜囊泡。
3.根据权利要求2所述的仿细菌纳米药物递送系统的制备方法，其特征在于，所述上清液经浓缩前，还需经0.45μm滤膜过滤。
4.一种仿细菌纳米药物递送系统的应用，其特征在于，将权利要求1-3中任一项所制得的仿细菌纳米药物递送系统用于制备抗肿瘤药物。
CN202210263791.1A 2022-03-17 2022-03-17 仿细菌纳米药物递送系统及其制备方法和应用 Active CN114668742B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210263791.1A CN114668742B (zh) 2022-03-17 2022-03-17 仿细菌纳米药物递送系统及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210263791.1A CN114668742B (zh) 2022-03-17 2022-03-17 仿细菌纳米药物递送系统及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114668742A CN114668742A (zh) 2022-06-28
CN114668742B true CN114668742B (zh) 2023-06-16

Family

ID=82075059

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210263791.1A Active CN114668742B (zh) 2022-03-17 2022-03-17 仿细菌纳米药物递送系统及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114668742B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115948475A (zh) * 2022-11-25 2023-04-11 中国科学院深圳先进技术研究院 一种用于rna递送的转染复合物及其制备方法和应用

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107142228A (zh) * 2017-04-18 2017-09-08 浙江大学 一种大肠杆菌外膜囊泡的制备、载药方法与其在抗肿瘤中的应用
CN110279661A (zh) * 2019-05-22 2019-09-27 兰溪市立顺生物有限公司 一种纳米颗粒组合物递送系统、制备方法及其用途
CN112891318A (zh) * 2019-12-03 2021-06-04 复旦大学 一种细菌外膜囊泡包载的阿霉素纳米粒及其用途
CN113679829B (zh) * 2020-05-18 2024-01-02 北京繁易纳维科技有限公司 一种预防癌症术后复发的肿瘤疫苗及其制备方法和应用
CN114099533A (zh) * 2021-11-25 2022-03-01 中国药科大学 核酸药物递送系统、制备方法、药物组合物和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN114668742A (zh) 2022-06-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9351931B2 (en) Pharmaceutical preparation for tumor chemotherapy and method for producing the same
US10548853B2 (en) Oncolytic virus formulation and preparation method thereof
CN106821985B (zh) 一种适配体修饰的携氧载药多功能脂质体复合物
CN105012272B (zh) 一种可用于治疗骨转移癌的氧化还原敏感骨靶向胶束
CN108066317B (zh) 纳米药物控释体系的制备方法及其产品与应用
CN106139148B (zh) 一种肿瘤化疗药物制剂组合
KR20120132183A (ko) 종양 조직에서 유래한 나노소포체 및 이를 이용한 암 백신
CN109666695A (zh) 一种靶向整合素αvβ3的外泌体载体及其制备方法和应用
CN105012271A (zh) 一种共担载阿霉素和trail的白蛋白纳米粒靶向制剂及制备方法
CN114668742B (zh) 仿细菌纳米药物递送系统及其制备方法和应用
CN113476615A (zh) 一种肺靶向载药外泌体及应用和治疗肺部疾病药物
Zhang et al. Nano-drug delivery system with enhanced tumour penetration and layered anti-tumour efficacy
CN114642736B (zh) 一种透血脑屏障药物递送系统及其制备方法和应用
CN113398092A (zh) 一种膀胱靶向载药外泌体及应用和治疗膀胱疾病药物
CN104231050A (zh) 一种抑制肿瘤转移和治疗白血病的多肽和多肽复合物、其制备方法及其应用
CN115252632A (zh) 一种基于载药囊泡的突破血脑屏障组合物及其应用
CN106924748A (zh) 高穿透性肿瘤靶向脂质插件的构建及其促进细胞及细胞膜制剂向肿瘤聚集的作用
CN113456832A (zh) 一种转铁蛋白修饰的包载抗体的纳米粒及其应用
TW200920387A (en) Composition of mushroom beta-glucan for anti-cancer and preparation method thereof
CN114903870B (zh) 一种工程化细胞膜纳米颗粒及其制备方法和应用
CN117942410B (zh) 一种多肽修饰人脐带间充质细胞源外泌体的给药载体及其制备方法
CN111714641B (zh) 一种5-硼吡啶羧酸修饰的靶向药物递送系统及其制备方法
CN115192546B (zh) 一种靶向肝癌干细胞的多功能纳米粒及其制备方法
CN115350282B (zh) 靶向肝癌的载药外泌体、快速制备方法及其应用
CN100372571C (zh) 壳聚糖-免疫rna复合物制剂及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant