CN114668024A - 一种含啶酰菌胺和金银花精油的杀菌组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及农药领域，提供了一种将天然产物金银花精油与化学杀菌剂啶酰菌胺混合用于防治核桃病害的组合物，该组合物可显著提高啶酰菌胺对核桃叶部和果实病害的防效，能够有效减少化学农药用量，降低农药残留和环境污染，为药剂开发和科学使用开辟了的新思路。

Description

一种含啶酰菌胺和金银花精油的杀菌组合物

技术领域

本发明涉及农药领域，特别是涉及一种含啶酰菌胺和金银花精油防治核桃病害的组合物。

背景技术

目前我国核桃种植面积、产量均占世界第一。核桃的主要病害有核桃链格孢叶斑病、核桃炭疽病、核桃黑斑病等。核桃链格孢叶斑病的病原菌为半知菌亚门链格孢属极细链格孢菌(Alternaria tenuissima)，可危害核桃树叶片、果实、芽和幼梢。该病造成核桃叶片出现黑褐色斑块，坏死焦枯，核桃灌浆不足，产量下降，对核桃产业发展具有潜在威胁。核桃炭疽病的病原菌主要为半知菌亚门炭疽菌属尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum)，可危害核桃树叶片、果实和幼梢，当果实受害后，果皮上会形成初期为褐色、后期变为黑色的圆形或近圆形病斑，严重影响了核桃的产量和品质。

啶酰菌胺的化学名称为2-氯-N-(4′-氯代联苯-2-基)-烟酰胺是琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂，杀菌谱较广。啶酰菌胺作用于线粒体呼吸链中琥珀酸辅酶Q，抑制了电子从琥珀酸转至到辅酶Q（泛醌），从而阻断了能量的合成，导致了病原菌的死亡。啶酰菌胺对孢子的萌发有很强的抑制能力，与其它杀菌剂无交互抗性。

金银花是一种广泛应用的中药材，是忍冬科忍冬属植物忍冬（Lonicera japonicaThunb.）的干燥花蕾或带初开的花。金银花精油是以金银花干花为原料，通过干燥、粉碎、超高压处理后，对金银花浸膏进行脱胶处理再由经旋转蒸发仪浓缩后得到的挥发性精油。金银花精油具有高效的抑菌效果，并具有诱导植物抗病性的作用。

发明内容

针对缺乏有效防治核桃生长期病害药剂的问题，本发明提供一种含啶酰菌胺和金银花精油的防治核桃炭疽病、核桃链格孢叶斑病的杀菌组合物，以提高对核桃等果树病害的防治效果，延缓病原菌对琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的抗性。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

金银花精油作为啶酰菌胺增效剂的用途。

所述金银花精油和啶酰菌胺的质量比为1:2.5-80。

一种防治核桃病害的杀菌组合物，包括啶酰菌胺和金银花精油，所述啶酰菌胺与金银花精油的质量比为20:1-50:1。

优选地，上述杀菌组合物中啶酰菌胺的质量百分含量为10%-50%。

优选地，上述杀菌组合物中还包括将有效成分啶酰菌胺和金银花精油便于使用或均匀分布于作物上的助剂，如惰性填料、润湿分散剂、渗透剂、乳化剂、溶剂、防冻剂、消泡剂、颜料等。

优选地，上述杀菌组合物的剂型选自水分散粒剂、悬浮剂、水乳剂。

上述杀菌组合物还可用于防治枣树、苹果树、梨树等果树上的炭疽病、黑斑病等。

本发明具有以下优点：

本发明提供了一种将天然产物金银花精油与化学杀菌剂啶酰菌胺混合用于防治核桃病害的组合物，该组合物可显著提高啶酰菌胺对核桃叶部和果实病害的防效，能够有效减少化学农药用量，降低农药残留和环境污染，为药剂开发和科学使用开辟了的新思路。

附图说明

图1是金银花精油对啶酰菌胺对核桃链格孢叶斑病菌的增效效果；其中，A为核桃链格孢叶斑病菌，B为单独啶酰菌胺处理，C为啶酰菌胺和金银花精油处理；

图2是金银花精油对啶酰菌胺对核桃炭疽病菌的增效效果；其中，A为核桃炭疽病菌，B为单独啶酰菌胺处理，C为啶酰菌胺和金银花精油处理。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明做进一步说明，但本发明不受下述实施例的限制。

实施例1 啶酰菌胺和金银花精油对核桃病原菌的联合毒力

啶酰菌胺购自京博农化科技有限公司，金银花精油购自江西万花香料有限公司。

1. 对核桃链格孢叶斑病菌的联合毒力

采用菌丝生长速率法测定啶酰菌胺和金银花精油单独和按照20:1、50:1、100:1混用后对核桃链格孢叶斑病菌（Alternaria tenuissima）的室内毒力：根据预试结果将药剂稀释为5-7个浓度，与PDA培养基混合后倒入9cm平皿内，冷却后制成含药平板，以加入等量灭菌水的为对照，然后将7mm核桃链格孢叶斑病菌的菌饼倒置接种于含药平板中央，28℃培养至对照长满80%平皿进行测定，以十字交叉法测定菌落直径，计算生长抑制率并用软件计算EC₅₀，采用孙云沛法评价两药剂复配对核桃链格孢叶斑病菌菌丝生长的联合毒力，并计算共毒系数（CTC）。CTC <80表示拮抗，80≤CTC≤120表示相加，CTC>120表示增效。

表1 金银花精油和啶酰菌胺混用对核桃链格孢叶斑病菌的联合毒力

结果如表1所示：啶酰菌胺和金银花精油对核桃链格孢叶斑病菌的EC₅₀分别为1.288mg/L和0.272mg/L，两者按照质量比20:1-100:1混合后对核桃链格孢叶斑病菌的EC₅₀分别为0.542mg/L、0.910mg/L和1.681mg/L，其共毒系数分别为221.43、136.49、75.22，其中前2个配比中金银花精油对啶酰菌胺的增效十分显著。

2. 对核桃炭疽病菌的联合毒力

采用孢子萌发法测定啶酰菌胺和金银花精油单独和按照20:1、50:1、100:1混用后对核桃炭疽病菌（Colletotrichum acutatum）的室内毒力：取产生孢子的核桃炭疽病菌培养皿，用一次性吸管冲洗孢子，将孢子悬浮液倒入已经灭过菌的烧杯，再添加少量的无菌水稀释。用玻璃棒将孢子悬浮液搅匀，用一次性滴管取一滴至载玻片上观察并稀释，直至视野中(10×10)孢子的数量为20-30个。先取20μL摇匀的孢子悬浮液滴加到凹玻片上，然后滴加20μL各浓度药剂，置于培养皿（含吸水纸，并加入无菌水湿润）中保湿(需要封口保水)，然后于25℃的恒温培养箱中培养，每个浓度3次重复。以不含药剂的处理为空白对照。处理16h后于显微镜下观察孢子萌发情况，并计算不同浓度下的萌发抑制率，用软件计算EC₅₀，采用孙云沛法评价两药剂复配对核桃炭疽病菌孢子的联合毒力，并计算共毒系数（CTC）。CTC <80表示拮抗，80≤CTC≤120表示相加，CTC>120表示增效。

表2 金银花精油和啶酰菌胺混用对核桃炭疽病菌的联合毒力

结果如表2所示：啶酰菌胺和金银花精油对核桃炭疽病菌的EC₅₀分别为0.749mg/L和0.750mg/L，两者按照质量比20:1-100:1混合后对核桃炭疽病菌的EC₅₀分别为0.380mg/L、0.606mg/L和0.948mg/L，其共毒系数分别为197.11、123.60和79.01，其中前2个配比中金银花精油对啶酰菌胺的增效十分显著。

实施例2 金银花精油对啶酰菌胺对核桃病原菌的增效

1. 对核桃链格孢叶斑病菌的增效

选择直径9cm的培养皿，在皿盖中央贴1片直径5mm滤纸片，灭菌后待用。在超净工作台上，向培养皿内倒入20mL PDA培养基，混入啶酰菌胺，使其终浓度为1.29mg/L（理论生长抑制率约50%），皿内剩余空间容积为70mL。接种直径5mm的核桃链格孢叶斑病菌菌饼后，立即在滤纸片上滴加入低于最小抑菌浓度的终浓度0.026mg/L的金银花精油，迅速封口，分别以直接接种核桃链格孢叶斑病菌菌饼、添加精油以及添加啶酰菌胺不加精油处理为对照，每个处理重复4次。28℃培养至对照长满80%平皿进行测定，以十字交叉法测定菌落直径，计算生长抑制率。

结果如图1所示：金银花精油作为增效剂与啶酰菌胺混用，可以将抑制率提升30.50%，金银花精油作为增效剂的作用明显。

按照上述方法，啶酰菌胺加入终浓度分别为0.26mg/L（约EC₂₀）、0.80mg/L（约EC₄₀）、2.08mg/L（约EC₆₀），金银花精油对于啶酰菌胺对核桃链格孢叶斑病菌生长抑制率分别能够提高20.5%、23.4%和30.8%。说明，金银花精油对啶酰菌胺有显著的增效作用。

2. 对核桃炭疽病菌的增效

选择直径9cm的培养皿，在皿盖中央贴1片直径5mm滤纸片，灭菌后待用。20μL摇匀的孢子悬浮液（10×10视野孢子的数量20-30个）滴加到凹玻片上，然后滴加20μL浓度为0.75mg/L的啶酰菌胺药液（约EC₅₀），置于培养皿（含吸水纸，并加入无菌水湿润）中保湿，立即在滤纸片上滴加低于最小抑菌浓度的终浓度0.0375mg/L金银花精油，迅速封口，然后于25℃的恒温培养箱中培养，每个浓度3次重复。以不含药剂的处理为空白对照。处理16h后于显微镜下观察孢子萌发情况，并计算不同浓度下的萌发抑制率。

结果如图2所示：金银花精油作为增效剂与啶酰菌胺混用，可以将孢子萌发抑制率提升45.0%，说明，最小抑制浓度以下的金银花精油作为啶酰菌胺增效剂的作用明显。

按照上述方法，啶酰菌胺加入终浓度分别为0.11mg/L（约EC₂₀）、0.42mg/L（约EC₄₀）、1.34mg/L（约EC₆₀），金银花精油对于啶酰菌胺对核桃炭疽病病菌孢子萌发抑制率分别能够提高10.3%、38.0%和46.7%。说明，金银花精油对啶酰菌胺有显著的增效作用。

实施例3 金银花精油和啶酰菌胺对核桃链格孢叶斑病的田间防效

将金银花精油和啶酰菌胺为有效成分加工成20%啶酰菌胺水分散粒剂、1%金银花精油微囊悬浮剂、21%啶酰菌胺+金银花精油（20:1）水分散粒剂和51%啶酰菌胺+金银花精油（50:1）水分散粒剂用于田间防治核桃链格孢叶斑病。

在连续多年发生核桃链格孢叶斑病的果园开展试验。在病害发生前或零星发病时施药，连续施药两次，间隔10天施药。田间试验设置5个处理，4次重复，每个重复2株核桃树。以清水为对照，试验小区完全随机区组排列。

采用常规栽培管理，第一次药后10天和第二次药后10天各调查一次发病率。调查方法为每处理按对角线五点取样法取样，各调查2株。每株树按东、南、西、北、中5个方位取样 (取样时兼顾上、中、下3层叶片)，调查100片叶（每方位调查20片），分别记录病叶数，计算发病率，并计算防效（防效=（对照组发病率-处理组发病率）/对照组发病率×100%），

对防效进行方差分析并采用邓肯氏新复极差法比较各药剂的平均防效是否存在显著性差异。

表3 金银花精油和啶酰菌胺复配对核桃链格孢叶斑病的防效

结果如表3所示：与20%啶酰菌胺悬浮剂在田间使用200 mg/L防治核桃链格孢叶斑病相比，21%啶酰菌胺+金银花精油（20:1）水分散粒剂和51%啶酰菌胺+金银花精油（50:1）水分散粒剂中均降低啶酰菌胺1/2用量以下，且防效与单用啶酰菌胺相当或显著高于单用啶酰菌胺防效。其中，第二次药后10天，21%啶酰菌胺+金银花精油（20:1）水分散粒剂处理的防治效果显著高于另外1个复配组合及啶酰菌胺单独处理。这表明，金银花精油和啶酰菌胺混用能够降低啶酰菌胺的使用剂量且提高防效，适合田间防治核桃链格孢叶斑病。

实施例4 金银花精油和啶酰菌胺对核桃炭疽病的田间防效

将金银花精油和啶酰菌胺为有效成分加工成20%啶酰菌胺水分散粒剂、1%金银花精油微囊悬浮剂、21%啶酰菌胺+金银花精油（20:1）水分散粒剂和51%啶酰菌胺+金银花精油（50:1）水分散粒剂用于田间防治核桃核桃炭疽病。

在连续多年发生核桃炭疽病的果园开展试验。在病害发生前或零星发病时施药，连续施药两次，间隔10天施药。田间试验设置5个处理，4次重复，每个重复2株核桃树。以清水为对照，试验小区完全随机区组排列。采用常规栽培管理，第一次药后10天和第二次药后10天各调查一次发病情况。调查方法为每处理按对角线五点取样法取样，各调查2株。按以下标准进行田间调查分级：0级为健株，长势良好无病症；1级为危害部位占整植株（或根部、枝干等）1/4以下；2级为危害部位占整植株（或根部、枝干等）1/4-1/2；3级为危害部位占整植株（或根部、枝干等）1/2-3/4；4级为危害部位占整植株（或根部、枝干等）3/4以上。

按照以下公式计算病情指数和防效：

病情指数=∑（各级病株数×相对级数值）/（调查总株数×最大病级数）×100

防效%=（对照区病情指数-处理区病情指数）/对照区病情指数×100%。

对防效进行方差分析并采用邓肯氏新复极差法比较各药剂的平均防效是否存在显著性差异。

表4 金银花精油和啶酰菌胺复配对核桃炭疽病的防效

结果如表4所示：与20%啶酰菌胺悬浮剂在田间使用200 mg/L防治核桃炭疽病相比，21%啶酰菌胺+金银花精油（20:1）水分散粒剂和51%啶酰菌胺+金银花精油（50:1）水分散粒剂中均降低啶酰菌胺1/2用量以下，且防效显著高于单用啶酰菌胺防效。其中，第二次药后10天，21%啶酰菌胺+金银花精油（20:1）水分散粒剂处理和和51%啶酰菌胺+金银花精油（50:1）水分散粒剂处理的防治效果与第一次施药相比防效均略有上升，持效性好。这表明，金银花精油和啶酰菌胺混用能够降低啶酰菌胺的使用剂量、提高防效并且持效期长，适合田间防治核桃炭疽病。

Claims (7)

1.金银花精油作为啶酰菌胺增效剂的用途。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述金银花精油和啶酰菌胺的质量比为1:2.5-80。

3.一种防治核桃病害的杀菌组合物，其特征在于，包括啶酰菌胺和金银花精油，所述啶酰菌胺与金银花精油的质量比为20:1-50:1。

4.根据权利要求3所述的杀菌组合物，其特征在于，啶酰菌胺的质量百分含量为10%-50%。

5.根据权利要求3所述的杀菌组合物，其特征在于，所述杀菌组合物中还包括惰性填料、润湿分散剂、渗透剂、乳化剂、溶剂、防冻剂、消泡剂、颜料。

6.根据权利要求3所述的杀菌组合物，其特征在于，所述杀菌组合物的剂型选自水分散粒剂、悬浮剂、水乳剂。

7.根据权利要求3所述的杀菌组合物，其特征在于，所述杀菌组合物用于防治枣树、苹果树、梨树上的炭疽病或黑斑病。

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