CN114652633B - 一种多肽酶解发酵组合物的制备方法及其护肤品中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种多肽酶解发酵组合物的制备方法，包括以下步骤：鹿茸多肽酶解料的制备：S01：将鹿茸粉碎，然后加入2‑3倍的水制成浆液；S02：然后向浆液中加入复合酶，酶解处理，得到酶解料；S03：将酶解料于85‑90℃下水热处理30‑40min，然后冷却至室温，采用纳滤膜过滤，去除滤液，再冷冻干燥，得到鹿茸多肽酶解料。本发明多肽酶解发酵组合物以鹿茸多肽酶解料为主体基料，配合改性二氧化钛、壳聚糖剂，二者具有协同功效，能够改进EGF衰减量的稳定性，从而提高鹿茸多肽酶解料在产品中抗氧化性的效果，同时本发明在抗氧化性中，改性二氧化钛、壳聚糖剂能够进一步的进行补强、互助，共同增进产品的抗氧化性效果。

Description

一种多肽酶解发酵组合物的制备方法及其护肤品中的应用
技术领域
本发明涉及多肽酶解技术领域，具体涉及一种多肽酶解发酵组合物的制备方法及其护肤品中的应用。
背景技术
护肤品，即保护皮肤的产品。鹿茸多肽包含有丰富的表皮细胞生长因子(Epidermal Growth Factor，EGF )和胰岛素样生长因子、神经生长因子、转化生长因子等。有实验证明，这些生长因子能够加速表皮细胞的分裂与生长，对皮肤的再生与修复起着重要的作用。但是，这些细胞生长因子的半衰期短、稳定性差；EGF等多种生长因子存在常温下稳定性差，对热光极不稳定、易降解及易失活等缺点。此外，细胞生长因子透皮吸收性不高也是其产品化需要解决的问题。
基于此，本发明对鹿茸多肽进行组合改进，提供一种高效稳定的多肽酶解发酵组合物。
发明内容
针对现有技术的缺陷，本发明的目的是提供一种多肽酶解发酵组合物的制备方法及其护肤品中的应用，以解决上述背景技术中提出的问题。
本发明解决技术问题采用如下技术方案：
本发明提供了一种多肽酶解发酵组合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：鹿茸多肽酶解料的制备：
S01：将鹿茸粉碎，然后加入2-3倍的水制成浆液；
S02：然后向浆液中加入复合酶，酶解处理，得到酶解料；
S03：将酶解料于85-90℃下水热处理30-40min，然后冷却至室温，采用纳滤膜过滤，去除滤液，再冷冻干燥，得到鹿茸多肽酶解料；
步骤二：称取30-40份鹿茸多肽酶解料、2-6份改性二氧化钛、1-4份壳聚糖剂；
步骤三：然后于发酵罐内进行发酵处理，发酵温度为37-41℃，发酵时间为10-24h，发酵结束，备用；
步骤四：取10-20份步骤二的产物、20-30份水、2-5份角鲨烷和3-6份甘油以及1-4份丁二醇搅拌混合充分，得到多肽酶解发酵组合物。
优选地，所述复合酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶；胃蛋白酶占复合酶总量35-45%；且复合酶加入量为浆液的5-10%。
优选地，所述酶解温度为35-39℃，酶解pH为5.0-6.0，酶解2-3h。
优选地，所述改性二氧化钛的改性方法为：
S11：将15-25份二氧化钛加入到25-35份丙酮溶剂中，充分分散，加入盐酸，调节pH值至5.0，得到二氧化钛分散液；
S12：将二氧化钛分散液中加入10-15%的十二烷基硫酸钠、1-5%的柠檬酸，搅拌混合充分，再水洗、干燥，得到预处理二氧化钛；
S13：预处理二氧化钛中加入2-10%的稀土液，然后于球磨机球磨，球磨结束、水洗，干燥，得到改性二氧化钛。
优选地，所述稀土液为质量分数5-10%的氯化镧。
优选地，所述球磨机球磨的转速为500-1000r/min，球磨时间为10-30min。
本发明的发明人发现未添加改性二氧化钛，产品在35℃下EGF衰减量显著高于常规下EGF衰减量，改性二氧化钛的加入能够改进产品的稳定性；同时通过壳聚糖剂，能够起到协配增效的效果，共同改进产品的EGF衰减量，以及产品的稳定性；
本发明的发明人发现二氧化钛改性方法不同，性能改进效果不同，采用本发明的改性方法，改性效果最显著；同时二氧化钛采用碳纳米管代替，产品的EGF衰减量反而降低更显著，基于此，本发明二氧化钛的选择具有专有性，同时采用本发明的改性方法效果最显著；
同时发现植物多糖提取剂采用芦荟提取剂代替，产品的EGF衰减量稳定性降低明显，植物多糖提取剂的使用对产品的EGF衰减量改进具有显著成效。
优选地，所述壳聚糖剂的制备方法为：将枸杞送入到捣碎机中进行捣碎，然后加入2-3倍的乙醇溶剂超声处理，超声功率为350-380W，超声时间为10-20min，超声结束，再除醇，最后加入5-9倍的水进行文火煮沸，得到提取液，然后蒸发处理，得到植物多糖提取剂；再将壳聚糖、植物多糖提取剂按照重量比1:3混合，形成壳聚糖剂。
本发明的发明人发现产品中未添加壳聚糖剂，产品的DPPH清除率发生显著降低，而植物多糖提取剂的使用对产品的抗氧化性有显著改进效果；
壳聚糖剂的使用效果明显优于改性二氧化钛，对产品的抗氧化性能，结合EGF衰减量测试发现，产品的壳聚糖剂、改性二氧化钛具有协同增效，共同改进产品的抗氧化能。
优选地，所述文火煮沸的时间为1-3h。
优选地，所述蒸发至含水率低于5%。
本发明还提供了一种多肽酶解发酵组合物在护肤品中的应用。
与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
本发明的多肽酶解发酵组合物以鹿茸多肽酶解料为主体基料，配合改性二氧化钛、壳聚糖剂，二者具有协同功效，能够改进EGF衰减量的稳定性，从而提高鹿茸多肽酶解料在产品中抗氧化性的效果，同时本发明在抗氧化性中，改性二氧化钛、壳聚糖剂能够进一步的进行补强、互助，共同增进产品的抗氧化性效果。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本实施例的本发明提供了一种多肽酶解发酵组合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：鹿茸多肽酶解料的制备：
S01：将鹿茸粉碎，然后加入2-3倍的水制成浆液；
S02：然后向浆液中加入复合酶，酶解处理，得到酶解料；
S03：将酶解料于85-90℃下水热处理30-40min，然后冷却至室温，采用纳滤膜过滤，去除滤液，再冷冻干燥，得到鹿茸多肽酶解料；
步骤二：称取30-40份鹿茸多肽酶解料、2-6份改性二氧化钛、1-4份壳聚糖剂；
步骤三：然后于发酵罐内进行发酵处理，发酵温度为37-41℃，发酵时间为10-24h，发酵结束，备用；
步骤四：取10-20份步骤二的产物、20-30份水、2-5份角鲨烷和3-6份甘油以及1-4份丁二醇搅拌混合充分，得到多肽酶解发酵组合物。
本实施例的复合酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶；胃蛋白酶占复合酶总量35-45%；且复合酶加入量为浆液的5-10%。
本实施例的酶解温度为35-39℃，酶解pH为5.0-6.0，酶解2-3h。
本实施例的改性二氧化钛的改性方法为：
S11：将15-25份二氧化钛加入到25-35份丙酮溶剂中，充分分散，加入盐酸，调节pH值至5.0，得到二氧化钛分散液；
S12：将二氧化钛分散液中加入10-15%的十二烷基硫酸钠、1-5%的柠檬酸，搅拌混合充分，再水洗、干燥，得到预处理二氧化钛；
S13：预处理二氧化钛中加入2-10%的稀土液，然后于球磨机球磨，球磨结束、水洗，干燥，得到改性二氧化钛。
本实施例的稀土液为质量分数5-10%的氯化镧。
本实施例的球磨机球磨的转速为500-1000r/min，球磨时间为10-30min。
本实施例的壳聚糖剂的制备方法为：将枸杞送入到捣碎机中进行捣碎，然后加入2-3倍的乙醇溶剂超声处理，超声功率为350-380W，超声时间为10-20min，超声结束，再除醇，最后加入5-9倍的水进行文火煮沸，得到提取液，然后蒸发处理，得到植物多糖提取剂；再将壳聚糖、植物多糖提取剂按照重量比1:3混合，形成壳聚糖剂。
本实施例的文火煮沸的时间为1-3h。
本实施例的蒸发至含水率低于5%。
本实施例的一种多肽酶解发酵组合物在护肤品中的应用。
实施例1.
本实施例的本发明提供了一种多肽酶解发酵组合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：鹿茸多肽酶解料的制备：
S01：将鹿茸粉碎，然后加入2倍的水制成浆液；
S02：然后向浆液中加入复合酶，酶解处理，得到酶解料；
S03：将酶解料于85℃下水热处理30min，然后冷却至室温，采用纳滤膜过滤，去除滤液，再冷冻干燥，得到鹿茸多肽酶解料；
步骤二：称取30份鹿茸多肽酶解料、2份改性二氧化钛、1份壳聚糖剂；
步骤三：然后于发酵罐内进行发酵处理，发酵温度为37℃，发酵时间为10h，发酵结束，备用；
步骤四：取10份步骤二的产物、20份水、2份角鲨烷和3份甘油以及1份丁二醇搅拌混合充分，得到多肽酶解发酵组合物。
本实施例的复合酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶；胃蛋白酶占复合酶总量35%；且复合酶加入量为浆液的5%。
本实施例的酶解温度为35℃，酶解pH为5.0，酶解2h。
本实施例的改性二氧化钛的改性方法为：
S11：将15份二氧化钛加入到25份丙酮溶剂中，充分分散，加入盐酸，调节pH值至5.0，得到二氧化钛分散液；
S12：将二氧化钛分散液中加入10%的十二烷基硫酸钠、1%的柠檬酸，搅拌混合充分，再水洗、干燥，得到预处理二氧化钛；
S13：预处理二氧化钛中加入2%的稀土液，然后于球磨机球磨，球磨结束、水洗，干燥，得到改性二氧化钛。
本实施例的稀土液为质量分数5%的氯化镧。
本实施例的球磨机球磨的转速为500r/min，球磨时间为10min。
本实施例的壳聚糖剂的制备方法为：将枸杞送入到捣碎机中进行捣碎，然后加入2倍的乙醇溶剂超声处理，超声功率为350W，超声时间为10min，超声结束，再除醇，最后加入5倍的水进行文火煮沸，得到提取液，然后蒸发处理，得到植物多糖提取剂；再将壳聚糖、植物多糖提取剂按照重量比1:3混合，形成壳聚糖剂。
本实施例的文火煮沸的时间为1h。
本实施例的蒸发至含水率低于5%。
本实施例的一种多肽酶解发酵组合物在护肤品中的应用。
实施例2.
本实施例的本发明提供了一种多肽酶解发酵组合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：鹿茸多肽酶解料的制备：
S01：将鹿茸粉碎，然后加入3倍的水制成浆液；
S02：然后向浆液中加入复合酶，酶解处理，得到酶解料；
S03：将酶解料于90℃下水热处理40min，然后冷却至室温，采用纳滤膜过滤，去除滤液，再冷冻干燥，得到鹿茸多肽酶解料；
步骤二：称取40份鹿茸多肽酶解料、6份改性二氧化钛、4份壳聚糖剂；
步骤三：然后于发酵罐内进行发酵处理，发酵温度为41℃，发酵时间为24h，发酵结束，备用；
步骤四：取20份步骤二的产物、30份水、5份角鲨烷和6份甘油以及4份丁二醇搅拌混合充分，得到多肽酶解发酵组合物。
本实施例的复合酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶；胃蛋白酶占复合酶总量45%；且复合酶加入量为浆液的10%。
本实施例的酶解温度为39℃，酶解pH为6.0，酶解3h。
本实施例的改性二氧化钛的改性方法为：
S11：将25份二氧化钛加入到35份丙酮溶剂中，充分分散，加入盐酸，调节pH值至5.0，得到二氧化钛分散液；
S12：将二氧化钛分散液中加入15%的十二烷基硫酸钠、5%的柠檬酸，搅拌混合充分，再水洗、干燥，得到预处理二氧化钛；
S13：预处理二氧化钛中加入10%的稀土液，然后于球磨机球磨，球磨结束、水洗，干燥，得到改性二氧化钛。
本实施例的稀土液为质量分数10%的氯化镧。
本实施例的球磨机球磨的转速为1000r/min，球磨时间为30min。
本实施例的壳聚糖剂的制备方法为：将枸杞送入到捣碎机中进行捣碎，然后加入3倍的乙醇溶剂超声处理，超声功率为380W，超声时间为20min，超声结束，再除醇，最后加入9倍的水进行文火煮沸，得到提取液，然后蒸发处理，得到植物多糖提取剂；再将壳聚糖、植物多糖提取剂按照重量比1:3混合，形成壳聚糖剂。
本实施例的文火煮沸的时间为3h。
本实施例的蒸发至含水率低于5%。
本实施例的一种多肽酶解发酵组合物在护肤品中的应用。
实施例3.
本实施例的本发明提供了一种多肽酶解发酵组合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：鹿茸多肽酶解料的制备：
S01：将鹿茸粉碎，然后加入2.5倍的水制成浆液；
S02：然后向浆液中加入复合酶，酶解处理，得到酶解料；
S03：将酶解料于87.5℃下水热处理35min，然后冷却至室温，采用纳滤膜过滤，去除滤液，再冷冻干燥，得到鹿茸多肽酶解料；
步骤二：称取35份鹿茸多肽酶解料、4份改性二氧化钛、2.5份壳聚糖剂；
步骤三：然后于发酵罐内进行发酵处理，发酵温度为38.5℃，发酵时间为17h，发酵结束，备用；
步骤四：取15份步骤二的产物、25份水、3.5份角鲨烷和4.5份甘油以及2.5份丁二醇搅拌混合充分，得到多肽酶解发酵组合物。
本实施例的复合酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶；胃蛋白酶占复合酶总量40%；且复合酶加入量为浆液的7.5%。
本实施例的酶解温度为37℃，酶解pH为5.5，酶解2.5h。
本实施例的改性二氧化钛的改性方法为：
S11：将20份二氧化钛加入到30份丙酮溶剂中，充分分散，加入盐酸，调节pH值至5.0，得到二氧化钛分散液；
S12：将二氧化钛分散液中加入12.5%的十二烷基硫酸钠、3%的柠檬酸，搅拌混合充分，再水洗、干燥，得到预处理二氧化钛；
S13：预处理二氧化钛中加入6%的稀土液，然后于球磨机球磨，球磨结束、水洗，干燥，得到改性二氧化钛。
本实施例的稀土液为质量分数7.5%的氯化镧。
本实施例的球磨机球磨的转速为750r/min，球磨时间为20min。
本实施例的壳聚糖剂的制备方法为：将枸杞送入到捣碎机中进行捣碎，然后加入2.5倍的乙醇溶剂超声处理，超声功率为365W，超声时间为15min，超声结束，再除醇，最后加入7倍的水进行文火煮沸，得到提取液，然后蒸发处理，得到植物多糖提取剂；再将壳聚糖、植物多糖提取剂按照重量比1:3混合，形成壳聚糖剂。
本实施例的文火煮沸的时间为2h。
本实施例的蒸发至含水率低于5%。
本实施例的一种多肽酶解发酵组合物在护肤品中的应用。
对比例1.
与实施例3不同是未添加改性二氧化钛。
对比例2.
与实施例3不同是改性二氧化钛改性方法不同；
将二氧化钛送入到3倍的质量分数5%的盐酸多巴胺水溶液中，然后加入二氧化钛总量5-10%的海藻酸钠，最后加入盐酸，调节pH至4.5，搅拌分散充分，水洗、干燥，得到改性二氧化钛。
对比例3.
与实施例3不同是改性二氧化钛中二氧化钛采用碳纳米管代替。
对比例4.
与实施例3不同是未添加壳聚糖剂。
对比例5.
与实施例3不同是壳聚糖剂制备中未添加植物多糖提取剂。
对比例6.
与实施例3不同是植物多糖提取剂采用芦荟提取剂代替。
将实施例1-3及对比例1-6产品进行性能测试；
本发明对实施例1-3及对比例1-6产品在常规、35℃下存放1h后的EGF衰减量性能测试如下：
Figure 428718DEST_PATH_IMAGE001
从对比例1-6实施例1-3可看出；
本发明未添加改性二氧化钛，产品在35℃下EGF衰减量显著高于常规下EGF衰减量，改性二氧化钛的加入能够改进产品的稳定性；同时通过壳聚糖剂，能够起到协配增效的效果，共同改进产品的EGF衰减量，以及产品的稳定性；
此外，二氧化钛改性方法不同，性能改进效果不同，采用本发明的改性方法，改性效果最显著；同时二氧化钛采用碳纳米管代替，产品的EGF衰减量反而降低更显著，基于此，本发明二氧化钛的选择具有专有性，同时采用本发明的改性方法效果最显著；
同时发现植物多糖提取剂采用芦荟提取剂代替，产品的EGF衰减量稳定性降低明显，植物多糖提取剂的使用对产品的EGF衰减量改进具有显著成效。
将实施例1-3及对比例1-6产品进行抗氧化能力测试：
Figure 270772DEST_PATH_IMAGE002
从对比例1-6及实施例3可看出；
产品中未添加壳聚糖剂，产品的DPPH清除率发生显著降低，而植物多糖提取剂的使用对产品的抗氧化性有显著改进效果；
壳聚糖剂的使用效果明显优于改性二氧化钛，对产品的抗氧化性能，结合EGF衰减量测试发现，产品的壳聚糖剂、改性二氧化钛具有协同增效，共同改进产品的抗氧化能。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (7)

1.一种多肽酶解发酵组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一：鹿茸多肽酶解料的制备：
S01：将鹿茸粉碎，然后加入2-3倍的水制成浆液；
S02：然后向浆液中加入复合酶，酶解处理，得到酶解料；
S03：将酶解料于85-90℃下水热处理30-40min，然后冷却至室温，采用纳滤膜过滤，去除滤液，再冷冻干燥，得到鹿茸多肽酶解料；
步骤二：称取30-40份鹿茸多肽酶解料、2-6份改性二氧化钛、1-4份壳聚糖剂；
步骤三：然后于发酵罐内进行发酵处理，发酵温度为37-41℃，发酵时间为10-24h，发酵结束，备用；
步骤四：取10-20份步骤三的产物、20-30份水、2-5份角鲨烷和3-6份甘油以及1-4份丁二醇搅拌混合充分，得到多肽酶解发酵组合物；
所述复合酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶；胃蛋白酶占复合酶总量的35-45%；且复合酶加入量为浆液的5-10%；
所述改性二氧化钛的改性方法为：
S11：将15-25份二氧化钛加入到25-35份丙酮溶剂中，充分分散，加入盐酸，调节pH值至5.0，得到二氧化钛分散液；
S12：将二氧化钛分散液中加入10-15%的十二烷基硫酸钠、1-5%的柠檬酸，搅拌混合充分，再水洗、干燥，得到预处理二氧化钛；
S13：预处理二氧化钛中加入2-10%的稀土液，然后于球磨机球磨，球磨结束、水洗，干燥，得到改性二氧化钛；
所述壳聚糖剂的制备方法为：将枸杞送入到捣碎机中进行捣碎，然后加入2-3倍的乙醇溶剂超声处理，超声功率为350-380W，超声时间为10-20min，超声结束，再除醇，最后加入5-9倍的水进行文火煮沸，得到提取液，然后蒸发处理，得到植物多糖提取剂；再将壳聚糖、植物多糖提取剂按照重量比1:3混合，形成壳聚糖剂。
2.根据权利要求1所述的一种多肽酶解发酵组合物的制备方法，其特征在于，所述酶解温度为35-39℃，酶解pH为5.0-6.0，酶解2-3h。
3.根据权利要求1所述的一种多肽酶解发酵组合物的制备方法，
其特征在于，所述稀土液为质量分数5-10%的氯化镧。
4.根据权利要求1所述的一种多肽酶解发酵组合物的制备方法，其特征在于，所述球磨机球磨的转速为500-1000r/min，球磨时间为10-30min。
5.根据权利要求1所述的一种多肽酶解发酵组合物的制备方法，其特征在于，所述文火煮沸的时间为1-3h。
6.根据权利要求1所述的一种多肽酶解发酵组合物的制备方法，其特征在于，所述蒸发至含水率低于5%。
7.一种如权利要求1-6任一项多肽酶解发酵组合物的制备方法制备得到的组合物在制备护肤品中的应用。
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