CN114615897A - 牛乳分离的粉末状外泌体、营养组合物和方法 - Google Patents
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Abstract
牛乳分离的粉末状外泌体包含完整外泌体。营养组合物包含蛋白质、碳水化合物和/或脂肪以及从牛乳分离的外泌体。一种制备粉末状外泌体的方法包括将牛乳离心以形成脂质级分顶层、乳清级分中间层以及细胞和碎片的第一团粒，分离所述乳清级分并将所分离的乳清级分离心以除去额外的脂肪、酪蛋白聚集体和碎片并形成基本上澄清的乳清级分，将所述基本上澄清的乳清级分微滤以除去残余碎片，离心经微滤的乳清级分以获得含有外泌体的团粒，将所述含有外泌体的团粒在水性介质中孵育以溶解所述团粒而不破坏外泌体膜，从而提供外泌体悬浮液，以及干燥所述悬浮液以获得所述粉末状外泌体。降低受试者中发展胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的风险或治疗受试者的胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的方法采用从牛乳分离的外泌体。
Description
技术领域
本发明涉及牛乳分离的粉末状外泌体，并且涉及含有蛋白质、碳水化合物和/或脂肪以及从牛乳分离的外泌体的营养组合物。本发明还涉及制备所述牛乳分离的粉末状外泌体的方法、制备所述营养组合物的方法以及通过施用粉末状外泌体或粉末状营养组合物降低受试者中发展胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的风险或治疗胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的方法。
发明背景
牛乳含有外泌体，所述外泌体是细胞外双层囊泡。牛乳外泌体含有已知在调控健康和疾病方面发挥作用的生物活性剂，如酶蛋白和非酶蛋白(CD9、CD63、MHC-II类、乳凝集素、TSG101和Hsc70等)、核酸(包括大量微小RNA(miRNA)和信使RNA(mRNA))和脂质(磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰胆碱和鞘磷脂等)。乳外泌体可被细胞主动吸收以递送其内容物，但摄取需要保留乳外泌体双层膜。虽然外泌体结构保护生物活性剂，但从乳分离外泌体的已知方法可损坏外泌体膜，从而阻止外泌体的摄取并导致生物活性剂的释放及其生物活性的降低。例如，外泌体中所含的诸如miRNA和其他生物活性剂的剂极不稳定并且在双层膜受损时在暴露的数秒内降解。类似地，乳和/或分离的外泌体的加工和/或分离的外泌体的延长储存可损坏外泌体膜或以其他方式降低生物活性。因此，需要改进的分离牛乳外泌体的方法和具有改进的稳定性的外泌体。
胰岛素抵抗、前驱糖尿病和糖尿病是葡萄糖失调的疾患。生活方式改变和胰岛素增敏剂是可用的治疗策略之一，但是这些通常失败并且可能需要胰岛素疗法。饮食管理可改善代谢健康并导致体重减轻。计划随时间推移保持体重、维持和改善肌肉质量以及服用维生素和矿物质可改善生活质量。不幸的是，在许多情况下，生活方式改变不足以完全治疗此类疾患。因此需要用于改善胰岛素敏感性的新的组合物和方法。
发明内容
在一个实施方案中，本发明涉及牛乳分离的粉末状外泌体，所述牛乳分离的粉末状外泌体包含完整外泌体。完整外泌体是双层膜未受损且外泌体的内容物保留在外泌体中的外泌体。
在另一个实施方案中，本发明涉及一种营养组合物，所述营养组合物包含蛋白质、碳水化合物和/或脂肪以及从牛乳分离的外泌体，其中所述外泌体是通过添加本发明的粉末状外泌体而提供。在具体实施方案中，所述营养组合物呈粉末形式，并且在另外的具体实施方案中，所述营养组合物呈液体形式。在另外的实施方案中，所述营养组合物包含蛋白质、碳水化合物、脂肪以及从牛乳分离的外泌体，其中所述外泌体是通过添加本发明的粉末状外泌体而提供。
在另一实施方案中，本发明涉及一种制备粉末状外泌体的方法。所述方法包括将牛乳离心以形成脂质级分顶层、乳清级分中间层以及细胞和碎片的第一团粒，分离所述乳清级分并将所分离的乳清级分离心以除去额外的脂肪、酪蛋白聚集体和碎片并形成基本上澄清的乳清级分，将所述基本上澄清的乳清级分微滤以除去残余碎片，离心经微滤的乳清级分以获得含有外泌体的团粒，将所述含有外泌体的团粒在水性介质中孵育以溶解所述团粒而不破坏外泌体双层膜，从而提供外泌体悬浮液，以及干燥所述悬浮液以获得所述粉末状外泌体。
在另一个实施方案中，本发明涉及一种制备粉末状营养组合物的方法。所述方法包括将包含蛋白质、脂肪和碳水化合物的粉末组合物与从牛乳分离的粉末状外泌体干混。
在另外的实施方案中，本发明涉及一种降低受试者中发展胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的风险或治疗受试者的胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的方法。所述方法包括将根据本发明的外泌体或本发明的营养组合物施用于有发展胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的风险或患有胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的受试者，其中外泌体的施用量分别有效降低发展胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的风险或治疗胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病。
本发明的牛乳分离的外泌体有利于以方便且稳定的形式提供生物活性剂，并且在某些实施方案中，以营养组合物的形式提供生物活性剂。因此促进了生物活性剂用于治疗益处的用途。根据以下详细描述，本发明的这些和另外的方面和优点将更充分地显而易见。
附图说明
在附图中阐述的实施方案说明本发明的某些方面并且在本质上是示例性的，并且不旨在限制由权利要求限定的本发明，其中：
图1A-1I示出来自透射电子显微镜(TEM)的放大倍数为880x(图1A-1C)、放大倍数为10,000x(图1D-1F)和放大倍数为25,000x(图1G-1I)的图像。图1A、1D和1G示出新鲜外泌体，图1B、1E和1H示出冻融的外泌体，并且图1C、1F和1I示出根据本发明的一个实施方案的粉末状外泌体，全部具有乙酸双氧铀染色，如实施例1中所述。
图2A分别示出新鲜外泌体和根据本发明的一个实施方案的粉末状外泌体中的微小RNA(miRNA)的相对表达，如实施例1中所述。图2B示出分别补充有冷冻干燥的生乳和根据本发明的一个实施方案的冷冻干燥的粉末状外泌体的营养组合物中与胰岛素调控相关的几种微小RNA(miRNA)的含量，如实施例1中所述。
图3示出分别与增加浓度的冷冻干燥的外泌体或超声处理的外泌体一起孵育24小时的肌肉细胞中的葡萄糖摄取，如实施例2中所述。
图4示出分别与冷冻干燥的外泌体或超声处理的外泌体一起孵育24小时的肌肉细胞中的GLUT-4转运蛋白水平，如实施例2中所述。
图5示出分别与冷冻干燥的外泌体或超声处理的外泌体一起孵育24小时的肌肉细胞中的GLUT-4mRNA水平，如实施例2中所述。
图6示出分别与增加浓度的冷冻干燥的外泌体或超声处理的外泌体一起孵育24小时的肌肉细胞中的GLUT-4基因启动子活性，如实施例2中所述。
具体实施方式
本文描述了本发明的具体实施方案。然而，本发明可以许多不同形式来实施并且不应被解释为局限于本文中所阐述的实施方案。相反，提供这些实施方案以向本领域技术人员说明本发明的某些方面的更具体的特征。
如本文所阐述的术语仅用于描述实施方案，并且不应被解释为总体上限制本公开。除非在进行引用的上下文中相反地另有说明或清楚说明，否则本公开的单一特征或限制的所有引用应包括相应多个特征或限制，并且反之亦然。除非另有说明，否则“一个/种(a/an)”、“所述”和“至少一个/种”可互换使用。此外，除非上下文另外清楚指示，否则如本说明书和随附权利要求书中所用，单数形式“一个/种(a/an)”和“所述(the)”包括其复数形式。
就在本说明书或权利要求书中使用术语“包括(includes)”或“包括(including)”来说，其意图以与术语“包含(comprising)”在权利要求中用作过渡词时所解释的类似的方式包括另外的要素或步骤。此外，就所采用的术语“或”(例如，A或B)来说，其意图指“A或B或两者”。当意图“仅A或B而不是两者”时，那么将采用术语“仅A或B而不是两者”。因此，在本文中术语“或”的使用是包括性的，而不是排他性的使用。当术语“和”以及“或”一起使用时，如在“A和/或B”中，这指示A或B以及A和B。
本公开中描述的粉末状外泌体、营养组合物和方法可包含如本文所述的任何要素和步骤，由或基本上由如本文所述的任何要素和步骤组成。
本文所公开的所有范围和参数(包括但不限于百分比、份数和比率)应理解为涵盖其中包含的任何和所有子范围以及各端点之间的每个数字。例如，所陈述的“1至10”的范围应被理解为包括以最小值1或更大数字开始并且以最大值10或更小数字结束(例如，1至6.1或2.3至9.4)的任何和所有子范围，并且被认为是包括在所述范围内的每个整数(1、2、3、4、5、6、7、8、9和10)。
除非在进行引用组合的上下文中相反地另有说明或清楚暗指，否则如本文所用的方法或工艺步骤的任何组合可按任何顺序进行。
除非另外指明，否则所有百分比都是重量百分比。
除非另有说明，否则如本文所用的术语“牛乳分离的外泌体”是指已与其他牛乳组分如脂质、细胞和碎片基本上分离并且以高于在牛乳中发现的量浓缩的外泌体。乳外泌体是“溶解”在牛乳中的小固体颗粒，并且仅占乳的总固体的一小部分。如本文所述的外泌体的分离产生流体，其中最初存在于乳中的外泌体被浓缩。显而易见，粉末状外泌体还可含有与乳外泌体具有相同大小并与外泌体共分离的其他乳固形物(即，酪蛋白和其他乳清蛋白)。
除非另有说明，否则如本文所用的术语“粉末状外泌体”是指含有已从牛乳分离的外泌体的干粉。将外泌体干燥以形成干粉。在具体实例中，分离的外泌体已被冷冻干燥以形成粉末状外泌体。由于含有外泌体的分离流体还含有如上所述的共分离的乳固形物，所以粉末状外泌体在所得粉末中也含有此类其他乳固形物。
重要的是，本发明的粉末状外泌体包含完整外泌体。完整外泌体是双层膜未受损且外泌体的内容物保留在外泌体中的外泌体。
如前所述，乳含有外泌体，所述外泌体含有可改善健康的生物活性剂。更具体地，牛乳含有例如用于促进从肌肉到骨骼和脂肪到皮肤、脑、肝脏、肠道和脉管系统范围内的各种器官、组织和系统的健康功能的多种miRNA。然而，诸如miRNA的因素往往迅速降解，并且此类有益功能丧失。乳外泌体为miRNA提供保护性环境，但目前用于分离外泌体的技术经常导致对外泌体膜的损伤。相比之下，本发明提供了呈粉末形式的完整分离的外泌体。
一般来说，牛乳分离的粉末状外泌体是使用温和的程序从牛乳获得的，所述程序不会破坏外泌体双层膜，从而使外泌体保持完整且生物活性剂包含在外泌体结构中。在一个实施方案中，分离且浓缩的外泌体以悬浮液的形式提供，并且将悬浮液干燥以提供粉末状外泌体。可采用各种方法来分离外泌体，小心避免破坏双层膜。鲜牛乳和/或解冻的冷冻牛乳可用作外泌体的来源。在具体实施方案中，分离外泌体的步骤包括在从牛获得乳后立即进行分离。在另外的实施方案中，分离外泌体的步骤包括在从牛获得乳时起约1天、或约2天、或约3天、或约4天、或约5天、或约6天、或约7天内进行分离。在具体实施方案中，外泌体在从牛获得乳时起约10天内或约14天内分离。在另外的实施方案中，可将牛乳冷冻，然后解冻用于如本文所述进行加工以分离外泌体，其中牛乳优选地在从牛获得乳时起约1天、或约2天、或约3天、或约4天、或约5天、或约6天、或约7天内冷冻。解冻的乳优选在解冻后立即加工。在一个具体实施方案中，鲜牛乳在从牛获得乳的约5天内进行如本文所述的加工，或者进行如本文所述的加工的解冻的牛乳是从自牛获得乳的约5天内冷冻的牛乳解冻的。
在一个实施方案中，通过将牛乳离心以形成脂质级分顶层、乳清级分中间层以及细胞和碎片的第一团粒来从牛乳分离外泌体。将所述乳清级分与所述脂质级分和所述第一团粒分离并进行进一步离心以产生基本上澄清的乳清级分。例如，将额外的脂肪、酪蛋白聚集体和碎片除去以产生基本上澄清的乳清级分。然后将所述基本上澄清的乳清级分微滤以除去残余碎片。然后对微滤的乳清级分进行额外的离心以获得含有外泌体的第二团粒。然后将此第二团粒悬浮在水性介质中以溶解所述第二团粒而不破坏其中的外泌体的双层膜并提供外泌体悬浮液。以不会破坏外泌体膜的温和方式悬浮第二团粒是重要的。在一个具体实施方案中，将第二团粒在水性介质如无菌磷酸盐缓冲盐水(PBS)或无菌分子生物学水中孵育延长的时间段，例如至少6小时、至少8小时、至少10小时或至少12小时，以及长达18、24、30或36小时或更多小时。例如，可采用低速的轨道振荡器，即不超过500rpm。一旦团粒完全悬浮，就将悬浮液干燥以获得粉末状外泌体。再次，干燥步骤必须小心进行，以避免破坏外泌体的双层膜。在一个具体实施方案中，干燥步骤包括冷冻干燥。
在本发明的具体实施方案中，外泌体分离包括以特定速度、时间和/或温度离心。如本文所述的离心时间和速度提供完整的外泌体分离，因为如果离心操作过于用力则会导致外泌体膜损伤。在具体实施方案中，将牛乳在约15,000G以下，例如在约12,000G下，例如在约4℃下离心约15分钟，以获得在脂肪(脂质)顶层与细胞碎片团粒之间形成的乳清层。在具体实施方案中，将乳清级分再离心两次，再次在保持外泌体呈完整形式的条件下，例如在约12,000G和约4℃下每次离心约30分钟，以除去额外的脂肪和/或碎片。获得基本上澄清的乳清级分。将基本上澄清的乳清级分微滤，例如使用亲水性材料如具有低蛋白质保留的聚醚砜的0.22μm过滤器，然后将微滤的乳清在4℃下以100,000G离心约60分钟，以形成含有外泌体的团粒。在具体实施方案中，通过孵育至少约12小时、或约12小时至约36小时、或约15小时至约30小时、或约18小时至约24小时，将含有外泌体的颗粒溶解于轨道振荡器中。溶解是在保持外泌体呈完整形式的条件下进行的，即双层膜不被损坏并且外泌体的内容物保持在其中。
然后将外泌体再次在保持外泌体呈完整形式的条件下干燥。在本发明的具体实施方案中，将分离的外泌体通过在保持外泌体呈完整形式的条件下冷冻干燥进行干燥以形成粉末状外泌体。在本发明的具体实施方案中，冷冻干燥的步骤包括将外泌体悬浮液暴露于-80℃的温度和小于0.3毫巴的真空持续足够的时间段。在具体实施方案中，取决于待冷冻干燥的液体的量和冷冻干燥设备的特征，时间可从约5至约40小时、更具体地从约10至约30小时、或从约15至25小时变化。重要的是，所述过程应完全干燥外泌体。在如实施例中所述的具体实施方案中，在-80℃的温度和小于0.3毫巴的真空下，用于冷冻干燥的时间段是24小时或更长。
所述方法的另外实施方案包括用于冷冻干燥的时间、温度和压力的变化。在所述方法的另外实施方案中，使乳外泌体：保持在至少约-50℃、或至少约-60℃、或至少约-70℃、或至少约-80℃的温度下；经受小于约0.3毫巴、或小于约0.2毫巴、或小于约0.1毫巴的真空；并在这些条件下保持至少约5、10、15、20、25、30、35或40小时。
根据此类方法产生的粉末状外泌体包含完整外泌体，即其中双层膜没有破裂和/或以其他方式降解并且外泌体的内容物保留在其中的外泌体。在具体实施方案中，粉末中至少约50wt％的外泌体是完整的。在另外的实施方案中，粉末中至少约55、60、65、70、75、80、85、90或95wt％的外泌体是完整的。在具体实施方案中，在组合物在20℃的温度下储存至少两个月后，粉末中至少50wt％的外泌体保持完整。在另外的实施方案中，在组合物在20℃的温度下储存至少两个月后，粉末中至少约55、60、65、70、75、80、85、90或95wt％的外泌体保持完整。此外，在某些实施方案中，粉末状外泌体在较高温度条件下表现出良好的稳定性。例如，在一个具体实施方案中，在37℃下储存3周后，与在37℃下储存3周的鲜乳外泌体相比，牛乳分离的粉末状外泌体包含更大量的miRNA，因此证明与鲜乳外泌体相比，在此类储存条件下对双层膜破裂和/或其他降解的更大抗性。在另一个具体实施方案中，在55℃下储存1周后，与在55℃下储存1周的鲜乳外泌体相比，牛乳分离的粉末状外泌体包含更大量的miRNA，因此进一步证明与鲜乳外泌体相比，在此类储存条件下对膜破裂和/或其他降解的更大抗性。粉末状外泌体的这种稳定性是在用于消费者分配和消耗的产品中提供其中的活性剂的益处方面的显著改进。
在具体实施方案中，大于90％的分离的外泌体的直径为约10纳米至约250纳米，或直径为约20至200nm，或直径为约50至150nm。
本发明的粉末状外泌体特别适合用作营养组合物的组分。所述营养组合物可呈粉末形式或呈液体形式，并且包含牛乳分离的外泌体，其中所述外泌体是通过添加如本文所述的本发明的粉末状外泌体而提供。在粉末状营养组合物的一个实施方案中，将粉末状外泌体与营养组合物的一种或多种干燥组分干混。在本发明的营养组合物的另外实施方案中，液体营养组合物包含由如本文所述的粉末状营养组合物重构的液体。在另外的实施方案中，液体营养组合物以即饮形式，例如以乳剂形式制造，在制造过程期间将粉末状外泌体与一种或多种另外的营养组合物组分组合。呈粉末或液体形式的此类组合物可容易地口服施用以获得外泌体中的生物活性剂的益处。
本文所述的营养组合物的具体实施方案包括蛋白质、碳水化合物和/或脂肪以及牛乳分离的外泌体，其中所述外泌体是通过添加本发明的粉末状外泌体而提供。牛乳分离的外泌体可以任何有效提供营养或治疗益处的所需量包含在营养组合物中。在一个具体实施方案中，营养组合物包含基于所述组合物的重量约0.001至约10wt％的牛乳分离的外泌体，或者更具体地，约0.1至约5wt％的牛乳分离的外泌体。
多种来源和类型的蛋白质、碳水化合物和脂肪可用于本文所述的营养组合物的实施方案中。
在营养组合物的具体实施方案中，蛋白质占所述营养组合物的约1wt％至约30wt％。在更具体的实施方案中，蛋白质占营养组合物的约1wt％至约25wt％，包括占营养组合物的约1wt％至约20wt％、约1wt％至约15wt％、约1wt％至约10wt％、约5wt％至约10wt％、或约10wt％至约20wt％。在另外的具体实施方案中，蛋白质占营养组合物的约1wt％至约5wt％。在另外的具体实施方案中，蛋白质占营养组合物的约20wt％至约30wt％。
在具体实施方案中，一种或多种蛋白质来源用于营养组合物中。例如，蛋白质来源可包括但不限于完整、水解和部分水解的蛋白质，其可源于合适的来源，如乳(例如酪蛋白、乳清)、动物(例如肉类、鱼)、谷类(例如大米、玉米)、蔬菜(例如大豆、豌豆)以及它们的组合。用于营养组合物的具体实施方案中的蛋白质来源的更特定实例包括但不限于乳清蛋白浓缩物、乳清蛋白分离物、乳清蛋白水解物、酸性酪蛋白、酪蛋白酸钠、酪蛋白酸钙、酪蛋白酸钾、酪蛋白水解物、乳蛋白浓缩物、乳蛋白分离物、乳蛋白水解物、脱脂乳粉、浓缩脱脂乳、大豆蛋白浓缩物、大豆蛋白分离物、大豆蛋白水解物、豌豆蛋白浓缩物、豌豆蛋白分离物、豌豆蛋白水解物、胶原蛋白、胶原蛋白分离物、大米蛋白、马铃薯蛋白、蚯蚓蛋白和/或昆虫蛋白以及它们中的两者或更多者的组合。更具体的实施方案包括乳蛋白浓缩物和/或大豆蛋白分离物。
蛋白质来源还可包括已知用于营养产品中的氨基酸混合物(常常描述为游离氨基酸)或此类氨基酸与本文所述的完整、水解和/或部分水解的蛋白质的组合。所述氨基酸可以是天然存在的或合成的氨基酸。
在具体实施方案中，营养组合物含有β-羟基-β-甲基丁酸盐(HMB)。HMB是已知用于各种营养产品和补充剂中的一种天然存在的亮氨酸的短链脂肪酸代谢物。HMB的任何来源都适用于本文，包括但不限于游离酸、盐(包括无水盐)、酯、内酯或以其他方式在营养组合物中提供HMB的生物可利用形式的其他产品形式。适用于本文的HMB盐的非限制性实例包括钠、钾、镁、铬、钙或其他无毒盐形式的水合或无水HMB盐。在具体实施方案中，HMB由一水合HMB钙提供。在具体实施方案中，营养组合物可包含约0.01至约10wt％HMB。在更具体的实施方案中，营养组合物包含约0.1％至约7.0％，或者更具体地约0.1％至约5.0％HMB。在另外的实施方案中，营养组合物提供每237ml份量约1至3克、或者更具体地约1.5至3克HMB。
在营养组合物的具体实施方案中，碳水化合物以所述营养组合物的约5wt％至约75wt％的量存在。在更具体的实施方案中，碳水化合物以营养组合物的约5wt％至约70wt％，包括营养组合物的约5wt％至约65wt％、约5wt％至约50wt％、约5wt％至约40wt％、约5wt％至约30wt％、约5wt％至约25wt％、约10wt％至约65wt％、约20wt％至约65wt％、约30wt％至约65wt％、约40wt％至约65wt％、或约15wt％至约25wt％的量存在。
在营养组合物的具体实施方案中使用的碳水化合物是简单的、复杂的或它们的组合。适用于本文所述的营养组合物中的碳水化合物来源的非限制性实例包括但不限于人乳寡糖(HMO)、麦芽糊精、水解淀粉、葡萄糖聚合物、玉米糖浆、玉米糖浆固体、大米来源的碳水化合物、蔗糖、葡萄糖、乳糖、蜂蜜、糖醇、异麦芽酮糖、蔗糖酮糖醇(sucromalt)、普鲁兰多糖、马铃薯淀粉、低聚半乳糖、燕麦纤维、大豆纤维、玉米纤维、阿拉伯树胶、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、瓜尔胶、结冷胶、刺槐豆胶、魔芋粉、羟丙基甲基纤维素、黄芪胶、卡拉胶、阿拉伯树胶、壳聚糖、阿拉伯半乳聚糖、葡甘露聚糖、黄原胶、海藻酸盐、果胶、低甲氧基果胶、高甲氧基果胶、谷类β-葡聚糖、角叉菜胶、洋车前子、难消化性碳水化合物如难消化性麦芽糖糊精、难消化性淀粉、缓慢消化碳水化合物、菊粉、低聚果糖以及它们中的两者或更多者的组合。
在具体实施方案中，营养组合物包含为所述营养组合物的约0.5wt％至约30wt％的量的脂肪。在某些具体实施方案中，脂肪占营养组合物的约1wt％至约30wt％，包括营养组合物的约1wt％至约20wt％、约1wt％至约15wt％、约1wt％至约10wt％、约1wt％至约5wt％、约3wt％至约30wt％、约5wt％至约30wt％、约5wt％至约25wt％、约5wt％至约20wt％、约5wt％至约10wt％、或约10wt％至约20wt％。
在具体实施方案中，营养组合物的脂肪是以下中的一者或多者：椰子油、分馏椰子油、豆油(例如，高油酸豆油)、玉米油、橄榄油、红花油(例如，高油酸红花油)、中链甘油三酯油(MCT油)、高γ亚麻酸(GLA)红花油、向日葵油(例如，高油酸向日葵油)、棕榈油、棕榈仁油、棕榈油精、低芥酸菜籽油(例如，高油酸低芥酸菜籽油)、海洋油、鱼油(例如，金枪鱼油)、海藻油、琉璃苣油、棉籽油、真菌油、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、花生四烯酸(ARA)、缀合亚油酸(CLA)、α-亚麻酸、酯交换油(interesterified oil)、酯交换油(transesterified oil)、结构化脂质以及它们的组合。脂肪来源可包括甘油三酯、甘油二酯、甘油单酯、磷脂(例如，卵磷脂)和/或游离脂肪酸。脂肪酸可包括但不限于癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、α-亚麻酸、花生四烯酸(ARA)、二十碳五烯酸(EPA)和/或二十二碳六烯酸(DHA)。本公开的组合物的具体实施方案包含任何单独脂肪来源或上述各种脂肪来源中的两者或更多者的组合。更具体的实施方案包括低芥酸菜籽油、高油酸向日葵油、中链甘油三酯和/或一种或多种脂肪酸如亚油酸、α-亚麻酸、ARA、EPA和/或DHA。
营养组合物的另外具体实施方案包含一种或多种组分以改变营养组合物的物理、化学、美学或加工特性或充当另外的营养组分。另外组分的非限制性实例包括防腐剂、乳化剂(例如，卵磷脂)、缓冲剂、甜味剂(包括人工甜味剂(例如，糖精、阿斯巴甜、安赛蜜K、三氯蔗糖))、着色剂、调味剂、增稠剂、稳定剂等。
营养组合物的具体实施方案任选地包含一种或多种益生元和/或益生菌。除非另有说明，否则如本文所用的术语“益生元”是指通过选择性地刺激受试者的胃肠(GI)道中细菌的生长和/或活性而有益地影响受试者的不可消化的食物成分。不可消化的可发酵多糖是可包含于本文所述的营养组合物中的益生元的实例。除非另有说明，否则如本文所用的术语“益生菌”是指在消化过程后存活以赋予宿主健康益处的微生物，如细菌或酵母。可单独或组合地包含在本文所述的营养组合物中的益生菌的实例包括双歧杆菌属(B.)，如短双岐杆菌M-16V、婴儿双歧杆菌Bb02、婴儿双歧杆菌M-63、婴儿双歧杆菌35624、乳酸双歧杆菌HN019、乳酸双歧杆菌Bi07、两歧双歧杆菌、长双歧杆菌BB536、长双歧杆菌AH1205、长双歧杆菌AH1206和动物双歧杆菌；和乳杆菌属(L.)，如鼠李糖乳杆菌GG、鼠李糖乳杆菌HN001、嗜酸乳杆菌(LA-5)、嗜酸乳杆菌NCFM、发酵乳杆菌CECT5716、罗伊氏乳杆菌ATCC55730、罗伊氏乳杆菌ATCC PTA-6475和罗伊氏乳杆菌DSM 17938；嗜热链球菌(Th4)；艾克曼菌属；拟杆菌属；肠球菌属；真杆菌属；栖粪杆菌属；罗氏菌属和/或酵母属。
营养组合物的具体实施方案可包含维生素和/或相关营养素，其非限制性实例包括维生素A、维生素B12、维生素C、维生素D、微生物E、维生素K、硫胺素、核黄素、吡哆醇、烟酸、叶酸、泛酸、生物素、胆碱、肌醇和/或它们的盐和衍生物以及它们的组合。
营养组合物的具体实施方案包含矿物质，其非限制性实例包括钙、磷、镁、锌、锰、钠、钾、钼、铬、铁、铜和/或氯化物以及它们的组合。
本发明的营养组合物的另外具体实施方案包含作为蛋白质的乳蛋白浓缩物和/或大豆蛋白分离物，作为脂肪的低芥酸菜籽油、向日葵油、中链甘油三酯和/或DHA，以及作为碳水化合物的水解玉米淀粉、蔗糖和/或麦芽糖糊精。在另外的具体实施方案中，这些营养组合物还包含低聚果糖、混合生育酚和/或嗜酸乳杆菌。
在另一个具体实施方案中，营养组合物包含作为蛋白质的乳蛋白浓缩物、酪蛋白酸钠、酪蛋白酸钙和/或大豆蛋白分离物，作为碳水化合物的玉米糖浆、玉米麦芽糖糊精和/或糖，以及作为脂肪的玉米油和/或低芥酸菜籽油。在另一个具体实施方案中，营养组合物包含作为蛋白质的乳蛋白浓缩物，作为碳水化合物的玉米麦芽糖糊精、果糖和/或甘油，以及作为脂肪的高油酸红花油。
在具体实施方案中，当营养组合物是例如由如本文所述的粉末重构或制造为即饮产品的液体时，份量在约1ml至约500ml，包括约110ml至约500ml、约110ml至约417ml、约120ml至约500ml、约120ml至约417ml、约177ml至约417ml、约207ml至约296ml、约230m至约245ml、约110ml至约237ml、约120ml至约245ml、约110ml至约150ml以及约120ml至约150ml的范围内。在具体实施方案中，份量是约1ml、或约100ml、或约225ml、或约237ml、或约500ml。
在具体实施方案中，当营养组合物是粉末时，例如份量大小是待以粉末形式施用或在约1ml至约500ml(如约225ml，或约230ml至约245ml)的液体中重构的约40g至约60g，如45g、或48.6g、或50g。
在具体实施方案中，营养组合物提供每份营养组合物至多约500kcal的能量，包括每份营养组合物约20kcal至约500kcal、约75kcal至约500kcal、约150kcal至约500kcal、约250kcal至约500kcal、约300kcal至约500kcal或约400kcal至约500kcal。
在具体实施方案中，营养组合物具有约0.5kcal/ml至约3kcal/ml的热量密度。在具体实施方案中，营养组合物具有约0.5kcal/ml至约2.5kcal/ml，包括约0.5kcal/ml至约2kcal/ml、约0.5kcal/ml至约1.5kcal/ml、约0.5kcal/ml至约1kcal/ml或约0.5kcal/ml至约0.8kcal/ml的热量密度。在具体实施方案中，营养组合物具有约1kcal/ml至约3kcal/ml，包括约1.5kcal/ml至约3kcal/ml、约2kcal/ml至约3kcal/ml或约2.5kcal/ml至约3kcal/ml的热量密度。
在具体实施方案中，营养组合物具有约1kcal/克至约10kcal/克，如约4.6kcal/克的热量密度。在具体实施方案中，营养组合物具有约2kcal/克至约8kcal/克或约3kcal/克至约6kcal/克的热量密度。
在具体实施方案中，营养组合物呈液体形式，由粉末状营养组合物重构，并且具有约3至约9或约6至约8的pH。
在本文所述的方法的具体实施方案中，粉末状营养组合物通过将粉末状外泌体与包含蛋白质、脂肪和碳水化合物中的一者或多者的粉末干混以产生储存稳定的粉末状营养组合物而形成。粉末状营养组合物可以粉末形式施用或者可用水性液体重构以形成液体营养组合物。
由于呈粉末形式的外泌体的完整性质，所以外泌体和添加了粉末状外泌体的组合物适合用于基于外泌体中的生物活性剂(包括完整外泌体中所含的各种miRNA)提供营养或治疗益处。在具体实施方案中，粉末状外泌体和添加了粉末状外泌体的组合物适合用于降低胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的风险，和/或用于治疗胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病。发展胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的风险因素可包括超重、久坐不动或每周身体活动少于3次、以前患有妊娠糖尿病或患有免疫病症。患有胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的受试者也经常肥胖、高血压、患有血脂异常和/或患有肌肉减少症。
在本文所述的方法的具体实施方案中，营养组合物口服或通过管饲施用。在具体实施方案中，当通过管饲施用时，管饲通过受试者的鼻子进行或通过受试者腹部中的切口直接进入受试者的胃或小肠中进行。
在具体实施方案中，用于降低胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的风险或治疗这些疾患的方法包括向受试者施用如本文所述的牛乳分离的粉末状外泌体或已添加了如本文所述的牛乳分离的粉末状外泌体的营养组合物。营养组合物可根据需要以粉末或液体形式施用。在具体实施方案中，将牛乳分离的粉末状外泌体或已添加了如本文所述的牛乳分离的粉末状外泌体的营养组合物每天或每周一次或多次施用于受试者。在具体实施方案中，将营养组合物每天或每周约1至约6次、或每天或每周约1至约5次、或每天或每周约1至约4次、或每天或每周约1至约3次施用于受试者。
在具体实施方案中，本发明的粉末状外泌体以有效量直接施用或通过添加至营养组合物中施用以降低有发展胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病中的一者或多者的风险的受试者中此类疾患的风险。在另外的具体实施方案中，本发明的粉末状外泌体以有效量直接施用或通过营养组合物施用以治疗被诊断患有胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病中的一者或多者的受试者的此类疾患。在本文所述的方法的具体实施方案中，将约0.01至约10g剂量的粉末状外泌体直接或通过添加至营养组合物施用于受试者。在另外的实施方案中，将约0.1至约10g或约1至约5g剂量的粉末状外泌体直接或通过添加至营养组合物施用于受试者。
以下实施例展现本发明的各个方面。
实施例
实施例1：粉末状外泌体的产生
此实施例描述粉末状外泌体和包含外泌体的粉末状营养组合物的制备。首先从牛乳分离外泌体，然后干燥。使用以下程序从牛乳分离外泌体。将未加工的生牛乳等分并立即在-80℃下冷冻。将等分试样在冰上解冻并在约4℃下以约12,000G进行第一离心持续约15分钟，以获得在脂肪(脂质)顶层与细胞碎片团粒之间形成的乳清层。将乳清级分转移至干净的管中并再离心两次，每次在约12,000G和约4℃下在保持外泌体呈完整形式的条件下约30分钟，以除去额外的脂肪和碎片。获得基本上澄清的乳清级分。使用亲水性聚醚砜的0.22μm过滤器将基本上澄清的乳清级分微滤，然后将微滤的乳清在4℃下以100,000G离心约60分钟以获得含有外泌体的团粒。将含有外泌体的团粒悬浮在离心管中的无菌PBS(137mMNaCl、2.7mM KCI、8mM Na2HP04和2mM KH2P04；pH 7.4)或无菌分子生物学级水中，然后将其孵育在4℃和150rpm的轨道振荡器中孵育12-36小时。值得注意的是，当不使用轨道振荡步骤时，出现需要大量移液来分解的聚集体，从而导致外泌体双层膜损伤。
首先将外泌体在-80℃下冷冻至少2小时，然后将冷冻的外泌体在保持外泌体呈完整形式的条件下冷冻干燥。具体而言，冷冻干燥的步骤包括将冷冻的外泌体暴露于-80℃的温度和小于0.3毫巴的真空持续足够长的时间段(约24小时)，以确保低水分含量。
重要的是，在冷冻干燥的真空阶段之前解冻外泌体导致乳外泌体膜损伤。因此，本文所述的方法的实施方案包括冷冻乳外泌体并保持乳外泌体冷冻直到冷冻干燥完成并得到粉末状外泌体。本文所述的分离和干燥条件保持外泌体双层膜的完整性和外泌体的内容物。
将乳外泌体样品在TEM下以800x(如图1A-1C所示)、10,000x(如图1D-1F所示)和25,000x(如图1G-1I所示)的放大倍数可视化。为了比较目的，TEM分析包括鲜乳外泌体(图1A、1D和1G)、在-80℃下冷冻2小时并在冰上解冻的乳外泌体(图1B、1E和1H)以及根据本发明的一个具体实施方案的粉末状、冷冻干燥的乳外泌体(图1C、1F和1I)。对于TEM图像，每个样品都用乙酸双氧铀(其是一种电子致密化合物)染色。当外泌体膜受损时，乙酸双氧铀渗透并染色内部隔室。如通过图1G和图1I的比较容易地显示，与新鲜外泌体(图1G)相比，冷冻干燥没有改变粉末状外泌体(图1I)的外泌体结构(形态、大小或膜完整性)。在这些图中，很明显，膜完整性并未受到损害，因为乙酸双氧铀覆盖外泌体，并且囊泡轮廓通过深色阴影突出显示，而囊泡的内部仍然是苍白的。然而，冷冻和解冻外泌体导致大量外泌体膜损伤(图1H)，其中乙酸双氧铀通过受损膜渗透并染色外泌体的内部隔室。因此，粉末状外泌体提供了一种产品，其中保留了乳外泌体膜结构。
冷冻干燥的外泌体还保留了miRNA。为了分析miRNA含量，将鲜牛乳外泌体和本发明的粉末状外泌体重悬于无菌PBS中，并使用60微升的每种样品来分离和量化miRNA含量。使用市售试剂盒(InvitrogenTM mirVanaTM miRNA分离试剂盒，参考号AM 1560)按照制造商的方案和技术建议进行miRNA分离。使用小RNA芯片在Agilent 2100生物分析仪系统中通过微流体电泳进行miRNA定量。图2A示出鲜乳外泌体和粉末状外泌体中的miRNA-200c水平。这种RNA(miRNA-200c)在牛乳中丰富，并且主要存在于含有外泌体的乳清级分中。新鲜外泌体中的miRNA-200c水平与粉末状外泌体中的水平之间没有统计学差异(p>0.05，图2A的不显著(n.s.))。由于先前识别并显示在图1H中的广泛损伤，未显示来自经历冷冻和解冻的外泌体的miRNA-200c水平。
此外，将冷冻干燥的生乳和根据本发明的粉末状外泌体分别添加至液体营养产品中，并测量了某些miRNA水平。具体地，将20mg的冷冻干燥的生乳或根据本发明的粉末状外泌体添加至1mL的市售
TripleSureTM营养组合物中。分析了miR-26a和miR-26b的水平。这些miRNA与葡萄糖代谢特别相关。结果示于图2B中，并且示出添加了粉末状外泌体的营养组合物中所指示的miRNA的水平增加。这些结果表明，粉末状外泌体保留了乳外泌体的结构和含量，粉末状外泌体适合用于增加液体营养产品中的miRNA水平，并且与冷冻干燥的生乳添加相比，添加粉末状外泌体提供更高水平的miRNA。
在另外实验中，评估了根据本发明的粉末状外泌体的热稳定性。将如上所述制备的粉末状外泌体和鲜牛乳外泌体两者在25℃、37℃或55℃下在真空包装下储存4周。在1、2、3和4周对样品进行分析，并与它们各自的未经热处理的对照进行比较。测定了外泌体中外泌体携带的特定miRNA(miR-200c)的水平。miRNA对高温和降解酶特别敏感。为了防止实验时程期间的微生物生长，在确认添加叠氮化钠不会干扰下游样品分析也不会破坏乳外泌体结构后，用叠氮化钠(最终浓度＝0.15％w/v)处理鲜乳外泌体。按照制造商的说明书，使用mirVanaTM miRNA分离试剂盒提取总小RNA。在样品制备过程中添加了外部掺入对照寡核苷酸(cel-miR-39，AGCUGAUUUCGUCUUGGUAAUA)，以监测RNA提取的效率。除此之外，cel-miR-39还用于归一化潜在样品间和技术变化。
结果列于表1中，并且表明无论测试温度如何，粉末状外泌体都保护了miRNA含量。相反，当鲜乳外泌体储存在37℃和55℃时，miR-200c水平在统计学上降低。所述降低在55℃下尤其相关，其中在1周后仅检测到少量miR-200c，并且从2周起未检测到miR-200c。miR-200c信号的所述衰减可归因于热损伤所致的外泌体破裂。
表1：热稳定性
*表示与第0周相比的统计显著性(p<0.05)
表1中的结果表明，根据本发明的粉末状外泌体在高热条件下表现出良好的稳定性。这种稳定性表明粉末状外泌体有利于简单的口服施用途径，直接或通过添加至营养组合物。
实施例2：治疗结果
此实施例表明，如上所述制备并显示完整的粉末状外泌体被肌肉细胞吸收。这通过用红色染料标记外泌体、将所述外泌体与L6.C11肌肉细胞一起孵育并通过显微术观察细胞来显示。包含与用相同红色染料标记的BSA一起孵育的L6.C11肌肉细胞的对照证实染料本身不促进摄取。
粉末状外泌体导致肌肉细胞对葡萄糖的摄取增加。将粉末状外泌体添加至L6.C11肌肉细胞培养物，直到分别达到0、2.8、5.6和14μg/ml的乳外泌体浓度，并将培养物孵育24小时。然后评估放射性标记的葡萄糖的摄取。这些孵育的结果通过图3的白色条形显示。0μg/ml的浓度(无外泌体)充当对照，其中葡萄糖摄取设定为100％。与对照相比，5.6和14μg/ml粉末状外泌体的浓度分别导致肌肉细胞对葡萄糖摄取的统计学上显著的增加(p<0.05)。进行了比较实验，其中粉末状外泌体在孵育前进行了超声处理。图3的黑色条形显示此比较实验的结果。超声处理允许物理膜破坏。在所有情况下，超声处理都导致外泌体膜的破坏并抵消粉末状外泌体的积极效应。
葡萄糖摄取的增加部分是由于GLUT-4转运蛋白表达的增加。在另一个实验中，将粉末状外泌体以14μg/ml的浓度添加至L6.C11肌肉细胞培养物中，并将所述细胞培养物孵育24小时。包括不含粉末状外泌体的对照培养物，以及浓度为14μg/ml的粉末状外泌体的培养物，其中粉末状外泌体在添加至培养物之前也进行了超声处理。蛋白质印迹用于评估GLUT-4转运蛋白的蛋白质表达。甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GADPH)(一种参与糖酵解的关键酶)用作负载对照，并且对照培养物(0μg/ml)中的相对表达强度(GLUT-4/GADPH的水平)设置为100％。结果在图4中示出。对照培养物与粉末状外泌体培养物之间存在统计学上显著的差异，因为粉末状外泌体培养物中GLUT-4转运蛋白表达显著增加。这种效应被超声处理所抵消，因为超声处理的外泌体培养物与粉末状外泌体培养物之间也存在显著差异。
使用相同的实验设计来评估粉末状外泌体是否导致GLUT-4RNA增加(如通过PCR评估的)，并确定粉末状乳外泌体是否影响翻译以及蛋白质水平，并且结果显示在图5中。粉末状外泌体培养物中GLUT-4 mRNA的归一化的相对表达远高于对照培养物中的表达，并且在粉末状外泌体培养物与对照培养物之间存在统计学上显著的差异。对外泌体进行超声处理似乎部分抵消了这种积极效应，尽管粉末状外泌体培养物与超声处理的外泌体培养物之间没有统计学上显著的差异。
粉末状乳外泌体还增加了GLUT-4启动子活性，从而导致肌肉细胞上的总体GLUT-4表达增加，提供了肌肉细胞的总体葡萄糖摄取增加的机制。这通过以下实验显示。用pGL3-GLUT-4质粒转染肌肉细胞，这允许在天然GLUT-4启动子的控制下表达荧光素酶(荧光蛋白)。然后将细胞与0、2.8、5.6和14μg/ml的粉末状外泌体或超声处理的外泌体一起孵育24小时。孵育期后，测量荧光，所述荧光与GLUT-4启动子活性相关。结果在图6中示出。将对照培养物(0μg/ml)中的相对值(Pgl3-glut4/对照报告基因质粒Prl-tk)/GADPH)设置为100％。在14μg/ml下，粉末状外泌体显著增加了GLUT-4启动子活性，并且在粉末状外泌体培养物(14μg/ml)与对照培养物之间存在统计学上显著的差异。在粉末状外泌体培养物(14μg/ml)与相应的超声处理的外泌体培养物之间也存在统计学上显著的差异。
综上所述，在不破坏乳外泌体双层膜结构的情况下通过温和加工和干燥制备的本发明的粉末状外泌体优于已经冷冻和解冻的分离的外泌体，所述冷冻和解冻导致外泌体膜损伤。超声处理也抵消了粉末状外泌体对肌肉细胞的积极效应。保持外泌体结构在实现生物学效应方面是重要的。粉末状乳外泌体被肌肉细胞吸收，并且通过增强GLUT-4基因的转录而增加肌肉细胞对葡萄糖的摄取。此外，增加肌肉细胞中的葡萄糖摄取提供了通过提高胰岛素敏感性来增强对胰岛素抵抗受试者中的葡萄糖水平和肌肉功能的控制的方法。因此，在具体实施方案中，施用粉末状乳外泌体和/或含有所述粉末状乳外泌体的营养组合物以增加受试者肌肉中的GLUT-4转运蛋白表达。此外，在具体实施方案中，将粉末状外泌体和/或添加了所述粉末状外泌体的营养组合物施用于受试者以降低所述受试者中发展胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的风险，或治疗所述受试者的胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病。
本文描述的具体实施方案和实施例仅是示例性的，并且不限于由权利要求限定的本发明。
Claims (21)
1.牛乳分离的粉末状外泌体，所述牛乳分离的粉末状外泌体包含完整外泌体。
2.如权利要求1所述的牛乳分离的粉末状外泌体，其中所述完整外泌体包含miRNA。
3.如权利要求2所述的牛乳分离的粉末状外泌体，其中在37℃下储存3周后，所述牛乳分离的粉末状外泌体包含与在37℃下储存3周的鲜乳外泌体相比更大量的miRNA。
4.如权利要求1-3中任一项所述的牛乳分离的粉末状外泌体，其中所述牛乳分离的粉末状外泌体包含冷冻干燥的完整外泌体。
5.如权利要求1-4中任一项所述的牛乳分离的粉末状外泌体，其中大于90％的所述外泌体的直径是约10纳米至约250纳米。
6.一种营养组合物，所述营养组合物包含蛋白质、碳水化合物和/或脂肪以及牛乳分离的外泌体，其中所述外泌体是通过添加权利要求1-5中任一项所述的粉末状外泌体而提供。
7.如权利要求6所述的营养组合物，所述营养组合物包含基于所述营养组合物的重量约0.001至约10wt％的所述牛乳分离的外泌体。
8.如权利要求6或7所述的营养组合物，其中所述蛋白质包含乳蛋白和/或大豆蛋白。
9.如权利要求6-8中任一项所述的营养组合物，其中所述碳水化合物包含纤维。
10.如权利要求6-9中任一项所述的营养组合物，其中所述脂肪包含至少一种ω-3脂肪酸。
11.如权利要求10所述的营养组合物，其中所述组合物的所述至少一种ω-3脂肪酸选自由以下组成的组：二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、花生四烯酸和α-亚麻酸。
12.如权利要求6-11中任一项所述的营养组合物，其中所述营养组合物呈粉末形式。
13.如权利要求6-11中任一项所述的营养组合物，其中所述营养组合物呈液体形式。
14.一种制备粉末状营养组合物的方法，所述方法包括将包含蛋白质、碳水化合物和/或脂肪的粉末组合物与权利要求1-5中任一项所述的粉末状外泌体干混。
15.一种制备从牛乳分离的粉末状外泌体的方法，所述方法包括：
将牛乳离心以形成脂质级分顶层、乳清级分中间层以及细胞和碎片的第一团粒；
分离所述乳清级分并将所分离的乳清级分离心以除去额外的脂肪、酪蛋白聚集体和碎片并形成基本上澄清的乳清级分；
将所述基本上澄清的乳清级分微滤以除去残余碎片；
离心经微滤的乳清级分以获得含有外泌体的团粒；
将所述含有外泌体的团粒在水性介质中孵育以溶解所述团粒而不破坏外泌体膜，从而提供外泌体悬浮液；以及
干燥所述悬浮液以获得所述粉末状外泌体。
16.如权利要求15所述的方法，其中所述孵育步骤进行约12至约36小时并且在不超过500rpm离心下进行。
17.如权利要求15或权利要求16所述的方法，其中所述干燥步骤包括冷冻干燥。
18.如权利要求17所述的方法，其中所述冷冻干燥包括将所述外泌体悬浮液暴露于-80℃的温度和小于0.3毫巴的真空持续至少24小时。
19.如权利要求15-18中任一项所述的方法，其中所述方法在从牛获得所述乳的约5天内用牛乳进行，或者其中所述牛乳是从牛获得所述乳的约5天内冷冻的牛乳解冻的。
20.一种降低受试者中发展胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的风险或治疗受试者的胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的方法，所述方法包括：
将权利要求1-5中任一项所述的粉末状外泌体或权利要求6-13中任一项所述的营养组合物施用于有发展胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的风险或患有胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的受试者，其中外泌体的施用量分别有效降低发展胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病的风险或治疗胰岛素抵抗、前驱糖尿病或糖尿病。
21.如权利要求20所述的方法，其中所述受试者肥胖或患有肌肉减少症。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115038454A (zh) * | 2020-08-31 | 2022-09-09 | 庆熙大学校产学协力团 | 包含牛乳外泌体的用于诱导棕色脂肪化的组合物 |
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Families Citing this family (3)
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|---|---|---|---|---|
| WO2021202824A1 (en) * | 2020-04-03 | 2021-10-07 | Abbott Laboratories | Bovine milk exosome products and methods, nutritional compositions, and therapeutic methods |
| WO2023076144A1 (en) * | 2021-10-29 | 2023-05-04 | Abbott Laboratories | Methods and compositions for improving insulin production and secretion |
| WO2023205762A1 (en) * | 2022-04-21 | 2023-10-26 | Abbott Laboratories | Methods and compositions for slowing diabetes development or reducing a risk of diabetes |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103596440A (zh) * | 2011-06-08 | 2014-02-19 | 雀巢产品技术援助有限公司 | 含有外源性乳脂肪球膜组分的营养组合物 |
| CN103906440A (zh) * | 2011-10-21 | 2014-07-02 | 雀巢产品技术援助有限公司 | 乳清蛋白胶束用于处于肥胖症或糖尿病风险中的婴儿的用途 |
| WO2014134132A1 (en) * | 2013-02-26 | 2014-09-04 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Milk-derived microvesicle compositions and related methods |
| CN106455662A (zh) * | 2014-06-03 | 2017-02-22 | 雅培制药有限公司 | 包含亲脂性活性成分的营养组合物 |
| WO2017090049A1 (en) * | 2015-11-29 | 2017-06-01 | Hadasit Medical Research Services And Development Ltd. | Supplementation of milk formulas with microvesicles isolated from milk |
| US20170296627A1 (en) * | 2014-09-05 | 2017-10-19 | Exerkine Corporation | Exersomes, methods of producing and method of using |
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Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103596440A (zh) * | 2011-06-08 | 2014-02-19 | 雀巢产品技术援助有限公司 | 含有外源性乳脂肪球膜组分的营养组合物 |
| CN103906440A (zh) * | 2011-10-21 | 2014-07-02 | 雀巢产品技术援助有限公司 | 乳清蛋白胶束用于处于肥胖症或糖尿病风险中的婴儿的用途 |
| WO2014134132A1 (en) * | 2013-02-26 | 2014-09-04 | University Of Louisville Research Foundation, Inc. | Milk-derived microvesicle compositions and related methods |
| CN106455662A (zh) * | 2014-06-03 | 2017-02-22 | 雅培制药有限公司 | 包含亲脂性活性成分的营养组合物 |
| US20170296627A1 (en) * | 2014-09-05 | 2017-10-19 | Exerkine Corporation | Exersomes, methods of producing and method of using |
| WO2017090049A1 (en) * | 2015-11-29 | 2017-06-01 | Hadasit Medical Research Services And Development Ltd. | Supplementation of milk formulas with microvesicles isolated from milk |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| BODO C.MELNIK: "The Pathogenic Role of Persistent Milk Signaling in mTORCl-and Milk-MicroRNA-Driven Type 2 Diabetes Mellitus", CURRENT DIABETES REVIEWS, vol. 11, pages 46 - 62, XP055773005 * |
| MELNIK BODO C. ET AL: "Exosomes of pasteurized milk: potential pathogens of Western diseases", JOURNAL OF TRANSLATIONAL MEDICINE, vol. 17, no. 1, pages 1 - 33, XP055773012, DOI: 10.1186/s12967-018-1760-8 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115038454A (zh) * | 2020-08-31 | 2022-09-09 | 庆熙大学校产学协力团 | 包含牛乳外泌体的用于诱导棕色脂肪化的组合物 |
| CN116036298A (zh) * | 2021-10-28 | 2023-05-02 | 谛邈生物科技(北京)有限公司 | 牛奶外泌体在制备药物载体中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
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