CN114605567B - 一种老鹳草酸性多糖及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种老鹳草酸性多糖及其制备方法与应用，所述老鹳草酸性多糖由L‑鼠李糖、D‑阿拉伯糖、D‑甘露糖和D‑半乳糖组成，L‑鼠李糖：D‑阿拉伯糖：D‑甘露糖：D‑半乳糖摩尔比为1:24.42:3.42:4.65，分子量为2427 Da。所述酸性多糖具有较高的抗炎及抗氧化活性，其在浓度为50μg/mg时已经初步对TNF‑α及IL‑6的分泌水平有抑制作用，在浓度为1.6 mg/mL时就已经具有了与VC持平的DPPH自由基清除能力。另外，本发明提供的酸性多糖毒副作用小，因此，在制备低毒高效的抗炎及抗氧化药品开发中具有广泛的应用前景，有利于老鹳草资源的进一步开发利用。本发明制备酸性多糖的方法不仅操作简单成本低廉，同时更加高效更加实用，多糖的生物活性也得到了更好的保障，值得推广应用。

Description

一种老鹳草酸性多糖及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于天然产物提取技术领域，具体涉及一种老鹳草酸性多糖及其制备方法与应用。
背景技术
多糖在植物、藻类、菌类及动物体内广泛存在，是自然界中含量最丰富的生物大分子之一。研究表明多糖类成分具有多种药理活性，如调节免疫、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等，在药品及保健食品领域有很多的研究与应用。目前对于多糖常见的提取技术有热水提取法、酸提取法、碱提取法，上述技术操作简单、成本也较小，但是对多糖的提取率普遍较低，同时也会对多糖的生物活性有所降低。
老鹳草（Geranium wilfordii Maxim.）为牻牛儿苗科老鹳草属植物，是我国常用中药之一，具有祛风湿、通经络等功效。目前，针对老鹳草中多糖的研究未见报道，为了更好的开发利用老鹳草资源，本发明旨在提供一种老鹳草酸性多糖的制备方法以及应用。
发明内容
本发明的第一目的是提供一种老鹳草酸性多糖，本发明的第二目的是提供一种老鹳草酸性多糖的制备方法，本发明的第三目的是提供一种老鹳草酸性多糖的应用。
本发明的第一目的是这样实现的，所述老鹳草酸性多糖由L-鼠李糖：D-阿拉伯糖：D-甘露糖和D-半乳糖组成，L-鼠李糖：D-阿拉伯糖：D-甘露糖：D-半乳糖摩尔比为1:24.42:3.42:4.65，分子量为2427 Da。
本发明的第二目的是这样实现的，所述老鹳草酸性多糖的制备方法按以下步骤实现：
1）将老鹳草药材干燥为手搓易断碎或成粉末的程度后，粉碎为最粗粉，过10目筛，经甲醇回流脱脂2-3次后以80-85℃水提，每次提取2.5-4h，提取次数为2-3次，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；
2）将步骤1得到的浸膏以80%-85%乙醇醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀用蒸馏水重溶，以sevege法除蛋白，离心，弃去沉淀，共5-6次，直至离心再无沉淀，减压浓缩，冷冻干燥，得到老鹳草粗提物；
3）将步骤2得到的老鹳草粗提物用蒸馏水溶解，离心过滤后，采用DEAE SepharoseFast Flow阴离子交换层析纯化，以NaCl溶液洗脱，收集洗脱液，经透析、浓缩后得到酸性多糖。
本发明的第三目的是这样实现的，所述老鹳草酸性多糖的应用为作为活性成分或者是药用载体在制备抗炎症及抗氧化药物中的应用。
本发明的有益效果为：
1）本发明提供了一种从老鹳草中提取的酸性多糖，该酸性多糖具有较高的抗炎及抗氧化活性，其在浓度为50μg/mg时已经初步对TNF-α及IL-6的分泌水平有抑制作用，在浓度为1.6 mg/mL时就已经具有了与VC持平的DPPH自由基清除能力。另外，本发明提供的酸性多糖毒副作用小，因此，在制备低毒高效的抗炎及抗氧化药品开发中具有广泛的应用前景，有利于老鹳草资源的进一步开发利用。
2）本发明制备酸性多糖的方法不仅操作简单成本低廉，同时更加高效更加实用，多糖的生物活性也得到了更好的保障，值得推广应用。
附图说明
图1为老鹳草酸性多糖GAP的葡萄糖标准曲线；
图2为老鹳草酸性多糖GAP的纤维素阴离子交换柱分离谱图；
图3为老鹳草酸性多糖GAP的气质联用色谱仪数据图；
图4为老鹳草酸性多糖GAP 的HPGPC色谱图；
图5为老鹳草酸性多糖GAP甲基化碎片的GC/MS重构总离子流图谱；
图6为老鹳草酸性多糖GAP 的红外光谱图；
图7为老鹳草酸性多糖GAP细胞活力检测示意图；
图8为老鹳草酸性多糖GAP抑制脂多糖诱导的RAW 264.7巨噬细胞产生促炎细胞因子IL-6的作用示意图；
图9为GAP抑制脂多糖诱导的RAW 264.7巨噬细胞产生促炎细胞因子TNF-α的作用示意图；
图10为龙胆多糖IL-6、TNF-α指标检测示意图
图11为老鹳草酸性多糖GAP及维生素C对DPPH自由基的清除作用的曲线图；
图12为现有多糖白云参中性多糖（CJP-C）以及白云参酸性多糖（CJP）DPPH自由基清除能力曲线图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变更或改进，均属于本发明的保护范围。
本发明提供了一种老鹳草酸性多糖，所述酸性多糖由L-鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-甘露糖和D-半乳糖组成，L-鼠李糖：D-阿拉伯糖：D-甘露糖：D-半乳糖摩尔比为1:24.42:3.42:4.65，分子量为2427 Da。
本发明老鹳草酸性多糖的制备方法按以下步骤实现：
1）将老鹳草药材干燥为手搓易断碎或成粉末的程度后，粉碎为最粗粉，过10目筛，经甲醇回流脱脂2-3次后以80-85℃水提，每次提取2.5-4h，提取次数为2-3次，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；
2）将步骤1得到的浸膏以80%-85%乙醇醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀用蒸馏水重溶，以sevege法除蛋白，离心，弃去沉淀，共5-6次，直至离心再无沉淀，减压浓缩，冷冻干燥，得到老鹳草粗提物；
3）将步骤2得到的老鹳草粗提物用蒸馏水溶解，离心过滤后，采用DEAE SepharoseFast Flow阴离子交换层析纯化，以0.2mol/L NaCl洗脱，收集洗脱液，经透析、浓缩后得到目标酸性多糖。
步骤1中，甲醇回流脱脂的温度为60-65℃，甲醇的浓度为80-90%，甲醇的加入量为老鹳草药材重量的6-10倍（V:m=6-10）。
步骤1中，热水煮提的温度为80-85℃。
步骤2中，乙醇浓度为80%-85%，乙醇的加入量为所述浸膏的2-3倍（V:m=2-3）。
步骤3中，透析时的截流分子量为3400 Da。
本发明老鹳草酸性多糖的应用为作为活性成分或者是药用载体在制备抗炎症及抗氧化药物中的应用。
所述应用将所述老鹳草多糖加入药学上可接受的辅料制备成片剂、硬胶囊、软胶囊、散剂、丸剂、颗粒剂。
实施例1
将1kg老鹳草药材粉碎后，60℃下用6L甲醇回流脱脂3次。将脱脂后的老鹳草药材以10L 80℃的热水进行煮提，每次提取3小时，共提取2次，合并提取液，减压浓缩。将浓缩后的浸膏以2倍体积80%乙醇醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀用蒸馏水重溶，以sevege法除蛋白，离心，弃去沉淀，共5次，直至离心再无沉淀。最后将除蛋白后的多糖减压浓缩，冷冻干燥，得到120 g老鹳草粗多糖。
利用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析纯化所述老鹳草粗多糖（分离图谱如图2所示），取所述老鹳草粗多糖10 g溶于少量蒸馏水中，配制成30mg/mL，4000rpm离心12min，上清液用0.45 μm滤头过滤，上样；用0.2mol/L NaCl洗脱，洗脱5倍柱体积，流速为1mL/min，接洗脱液，减压浓缩至1/11的体积；浓缩后的洗脱液装于分子量3400Da的透析袋中，放于蒸馏水中透析30h，每5 h换一次水；得到的洗脱液冷冻干燥得1.5g老鹳草酸性多糖。得率或收率为15%。
实施例2
将1kg老鹳草药材粉碎后，65℃下用8 L甲醇回流脱脂3次。将脱脂后的老鹳草药材以12 L 85℃的热水进行煮提，每次提取2.5小时，共提取3次，合并提取液，减压浓缩。将浓缩后的浸膏以2.5倍体积85%乙醇醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀用蒸馏水重溶，以sevege法除蛋白，离心，弃去沉淀，共6次，直至离心再无沉淀。最后将除蛋白后的多糖减压浓缩，冷冻干燥，得到140 g老鹳草粗多糖。
利用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析纯化该老鹳草粗多糖：取所述老鹳草粗多糖10g溶于少量蒸馏水中，配制成30 mg/mL，5000rpm离心8min，上清液用0.45 μm滤头过滤，上样；用0.2mol/L NaCl洗脱，洗脱5倍柱体积，流速为1mL/min，接洗脱液，减压浓缩至1/9的体积；浓缩后的洗脱液装于分子量3400 Da的透析袋中，放于蒸馏水中透析24h，每3 h换一次水；得到的洗脱液冷冻干燥得1.3 g老鹳草酸性多糖，得率或收率为13%。
实施例3
将1kg老鹳草药材粉碎后，63℃下用10 L甲醇回流脱脂3次。将脱脂后的老鹳草药材以12L 83℃的热水进行煮提，每次提取3.5小时，共提取3次，合并提取液，减压浓缩。将浓缩后的浸膏以3倍体积85%乙醇醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀用蒸馏水重溶，以sevege法除蛋白，离心，弃去沉淀，共6次，直至离心再无沉淀。最后将除蛋白后的多糖减压浓缩，冷冻干燥，得到138g老鹳草粗多糖。
利用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析纯化所述老鹳草粗多糖：取所述老鹳草粗提物10g溶于少量蒸馏水中，配制成35 mg/mL的溶液，于4500rpm下离心9min，上清液用0.45 μm滤头过滤，上样；用0.2mol/L NaCl洗脱，洗脱6倍柱体积，流速为1 mL/min，接洗脱液，减压浓缩至1/9的体积；浓缩后的洗脱液装于分子量3400 Da的透析袋中，放于蒸馏水中透析27 h，每6 h换一次水；得到的洗脱液冷冻干燥得1.7g老鹳草酸性粗多糖，得率为17%。
将本发明制备得到的老鹳草酸性多糖命名为GAP，以下以实施例1为例，对GAP进行结构及活性等分析检测。
试验例1 老鹳草酸性多糖GAP中多糖的含量测定
测定方法：苯酚-硫酸法
（1）6%苯酚溶液的配制：准确称量苯酚固体15g，加入250mL蒸馏水于60℃水浴下充分溶解，用棕色磨口瓶避光保存备用。
（2）0.1mg/mL GAP溶液的制备：准确称量老鹳草酸性多糖10mg，加蒸馏水定容至100mL容量瓶中，配制成0.1mg/mL的GAP溶液，待测。
（3）0.1mg/mL 葡萄糖标准溶液的配制：准确称量葡萄糖标准品10mg，加蒸馏水定容至100mL容量瓶中，配制成0.1mg/mL的葡萄糖标准溶液，待用。
（4）葡萄糖标准曲线的绘制：用移液枪分别量取葡萄糖标准溶液0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL于12mL玻璃试管中，加蒸馏水补至1mL，每个浓度3个重复。接下来向每个试管中加入0.5mL 6%的苯酚溶液，继续缓慢加入2.5mL浓硫酸，快速震荡试管，自然冷却待其颜色变化稳定后，于490nm波长下测量其吸光度。以葡萄糖标准品质量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线（图1）。
（5）多糖样品的含量测定：取1mL 0.1mg/mL GAP溶液，加入0.5mL 6%苯酚溶液，2.5mL浓硫酸溶液，于490nm波长下测量其吸光度。根据标准曲线计算出老鹳草酸性多糖的含量。
（6）结果如表1所示，可知本实施例制得的多糖含量为96.46%。
表1 苯酚-硫酸法测定实施例2制备的GAP的吸光度
Figure DEST_PATH_IMAGE001
试验例2 老鹳草酸性多糖GAP单糖组成鉴定
鉴定方法：分别准确称取实施例1中制备得到的GAP及各单糖标准品（L-鼠李糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-岩藻糖、D-阿拉伯糖、D-木糖）各2mg至各血清瓶中，其中单糖标准品进行单标及混标的衍生化反应。称取10 mg盐酸羟胺及1mg内标肌醇，然后加入2mL吡啶，于90℃条件下反应30min，待其自然冷却后，再加入2mL醋酸酐，拧紧瓶盖于90℃条件下反应30min，待反应结束自然冷却后加入2mL蒸馏水终止反应。向衍生化反应后的样品中加入2mL二氯甲烷，充分震荡后让其静置分层，吸取下层溶液转移至25mL蒸馏烧瓶中，再用1mL二氯甲烷重复萃取1次，将两次萃取的溶液减压浓缩至干以除去多余水分，过0.22μm有机滤膜，待进行GC-MS联用色谱检测。将各保留时间与单糖标准品比对后（图3），可确定其所含的单糖组成L-鼠李糖：D-阿拉伯糖：D-甘露糖：D-半乳糖摩尔比为1:24.42:3.42:4.65。
试验例3 老鹳草酸性多糖GAP分子量测定
称取样品GAP以及不同分子量的右旋糖酐标准品各5mg，分别加入0.05M NaCl溶液配制为5mg/mL的供试品及标准品溶液，使用0.22 μm的微孔滤膜过滤，转至进样小瓶中冷藏备用。采用HPGPC法，使用高效液相色谱仪，示差检测器，聚合物基质水溶性SEC（GFC）色谱柱OHpak SB-803 HQ、Ohpak SB-804 HQ、Ohpak SB-805 HQ（8×300 mm）串联柱检测，流动相为0.05M NaCl溶液，流速0.6mL/min，柱温40 ºC，进样量30μL。使用高效凝胶渗透色谱串联柱来进行供试品及标准品检测，采用Waters Empower软件对结果进行分析，以相应色谱峰的保留时间为横坐标，以标准品相对分子质量Mp的对数值为纵坐标进行线性回归，建立标准曲线，将供试品保留时间代入标准曲线，计算可得供试品相对分子质量为2427 Da（图4）。
试验例4 老鹳草酸性多糖GAP甲基化分析
称取10 mg GAP，加入1mL一级水溶解，加入1mL 100mg/mL碳二亚胺，反应2h，继续加入1mL 2M的咪唑，将样品平均分为两份，分别加入1mL 30mg/mL 的NaBH4和1mL 30mg/mL的NaBD4，反应3h，后加入100μL冰醋酸终止反应。透析样品48h，透析完成后冷冻干燥样品。对冻干样品进行甲基化处理，于冻干样品中加入500 μL DMSO溶解，加入1mg NaOH，孵育30min，继续加入50μL碘甲烷溶液反应1h，后加入1mL水和2mL二氯甲烷，涡旋混匀，离心，弃水相。重复水洗3次，吸取下层二氯甲烷相并蒸干。）继续加入100 μL 2M TFA，121℃反应90min后于30℃下蒸干，之后加入50 μL 2 M 氨水，50μL 1 M NaBD4，混匀，室温下反应2.5h后，加入20μL乙酸终止反应，氮气吹干，250μL甲醇洗两次，氮气吹干。加入乙酸酐250μL，涡旋混匀，100℃反应2.5h，继续加入1mL水静置10min，再加入500μL二氯甲烷，涡旋混匀，离心，弃水相。重复水洗3次，反应完成后取下层二氯甲烷相，待测。
色谱系统采用的是Agilent气象色谱系统（Agilent 7890A；AgilentTechnologies，USA），根据化合物的性质，进样量为1 μL，分流比10:1，载气为高纯氦气；柱温箱的初始温度为140℃保持2.0 min，以3℃/min程序升温至230℃，保持3 min。质谱系统采用的是美国Aiglent公司的四极杆质谱检测系统（Agilent 5977B；AgilentTechnologies，USA），配有电子轰击离子源（EI）和MassHunter工作站。采用电子轰击离子源（EI），分析物在全扫描（SCAN）模式下进行检测，质量扫描范围(m/z): 30-600。将样品溶液按照上述色谱、质谱条件进样检测，获得多糖甲基化后特征性碎片，其甲基化碎片的GC/MS重构总离子流图谱见图5。根据已有的数据库进行对比，进而确认其键合方式，结果如表2所示。
表2 GAP衍生物及键合方式
Figure DEST_PATH_IMAGE002
结果分析：GAP主要衍生物为2,3,6-Me3-Galp、2,3,4,6-Me4-Galp以及2,3,5-Me3-Araf组成，主要链接方式为→1)-Galp-(4→。
试验例5 老鹳草酸性多糖GAP红外光谱分析
精确称取2 mg GAP与KBr充分混合研磨，制作为溴化钾压片，放置于FT-IR仪器中进行扫描，重复三次，检测波长为4000~400 nm，结果如图6红外光谱图所示。
结果分析：GAP在3400cm-1附近存在很强的-OH伸缩振动吸收峰；在2930cm-1附近有较弱的C-H伸缩振动吸收峰；在1600cm-1附近具有较强的-OH弯曲振动吸收峰；于1379cm-1及1400cm-1附近有C-H弯曲引起的吸收峰；于1215-1220 cm-1处由C-O伸缩振动引起了吸收峰、于1032-1034 cm-1附近产生为-OH变角震动的吸收峰；于948cm-1附近可能为吡喃环末端次甲基的横摇振动引起的吸收峰；于832cm-1处应该为α吡喃糖的特征吸收峰。
试验例6 GAP细胞活力检测
检测方法：RAW264.7细胞于DMEM（含10%FBS，1%青霉素-链霉素）培养于37℃含5%CO2的培养箱。实验分组如下：正常对照组（NC）、0.1 μg/mL LPS处理组（阳性对照组）及不同浓度的老鹳草酸性多糖均一组分GAP（10-1000μg/mL）处理组，每个分组设置6个复孔。将细胞接种于96孔培养板中，接种浓度为1×105个/mL，每孔100μL，培养24小时后，吸弃原培养基，正常组加入DMEM培养基，其余各组加入对应浓度的药物，培养24h后，加入10μL CCK8试剂，于培养箱中培养1.5小时后，450nm下用酶标仪检测吸光度，实验重复3次。细胞活力计算公式如下：
细胞存活率=（As−Ab）/（Ac−Ab）×100%
（As：实验孔、Ac：对照孔、Ab：空白孔）。
测定结果如图7所示，与NC组细胞对比GAP（10-1000μg/mL）处理组细胞活力均上升，且GAP剂量在10μg/mL-500μg/mL 最为显著（P＜0.0001）。
结果分析：上述试验结果表明GAP可以促进巨噬细胞RAW264.7的增殖，且无毒副作用。
试验例7 GAP抗炎活性测定
测定方法：将RAW264.7接种于96孔板中，接种浓度为1×105个/mL，每孔100uL。培养24小时后，设置正常对照组（NC）、1 μm/L 地塞米松处理组（阳性对照组）、0.1ug/mL Lps(模型组）及不同浓度GAP（50-500μg/mL）每个浓度设置4个复孔，正常组和模型组给予完全培养基,每个药物组每孔给予100uL的含药培养基培养24h。24小时后，吸弃细胞上清，正常组加入DMEM培养基，其余各组均加入0.1 μg/mL LPS，每孔0.1mL，培养12小时后，收集细胞上清液，进行ELISA法检测细胞上清中的TNF-α及IL-6的水平。
检测结果如图8和图9所示，其中，数据为三个独立实验的平均值±SD。单用脂多糖可显著诱导RAW 264.7巨噬细胞产生TNF-α和IL-6(P<0.0001)。相反，GAP治疗以剂量依赖的方式抑制这些LPS刺激的促炎细胞因子的分泌(图8-9，p<0.001)。
注：与NC组（正常组）相比，“####”表示 P<0.0001；与MC组（模型对照组）相比，“**”表示P＜0.01，“***”表示 P<0.001，“****”表示 P<0.0001。
结果分析：
1、图8为IL-6指标检测结果，由图可见，模型组为经过脂多糖刺激的巨噬细胞产生大量的促炎细胞因子IL-6，经过浓度为1μm/L的阳性药物地塞米松干预后有显著降低IL-6分泌，GAP在浓度为50μg/mg时已经初步对IL-6的分泌水平有抑制作用，在浓度为500 μg/mg的时候，可以极显著抑制由LPS刺激引起的IL-6的分泌水平。
2、图9为TNF-α指标检测结果，由图可见，模型组为经过脂多糖刺激的巨噬细胞产生大量的促炎细胞因子TNF-α，经过浓度为1μm/L的阳性药物地塞米松干预后有显著降低TNF-α分泌，GAP在浓度为50μg/mg时已经初步对TNF-α的分泌水平有抑制作用，在浓度为500μg/mg的时候，可以极显著抑制由LPS刺激引起的TNF-α的分泌水平。
本发明采用了脂多糖激活的巨噬细胞RAW264.7炎症反应模型，通过对促炎细胞因子指标IL-6、TNF-α的检测，评价其体外抗炎活性，结果表明老鹳草酸性多糖能够显著降低促炎细胞因子水平，其具有较好的抗炎活性。
与现有技术龙胆多糖对促炎细胞因子指标IL-6、TNF-α的检测指标图比较，可以看出龙胆多糖在25μg/mg浓度下才开始有抑制促炎因子的效果，且其没有剂量依赖性。与之相比GAP有更加显著的抗炎作用。
试验例8 GAP抗氧化活性测定
测定方法：DPPH 自由基清除能力测定
（1）称取2 mg DPPH溶解于10 mL无水乙醇后定容于50mL容量瓶中（0.04mg/mL）于4℃下避光保存备用。取6根试管中分别加入1mL浓度为0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.4mg/mL、0.8mg/mL、1.6mg/mL的实施例1制备的GAP，以等体积的蒸馏水为空白对照，再分别向每个试管当中加入1mL DPPH 溶液避光反应30分钟，以维生素C作为阳性对照，于517nm下测定吸光度，试验结果如图9所示。自由基清除率计算公式如下：
Figure DEST_PATH_IMAGE003
结果分析：
1、根据吸光度计算可得，Vc自由基清除率为81%。
2、图11比较了老鹳草酸性多糖以及阳性对照VC的DPPH自由基清除能力，可见其浓度在0.8mg/mL下的清除能力就与阳性对照基本持平，且清除率达到76.5%，说明其具有极好的抗氧化能力。
3、图12为现有技术白云参中性及酸性多糖DPPH自由基清除能力，可以看出其均在浓度达到2 mg/mL上才初步具有一定的清除能力，浓度达到6.4 mg/mL时，白云参中性及酸性多糖清除率才达到59.7%以及65.7%，比较来看，老鹳草酸性多糖的自由基清除能力更强，更加具有开发抗氧化药物的潜力。

Claims (7)

1.一种老鹳草酸性多糖，其特征在于，所述老鹳草酸性多糖由L-鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-甘露糖和D-半乳糖组成，L-鼠李糖：D-阿拉伯糖：D-甘露糖：D-半乳糖摩尔比为1:24.42:3.42:4.65，峰值分子量Mp为2427 Da；所述老鹳草酸性多糖的甲基化分析所得残基包括2,3,6-Me3-Galp、2,3,4,6-Me-Glcp、2,3,4,6-Me4-Galp以及2,3,5-Me3-Araf，2,3,6-Me3-Galp的占比为18.939%，2,3,4,6-Me-Glcp的占比为9.9%，2,3,4,6-Me4-Galp的占比为9.407%，2,3,5-Me3-Araf的占比为8.783%，其中，2,3,6-Me3-Galp为1→4连接。
2.权利要求1所述的一种老鹳草酸性多糖的制备方法，其特征在于，按以下步骤实现：
1）将老鹳草药材干燥，粉碎，过10目筛，经甲醇回流脱脂2-3次后以80-85℃水提，每次提取2.5-4h，提取次数为2-3次，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；
2）将步骤1得到的浸膏以80%-85%乙醇醇沉，离心，弃去上清液，将沉淀用蒸馏水重溶，以sevege法除蛋白，离心，弃去沉淀，共5-6次，直至离心再无沉淀，减压浓缩，冷冻干燥，得到老鹳草粗提物；
3）将步骤2得到的老鹳草粗提物用蒸馏水溶解，离心过滤后，采用DEAE SepharoseFast Flow阴离子交换层析纯化，以浓度为0.2mol/L的NaCl溶液洗脱，收集洗脱液，经透析、浓缩后得到酸性多糖。
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤1中，甲醇回流脱脂的温度为60-65℃，甲醇的浓度为80-90%，甲醇的加入量为老鹳草药材重量的6-10倍。
4.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤2中，乙醇浓度为80%-85%，乙醇的加入量为所述浸膏的2-3倍。
5.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，步骤3中，透析时的截留分子量为3400Da。
6.权利要求1所述老鹳草酸性多糖作为活性成分或者是药用载体在制备抗炎症及抗氧化药物中的应用。
7.根据权利要求6所述应用，其特征在于将所述老鹳草酸性多糖加入药学上可接受的辅料制备成片剂、硬胶囊、软胶囊、散剂、丸剂、颗粒剂。
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