CN114533878A - Mgst1抑制剂的应用及治疗肝癌药物混合物 - Google Patents

Mgst1抑制剂的应用及治疗肝癌药物混合物 Download PDF

Info

Publication number
CN114533878A
CN114533878A CN202011339445.4A CN202011339445A CN114533878A CN 114533878 A CN114533878 A CN 114533878A CN 202011339445 A CN202011339445 A CN 202011339445A CN 114533878 A CN114533878 A CN 114533878A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mgst1
liver cancer
inhibitor
cancer
resistance
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202011339445.4A
Other languages
English (en)
Inventor
张丽华
王子璇
赵宝锋
褚宏伟
马宝福
杨开广
梁振
张玉奎
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Dalian Institute of Chemical Physics of CAS
Original Assignee
Dalian Institute of Chemical Physics of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dalian Institute of Chemical Physics of CAS filed Critical Dalian Institute of Chemical Physics of CAS
Priority to CN202011339445.4A priority Critical patent/CN114533878A/zh
Publication of CN114533878A publication Critical patent/CN114533878A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/7105—Natural ribonucleic acids, i.e. containing only riboses attached to adenine, guanine, cytosine or uracil and having 3'-5' phosphodiester links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

目前大部分肿瘤的治疗方案都是手术切除辅助化疗，化疗耐药性现已成为影响肿瘤患者预后的重要因素。本发明中公开了一种MGST1抑制剂的应用及治疗肝癌药物混合物，具体为一个特异性的分子标志物，可作为抗肿瘤耐药的重要靶点。本发明中首次揭示了MGST1与肝癌耐药的密切关系，并提供了MGST1的抑制剂在制备降低或消除肝癌化疗耐药性的药物中的用途、其作为肝癌耐药标志物及其作为肝癌耐药预测、诊断以及药物设计和筛选的靶点的应用。本发明为克服肝癌耐药、提高疗效提供新的机理，为抗肝癌耐药提供新的靶点。

Description

MGST1抑制剂的应用及治疗肝癌药物混合物
技术领域
本发明属于分子生物学和肿瘤防治领域，更具体而言，本发明涉及耐药肿瘤的治疗领域。本发明提供了一种新的肿瘤耐药标志物：在肿瘤组织中高表达并导致肿瘤耐药的微粒体谷胱甘肽S-转移酶1(Microsomal glutathione S-transferase 1，MGST1)，将该蛋白作为靶点，可筛选针对该蛋白及其相关分子的治疗肿瘤耐药的药物。
背景技术
肝癌是严重威胁人类生命健康的恶性肿瘤之一，其具有早期诊断困难、恶性程度高、预后差的特点，全身系统地化疗是肝癌的主要治疗手段之一，然后，肝癌细胞化疗耐药性的出现成为治疗的主要障碍。因此，为了逆转肿瘤耐药、提高化疗疗效，本领域迫切需要通过多种方式研究肿瘤耐药的关键基因靶点，并根据这些靶点设计治疗肿瘤耐药的新药，从而引导肿瘤耐药靶向性治疗。
微粒体谷胱甘肽S-转移酶1(MGST1)是一种膜蛋白，属于II期解毒酶，可通过中和活性氧来保护细胞存活，其定位于内质网和线粒体膜外壁，保护线粒体膜免受脂质过氧化和氧化应激损伤。在许多癌症中发现了MGST1的异常表达，对于MGST1在癌症耐药方面的功能已有初步报道，MGST1过表达介导细胞淋巴瘤对盐酸苯达莫司汀的耐药性(T.Takimoto-Shimomura,H.Nagoshi,S.Maegawa,Establishment and Characteristics of a NovelMantle Cell Lymphoma-derived Cell Line and a Bendamustine-resistant Subline,Cancer Genomics Proteomics 15(3)(2018)213–223)，并保护MCF7细胞免受几种细胞抑制剂的影响，如氯苯丁腈、马法兰和顺铂等药物(K.Johansson,M.Ito,C.M.Schophuizen,S.Mathew Thengumtharayil,Characterization of new potential anticancer drugsdesigned to overcome glutathione transferase mediated resistance,Mol.Pharm.8(5)(2011)1698–1708)。然而，MGST1在肝癌耐药中的作用尚不清楚。为了研究MGST1在肝癌耐药中发挥的作用，本发明采用基于质谱的定量蛋白质组学技术筛选和生物学功能研究，运用Western blotting、平板克隆形成、流式细胞术等方法检测MGST1对肝癌耐药细胞增殖及凋亡的影响。
发明内容
本发明的目的是提供一种针对MGST1的抑制剂作为降低或消除肝癌耐药治疗的应用。
为了实现上述目的，本发明通过如下技术方案进行实现：
本发明提供了抑制MGST1的方法，是通过抑制剂实现。
进一步，所述抑制剂包括了：针对MGST1蛋白抑制的抗MGST1的抗体、针对MGST1编码序列的RNA干扰分子或反义寡核苷酸。
更进一步，所述抗MGST1的抗体，包括：对MGST1或其活性片段具有免疫活性，能够特异性识别并结合MGST1的氨基酸序列或其空间结构的单克隆抗体、多克隆抗体和具有免疫活性的抗体片段。
本发明所述的针对MGST1编码序列的RNA干扰分子，选自shRNA、siRNA、miRNA、dsRNA。
进一步，所述的RNA干扰分子siRNA的优选序列为siRNA1，正义链:
5'-GCUUAUGAGUACUGCAACUTT-3'和反义链:
5'-AGUUGCAGUACUCAUAAGCTT-3'；siRNA2,正义链:5'
AGUUGCAGUACUCAUAAGCTT-3'和反义链:
5'-AAUACAGGAGGCCAAUUCCTT-3'；siRNA3,正义链:
5'-GGAUAUGGAGUUACUCUUUTT-3'和反义链:
5'-AAAGAGUAACUCCAUAUCCTT-3'。
本发明所述的反义寡核苷酸，特异地与MGST1基因DNA或mRNA结合而抑制MGST1基因表达，在基因水平调控的分子药物，包括人工合成或体内表达的反义DNA和反义RNA。
本发明所述的肝癌包括：原发性肝癌，继发性肝癌，以及原发性肝癌或继发性肝癌的离体培养细胞。
进一步，原发性肝癌包括：肝细胞肝癌、肝内胆管癌，肝细胞癌混合肝内胆管癌；继发性肝癌包括：肠癌、胰腺癌转移胆囊癌、胆管癌。
本发明所述的药物，包括：顺铂、吉非替尼、阿霉素、紫杉醇、5-氟尿嘧啶、索拉非尼、西地尼布、帕唑帕尼、阿西替尼、瓦他拉尼、司马沙尼、舒尼替尼、雷莫芦单抗及阿柏西普。
本发明中首次揭示了MGST1与肝癌耐药的密切关系，并提供了MGST1的抑制剂在制备降低或消除肝癌化疗耐药性的药物中的用途、其作为肝癌耐药标志物及其作为肝癌耐药预测、诊断以及药物设计和筛选的靶点的应用。本发明为克服肝癌耐药、提高疗效提供新的机理，为抗肝癌耐药提供新的靶点。
附图说明
图1.MGST1蛋白在肝癌索拉非尼耐药细胞HepG2-R中高表达；
图2.siRNA转染敲低MGST1蛋白表达水平；
图3.平板克隆实验显示抑制MGST1表达提高了肝癌耐药细胞对索拉非尼药物敏感性。
具体实施方式
下面结合具体实施例，具体阐述本发明。下列实施例中，索拉非尼耐药株HepG2-R按照文献方法构建(Yeh,C.C.；Hsu,C.H.；Shao,Y.Y.；Ho,W.C.Integrated Stable IsotopeLabeling by Amino Acids in Cell Culture(SILAC)and Isobaric Tags for Relativeand Absolute Quantitation(iTRAQ)Quantitative Proteomic Analysis IdentifiesGalectin-1as a Potential Biomarker for Predicting Sorafenib Resistance inLiver Cancer.Mol Cell Proteomics.14(6)(2015)1527-45.)；未注明具体条件的实验方法，通常是按照常规条件，如Sambrook等人著，分子克隆：实验室指南(New York：ColdSpring Harbor Laboratory Press,1989)中所述条件，或按照制造厂商所建议的条件。所用溶液中百分比如无特殊说明均为体积比。
实施例1.MGST1蛋白在肝癌索拉非尼耐药细胞HepG2-R中高表达
为研究MGST1在正常肝癌细胞和肝癌耐药细胞中的表达水平，通过对肝癌细胞HepG2及索拉非尼耐药细胞HepG2-R无标定量蛋白质组学分析发现，MGST1在HepG2-R中的丰度明显高于HepG2中。采用蛋白质印迹法(参考《分子克隆》)进一步检测两种细胞中MGST1蛋白表达水平。
分别在10cm培养皿培养HepG2及HepG2-R细胞，当细胞密度达80％-90％时(约5×106个细胞)，首先用6ml PBS(pH 7.4)(购买于美国Gibco公司)洗3次，再加入300μl的RIPA裂解液(购买于上海碧云天生物技术有限公司，裂解液主要成分为50mM Tris(pH 7.4)，150mM NaCl，1％Triton X-100，1％sodium deoxycholate，0.1％SDS，以及sodiumorthovanadate，sodium fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂)，培养皿置于冰上裂解细胞15min，12000g离心15min，去除沉淀获得蛋白质上清液。分别用BCA试剂盒(购买于上海碧云天生物技术有限公司)测定蛋白质浓度。分别采用蛋白质印迹法检测MGST1蛋白质表达水平,每个泳道的蛋白样品上样量为50μg。Bio rad电泳仪，Bio rad转膜仪购买于美国Biorad公司，MGST1的抗体购买于美国Gene Tex公司,货号GTX114551。β-actin抗体做内参，购买于美国Sigma公司，货号A5441。
结果显示MGST1在肝癌索拉非尼耐药细胞HepG2-R中蛋白表达水平明显高于对照细胞HepG2(图1)，表明MGST1的表达与肝癌耐药具有关联。
实施例2.抑制MGST1表达提高了肝癌耐药细胞对索拉非尼药物敏感性
1.siRNA设计合成
根据MGST1基因序列由上海吉玛制药技术有限公司设计合成siRNA1；
并同时提供与MGST1基因无序列同源性的阴性对照siRNA(siRNA NC)。
siRNA NC
正义链:5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'
反义链:5'-ACGUGACACGUUCGGAGAATT-3'
siRNA1 MGST1
正义链:5'-GCUUAUGAGUACUGCAACUTT-3'
反义链:5'-AGUUGCAGUACUCAUAAGCTT-3'；
2.细胞转染
取生长良好且处于对数生长期的HepG2-R细胞(105个)铺至六孔板，采用转染试剂盒Lipofectamine RNAiMAX(购自Invitrogen公司)进行转染，对照组转染siRNA NC，实验组转染siRNA1 MGST1，实验操作及试剂用量参照转染试剂盒说明书即可。培养48小时后，采用蛋白质印迹法(参考《分子克隆》)检测蛋白质表达水平。MGST1抗体购自美国Genetex公司，货号GTX114551。HSP90抗体做内参，购买于美国Santacruz Biotochnotogy公司，货号SC-13119。蛋白质印迹法结果显示实验组转染siRNA1 MGST1后，MGST1的表达水平相比于对照组降低(图2)，说明转染成功，siRNA1 MGST1可以实现MGST1的表达敲低。
3.平板克隆
在10cm培养皿中培养肝癌索拉非尼耐药细胞HepG2-R，对数生长期时加入0.5ml胰酶消化2min，加入6ml DMEM培养基吹打细胞液，细胞计数后稀释，分别取2ml细胞液(含104个细胞)至六孔板每孔中。48h后，细胞贴壁生长良好时，进行细胞转染。采用转染试剂盒Lipofectamine RNAiMAX进行转染，对照组转染siRNA NC，实验组转染siRNA1 MGST1，实验操作及试剂用量参照转染试剂盒说明书即可。继续培养24h后分别加索拉非尼至终浓度0μM,8μM,继续培养细胞，观察细胞生长状态。7天左右进行结晶紫染色。采用体积浓度20％乙酸500μl溶解结晶紫20min，检测590nm处吸光值。
结果显示，加索拉非尼0μM时，siRNA1 MGST1组敲低MGST1蛋白表达会抑制细胞的存活，促进凋亡，说明MGST1抑制细胞凋亡。随着索拉非尼药物浓度增加，siRNA1 MGST1组细胞存活率明显低于siRNANC组，每组差异均具有统计学意义(*p<0.05)(图3)，结果表明抑制MGST1表达提高了肝癌耐药细胞对索拉非尼药物敏感性，提高索拉非尼药物对肝癌的治疗效果。
实施例3.抑制MGST1表达提高肝癌耐药细胞对吉非替尼药物敏感性
1.siRNA设计
根据MGST1基因序列由上海吉玛制药技术有限公司设计合成siRNA2，并同时提供与MGST1基因无序列同源性的阴性对照siRNA(siRNA NC)。
siRNA NC
正义链:5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'
反义链:5'-ACGUGACACGUUCGGAGAATT-3'
siRNA2 MGST1
正义链:5'-CCACUGUUCUGUGCAAUGATT-3'
反义链:5'-AAUACAGGAGGCCAAUUCCTT-3'；
取生长良好且处于对数期的肝癌吉非替尼耐药细胞HepG2-SR细胞铺至六孔板，待细胞汇合率达50％时，采用脂质体Lipofectamine2000为转染试剂，对照组转染siRNA NC，实验组转染siRNA2MGST1，实验操作参照Lipofectamine2000试剂说明书即可。采用蛋白质印迹法(参考《分子克隆》)检测蛋白质表达水平。MGST1抗体购自美国Genetex公司，货号GTX114551。蛋白质印迹法结果显示实验组转染siRNA2MGST1后，MGST1的表达水平相比于对照组降低(图2)，说明转染成功，siRNA2 MGST1可以实现MGST1的表达敲低。
2.细胞转染和收集
培养肝癌吉非替尼耐药细胞HepG2-SR细胞，生长良好时胰酶消化，培养基终止吹打，得细胞悬浮液，稀释后，六孔板每孔加2ml细胞液含105个细胞。48h后，细胞贴壁生长良好时，进行细胞转染。采用脂质体Lipofectamine2000为转染试剂，siRNA NC与siRNA2MGST1各转染2μL siRNA加至300μLopti-mem培养基，10μL RNAi试剂加至300μLopti-mem培养基，吹打混匀30分钟后加入，转染6小时后换成正常培养基。24-48h后分别换液，加吉非替尼0μM,2μM,4μM,继续培养细胞48h，观察细胞生长状态。
3.细胞凋亡检测
加入100μL胰酶消化2min后收集细胞，3mL PBS清洗3次，离心收集细胞沉淀，采用美国BD公司细胞凋亡检测试剂盒(货号556547)，按照试剂盒说明书进行操作，使用1×binding buffer重悬细胞，5μL FITC加5μL PI避光染色15min，上机检测荧光强度，并进行统计学分析。
结果显示，在加药吉非替尼终浓度0μM,2μM,4μM时，siRNA2 MGST1组细胞凋亡率为分别是(7.09±2.4)％，(14.38±2.6)％，(24.65±3.7)％，明显高于siRNA NC组的凋亡率(4.69±2.1)％，(9.62±3.2)％，(17.25±3.4)％，结果表明抑制MGST1表达导致肝癌细胞对吉非替尼药物敏感性增加，提高吉非替尼药物对肝癌的治疗效果。
实施例4.抑制MGST1表达提高肝癌耐药细胞对5-氟尿嘧啶药物敏感性
1.siRNA设计合成
根据MGST1基因序列由上海吉玛制药技术有限公司设计合成siRNA2，并同时提供与MGST1基因无序列同源性的阴性对照siRNA(siRNA NC)。
siRNA NC
正义链:5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'
反义链:5'-ACGUGACACGUUCGGAGAATT-3'
siRNA2 MGST1
正义链:5'-CCACUGUUCUGUGCAAUGATT-3'
反义链:5'-AAUACAGGAGGCCAAUUCCTT-3'；
2.细胞转染和收集
在10cm培养皿中培养肝癌耐药细胞Bel-7402-5-氟尿嘧啶细胞，对数生长期时加入0.5mL胰酶消化2min，加入6Mlrpmi 1640培养基吹打细胞得到细胞悬液，计数稀释后，六孔板每孔加2ml细胞液(含104个细胞)。48h后，细胞贴壁生长良好时，进行细胞转染。采用转染试剂盒LipofectamineRNAiMAX进行转染，对照组转染siRNA NC，实验组转染siRNA2MGST1，实验操作及实际用量参照转染试剂盒说明书即可。继续培养24h后分别加加5-氟尿嘧啶0μM,10μM,20μM,继续培养细胞48h，观察细胞生长状态。
3.细胞凋亡检测
加入100μL胰酶消化2min后收集细胞，3mL PBS清洗3次，离心收集细胞沉淀，采用美国BD公司细胞凋亡检测试剂盒(货号556547)，按照试剂盒说明书进行操作，使用1×binding buffer重悬细胞，5μL FITC加5μL PI避光染色15min，上机检测荧光强度，并进行统计学分析。
结果显示，在5-氟尿嘧啶药物终浓度为0μM,10μM,20μM时，siRNA2FOLR1组细胞凋亡率为(7.13±1.2)％，(18.95±2.9)％，(34.26±4.7)％，明显高于siRNA NC组的凋亡率(3.96±1.8)％，(12.54±3.1)％，(19.76±3.6)％，结果表明抑制MGST1表达提高肝癌耐药细胞5-氟尿嘧啶药物敏感性，提高5-氟尿嘧啶药物对肝癌的治疗效果。
综上所述，通过抑制肝癌耐药细胞中MGST1的表达，可以增强肝癌的化疗治疗效果。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 中国科学院大连化学物理研究所
<120> MGST1抑制剂的应用及治疗肝癌药物混合物
<160> 6
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 21
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
gcuuaugagu acugcaacut t 21
<210> 2
<211> 21
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
aguugcagua cucauaagct t 21
<210> 3
<211> 21
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
aguugcagua cucauaagct t 21
<210> 4
<211> 21
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
aauacaggag gccaauucct t 21
<210> 5
<211> 21
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
ggauauggag uuacucuuut t 21
<210> 6
<211> 21
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
aaagaguaac uccauaucct t 21

Claims (10)

1.MGST1抑制剂的应用，其特征在于：MGST1抑制剂在制备降低或消除肝癌药物治疗中的耐药性的药物中的用途。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述抑制剂选自：针对MGST1蛋白抑制的抗MGST1的抗体、针对MGST1编码序列的RNA干扰分子或反义寡核苷酸中的一种或两种以上。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肝癌药物为顺铂、吉非替尼、阿霉素、紫杉醇、5-氟尿嘧啶、索拉非尼、西地尼布、帕唑帕尼、阿西替尼、瓦他拉尼、司马沙尼、舒尼替尼、雷莫芦单抗及阿柏西普中的一种或两种以上。
4.如权利要求1或3所述的应用，其特征在于：所述的肝癌包括原发性肝癌和继发性肝癌中的一种或者两种组合；或原发性肝癌或继发性肝癌的离体培养细胞中的一种或者两种。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于：其中原发性肝癌包括：肝细胞肝癌、肝内胆管癌，肝细胞癌混合肝内胆管癌中的一种或者两种；继发性肝癌包括：肠癌、胰腺癌转移胆囊癌、胆管癌中的一种或者两种。
6.如权利要求2所述的应用，其特征在于：抗MGST1的抗体包括：对MGST1或其活性片段具有免疫活性，能够特异性识别并结合MGST1的氨基酸序列或其空间结构的单克隆抗体、多克隆抗体和具有免疫活性的抗体片段中的一种或两种以上；所述的针对MGST1编码序列的RNA干扰分子选自：shRNA、siRNA、miRNA、dsRNA中的至少一种或两种以上；所述的反义寡核苷酸为：特异地与MGST1基因DNA或mRNA结合而抑制MGST1基因表达，在基因水平调控的分子药物，包括人工合成或体内表达的反义DNA和反义RNA中的一种或两种以上。
7.如权利要求1或6所述的应用，其特征在于：所述抑制剂为针对MGST1编码序列的RNA干扰分子，RNA干扰分子siRNA的优选序列为下述中的一种或两种以上，
siRNA1，正义链:5'-GCUUAUGAGUACUGCAACUTT-3'和反义链:5'-AGUUGCAGUACUCAUAAGCTT-3'；
siRNA2,正义链:5'-CCACUGUUCUGUGCAAUGATT-3'和反义链:5'-AAUACAGGAGGCCAAUUCCTT-3'；
siRNA3,正义链:5'-GGAUAUGGAGUUACUCUUUTT-3'和反义链:5'-AAAGAGUAACUCCAUAUCCTT-3'。
8.一种治疗肝癌药物混合物，包含MGST1抑制剂，以及肝癌药物或肝癌药物活性成份中的一种或二种以上。
9.如权利要求8所述的治疗肝癌药物混合物，所述MGST1抑制剂为权利要求2、6或7中所述MGST1抑制剂中的一种或二种以上。
10.如权利要求8所述的治疗肝癌药物混合物，所述肝癌药物为权利要求3中所述肝癌药物中的一种或二种以上。
CN202011339445.4A 2020-11-25 2020-11-25 Mgst1抑制剂的应用及治疗肝癌药物混合物 Pending CN114533878A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011339445.4A CN114533878A (zh) 2020-11-25 2020-11-25 Mgst1抑制剂的应用及治疗肝癌药物混合物

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011339445.4A CN114533878A (zh) 2020-11-25 2020-11-25 Mgst1抑制剂的应用及治疗肝癌药物混合物

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114533878A true CN114533878A (zh) 2022-05-27

Family

ID=81660631

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011339445.4A Pending CN114533878A (zh) 2020-11-25 2020-11-25 Mgst1抑制剂的应用及治疗肝癌药物混合物

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114533878A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115992244A (zh) * 2022-11-28 2023-04-21 武汉大学 Sart1在肝癌治疗中的作用
CN116735875A (zh) * 2022-07-14 2023-09-12 宁波大学 一种蛋白质inf2在制备肝癌诊断标志物中的应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107384962A (zh) * 2017-07-11 2017-11-24 信雅生物科技（苏州）有限公司 Mgst1 基因在肺腺癌细胞中增殖与凋亡中的应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107384962A (zh) * 2017-07-11 2017-11-24 信雅生物科技（苏州）有限公司 Mgst1 基因在肺腺癌细胞中增殖与凋亡中的应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
蔡培等: "微粒体谷胱甘肽S转移酶1过度表达促进肝癌发生发展", 《基础医学与临床》 *
陈哲等: "大鼠微粒体谷胱甘肽S-转移酶1对苯丁酸氮芥体外致肿瘤细胞毒性的影响", 《浙江大学学报(医学版)》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116735875A (zh) * 2022-07-14 2023-09-12 宁波大学 一种蛋白质inf2在制备肝癌诊断标志物中的应用
CN115992244A (zh) * 2022-11-28 2023-04-21 武汉大学 Sart1在肝癌治疗中的作用
CN115992244B (zh) * 2022-11-28 2024-06-04 武汉大学 Sart1在肝癌治疗中的作用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Yoshida et al. Clinical and functional significance of intracellular and extracellular microRNA-25-3p in osteosarcoma
CN109797151B (zh) Circ-CDH1抑制剂的应用
Nara et al. Silencing of MYCN by RNA interference induces growth inhibition, apoptotic activity and cell differentiation in a neuroblastoma cell line with MYCN amplification
US9322016B2 (en) MicroRNA-based methods and assays for osteosarcoma
EP2994155B1 (en) Targeting the egfr-sglt1 interaction for cancer therapy
CA2609467A1 (en) Compositions and methods for the treatment or prevention of chemoresistant neoplasia
CN114533878A (zh) Mgst1抑制剂的应用及治疗肝癌药物混合物
Liang et al. Linc00467 promotes invasion and inhibits apoptosis of head and neck squamous cell carcinoma by regulating miR-1285-3p/TFAP2A
Lu et al. Chondrocyte-derived exosomal miR-195 inhibits osteosarcoma cell proliferation and anti-apoptotic by targeting KIF4A in vitro and in vivo
Yu et al. B4GALNT2 Gene Promotes Proliferation, and Invasiveness and Migration Abilities of Model Triple Negative Breast Cancer (TNBC) Cells by Interacting With HLA-B Protein
Wu et al. Long non-coding RNA SNHG1 promotes fibroblast-to-myofibroblast transition during the development of pulmonary fibrosis induced by silica particles exposure
CN112516317B (zh) 一种预防和治疗癌症的药物组合物及其应用
Cheng et al. Gankyrin promotes osteosarcoma tumorigenesis by forming a positive feedback loop with YAP
CN111218510A (zh) Smurf1基因、表达产物及其衍生物或其抑制剂在结直肠癌化疗中的应用
CN116270710A (zh) circRBM33作为靶点在前列腺癌诊断和治疗中的应用
CN106636368B (zh) miR-130a在卵巢癌的诊断、治疗及预后中的应用
CN113967261B (zh) Folr1抑制剂的应用和治疗肝癌药物混合物
Feng et al. CircGFPT1 regulates the growth and apoptosis of esophageal squamous cell carcinoma through miR-142-5p/HAX1 axis
WO2006128063A2 (en) Methods and compositions for inhibiting glioma growth
CN116769828B (zh) 调控nrf2转录因子活性的方法
CN118203662A (zh) 一种肝癌药物的辅助治疗药物及应用和治疗肝癌药物混合物
CN116059238B (zh) circ0000195在肝癌治疗、检测和预后中的应用
CN111394352B (zh) PDCD11-shRNA及其在治疗结直肠癌中的应用
CN116139277A (zh) 肝癌药物的辅助治疗药物及应用和治疗肝癌药物混合物
CN107723369B (zh) Setd1b蛋白及其编码基因在肝癌诊断治疗中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20220527