CN114532353A - 一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法 - Google Patents
一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114532353A CN114532353A CN202210051506.XA CN202210051506A CN114532353A CN 114532353 A CN114532353 A CN 114532353A CN 202210051506 A CN202210051506 A CN 202210051506A CN 114532353 A CN114532353 A CN 114532353A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- phosphatidylethanolamine
- phosphatidylcholine
- spraying
- temperature resistance
- plant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000005507 spraying Methods 0.000 title claims abstract description 95
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 title claims abstract description 66
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 39
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 120
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 claims abstract description 120
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims abstract description 118
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 claims description 38
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 36
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 29
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 claims description 28
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 18
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 16
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims description 14
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 11
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 10
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 9
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 8
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 8
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 claims description 3
- 235000010799 Cucumis sativus var sativus Nutrition 0.000 abstract description 20
- 230000002595 cold damage Effects 0.000 abstract description 3
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 abstract description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 abstract description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 2
- 238000012272 crop production Methods 0.000 abstract description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 abstract description 2
- 244000299906 Cucumis sativus var. sativus Species 0.000 abstract 1
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 description 20
- WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N Malondialdehyde Chemical compound O=CCC=O WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 229940118019 malondialdehyde Drugs 0.000 description 16
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 9
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 9
- 229960001701 chloroform Drugs 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 2-thiobarbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=S)N1 RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLIDBLDQVAYHNE-YKALOCIXSA-N Abscisic acid Natural products OC(=O)/C=C(/C)\C=C\[C@@]1(O)C(C)=CC(=O)CC1(C)C JLIDBLDQVAYHNE-YKALOCIXSA-N 0.000 description 1
- IXVMHGVQKLDRKH-VRESXRICSA-N Brassinolide Natural products O=C1OC[C@@H]2[C@@H]3[C@@](C)([C@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C(C)C)C)C)CC3)CC[C@@H]2[C@]2(C)[C@@H]1C[C@H](O)[C@H](O)C2 IXVMHGVQKLDRKH-VRESXRICSA-N 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000009084 Cold Injury Diseases 0.000 description 1
- 235000009849 Cucumis sativus Nutrition 0.000 description 1
- 239000006004 Quartz sand Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- HLVPIMVSSMJFPS-UHFFFAOYSA-N abscisic acid beta-D-glucopyranosyl ester Natural products O1C(CO)C(O)C(O)C(O)C1OC(=O)C=C(C)C=CC1(O)C(C)=CC(=O)CC1(C)C HLVPIMVSSMJFPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- IXVMHGVQKLDRKH-KNBKMWSGSA-N brassinolide Chemical compound C1OC(=O)[C@H]2C[C@H](O)[C@H](O)C[C@]2(C)[C@H]2CC[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]3[C@@H]21 IXVMHGVQKLDRKH-KNBKMWSGSA-N 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 239000002895 emetic Substances 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 239000010871 livestock manure Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 1
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 1
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 1
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003716 rejuvenation Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 description 1
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 description 1
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N57/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic phosphorus compounds
- A01N57/10—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic phosphorus compounds having phosphorus-to-oxygen bonds or phosphorus-to-sulfur bonds
- A01N57/12—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic phosphorus compounds having phosphorus-to-oxygen bonds or phosphorus-to-sulfur bonds containing acyclic or cycloaliphatic radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G13/00—Protecting plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G22/00—Cultivation of specific crops or plants not otherwise provided for
- A01G22/05—Fruit crops, e.g. strawberries, tomatoes or cucumbers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G7/00—Botany in general
- A01G7/06—Treatment of growing trees or plants, e.g. for preventing decay of wood, for tingeing flowers or wood, for prolonging the life of plants
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Forests & Forestry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Botany (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Ecology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Cultivation Of Plants (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
本发明涉及一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法。具体的是通过外源喷施一定比例磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)来提高黄瓜幼苗耐低温能力的方法。该方法通过在植物幼苗叶面喷施脂质代谢通路上的终产物溶液，即适宜磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺(PC/PE)比例的溶液，以提高植物幼苗的耐低温能力，尤其为解决我国北方冬春季作物生产设施易遭遇低温冷害的问题提供了方法。并且叶面喷施能使磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺通过叶片直接进入植物，参与代谢过程。速度快，作用强，用量少，效率高。
Description
技术领域
本发明涉及植株耐低温处理技术领域，具体说是一种通过外源喷施一定比例磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)来提高植物幼苗耐低温能力的方法。
背景技术
植物幼苗在16℃以下的低温胁迫中尤其敏感，轻则叶片变黄坏死，重则植株停止生长，进而影响作物产量和品质，降低经济效益。如果缺乏对生产设施的有力管控，低温是植物幼苗冬季正常生长的主要限制因子。
低温驯化、嫁接、添加抗冻外源物质等措施均能够提高作物的耐低温能力。但嫁接费工费时，且在管控不良的条件下嫁接苗易死亡。相比之下，施加外源物质更方便快捷。例如，在低温胁迫前喷施ABA、水杨酸、油菜素内酯、多胺可以减轻冷害症状；生物菌肥、激素等外源物质添加能够提高植物幼苗低温抗性。另外有研究表明，低温下嫁接植物幼苗的差异表达基因和差异代谢物富集在脂质代谢通路，因此添加代谢通路上的中间产物对植物幼苗耐低温能力有一定影响，但是中间产物的用量较多，效率较低。
发明内容
针对现有技术中存在的缺陷，本发明的目的在于提供一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法，具体的是通过外源喷施一定比例磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)来提高植物幼苗耐低温能力的方法。该方法通过在植物幼苗叶面喷施脂质代谢通路上的终产物溶液，即适宜磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺比例的溶液，以提高植物幼苗的耐低温能力，尤其为解决我国北方冬春季作物生产设施易遭遇低温冷害的问题提供了方法。并且叶面喷施能使磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺通过叶片直接进入植物，参与代谢过程。速度快，作用强，用量少，效率高。
为达到以上目的，本发明采取的技术方案是：
一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一、配制磷脂酰胆碱母液：称取磷脂酰胆碱，溶于溶剂I中，配制成磷脂酰胆碱母液；
步骤二、配制磷脂酰乙醇胺母液：称取磷脂酰乙醇胺，溶于溶剂II中，配制成磷脂酰乙醇胺母液；
步骤三、配制磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液：量取磷脂酰胆碱母液和磷脂酰乙醇胺母液进行混合，向混合液中加入表面活性剂和溶剂III，配制成磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液；
步骤四、使用步骤三配制成的喷施液，对植物幼苗植株进行叶面喷施。
进一步，所述溶剂I包括甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇，本法选用乙醇；溶剂II包括三氯甲烷、乙醚；溶剂III包括蒸馏水、去离子水，表面活性剂包括吐温、甘油。
进一步，所述磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液中磷脂酰胆碱的浓度为60-100μM，磷脂酰乙醇胺的浓度为40-80μM，表面活性剂的浓度为1-20mL/L。
进一步，所述磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液中磷脂酰胆碱的浓度为60-80μM，磷脂酰乙醇胺的浓度为40-60μM，表面活性剂的浓度为5-10mL/L。
进一步，所述步骤四中叶面喷施作业方法为：
每天1-4次，优选为每天2-3次；间隔6-12小时，优选为8-12小时；共7-11次，优选为9-11次；每次每植株喷施0.5-2mL，优选为1-2mL。
附图说明
本发明有如下附图：
图1不同时间低温处理外源喷施不同浓度PC和PE的黄瓜幼苗表型变化；
图2黄瓜叶片外源PC和PE物质喷施低温处理后相对电解质渗透率；
图3黄瓜叶片外源PC/PE喷施低温处理后表型和生理指标变化。
具体实施方式
以下结合附图对本发明作进一步详细说明。
本发明所述的一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法，包括如下步骤：
配制磷脂酰胆碱母液：称取磷脂酰胆碱固体，溶于溶剂I中，配制成磷脂酰胆碱母液；溶剂I包括甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇。
配制磷脂酰乙醇胺母液，称取磷脂酰乙醇胺固体，溶于溶剂II中，配制磷脂酰乙醇胺母液；溶剂II包括三氯甲烷、乙醚。
配制磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液：将磷脂酰胆碱母液和磷脂酰乙醇胺母液混合，加入表面活性剂和溶剂III，得到磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液；表面活性剂包括吐温、甘油，溶剂III包括蒸馏水、去离子水。
将喷施液喷施至植物幼苗的植株子叶叶面和除新叶、生长点外的所有真叶叶面，喷施作业方法为：每天1-4次，优选为每天2-3次；间隔6-12小时，优选为8-12小时；共7-11次，优选为9-11次；每次每植株喷施0.5-2mL，优选为1-2mL。
进一步，以‘新泰密刺’品种黄瓜为例，结合实施例具体说明使用本发明的方法对上述黄瓜幼苗进行处理后，幼苗耐低温能力得到明显提升的技术效果。
选取‘新泰密刺’黄瓜种子放入56℃温水中玻璃棒搅拌15min，换上25℃水常温浸泡4-6h后放置28±2℃黑暗条件下催芽，种子露白1-2mm后播至50孔穴盘(54cm×宽28cm，V草炭∶V蛭石∶V珍珠岩＝2∶1∶1混合基质)中，放置育苗设施(日光温室或塑料大棚等)中进行正常幼苗培育。培育得到的幼苗经筛选后使用不同配比的磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺复合喷施液进行喷施作业。
实施例1：
步骤一、配制磷脂酰胆碱母液：称取磷脂酰胆碱，溶于甲醇中，配制成磷脂酰胆碱母液；
步骤二、配制磷脂酰乙醇胺母液：称取磷脂酰乙醇胺，溶于溶剂乙醚中，配制成磷脂酰乙醇胺母液；
步骤三、配制磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液：按比例量取磷脂酰胆碱母液和磷脂酰乙醇胺母液混合，向混合液中加入甘油和去离子水，配制成磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液，其中磷脂酰胆碱的浓度为75μM，磷脂酰乙醇胺的浓度为80μM，甘油的浓度为15mL/L；
步骤四、使用步骤三配制成的喷施液，对植物幼苗植株进行叶面喷施，喷施作业方法为：每天3次，间隔8小时，共9次，每次每植株喷施1.5mL。
实施例2：
步骤一、配制磷脂酰胆碱母液：称取磷脂酰胆碱，溶于甲醇中，配制成磷脂酰胆碱母液；
步骤二、配制磷脂酰乙醇胺母液：称取磷脂酰乙醇胺，溶于溶剂乙醚中，配制成磷脂酰乙醇胺母液；
步骤三、配制磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液：按比例量取磷脂酰胆碱母液和磷脂酰乙醇胺母液混合，向混合液中加入甘油和蒸馏水，配制成磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液，其中磷脂酰胆碱的浓度为100μM，磷脂酰乙醇胺的浓度为50μM，甘油的浓度为1mL/L；
步骤四、使用步骤三配制成的喷施液，对植物幼苗植株进行叶面喷施，喷施作业方法为：每天2次，间隔12小时，共11次，每次每植株喷施1mL。
实施例3
步骤一、配制磷脂酰胆碱母液：称取磷脂酰胆碱，溶于甲醇中，配制成磷脂酰胆碱母液；
步骤二、配制磷脂酰乙醇胺母液：称取磷脂酰乙醇胺，溶于溶剂乙醚中，配制成磷脂酰乙醇胺母液；
步骤三、配制磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液：按比例量取磷脂酰胆碱母液和磷脂酰乙醇胺母液混合，向混合液中加入吐温和去离子水，配制成磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液，其中磷脂酰胆碱的浓度为80μM，磷脂酰乙醇胺的浓度为60μM，甘油的浓度为1mL/L；
步骤四、使用步骤三配制成的喷施液，对植物幼苗植株进行叶面喷施，喷施作业方法为：每天4次，间隔6小时，共7次，每次每植株喷施0.5mL。
实施例4
步骤一、配制磷脂酰胆碱母液：称取磷脂酰胆碱，溶于甲醇中，配制成磷脂酰胆碱母液；
步骤二、配制磷脂酰乙醇胺母液：称取磷脂酰乙醇胺，溶于溶剂乙醚中，配制成磷脂酰乙醇胺母液；
步骤三、配制磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液：按比例量取磷脂酰胆碱母液和磷脂酰乙醇胺母液混合，向混合液中加入吐温和去离子水，配制成磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液，其中磷脂酰胆碱的浓度为60μM，磷脂酰乙醇胺的浓度为55μM，吐温的浓度为5mL/L；
步骤四、使用步骤三配制成的喷施液，对植物幼苗植株进行叶面喷施，喷施作业方法为：每天2次，间隔12小时，共10次，每次每植株喷施2mL。
实施例5
步骤一、配制磷脂酰胆碱母液：称取磷脂酰胆碱，溶于甲醇中，配制成磷脂酰胆碱母液；
步骤二、配制磷脂酰乙醇胺母液：称取磷脂酰乙醇胺，溶于溶剂乙醚中，配制成磷脂酰乙醇胺母液；
步骤三、配制磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液：按比例量取磷脂酰胆碱母液和磷脂酰乙醇胺母液混合，向混合液中加入吐温和蒸馏水，配制成磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液，其中磷脂酰胆碱的浓度为90μM，磷脂酰乙醇胺的浓度为70μM，吐温的浓度为20mL/L；
步骤四、使用步骤三配制成的喷施液，对植物幼苗植株进行叶面喷施，喷施作业方法为：每天3次，间隔6小时，共7次，每次每植株喷施0.5mL。
实施例6
步骤一、配制磷脂酰胆碱母液：称取磷脂酰胆碱，溶于甲醇中，配制成磷脂酰胆碱母液；
步骤二、配制磷脂酰乙醇胺母液：称取磷脂酰乙醇胺，溶于溶剂乙醚中，配制成磷脂酰乙醇胺母液；
步骤三、配制磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液：按比例量取磷脂酰胆碱母液和磷脂酰乙醇胺母液混合，向混合液中加入吐温和去离子水，配制成磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液，其中磷脂酰胆碱的浓度为100μM，磷脂酰乙醇胺的浓度为45μM，甘油的浓度为20mL/L；
步骤四、使用步骤三配制成的喷施液，对植物幼苗植株进行叶面喷施，喷施作业方法为：每天4次，间隔6小时，共10次，每次每植株喷施0.5mL。
实施例7
步骤一、配制磷脂酰胆碱母液：称取磷脂酰胆碱，溶于甲醇中，配制成磷脂酰胆碱母液；
步骤二、配制磷脂酰乙醇胺母液：称取磷脂酰乙醇胺，溶于溶剂乙醚中，配制成磷脂酰乙醇胺母液；
步骤三、配制磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液：按比例量取磷脂酰胆碱母液和磷脂酰乙醇胺母液混合，向混合液中加入吐温和蒸馏水，配制成磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液，其中磷脂酰胆碱的浓度为80μM，磷脂酰乙醇胺的浓度为40μM，吐温的浓度为10mL/L；
步骤四、使用步骤三配制成的喷施液，对植物幼苗植株进行叶面喷施，喷施作业方法为：每天2次，间隔8小时，共9次，每次每植株喷施1mL。
实施例8
步骤一、配制磷脂酰胆碱母液：称取磷脂酰胆碱，溶于甲醇中，配制成磷脂酰胆碱母液；
步骤二、配制磷脂酰乙醇胺母液：称取磷脂酰乙醇胺，溶于溶剂乙醚中，配制成磷脂酰乙醇胺母液；
步骤三、配制磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液：按比例量取磷脂酰胆碱母液和磷脂酰乙醇胺母液混合，向混合液中加入吐温和去离子水，配制成磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液，其中磷脂酰胆碱的浓度为75μM，磷脂酰乙醇胺的浓度为60μM，吐温的浓度为15mL/L；
步骤四、使用步骤三配制成的喷施液，对植物幼苗植株进行叶面喷施，喷施作业方法为：每天2次，间隔11小时，共8次，每次每植株喷施0.5mL。
耐低温试验及结果表征：
1.电解质渗透率(EC)和丙二醛(MDA)含量测定
EC值测定：
EC值是一个对低温比较敏感的指标，而且简便易测，能够表征细胞膜的完整性，因此测定EC已成为抗寒力测定常规方法。
用钻孔器钻取9片叶片并将其置于温度为28℃的蒸馏水中。测量蒸馏水的电导率，记为EC0。震荡2h后，测定叶溶液的电导率，记为EC1。叶片溶液在95℃水浴中煮15min，冷却至室温后测量溶液的电导率，记为EC2。EC＝[(EC1-EC0)/(EC2-EC0)]*100％。
MDA含量测定：
MDA是膜脂过氧化的产物，在遭受低温时会在细胞中积累，MDA量的增多会导致细胞受到毒害；在MDA积累的同时细胞内的另一代谢产物活性氧的含量也会随着胁迫时间的延长而上升，含量过多时首先会损伤细胞膜系统，严重时甚至导致细胞的死亡。
取叶片1g，加入少量石英砂和10％TCA 2mL，研磨匀浆，再加8mL 10％TCA进一步研磨，匀浆以4000r/min离心10min，上清液为MDA提取液。在试管中加入提取液2mL，对照管加蒸馏水2mL，然后各管再加入2mL 0.6％硫代巴比妥酸，摇匀，置沸水浴中反应15min，迅速冷却后4000r/min离心10min，取上清液分别在450nm、532nm、600nm波长下测定消光度。结果以mmol/g表示。
2.耐低温试验结果
(1)经单独组分喷施液喷施幼苗低温处理过程表形变化及EC值
黄瓜幼苗长至两叶一心时，用对应浓度的喷施液对植株子叶和除新叶、生长点外的所有真叶进行叶面喷施。每天2次，间隔8h，共9次，每次每植株喷施1mL。喷施结束后置于正常培养条件下缓苗12h，随后放置光照培养箱中进行4℃低温处理。观测磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺单独喷施植株0h、6h、12h和24h低温胁迫后的表型变化(图1)。PC溶于乙醇，以400μL乙醇溶于加入吐温的水中作为该组的对照；PE溶于三氯甲烷，以200μL三氯甲烷溶于加入吐温的水中作为该组的对照。
取经过上述喷施作业且经低温处理24h的黄瓜幼苗第一真叶进行EC值测定，每个喷施浓度取三个生物学重复，每个重复包含3-6棵苗，使用t-test对数值进行检测。结果如图2所示(图中“*”代表p＜0.05)。
浓度筛选试验发现：与清水对照相比，80μM的磷脂酰胆碱(溶于乙醇)喷施下黄瓜叶片的相对电解质渗透率较低但无显著性差异(图1，图2)，表明磷脂酰胆碱的喷施对黄瓜抗低温性的调控效果并不显著。黄瓜叶片的磷脂酰乙醇胺物质(溶于三氯甲烷)喷施结果表明磷脂酰乙醇胺的喷施同样对黄瓜抗低温性的调控效果不显著，其中80μM的磷脂酰乙醇胺喷施后黄瓜叶片的相对电解质渗透率显著高于三氯甲烷对照。
(2)经磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺配比喷施液喷施幼苗的耐低温效果鉴定
黄瓜幼苗长至两叶一心时，用对应浓度的喷施液对植株子叶和除新叶、生长点外的所有真叶进行叶面喷施。每天2次，间隔8h，共9次，每次每植株喷施1mL。喷施结束后将黄瓜幼苗置于25℃正常培养条件下缓苗12h，随后放置光照培养箱中进行4℃低温处理。观测PC：PE配比液喷施植株0h、6h、12h低温胁迫后的表型变化，并测定12h低温处理后的EC值和MDA含量。将不同配比喷施液的EC值和MDA含量与对照相比，低于对照的即为能够提高黄瓜幼苗耐低温能力。设置两组对照：以磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺配比为80μM∶80μM中所含乙醇和三氯甲烷的量为对照1；以磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺配比为80μM∶0μM中所含乙醇和三氯甲烷的量为对照2。
如图3所示(图中“*”代表p＜0.05，“**”代表p＜0.01，“***”代表p＜0.001)，EC值和MDA含量结果具有一致性，80μM∶40μM配比喷施液处理后的植株两项数值均表现为最低，且低于对照。单独喷施80μM的磷脂酰胆碱40μM的磷脂酰乙醇胺时，相对电解质渗透率仅低于对照，但不存在显著性差异。同时喷施两种物质，且配比为80μM∶40μM时，黄瓜幼苗经12h低温处理后相对电解质渗透率与对照2间存在显著性差异。不同配比喷施处理后的植株经12h低温处理后叶片中MDA含量均与对照2存在显著差异，80μM∶0μM、80μM∶40μM这两种配比与对照1也存在显著差异。80μM∶40μM、80μM∶0μM、80μM∶80μM的EC和MDA含量依次上升，但均低于对照1和2。对前期筛选出来磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺适宜浓度进行组合喷施，发现低温处理后与对照组相比，磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺(80μmol/L∶40μmol/L)组合降低了黄瓜叶片的相对电解质渗透率和MDA含量，相比对照1该组合相对电解质渗透率和MDA含量分别下降了34.33％和55.79％，相比对照2该组合相对电解质渗透率和MDA含量分别下降了49.27％和69.76％。
本说明书中未作详细描述的内容属于本领域专业技术人员公知的现有技术。
Claims (6)
1.一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一、配制磷脂酰胆碱母液：称取磷脂酰胆碱，溶于溶剂I中，配制成磷脂酰胆碱母液；
步骤二、配制磷脂酰乙醇胺母液：称取磷脂酰乙醇胺，溶于溶剂II中，配制成磷脂酰乙醇胺母液；
步骤三、配制磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液：量取磷脂酰胆碱母液和磷脂酰乙醇胺母液进行混合，向混合液中加入表面活性剂和溶剂III，配制成磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液；
步骤四、使用步骤三配制成的喷施液，对植物幼苗植株进行叶面喷施。
2.如权利要求1所述的一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法，其特征在于：所述溶剂I包括甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇；溶剂II包括三氯甲烷、乙醚；溶剂III包括蒸馏水、去离子水，表面活性剂包括吐温、甘油。
3.如权利要求1所述的一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法，其特征在于：所述磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液中磷脂酰胆碱的浓度为60-100μM，磷脂酰乙醇胺的浓度为40-80μM，表面活性剂的浓度为1-20mL/L。
4.如权利要求3所述的一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法，其特征在于：所述磷脂酰胆碱/磷脂酰乙醇胺喷施液中磷脂酰胆碱的浓度为60-80μM，磷脂酰乙醇胺的浓度为40-60μM，表面活性剂的浓度为5-10mL/L。
5.如权利要求1-4任意一项所述的一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法，其特征在于：所述步骤四中叶面喷施作业方法为：
每天2-4次，间隔6-12小时，共7-11次，每次每植株喷施0.5-2mL。
6.如权利要求5所述的一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法，其特征在于：所述步骤四中叶面喷施作业方法为：
每天2-3次，间隔8-12小时，共9-11次，每次每植株喷施1-2mL。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210051506.XA CN114532353A (zh) | 2022-01-17 | 2022-01-17 | 一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210051506.XA CN114532353A (zh) | 2022-01-17 | 2022-01-17 | 一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114532353A true CN114532353A (zh) | 2022-05-27 |
Family
ID=81671227
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210051506.XA Pending CN114532353A (zh) | 2022-01-17 | 2022-01-17 | 一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114532353A (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4681617A (en) * | 1982-07-09 | 1987-07-21 | A. Nattermann & Cie, Gmbh | Phospholipid compositions and their use in plant protection spray mixtures |
| US20030064893A1 (en) * | 2000-03-29 | 2003-04-03 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Methods for enhancing plant health, protecting plants from biotic and abiotic stress related injuries and enhancing the recovery of plants injured as a result of such stresses |
| CN111518786A (zh) * | 2020-03-18 | 2020-08-11 | 中国农业大学 | 一种番茄SlCK1基因调控番茄低温抗性的方法 |
-
2022
- 2022-01-17 CN CN202210051506.XA patent/CN114532353A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4681617A (en) * | 1982-07-09 | 1987-07-21 | A. Nattermann & Cie, Gmbh | Phospholipid compositions and their use in plant protection spray mixtures |
| US20030064893A1 (en) * | 2000-03-29 | 2003-04-03 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Methods for enhancing plant health, protecting plants from biotic and abiotic stress related injuries and enhancing the recovery of plants injured as a result of such stresses |
| CN111518786A (zh) * | 2020-03-18 | 2020-08-11 | 中国农业大学 | 一种番茄SlCK1基因调控番茄低温抗性的方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 刘瑞芬 等: "差异显示法克隆与小麦低温诱导相关的磷脂酰乙醇胺结合蛋白基因", 《基因组学与应用生物学》 * |
| 李美如 等: "植物细胞中的抗寒物质及其与植物抗冷性的关系", 《植物生理学通讯》 * |
| 赖孟洪，郭金铨，陈文涛: "外源胆固醇对水稻幼苗膜脂组成及抗冷力的影响", 《亚热带植物科学》 * |
| 马菁平等: "卵磷脂和氯化胆碱对玉米幼苗生长及抗冷性的影响", 《江苏农业科学》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106665224B (zh) | 一种通过改变根际氧环境减少稻田甲烷排放的方法 | |
| CN101717747A (zh) | 黄芩花粉离体萌发液体培养基及测定黄芩花粉活力的方法 | |
| Jayaprakash | Pollen germination in vitro | |
| CN108307823A (zh) | 一种利用蓝莓组培苗进行扦插繁殖的方法 | |
| CN112400630A (zh) | 一种降低低温胁迫后不结球白菜内h2o2和mda含量的方法 | |
| CN107529530A (zh) | 一种黄芪种植专用肥的制备方法及其应用 | |
| CN106069538A (zh) | 一种海芒果的扦插育苗方法 | |
| CN101347125A (zh) | 一种提高旱地小麦拔节期生长特性的植物生长调节剂 | |
| CN103749102A (zh) | 一种曼地亚红豆杉扦插育苗试验方法 | |
| CN114532353A (zh) | 一种外源喷施提高植物幼苗耐低温能力的方法 | |
| CN115504828B (zh) | 一种提高冬瓜耐低钙胁迫能力的方法 | |
| CN115490554B (zh) | 一种紫薇花期调控复合植物调节剂以及花期调控方法 | |
| Cockefair | The role of phosphorus in the metabolism of plants | |
| CN116267296A (zh) | 一种提高草坪草抗旱性的方法 | |
| CN115669408A (zh) | 一种利用水杨酸提高金线莲耐热性的方法 | |
| Borch et al. | Improved drought tolerance in marigold by manipulation of root growth with buffered-phosphorus nutrition | |
| CN109496824A (zh) | 收集栽培植物根际分泌物的水培装置及水培方法 | |
| CN109348952A (zh) | 一种提高旱柳耐盐性能的方法 | |
| Hidaka et al. | Spectrum conversion film for regulation of plant growth | |
| CN106900743A (zh) | 一种促进干旱胁迫下玉米生长的复合制剂 | |
| CN209572741U (zh) | 收集栽培植物根际分泌物的水培装置 | |
| Yachya et al. | Impact of IBA and Ethephon Combination on Root Biomass Production of Javanese Ginseng (Talinum paniculatum Gaertn) Cuttings under Aeroponic System | |
| CN113615691A (zh) | 一种植物抗冷剂及其制备方法和应用 | |
| JP4143721B2 (ja) | 津田カブの水耕栽培法 | |
| CN104663431A (zh) | 利川黄连地方良种选育方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220527 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |