CN114507279B - 一种抗氧化卵清蛋白肽的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抗氧化卵清蛋白肽的制备方法，本发明在现有的二次酶解基础上增加了一次酶解前处理，酶解结束后，经过滤除杂、脱色、过滤精制、除菌和干燥后即制备得到所述抗氧化卵清蛋白肽。测得本发明20.08mg/mL的卵清蛋白肽DPPH清除率为87.49％，有着较强的抗氧化能力。本发明解决了现有技术中卵清蛋白在受热膨胀后成团不易搅拌，从而影响后续收率的问题，同时制备的卵清蛋白肽具有较强的抗氧化能力。
Description
技术领域
本发明属于蛋白肽制备领域，尤其涉及一种抗氧化卵清蛋白肽的制备方法。
背景技术
我国是世界鸡蛋生产的第一大国，但蛋制品加工比例却不到1％，这种现状严重限制了我国蛋制品行业的发展。而鸡蛋中蛋清含量最高，占鸡蛋总重的63％，蛋清中蛋白含量约为10％，其中最主要的蛋白质便是卵清蛋白，含量约为54％，具有较高的营养价值及抗氧化、降血压、调节免疫等生理功能；可因其是一种过敏原，在日常食用和蛋制品加工中有一定的局限性，但其经酶解后得到的多肽产物不仅可抑制和清除人体内的自由基，且相比于药物来说更安全、无毒、无副作用；而且，其致敏性也会明显下降甚至消失，这大大提高了鸡蛋清的应用范围，适宜鸡蛋过敏人群和婴儿食用。现有工艺在制备卵清蛋白肽时，通常需要两次酶解，而在酶解时，卵清蛋白会受热膨胀，成团后不利于搅拌，从而影响后续的收率和产物的性质，因此，需要提供一种新的制备工艺来解决这个问题。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提出一种抗氧化卵清蛋白肽的制备方法，解决了现有技术中卵清蛋白在受热膨胀后成团不易搅拌，从而影响后续收率的问题。
本发明的目的通过以下技术方案实现：
一种抗氧化卵清蛋白肽的制备方法，包括如下步骤：
(1)将卵清蛋白粉分散于水中，得到分散液；调节分散液的pH为6.0～9.5，升高体系温度为50～60℃，加入枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶和枯草芽孢杆菌中性蛋白酶中的至少一种进行酶解反应，酶解过程中需要保持体系pH；
(2)步骤(1)所述酶解反应结束后，将体系pH调节至7.5～9.5，在70～100℃下保持0.5～3h；然后调节pH＝6.0～9.5，升温到50～60℃，加入枯草芽孢杆菌中性蛋白酶、枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶和胰蛋白酶中的至少一种进行酶解反应，酶解过程中需要保持体系pH，酶解结束后灭酶；
(3)调节体系pH＝6.0～8.0，升温至45～60℃，加入木瓜蛋白酶和风味蛋白酶中的至少一种进行酶解反应，酶解过程中需要保持体系pH，酶解结束后灭酶；最后经过滤除杂、脱色、过滤精制、除菌和干燥后即制备得到所述抗氧化卵清蛋白肽。
优选的，步骤(1)所述卵清蛋白与水的质量比为1：5～20。
优选的，步骤(1)所述分散液在调节pH之前进行胶体磨处理或均质机处理。
优选的，步骤(1)所述枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶和枯草芽孢杆菌中性蛋白酶中的至少一种的加入量占卵清蛋白粉的5wt‰～1wt％。
优选的，步骤(1)所述酶解反应的时间为0.5～2h。
优选的，步骤(2)所述枯草芽孢杆菌中性蛋白酶、枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶和胰蛋白酶中的至少一种的加入量占卵清蛋白粉的1wt‰～3wt％。
优选的，步骤(2)所述酶解反应的时间为2～6h。
优选的，步骤(2)所述灭酶的方式为：升温到90～95℃并保温15min。
优选的，步骤(3)所述木瓜蛋白酶和风味蛋白酶中的至少一种的加入量占卵清蛋白粉的0.5wt‰～5wt％。
优选的，步骤(3)所述酶解反应的时间为0.5～3h。
优选的，步骤(3)所述灭酶的方式为：升温到80～100℃并保温10～30min。
优选的，步骤(3)所述过滤除杂的方式为：在料液中加入占卵清蛋白粉1wt％～10wt％的珍珠岩、活性白土和硅藻土中的至少一种，采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到较为澄清的酶解液。
优选的，步骤(3)所述脱色的方式为：调节酶解液pH为4.0～6.0，升温至65～85℃，添加占卵清蛋白粉1wt％～10wt％的活性炭脱色0.5～2h。
优选的，步骤(3)所述过滤精制的方式为：采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到澄清的脱色液。
优选的，步骤(3)所述除菌的方式为：升温到100～105℃并保温20～30min；或者采用孔径为0.22μm的除菌过滤器过滤。
优选的，步骤(3)所述干燥的方式为：喷雾干燥，进风温度为150～220℃，出风温度为75～100℃。
优选的，步骤(3)所述除菌之前还设有浓缩处理，所述浓缩处理的方式为：经过300～500D的透析膜过滤，使过滤后的液体浓缩至过滤前体积的0.1～0.5倍。
与现有技术相比，本发明的有益效果包括：
(1)本发明在第二次酶解之前设置了第一次酶解，即加入枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶和枯草芽孢杆菌中性蛋白酶中的至少一种进行酶解反应，这一步的酶解是为第二次酶解变性降低粘度，这样一来，变性时卵清蛋白在受热膨胀后，就不易成团，从而受热更加均匀，制备出的产品品质也就更稳定。
(2)本发明公开了一种卵清蛋白肽的制备方法，大大提高了工业化生产率，可高达80％以上，制得到的卵清蛋白肽具有较好的稳定性，能完全溶解于水，经分子量检测，上线生产的卵清蛋白肽平均分子量为522D，分子量主要分布在1000D以下，归属于寡肽，在人体内不需消化即可直接吸收，在很大程度上保留了其营养成分，具有较高的生物活性，DPPH检测活性，以VC做参考，测定自由基清除率，其IC50为2.76mg/mL，20.08mg/mL的卵清蛋白肽DPPH清除率为87.49％，有着较强的抗氧化能力。
附图说明
图1为不同浓度卵清蛋白肽的DPPH清除率比例数据的柱状图。
图2为采用HPLC高效体积排阻色谱法对上线生产制得的卵清蛋白肽进行分子量测定得到的色谱图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种抗氧化卵清蛋白肽的制备方法，步骤如下：
(1)预处理：将卵清蛋白粉用5倍的去离子水进行均质机处理；
(2)一次酶解：用食品级氢氧化钠调pH到8.5～9.5，升温至60℃，添加占卵清蛋白粉5wt‰的枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶，过程中维持pH至8.0-9.0，酶解时间为1h；
(3)变性：将一次酶解液在pH＝7.5，T＝70℃条件下变性3h；
(4)二次酶解：用食品级盐酸调pH到6.5～7.5，升温到55℃，添加占卵清蛋白粉1wt％的枯草芽孢杆菌中性蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为4h，结束后升温到90～95℃灭酶15min；
(5)三次酶解：用食品级盐酸调pH到6.0-7.0，升温至45-50℃，添加占卵清蛋白粉0.5wt‰的木瓜蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为3h，结束后升温到80℃灭酶30min；
(6)过滤除杂：料液中加入占卵清蛋白粉1wt％-10wt％的珍珠岩或活性白土或硅藻土，采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到较为澄清的酶解液；
(7)脱色：用食品级盐酸调pH到4.0～5.0，升温至65～75℃，添加占卵清蛋白粉1wt％的活性炭脱色2h；
(8)过滤精制：采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到澄清的脱色液；
(9)除菌：升温到100℃并保温30min，进行灭菌；
(10)干燥：喷雾干燥，进风温度150～180℃，出风温度75～85℃。
实施例1所得的卵清蛋白肽的收率为66.91％，用液相色谱仪测得其分子量为735D。
实施例2
一种抗氧化卵清蛋白肽的制备方法，步骤如下：
(1)预处理：将卵清蛋白粉用10倍的去离子水进行均质机处理；
(2)一次酶解：用食品级氢氧化钠调pH到6.0～7.5，升温至55℃，添加占卵清蛋白粉1wt‰的枯草芽孢杆菌中性蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为1h；
(3)变性：将一次酶解液在pH＝8.0，T＝80℃条件下变性2h；
(4)二次酶解：用食品级氢氧化钠调pH到8.5～9.5，升温到60℃，添加占卵清蛋白粉1wt‰的枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为4h，结束后升温到90～95℃灭酶15min；
(5)三次酶解：用食品级盐酸调pH到6.0-7.0，升温至45-50℃，添加占卵清蛋白粉1wt‰的木瓜蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为2h，结束后升温到100℃灭酶10min；
(6)过滤除杂：料液中加入占卵清蛋白粉1wt％-10wt％的珍珠岩或活性白土或硅藻土，采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到较为澄清的酶解液；
(7)脱色：用食品级盐酸调pH到5.0～6.0，升温至75～85℃，添加占卵清蛋白粉5wt％的活性炭脱色2h；
(8)过滤精制：采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到澄清的脱色液；
(9)浓缩：经过500D的透析膜过滤，使过滤后的液体浓缩至过滤前体积的0.5倍；
(10)除菌：升温到105℃保温30min，进行灭菌；
(11)干燥：喷雾干燥，进风温度180～200℃，出风温度85～95℃。
实施例2所得的卵清蛋白肽的收率为71.44％，用液相色谱仪测得其分子量为683D。
实施例3
一种抗氧化卵清蛋白肽的制备方法，步骤如下：
(1)预处理：将卵清蛋白粉用15倍的去离子水进行均质机处理；
(2)一次酶解：用食品级氢氧化钠调pH到8.5～9.5，升温至58℃，添加占卵清蛋白粉8wt‰的枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为0.5h；
(3)变性：将一次酶解液在pH＝8.5，T＝90℃条件下变性1h；
(4)二次酶解：用食品级盐酸调pH到6.0～7.0，升温到55℃，添加占卵清蛋白粉3wt％的胰蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为3h，结束后升温到90～95℃灭酶15min；
(5)三次酶解：用食品级氢氧化钠调pH到7.0～7.5，升温至45-50℃，添加占卵清蛋白粉2wt‰的木瓜蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为1h，结束后升温到80℃灭酶30min；
(6)过滤除杂：料液中加入占卵清蛋白粉1wt％-10wt％的珍珠岩或活性白土或硅藻土，采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到较为澄清的酶解液；
(7)脱色：用食品级盐酸调pH到4.5～5.0，升温至80～85℃，添加占卵清蛋白粉7wt％的活性炭脱色1h；
(8)过滤精制：采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到澄清的脱色液；
(9)浓缩：经过300D的透析膜过滤，使过滤后的液体浓缩至过滤前体积的0.3倍；
(10)除菌：升温到100℃保温30min，进行灭菌；
(11)干燥：喷雾干燥，进风温度180～200℃，出风温度85～95℃。
实施例3所得的卵清蛋白肽的收率为75.34％，用液相色谱仪测得其分子量为643D。
实施例4
一种抗氧化卵清蛋白肽的制备方法，步骤如下：
(1)预处理：将卵清蛋白粉用20倍的去离子水进行均质机处理；
(2)一次酶解：用食品级氢氧化钠调pH到6.0～7.5，升温至55℃，添加占卵清蛋白粉8wt‰的枯草芽孢杆菌中性蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为2h；
(3)变性：将一次酶解液在pH＝9.0，T＝95℃条件下变性1h；
(4)二次酶解：用食品级盐酸调pH到6.0～7.0，升温到55℃，添加占卵清蛋白粉1wt％的胰蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为6h，结束后升温到90～95℃灭酶15min；
(5)三次酶解：用食品级氢氧化钠调pH到7.5～8.0，升温至55-60℃，添加占卵清蛋白粉1wt‰的风味蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为2h，结束后升温到80℃灭酶30min；
(6)过滤除杂：料液中加入占卵清蛋白粉1wt％-10wt％的珍珠岩或活性白土或硅藻土，采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到较为澄清的酶解液；
(7)脱色：用食品级盐酸调pH到4.5～5.0，升温至65～70℃，添加占卵清蛋白粉10wt％的活性炭脱色0.5h；
(8)过滤精制：采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到澄清的脱色液；
(9)浓缩：经过300D的透析膜过滤，使过滤后的液体浓缩至过滤前体积的0.1倍；
(10)除菌：采用孔径为0.22μm的除菌过滤器过滤；
(11)干燥：喷雾干燥，进风温度200～220℃，出风温度95～100℃。
实施例4所得的卵清蛋白肽的收率为74.77％，用液相色谱仪测得其分子量为630D。
实施例5
一种抗氧化卵清蛋白肽的制备方法，步骤如下：
(1)预处理：将卵清蛋白粉用15倍的去离子水进行均质机处理；
(2)一次酶解：用食品级氢氧化钠调pH到8.5～9.5，升温至58℃，添加占卵清蛋白粉8wt‰的枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为1h；
(3)变性：将一次酶解液在pH＝9.5，T＝100℃条件下变性0.5h；
(4)二次酶解：用食品级盐酸调pH到6.5～7.5，升温到55℃，添加占卵清蛋白粉8wt‰的枯草芽孢杆菌中性蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为5h，结束后升温到90～95℃灭酶15min；
(5)三次酶解：用食品级氢氧化钠调pH到7.0～8.0，升温至55-60℃，添加占卵清蛋白粉3wt‰的风味蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为1h，结束后升温到100℃灭酶10min；
(6)过滤除杂：料液中加入占卵清蛋白粉1wt％-10wt％的珍珠岩或活性白土或硅藻土，采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到较为澄清的酶解液；
(7)脱色：用食品级盐酸调pH到5.0～6.0，升温至75～80℃，添加占卵清蛋白粉3wt％的活性炭脱色2h；
(8)过滤精制：采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到澄清的脱色液；
(9)浓缩：经过300D的透析膜过滤，使过滤后的液体浓缩至过滤前体积的0.3倍；
(10)除菌：采用孔径为0.22μm的除菌过滤器过滤；
(11)干燥：喷雾干燥，进风温度150～180℃，出风温度75～85℃。
实施例5所得的卵清蛋白肽的收率为77.82％，用液相色谱仪测得其分子量为590D。
实施例6
一种抗氧化卵清蛋白肽的制备方法，步骤如下：
(1)预处理：将卵清蛋白粉用10倍的去离子水进行均质机处理；
(2)一次酶解：用食品级氢氧化钠调pH到6.0～7.5，升温至55℃，添加占卵清蛋白粉1wt％的枯草芽孢杆菌中性蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为2h；
(3)变性：将一次酶解液在pH＝8.0，T＝80℃条件下变性3h；
(4)二次酶解：用食品级氢氧化钠调pH到8.5～9.5，升温到60℃，添加占卵清蛋白粉8wt‰的枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为2h，结束后升温到90～95℃灭酶15min；
(5)三次酶解：用食品级盐酸调pH到7.5～8.0，升温至55-60℃，添加占卵清蛋白粉5wt‰的风味蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为0.5h，结束后升温到100℃灭酶10min；
(6)过滤除杂：料液中加入占卵清蛋白粉1wt％-10wt％的珍珠岩或活性白土或硅藻土，采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到较为澄清的酶解液；
(7)脱色：用食品级盐酸调pH到4.0～5.0，升温至80～85℃，添加占卵清蛋白粉5wt％的活性炭脱色1h；
(8)过滤精制：采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到澄清的脱色液；
(9)浓缩：经过500D的透析膜过滤，使过滤后的液体浓缩至过滤前体积的0.5倍；
(10)除菌：升温到105℃保温20min，进行灭菌；
(11)干燥：喷雾干燥，进风温度200～220℃，出风温度95～100℃。
实施例6所得的卵清蛋白肽的收率为82.3％，用液相色谱仪测得其分子量为515D。
对比例1
(1)预处理：将卵清蛋白粉用10倍的去离子水进行均质机处理；
(2)变性：步骤(1)所述均质机处理后的体系在pH＝8.0，T＝80℃条件下变性3h；过程中出现大量凝胶成团；变性结束后对其再次进行均质，以便后续酶解；
(3)一次酶解：用食品级氢氧化钠调pH到8.5～9.5，升温到60℃，添加占卵清蛋白粉8wt‰的枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为2h，结束后升温到90～95℃灭酶15min；
(4)二次酶解：用食品级盐酸调pH到7.5～8.0，升温至55-60℃，添加占卵清蛋白粉5wt‰的风味蛋白酶，过程中维持pH，酶解时间为0.5h，结束后升温到100℃灭酶10min；
(5)过滤除杂：料液中加入占卵清蛋白粉1wt％-10wt％的珍珠岩或活性白土或硅藻土，采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到较为澄清的酶解液；
(6)脱色：用食品级盐酸调pH到4.0～5.0，升温至80～85℃，添加占卵清蛋白粉5wt％的活性炭脱色1h；
(7)过滤精制：采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到澄清的脱色液；
(8)浓缩：经过500D的透析膜过滤，使过滤后的液体浓缩至过滤前体积的0.5倍；
(9)除菌：升温到105℃保温20min，进行灭菌；
(10)干燥：喷雾干燥，进风温度200～220℃，出风温度95～100℃。
对比例1所得的卵清蛋白肽的收率为48.28％，用液相色谱仪测得其分子量为814D。
采用DPPH法检测制备得到的卵清蛋白肽的体外抗氧化能力。
测试方法如下：将1.5mL样品加入到1.5mL 0.1mmol/L DPPH(95％乙醇)中，混匀并在25℃保温30min。在517nm处测量吸光度。VC溶液用作对照。DPPH清除能力w(％)计算如下：
其中A0是1.5mL蒸馏水和1.5mL含0.1mmol/L DPPH的95％乙醇的吸光度值，A1是含有0.1mmol/L DPPH·的1.5mL水解产物的吸光度值，A2是吸光度值1.5mL水解产物和1.5mL95％乙醇的吸光度值。
在实施例6的基础上进行的车间放大上线生产样为检测对象，测得不同浓度卵清蛋白肽的DPPH清除率见表1。表1中的浓度是待测样品加入到1.5mL0.1mmol/L DPPH(95％乙醇)中的实际浓度，每个浓度做3个平行。与此同时，表1中显示的测试数据对应的柱状图见图1。
表1不同浓度卵清蛋白肽的DPPH清除率一览图
由表1和图1可以看出：以VC做参考，测定自由基清除率，测试样品IC50为2.76mg/mL，20.08mg/mL的卵清蛋白肽DPPH清除率为87.49％，有着较强的抗氧化能力。
图2是采用HPLC高效体积排阻色谱法对上线生产制得的卵清蛋白肽进行分子量测定得到的色谱图。
测试条件为：
1)色谱柱：TSKgel G2000 SWXL 300mm×7.8mm。
2)流动相：乙腈：水：三氟乙酸为45:55:0.1(体积比)。
3)波长：UV220nm。
4)流速：0.5mL/min。
5)柱温：30℃。
6)进样体积：10μL。
测试方法：
1)配置2‰的待测样品：称取卵清蛋白肽0.02g于10mL容量瓶中，用配置好的流动相定容至刻度线；
2)溶解脱气：将配置好的待测样品超声震荡30min，使样品充分溶解并脱气；
3)进样检测：用一次性注射器吸取2)中溶液，用0.45μm尼龙滤膜进行过滤，上机进样，用GPC数据处理软件对样品溶液在上述色谱条件下进行分析，30min后即得到所检测样品中肽的相对分子质量为522D和图2色谱图。
用峰面积归一化法计算相对分子质量范围在10000u以下的蛋白质水解物的峰面积相对百分比之和，计算得到各分子量范围占比如表2所示。
表2分子量分布范围一览表
由表2能看出不同区域的分子量分布情况，1000D以下占比高达88.48％，属于小分子多肽，更利于人体吸收。
以上所述本发明的具体实施方式，并不构成对本发明保护范围的限定。任何根据本发明的技术构思所做出的各种其他相应的改变与变形，均应包含在本发明权利要求的保护范围内。
Claims (7)
1.一种抗氧化鸡卵清蛋白肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将鸡卵清蛋白粉分散于水中，得到分散液；调节分散液的pH为6.0~7.5，升高体系温度为55℃，加入枯草芽孢杆菌中性蛋白酶进行酶解反应，酶解过程中需要保持体系pH；
步骤（1）所述枯草芽孢杆菌中性蛋白酶的加入量占鸡卵清蛋白粉的1wt%；
步骤（1）所述鸡卵清蛋白与水的质量比为1：10；
步骤（1）所述酶解反应的时间为2h；
（2）步骤（1）所述酶解反应结束后，将体系pH调节至8.0，在80℃下保持3h；然后调节pH=8.5~9.5，升温到60℃，加入枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶进行酶解反应，酶解过程中需要保持体系pH，酶解结束后灭酶；
步骤（2）所述枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶的加入量占鸡卵清蛋白粉的8wt‰；
步骤（2）所述酶解反应的时间为2h；
步骤（2）所述灭酶的方式为：升温到90~95℃并保温15min；
（3）调节体系pH=7.5~8.0，升温至55~60℃，加入风味蛋白酶进行酶解反应，酶解过程中需要保持体系pH，酶解结束后灭酶；最后经过滤除杂、脱色、过滤精制、除菌和干燥后即制备得到所述抗氧化鸡卵清蛋白肽；
步骤（3）所述风味蛋白酶的加入量占鸡卵清蛋白粉的5wt‰；步骤（3）所述酶解反应的时间为0.5h；
步骤（3）所述灭酶的方式为：升温到100℃并保温10min。
2.根据权利要求1所述一种抗氧化鸡卵清蛋白肽的制备方法，其步骤（1）所述分散液在调节pH之前进行胶体磨处理或均质机处理。
3.根据权利要求1~2任一项所述一种抗氧化鸡卵清蛋白肽的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述过滤除杂的方式为：在料液中加入占鸡卵清蛋白粉1wt%~10wt%的珍珠岩、活性白土和硅藻土中的至少一种，采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到较为澄清的酶解液。
4.根据权利要求1~2任一项所述一种抗氧化鸡卵清蛋白肽的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述脱色的方式为：调节酶解液pH为4.0~6.0，升温至65~85℃，添加占鸡卵清蛋白粉1wt%~10wt%的活性炭脱色0.5~2h；
步骤（3）所述过滤精制的方式为：采用卧式螺旋离心机或板框过滤机分离固液，得到澄清的脱色液。
5.根据权利要求4所述一种抗氧化鸡卵清蛋白肽的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述除菌的方式为：升温到100~105℃并保温20~30min；或者采用孔径为0.22μm的除菌过滤器过滤。
6.根据权利要求5所述一种抗氧化鸡卵清蛋白肽的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述干燥的方式为：喷雾干燥，进风温度为150~220℃，出风温度为75~100℃。
7.根据权利要求1所述一种抗氧化鸡卵清蛋白肽的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述除菌之前还设有浓缩处理，所述浓缩处理的方式为：经过300~500D的透析膜过滤，使过滤后的液体浓缩至过滤前体积的0.1~0.5倍。
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