CN114478509A - 五元杂环取代的苯甲酰胺类化合物及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种五元杂环取代的苯甲酰胺类化合物及其制备方法与应用，所述化合物的结构式如式（Ⅰ）所示。本发明所提供的五元杂环取代的苯甲酰胺类化合物能够显著抑制鞘氨醇激酶2（SphK2），并能够用于制备预防和/或治疗与SphK2介导的相关疾病的药物，对SphK2和癌细胞均具有很强的抑制作用，可形成新一代的抗癌先导化合物，不仅为制备预防和/或治疗癌症的药物提供了一种新来源，同时为SphK2小分子抑制剂的开发和应用提供了更多选择可能性。

Description

五元杂环取代的苯甲酰胺类化合物及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及苯甲酰胺类化合物及其制备方法与应用，尤其是涉及五元杂环取代的苯甲酰胺类化合物及其制备方法与应用。
背景技术
随着脂质组学的发展，哺乳动物体内的鞘脂信号通路的重要功能逐渐被发掘，靶向鞘脂信号通路成为治疗肿瘤的新策略。神经酰胺(Ceramide,Cer)、鞘氨醇(Sphingosine,Sph)、鞘氨醇-1-磷酸(Sphingosine-1-phosphosine,S1P)属于体内鞘脂类物质，它们不仅参与了细胞膜的组成，还可以作为脂质信号分子参与细胞的增殖、分化与凋亡等过程。研究表明，Cer/Sph促进细胞凋亡，而S1P则促进细胞存活，其失调后将促进肿瘤的发生与发展。鞘脂学研究通常用“鞘脂-变阻器”(sphingolipid-rheostat)来描述三者之间的平衡与转化。因此，靶向鞘脂信号通路，调控“鞘脂-变阻器”已经成为开发抗肿瘤药物的新方向。
SphK催化Sph磷酸化生成S1P，是控制“鞘脂-变阻器”关键限速酶。抑制SphK可以引起促凋亡的Cer/Sph升高和促存活的S1P降低，进而产生抗肿瘤作用。SphKs具有两个亚型，其中SphK1作为致癌基因被大量报道，但由于SphK2的关键生理功能存在矛盾，导致相关病理学研究及药物开发严重受阻。尽管如此，SphK2促进肿瘤发生的重要作用在近几年得到研究人员的一致认可，特别是其选择性抑制剂ABC294640目前进入了临床Ⅱ期开发，有力推动了SphK2的相关机制研究。
目前已报道的高效高选择性SphK2抑制剂很少，但在研究中发现靶向SphK2要表现出更优于靶向SphK1的抗肿瘤活性。基于对SphKs两个亚型的选择性，将已报道的SphK2抑制剂分为非选择性和选择性抑制剂两类。但目前SphK2晶体结构依然未知，全球尚无SphK2抑制剂获批上市，且大多数已报道的SphK2抑制剂仍受到低效力、低特异性、结构单一及数量少等限制，这在很大程度上制约了鞘脂信号通路的研究和相关治疗药物的开发。
因此，亟需开发新型高效、高选择性的SphK2抑制剂以解决以上问题，既要为新型SphK2抑制剂的开发提供一定的构效关系，又要进一步研究通过小分子抑制剂直接调控SphK2的抗肿瘤作用。
发明内容
本发明的目的之一就是提供一种五元杂环取代的苯甲酰胺类化合物，其可作为高效、高选择性的SphK2抑制剂，以解决现有SphK2抑制剂效力低、特异性低等问题。
本发明的另一目的是提供上述化合物及其药用盐的制备方法。
本发明的进一步的目的是提供上述化合物及其药用盐在制备用于预防和/治疗癌症的药物中的应用。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
一种式(Ⅰ)所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure BDA0003471608560000021
式中：R1为H、F、Cl、CH3或CF3中的任意一种；R1取代位置为邻位、间位或对位；n＝1或2；当n＝1时为单取代；当n＝2时，为双取代，此时两个R1相同或不同；
R2为
Figure BDA0003471608560000022
中的任意一种；
R3为
Figure BDA0003471608560000023
Figure BDA0003471608560000024
中的任意一种。
优选的，R1为氢、氯或三氟甲基，R2为噁二唑环，R3为乙醇胺基、乙二胺基、甘氨酰氨基、L-脯氨醇基、D-脯氨醇基、L-脯氨酰胺基或D-脯氨酰胺基中的任意一种。
更优选的，所述化合物选自如下结构之一：
Figure BDA0003471608560000025
Figure BDA0003471608560000031
所述化合物的药学上可接受的盐包括但不限于乙酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐或甲磺酸盐等。
本发明还提供式(Ⅰ)所示的化合物的制备方法，合成路线如下：
Figure BDA0003471608560000032
包括以下步骤：
(1)化合物A与化合物B发生亲核取代反应，生成化合物C；
(2)化合物C与盐酸羟胺发生加成反应，生成化合物D；
(3)化合物D与E作用下发生缩合反应，生成化合物F；
(4)化合物F与氢氧化钠作用下发生水解反应，生成化合物G；
(5)化合物G与具有R3结构的胺在有机碱条件下发生缩合，生成式(I)所示化合物。
具体的，步骤(1)中，化合物A和氯乙腈在DMF溶液中，加热回流85℃反应4～5h；所述化合物A与氯乙腈的摩尔比为1：(1.1～1.2)。
具体的，步骤(2)中，化合物C在无水乙醇溶剂条件下与盐酸羟胺和碳酸氢钠反应，加热回流85℃反应1～1.5h；所述化合物C与盐酸羟胺和碳酸氢钠的摩尔比为1:5:7。
具体的，步骤(3)中，D与对三氟甲基/氯苯基酸先与EDCI、DMAP于室温25℃下反应8h后，再加热回流至140℃反应2h；所述化合物D与对三氟甲基/氯苯基酸的摩尔比为1:1。
具体的，步骤(4)中，F与氢氧化钠在甲醇：水＝4:1的体系下，加热回流至70℃反应1-1.5h；所述化合物F与氢氧化钠的摩尔比为1:4。
具体的，步骤(5)中，在氩气保护下，G在无水二氯甲烷溶剂中先与HATU、DIEA反应0.5h，再加入具有R3结构的胺，室温25℃下过夜；所述化合物G和胺的摩尔比是1:1。
本发明还提供了式(Ⅰ)所示的化合物或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗SphK2介导的疾病的药物中的应用。
所述SphK2介导的疾病为癌症，尤其是人组织细胞淋巴瘤、乳腺癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、肾癌、宫颈癌、结肠癌或肝癌。
本发明还提供了一种药物组合物，其包含本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成份，以及一种或多种药学上可接受的载体和/或辅料。
本发明所提供的五元杂环取代的苯甲酰胺类化合物能够显著抑制SphK2，并能够用于制备预防和/或治疗与SphK2介导的相关疾病的药物。
本发明的所提供的五元杂环取代的苯甲酰胺类化合物对SphK2和癌细胞均具有很强的抑制作用，可形成新一代的抗癌先导化合物，不仅为制备预防和/或治疗癌症的药物提供了一种新来源，同时为SphK2小分子抑制剂的开发和应用提供了更多选择可能性。
具体实施方式
在以下各实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法，所用试剂未表明来源和规格的均为市售分析纯或色谱纯。
实施例1：式(Ⅰ)所示系列化合物的制备
S1)、将3g(20mmol)对羟基苯甲酸甲酯、5.4g(40mmol)碳酸钾、0.4g(2mmol)的碘化钾加入15mL的盛有DMF的茄形瓶中溶解，再加入1.6g(24mmol)的氯乙腈，加热回流85℃反应4h后，TLC检测反应终点，减压除去溶剂得粗产物，乙酸乙酯重结晶即得3.2g产物C，产率为85％。1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.07–8.04(m,2H),7.02–7.00(m,2H),4.83(s,2H),3.91(s,3H)。
S2)、用20mL的无水乙醇溶液溶解2.86g(15mmol)的化合物C，加入的5.2g(75mmol)盐酸羟胺和8.8g(105mmol)碳酸氢钠，加热回流85℃反应1h后，TLC检测反应终点，趁热过滤，滤饼洗涤3-4次，滤液浓缩后得2.83g粗产品D，产率为80～85％，HRESIMS m/z225.0784[M+H]+。
S3)、然后用10ml无水DMF溶解1.8g(8mmol)对氯甲基苯基酸或1.52g(8mmol)对三氟甲基苯甲酸，先与3.1g(16mmol)EDCI、0.1g(0.8mmol)DMAP反应1h后，再加入1.25g(8mmol)产物D。室温25℃下反应8h后，加热回流至140℃反应2h，TLC检测反应终点。乙酸乙酯萃取，无水MgSO4干燥。硅胶层析柱分离纯化(洗脱剂为乙酸乙酯：石油醚＝25:1)得2.1g产物F，产率为65～75％。R1为氯：1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.10(d,J＝8.4Hz,2H),8.02(d,J＝8.7Hz,2H),7.52(d,J＝8.4Hz,2H),7.08(d,J＝8.7Hz,2H),5.30(s,2H),3.89(s,3H)。R1为三氟甲基：1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.29(d,J＝8.2Hz,2H),8.03(d,J＝8.8Hz,2H),7.81(d,J＝8.2Hz,2H),7.08(d,J＝8.8Hz,2H),5.32(s,2H),3.89(s,3H).
S4)、在1.5g(5mmol)产物F加入0.52g(15mmol)的氢氧化钠，在甲醇：水＝4:1的体系下，加热回流至70℃反应1-1.5h，减压蒸馏除去甲醇溶剂，加入适量的1mol/L的盐酸溶液调节PH至中性或酸性至白色固体析出，过滤即得1.1g产物G，产率为75％，HRESIMS m/z330.0378[M+H]+。
S5)、在氩气保护下，用5ml无水二氯甲烷溶解产物0.33g(1mmol)G，先与0.57g(1.5mmol)HATU、0.19g(1.5mmol)DIEA反应1h，再加入1mmol不同种类的胺(见表1)，室温25℃下过夜，TLC检测反应终点。乙酸乙酯萃取，无水MgSO4干燥。粗产物用硅胶层析柱分离纯化(洗脱剂为乙酸乙酯：石油醚＝2:1)，乙酸乙酯重结晶，白色固体析出，真空干燥得0.25g目标产物，产率约为70～88％。
S5)中使用不同种类的胺，得到的相应化合物的具体结构如表1所示。
表1
Figure BDA0003471608560000051
Figure BDA0003471608560000061
Figure BDA0003471608560000071
化合物1-14的表征数据如下：
化合物1：1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.09(d,J＝8.5Hz,2H),7.52(d,J＝8.5Hz,4H),7.07(d,J＝8.7Hz,2H),5.27(s,2H),4.83(d,J＝5.7Hz,1H),4.40(d,J＝7.2Hz,1H),3.79(d,J＝7.2Hz,1H),3.75–3.69(m,1H),3.57(d,J＝7.2Hz,1H),3.50(dt,J＝16.6,8.3Hz,1H),2.16(d,J＝4.3Hz,1H),1.90–1.84(m,1H),1.74(d,J＝9.5Hz,1H),1.64(d,J＝18.6Hz,1H)；HRESIMS m/z 436.1031[M+Na]+。
化合物2：1H NMR(600MHz,DMSO)δ8.73(t,J＝5.4Hz,1H),8.19(s,2H),8.11(d,J＝8.6Hz,2H),7.93(d,J＝8.9Hz,2H),7.70(d,J＝8.6Hz,2H),7.13(d,J＝8.9Hz,2H),5.42(s,2H),3.50(dd,J＝11.7,5.9Hz,2H),2.95(t,J＝6.1Hz,2H)；HRESIMS m/z 373.1057[M+H]+；HRESIMS m/z 395.0875[M+Na]+。
化合物3：1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.12(d,J＝8.5Hz,2H),7.55(s,2H),7.54(s,2H),7.09(d,J＝8.7Hz,2H),5.30(s,2H),4.88(d,J＝7.1Hz,1H),4.43(d,J＝7.4Hz,1H),3.85–3.80(m,1H),3.78–3.72(m,1H),3.60(d,J＝7.5Hz,1H),3.53(dt,J＝16.5,8.3Hz,1H),2.19(d,J＝4.7Hz,1H),1.89(s,1H),1.77(d,J＝9.1Hz,1H)；HRESIMS m/z 436.1031[M+Na]+。
化合物4：1H NMR(600MHz,DMSO)δ8.55(t,J＝5.8Hz,1H),8.12(d,J＝8.6Hz,2H),7.86(d,J＝8.8Hz,2H),7.70(d,J＝8.6Hz,2H),7.33(s,1H),7.14(d,J＝8.8Hz,2H),6.98(s,1H),5.43(s,2H),3.77(d,J＝5.9Hz,2H)；HRESIMS m/z 409.0669[M+Na]+。
化合物5：1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.08(d,J＝8.5Hz,2H),7.53(dd,J＝17.0,8.4Hz,4H),7.06(d,J＝8.4Hz,2H),6.92(s,1H),5.64(s,1H),5.27(s,2H),4.81–4.66(m,1H),3.61(dd,J＝16.1,7.2Hz,1H),3.54(s,1H),2.36(dd,J＝12.0,6.0Hz,1H),2.09(dd,J＝13.1,6.6Hz,1H),2.06–2.00(m,1H),1.84–1.78(m,1H)；HRESIMS m/z 449.0984[M+Na]+。
化合物6：1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.33(t,J＝5.4Hz,1H),8.09(d,J＝8.5Hz,2H),7.82(d,J＝8.7Hz,2H),7.68(d,J＝8.5Hz,2H),7.09(d,J＝8.7Hz,2H),5.39(s,2H),4.72(t,J＝5.6Hz,1H),3.45(q,J＝6.0Hz,2H),3.26(dd,J＝11.9,6.0Hz,2H)；HRESIMS m/z396.0708[M+Na]+。
化合物7:1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.10(d,J＝8.6Hz,2H),7.55(d,J＝8.2Hz,2H),7.52(d,J＝8.6Hz,2H),7.07(d,J＝8.4Hz,2H),6.93(s,1H),5.47(s,1H),5.28(s,2H),4.79(d,J＝6.0Hz,1H),3.59(s,1H),3.55(s,1H),2.44(d,J＝6.0Hz,1H),2.10–2.06(m,1H),2.06–2.03(m,1H),1.84(d,J＝6.2Hz,1H)；HRESIMS m/z449.0979[M+Na]+。
化合物8：1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.30(d,J＝7.6Hz,3H),7.98(d,J＝8.6Hz,2H),7.82(d,J＝8.8Hz,2H),7.11(d,J＝8.8Hz,2H),5.43(s,2H),4.68(t,J＝5.6Hz,1H),3.45(q,J＝6.1Hz,2H),3.27(q,J＝6.1Hz,2H)；HRESIMS m/z 430.0975[M+Na]+。
化合物9：1H NMR(600MHz,DMSO)δ8.64(s,1H),8.31(d,J＝8.1Hz,2H),7.99(d,J＝8.2Hz,2H),7.89(d,J＝8.7Hz,2H),7.37(s,1H),7.13(d,J＝8.7Hz,2H),6.96(s,1H),5.45(s,2H),3.77(d,J＝5.8Hz,2H)；HRESIMS m/z 443.0928[M+Na]+。
化合物10:1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.55(t,J＝5.6Hz,1H),8.36(d,J＝8.1Hz,2H),8.05(d,J＝8.3Hz,2H),7.89(d,J＝8.9Hz,2H),7.85(s,2H),7.21(d,J＝8.9Hz,2H),5.51(s,2H),3.51(q,J＝6.0Hz,2H),3.00(s,2H)；HRESIMS m/z407.1309[M+H]+；HRESIMS m/z429.1127[M+Na]+。
化合物11:1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.29(d,J＝8.2Hz,2H),7.81(d,J＝8.2Hz,2H),7.55(d,J＝8.2Hz,2H),7.08(d,J＝8.3Hz,2H),6.89(s,1H),5.53(s,1H),5.30(s,2H),4.80–4.72(m,1H),3.69(d,J＝2.7Hz,1H),3.65–3.59(m,1H),3.55(s,1H),3.15(dd,J＝7.2,3.6Hz,1H),2.38(dd,J＝12.3,6.2Hz,1H),2.11(dd,J＝13.0,6.6Hz,1H)；HRESIMS m/z483.1248[M+Na]+。
化合物12：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.29(d,J＝8.1Hz,2H),7.81(d,J＝8.6Hz,2H),7.55(d,J＝8.5Hz,2H),7.07(d,J＝8.6Hz,2H),6.91(s,1H),5.57(s,1H),5.30(s,2H),4.77–4.72(m,1H),4.67(s,1H),3.66–3.60(m,1H),3.59–3.48(m,1H),2.37(dd,J＝12.9,5.9Hz,1H),2.11(dd,J＝13.4,6.2Hz,1H),2.08–2.03(m,1H)；HRESIMS m/z 483.1241[M+Na]+。
化合物13:1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.32(d,J＝8.1Hz,2H),7.99(d,J＝8.3Hz,2H),7.48(d,J＝7.5Hz,2H),7.09(d,J＝8.8Hz,2H),5.42(s,2H),4.75(s,1H),4.10(s,1H),3.55(s,1H),3.50–3.38(m,2H),2.00–1.67(m,4H),1.64(s,1H)；HRESIMS m/z 448.1465[M+H]+；HRESIMS m/z 470.1284[M+Na]+。
化合物14:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.29(d,J＝8.1Hz,2H),7.81(d,J＝8.2Hz,2H),7.53(d,J＝8.7Hz,2H),7.07(d,J＝8.8Hz,2H),5.30(s,2H),4.89(s,1H),4.40(d,J＝7.2Hz,1H),3.79(s,1H),3.76–3.67(m,1H),3.58(t,J＝7.5Hz,1H),3.51(dt,J＝16.6,8.2Hz,1H),2.16(d,J＝4.4Hz,1H),1.87(dd,J＝5.8,3.2Hz,1H),1.76(d,J＝7.2Hz,1H),1.61(t,J＝14.5Hz,1H)；HRESIMS m/z 448.1467[M+H]+；HRESIMS m/z 470.1286[M+Na]+。
实施例2：本发明系列化合物对SphK2的活性研究
(1)实验材料：目标化合物和阳性对照PF543(Target mol，T8840)、鞘氨醇激酶2试剂盒(Cayman，701870)、酶标仪(Bio-Stack)和黑色96孔板。
(2)实验方法：
选取对3种癌细胞均具有较强抑制作用的化合物3，分别测定在5μM、10μM、25μM、50μM、80μM、100μM不同浓度下的抑制率，实验结果如表2。
表2
浓度 5μM 10μM 25μM 50μM 80μM 100μM
抑制率(％) 66.7 66.7 88.9 >100 >100 ＞100
所有样品以10μM的浓度测定单孔抑制率，实验结果如表3。
表3
编号 抑制率(％)
6 60
8 80
12 100
13 60
14 100
PF543 60
选取抑制率大于50％的化合物，将不同抑制率的化合物分别设置不同的浓度梯度，3个复孔，对每个浓度的抑制率进行非线性曲线拟合分析后，计算半数抑制浓度IC50值。
黑色96孔板中包含空白组、阴性组和样品组3个体系。其中，空白组：75μl完整缓冲液、20μl缓冲液(1x)、5μl DMSO；阴性组：75μl完整缓冲液、5μl DMSO、20μl ATP；样品组：75μl完整缓冲液、5μl不同浓度的化合物、20μl ATP。然后在室温25℃下孵育90min，利用Bio-Stack酶标仪在激发波长为530nm，发射波长590nm下测定荧光强度值(F值)，计算不同浓度的化合物对SphK2酶的抑制率。阴性组和给药组减去空白组即为各自的校正值。抑制率＝(阴性组校正值-给药组校正值)/阴性组校正值×100％。选取抑制率大于50％的化合物，设置5个不同的浓度梯度，3个复孔，对每个浓度的抑制率进行非线性曲线拟合分析后，计算半数抑制浓度IC50值。半数抑制浓度IC50值越低，代表化合物对SphK2的抑制能力越强。实验结果如表4所示。
表4五元杂环取代的苯甲酰胺类化合物对SphK2的抑制活性
化合物 IC<sub>50</sub>(μM)
8 0.03578
12 0.0002404
13 2.458
14 0.003431
PF543 0.48
实验结果表明，化合物12对SphK2具有显著的抑制作用，其作用效果明显优于阳性对照药物PF543。
实施例3：本发明系列化合物对癌细胞增殖的作用研究
(1)实验材料：目标化合物和阳性对照PF543、胰酶、清洗液PBS、胎牛血清(Gemini)、人组织细胞淋巴瘤细胞U937和人乳腺癌细胞MCF-7和人胃癌细胞MGC-308(上海中科院细胞库)、酶标仪(thermo scientific)和96孔板、DMEM培养基和1640培养基(Solarbio，其中青霉素和链霉素的终浓度分别为100U/mL和100μ/mL)。
(2)实验方法：
将生长至对数期的细胞制成均匀分散的单细胞悬液，每孔90μL单细胞悬液约(2-5)×104个/ml细胞接种到96孔板中，在5％CO2、37℃培养箱中孵育48h。待细胞贴壁后分别加入6种不同浓度样品10μL，每个浓度设置3-5个平行，继续孵育48h后，每孔加5mg/ml的MTT溶液10μL，孵育3～4h后，吸去每孔的上清液(U937须先在离板机离心20s再吸走上清液)，加100μL DMSO溶解，放于摇床充分震荡15min使结晶充分溶解，于540nm波长下用酶标仪测定每孔吸光值(OD值)，每组实验独立平行三次。抑制率＝1-[(OD实验组-OD空白组)/(OD阴性对照-OD空白组)]×100％。运用Graphpad 7.0软件进行分析，样品浓度对数值与细胞抑制率线性回归，计算化合物对各细胞的半数抑制浓度IC50值(均值±标准差)。
表5本发明系列化合物对癌细胞的半数抑制浓度的实验结果对比
Figure BDA0003471608560000111
实验结果表明，化合物3、5、11、12、13对三种癌细胞系均具有显著的抑制作用，其作用效果明显优于阳性对照药物PF543。
综述所述，通过上述实施例1-3证明，根据本发明所提供的五元杂环取代的苯甲酰胺类化合物12均对SphK2和癌细胞具有很强的抑制剂作用。对比阳性对照PF543，本发明提供的五元杂环取代的苯甲酰胺类化合物的活性显著提高，可开发为新一代的抗癌药物。
最后应当说明的是：本说明书中未作详细描述的内容属于本领域专业技术人员公知的现有技术。尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种式(Ⅰ)所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征是，结构通式如下：
Figure FDA0003471608550000011
式中：R1为H、F、Cl、CH3或CF3中的任意一种；n＝1或2；当n＝1时为单取代；当n＝2时，为双取代，此时两个R1相同或不同；
R2为
Figure FDA0003471608550000012
中的任意一种；
R3为
Figure FDA0003471608550000013
Figure FDA0003471608550000014
中的任意一种。
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征是，R1为氢、氯或三氟甲基，R2为噁二唑环，R3为乙醇胺基、乙二胺基、甘氨酰氨基、L-脯氨醇基、D-脯氨醇基、L-脯氨酰胺基或D-脯氨酰胺基中的任意一种。
3.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征是，选自如下结构：
Figure FDA0003471608550000015
Figure FDA0003471608550000021
4.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征是，所述盐为乙酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐或甲磺酸盐。
5.一种式(Ⅰ)所示的化合物的制备方法，其特征是，合成路线如下：
Figure FDA0003471608550000022
式中，R1与R3的定义同前。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征是，包括以下步骤：
(1)化合物A与化合物B在DMF溶液中，加热回流85℃反应4～5h，生成化合物C；所述化合物A与化合物B的摩尔比为1︰(1.1～1.2)；
(2)化合物C在无水乙醇溶剂条件下与盐酸羟胺和碳酸氢钠反应，加热回流85℃反应1～1.5h，生成化合物D；所述化合物C与盐酸羟胺和碳酸氢钠的摩尔比为1:5:7；
(3)化合物D与E先与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、4-二甲氨基吡啶于室温25℃下反应8h后，再加热回流至140℃反应2h，生成化合物F；所述化合物D与E的摩尔比为1:1；
(4)化合物F与氢氧化钠在甲醇：水＝4:1的体系下，加热回流至70℃反应1-1.5h，生成化合物G；所述化合物F与氢氧化钠的摩尔比为1:4；
(5)在氩气保护下，化合物G在无水二氯甲烷溶剂中先与HATU、DIEA反应0.5h，再与具有R3结构的胺在有机碱条件下发生缩合，室温25℃下过夜，生成式(I)所示化合物；所述化合物G和胺的摩尔比是1:1。
7.权利要求1-5中任意一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备预防和/或治疗SphK2介导的疾病的药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征是，所述疾病是癌症。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征是，所述癌症为人组织细胞淋巴瘤、乳腺癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、肾癌、宫颈癌、结肠癌或肝癌。
10.一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1-5中任意一项所述的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成份，以及一种或多种药学上可接受的载体和/或辅料。
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张金淼等: "鞘氨醇激酶2在肿瘤中的作用及其抑制剂研究进展", 药学学报, vol. 55, no. 9, pages 2062 - 2069 *

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