CN114404384A - 一种用于肠道菌群移植的口服胶囊及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种用于肠道菌群移植的口服胶囊及其制备方法。所述胶囊的基质组分由质量百分比为2％的海藻酸钠、5‑15％的甘油、2％的益生元、0.9％的NaCl、余量为去离子水组成；采集肠道菌群；按胶囊基质:菌泥质量比为3:1的比例混匀；再将蠕动泵导管入口端插入上述胶囊基质和菌泥的混合物中，将注射器针头与蠕动泵导管出口端密封连接，再固定到盛有定型剂的玻璃杯上方，启动蠕动泵，使胶囊基质和菌泥的混合物逐滴滴入定型剂中形成胶囊球体；经固化清洗干燥后冻存于‑80℃冰箱，现用现取。本发明可将肠道菌群移植所用口服胶囊的直径控制在0.06‑5毫米，提高了肠道菌群移植的成功率：本发明的口服胶囊虽然直径小，但却具有更高的肠道菌群移植成功率。

Description

一种用于肠道菌群移植的口服胶囊及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物医疗技术领域，具体涉及一种用于肠道菌群移植的口服胶囊及其制备方法。
技术背景
目前肠道菌群移植作为一种新兴医疗技术已经逐渐在实践中得以应用。菌群移植是将健康人粪便中的功能菌群移植到患者胃肠道内，重建新的肠道菌群，实现肠道和肠道外疾病的治疗技术。在复发性艰难梭菌感染(CDI)的治疗中，总体治愈率甚至高达96％，其有效性和安全性在后续研究中得到进一步证实。目前，菌群移植已成为复发性艰难梭菌感染(rCDI)、对标准治疗无响应的严重CDI、不适合手术的爆发性CDI的首选治疗策略，单次菌群移植治愈率高达90％以上。菌群移植亦可缓解轻度至中度溃疡性结肠炎(UC)症状。此外，菌群移植的其他治疗适应症还包括代谢综合征、肠易激综合症、炎症性肠病、顽固性便秘、肝性脑病、多药耐药微生物感染、原发性硬化性胆管炎、自闭症、帕金森病、多种癌症等。
菌群移植的途径包括手术方式输注菌液(如鼻肠管、胃镜钳道孔、经皮内镜胃造瘘空肠管、结肠镜、灌肠、结肠造瘘口、经内径肠道植管等)和口服胶囊。与手术途径输注菌液相比，口服途径更经济高效，好处包括：①改善患者对菌群移植的可接受性；②降低不良事件的发生率；③降低菌群移植的成本；④不涉及需要专业人员和日间住院的技术方法，如住院、麻醉、手术、术后护理等；⑤改善菌群移植技术的可及性，在应对紧急情况时尤其重要，如复发性艰难梭菌感染、不宜手术的爆发性艰难梭菌感染等。当前多个临床研究报告指出，在治疗CDI中，口服胶囊的疗效与手术途径输注菌液的方法相当，而不良事件发生率和成本更低、患者满意度更高。
为了保持菌群活性，确保其在肠道中更好地定植，目前的口服胶囊通常是通过将特定形式的肠道菌群混合物(新鲜菌泥或冻干粉)填充到耐酸肠溶胶囊中制得。肠溶胶囊在肠道崩解有助于肠道菌群避开胃内酸性胃液和各种消化酶的破坏，抵达肠道进行定植。然而，由于肠道菌群移植治疗的核心在于移植的是一个健康供体的肠道菌群生态系统，而成功定植需要一定数量和丰度的有效菌群及其基质，为了保证肠道菌群生态系统移植的完整性，移植的新鲜菌泥或冻干粉需要具备一定的数量，因此目前的肠溶胶囊一般都比较大——目前市场上可获得的最小肠溶胶囊为3号胶囊(尺寸为长16mm、宽5.5mm，容量0.12～0.2g)--对于吞咽困难的低幼儿童或老年人，无法通过口服这么大的肠溶胶囊进行菌群移植。而且目前所用的口服胶囊通常是先将分离制备得到的粪菌液进行冷冻干燥处理，然后将冻干菌粉填充到肠溶胶囊壳中。冷冻干燥不仅成本高、周期长，而且对肠道菌群也有较大的杀伤作用，很大一部分肠菌在冷冻干燥过程中死亡，导致胶囊中肠道菌群的活性大大降低，进一步限制了肠溶胶囊的肠菌载量，也改变了定植口服胶囊内的肠道菌群生态平衡，使最终在患者肠道中定植的菌群生态与健康供体的肠道菌群生态不同，当这种不同差异较大时，就很难获得理想的治疗效果，严重者甚至会产生副作用。
发明内容
为了解决以上问题，本发明提出一种用于肠道菌群移植的口服胶囊及其制备方法。
本发明的用于肠道菌群移植的口服胶囊的制备方法如下：
(1)配制胶囊基质：胶囊基质的组分由质量百分比为2％的海藻酸钠、5-15％的甘油、2％的益生元、0.9％的NaCl、余量为去离子水组成，将以上组分溶解混匀后高压灭菌，冷却后再次充分混匀并置于冰上备用；
(2)配制定型剂：定型剂由质量百分比为2％的氯化钙、0.9％的NaCl、余量为去离子水组成，将以上组分溶解混匀后高压灭菌，冷却后备用；
(3)采集肠道菌群：向经严格筛选的健康供体采集肠道菌群，采集方法为用干净无菌的大便收集器收集健康供体的大便，称重后按大便：生理盐水质量比为1：4的比例加入无菌生理盐水，搅拌均匀，然后依次用2.0mm、1.0mm、0.5mm、0.25mm孔径食品级无菌滤网过滤，去除未消化的食物残渣或较大不溶颗粒物，0.25mm孔径过滤后的滤液于4℃用6000-7000xg离心15分钟，去上清保留菌泥，菌泥用无菌生理盐水洗涤2遍，吸干无菌生理盐水后将菌泥置于冰上，所述菌泥即为肠道菌群，以上操作要在大便离开健康供体的4-10小时内完成；
(4)采用注射器挤出胶囊：按胶囊基质:菌泥质量比为3:1的比例将冷却预冷后的胶囊基质加入预先装入上述菌泥的离心管中，用搅拌器将胶囊基质和菌泥混合15分钟，使其充分混匀；再将蠕动泵导管入口端插入上述胶囊基质和菌泥的混合物中，根据需求选择不同孔径的注射器针头，使胶囊直径范围为0.06-5毫米，将注射器针头与蠕动泵导管出口端密封连接，再固定到盛有定型剂的玻璃杯上方，针头出口距离液面5～10cm；启动蠕动泵，调整蠕动泵转速使胶囊基质和菌泥的混合物逐滴滴入定型剂中；一旦液滴到达定型剂会立即形成胶囊球体；将获得的胶囊沥干后放置30分钟进行固化；之后使用真空泵将胶囊间残留的定型剂吸干，然后用无菌生理盐水洗涤胶囊3次，并用真空泵吸干胶囊间残留的洗液；
(5)胶囊的储存与使用：将上述胶囊分装于西林瓶中，西林瓶用T型胶塞和铝箔盖密封，贴上标签，冻存于-80℃冰箱，现用现取。
优选地，所述胶囊基质的组分中，甘油用量为10％。
优选地，采集肠道菌群时，所有操作要在大便离开健康供体的6小时内完成。
优选地，菌泥过滤的最小孔径为0.25mm。
本发明的有益效果如下：
1、减小了肠道菌群移植所用口服胶囊的直径：本发明利用海藻酸钠与Ca2+发生离子凝胶反应形成的海藻酸钙微滴/小胶囊壁材具有耐酸肠溶的特点，将新鲜制备的肠道菌群沉淀物与胶囊基质混合，通过挤出封装技术将混合乳液逐滴加入氯化钙溶液形成固化的小胶囊，以目前市面上的针头孔径，可以将胶囊的直径控制在0.06-5毫米，且每种针头制备的胶囊直径统一，一致性好。
2、提高了肠道菌群移植的成功率：本发明的口服胶囊虽然直径小，但却具有更高的肠道菌群移植成功率。现有的肠溶益生菌微胶囊，需要采用冻干技术对益生菌微胶囊进行真空冷冻干燥后进行保藏，冻干技术不仅周期长、成本高，而且对活体微生物造成极大损伤。本发明与现有益生菌微胶囊技术最大的不同在于向基质中加入防冻保护剂，制成的小胶囊并不冻干，而是直接冻存于-80℃，治疗时现用现取。本发明的技术方案可避免冻干过程对肠道菌群的杀伤破坏作用，最大限度保证肠道菌群的丰度和活性，这对于菌群移植的有效性至关重要，能极大提高菌群移植/粪菌移植在临床中的应用可及性。
3、确定了在本技术方案中的最佳抗冻剂组分为甘油，最佳用量为10％。虽然大多数非渗透性大分子冷冻保护剂是可食用材料，但本发明中小胶囊基质--海藻酸钠溶液是一种黏稠溶液，非渗透性大分子冷冻保护剂难以溶解其中，因此，本发明选用食用级甘油作为小胶囊冷冻保护剂。并且经过对比试验确定10％的甘油用量对肠菌活性的保护效果最佳(见实施例2和表1)。
附图说明
图1为实施例1制备的口服胶囊；
图2为实施例3冻干与冻存的活菌数量及丰度对比；
图3为实施例4胃液处理肠菌小胶囊的实验；
图4为实施例4胃液处理后肠菌小胶囊活菌数对比；
图5为实施例6小胶囊与油剂的肠道菌群活性对比；
图6为实施例7受体一口服肠菌小胶囊后的菌群分析；
图7为实施例7受体二口服肠菌小胶囊后的菌群分析。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1：制备用于肠道菌群移植的口服胶囊
本实施例的肠道菌群来自经严格筛选的健康供体，所有操作要在大便离开健康供体的6小时内完成。健康供体的筛选严格遵照国际粪菌移植共识、欧洲粪菌移植共识、亚太粪菌移植共识、以及中国儿童粪菌移植共识相关指南，采用严格的“排除法”。筛查包括回顾病史、血清学检查以筛查传染病、粪便检查、肠道微生物群测序，并确认没有胃肠道疾病和其他神经发育问题。血清学检查排除甲型、乙型、丙型和戊型肝炎感染、人类免疫缺陷病毒Ⅰ/Ⅱ型感染、T细胞结核感染、TORCH病毒感染和梅毒感染，还评估肝功能和肾功能。检测用于制备的粪便是否存在细菌病原体(幽门螺杆菌、大肠杆菌O157、志贺氏菌、沙门氏菌、弯曲杆菌、金黄色葡萄球菌、耶尔森氏菌、副溶血性弧菌和霍乱弧菌)、病毒感染(轮状病毒A、腺病毒和诺如病毒),真菌感染(白色念珠菌)和寄生虫(贾第鞭毛虫、隐孢子虫、环孢子虫和等孢子虫)的存在。
制备口服胶囊按以下步骤进行：
(1)配制胶囊基质：胶囊基质的组分由质量百分比为2％的海藻酸钠、10％的甘油、2％的益生元、0.9％的NaCl，余量为去离子水组成，将以上组分溶解混匀后于121℃高压灭菌15分钟，冷却后再次充分混匀并置于冰上备用，检测pH值为7.0-7.5；
(2)配制定型剂：定型剂由质量百分比为2％的氯化钙、0.9％的NaCl、余量为去离子水组成，将以上组分溶解混匀后高压灭菌，冷却后备用；
(3)采集肠道菌群：向经严格筛选的健康供体采集肠道菌群，采集方法为用干净无菌的大便收集器收集健康供体的大便，称重后按大便：生理盐水质量比为1：4的比例加入无菌生理盐水，搅拌均匀，然后依次用2.0mm、1.0mm、0.5mm、0.25mm孔径食品级无菌滤网过滤，去除未消化的食物残渣或较大不溶颗粒物，0.25mm孔径过滤后的滤液用6000xg离心15分钟，去上清保留菌泥，菌泥用无菌生理盐水洗涤2遍，吸干无菌生理盐水后将菌泥置于冰上，所述菌泥即为肠道菌群，以上操作要在大便离开健康供体的6小时内完成；0.25mm为食品级无菌滤网的最小孔径，因为过滤程序中最后一级滤网的最小孔径太大则不能有效去除未消化食物和其他颗粒物，太小会损失有效的肠道菌群—因为肠道菌群里有些细菌的大小直径在0.1mm，如果部分有效细菌被过滤出去，则对健康供体肠道菌群的整体生态活性有影响，有可能对肠道菌群移植的治疗效果产生不利影响。
(4)采用注射器挤出胶囊：按胶囊基质:菌泥质量比为3:1的比例将冷却预冷后的胶囊基质加入预先装入上述菌泥的离心管中，用搅拌器将胶囊基质和菌泥混合15分钟，使其充分混匀；再将蠕动泵导管入口端插入上述胶囊基质和菌泥的混合物中，选择13G注射器针头，使胶囊直径为2毫米(如图1所示)，将注射器针头与蠕动泵导管出口端密封连接，再固定到盛有定型剂的玻璃杯上方，针头出口距离液面8cm；启动蠕动泵，调整蠕动泵转速使胶囊基质和菌泥的混合物逐滴滴入定型剂中；一旦液滴到达定型剂会立即形成胶囊球体；将获得的胶囊沥干后放置30分钟进行固化；之后使用真空泵将胶囊间残留的定型剂吸干，然后用无菌生理盐水洗涤胶囊3次，并用真空泵吸干胶囊间残留的洗液；
(5)胶囊的储存与使用：将上述胶囊分装于西林瓶中，西林瓶用T型胶塞和铝箔盖密封，贴上标签，冻存于-80℃冰箱，现用现取。
实施例2：不同甘油浓度对口服胶囊中菌群活性的保护效果对比试验
为了保护菌群移植小胶囊中肠道菌群免受冷冻损伤，本发明在制作小胶囊时加入无毒可食用的冻存保护剂，虽然大多数非渗透性大分子冷冻保护剂是可食用材料，但本发明中小胶囊基质--海藻酸钠溶液是一种黏稠溶液，非渗透性大分子冷冻保护剂难以溶解其中，因此，本发明选用食用级甘油作为小胶囊冷冻保护剂。
本发明还检验了不同浓度甘油对小胶囊活菌的保护作用：冻存保护剂可以保护细菌或细胞在冷冻保存过程中免受冷冻损伤。冷冻保护剂分为渗透性小分子冷冻保护剂(甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等)和非渗透性大分子冷冻保护剂(聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及羟乙基淀粉等)。甘油浓度在0％～15％，按以下步骤进行：
(1)分别制备含0％、5％、8％、10％、12％、15％甘油的胶囊基质(其他组分同实施例1)和定型剂(同实施例1)，于121℃高压灭菌15分钟；
(2)菌泥制备和小胶囊制作同实施例1；
(3)取0.1g新鲜制备的肠菌小胶囊加入1ml 1％柠檬酸钠溶液(10:1)，摇动孵育30分钟，小胶囊完全溶解后，用生理盐水进行系列稀释，取100μl 10-7稀释度菌液铺于改良GAM平板上，将平板置于厌氧盒中于37℃培养36～48h。然后计算平板上的克隆数，通过计算获得小胶囊包裹的活性肠菌数量。计算公式：平板上克隆数*10*稀释度(FCU/g)；
(4)小胶囊-80℃冻存一周后，取0.1g小胶囊加入1ml 1％柠檬酸钠溶液，按上述方法进行活菌培养和计数；
(5)存活率为冻存一周后小胶囊单位活菌数与新鲜胶囊单位活菌量的百分比，计算公式：冻存一周活菌量(CFU/g)/
新鲜活菌量(CFU/g)*100％。
表1不同浓度甘油对小胶囊包裹肠道菌群活性的保护作用
Figure BDA0003521742170000101
注：新鲜胶囊为制作完成即进行活菌量检测，冻存胶囊为-80℃冻存1周后进行活菌量检测。
以上结果显示，10％甘油对肠菌活性的保护效果最佳。
实施例3：本发明制备的口服胶囊采用冻存与冻干保存的活菌数量及菌群丰度的对比试验
(1)冻存肠菌小胶囊的制备同实施例1；一部分小胶囊直接冻存于-80℃冰箱，另一部分小胶囊采用博医康(Biocool)真空冷冻干燥机(Pilot 2-4H)进行冷冻干燥；
(2)取相同数量的冻存(-80℃冻存一周)和冻干(冷冻干燥)肠菌小胶囊，加入10倍体积的1％柠檬酸钠溶液，摇动孵育30分钟，小胶囊完全溶解后，用生理盐水进行系列稀释；
(3)冻存样品取100μl 10-6、冻干样品取100μl 10-6稀释度菌液铺于改良GAM平板上，将平板置于厌氧盒中于37℃培养36～48h。
培养结果见图2，可见新鲜冻存对小胶囊肠菌活性的保护作用远优于冻干保藏技术，新鲜冻存小胶囊活菌量明显高于冻干小胶囊：新鲜冻存的小胶囊活性肠道菌群丰度比冻干小胶囊大1000倍以上。
实施例4：本发明的口服胶囊经体外胃液处理的菌群活性对比试验
(1)肠菌小胶囊的制备如实施例1.
(2)配制体外胃液(胃蛋白酶3g/L,NaCl 0.9％,pH 3.0),0.22μm滤膜过滤除菌；
(3)取6只无菌EP管，分别称取0.1g肠菌小胶囊，向其中3只EP管中加入1ml体外胃液(胃液:小胶囊重量比为10:1)，向另3只EP管中加入无菌生理盐水作为对照；37℃摇动孵育4.5小时；(图3)
(4)取出EP管，观察肠菌小胶囊是否崩解，拍照留存；
(5)将体外胃液或生理盐水吸出移去，向EP管中加入～1ml 1％柠檬酸钠溶液(10:1)，摇动孵育30分钟，小胶囊完全溶解后，用生理盐水进行系列稀释，取100μl 10-7稀释度菌液铺于改良GAM平板上，将平板置于厌氧盒中于37℃培养36～48h(图4)。
结果显示，体外模拟胃液处理小胶囊，肠菌活性不受影响，说明按本发明技术方案制备的肠菌小胶囊，口服后不会被胃液消化，能把菌群顺利送达肠道。
实施例5：本发明的口服胶囊冻存时间的菌群活性对比试验
(1)肠菌小胶囊的制备如实施例1；
(2)同一批次的肠菌小胶囊分别在新鲜制备后、-80℃冻存1周、1个月、3个月、6个月时间点进行改良GAM平板培养法检测小胶囊活菌量(方法同实施例2)；
存活率是各个时间点活菌量与新鲜小胶囊活菌量的百分比，计算公式为：各时间点活菌含量/新鲜小胶囊活菌含量*100％。
表2-80°冻存不同时间的小胶囊中肠道菌群的存活率情况
Fresh 1w 1m 3m 6m
平板1(CFU) 457 428 446 425 411
平板2(CFU) 436 396 413 431 408
平板3(CFU) 415 453 428 419 445
活菌含量(CFU/g) 4.36*10<sup>10</sup> 4.26*10<sup>10</sup> 4.29*10<sup>10</sup> 4.25*10<sup>10</sup> 4.21*10<sup>10</sup>
存活率％ 100 97.7 98.4 97.5 96.6
以上结果表明，本发明的肠菌小胶囊在冻存状态保存6个月时，与新鲜状态的肠菌胶囊的活菌含量及菌群存活率无显著差别。
实施例6：本发明的口服小胶囊与口服油剂的肠道菌群活性对比试验
近年来，油滴剂益生菌为婴幼儿补充益生菌提供了极大的便利。油滴剂剂型的肠菌油剂可以将肠道菌群包裹在高纯度的植物油里(通常为葵花籽油)，完全隔离空气和水分，能够保持菌株高活性和长期稳定性，是低幼儿童/老年人通过口服途径进行肠菌移植的一个渠道。本发明对口服胶囊与油剂的菌群活性进行了对比试验：
(1)肠道菌群的采集如实施例1；
(2)部分菌泥制备为小胶囊，如实施例1；
(3)部分菌泥制备为油剂，方法为将菌泥冷冻干燥后以重量比1:5的比例与葵花籽油混合，制成油滴剂剂型；
(4)将小胶囊和油滴剂分别以1:10的比例加入体外胃液中，37℃摇动孵育1h和2h；
(5)小胶囊活菌量按实施例4方法进行；
(6)油滴剂活菌量按以下步骤进行检测：以8000rpm离心2分钟，移去上清，收集体外胃液处理的油滴剂中的肠道菌群沉淀，向EP管中加入初始油滴剂10倍体积的无菌生理盐水，充分重悬肠菌沉淀，然后用生理盐水进行系列稀释，取100μl 10-6稀释度菌液铺于改良GAM平板上，将平板置于厌氧盒中于37℃培养36～48h。计数平板上的活菌克隆(图5)。
表三小胶囊耐胃酸vs油剂耐胃酸情况
Figure BDA0003521742170000131
Figure BDA0003521742170000141
以上结果表明，本发明的技术方案制备的肠菌小胶囊，经过胃液消化后，活菌密度是油剂的40倍以上，因此有助于减小肠菌的口服剂量，极大提高患者接受度。
实施例7：定植效果实验
两名自闭症儿童志愿者服用了来自经严格筛选的同龄健康供体的肠菌小胶囊，通过16srDNA测序技术，分别对两名受体服用小胶囊前(pre.FMT)、服用小胶囊后一个星期(post.FMT)、以及供体(donor)的粪便样品进行肠道菌群的物种分类鉴定。根据肠道菌的组成及其相对丰度，对每名受体菌群移植前、移植后和供体肠道菌群相似度进行分析。从图6-7可见，韦恩图中，服用小胶囊一个星期后，受体肠道菌群中产生了更多的与供体一致的菌种，肠道菌群的相似度曲线与供体的曲线更趋向一致，提示受体服用肠菌小胶囊后的肠道菌群与供体的菌群更为相似，表明供体菌群在受体肠道内定植良好。本实验说明自闭症儿童口服本发明的肠菌小胶囊后肠道菌群发生明显改变，来自供体的肠道菌群得以成功定植。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (4)

1.一种用于肠道菌群移植的口服胶囊，其特征在于，所述胶囊的制备方法如下：
(1)配制胶囊基质：胶囊基质的组分由质量百分比为2％的海藻酸钠、5-15％的甘油、2％的益生元、0.9％的NaCl、余量为去离子水组成，将以上组分溶解混匀后高压灭菌，冷却后再次充分混匀并置于冰上备用；
(2)配制定型剂：定型剂由质量百分比为2％的氯化钙、0.9％的NaCl，余量为去离子水组成，将以上组分溶解混匀后高压灭菌，冷却后备用；
(3)采集肠道菌群：向经严格筛选的健康供体采集肠道菌群，采集方法为用干净无菌的大便收集器收集健康供体的大便，称重后按大便：生理盐水质量比为1：4的比例加入无菌生理盐水，搅拌均匀，然后依次用2.0mm、1.0mm、0.5mm、0.25mm孔径食品级无菌滤网过滤，去除未消化的食物残渣或较大不溶颗粒物，0.25mm孔径过滤后的滤液于4℃用6000-7000xg离心15分钟，去上清保留菌泥，菌泥用无菌生理盐水洗涤2遍，吸干无菌生理盐水后将菌泥置于冰上，所述菌泥即为肠道菌群，以上操作要在大便离开健康供体的4-10小时内完成；
(4)采用注射器挤出胶囊：按胶囊基质:菌泥质量比为3:1的比例将冷却预冷后的胶囊基质加入预先装入上述菌泥的离心管中，用搅拌器将胶囊基质和菌泥混合15分钟，使其充分混匀；再将蠕动泵导管入口端插入上述胶囊基质和菌泥的混合物中，根据需求选择不同孔径的注射器针头，使胶囊直径范围为0.06-5毫米，将注射器针头与蠕动泵导管出口端密封连接，再固定到盛有定型剂的玻璃杯上方，针头出口距离液面5～10cm；启动蠕动泵，调整蠕动泵转速使胶囊基质和菌泥的混合物逐滴滴入定型剂中；一旦液滴到达定型剂会立即形成胶囊球体；将获得的胶囊沥干后放置30分钟进行固化；之后使用真空泵将胶囊间残留的定型剂吸干，然后用无菌生理盐水洗涤胶囊3次，并用真空泵吸干胶囊间残留的洗液；
(5)胶囊的储存与使用：将上述胶囊分装于西林瓶中，西林瓶用T型胶塞和铝箔盖密封，贴上标签，冻存于-80℃冰箱，现用现取。
2.根据权利要求1所述用于肠道菌群移植的口服胶囊，其特征在于，所述胶囊基质的组分中，甘油用量为10％。
3.根据权利要求1所述用于肠道菌群移植的口服胶囊，其特征在于，其制备方法中，采集肠道菌群时，所有操作要在大便离开健康供体的6小时内完成。
4.根据权利要求1所述用于肠道菌群移植的口服胶囊，其特征在于，其制备方法中，菌泥过滤的最小孔径为0.25mm。
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