CN116712405B - 一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型及其方法 - Google Patents

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Abstract

一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型及其方法，所属生物技术领域，药物剂型为套装的冷冻胶囊剂，即大胶囊剂内置有两个小胶囊剂，大胶囊剂的胶囊壳内装有菌群大冰粒，菌群大冰粒内部置有小胶囊剂，小胶囊剂的胶囊壳内装有菌群小冰粒，菌群小冰粒和菌群大冰粒包裹有一层肠衣膜。本法发明采用冰冻制剂固定菌液，减小气味，采用大胶囊壳和衣膜保证菌剂不在胃中分解，能够到达小肠前中段部位进行外层菌剂肠溶分散，释放菌群；采用小胶囊壳和衣膜保证内层菌剂不在小肠前段部位分散，能够到达小肠中后段部位才进行肠溶分散，释放菌群；从而保证菌群到达部位更加多元化。

Description

一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型及其方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型及其制备方法。
背景技术
肠道的细菌数量庞大、种类多样，肠道菌群能通过代谢功能合成人体所需维生素，有调节免疫功能的作用。肠道菌群能够干扰免疫系统，现有技术研究发现，当人类肠道菌群环境受到破坏时，一些肠道共生微生物也可能成为病原体，导致疾病的发生。肠道菌群发生改变，能够干扰全身代谢、免疫系统，形成炎症，例如具核梭杆菌水平升高容易导致结肠腺瘤；再例如，对免疫治疗反应更好的患者，其肠道菌群也与其他反应不良的患者有明显不同，那些无法从免疫治疗中获益的患者体内缺乏一种叫做嗜黏蛋白阿克曼菌的细菌；在多年前，医院就已经采用粪菌移植的方式改善患者免疫力，调节肠道菌群对术后恢复也能够发挥很大的作用。
通过肠道菌群移植是调节肠道菌群环境的有效方法，具体是将健康人粪便中的功能菌群移植至患者胃肠道内，重建具有正常功能的肠道菌群，以此改善肠道内菌群失衡，提高免疫力。另外，癌症患者在化疗后，化疗会对肠道菌群进行破坏，化疗对肠道菌群的破坏甚至比抗生素还要严重，会产生各种体征副作用，免疫力严重降低，甚至容易感染其它疾病，产生并发症。而对于免疫力明显底下的化疗后患者，想要快速改善肠道环境，提高免疫力，医院的通常做法是移植健康人群的肠道菌群，肠道菌群从健康人群的粪便中提取或采用人工培养分选。
现有最简便的粪便菌群移植方式主要是口服和肛门注入，其中，肛门注入的方式只能局部改善肠道环境，主要改善肠道中、后位置或大肠位置的肠道菌群，并且随着肛门注入深度，患者在注入过程中感到的不适性加剧；而口服粉体胶囊或片剂形式的药剂会根据释放时间的不同，决定其改善肠道菌群的位置，有的容易在胃部发生消化，由于粉体或片剂在肠道中流动分散性差，有的只能在小肠的局部位置发生改善，到达或分布的移植位置不理想，并且药物处理不好会产生较大气味。而灌肠，或者借助鼻胃管、内窥镜插入上消化道的方式用药，则体验感非常差，用药依从性差，尤其是针对于儿童或敏感患者，一般不被接受，且用药不方便，需要借助专门的医疗器械，大幅增加成本。
发明内容
针对现有粪便菌群移植方式复杂、固体粉末或片剂药物移植位置不理想、其它方式用药体验感非常差、难以被接受，药物移植气味大，设备成本高的问题，本发明提供一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型及其制备方法，采用冰冻制剂固定并保存菌液，减小气味，采用大肠溶胶囊壳和肠衣膜包裹保证菌剂不在胃部分解，能够到达小肠前中段部位进行外层菌剂肠溶分散，释放菌群；然后采用小肠溶胶囊壳和肠衣膜保证内层菌剂不在小肠前段部位分散，能够到达小肠中后段部位才进行肠溶分散，释放菌群；从而保证菌群到达部位更加多元化，移植位置更加理想，多层胶囊释放时间不同，释放部位不同，提高菌群遍布范围。其具体技术方案如下：
一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，药物剂型为套装的冷冻胶囊剂，即大胶囊剂内置有两个小胶囊剂，所述大胶囊剂的胶囊壳内装有菌群大冰粒，所述菌群大冰粒内部置有小胶囊剂，所述小胶囊剂的胶囊壳内装有菌群小冰粒，所述菌群小冰粒和菌群大冰粒包裹有一层肠衣膜。
上述技术方案中，所述肠衣膜的制备方法为：将猪皮或牛皮提取的胶原蛋白10～15份、大豆蛋白15～25份、磷酸酯马铃薯淀粉5～15份、羧甲基纤维素钠1～3份、甘油4～8份、聚乙二醇4～8份、戊二醛0.3～1份和水5～25份，在30～35℃进行混合均匀，得到浆液，然后将浆液滴加在半胶囊模具的上表面，进行流延成膜，在35～40℃鼓风干燥得到肠衣膜坯，肠衣膜坯在温度70～80℃，湿度65～75°条件下进行熟化15～18h，得到半胶囊槽形的肠衣膜；所述肠衣膜厚度为0.04～0.06mm。
上述技术方案中，所述半胶囊模具为倒扣式的半胶囊体。
上述技术方案中，所述大胶囊剂和小胶囊剂的胶囊壳为空心肠溶胶囊；所述小胶囊剂的胶囊壳厚度为0.12～0.14mm；所述大胶囊剂的胶囊壳厚度为0.1～0.11mm；所述大胶囊剂的胶囊壳内径为小胶囊剂的胶囊壳外径的2倍以上。
本发明通过多种成分的复配制得一种肠衣膜，与一定范围厚度的大胶囊剂的胶囊壳和小胶囊剂的胶囊壳协同发挥作用，可以调控大胶囊壳在小肠前中段溶解释放菌群，小胶囊壳在小肠中后段溶解释放菌群，能够扩大菌群释放遍布范围。发明人在大量的实验中发现改变肠衣膜的成分、用量及其制备方法，以及改变壳体的厚度均会影响大小胶囊的释放位置。猜测是胶囊壳体的厚度和肠衣膜共同影响肠道内胶囊溶解速率和时间。
猪皮提取的胶原蛋白，CAS号：9064-67-9，购自湖北健楚生物医药有限公司；
大豆蛋白，CAS号：9010-10-0，购自山松生物；
磷酸酯马铃薯淀粉，CAS号：57351-99-2，购自西安浩天生物工程有限公司；
羧甲基纤维素钠，购自默克，C9481。
聚乙二醇，平均数均分子量为3350，购自默克，202444。
聚乙二醇的分子量影响它的交联性能。发明人发现使用平均数均分子量为3350的聚乙二醇，与肠衣膜的其余组分复配，得到的肠衣膜能合理调控胶囊在肠道内合适的位置释放。发明人猜测是该分子量下聚乙醇的氢键、静电作用力以及范德华作用力等相互作用，能与戊二醛、羧甲基纤维素钠、以及胶原蛋白等成分更好的交联，增加肠衣膜的稳定性以及调控其在肠道中的溶解速率，进而影响大小胶囊释放菌群的位置。
上述技术方案中，所述菌群大冰粒和菌群小冰粒为粪菌浓缩液冰冻制成。
上述一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：采集、筛选健康生物体的新鲜健康的粪便；
步骤2：将粪便加入至无菌生理盐水中，均匀搅拌后形成浑浊液，静置沉淀，取粪菌悬液；
步骤3：粪菌悬液通过棉质滤网粗滤一次，得到一级滤液，然后采用100uM滤膜压滤一次，得到二级滤液，然后采用0.25uM滤膜压滤一次，压滤出无菌液，压滤剩余液体为粪菌浓缩液；
步骤4：将半胶囊槽形的一级冷冻模具浸入甘油中，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将粪菌浓缩液进行灌模冷冻成型，脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群小冰粒，将两个半胶囊体的菌群小冰粒对合，采用胶囊壳封装，得到小胶囊剂；
步骤5：将半胶囊槽形的二级冷冻模具浸入甘油中，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将小胶囊剂置入二级冷冻模具中央，此时小胶囊剂与二级冷冻模具的模腔内壁之间形成有余量空间；然后将粪菌浓缩液进行灌模充满余量空间，冷冻成型，脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群大冰粒，将两个半胶囊体的菌群大冰粒对合，采用胶囊壳封装，得到大胶囊剂，即菌群移植药物剂型；口服或冷冻保存待服用。
上述方法的步骤2中，所述粪便与无菌生理盐水的质量比为，粪便：无菌生理盐水＝1：5～8。
上述方法的步骤3中，所述粪菌浓缩液体积为二级滤液体积的0.5～5％。
上述方法的步骤4中，所述冷冻成型后，将一级冷冻模具的上表面刮平，去除多余冰冻料；
上述方法的步骤5中，所述冷冻成型后，将二级冷冻模具的上表面刮平，去除多余冰冻料。
上述制备方法中，所述二级冷冻模具的模腔宽度大于一级冷冻模具的2倍模腔宽度。
本发明的一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型及其制备方法，与现有技术相比，有益效果为：
一、本发明菌群移植采用冷冻胶囊剂，冷冻粪菌浓缩液能够降低刺激性气味，还能够很好的保持菌群活性。
二、本发明菌群移植采用大胶囊剂内置两个小胶囊剂，能够错开时间释放，大胶囊壳在小肠前中段溶解释放菌群，小胶囊壳在小肠中后段溶解释放菌群，能够扩大菌群释放遍布范围。
三、本发明药物剂型的粪菌浓缩液冰粒与胶囊壳之间设置有肠衣膜，第一方面，肠衣膜能够更好的封堵气味；第二方面，肠衣膜提高密封性，能够很好的防止粪菌浓缩液溶化后发生渗漏，在冷冻储存不当时，短时间内不会发生液体渗漏，造成药剂无法使用；第三方面，在储存不当冰粒溶化时、到达胃、肠部冰粒溶化时，肠衣膜还能够为菌群提供一定营养物质，保持菌群活性；第四方面，肠衣膜能够辅助胶囊壳，隔离菌液，防止药剂在胃部被溶解消化。
四、本发明药剂肠衣膜的成分、形状、厚度是针对于冰冻胶囊药剂而专门设计的，适用于冰冻菌群移植药物胶囊剂型。肠衣膜的厚度设计0.04～0.06mm，即能够保证良好密封性，又不占据空间，也能够配合胶囊壳达到合理溶解释放时间。
五、本发明设计内胶囊壳厚度为0.12～0.14mm，相比于常规胶囊壳略厚，再配合0.04～0.06mm的肠衣膜能够很好的延长溶解释放时间，防止内层的粪菌浓缩液过早释放。
六、本发明制备方法在提取粪菌时添加大量生理盐水混合，能够使粪菌提取更加完全，以及方便后续的沉淀和过滤粪便杂质；采用压滤方式制备粪菌浓缩液，能够有效的使菌液缩小体积，且不破坏菌株，达到移植用量，浓缩程度能够根据移植用量设定；另外，粪菌浓缩后能够有效地降低药剂服用数量，更加人性化。
七、本发明设计粪菌浓缩液不添加任何改善气味的添加剂，能够保证粪菌的纯度和质量，不会影响粪菌活性，不会改变粪菌储存和生存环境。
八、本发明方法设计模具浸渍涂有甘油，一方面有助于冷冻后脱模顺利，另一方面甘油粘附在肠衣膜外表面，能够便于顺滑封装，在一方面甘油还具有封堵肠衣膜包裹缝隙的作用，增加肠衣膜密封性。
九、本发明方法制备的冷冻胶囊剂无刺激性气味，外观等同于普通胶囊，口服依从性很好。相比于现有技术的肛门注入、灌肠、鼻胃管或内窥镜注入的服用方式，更加容易，无需医院的专业设备，节省医院资源。相比于现有的口服固体颗粒胶囊制备成本更低，粪菌的原始性状态更好，多部位释放，相比于粉末胶囊或片剂药物，本发明胶囊中菌液分层释放，且液体流动性好，能够扩大菌群释放遍布范围。
十、本发明设计的药剂制备方法和冰冻模具也是为冰冻菌群移植药物胶囊剂型专门设计的，操作方便，具有良好的实用性。
附图说明
图1为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的2个菌群小冰粒对合前状态示意图；
图2为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的2个菌群小冰粒对合后状态示意图；
图3为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的2个菌群小冰粒对合后置入胶囊壳的状态示意图；
图4为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的小胶囊剂示意图，
图5为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的一级冷冻模具正剖视图；
图6为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的一级冷冻模具俯视图；
图7为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的2个菌群大冰粒对合前状态示意图；
图8为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的2个菌群大冰粒对合后状态示意图；
图9为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的2个菌群大冰粒对合后置入胶囊壳的状态示意图；
图10为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的示意图；
图11为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的二级冷冻模具正剖视图；
图12为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的二级冷冻模具俯视图；
图13为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的包覆菌群小冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具的正视图；
图14为本发明实施例一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的包覆菌群大冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具的正视图；
图1-14中：1-一级冷冻模具，1.1-菌群小冰粒I，1.2-菌群小冰粒II；2-小胶囊管，2.1-小胶囊管帽；3-二级冷冻模具，3.1-菌群大冰粒I，3.2-菌群大冰粒II；4-大胶囊管，4.1-大胶囊管帽；5.1-半胶囊模具I，5.2-半胶囊模具II。
具体实施方式
下面结合具体实施案例和附图1-14对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
实施例1
一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，药物剂型为套装的冷冻胶囊剂，即大胶囊剂内置有两个小胶囊剂，大胶囊剂的胶囊壳内装有菌群大冰粒，菌群大冰粒内部置有小胶囊剂，小胶囊剂的胶囊壳内装有菌群小冰粒，菌群小冰粒和菌群大冰粒包裹有一层肠衣膜。菌群大冰粒和菌群小冰粒为粪菌浓缩液冰冻制成。
肠衣膜的制备方法为：将猪皮提取的胶原蛋白12份、大豆蛋白20份、磷酸酯马铃薯淀粉10份、羧甲基纤维素钠2份、甘油5份、聚乙二醇6份、戊二醛0.5份和水10份，在35℃进行混合均匀，得到浆液，然后将浆液滴加在半胶囊模具的上表面，进行流延成膜，在40℃鼓风干燥得到肠衣膜坯，肠衣膜坯在温度80℃，湿度65°条件下进行熟化18h，得到半胶囊槽形的肠衣膜；肠衣膜厚度为0.05mm。半胶囊模具为倒扣式的半胶囊体，其中，包覆菌群小冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具I 5.1如图13所示；包覆菌群大冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具II 5.2如图14所示。
上述一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：采集、筛选健康生物体的新鲜健康的粪便，即健康人的新鲜粪便(来自标准粪菌库)；
步骤2：将粪便加入至无菌生理盐水中，粪便与无菌生理盐水的质量比为，粪便∶无菌生理盐水＝1∶6；均匀搅拌后形成浑浊液，静置沉淀，取粪菌悬液；
步骤3：粪菌悬液通过棉质滤网粗滤一次，得到一级滤液，然后采用100uM滤膜压滤一次，得到二级滤液，然后采用0.25uM滤膜压滤一次，压滤出无菌液，压滤剩余液体为粪菌浓缩液，粪菌浓缩液体积为二级滤液体积的4％；
步骤4：将半胶囊槽形的一级冷冻模具1浸入甘油中，一级冷冻模具1如图5-6所示，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将粪菌浓缩液进行灌模，在-10℃冷冻成型，将一级冷冻模具1的上表面刮平，去除多余冰冻料；脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群小冰粒，即菌群小冰粒I 1.1和菌群小冰粒II 1.2，如图1所示；将菌群小冰粒I 1.1和菌群小冰粒II 1.2对合，如图2所示；然后装入小胶囊管2中，并用小胶囊管帽2.1封装，如图3-4所示，得到小胶囊剂；
步骤5：将半胶囊槽形的二级冷冻模具3浸入甘油中，二级冷冻模具3如图11-12所示，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将小胶囊剂置入二级冷冻模具3中央，此时小胶囊剂与二级冷冻模具3的模腔内壁之间形成有余量空间；然后将粪菌浓缩液进行灌模充满余量空间，在-10℃冷冻成型，将二级冷冻模具3的上表面刮平，去除多余冰冻料，脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群大冰粒，即菌群大冰粒I 3.1和菌群大冰粒II 3.2，如图7所示；将菌群大冰粒I 3.1和菌群大冰粒II 3.2对合，如图8所示；然后装入大胶囊管4中，并用大胶囊管帽4.1封装，如图9-10所示，得到大胶囊剂，即菌群移植药物剂型，口服或在-8℃冷冻保存待服用。
二级冷冻模具的模腔宽度大于一级冷冻模具的2倍模腔宽度。
本实施例胶囊壳为空心肠溶胶囊；采用的大胶囊管4为常规2#胶囊管，壳厚度为0.105mm；小胶囊管2的壳厚度为0.13mm，壳外径为2.90mm。
本实施例制备的冷冻胶囊剂置于模拟胃液中3h胶囊不溶解，不泄漏菌液；将冷冻胶囊剂置于模拟肠液中，测定胶囊溶解和菌群释放时间，大胶囊壳和外层肠衣膜在35min溶解释放菌群，小胶囊壳和内层肠衣膜在113min溶解释放菌群。本实验冷冻胶囊剂在模拟肠液中的释放时间能够推测出大胶囊和小胶囊在肠道中的溶解释放时间，由于是分层释放，产生了不同的释放时间，随着时间推移和肠道蠕动，每层胶囊到达的肠道位置不同，即外层大胶囊能够在小肠肠道前中段溶解释放菌群，液态菌液易于分散，并随着肠道蠕动提高菌液流动距离和分布面积；内层小胶囊延后释放，在较长的时间差内，小胶囊能够随着肠道蠕动，到达小肠中后段进行溶解并释放菌群，液态菌液易于分散，并随着肠道蠕动提高菌液流动距离和分布面积；进而不同的释放时间，胶囊达到的部位不同，能够扩大菌群释放遍布范围。
对两个供试者(第一个供试者为38岁男性，第二个供试者为40岁男性)进行冷冻胶囊剂服用实验，检测菌群释放分布位置：
1、按照本实施例的工艺制备小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒不含造影剂)，然后取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，加入至大胶囊中，制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内含有造影剂)，第一个供试者同时空腹服用3颗胶囊(实验前3小时内无进食)，在服用160min后进行肠道镜检，观察造影剂成像区域。
2、取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，按照本实施例的工艺制备成小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒含有造影剂)，之后制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内不含造影剂)，第二个供试者同时空腹服用3颗胶囊(实验前3小时内无进食)，在服用250min后进行肠道镜检，根据进入深度观察造影剂成像区域。
经检测第一个供试者观察到的成像区域在小肠肠道前中段；经检测第二个供试者观察到的成像区域在小肠肠道中后段。两个检测结果相结合，能够证明，不同层的胶囊溶解时间不同，达到肠道的位置不同，在不同部位进行释放菌液，并且随着肠道蠕动，液体流动性好，能够扩大菌群遍布范围。
目前，通过采用正常健康者的肠道菌群移植到患者肠道内，以调节患者肠道菌群环境，属于常规技术手段，包括改善各种肠内、肠外疾病，菌群灌肠也是一种现有常规技术手段，菌群具有改善作用已经有现有技术相关报道和实验证明，因此菌群肠道改善作用不是本实施例技术的创新点，本实施例技术不是一种新药，而是一种新胶囊剂型及制备方法，是针对剂型结构的改进，改善菌群移植的依从性，因此只需要对胶囊剂型进行菌群释放时间、部位的实验检测即可；无需对菌群移植后发挥改善肠道环境作用进行临床证实试验。
实施例2
一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，药物剂型为套装的冷冻胶囊剂，即大胶囊剂内置有两个小胶囊剂，大胶囊剂的胶囊壳内装有菌群大冰粒，菌群大冰粒内部置有小胶囊剂，小胶囊剂的胶囊壳内装有菌群小冰粒，菌群小冰粒和菌群大冰粒包裹有一层肠衣膜。菌群大冰粒和菌群小冰粒为粪菌浓缩液冰冻制成。
肠衣膜的制备方法为：将猪皮提取的胶原蛋白15份、大豆蛋白20份、磷酸酯马铃薯淀粉15份、羧甲基纤维素钠3份、甘油6份、聚乙二醇6份、戊二醛0.8份和水20份，在305℃进行混合均匀，得到浆液，然后将浆液滴加在半胶囊模具的上表面，进行流延成膜，在35℃鼓风干燥得到肠衣膜坯，肠衣膜坯在温度75℃，湿度75°条件下进行熟化16h，得到半胶囊槽形的肠衣膜；肠衣膜厚度为0.04mm。半胶囊模具为倒扣式的半胶囊体，其中，包覆菌群小冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具I 5.1如图13所示；包覆菌群大冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具II 5.2如图14所示。
上述一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：采集、筛选健康生物体的新鲜健康的粪便，即健康人的新鲜粪便；
步骤2：将粪便加入至无菌生理盐水中，粪便与无菌生理盐水的质量比为，粪便∶无菌生理盐水＝1∶5；均匀搅拌后形成浑浊液，静置沉淀，取粪菌悬液；
步骤3：粪菌悬液通过棉质滤网粗滤一次，得到一级滤液，然后采用100uM滤膜压滤一次，得到二级滤液，然后采用0.25uM滤膜压滤一次，压滤出无菌液，压滤剩余液体为粪菌浓缩液，粪菌浓缩液体积为二级滤液体积的3％；
步骤4：将半胶囊槽形的一级冷冻模具1浸入甘油中，一级冷冻模具1如图5-6所示，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将粪菌浓缩液进行灌模，在-8℃冷冻成型，将一级冷冻模具1的上表面刮平，去除多余冰冻料；脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群小冰粒，即菌群小冰粒I 1.1和菌群小冰粒II 1.2，如图1所示；将菌群小冰粒I 1.1和菌群小冰粒II 1.2对合，如图2所示；然后装入小胶囊管2中，并用小胶囊管帽2.1封装，如图3-4所示，得到小胶囊剂；
步骤5：将半胶囊槽形的二级冷冻模具3浸入甘油中，二级冷冻模具3如图11-12所示，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将小胶囊剂置入二级冷冻模具3中央，此时小胶囊剂与二级冷冻模具3的模腔内壁之间形成有余量空间；然后将粪菌浓缩液进行灌模充满余量空间，在-8℃冷冻成型，将二级冷冻模具3的上表面刮平，去除多余冰冻料，脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群大冰粒，即菌群大冰粒I 3.1和菌群大冰粒II 3.2，如图7所示；将菌群大冰粒I 3.1和菌群大冰粒II 3.2对合，如图8所示；然后装入大胶囊管4中，并用大胶囊管帽4.1封装，如图9-10所示，得到大胶囊剂，即菌群移植药物剂型，口服或在-8℃冷冻保存待服用。
二级冷冻模具的模腔宽度大于一级冷冻模具的2倍模腔宽度。
本实施例胶囊壳为空心肠溶胶囊；采用的大胶囊管4为常规3#胶囊管，壳厚度为0.105mm；小胶囊管2的壳厚度为0.12mm，壳外径为2.65mm。
本实施例制备的冷冻胶囊剂置于模拟胃液中3h胶囊不溶解，不泄漏菌液；将冷冻胶囊剂置于模拟肠液中，测定胶囊溶解和菌群释放时间，大胶囊壳和外层肠衣膜在31min溶解释放菌群，小胶囊壳和内层肠衣膜在96min溶解释放菌群。本实验冷冻胶囊剂在模拟肠液中的释放时间能够推测出大胶囊和小胶囊在肠道中的溶解释放时间，由于是分层释放，产生了不同的释放时间，随着时间推移和肠道蠕动，每层胶囊到达的肠道位置不同，即外层大胶囊能够在小肠肠道前中段溶解释放菌群，液态菌液易于分散，并随着肠道蠕动提高菌液流动距离和分布面积；内层小胶囊延后释放，在较长的时间差内，小胶囊能够随着肠道蠕动，到达小肠中后段进行溶解并释放菌群，液态菌液易于分散，并随着肠道蠕动提高菌液流动距离和分布面积；进而不同的释放时间，胶囊达到的部位不同，能够扩大菌群释放遍布范围。
对两个供试者(第一个供试者为38岁男性，第二个供试者为40岁男性)进行冷冻胶囊剂服用实验，检测菌群释放分布位置：
1、按照本实施例的工艺制备小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒不含造影剂)，然后取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，加入至大胶囊中，制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内含有造影剂)，第一个供试者同时空腹服用4颗胶囊(实验前3小时内无进食)，在服用170min后进行肠道镜检，观察造影剂成像区域。
2、取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，按照本实施例的工艺制备成小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒含有造影剂)，之后制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内不含造影剂)，第二个供试者同时空腹服用4颗胶囊(实验前3小时内无进食)，在服用230min后进行肠道镜检，根据进入深度观察造影剂成像区域。
经检测第一个供试者观察到的成像区域在小肠肠道前中段；经检测第二个供试者观察到的成像区域在小肠肠道中后段。两个检测结果相结合，能够证明，不同层的胶囊溶解时间不同，达到肠道的位置不同，在不同部位进行释放菌液，并且随着肠道蠕动，液体流动性好，能够扩大菌群遍布范围。
目前，通过采用正常健康者的肠道菌群移植到患者肠道内，以调节患者肠道菌群环境，属于常规技术手段，包括改善各种肠内、肠外疾病，菌群灌肠也是一种现有常规技术手段，菌群具有改善作用已经有现有技术相关报道和实验证明，因此菌群肠道改善作用不是本实施例技术的创新点，本实施例技术不是一种新药，而是一种新胶囊剂型及制备方法，是针对剂型结构的改进，改善菌群移植的依从性，因此只需要对胶囊剂型进行菌群释放时间、部位的实验检测即可；无需对菌群移植后发挥改善肠道环境作用进行临床证实试验。
实施例3
一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，药物剂型为套装的冷冻胶囊剂，即大胶囊剂内置有两个小胶囊剂，大胶囊剂的胶囊壳内装有菌群大冰粒，菌群大冰粒内部置有小胶囊剂，小胶囊剂的胶囊壳内装有菌群小冰粒，菌群小冰粒和菌群大冰粒包裹有一层肠衣膜。菌群大冰粒和菌群小冰粒为粪菌浓缩液冰冻制成。
肠衣膜的制备方法为：将猪皮提取的胶原蛋白10份、大豆蛋白25份、磷酸酯马铃薯淀粉10份、羧甲基纤维素钠1份、甘油4份、聚乙二醇5份、戊二醛1份和水15份，在34℃进行混合均匀，得到浆液，然后将浆液滴加在半胶囊模具的上表面，进行流延成膜，在38℃鼓风干燥得到肠衣膜坯，肠衣膜坯在温度75℃，湿度70°条件下进行熟化15h，得到半胶囊槽形的肠衣膜；肠衣膜厚度为0.06mm。半胶囊模具为倒扣式的半胶囊体，其中，包覆菌群小冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具I 5.1如图13所示；包覆菌群大冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具II5.2如图14所示。
上述一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：采集、筛选健康生物体的新鲜健康的粪便，即健康人的新鲜粪便；
步骤2：将粪便加入至无菌生理盐水中，粪便与无菌生理盐水的质量比为，粪便∶无菌生理盐水＝1∶8；均匀搅拌后形成浑浊液，静置沉淀，取粪菌悬液；
步骤3：粪菌悬液通过棉质滤网粗滤一次，得到一级滤液，然后采用100uM滤膜压滤一次，得到二级滤液，然后采用0.25uM滤膜压滤一次，压滤出无菌液，压滤剩余液体为粪菌浓缩液，粪菌浓缩液体积为二级滤液体积的5％；
步骤4：将半胶囊槽形的一级冷冻模具1浸入甘油中，一级冷冻模具1如图5-6所示，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将粪菌浓缩液进行灌模，在-15℃冷冻成型，将一级冷冻模具1的上表面刮平，去除多余冰冻料；脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群小冰粒，即菌群小冰粒I 1.1和菌群小冰粒II 1.2，如图1所示；将菌群小冰粒I 1.1和菌群小冰粒II 1.2对合，如图2所示；然后装入小胶囊管2中，并用小胶囊管帽2.1封装，如图3-4所示，得到小胶囊剂；
步骤5：将半胶囊槽形的二级冷冻模具3浸入甘油中，二级冷冻模具3如图11-12所示，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将小胶囊剂置入二级冷冻模具3中央，此时小胶囊剂与二级冷冻模具3的模腔内壁之间形成有余量空间；然后将粪菌浓缩液进行灌模充满余量空间，在-15℃冷冻成型，将二级冷冻模具3的上表面刮平，去除多余冰冻料，脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群大冰粒，即菌群大冰粒I 3.1和菌群大冰粒II 3.2，如图7所示；将菌群大冰粒I 3.1和菌群大冰粒II 3.2对合，如图8所示；然后装入大胶囊管4中，并用大胶囊管帽4.1封装，如图9-10所示，得到大胶囊剂，即菌群移植药物剂型，口服或在-10℃冷冻保存待服用。
二级冷冻模具的模腔宽度大于一级冷冻模具的2倍模腔宽度。
本实施例胶囊壳为空心肠溶胶囊；采用的大胶囊管4为常规1#胶囊管，壳厚度为0.11mm；小胶囊管2的壳厚度为0.14mm，壳外径为3.20mm。
本实施例制备的冷冻胶囊剂置于模拟胃液中3h胶囊不溶解，不泄漏菌液；将冷冻胶囊剂置于模拟肠液中，测定胶囊溶解和菌群释放时间，大胶囊壳和外层肠衣膜在48min溶解释放菌群，小胶囊壳和内层肠衣膜在136min溶解释放菌群。本实验冷冻胶囊剂在模拟肠液中的释放时间能够推测出大胶囊和小胶囊在肠道中的溶解释放时间，由于是分层释放，产生了不同的释放时间，随着时间推移和肠道蠕动，每层胶囊到达的肠道位置不同，即外层大胶囊能够在小肠肠道前中段溶解释放菌群，液态菌液易于分散，并随着肠道蠕动提高菌液流动距离和分布面积；内层小胶囊延后释放，在较长的时间差内，小胶囊能够随着肠道蠕动，到达小肠中后段进行溶解并释放菌群，液态菌液易于分散，并随着肠道蠕动提高菌液流动距离和分布面积；进而不同的释放时间，胶囊达到的部位不同，能够扩大菌群释放遍布范围。
对两个供试者(第一个供试者为38岁男性，第二个供试者为40岁男性)进行冷冻胶囊剂服用实验，检测菌群释放分布位置：
1、按照本实施例的工艺制备小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒不含造影剂)，然后取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，加入至大胶囊中，制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内含有造影剂)，第一个供试者同时空腹服用4颗胶囊(实验前3小时内无进食)，在服用180min后进行肠道镜检，观察造影剂成像区域。
2、取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，按照本实施例的工艺制备成小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒含有造影剂)，之后制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内不含造影剂)，第二个供试者同时空腹服用4颗胶囊(实验前3小时内无进食)，在服用280min后进行肠道镜检，根据进入深度观察造影剂成像区域。
经检测第一个供试者观察到的成像区域在小肠肠道前中段；经检测第二个供试者观察到的成像区域在小肠肠道中后段。两个检测结果相结合，能够证明，不同层的胶囊溶解时间不同，达到肠道的位置不同，在不同部位进行释放菌液，并且随着肠道蠕动，液体流动性好，能够扩大菌群遍布范围。
目前，通过采用正常健康者的肠道菌群移植到患者肠道内，以调节患者肠道菌群环境，属于常规技术手段，包括改善各种肠内、肠外疾病，菌群灌肠也是一种现有常规技术手段，菌群具有改善作用已经有现有技术相关报道和实验证明，因此菌群肠道改善作用不是本实施例技术的创新点，本实施例技术不是一种新药，而是一种新胶囊剂型及制备方法，是针对剂型结构的改进，改善菌群移植的依从性，因此只需要对胶囊剂型进行菌群释放时间、部位的实验检测即可；无需对菌群移植后发挥改善肠道环境作用进行临床证实试验。
实施例4
一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，药物剂型为套装的冷冻胶囊剂，即大胶囊剂内置有两个小胶囊剂，大胶囊剂的胶囊壳内装有菌群大冰粒，菌群大冰粒内部置有小胶囊剂，小胶囊剂的胶囊壳内装有菌群小冰粒，菌群小冰粒和菌群大冰粒包裹有一层肠衣膜。菌群大冰粒和菌群小冰粒为粪菌浓缩液冰冻制成。
肠衣膜的制备方法为：将猪皮提取的胶原蛋白15份、大豆蛋白15份、磷酸酯马铃薯淀粉15份、羧甲基纤维素钠1份、甘油8份、聚乙二醇8份、戊二醛1份和水14份，在35℃进行混合均匀，得到浆液，然后将浆液滴加在半胶囊模具的上表面，进行流延成膜，在35℃鼓风干燥得到肠衣膜坯，肠衣膜坯在温度70℃，湿度75°条件下进行熟化17h，得到半胶囊槽形的肠衣膜；肠衣膜厚度为0.05mm。半胶囊模具为倒扣式的半胶囊体，其中，包覆菌群小冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具I 5.1如图13所示；包覆菌群大冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具II5.2如图14所示。
上述一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：采集、筛选健康生物体的新鲜健康的粪便，即健康人的新鲜粪便；
步骤2：将粪便加入至无菌生理盐水中，粪便与无菌生理盐水的质量比为，粪便∶无菌生理盐水＝1∶7；均匀搅拌后形成浑浊液，静置沉淀，取粪菌悬液；
步骤3：粪菌悬液通过棉质滤网粗滤一次，得到一级滤液，然后采用100uM滤膜压滤一次，得到二级滤液，然后采用0.25uM滤膜压滤一次，压滤出无菌液，压滤剩余液体为粪菌浓缩液，粪菌浓缩液体积为二级滤液体积的0.5％；
步骤4：将半胶囊槽形的一级冷冻模具1浸入甘油中，一级冷冻模具1如图5-6所示，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将粪菌浓缩液进行灌模，在-8℃冷冻成型，将一级冷冻模具1的上表面刮平，去除多余冰冻料；脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群小冰粒，即菌群小冰粒I 1.1和菌群小冰粒II 1.2，如图1所示；将菌群小冰粒I 1.1和菌群小冰粒II 1.2对合，如图2所示；然后装入小胶囊管2中，并用小胶囊管帽2.1封装，如图3-4所示，得到小胶囊剂；
步骤5：将半胶囊槽形的二级冷冻模具3浸入甘油中，二级冷冻模具3如图11-12所示，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将小胶囊剂置入二级冷冻模具3中央，此时小胶囊剂与二级冷冻模具3的模腔内壁之间形成有余量空间；然后将粪菌浓缩液进行灌模充满余量空间，在-8℃冷冻成型，将二级冷冻模具3的上表面刮平，去除多余冰冻料，脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群大冰粒，即菌群大冰粒I 3.1和菌群大冰粒II 3.2，如图7所示；将菌群大冰粒I 3.1和菌群大冰粒II 3.2对合，如图8所示；然后装入大胶囊管4中，并用大胶囊管帽4.1封装，如图9-10所示，得到大胶囊剂，即菌群移植药物剂型，口服或在-8℃冷冻保存待服用。
二级冷冻模具的模腔宽度大于一级冷冻模具的2倍模腔宽度。
本实施例胶囊壳为空心肠溶胶囊；采用的大胶囊管4为常规2#胶囊管，壳厚度为0.105mm；小胶囊管2的壳厚度为0.12mm，壳外径为2.85mm。
本实施例制备的冷冻胶囊剂置于模拟胃液中3h胶囊不溶解，不泄漏菌液；将冷冻胶囊剂置于模拟肠液中，测定胶囊溶解和菌群释放时间，大胶囊壳和外层肠衣膜在36min溶解释放菌群，小胶囊壳和内层肠衣膜在118min溶解释放菌群。本实验冷冻胶囊剂在模拟肠液中的释放时间能够推测出大胶囊和小胶囊在肠道中的溶解释放时间，由于是分层释放，产生了不同的释放时间，随着时间推移和肠道蠕动，每层胶囊到达的肠道位置不同，即外层大胶囊能够在小肠肠道前中段溶解释放菌群，液态菌液易于分散，并随着肠道蠕动提高菌液流动距离和分布面积；内层小胶囊延后释放，在较长的时间差内，小胶囊能够随着肠道蠕动，到达小肠中后段进行溶解并释放菌群，液态菌液易于分散，并随着肠道蠕动提高菌液流动距离和分布面积；进而不同的释放时间，胶囊达到的部位不同，能够扩大菌群释放遍布范围。
对两个供试者(第一个供试者为38岁男性，第二个供试者为40岁男性)进行冷冻胶囊剂服用实验，检测菌群释放分布位置：
1、按照本实施例的工艺制备小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒不含造影剂)，然后取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，加入至大胶囊中，制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内含有造影剂)，第一个供试者同时空腹服用3颗胶囊(实验前2小时内无进食)，在服用160min后进行肠道镜检，观察造影剂成像区域。
2、取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，按照本实施例的工艺制备成小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒含有造影剂)，之后制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内不含造影剂)，第二个供试者同时空腹服用3颗胶囊(实验前2小时内无进食)，在服用250min后进行肠道镜检，根据进入深度观察造影剂成像区域。
经检测第一个供试者观察到的成像区域在小肠肠道前中段；经检测第二个供试者观察到的成像区域在小肠肠道中后段。两个检测结果相结合，能够证明，不同层的胶囊溶解时间不同，达到肠道的位置不同，在不同部位进行释放菌液，并且随着肠道蠕动，液体流动性好，能够扩大菌群遍布范围。
目前，通过采用正常健康者的肠道菌群移植到患者肠道内，以调节患者肠道菌群环境，属于常规技术手段，包括改善各种肠内、肠外疾病，菌群灌肠也是一种现有常规技术手段，菌群具有改善作用已经有现有技术相关报道和实验证明，因此菌群肠道改善作用不是本实施例技术的创新点，本实施例技术不是一种新药，而是一种新胶囊剂型及制备方法，是针对剂型结构的改进，改善菌群移植的依从性，因此只需要对胶囊剂型进行菌群释放时间、部位的实验检测即可；无需对菌群移植后发挥改善肠道环境作用进行临床证实试验。
实施例5
一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，药物剂型为套装的冷冻胶囊剂，即大胶囊剂内置有两个小胶囊剂，大胶囊剂的胶囊壳内装有菌群大冰粒，菌群大冰粒内部置有小胶囊剂，小胶囊剂的胶囊壳内装有菌群小冰粒，菌群小冰粒和菌群大冰粒包裹有一层肠衣膜。菌群大冰粒和菌群小冰粒为粪菌浓缩液冰冻制成。
肠衣膜的制备方法为：将猪皮提取的胶原蛋白14份、大豆蛋白22份、磷酸酯马铃薯淀粉12份、羧甲基纤维素钠2.5份、甘油5.5份、聚乙二醇6.5份、戊二醛0.6份和水15份，在35℃进行混合均匀，得到浆液，然后将浆液滴加在半胶囊模具的上表面，进行流延成膜，在40℃鼓风干燥得到肠衣膜坯，肠衣膜坯在温度70℃，湿度65°条件下进行熟化15h，得到半胶囊槽形的肠衣膜；肠衣膜厚度为0.05mm。半胶囊模具为倒扣式的半胶囊体，其中，包覆菌群小冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具I5.1如图13所示；包覆菌群大冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具II5.2如图14所示。
上述一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：采集、筛选健康生物体的新鲜健康的粪便，即健康人的新鲜粪便；
步骤2：将粪便加入至无菌生理盐水中，粪便与无菌生理盐水的质量比为，粪便∶无菌生理盐水＝1∶6.5；均匀搅拌后形成浑浊液，静置沉淀，取粪菌悬液；
步骤3：粪菌悬液通过棉质滤网粗滤一次，得到一级滤液，然后采用100uM滤膜压滤一次，得到二级滤液，然后采用0.25uM滤膜压滤一次，压滤出无菌液，压滤剩余液体为粪菌浓缩液，粪菌浓缩液体积为二级滤液体积的2％；
步骤4：将半胶囊槽形的一级冷冻模具1浸入甘油中，一级冷冻模具1如图5-6所示，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将粪菌浓缩液进行灌模，在-9℃冷冻成型，将一级冷冻模具1的上表面刮平，去除多余冰冻料；脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群小冰粒，即菌群小冰粒I 1.1和菌群小冰粒II 1.2，如图1所示；将菌群小冰粒I 1.1和菌群小冰粒II 1.2对合，如图2所示；然后装入小胶囊管2中，并用小胶囊管帽2.1封装，如图3_4所示，得到小胶囊剂；
步骤5：将半胶囊槽形的二级冷冻模具3浸入甘油中，二级冷冻模具3如图11-12所示，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将小胶囊剂置入二级冷冻模具3中央，此时小胶囊剂与二级冷冻模具3的模腔内壁之间形成有余量空间；然后将粪菌浓缩液进行灌模充满余量空间，在-9℃冷冻成型，将二级冷冻模具3的上表面刮平，去除多余冰冻料，脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群大冰粒，即菌群大冰粒I 3.1和菌群大冰粒II 3.2，如图7所示；将菌群大冰粒I 3.1和菌群大冰粒II 3.2对合，如图8所示；然后装入大胶囊管4中，并用大胶囊管帽4.1封装，如图9-10所示，得到大胶囊剂，即菌群移植药物剂型，口服或在-9℃冷冻保存待服用。
二级冷冻模具的模腔宽度大于一级冷冻模具的2倍模腔宽度。
本实施例胶囊壳为空心肠溶胶囊；采用的大胶囊管4为常规1#胶囊管，壳厚度为0.11mm；小胶囊管2的壳厚度为0.13mm，壳外径为3.00mm。
本实施例制备的冷冻胶囊剂置于模拟胃液中3h胶囊不溶解，不泄漏菌液；将冷冻胶囊剂置于模拟肠液中，测定胶囊溶解和菌群释放时间，大胶囊壳和外层肠衣膜在40min溶解释放菌群，小胶囊壳和内层肠衣膜在145min溶解释放菌群。本实验冷冻胶囊剂在模拟肠液中的释放时间能够推测出大胶囊和小胶囊在肠道中的溶解释放时间，由于是分层释放，产生了不同的释放时间，随着时间推移和肠道蠕动，每层胶囊到达的肠道位置不同，即外层大胶囊能够在小肠肠道前中段溶解释放菌群，液态菌液易于分散，并随着肠道蠕动提高菌液流动距离和分布面积；内层小胶囊延后释放，在较长的时间差内，小胶囊能够随着肠道蠕动，到达小肠中后段进行溶解并释放菌群，液态菌液易于分散，并随着肠道蠕动提高菌液流动距离和分布面积；进而不同的释放时间，胶囊达到的部位不同，能够扩大菌群释放遍布范围。
对两个供试者(第一个供试者为38岁男性，第二个供试者为40岁男性)进行冷冻胶囊剂服用实验，检测菌群释放分布位置：
1、按照本实施例的工艺制备小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒不含造影剂)，然后取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，加入至大胶囊中，制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内含有造影剂)，第一个供试者同时空腹服用2颗胶囊(实验前3小时内无进食)，在服用200min后进行肠道镜检，观察造影剂成像区域。
2、取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，按照本实施例的工艺制备成小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒含有造影剂)，之后制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内不含造影剂)，第二个供试者同时空腹服用2颗胶囊(实验前3小时内无进食)，在服用300min后进行肠道镜检，根据进入深度观察造影剂成像区域。
经检测第一个供试者观察到的成像区域在小肠肠道前中段；经检测第二个供试者观察到的成像区域在小肠肠道中后段。两个检测结果相结合，能够证明，不同层的胶囊溶解时间不同，达到肠道的位置不同，在不同部位进行释放菌液，并且随着肠道蠕动，液体流动性好，能够扩大菌群遍布范围。
目前，通过采用正常健康者的肠道菌群移植到患者肠道内，以调节患者肠道菌群环境，属于常规技术手段，包括改善各种肠内、肠外疾病，菌群灌肠也是一种现有常规技术手段，菌群具有改善作用已经有现有技术相关报道和实验证明，因此菌群肠道改善作用不是本实施例技术的创新点，本实施例技术不是一种新药，而是一种新胶囊剂型及制备方法，是针对剂型结构的改进，改善菌群移植的依从性，因此只需要对胶囊剂型进行菌群释放时间、部位的实验检测即可；无需对菌群移植后发挥改善肠道环境作用进行临床证实试验。
实施例6
一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，药物剂型为套装的冷冻胶囊剂，即大胶囊剂内置有两个小胶囊剂，大胶囊剂的胶囊壳内装有菌群大冰粒，菌群大冰粒内部置有小胶囊剂，小胶囊剂的胶囊壳内装有菌群小冰粒，菌群小冰粒和菌群大冰粒包裹有一层肠衣膜。菌群大冰粒和菌群小冰粒为粪菌浓缩液冰冻制成。
肠衣膜的制备方法为：将牛皮提取的胶原蛋白10份、大豆蛋白25份、磷酸酯马铃薯淀粉5份、羧甲基纤维素钠3份、甘油4份、聚乙二醇4份、戊二醛0.3份和水10份，在32℃进行混合均匀，得到浆液，然后将浆液滴加在半胶囊模具的上表面，进行流延成膜，在40℃鼓风干燥得到肠衣膜坯，肠衣膜坯在温度80℃，湿度75°条件下进行熟化18h，得到半胶囊槽形的肠衣膜；肠衣膜厚度为0.05mm。半胶囊模具为倒扣式的半胶囊体，其中，包覆菌群小冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具I 5.1如图13所示；包覆菌群大冰粒的肠衣膜流延用半胶囊模具II 5.2如图14所示。
上述一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：采集、筛选健康生物体的新鲜健康的粪便，即健康人的新鲜粪便；
步骤2：将粪便加入至无菌生理盐水中，粪便与无菌生理盐水的质量比为，粪便∶无菌生理盐水＝1∶8；均匀搅拌后形成浑浊液，静置沉淀，取粪菌悬液；
步骤3：粪菌悬液通过棉质滤网粗滤一次，得到一级滤液，然后采用100uM滤膜压滤一次，得到二级滤液，然后采用0.25uM滤膜压滤一次，压滤出无菌液，压滤剩余液体为粪菌浓缩液，粪菌浓缩液体积为二级滤液体积的0.8％；
步骤4：将半胶囊槽形的一级冷冻模具1浸入甘油中，一级冷冻模具1如图5-6所示，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将粪菌浓缩液进行灌模，在-10℃冷冻成型，将一级冷冻模具1的上表面刮平，去除多余冰冻料；脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群小冰粒，即菌群小冰粒I 1.1和菌群小冰粒II 1.2，如图1所示；将菌群小冰粒I 1.1和菌群小冰粒II 1.2对合，如图2所示；然后装入小胶囊管2中，并用小胶囊管帽2.1封装，如图3_4所示，得到小胶囊剂；
步骤5：将半胶囊槽形的二级冷冻模具3浸入甘油中，二级冷冻模具3如图11-12所示，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将小胶囊剂置入二级冷冻模具3中央，此时小胶囊剂与二级冷冻模具3的模腔内壁之间形成有余量空间；然后将粪菌浓缩液进行灌模充满余量空间，在-10℃冷冻成型，将二级冷冻模具3的上表面刮平，去除多余冰冻料，脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群大冰粒，即菌群大冰粒I 3.1和菌群大冰粒II 3.2，如图7所示；将菌群大冰粒I 3.1和菌群大冰粒II 3.2对合，如图8所示；然后装入大胶囊管4中，并用大胶囊管帽4.1封装，如图9-10所示，得到大胶囊剂，即菌群移植药物剂型，口服或在-8℃冷冻保存待服用。
二级冷冻模具的模腔宽度大于一级冷冻模具的2倍模腔宽度。
本实施例胶囊壳为空心肠溶胶囊；采用的大胶囊管4为常规4#胶囊管，壳厚度为0.10mm；小胶囊管2的壳厚度为0.12mm，壳外径为2.4mm。
本实施例制备的冷冻胶囊剂置于模拟胃液中3h胶囊不溶解，不泄漏菌液；将冷冻胶囊剂置于模拟肠液中，测定胶囊溶解和菌群释放时间，大胶囊壳和外层肠衣膜在30min溶解释放菌群，小胶囊壳和内层肠衣膜在93min溶解释放菌群。本实验冷冻胶囊剂在模拟肠液中的释放时间能够推测出大胶囊和小胶囊在肠道中的溶解释放时间，由于是分层释放，产生了不同的释放时间，随着时间推移和肠道蠕动，每层胶囊到达的肠道位置不同，即外层大胶囊能够在小肠肠道前中段溶解释放菌群，液态菌液易于分散，并随着肠道蠕动提高菌液流动距离和分布面积；内层小胶囊延后释放，在较长的时间差内，小胶囊能够随着肠道蠕动，到达小肠中后段进行溶解并释放菌群，液态菌液易于分散，并随着肠道蠕动提高菌液流动距离和分布面积；进而不同的释放时间，胶囊达到的部位不同，能够扩大菌群释放遍布范围。
对两个供试者(第一个供试者为38岁男性，第二个供试者为40岁男性)进行冷冻胶囊剂服用实验，检测菌群释放分布位置：
1、按照本实施例的工艺制备小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒不含造影剂)，然后取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，加入至大胶囊中，制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内含有造影剂)，第一个供试者同时空腹服用4颗胶囊(实验前2小时内无进食)，在服用170min后进行肠道镜检，观察造影剂成像区域。
2、取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，按照本实施例的工艺制备成小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒含有造影剂)，之后制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内不含造影剂)，第二个供试者同时空腹服用4颗胶囊(实验前2小时内无进食)，在服用240min后进行肠道镜检，根据进入深度观察造影剂成像区域。
经检测第一个供试者观察到的成像区域在小肠肠道前中段；经检测第二个供试者观察到的成像区域在小肠肠道中后段。两个检测结果相结合，能够证明，不同层的胶囊溶解时间不同，达到肠道的位置不同，在不同部位进行释放菌液，并且随着肠道蠕动，液体流动性好，能够扩大菌群遍布范围。
目前，通过采用正常健康者的肠道菌群移植到患者肠道内，以调节患者肠道菌群环境，属于常规技术手段，包括改善各种肠内、肠外疾病，菌群灌肠也是一种现有常规技术手段，菌群具有改善作用已经有现有技术相关报道和实验证明，因此菌群肠道改善作用不是本实施例技术的创新点，本实施例技术不是一种新药，而是一种新胶囊剂型及制备方法，是针对剂型结构的改进，改善菌群移植的依从性，因此只需要对胶囊剂型进行菌群释放时间、部位的实验检测即可；无需对菌群移植后发挥改善肠道环境作用进行临床证实试验。
上述各实施例菌群分布范围，也受到胶囊剂的服用量影响，服用量越大，菌液量越多，在肠道内菌液流动行程范围也越大。
对比例1
本对比例与实施例1的区别为：所述肠衣膜的制备方法为：将猪皮提取的胶原蛋白25份、大豆蛋白5份、磷酸酯马铃薯淀粉4份、羧甲基纤维素钠5份、甘油6份、聚乙二醇9份、戊二醛0.5份和水30份，在40℃进行混合均匀，得到浆液，然后将浆液滴加在半胶囊模具的上表面，进行流延成膜，在45℃鼓风干燥得到肠衣膜坯，肠衣膜坯在温度75℃，湿度70°条件下进行熟化20h，得到半胶囊槽形的肠衣膜；所述肠衣膜厚度为0.03mm。
本实施例胶囊壳为空心肠溶胶囊；采用的大胶囊管4为常规3#胶囊管，壳厚度为0.095mm；小胶囊管2的壳厚度为0.11mm，壳外径为2.65mm。
本对比例制备的冷冻胶囊剂置于模拟胃液中3h胶囊不溶解，不泄漏菌液；将冷冻胶囊剂置于模拟肠液中，测定胶囊溶解和菌群释放时间，大胶囊壳和外层肠衣膜在21min溶解释放菌群，小胶囊壳和内层肠衣膜在56min溶解释放菌群。
对两个供试者(第一个供试者为38岁男性，第二个供试者为40岁男性)进行冷冻胶囊剂服用实验，检测菌群释放分布位置：
1、按照本对比例的工艺制备小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒不含造影剂)，然后取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，加入至大胶囊中，制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内含有造影剂)，第一个供试者同时空腹服用4颗胶囊(实验前3小时内无进食)，在服用170min后进行肠道镜检，观察造影剂成像区域。
2、取粪菌浓缩液，参入肠道造影剂，按照本对比例的工艺制备成小胶囊(小胶囊中菌浓缩液冰粒含有造影剂)，之后制备成大胶囊(大胶囊与小胶囊之间的冰冻菌液内不含造影剂)，第二个供试者同时空腹服用4颗胶囊(实验前3小时内无进食)，在服用230min后进行肠道镜检，根据进入深度观察造影剂成像区域。
经检测第一个供试者观察到的成像区域在小肠肠道前段；经检测第二个供试者观察到的成像区域在小肠肠道中段。两个检测结果相结合，能够证明，不同层的胶囊溶解时间不同，达到肠道的位置不同，在不同部位进行释放菌液，并且随着肠道蠕动，液体流动性好，能够扩大菌群遍布范围。
实施例7
选择化疗4～6个周期的肺癌志愿者60名(编号001～060)，其中男性30名，女性30名，年龄40～50岁。服用实施例1制备的药物剂型，空腹开水冲服，每天三次，服用时间30天，收集肺癌志愿者肠道菌群干预前后(第1天和第30天)的便样进行分析，具体为：收集肺癌志愿者的新鲜粪便5g，提取粪便DNA，对所提取的粪便DNA进行16SrRNA测序分析，将所得结果与已知物种结果进行比对，分析第1天和第30天肺癌志愿者肠道菌群差异，采用SPSS22.0软件进行统计学处理和分析，结果见表1。
表1检测结果
时间 丰富度 Shannon-Wiener指数 均匀度
第1天 22.36±3.12 2.54±0.34 0.86±0.11
第30天 29.25±3.21 3.48±0.21 0.52±0.10
通过结果可知，服用实施例1制备的药物剂型后，肺癌志愿者肠道菌群的丰富度、Shannon-Wiener指数和均匀度均有显著改善。
同时，采用胃肠道生活质量指数(GIQLI)评价60名肺癌志愿者的生活质量，问卷包含36个问题，总分144分。结果见表2。
表2胃肠道生活质量指数统计
通过表2可知，服用实施例1制备的药物剂型后，肺癌志愿者胃肠道生活质量得到显著提高。

Claims (6)

1.一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，其特征在于，药物剂型为套装的冷冻胶囊剂，即大胶囊剂内置有两个小胶囊剂，所述大胶囊剂的胶囊壳内装有菌群大冰粒，所述菌群大冰粒内部置有小胶囊剂，所述小胶囊剂的胶囊壳内装有菌群小冰粒，所述菌群小冰粒和菌群大冰粒包裹有一层肠衣膜；
所述肠衣膜的制备方法为：将猪皮或牛皮提取的胶原蛋白10~15份、大豆蛋白15~25份、磷酸酯马铃薯淀粉5~15份、羧甲基纤维素钠1~3份、甘油4~8份、聚乙二醇4~8份、戊二醛0.3~1份和水5~25份，在30~35℃进行混合均匀，得到浆液；然后将浆液滴加在半胶囊模具的上表面，进行流延成膜，在35~40℃鼓风干燥得到肠衣膜坯；肠衣膜坯在温度70～80℃，湿度65~75°条件下进行熟化15~18h，得到半胶囊槽形的肠衣膜；其中，所述肠衣膜厚度为0.04~0.06mm；所述聚乙二醇的平均数均分子量为3350；
所述大胶囊剂和小胶囊剂的胶囊壳为空心肠溶胶囊；所述小胶囊剂的胶囊壳厚度为0.12~0.14mm；所述大胶囊剂的胶囊壳厚度为0.1~0.11mm；所述大胶囊剂的胶囊壳内径为小胶囊剂的胶囊壳外径的2倍以上；
所述药物剂型的制备方法，包括如下步骤：
步骤1：采集、筛选健康生物体的新鲜健康的粪便；
步骤2：将粪便加入至无菌生理盐水中，均匀搅拌后形成浑浊液，静置沉淀，取粪菌悬液；
步骤3：粪菌悬液通过棉质滤网粗滤一次，得到一级滤液，然后采用100uM滤膜压滤一次，得到二级滤液，然后采用0.25uM滤膜压滤一次，压滤出无菌液，压滤剩余液体为粪菌浓缩液；
步骤4：将半胶囊槽形的一级冷冻模具浸入甘油中，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将粪菌浓缩液进行灌模冷冻成型，脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群小冰粒，将两个半胶囊体的菌群小冰粒对合，采用胶囊壳封装，得到小胶囊剂；
步骤5：将半胶囊槽形的二级冷冻模具浸入甘油中，使模腔内壁涂上甘油，然后在模腔内壁铺放一层半胶囊槽形的肠衣膜，将小胶囊剂置入二级冷冻模具中央，此时小胶囊剂与二级冷冻模具的模腔内壁之间形成有余量空间；然后将粪菌浓缩液进行灌模充满余量空间，冷冻成型，脱模，得到肠衣膜包裹的半胶囊体的菌群大冰粒，将两个半胶囊体的菌群大冰粒对合，采用胶囊壳封装，得到大胶囊剂，即菌群移植药物剂型；口服或冷冻保存待服用。
2.根据权利要求1所述的一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，其特征在于，所述半胶囊模具为倒扣式的半胶囊体。
3.根据权利要求1所述的一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，其特征在于，步骤2中，所述粪便与无菌生理盐水的质量比为，粪便:无菌生理盐水=1:5~8。
4.根据权利要求1所述的一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，其特征在于，步骤3中，所述粪菌浓缩液体积为二级滤液体积的0.5~5%。
5.根据权利要求1所述的一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，其特征在于，步骤4中，所述冷冻成型后，将一级冷冻模具的上表面刮平，去除多余冰冻料；步骤5中，所述冷冻成型后，将二级冷冻模具的上表面刮平，去除多余冰冻料。
6.根据权利要求1所述的一种改善癌症患者肠道环境的菌群移植药物剂型，其特征在于，所述二级冷冻模具的模腔宽度大于一级冷冻模具的2倍模腔宽度。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022062496A1 (zh) * 2020-09-22 2022-03-31 苏州普瑞森生物科技有限公司 一种全菌胶囊及其制备方法和应用
CN114404384A (zh) * 2022-02-25 2022-04-29 北京富玛特生物科技有限公司 一种用于肠道菌群移植的口服胶囊及其制备方法
WO2022148451A1 (zh) * 2021-01-08 2022-07-14 深圳未知君生物科技有限公司 一种粪菌口服制剂及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022062496A1 (zh) * 2020-09-22 2022-03-31 苏州普瑞森生物科技有限公司 一种全菌胶囊及其制备方法和应用
WO2022148451A1 (zh) * 2021-01-08 2022-07-14 深圳未知君生物科技有限公司 一种粪菌口服制剂及其制备方法
CN114404384A (zh) * 2022-02-25 2022-04-29 北京富玛特生物科技有限公司 一种用于肠道菌群移植的口服胶囊及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
粪菌移植治疗炎症性肠病的临床效果观察;许建勇;《中国现代药物应用》;全文 *
结肠靶向给药系统在粪菌移植中的应用;陈吉含;《现代医药卫生》;全文 *

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