CN114395493B - 一种改善上部烟叶品质的发酵液及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种改善上部烟叶品质的发酵液及其应用，所述改善上部烟叶品质的发酵液包括酿酒酵母、有机酸、碳源、氮源、水。利用有机酸与酿酒酵母对上部烟叶进行协同发酵，在酿酒酵母发酵使上部烟叶化学成分趋于协调的基础上，添加有机酸能够进一步显著地提高上部烟叶的品质，包括提高总糖含量，降低烟碱和总生物碱含量，增加非挥发性有机酸含量，提高新植二烯含量，降低了烟叶的pH值。本发明所涉及的发酵液弥补了现有酿酒酵母发酵的不足，为利用生物技术改善上部烟叶品质提供了新思路。
Description
技术领域
本发明属于烟草加工技术领域，涉及一种改善上部烟叶品质的发酵液及其应用，具体涉及一种利用有机酸与酿酒酵母协同发酵改善上部烟叶品质的方法。
背景技术
烟草是我国重要的经济作物，上部烟叶占整个烟草植株总产量的30-40％，但上部烟叶普遍存在化学协调性差、烟气香气量不足、刺激性强等问题，导致其在卷烟配方中的使用受到限制。运用各种技术提升烟草品质是烟草加工的一大研究热点，利用生物制剂或酶制剂处理上部烟叶，可以降解对烟草品质不利的大分子物质或增加香气成分，从而达到改善上部烟叶品质的目的。
CN109971739A公开了一种用于烟草处理的复合酶的制备方法，并进一步通过该制备方法制备获得的复合酶对烟叶进行处理的方法。包括：将含有上部烟叶的液态发酵培养基接种黑曲霉，发酵；将发酵所得产物固液分离，液相浓缩。该烟草处理方法具有工艺相对简单、易于实现、成本相对较低，在改善了上部烟叶吸食品质的同时，仅以上部烟叶作为微生物的发酵培养基，避免了外加商品酶制剂带来的不良风味。
CN110839940A公开了一种利用贝莱斯芽孢杆菌发酵提升烟叶品质的方法。具体方法为将贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)进行菌种活化、发酵制备成生物制剂，然后均匀喷施于烟叶表面进行发酵。经过发酵后，烟叶中淀粉的降解率可达20.2-36.2％，烟叶中的香味物质增加。感官评吸结果表明，处理烟叶的香气质提升，香气量增加，浓度增加，口感改善，甜润感增加，杂气减少，品质显著提升。
CN103462214A公开了一种通过添加葡萄糖和柠檬酸及植物水解蛋白提高烟叶品质的方法，通过在烟叶上添加葡萄糖和柠檬酸及植物水解蛋白，结合高温热处理，达到提高烟叶品质的目的。按处理烟叶的重量，将一定量的葡萄糖(2％-4％)、柠檬酸(0.5％-1％)和植物水解蛋白(0.03％-0.07％)溶解于水或者乙醇和水的混合溶液中，喷施于烟叶表面，然后将烟叶放置在封闭环境中处理，反应温度:20-30℃，环境湿度:50-60％，储叶时间:4-10h；储叶完成后，在高温热处理条件下进行干燥处理，去除低等级原料烟叶中的杂气及刺激。该方法可降低烟气劲头、刺激性和杂气，增加醇和性，协调香气。
酿酒酵母是发酵工业中常用的微生物种类，用于烟草加工中，可增加烟草及其制品的香气成分。龙章德等研究发现，利用酿酒酵母对上部烟叶进行混菌发酵，发酵后上部烟叶化学成分趋于协调，香气量有所增加，但烟碱和总氮含量仍处于较高水平。
烟碱含量较高是造成上部烟叶烟气刺激性强的原因之一，且烟碱对大多数微生物具有一定毒性，是微生物生长的不利因素。目前，在烟草加工过程中，有机酸主要应用于烘烤或卷烟加料环节，在烟草醇化中对微生物生长及烟草品质的影响尚不清楚。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种改善上部烟叶品质的发酵液及其应用，具体提供一种利用有机酸与酿酒酵母协同发酵改善上部烟叶品质的方法。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种改善上部烟叶品质的发酵液，所述改善上部烟叶品质的发酵液包括酿酒酵母、有机酸、碳源、氮源、水。
本发明创造性地利用有机酸与酿酒酵母对上部烟叶进行协同发酵，在酿酒酵母发酵使上部烟叶化学成分趋于协调的基础上，添加有机酸能够进一步显著地提高上部烟叶的品质，包括提高总糖含量，降低烟碱和总生物碱含量，增加非挥发性有机酸含量；提高新植二烯含量，新植二烯是烟草中最重要的中性香气成分，可以减轻烟气刺激性、增强柔和性和细腻程度；降低烟叶的pH值，由于较低的烟叶pH值有利于减少烟气的游离烟碱含量，烟叶pH值在一定范围内与烟气劲头呈正相关，因此添加有机酸更有利于减小上部烟叶的烟气劲头。综上，本发明所涉及的发酵液弥补了现有酿酒酵母发酵的不足，为利用生物技术改善上部烟叶品质提供了新思路。
优选地，所述有机酸包括柠檬酸、苹果酸、乳酸中的任意一种或至少两种的组合。所述至少两种的组合例如柠檬酸和苹果酸的组合、苹果酸和乳酸的组合、柠檬酸和乳酸的组合、柠檬酸、苹果酸和乳酸的组合。
不同的有机酸分别侧重从不同的方面协同酿酒酵母来提高上部烟叶的品质，例如分别添加有柠檬酸、苹果酸、乳酸的发酵液发酵烟叶后，烟叶在化学成分上存在较大差异，可能是因为不同种类的有机酸对微生物代谢相关酶的影响不同，也可能与有机酸进入细胞的难易程度或微生物暴露的化学环境等因素有关。本发明还发现不同有机酸的组合方式在提高上部烟叶品质上的效果更佳。三种有机酸相比，添加柠檬酸有利于降低烟叶pH值，添加苹果酸有利于提高总糖含量和非挥发性有机酸总量，添加乳酸有利于改善香气、减少杂气与刺激性、增加余味。
优选地，所述酿酒酵母与有机酸的质量比为1:(1-15)，例如1:1、1:2、1:3、1:5、1:6、1:7、1:8、1:10、1:11、1:12、1:13、1:15等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
所述酿酒酵母与有机酸的质量比满足1:(1-15)时，两者在协同提高上部烟叶品质方面的效果更显著。
优选地，所述碳源包括葡萄糖、果糖、麦芽糖、淀粉糖浆或果葡糖浆中的任意一种或至少两种的组合。所述至少两种的组合例如葡萄糖和果糖的组合、麦芽糖和淀粉糖浆的组合、葡萄糖和果葡糖浆的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述氮源包括大豆肽、小麦蛋白肽、大米蛋白肽、乳清蛋白肽或酪蛋白肽中的任意一种或至少两种的组合。所述至少两种的组合例如大豆肽和小麦蛋白肽的组合、大米蛋白肽和乳清蛋白肽的组合、大豆肽和酪蛋白肽的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
第二方面，本发明提供一种如第一方面所述的改善上部烟叶品质的发酵液在对上部烟叶进行发酵以改善上部烟叶品质中的应用。
优选地，所述应用的方法包括：
将发酵液喷洒于上部烟叶表面，混合均匀，静置，随后密封发酵，发酵结束后烘干，即可。
优选地，所述发酵液中酿酒酵母的质量为上部烟叶质量的0.01-0.1％，例如0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述发酵液中有机酸的质量为上部烟叶质量的0.1-1％，例如0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。优选0.5-0.7％。
优选地，所述发酵液中碳源的质量为上部烟叶质量的0.5-2％，例如0.5％、0.8％、1％、1.2％、1.4％、1.5％、1.6％、1.8％、2％等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述发酵液中氮源的质量为上部烟叶质量的0.005-0.02％，例如0.005％、0.008％、0.01％、0.012％、0.015％、0.018％、0.02％等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述发酵液中水的质量为上部烟叶质量的20-40％，例如20％、25％、30％、35％、40％等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
本发明所涉及的发酵液中各组分在满足上述使用量的情况下，发酵效果更佳，发酵后的上部烟叶在各方面的性质也更加优异。
优选地，所述静置的时间为5-20min，例如5min、7min、8min、10min、12min、14min、15min、18min、20min等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述发酵的时间为5-10天，例如5天、6天、7天、8天、9天、10天。
优选地，所述发酵的温度为25-35℃，例如25℃、26℃、27℃、30℃、32℃、33℃、35℃等；相对湿度为50-70％，例如50％、55％、60％、65％、70％等；上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
本发明创造性地利用有机酸与酿酒酵母对上部烟叶进行协同发酵，在酿酒酵母发酵使上部烟叶化学成分趋于协调的基础上，添加有机酸能够进一步显著地提高上部烟叶的品质，包括提高总糖含量，降低烟碱和总生物碱含量，增加非挥发性有机酸含量；提高新植二烯含量，新植二烯是烟草中最重要的中性香气成分，可以减轻烟气刺激性、增强柔和性和细腻程度；降低了烟叶的pH值，由于较低的烟叶pH值有利于减少烟气的游离烟碱含量，烟叶pH值在一定范围内与烟气劲头呈正相关，因此添加有机酸更有利于减小上部烟叶的烟气劲头。综上，本发明所涉及的发酵液弥补了现有酿酒酵母发酵的不足，为利用生物技术改善上部烟叶品质提供了新思路。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
下述涉及的材料与试剂包括：上部烟叶为永州B2F(B1)混打片烟，广东中烟工业有限责任公司；葡萄糖，东晓生物科技有限公司；大豆肽，广东华肽生物科技有限公司；酿酒酵母SY，安琪酵母股份有限公司；柠檬酸(Citric acid，CA)、苹果酸(Malic acid，MA)、乳酸(Lactic acid，LA)，广东华盛食化有限公司；二氯甲烷、甲醇(色谱纯)，永华化学股份有限公司；氢氧化钠等化学试剂(分析纯)，国药集团化学试剂有限公司。
下述涉及的仪器与设备包括：FiveEasy Plus pH计，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司；LRH-250-S型恒温恒湿培养箱，广东泰宏君科学仪器股份有限公司；FOSS旋风式样品磨CT293，福斯分析仪器(苏州)有限公司；AA3连续流动分析仪，德国BRAN+LUEBBE公司；U3000型高效液相色谱仪，赛默飞世尔科技(中国)有限公司；8890-7000D三重串联四级杆气质联用仪，安捷伦科技(中国)有限公司。
采用IBM SPSS Statistics 25与Microsoft Excel 2019进行数据处理、绘图和方差分析；采用Qualitative Analysis B.07.00和NIST谱库对挥发性物质进行定性及定量分析。
制备例
本制备例制备一系列改善上部烟叶品质的发酵液：
(1)含有酿酒酵母的发酵液(记为SC)：将1份葡萄糖、0.01份大豆肽、0.06份酿酒酵母粉和30份无菌水进行混合并充分溶解，搅拌均匀。
(2)含有酿酒酵母和柠檬酸的发酵液(分为记为CA-1、CA-3、CA-5、CA-7)：将1份葡萄糖、0.01份大豆肽、0.06份酿酒酵母粉、0.1份柠檬酸(或0.3份柠檬酸、0.5份柠檬酸、0.7份柠檬酸)和30份无菌水进行混合并充分溶解，搅拌均匀。
(3)含有酿酒酵母和苹果酸的发酵液(分为记为MA-1、MA-3、MA-5、MA-7)：将1份葡萄糖、0.01份大豆肽、0.06份酿酒酵母粉、0.1份苹果酸(或0.3份苹果酸、0.5份苹果酸、0.7份苹果酸)和30份无菌水进行混合并充分溶解，搅拌均匀。
(4)含有酿酒酵母和乳酸的发酵液(分为记为LA-1、LA-3、LA-5、LA-7)：将1份葡萄糖、0.01份大豆肽、0.06份酿酒酵母粉、0.1份乳酸(或0.3份乳酸、0.5份乳酸、0.7份乳酸)和30份无菌水进行混合并充分溶解，搅拌均匀。
(5)含有酿酒酵母、柠檬酸、苹果酸的发酵液(记为CA-3+MA-2)：将1份葡萄糖、0.01份大豆肽、0.06份酿酒酵母粉、0.3份柠檬酸、0.2份苹果酸和30份无菌水进行混合并充分溶解，搅拌均匀。
(6)空白对照组(记为CG)：将1份葡萄糖、0.01份大豆肽和30份无菌水进行混合并充分溶解，搅拌均匀。
实施例
将制备例制得的各组发酵液喷洒于上部烟叶表面，同时不停翻动以保证物料分布均匀，喷洒完毕后静置10min，随后装入自封袋中密封，发酵7天，发酵温度为30℃，相对湿度为60％。发酵完毕的上部烟叶置于40℃下烘干，研磨并过40目筛，得到的烟末用于测定下述各项指标(同时以不进行任何处理的上部烟叶为对照，记为UTL)。
(1)pH值的测定：
参考YC/T 222-2007测定各组烟叶在发酵前后的pH值，结果如表1所示：
表1
注：不同小写字母表示不同处理间差异显著(p<0.05)；“*”表示发酵前后差异显著(p<0.05)。
由表1数据可知：发酵前，上部烟叶pH值随柠檬酸或苹果酸添加量增大而显著降低(p<0.05)，且同一添加量下，柠檬酸添加组pH值稍低于苹果酸组。添加0.10-0.50％乳酸，上部烟叶pH值变化不明显，仅当乳酸添加量达0.70％时，pH值显著降低(p<0.05)。添加混合有机酸(0.30％柠檬酸+0.20％苹果酸，下同)，pH值变化与单独添加有机酸差别不大。发酵后，SC组pH显著降低(p<0.05)，可能是因为酿酒酵母降解烟叶大分子化合物，产生了酸性物质；有机酸添加组中，只有添加0.50-0.70％苹果酸或0.10-0.30％乳酸时，pH值显著降低(p<0.05)。烟叶pH值在一定范围内与烟气劲头呈正相关，添加柠檬酸或苹果酸对减小上部烟叶的烟气劲头作用较大。
(2)常规化学成分的测定：
参考YC/T 160-2002、YC/T 159-2019及YC/T 161-2002，分别测定各组烟叶水溶性总糖、还原糖、总植物碱及总氮含量。结果如表2所示：
表2
注：不同小写字母表示不同处理间差异显著(p<0.05)；“*”表示发酵前后差异显著(p<0.05)。
由表2数据可知：与UTL组相比，SC组上部烟叶总糖含量和糖碱比均提高，总植物碱和总氮含量均降低，氮碱比变化不大，化学成分趋于协调。三种有机酸对酿酒酵母发酵上部烟叶化学成分的影响差异较大。添加0.10-0.30％柠檬酸，总糖含量和糖碱比均低于SC组，总氮含量显著提高(p<0.05)，化学成分协调性稍有变差；添加0.50％柠檬酸，糖碱比稍有提高，除此之外，0.50-0.70％柠檬酸添加组其他化学指标变化不大。添加0.10-0.50％苹果酸，总糖含量较SC组显著提高(p<0.05)，糖碱比提高；添加0.70％苹果酸，总糖含量和糖碱比变化不大，但总氮含量显著提高(p<0.05)。添加0.10-0.50％乳酸，化学指标与SC组相比变化不大；但当添加量为0.70％时，总糖含量显著降低(p<0.05)，总植物碱及总氮含量高于SC组，糖碱比大幅度减小。单独添加柠檬酸、苹果酸或乳酸，当添加量为0.50％时，总糖含量和糖碱比均高于其他添加量组。添加混合有机酸，总糖含量和糖碱比高于单独添加柠檬酸或苹果酸。
(3)生物碱的测定：
准确称取45mg喹啉，用二氯甲烷-甲醇(VCH2Cl2:VCH3OH＝3:1)溶解后，转移至250mL棕色容量瓶中定容，得到浓度为0.18mg/mL的内标溶液。样品预处理参考Lin等的方法(LIN SS,ZHANG X M,SONG S Q,et al.Tobacco alkaloids reduction by casings added/enzymatic hydrolysis treatments assessed through PLSR analysis[J].RegulatoryToxicology and Pharmacology,2016,29.DOI:10.1016/j.yrtph.2015.12.016.)。气相色谱-质谱联用法测定：气相色谱条件：色谱柱HP-5MS UI(30m×250μm×0.25μm)，载气为高纯He，进样体积10μL，进样口温度250℃，分流比100:1。程序升温条件：初始温度70℃保持2min，以20℃/min的速率升温至250℃保持5min。质谱条件：离子源为电子轰击电离(EI)，离子源温度230℃，扫描模式为选择离子检测(SIM)，质量扫描范围40-500m/z。
根据内标物质的信息对4种烟草生物碱进行定量分析，结果如表3所示。
表3
注：“*”表示与SC组差异显著(p<0.05)。
由表3数据可知：UTL组和CG组烟碱含量差异不大，酿酒酵母发酵后上部烟叶烟碱含量从32.12mg/g降低至28.28mg/g。酿酒酵母本身无法降解烟碱，但降解大分子化合物产生的酸性物质能与烟碱结合成盐，使烟碱从游离态转化为结合态。在0.10-0.70％添加量范围内，随着柠檬酸或苹果酸添加量增大，烟碱含量呈先降低再升高趋势；当柠檬酸或苹果酸添加量为0.10-0.30％时，烟碱含量均高于SC组，但只有0.10％柠檬酸组达显著水平(p<0.05)；烟碱含量与乳酸添加量之间无明显规律。单独添加柠檬酸、苹果酸或乳酸，当添加量为0.50％时，烟碱含量均低于其他添加量组。添加混合有机酸，烟碱含量稍低于单独添加柠檬酸或苹果酸。
(4)非挥发性有机酸的测定：
样品预处理参考易娇等的方法(易娇,尹笃林,廉世勋,等.反相HPLC法同时测定烟草中的6种有机酸[J].烟草科技,2006,39(7):37.DOI:10.3969/j.issn.1002-0861.2006.07.009.)。高效液相色谱法测定：色谱柱Agilent ZORBAX SB AQ-C18(4.60mm×250mm，5μm)；流动相：0.02mol/L磷酸缓冲盐溶液(pH 2.70)；流速0.50mL/min；检测波长214nm；柱温30℃；进样体积10μL；外标法定量；等度洗脱100％KH2PO4，40min。结果如表4所示(mg/g)。
表4
注：同列数据不同小写字母表示不同处理间差异显著(p<0.05)；“*”表示添加CA、MA或LA条件下与SC组差异显著(p<0.05)。
由表4数据可知：与UTL组相比，SC组草酸含量变化不大，苹果酸含量降低，柠檬酸含量提高，非挥发酸总量有所增加。与SC组相比，柠檬酸或苹果酸在0.10-0.70％添加量范围内均可不同程度地提高非挥发有机酸总量，而乳酸在0.30-0.50％添加量下，会造成非挥发性有机酸总量稍有减少，表现为与柠檬酸组和苹果酸组较大的不同，这可能与酿酒酵母代谢途径中有机酸之间的相互转换有关。添加混合有机酸，测得上部烟叶苹果酸和柠檬酸含量均有提高，但非挥发有机酸总量稍低于单独添加柠檬酸或苹果酸。
(5)挥发性香气成分的测定：
称取2.50g烟末装入20mL顶空瓶中，同时加入20μL 5mg/mL乙酸苯乙酯(内标)的二氯甲烷溶液，盖上瓶盖待测。顶空-固相微萃取条件：萃取头75μm CAD/PDMS，萃取温度65℃，萃取时间45min，解吸温度250℃，解吸时间3min。气相色谱条件：色谱柱：TR-5ms(60m×0.25mm×0.25μm)；载气为高纯He；流速1.00mL/min；进样口温度250℃；采用不分流进样模式。升温程序：起始温度40℃保持2min，以5℃/min的速度升至120℃保持2min，再以7℃/min的速度升至220℃保持5min。质谱条件：离子源为电子轰击(EI)；电子能量70eV；离子源温度250℃；传输线温度250℃；质量扫描范围33-350m/z；扫描速度3.00scans/s。
对烟末的挥发性物质进行测定，定性结果如表5所示，共检测出92种物质，其中酸类5种，醇类7种，酮类27种，酯类6种，醛类9种，酚类2种，烷烃类10种，氮杂环类9种，氧杂环类4种，芳香烃类6种。不同样品的挥发性物质组成变化不大，但物质含量差异较大。
表5
/>
/>
根据内标物质的信息对检测出的挥发性物质进行相对定量，表6中列出了各类挥发性物质占总量的比例(％)。
表6
/>
由表6数据可知：与UTL组相比，酿酒酵母发酵后上部烟叶氮杂环类及芳香烃类物质含量大幅度降低，酸、醇、酮、醛类等香气物质含量有所提高，新植二烯含量从3.70％提升至4.76％。当柠檬酸添加量为0.10％或0.70％时，酮类香气物质含量较高；当柠檬酸添加量为0.30％时，酸、醇、酮、酯、醛类香气物质含量较低，且氮杂环类物质含量较高。苹果酸添加组中，酮、酯、醛类香气物质含量随苹果酸添加量增加呈下降趋势，当添加量为0.50-0.70％时，酸类物质含量较高。乳酸添加组中，当乳酸添加量为0.30％时，醇、酮、醛等香气物质含量较高。此外，单独添加三种有机酸均能使新植二烯含量提高，而组间变化趋势存在差异：新植二烯含量随柠檬酸添加量增大呈先降低后升高趋势，随苹果酸添加量增大呈逐渐下降趋势，而在乳酸添加组中，当乳酸添加量为0.30％时，新植二烯含量最高。添加混合有机酸，挥发性酸类、酮类、醇类、新植二烯等物质含量均稍高于单独添加柠檬酸或苹果酸，但新植二烯含量低于单独添加乳酸。
(6)感官评吸结果：
评价方法为：
组织7人感官评吸小组，采用盲评方式对样品进行评吸。对品质特征指标进行打分，包括香气质、香气量、杂气、刺激性和余味，分值标准如下表所示。感官质量得分按相应指标权重计算得出，计算公式为：
感官质量得分＝(香气质×0.35+香气量×0.25+杂气×0.1+刺激性×0.15+余味×0.15)×11.11
结果如表7所示。
表7
由表7数据可知：酿酒酵母发酵和添加有机酸对上部烟叶风格特征影响不大，主要影响香气、杂气、刺激性、余味等品质特征指标。除了添加0.50％乳酸对酿酒酵母发酵上部烟叶香气量有负面影响，添加0.50％有机酸可以提高品质特征指标的分数。其中，添加0.50％乳酸对香气质、杂气、刺激性、余味的改善效果比添加0.50％柠檬酸或苹果酸好，其感官质量总分较高。柠檬酸和苹果酸相比，添加柠檬酸对杂气和刺激性的改善效果较好，添加苹果酸对香气量和余味的改善效果好。添加混合有机酸，在改善香气质、减少刺激性、增加余味方面均比单独添加有机酸效果较好。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种改善上部烟叶品质的发酵液及其应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
Claims (12)
1.一种改善上部烟叶品质的发酵液，其特征在于，所述改善上部烟叶品质的发酵液包括酿酒酵母、有机酸、碳源、氮源和水；
所述有机酸为柠檬酸、苹果酸或乳酸中的任意一种，或柠檬酸和苹果酸的组合；
所述发酵液中有机酸的质量为上部烟叶质量的0.5％；
所述酿酒酵母与有机酸的质量比为1:(1-15)；
所述酿酒酵母为酿酒酵母粉。
2.如权利要求1所述的改善上部烟叶品质的发酵液，其特征在于，所述碳源包括葡萄糖、果糖、麦芽糖、淀粉糖浆或果葡糖浆中的任意一种或至少两种的组合。
3.如权利要求1所述的改善上部烟叶品质的发酵液，其特征在于，所述氮源包括大豆肽、小麦蛋白肽、大米蛋白肽、乳清蛋白肽或酪蛋白肽中的任意一种或至少两种的组合。
4.如权利要求1所述的改善上部烟叶品质的发酵液在对上部烟叶进行发酵以改善上部烟叶品质中的应用。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述应用的方法包括：
将发酵液喷洒于上部烟叶表面，混合均匀，静置，随后密封发酵，发酵结束后烘干，即可。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述发酵液中酿酒酵母的质量为上部烟叶质量的0.01-0.1％。
7.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述发酵液中碳源的质量为上部烟叶质量的0.5-2％。
8.如权利要求5的应用，其特征在于，所述发酵液中氮源的质量为上部烟叶质量的0.005-0.02％。
9.如权利要求5的应用，其特征在于，所述发酵液中水的质量为上部烟叶质量的20-40％。
10.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述静置的时间为5-20min。
11.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述发酵的时间为5-10天。
12.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述发酵的温度为25-35℃，相对湿度为50-70％。
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