CN114292771B - 高效降解蒽酮的施氏假单胞菌wzy-3-1及应用 - Google Patents
高效降解蒽酮的施氏假单胞菌wzy-3-1及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一株高效降解蒽酮的施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY‑3‑1及其降解应用，所述施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY‑3‑1保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，邮政编码：430072，保藏编号：CCTCC NO：M 20211035，保藏日期2021年8月16日；本发明提供的一种高效降解蒽酮的施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY‑3‑1在5d内能对初始浓度为100mg·L‑1的蒽酮降解率达到73.3％，该菌株的发现对工业废水中蒽酮的高效净化具有重要意义。
Description
技术领域
本发明涉及微生物领域，尤其涉及一株高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1及应用。
背景技术
蒽酮又称9,10-二氢蒽-9-酮，是一种有机化合物，化学式为C14H10O。外观为淡黄色针状晶体。不溶于水，溶于乙醇和热苯。不溶于冷氢氧化钠溶液，加热时溶解成蒽酚的碱金属盐。它的乙醇溶液呈蓝色荧光，用于制取苯绕蒽酮和染料，也用于色层分析试剂及体液中糖分的比色测定或肝脏组织中动物淀粉的测定等。其可以通过不同的接触途径进入生物体，由于其潜在的持久性，毒性和生物富集作用，造成严重的环境污染。
现有通过光催化降解、芬顿氧化和微生物降解等方法去除蒽酮。其中光催化降解是让有机化合物中的C-C、C-N键吸收紫外光的能量而断裂，使有机物逐渐降解，最后以CO2的形式离开体系。具有可使大多数污染物完全破坏而不形成中间产物，价廉、安全、有很好的稳定性的优点。但是催化效率相对低，并且悬浮相催化剂易凝聚且难以分离回收，活性成分损失大。芬顿氧化对环境友善、占地空间小、操作弹性大、初设成本低、氧化能力强。但是反应过程中有Fe(OH)3的产生，并且COD达一定的去除率后，无法再继续去除有机物，易造成H2O2用药的消耗。
在这些方法中，生物修复由于其潜在的成本效益和生态友好特性，将成为有效消除污染环境中蒽酮的有吸引力的替代方法。利用生物法处理含蒽酮废水具有能耗低、反应条件温和且效率较高，但是国内外对于蒽酮降解功能菌株的研究还鲜有报道，因此本研究为蒽酮降解筛选可用菌株，进行蒽酮生物降解，具有重要意义。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了一株高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1及应用。
本发明的具体技术方案为：
第一方面，本发明提供了一株高效降解蒽酮的施氏假单胞菌，微生物分类命名为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1，已在2021年8月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为：中国武汉武汉大学，邮政编码为430072；保藏编号为CCTCC NO:M20211035；所述WZY-3-1的16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明的施氏假单胞菌WZY-3-1来源于浙江卫星能源有限公司废水处理池污泥中，该施氏假单胞菌经过分离及纯化获得，可利用蒽酮作为其生长的唯一碳源。
所述施氏假单胞菌WZY-3-1的特征为：菌落颜色为暗黄色，椭圆形不透明表面粗糙、干燥，无鞭毛，无芽孢，扫描电镜下观察该菌体的形态为椭圆状和短杆状。
第二方面，本发明提供了一株以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1为活性成分的含菌悬液及含菌悬液的制备方法。
所述含菌悬液以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1经斜面培养、种子培养、发酵后制成。
所述含菌悬液的制备方法包括以下具体步骤：
(1)斜面培养：将高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1接种至斜面培养基上，在30-35℃下培养1-3d，获得斜面菌体；所述斜面培养基终浓度组成为：NH4Cl 1.16g·L-1，NaNO30.72g·L-1，K2HPO4 1g·L-1，KCl 0.2g·L-1，MgSO4·7H2O 0.2g·L-1，CaCl2 0.01g·L-1，蒽酮0.1g·L-1，FeSO4·7H2O 0.001g·L-1，微量元素，琼脂18-20g·L-1，pH值7.0-8.0；
(2)种子培养：从斜面菌体挑取菌落接种至LB培养基，在30-35℃下培养12-18h，获得种子液；所述LB培养基终浓度组成为NaCl 10g·L-1，酵母浸粉5g·L-1，蛋白胨10g·L-1，pH值7.0-8.0；
(3)发酵：将种子液以体积浓度2％的接种量接种至发酵培养基，在30-35℃下培养12-18h，获得发酵培养液即为含菌悬液；所述发酵培养基终浓度组成为：NH4Cl 1.16g·L-1，NaNO3 0.72g·L-1，K2HPO4 1g·L-1，KCl 0.2g·L-1，MgSO4·7H2O 0.2g·L-1，CaCl2 0.01g·L-1，蒽酮0.1g·L-1，FeSO4·7H2O 0.001g·L-1，微量元素，pH值7.0-8.0；
所述微量元素的终浓度组成为：EDTA 5000mg·L-1，CaCl2 5500mg·L-1，CuSO4·5H2O，250mg·L-1，FeSO4·7H2O 500mg·L-1，ZnSO4 430mg·L-1，CoCl2·6H2O 240mg·L-1，MnCl2·4H2O990mg·L-1，H3BO4 14mg·L-1。
第三方面，本发明提供了一种以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1为活性成分的含菌悬液在降解蒽酮中的应用及其具体方法。
具体方法为：将所述含菌悬液接种至含有终浓度为100mg·L-1的蒽酮的液体选择培养基中，以蒽酮为唯一碳源，在30-35℃、160-300rpm恒温摇床上振荡培养，获得培养液；所述液体选择培养基的终浓度组成为：NH4Cl 1.16g·L-1，NaNO3 0.72g·L-1，K2HPO4 1g·L-1，KCl0.2g·L-1，MgSO4·7H2O 0.2g·L-1，CaCl2 0.01g·L-1，FeSO4·7H2O 0.001g·L-1，蒽酮0.1g·L-1，微量元素，pH值7.0-8.0；
所述微量元素的终浓度组成为：EDTA 5000mg·L-1，CaCl2 5500mg·L-1，CuSO4·5H2O，250mg·L-1，FeSO4·7H2O 500mg·L-1，ZnSO4 430mg·L-1，CoCl2·6H2O 240mg·L-1，MnCl2·4H2O990mg·L-1，H3BO4 14mg·L-1。
本发明的有益效果为：本发明提供了一株高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1及去除废水中蒽酮的应用，该菌株在5d内对初始浓度为100mg·L-1的蒽酮降解率到达73.3％，该降解菌的发现对蒽酮生物降解的进一步研究具有重要意义。
附图说明
图1为菌株WZY-3-1的扫描电镜图；
图2为菌株WZY-3-1的系统发育树图；
图3为菌株WZY-3-1对蒽酮的降解率曲线图；
图4不同初始浓度下蒽酮降解率和菌密度(OD600)变化图；
图5不同温度下蒽酮降解率和菌密度(OD600)变化图；
图6不同pH下蒽酮降解率和菌密度(OD600)变化图；
图7不同接种量下蒽酮降解率和菌密度(OD600)变化图。
具体实施方式
本发明提供了一株高效降解蒽酮的施氏假单胞菌，微生物分类命名为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1，已在2021年8月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为：中国武汉武汉大学，邮政编码为430072；保藏编号为CCTCC NO:M 20211035；所述WZY-3-1的16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明提供了一种以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1为活性成分的含菌悬液，所述含菌悬液以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1经斜面培养、种子培养、发酵后制成。
所述含菌悬液的制备方法包括以下具体步骤：
(1)斜面培养：将高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1接种至斜面培养基上，在30-35℃下培养1-3d，获得斜面菌体；所述斜面培养基终浓度组成为：NH4Cl 1.16g·L-1，NaNO30.72g·L-1，K2HPO4 1g·L-1，KCl 0.2g·L-1，MgSO4·7H2O 0.2g·L-1，CaCl2 0.01g·L-1，蒽酮0.1g·L-1，FeSO4·7H2O 0.001g·L-1，微量元素，琼脂18-20g·L-1，pH值7.0-8.0；
(2)种子培养：从斜面菌体挑取菌落接种至LB培养基，在30-35℃下培养12-18h，获得种子液；所述LB培养基终浓度组成为NaCl 10g·L-1，酵母浸粉5g·L-1，蛋白胨10g·L-1，pH值7.0-8.0；
(3)发酵：将种子液以体积浓度2％的接种量接种至发酵培养基，在30-35℃下培养12-18h，获得发酵培养液即为含菌悬液；所述发酵培养基终浓度组成为：NH4Cl 1.16g·L-1，NaNO3 0.72g·L-1，K2HPO4 1g·L-1，KCl 0.2g·L-1，MgSO4·7H2O 0.2g·L-1，CaCl2 0.01g·L-1，蒽酮0.1g·L-1，FeSO4·7H2O 0.001g·L-1，微量元素，pH值7.0-8.0；
所述微量元素的终浓度组成为：EDTA 5000mg·L-1，CaCl2 5500mg·L-1，CuSO4·5H2O，250mg·L-1，FeSO4·7H2O 500mg·L-1，ZnSO4 430mg·L-1，CoCl2·6H2O 240mg·L-1，MnCl2·4H2O990mg·L-1，H3BO4 14mg·L-1。
本发明提供了一种以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1为活性成分的含菌悬液在降解蒽酮中的应用。
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此。
蒽酮的液体选择培养基的终浓度组成为：NH4Cl 1.16g·L-1，NaNO3 0.72g·L-1，K2HPO41g·L-1，KCl 0.2g·L-1，MgSO4·7H2O 0.2g·L-1，CaCl2 0.01g·L-1，FeSO4·7H2O0.001g·L-1，蒽酮0.1g·L-1，微量元素；
所述微量元素的终浓度组成为：EDTA 5000mg·L-1，CaCl2 5500mg·L-1，CuSO4·5H2O，250mg·L-1，FeSO4·7H2O 500mg·L-1，ZnSO4 430mg·L-1，CoCl2·6H2O 240mg·L-1，MnCl2·4H2O990mg·L-1，H3BO4 14mg·L-1。
蒽酮的固体选择培养基的终浓度组成为：NH4Cl 1.16g·L-1，NaNO3 0.72g·L-1，K2HPO41g·L-1，KCl 0.2g·L-1，MgSO4·7H2O 0.2g·L-1，CaCl2 0.01g·L-1，FeSO4·7H2O0.001g·L-1，蒽酮0.1g·L-1，微量元素，琼脂18-20g·L-1；
所述微量元素的终浓度组成为：EDTA 5000mg·L-1，CaCl2 5500mg·L-1，CuSO4·5H2O，250mg·L-1，FeSO4·7H2O 500mg·L-1，ZnSO4 430mg·L-1，CoCl2·6H2O 240mg·L-1，MnCl2·4H2O990mg·L-1，H3BO4 14mg·L-1。
实施例1：施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1的分离、纯化及鉴定
1.施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1的分离及纯化
施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1是从浙江卫星能源有限公司废水处理池污泥中筛得，具体步骤如下：
(1)采样：从卫星能源公司蒽酮废水处理池中的悬浮污泥中分别多点采样，作为筛选高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1的原材料；
(2)菌株分离：取适量废水处理池中活性污泥，静置24h后，取10mL上清液接种至含100mL无菌水的250mL培养瓶中，在30℃、160rpm恒温摇床上振荡培养30min，停止振荡后静置2min，取5mL悬浮液接种至含100mL蒽酮的液体选择培养基中，在30℃、160rpm恒温摇床上振荡培养7d，重复5次；用无菌水将上述菌液稀释10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7倍；将所得到的菌液用蒽酮固体选择培养基经多次平板划线分离纯化，得到单菌落，记为菌株WZY-3-1。
2.菌株WZY-3-1的鉴定
a、菌株WZY-3-1的生理生化特征
对所获得的菌株WZY-3-1进行形态观察和生理生化鉴定，菌落颜色为暗黄色，椭圆形不透明表面粗糙、干燥，无鞭毛，无芽孢；扫描电镜下观察该菌体的形态为椭圆状和短杆状，如图1所示，生长最适pH值为7.0-8.0，最适温度为30-35℃。
b、菌株WZY-3-1的16S rRNA序列分析
采用3S柱离心式环境样品DNA回收试剂盒(V2.2，浙江天科生物科技有限公司)提取和纯化菌株WZY-3-1的DNA，4℃保存；采用细菌通用引物27F(正向引物27F，5’-AGA GTTTGA TCC TGG CTC AG-3’)和1492R(反向引物1492R,5’-GGT TAC CTT GTT ACG ACT T-3’)PCR扩增16S rRNA。
PCR反应体系(50uL)包括模板DNA 1.75μL，引物27f、1492r各1μL，MgCl2(25mmol·L-1)3μL，Taq酶(5U·μL-1)0.25μL，PCR缓冲液(10×)5μL，dNTP(2.5mmol·L-1)4μL，重蒸水34Μl。
PCR扩增程序：94℃预变性4min；4℃变性1min，59℃退火1min，72℃延伸1.5min，35个循环；72℃延伸10min；4℃保持10min。
将PCR产物进行16S rRNA序列测试(浙江天科)，菌株WZY-3-1的16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示。
将菌株WZY-3-1的16S rRNA序列上传到同Genbank中的基因序列进行同源性比较，发现其属于Pseudomonas属，与Pseudomonas stutzeri同源性最高，达到99.64％，图2为菌株WZY-3-1的系统发育树图。为了进一步确定鉴定结果的可靠性，经过生理生化实验，最终确定菌株WX3-1属于Pseudomonas stutzeri，因此，菌株WZY-3-1命名为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO：M 20211035，保藏日期2021年8月16日，地址：中国，武汉，武汉大学，邮编地址：430072。
实施例2：以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1为活性成分的含菌悬液的制备过程所述含菌悬液的制备过程：
(1)斜面培养：将高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1接种至斜面培养基上，在30℃下培养3d，获得斜面菌体；所述斜面培养基终浓度组成为：NH4Cl 1.16g·L-1，NaNO30.72g·L-1，K2HPO4 1g·L-1，KCl 0.2g·L-1，MgSO4·7H2O 0.2g·L-1，CaCl2 0.01g·L-1，蒽酮0.1g·L-1，FeSO4·7H2O 0.001g·L-1，微量元素，琼脂18g·L-1，pH值7.0；
(2)种子培养：从斜面菌体挑取菌落接种至LB培养基，在30℃下培养18h，获得种子液；所述LB培养基终浓度组成为NaCl 10g·L-1，酵母浸粉5g·L-1，蛋白胨10g·L-1，pH值7.0；
(3)发酵：将种子液以体积浓度2％的接种量接种至发酵培养基，在30℃下培养18h，获得发酵培养液即为含菌悬液；所述发酵培养基终浓度组成为：NH4Cl 1.16g·L-1，NaNO30.72g·L-1，K2HPO4 1g·L-1，KCl 0.2g·L-1，MgSO4·7H2O 0.2g·L-1，CaCl2 0.01g·L-1，蒽酮0.1g·L-1，FeSO4·7H2O 0.001g·L-1，微量元素，pH值7.0；
所述微量元素的终浓度组成为：EDTA 5000mg·L-1，CaCl2 5500mg·L-1，CuSO4·5H2O，250mg·L-1，FeSO4·7H2O 500mg·L-1，ZnSO4 430mg·L-1，CoCl2·6H2O 240mg·L-1，MnCl2·4H2O990mg·L-1，H3BO4 14mg·L-1。
实施例3：施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1对蒽酮降解性能的检测和降解条件筛选
1.施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1对蒽酮降解性能的检测
将实施例2所制备的以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1为活性成分的含菌悬液接种至含有终浓度为100mg·L-1的蒽酮液体选择培养基中，以蒽酮为唯一碳源，使培养基的初始pH值为7.0，取100mL置于250mL三角瓶中，在30℃、160rpm恒温摇床上振荡培养，获得培养液(作为实验组)；
同时以装有100mL含有终浓度为100mg·L-1的蒽酮液体选择培养基的250mL三角瓶，使培养基的初始pH值为7.0，在30℃、160rpm恒温摇床上振荡培养作为空白对照组。
培养过程中，间隔12小时分别提取实验组和空白对照组的培养液，测得蒽酮的浓度并绘制蒽酮降解率图，如图3所示。检测方法如下：
蒽酮浓度的检测采用紫外分光光度法：间隔12小时取3ml培养液，加入10m的苯进行萃取，振荡混匀后静置，取2ml上层有机相，再通过孔径为0.22μm的一次性有机针筒过滤器过滤去除剩余微生物，然后滤液用紫外分光光度法在波长620nm处测出蒽酮的吸光度并计算出其浓度。
从图3中可以看出施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1对蒽酮有较好的降解效果，在5d对初始浓度为100mg·L-1的蒽酮的降解率达到73.3％。
2.蒽酮初始浓度对施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1降解蒽酮的影响检测
将实施例2制备得到的以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1为活性成分的含菌悬液分别接种至含不同蒽酮终浓度(50mg·L-1、100mg·L-1、150mg·L-1、200mg·L-1、250mg·L-1)的液体选择培养基中，以蒽酮为唯一碳源，使培养基的初始pH值为7.0，分别取100mL置于5个250mL三角瓶中，在30℃、160rpm恒温摇床上振荡培养；振荡培养5d后测得蒽酮的浓度和菌密度(OD600)，测得结果如图4所示。
菌密度(OD600)的检测方法如下：以岛津UV2401型紫外-可见光分光光度计，在波长600nm处测定反应液的吸光度。
结果如图4所示，在200mg·L-1初始蒽酮浓度下，施氏假单胞菌WZY-3-1对蒽酮的降解率为73.3％，在250mg·L-1的浓度下污染物浓度对降解菌起到了抑制的作用，降解率降低，由图4可知，最佳初始浓度为200mg·L-1；并且通过菌密度(OD600)的测定值可以看出细菌生长在初始浓度为为200mg·L-1时最好。
3.施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1对蒽酮降解的最佳温度条件筛选
将实施例2制备得到的以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1为活性成分的含菌悬液分别接种至含蒽酮终浓度为100mg·L-1的液体选择培养基中，使培养基的初始pH值为7.0，分别取100mL置于5个250mL三角瓶中，分别置于20℃、25℃、30℃、35℃或40℃，160rpm恒温摇床上振荡培养；振荡培养5d后测得蒽酮的浓度和菌密度(OD600)，测得结果如图5所示。
结果如图5所示：菌株WZY-3-1对低温的环境适应性相对较差，当温度为30.0℃时，菌株WZY-3-1对蒽酮的降解效果最好，达到70.81％；并且通过菌密度(OD600)的测定值可以看出细菌生长在温度为30℃时最好。
4.施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1对蒽酮降解的最佳pH值条件筛选
将实施例2制备得到的以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1为活性成分的含菌悬液分别接种至含蒽酮终浓度为100mg·L-1的液体选择培养基中，分别取100mL置于5个250mL三角瓶中，分别调节培养基pH值为5.0、6.0、7.0、8.0或9.0，在30℃、160rpm恒温摇床上振荡培养；振荡培养5d后测得蒽酮的浓度和菌密度(OD600)，测得结果如图6所示。
结果如图6所示：菌株WZY-3-1对弱酸和弱碱的环境适应性相对较差，当pH为7.0时，菌株WZY-3-1对蒽酮的降解效果最好，达到70.9％；并且通过菌密度(OD600)的测定值可以看出细菌生长在pH 7.0时最好。
5.施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)WZY-3-1对蒽酮降解的最佳接种量的筛选
将实施例2步骤(3)中种子液以体积浓度分别为1％、2％、3％、4％、5％的接种量接种至发酵培养基，实施例2的其他步骤不变，制备接种量为1％、2％、3％、4％、5％的以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1为活性成分的含菌悬液。
分别将接种量为1％、2％、3％、4％、5％的以高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1为活性成分的含菌悬液接种至蒽酮终浓度为100mg·L-1的液体选择培养基中，分别取100mL置于5个250mL三角瓶中，使培养基的初始pH值为7.0，在30℃、160rpm恒温摇床上振荡培养；振荡培养5d后测得蒽酮的浓度和菌密度(OD600)，测得结果如图7所示。
结果如图7所示：当接种量大于1％时，由于刚开始时培养基中营养物质充足，接种量多少直接影响到底物降解，降解率率随着接种量的增加而缓慢上升，当接种量为4％时，降解率达到72.44％，而随着接种量的继续增加，在降解菌之间形成了对营养物质的竞争关系，因此还原率出现减小的现象；由图7可知，菌株WZY-3-1的最佳接种量为4％左右；并且通过菌密度(OD600)的测定值可以看出细菌生长在接种量为4％时最好。
序列表
<110> 平湖石化有限责任公司
<120> 高效降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1及应用
<160> 1
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cgggcggtgt gtacaaggcc cgggaacgta ttcaccgtga cattctgatt cacgattact 120
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tagcccaggc cgtaagggcc atgatgactt gacgtcatcc ccaccttcct ccggtttgtc 300
accggcagtc tccttagagt gcccacctta acgtgctggt aactaaggac aagggttgcg 360
ctcgttacgg gacttaaccc aacatctcac gacacgagct gacgacagcc atgcagcacc 420
tgtgtcagag ctcccgaagg caccaatcca tctctggaaa gttctctgca tgtcaaggcc 480
tggtaaggtt cttcgcgttg cttcgaatta aaccacatgc tccaccgctt gtgcgggccc 540
ccgtcaattc atttgagttt taaccttgcg gccgtactcc ccaggcggtc gacttaatgc 600
gttagctgcg ccactaagat ctcaaggatc ccaacggcta gtcgacatcg tttacggcgt 660
ggactaccag ggtatctaat cctgtttgct ccccacgctt tcgcacctca gtgtcagtat 720
tagcccaggt ggtcgccttc gccactggtg ttccttccta tatctacgca tttcaccgct 780
acacaggaaa ttccaccacc ctctgccata ctctagctcg ccagttttgg atgcagttcc 840
caggttgagc ccggggcttt cacatccaac ttaacgaacc acctacgcgc gctttacgcc 900
cagtaattcc gattaacgct tgcacccttc gtattaccgc ggctgctggc acgaagttag 960
ccggtgctta ttctgttggt aacgtcaaaa cagcaaggta ttaacttact gcccttcctc 1020
ccaacttaaa gtgctttaca atccgaagac cttcttcaca cacgcggcat ggctggatca 1080
ggctttcgcc cattgtccaa tattccccac tgctgcctcc cgtaggagtc tggaccgtgt 1140
ctcagttcca gtgtgactga tcatcctctc agaccagtta cggatcgtcg ccttggtgag 1200
cctttacctc accaactagc taatccgacc taggctcatc tgatagcgtg aggtccgaag 1260
atcccccact ttctcccgta ggacgtatgc ggtattagcg ttcctttcga aacgttgtcc 1320
cccactacca ggcagattcc taggcattac tcacccgtcc gccgctgaat catgagcaag 1380
ctccactctc cgctcgactg caggt 1405
Claims (3)
1.一株降解蒽酮的施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)，其特征在于，其命名为施氏假单胞菌WZY-3-1，其保藏编号为CCTCC NO:M 20211035。
2.一种以权利要求1所述施氏假单胞菌为活性成分的含菌悬液，其特征在于，所述含菌悬液以降解蒽酮的施氏假单胞菌WZY-3-1经斜面培养、种子培养、发酵后制成。
3.一种权利要求2所述含菌悬液在降解蒽酮中的应用。
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|---|---|---|---|
| CN202111473190.5A CN114292771B (zh) | 2021-12-02 | 2021-12-02 | 高效降解蒽酮的施氏假单胞菌wzy-3-1及应用 |
Applications Claiming Priority (1)
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|---|---|---|---|
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| CN114292771A CN114292771A (zh) | 2022-04-08 |
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2021
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| Title |
|---|
| Evidence for a Novel Pathway in the Degradation of Fluorene by Pseudomonas sp. Strain F274;M. GRIFOLL 等;《APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY》;第2438-2449页 * |
| 烃降解菌WJ-1及其生物表面活性剂特性研究;夏文杰 等;《油田化学》;第436-440和418页 * |
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