CN114280181A - 一种瑞舒伐他汀中间体及其有关物质的检测方法 - Google Patents
一种瑞舒伐他汀中间体及其有关物质的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114280181A CN114280181A CN202111588110.0A CN202111588110A CN114280181A CN 114280181 A CN114280181 A CN 114280181A CN 202111588110 A CN202111588110 A CN 202111588110A CN 114280181 A CN114280181 A CN 114280181A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- impurity
- mobile phase
- solution
- gradient
- rosuvastatin intermediate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 229960000672 rosuvastatin Drugs 0.000 title claims abstract description 68
- BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N rosuvastatin Chemical compound CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N 0.000 title claims abstract description 68
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 30
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical group CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 84
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 49
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 27
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 12
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 7
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 95
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 64
- XUKUURHRXDUEBC-SXOMAYOGSA-N (3s,5r)-7-[2-(4-fluorophenyl)-3-phenyl-4-(phenylcarbamoyl)-5-propan-2-ylpyrrol-1-yl]-3,5-dihydroxyheptanoic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-SXOMAYOGSA-N 0.000 claims description 40
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 33
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims description 22
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 claims description 16
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 15
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 14
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 6
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 3
- 238000012856 packing Methods 0.000 claims description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 abstract description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 61
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 9
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 7
- XXMFJKNOJSDQBM-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trifluoroacetic acid;hydrate Chemical compound [OH3+].[O-]C(=O)C(F)(F)F XXMFJKNOJSDQBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 4
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 4
- 229960004796 rosuvastatin calcium Drugs 0.000 description 4
- LALFOYNTGMUKGG-BGRFNVSISA-L rosuvastatin calcium Chemical compound [Ca+2].CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O.CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O LALFOYNTGMUKGG-BGRFNVSISA-L 0.000 description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 4
- CABVTRNMFUVUDM-VRHQGPGLSA-N (3S)-3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)C[C@@](O)(CC(O)=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 CABVTRNMFUVUDM-VRHQGPGLSA-N 0.000 description 3
- 108010062497 VLDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 3
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical group C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000001255 4-fluorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1F 0.000 description 2
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 2
- MSDYDUNHTAYBHV-UHFFFAOYSA-N n-[4-(4-fluorophenyl)-5-(hydroxymethyl)-6-propan-2-ylpyrimidin-2-yl]-n-methylmethanesulfonamide Chemical compound CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1CO MSDYDUNHTAYBHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PHEVHIWIKJRWDB-UHFFFAOYSA-N n-[5-(bromomethyl)-4-(4-fluorophenyl)-6-propan-2-ylpyrimidin-2-yl]-n-methylmethanesulfonamide Chemical compound CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1CBr PHEVHIWIKJRWDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 2
- CMSYDJVRTHCWFP-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphane;hydrobromide Chemical compound Br.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 CMSYDJVRTHCWFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KJTLQQUUPVSXIM-ZCFIWIBFSA-M (R)-mevalonate Chemical compound OCC[C@](O)(C)CC([O-])=O KJTLQQUUPVSXIM-ZCFIWIBFSA-M 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- KJTLQQUUPVSXIM-UHFFFAOYSA-N DL-mevalonic acid Natural products OCCC(O)(C)CC(O)=O KJTLQQUUPVSXIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 229940123934 Reductase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000003741 agents affecting lipid metabolism Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000010812 external standard method Methods 0.000 description 1
- 239000002471 hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000005220 pharmaceutical analysis Methods 0.000 description 1
- 229940096701 plain lipid modifying drug hmg coa reductase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
Images
Abstract
本发明公开了一种瑞舒伐他汀中间体及其有关物质的检测方法，该检测方法为高效液相色谱法，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的反相柱；流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为三氟乙酸体积浓度0.08～0.12％的三氟乙酸水溶液，流动相B为乙腈；洗脱方式为梯度洗脱。本发明检测方法能有效分离瑞舒伐他汀中间体T及其有关物质，专属性强、灵敏度高、准确度好，为中间体的质量追踪和质量控制提供了简单、快速、可靠的方法。
Description
技术领域
本发明属于药物分析领域，涉及一种瑞舒伐他汀中间体及其有关物质的检测方法。
背景技术
瑞舒伐他汀钙是阿斯利康公司开发的新一代他汀类血脂调节药，属于选择性3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂，已在美国、日本、欧洲、中国等多个国家和地区上市。HMG-CoA还原酶抑制剂是转变3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A为甲戊酸盐—胆固醇的前体—的限速酶。瑞舒伐他汀钙的主要作用部位是肝—降低胆固醇的靶向器官。瑞舒伐他汀钙增加了肝低密度脂蛋白(LDL)细胞表面受体数目，促进LDL的吸收和分解代谢，抑制了极低密度脂蛋白(VLDL)的肝合成，由此降低VLDL和LDL微粒的总数。
瑞舒伐他汀中间体[4-(4-氟苯基)-6-异丙基-2-(N-甲基-N-甲磺酰胺基)-5-嘧啶基]三苯基溴化膦(CAS：885477-83-8)是合成瑞舒伐他汀的重要中间体(在下文中将其简称为“瑞舒伐他汀中间体T”)，其结构式如式(I)所示：
瑞舒伐他汀中间体T的合成路线如下：
该合成路线中，产物瑞舒伐他汀中间体T中会含有多种有关物质，包括未反应的原料、过程中间体等等。
现行《美国药典》与《欧洲药典》收载有瑞舒伐他汀钙原料药的质量标准，但没有记载中间体的检测方法。目前相关文献也未见有对瑞舒伐他汀中间体T及其有关物质的检测方法的具体报道。
因此，目前缺少一种能够检测瑞舒伐他汀中间体T及其有关物质的检测方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种可以检测瑞舒伐他汀中间体T及其有关物质的方法，该方法可以分离以及准确定量瑞舒伐他汀中间体T及其各有关物质。
为实现上述目的，本发明提供了一种采用高效液相色谱法检测瑞舒伐他汀中间体T及其有关物质的检测方法，其中
所述瑞舒伐他汀中间体T的化学名为[4-(4-氟苯基)-6-异丙基-2-(N-甲基-N-甲磺酰胺基)-5-嘧啶基]三苯基溴化膦，CAS：885477-83-8，具有式(I)的结构式：
所述有关物质选自杂质A、杂质B和/或杂质C；
所述杂质A的化学名为5-(羟基甲基)-4-(4-氟苯基)-6-异丙基-2-[甲基(甲磺酰)氨基]嘧啶，CAS：147118-36-3，具有式(II)的结构式：
所述杂质B的化学名为三苯基膦，CAS：603-35-0，具有式(III)的结构式：
所述杂质C的化学名为5-(溴甲基)-4-(4-氟苯基)-6-异丙基-2-[甲基(甲磺酰)氨基]嘧啶，CAS：799842-07-2，具有式(IV)的结构式：
取空白溶液、系统适用性溶液和供试品溶液进行高效液相色谱检测，检测条件如下：
色谱柱为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的反相柱；
流动相由流动相A和流动相B组成，所述流动相A为三氟乙酸体积浓度0.08～0.12％的三氟乙酸水溶液，所述流动相B为乙腈；
洗脱方式为梯度洗脱；
其中，所述空白溶液为乙腈；
所述系统适用性溶液为含有瑞舒伐他汀中间体T以及杂质A对照品、杂质B对照品和杂质C对照品的乙腈溶液；
所述供试品溶液为待测样品的乙腈溶液，待测样品含有所述瑞舒伐他汀中间体T和/或所述有关物质。
在一些实施方案中，上述方法中，所述系统适用性溶液可以通过将瑞舒伐他汀中间体T对照品以及杂质A对照品、杂质B对照品和杂质C对照品溶于乙腈制成。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，待测样品中瑞舒伐他汀中间体T的含量可以为90.0％以上，例如瑞舒伐他汀中间体T的含量为90.0％、91.0％、92.0％、93.0％、94.0％、95.0％、96.0％、97.0％、98.0％、99.0％或100.0％或所列数值中的任意两者之间的含量，进一步地，瑞舒伐他汀中间体T的含量可以为99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％、99.9％或所列数值中的任意两者之间的含量。
本发明中，所述梯度洗脱是指本领域中通过不断调整流动相的体积配比以使样品中的所有组分得到有效分离和检测而进行的梯度洗脱。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述梯度洗脱中，初始梯度为流动相B占流动相的体积百分数由30％～40％变化至100％，第二梯度为流动相B占流动相的体积百分数为100％，第三梯度为流动相B占流动相的体积百分数由100％变化至30％～40％，最终梯度为流动相B占流动相的体积百分数为30％～40％；优选地，初始梯度为流动相B占流动相的体积百分数为35％变化至100％，第二梯度为流动相B占流动相的体积百分数为100％，第三梯度为流动相B占流动相的体积百分数由100％变化至35％，最终梯度为流动相B占流动相的体积百分数为35％。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述初始梯度的洗脱时间为8～13min，优选为10min；所述第二梯度的洗脱时间为7～10min，优选为8min；所述第三梯度的洗脱时间为1～3min，优选为1min；所述最终梯度的洗脱时间为4～8min，优选为6min。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述三氟乙酸水溶液中三氟乙酸的体积浓度为0.1％。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述色谱柱的填料颗粒度为3～5μm，色谱柱的长度为75～150mm，色谱柱的直径为2～5mm。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述色谱柱可以来自市售品牌，例如Agilent Eclipse plus C18。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述高效液相色谱法可采用本领域的常规高效液相色谱仪，例如Agilent 1260液相色谱仪。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述色谱柱的柱温为20～35℃，优选为30℃。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述流动相的流速为0.3～0.8mL/min，优选为0.5mL/min。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述高效液相色谱法的进样量可参考本领域HPLC检测分析的常规进样量，优选1～10μL，例如5μL。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述高效液相色谱法的检测器为紫外吸收检测器。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述高效液相色谱法的检测波长为240～250nm，优选为244nm。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述高效液相色谱法的进样盘温度为4～8℃，优选为4℃。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述系统适用性溶液中瑞舒伐他汀中间体T对照品的浓度为1～2mg/mL，优选1mg/mL，杂质A对照品、杂质B对照品和杂质C对照品的浓度分别为0.25～2μg/mL，优选1μg/mL。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述供试品溶液的浓度为1～2mg/mL，优选1mg/mL，如果所述供试品溶液含有所述有关物质，则其中杂质A、杂质B或杂质C的浓度分别为0～3μg/mL时可准确定量。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，所述瑞舒伐他汀中间体T的主峰与所述有关物质的峰的分离度均大于2.0，瑞舒伐他汀中间体T和所述有关物质的峰的理论塔板数均大于10000。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，杂质定量方法为杂质外标法。
在一些实施方案中，上述任一所述的方法中，进一步可以用杂质A对照品、杂质B对照品和杂质C对照品的定位溶液进行定位，定位溶液的浓度可以为1mg/mL。
与现有技术相比，本发明的积极效果在于：
本发明的分离检测方法能实现瑞舒伐他汀中间体T及其有关物质的各色谱峰之间的有效分离，准确定性及定量，从而为瑞舒伐他汀中间体T的质量追踪和质量控制提供了简单、快速、可靠的方法。
专属性试验，结果显示出峰顺序依次为瑞舒伐他汀中间体T、杂质A、杂质C、杂质B，各色谱峰的峰型良好，理论塔板数大于10000及分离度均大于2.0，说明本法专属性强。
检测限与定量限试验，结果显示本法定量限(LOQ)杂质A浓度为0.2585μg/ml，杂质B浓度为0.25425μg/ml，杂质C浓度为0.25975μg/ml，均相当于供试品溶液浓度的0.025％，说明本法的灵敏度非常高。
线性和范围试验，结果显示各杂质所在的范围内线性关系良好。
回收率试验，结果显示各杂质的平均回收率均在90％-110％以内，RSD均在5％以内，本法准确度良好。
附图说明
图1为空白溶液的液相色谱图。
图2为系统适用性溶液的液相色谱图。
图3为供试品溶液的液相色谱图。
图4为杂质A的液相色谱图。
图5为杂质B的液相色谱图。
图6为杂质C的液相色谱图。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。本发明中，如无特别注明，任意溶剂的比例均指体积比。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
以下结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围。在不违背本领域常识的基础上，本发明所述检测方法的各条件可任意组合，它们均包含在本发明范围内，其中包括但不限于各实施例。
瑞舒伐他汀中间体T对照品购自江西埃菲姆科技有限公司，纯度为99.60％。
瑞舒伐他汀中间体T待检样品购自浙江海翔药业股份有限公司，纯度为99.30％。
杂质A对照品购自上海迈瑞尔化学技术有限公司，纯度为96.04％。
杂质B对照品购自上海迈瑞尔化学技术有限公司，纯度为99.75％。
杂质C对照品购自上海迈瑞尔化学技术有限公司，纯度为99.04％。
色谱柱采用固定相为碳十八烷基硅烷键合硅胶的反相柱，Agilent Eclipse PlusC18，4.6×150mm，3.5μm。
高效液相色谱仪采用Agilent 1260液相色谱仪，检测器为紫外检测器，进样盘温度为4℃。
实施例1
溶液配制：
1、杂质A/杂质C对照品储备溶液(100μg/mL)：精密称取10mg杂质A对照品和10mg杂质C对照品置于100mL容量瓶中，加乙腈溶解并定容至刻度，摇匀。
2、杂质B对照品储备溶液(100μg/mL)：精密称取10mg杂质B对照品置于100mL容量瓶中，加乙腈溶解并定容至刻度，摇匀。
3、系统适用性溶液：精密称取100mg瑞舒伐他汀中间体T对照品至100mL容量瓶中，用乙腈溶解，各移取1mL杂质A/杂质C对照品储备溶液、杂质B对照品储备溶液至该容量瓶中，加乙腈定容至刻度，摇匀。(临用新制)
4、供试品溶液(1mg/mL)：精密称取瑞舒伐他汀中间体T待检样品20mg至20mL容量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀。(临用新制)
5、空白溶液：乙腈。
6、杂质A的定位溶液(1mg/mL)：精密称取10mg杂质A对照品置于10mL容量瓶中，加乙腈溶解并定容至刻度，摇匀。
7、杂质B的定位溶液(1mg/mL)：精密称取10mg杂质B对照品置于10mL容量瓶中，加乙腈溶解并定容至刻度，摇匀。
8、杂质C的定位溶液(1mg/mL)：精密称取10mg杂质C对照品置于10mL容量瓶中，加乙腈溶解并定容至刻度，摇匀。
色谱条件：以0.1％三氟乙酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按表1进行梯度洗脱，柱温30℃，流速为0.5mL/min；检测波长为244nm。
表1
测定方法：
精密吸取空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定获得的空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液的液相色谱图分别如图1～图3所示。
精密吸取杂质A的定位溶液、杂质B的定位溶液和杂质C的定位溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定获得的杂质A、杂质B和杂质C的液相色谱图分别如图4～图6所示，用于方法开发时确定图谱中杂质A、杂质B和杂质C的出峰位置。
系统适用性溶液的具体数据如表2所示。
表2
| 峰编号 | 保留时间(min) | 分离度 | 理论塔板数 |
| 瑞舒伐他汀中间体T | 9.892 | / | 16902 |
| 杂质A | 10.628 | 3.39 | 109483 |
| 杂质C | 13.752 | 25.03 | 205464 |
| 杂质B | 15.118 | 11.03 | 228703 |
结论：瑞舒伐他汀中间体T主峰与各杂质峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000。
供试品溶液中，瑞舒伐他汀中间体T主峰与杂质A峰、杂质B峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000，杂质C未检出。
实施例2
溶液配制：同实施例1溶液配制的1-5。
色谱条件：以0.1％三氟乙酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按表3进行梯度洗脱，柱温30℃，流速为0.5mL/min；检测波长为244nm。
表3
测定方法：精密吸取空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
系统适用性溶液的具体数据如表4所示。
表4
| 峰编号 | 保留时间(min) | 分离度 | 理论塔板数 |
| 瑞舒伐他汀中间体T | 9.542 | / | 15133 |
| 杂质A | 10.281 | 3.25 | 80027 |
| 杂质C | 13.589 | 24.59 | 193481 |
| 杂质B | 15.021 | 11.44 | 223422 |
结论：瑞舒伐他汀中间体T主峰与各杂质峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000。
供试品溶液中，瑞舒伐他汀中间体T主峰与杂质A峰、杂质B峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000，杂质C未检出。
实施例3
溶液配制：同实施例1溶液配制的1-5。
色谱条件：以0.1％三氟乙酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按表5进行梯度洗脱，柱温30℃，流速为0.5mL/min；检测波长为244nm。
表5
测定方法：精密吸取空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
系统适用性溶液的具体数据如表6所示。
表6
| 峰编号 | 保留时间(min) | 分离度 | 理论塔板数 |
| 瑞舒伐他汀中间体T | 10.330 | / | 20811 |
| 杂质A | 11.073 | 3.55 | 109770 |
| 杂质C | 13.96 | 22.81 | 218745 |
| 杂质B | 15.257 | 10.39 | 222236 |
结论：瑞舒伐他汀中间体T主峰与各杂质峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000。
供试品溶液中，瑞舒伐他汀中间体T主峰与杂质A峰、杂质B峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000，杂质C未检出。
实施例4
溶液配制：同实施例1溶液配制的1-5。
色谱条件：以0.1％三氟乙酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按表7进行梯度洗脱，柱温30℃，流速为0.5mL/min；检测波长为244nm。
表7
测定方法：精密吸取空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
系统适用性溶液的具体数据如表8所示。
表8
| 峰编号 | 保留时间(min) | 分离度 | 理论塔板数 |
| 瑞舒伐他汀中间体T | 9.045 | / | 18800 |
| 杂质A | 9.780 | 3.77 | 97683 |
| 杂质C | 12.305 | 21.05 | 183460 |
| 杂质B | 13.510 | 9.86 | 172855 |
结论：瑞舒伐他汀中间体T主峰与各杂质峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000。
供试品溶液中，瑞舒伐他汀中间体T主峰与杂质A峰、杂质B峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000，杂质C未检出。
实施例5
溶液配制：同实施例1溶液配制的1-5。
色谱条件：以0.1％三氟乙酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按表9进行梯度洗脱，柱温30℃，流速为0.5mL/min；检测波长为244nm。
表9
测定方法：精密吸取空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
系统适用性溶液的具体数据如表10所示。
表10
| 峰编号 | 保留时间(min) | 分离度 | 理论塔板数 |
| 瑞舒伐他汀中间体T | 11.035 | / | 16137 |
| 杂质A | 11.816 | 3.15 | 102981 |
| 杂质C | 15.813 | 28.56 | 228477 |
| 杂质B | 17.528 | 13.14 | 293454 |
结论：瑞舒伐他汀中间体T主峰与各杂质峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000。
供试品溶液中，瑞舒伐他汀中间体T主峰与杂质A峰、杂质B峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000，杂质C未检出。
实施例6
溶液配制：同实施例1溶液配制的1-5。
色谱条件：以0.08％三氟乙酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按表1进行梯度洗脱，柱温30℃，流速为0.5mL/min；检测波长为244nm。
测定方法：精密吸取空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
系统适用性溶液的具体数据如表11所示。
表11
| 峰编号 | 保留时间(min) | 分离度 | 理论塔板数 |
| 瑞舒伐他汀中间体T | 9.784 | / | 15932 |
| 杂质A | 10.628 | 3.92 | 122368 |
| 杂质C | 13.749 | 25.81 | 209250 |
| 杂质B | 15.124 | 11.14 | 229404 |
结论：瑞舒伐他汀中间体T主峰与各杂质峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000。
供试品溶液中，瑞舒伐他汀中间体T主峰与杂质A峰、杂质B峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000，杂质C未检出。
实施例7
溶液配制：同实施例1溶液配制的1-5。
色谱条件：以0.12％三氟乙酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按表1进行梯度洗脱，柱温30℃，流速为0.5mL/min；检测波长为244nm。
测定方法：精密吸取空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
系统适用性溶液的具体数据如表12所示。
表12
| 峰编号 | 保留时间(min) | 分离度 | 理论塔板数 |
| 瑞舒伐他汀中间体T | 9.925 | / | 20020 |
| 杂质A | 10.632 | 3.56 | 132278 |
| 杂质C | 13.749 | 26.26 | 207637 |
| 杂质B | 15.118 | 11.11 | 233041 |
结论：瑞舒伐他汀中间体T主峰与各杂质峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000。
供试品溶液中，瑞舒伐他汀中间体T主峰与杂质A峰、杂质B峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000，杂质C未检出。
实施例8
溶液配制：同实施例1溶液配制的1-5。
色谱条件：以0.1％三氟乙酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按表1进行梯度洗脱，柱温30℃，流速为0.3mL/min；检测波长为244nm。
测定方法：精密吸取空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
系统适用性溶液的具体数据如表13所示。
表13
| 峰编号 | 保留时间(min) | 分离度 | 理论塔板数 |
| 瑞舒伐他汀中间体T | 13.532 | / | 22585 |
| 杂质A | 14.721 | 4.52 | 127248 |
| 杂质C | 17.888 | 19.69 | 208834 |
| 杂质B | 19.760 | 10.09 | 135282 |
结论：瑞舒伐他汀中间体T主峰与各杂质峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000。
供试品溶液中，瑞舒伐他汀中间体T主峰与杂质A峰、杂质B峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000，杂质C未检出。
实施例9
溶液配制：同实施例1溶液配制的1-5。
色谱条件：以0.1％三氟乙酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，按表1进行梯度洗脱，柱温30℃，流速为0.8mL/min；检测波长为244nm。
测定方法：精密吸取空白溶液、系统适用性溶液、供试品溶液各5μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
系统适用性溶液的具体数据如表14所示。
表14
| 峰编号 | 保留时间(min) | 分离度 | 理论塔板数 |
| 瑞舒伐他汀中间体T | 7.582 | / | 14769 |
| 杂质A | 8.044 | 2.49 | 72528 |
| 杂质C | 11.073 | 25.62 | 192860 |
| 杂质B | 12.389 | 13.01 | 240628 |
结论：瑞舒伐他汀中间体T主峰与各杂质峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000。
供试品溶液中，瑞舒伐他汀中间体T主峰与杂质A峰、杂质B峰的分离度均大于2.0，理论塔板数均大于10000，杂质C未检出。
综上所述，各实施例中，杂质A、杂质B、杂质C和瑞舒伐他汀中间体T的峰型良好，分离度好，理论塔板数良好，达到了瑞舒伐他汀中间体T及其有关物质的分析要求。本发明的方法专属性强、结果准确、稳定性好、操作简便。
Claims (10)
1.一种瑞舒伐他汀中间体T及其有关物质的检测方法，其特征在于，
所述瑞舒伐他汀中间体T具有式(I)的结构式：
所述有关物质选自杂质A、杂质B和/或杂质C；
所述杂质A具有式(II)的结构式：
所述杂质B具有式(III)的结构式：
所述杂质C具有式(IV)的结构式：
所述检测方法采用高效液相色谱法，包括如下步骤：
取空白溶液、系统适用性溶液和供试品溶液进行高效液相色谱检测，检测条件如下：
色谱柱为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的反相柱；
流动相由流动相A和流动相B组成，所述流动相A为三氟乙酸体积浓度0.08～0.12％的三氟乙酸水溶液，所述流动相B为乙腈；
洗脱方式为梯度洗脱；
其中，所述空白溶液为乙腈；
所述系统适用性溶液为含有瑞舒伐他汀中间体T对照品以及杂质A对照品、杂质B对照品和杂质C对照品的乙腈溶液；
所述供试品溶液为待测样品的乙腈溶液，待测样品含有所述瑞舒伐他汀中间体T和/或所述有关物质。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱中，初始梯度为流动相B占流动相的体积百分数由30％～40％变化至100％，第二梯度为流动相B占流动相的体积百分数为100％，第三梯度为流动相B占流动相的体积百分数由100％变化至30％～40％，最终梯度为流动相B占流动相的体积百分数为30％～40％。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述初始梯度的洗脱时间为8～13min；所述第二梯度的洗脱时间为7～10min；所述第三梯度的洗脱时间为1～3min；所述最终梯度的洗脱时间为4～8min。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述色谱柱的填料颗粒度为3～5μm；
所述色谱柱的长度为75～150mm；和
所述色谱柱的直径为2～5mm。
5.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述色谱柱的柱温为20～35℃。
6.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.3～0.8mL/min。
7.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的检测器为紫外吸收检测器，波长240～250nm。
8.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述系统适用性溶液中瑞舒伐他汀中间体T对照品的浓度为1～2mg/mL，杂质A对照品、杂质B对照品和杂质C对照品的浓度分别为0.25～2μg/mL。
9.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液的浓度为1～2mg/mL。
10.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述瑞舒伐他汀中间体T的主峰与所述有关物质的峰的分离度均大于2.0，所述瑞舒伐他汀中间体T和所述有关物质的峰的理论塔板数均大于10000。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111588110.0A CN114280181A (zh) | 2021-12-23 | 2021-12-23 | 一种瑞舒伐他汀中间体及其有关物质的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111588110.0A CN114280181A (zh) | 2021-12-23 | 2021-12-23 | 一种瑞舒伐他汀中间体及其有关物质的检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114280181A true CN114280181A (zh) | 2022-04-05 |
Family
ID=80874386
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111588110.0A Pending CN114280181A (zh) | 2021-12-23 | 2021-12-23 | 一种瑞舒伐他汀中间体及其有关物质的检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114280181A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115166104A (zh) * | 2022-09-08 | 2022-10-11 | 康瑞鑫(天津)药物研究院有限公司 | 将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用 |
Citations (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005056534A1 (en) * | 2003-12-02 | 2005-06-23 | Teva Pharmaceutical Industries Ltd. | Reference standard for characterization of rosuvastatin |
| WO2009157014A2 (en) * | 2008-01-30 | 2009-12-30 | Cadila Healthcare Limited | A process for preparing hmg-coa reductase inhibitors and intermediates |
| CN103454352A (zh) * | 2013-07-30 | 2013-12-18 | 广东先强药业股份有限公司 | 一种hplc法测定瑞舒伐他汀钙的含量及其有关物质的方法 |
| KR20140017207A (ko) * | 2012-07-31 | 2014-02-11 | 미래파인켐 주식회사 | 로수바스타틴 이소프로필 아민염, 이의 제조 방법 및 이를 이용한 로수바스타틴 헤미칼슘염의 제조방법 |
| KR20170078033A (ko) * | 2015-12-29 | 2017-07-07 | 미래파인켐 주식회사 | 신규한 스타틴 중간체, 이의 제조방법 및 이를 이용한 로수바스타틴의 제조방법 |
| WO2018041281A1 (en) * | 2016-09-05 | 2018-03-08 | Zentiva, K.S. | A pharmaceutical composition comprising rosuvastatin and ezetimibe and a preparation method thereof |
| CN108398501A (zh) * | 2018-03-02 | 2018-08-14 | 海南通用三洋药业有限公司 | 一种检测瑞舒伐他汀钙有关物质的方法 |
| CN108845058A (zh) * | 2018-08-13 | 2018-11-20 | 江苏悦兴医药技术有限公司 | 一种瑞舒伐他汀钙起始物料的高效液相色谱检测方法 |
| CN111812217A (zh) * | 2020-05-29 | 2020-10-23 | 南京品生医学检验实验室有限公司 | 一种检测血浆中抗动脉粥样硬化药物浓度的方法 |
| US20200378942A1 (en) * | 2019-05-29 | 2020-12-03 | Imam Abdulrahman Bin Faisal University | Liquid chromatographic method for the simultaneous analysis of antihypertensive and antilipidemic agents and interactions thereof |
| WO2021217887A1 (zh) * | 2020-04-30 | 2021-11-04 | 山东齐都药业有限公司 | 匹伐他汀钙片中潜在致突变杂质的检测方法 |
| CN113759049A (zh) * | 2021-11-09 | 2021-12-07 | 南京科默生物医药有限公司 | 一种依折麦布瑞舒伐他汀钙片有关物质的检测方法 |
| CN114264747A (zh) * | 2021-12-27 | 2022-04-01 | 浙江海翔药业股份有限公司 | 一种恩格列净中间体及其有关物质的高效液相色谱检测方法 |
-
2021
- 2021-12-23 CN CN202111588110.0A patent/CN114280181A/zh active Pending
Patent Citations (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005056534A1 (en) * | 2003-12-02 | 2005-06-23 | Teva Pharmaceutical Industries Ltd. | Reference standard for characterization of rosuvastatin |
| WO2009157014A2 (en) * | 2008-01-30 | 2009-12-30 | Cadila Healthcare Limited | A process for preparing hmg-coa reductase inhibitors and intermediates |
| KR20140017207A (ko) * | 2012-07-31 | 2014-02-11 | 미래파인켐 주식회사 | 로수바스타틴 이소프로필 아민염, 이의 제조 방법 및 이를 이용한 로수바스타틴 헤미칼슘염의 제조방법 |
| CN103454352A (zh) * | 2013-07-30 | 2013-12-18 | 广东先强药业股份有限公司 | 一种hplc法测定瑞舒伐他汀钙的含量及其有关物质的方法 |
| KR20170078033A (ko) * | 2015-12-29 | 2017-07-07 | 미래파인켐 주식회사 | 신규한 스타틴 중간체, 이의 제조방법 및 이를 이용한 로수바스타틴의 제조방법 |
| WO2018041281A1 (en) * | 2016-09-05 | 2018-03-08 | Zentiva, K.S. | A pharmaceutical composition comprising rosuvastatin and ezetimibe and a preparation method thereof |
| CN108398501A (zh) * | 2018-03-02 | 2018-08-14 | 海南通用三洋药业有限公司 | 一种检测瑞舒伐他汀钙有关物质的方法 |
| CN108845058A (zh) * | 2018-08-13 | 2018-11-20 | 江苏悦兴医药技术有限公司 | 一种瑞舒伐他汀钙起始物料的高效液相色谱检测方法 |
| US20200378942A1 (en) * | 2019-05-29 | 2020-12-03 | Imam Abdulrahman Bin Faisal University | Liquid chromatographic method for the simultaneous analysis of antihypertensive and antilipidemic agents and interactions thereof |
| WO2021217887A1 (zh) * | 2020-04-30 | 2021-11-04 | 山东齐都药业有限公司 | 匹伐他汀钙片中潜在致突变杂质的检测方法 |
| CN111812217A (zh) * | 2020-05-29 | 2020-10-23 | 南京品生医学检验实验室有限公司 | 一种检测血浆中抗动脉粥样硬化药物浓度的方法 |
| CN113759049A (zh) * | 2021-11-09 | 2021-12-07 | 南京科默生物医药有限公司 | 一种依折麦布瑞舒伐他汀钙片有关物质的检测方法 |
| CN114264747A (zh) * | 2021-12-27 | 2022-04-01 | 浙江海翔药业股份有限公司 | 一种恩格列净中间体及其有关物质的高效液相色谱检测方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| NAZIR, S (NAZIR, SHABNAM)，IQBAL, Z (IQBAL, ZAFAR)，SHAH, Y (SHAH, YASAR)，AHMAD, L (AHMAD, LATEEF)，KHAN, A (KHAN, ABAD): "Pharmacokinetic study of rosuvastatin in males and females", 《EUROPEAN JOURNAL OF DRUG METABOLISM AND PHARMACOKINETICS》, vol. 40, no. 3, 23 September 2015 (2015-09-23), pages 313 - 318, XP035531811, DOI: 10.1007/s13318-014-0211-z * |
| 吴晋;张晴;余建明;: "瑞舒伐他汀钙片的含量测定分析", 海峡药学, vol. 26, no. 12, 15 December 2014 (2014-12-15), pages 88 - 90 * |
| 张得胜;庄波阳;王凌;: "高效液相色谱法测定瑞舒伐他汀钙片有关物质", 海峡药学, vol. 25, no. 10, 15 October 2013 (2013-10-15), pages 29 - 32 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115166104A (zh) * | 2022-09-08 | 2022-10-11 | 康瑞鑫(天津)药物研究院有限公司 | 将匹伐他汀钙起始物料和其杂质进行分离的方法和应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Yu et al. | Determination of pharmaceuticals and antiseptics in water by solid-phase extraction and gas chromatography/mass spectrometry: analysis via pentafluorobenzylation and stable isotope dilution | |
| Sun et al. | Simultaneous determination of arylpropionic acidic non-steroidal anti-inflammatory drugs in pharmaceutical formulations and human plasma by HPLC with UV detection | |
| Trivedi et al. | Development and validation of a stability-indicating RP-UPLC method for determination of rosuvastatin and related substances in pharmaceutical dosage form | |
| Barreiro et al. | A column-switching method for quantification of the enantiomers of omeprazole in native matrices of waste and estuarine water samples | |
| Mehta et al. | Determination of rosuvastatin in the presence of its degradation products by a stability-indicating LC method | |
| CN114280181A (zh) | 一种瑞舒伐他汀中间体及其有关物质的检测方法 | |
| CN113092597B (zh) | 一种匹伐他汀钙中间体有关物质的分析方法 | |
| CA2741928A1 (en) | Hplc method for the analysis of bosentan and related substances and use of these substances as reference standards and markers | |
| Ivanova et al. | HPLC method for determination of verapamil in human plasma after solid-phase extraction | |
| Davidson | Simultaneous assay for urinary 4-hydroxy-3-methoxymandelic acid, 5-hydroxyindoleacetic acid and homovanillic acid by isocratic HPLC with electrochemical detection | |
| CN110220989B (zh) | 一种检测盐酸法舒地尔及其9种有关物质的方法 | |
| Kwon et al. | Sensitive determination of fluoride in biological samples by gas chromatography–mass spectrometry after derivatization with 2-(bromomethyl) naphthalene | |
| Kathirvel et al. | Development and validation of HPTLC method for the determination of mycophenolate mofetil in bulk and pharmaceutical formulation | |
| Tekkeli et al. | An HPLC method for the determination of saxagliptin in human plasma with fluorescence detection | |
| CN115774061A (zh) | 1-环己基哌嗪中的醋酸的检测方法 | |
| Al-Majed et al. | Use of 7-fluoro-4-nitrobenzo-2-oxo-1, 3-diazole (NBD-F) for the determination of ramipril in tablets and spiked human plasma | |
| de Jalón et al. | Determination by high-performance liquid chromatography of ketoprofen in vitro in rat skin permeation samples | |
| Higashi et al. | Liquid chromatographic determination of 1-adamantanamine and 2-adamantanamine in human plasma after pre-column derivatization with o-phthalaldehyde and 1-thio-β-d-glucose | |
| Manikanta Kumar et al. | Development and Validation of RP-HPLC method for simultaneous estimation of Lamivudine and Efavirenz in the Pharmaceutical Dosage Form | |
| Soyseven et al. | Development of a RP-HPLC method for simultaneous determination of reference markers used for in-situ rat intestinal permeability studies | |
| Paramane et al. | Simultaneous RP-HPLC estimation of gatifloxacin and ornidazole in tablet dosage forms | |
| Althanyan et al. | Development of a microemulsion high performance liquid chromatography (MELC) method for determination of salbutamol in metered-dose inhalers (MDIS) | |
| Arnipalli et al. | New enantioselective liquid chromatography method development and validation of dipeptidyl peptidase IV inhibitors using a macrocyclic glycopeptide (vancomycin) chiral stationary phase under polar ionic mode condition | |
| CN102636582A (zh) | 测定三氮脒颗粒中三氮脒和安替比林含量的方法 | |
| CN110887925A (zh) | 一种用于测定磷霉素钠杂质的高效液相色谱方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |