CN114279992B - 一种黄贡椒中黄色色素的提取和检测方法 - Google Patents
一种黄贡椒中黄色色素的提取和检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114279992B CN114279992B CN202111661339.2A CN202111661339A CN114279992B CN 114279992 B CN114279992 B CN 114279992B CN 202111661339 A CN202111661339 A CN 202111661339A CN 114279992 B CN114279992 B CN 114279992B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- yellow
- yellow pigment
- ethyl acetate
- cyclohexane
- pigment
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000001052 yellow pigment Substances 0.000 title claims abstract description 61
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 36
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title abstract description 35
- KBPHJBAIARWVSC-XQIHNALSSA-N trans-lutein Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=CC(O)CC2(C)C)C KBPHJBAIARWVSC-XQIHNALSSA-N 0.000 claims abstract description 66
- 235000012680 lutein Nutrition 0.000 claims abstract description 34
- 239000001656 lutein Substances 0.000 claims abstract description 34
- KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N lutein Chemical compound C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\[C@H]1C(C)=C[C@H](O)CC1(C)C KBPHJBAIARWVSC-RGZFRNHPSA-N 0.000 claims abstract description 34
- 229960005375 lutein Drugs 0.000 claims abstract description 34
- ORAKUVXRZWMARG-WZLJTJAWSA-N lutein Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C(=CC(O)CC2(C)C)C ORAKUVXRZWMARG-WZLJTJAWSA-N 0.000 claims abstract description 34
- FJHBOVDFOQMZRV-XQIHNALSSA-N xanthophyll Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2C=C(C)C(O)CC2(C)C FJHBOVDFOQMZRV-XQIHNALSSA-N 0.000 claims abstract description 34
- JKQXZKUSFCKOGQ-JLGXGRJMSA-N (3R,3'R)-beta,beta-carotene-3,3'-diol Chemical compound C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C[C@@H](O)CC1(C)C JKQXZKUSFCKOGQ-JLGXGRJMSA-N 0.000 claims abstract description 32
- JKQXZKUSFCKOGQ-LQFQNGICSA-N Z-zeaxanthin Natural products C([C@H](O)CC=1C)C(C)(C)C=1C=CC(C)=CC=CC(C)=CC=CC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)C[C@@H](O)CC1(C)C JKQXZKUSFCKOGQ-LQFQNGICSA-N 0.000 claims abstract description 32
- QOPRSMDTRDMBNK-RNUUUQFGSA-N Zeaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCC(O)C1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)CC(O)CC2(C)C QOPRSMDTRDMBNK-RNUUUQFGSA-N 0.000 claims abstract description 32
- JKQXZKUSFCKOGQ-LOFNIBRQSA-N all-trans-Zeaxanthin Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CC(O)CC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=C(C)CC(O)CC2(C)C JKQXZKUSFCKOGQ-LOFNIBRQSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 235000010930 zeaxanthin Nutrition 0.000 claims abstract description 32
- 239000001775 zeaxanthin Substances 0.000 claims abstract description 32
- 229940043269 zeaxanthin Drugs 0.000 claims abstract description 32
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 31
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 31
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 31
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 12
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 claims abstract description 8
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 54
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 23
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- WACQKHWOTAEEFS-UHFFFAOYSA-N cyclohexane;ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O.C1CCCCC1 WACQKHWOTAEEFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 20
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 239000000049 pigment Substances 0.000 claims description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 claims description 11
- 238000002386 leaching Methods 0.000 claims description 8
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 7
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 241000758706 Piperaceae Species 0.000 abstract description 5
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 5
- 239000001054 red pigment Substances 0.000 abstract description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 13
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 6
- 240000008574 Capsicum frutescens Species 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 2-Methylpentane Chemical compound CCCC(C)C AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PFEOZHBOMNWTJB-UHFFFAOYSA-N 3-methylpentane Chemical compound CCC(C)CC PFEOZHBOMNWTJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GDOPTJXRTPNYNR-UHFFFAOYSA-N methylcyclopentane Chemical compound CC1CCCC1 GDOPTJXRTPNYNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IIEWJVIFRVWJOD-UHFFFAOYSA-N ethyl cyclohexane Natural products CCC1CCCCC1 IIEWJVIFRVWJOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 244000291564 Allium cepa Species 0.000 description 1
- 235000002732 Allium cepa var. cepa Nutrition 0.000 description 1
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 description 1
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 description 1
- 244000045232 Canavalia ensiformis Species 0.000 description 1
- 235000010520 Canavalia ensiformis Nutrition 0.000 description 1
- 235000010518 Canavalia gladiata Nutrition 0.000 description 1
- 235000002568 Capsicum frutescens Nutrition 0.000 description 1
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 description 1
- 244000131522 Citrus pyriformis Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 240000008892 Helianthus tuberosus Species 0.000 description 1
- 235000003230 Helianthus tuberosus Nutrition 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 244000017020 Ipomoea batatas Species 0.000 description 1
- 235000002678 Ipomoea batatas Nutrition 0.000 description 1
- 244000082204 Phyllostachys viridis Species 0.000 description 1
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 description 1
- 244000088415 Raphanus sativus Species 0.000 description 1
- 235000006140 Raphanus sativus var sativus Nutrition 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N all-trans beta-carotene Natural products CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 1
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013734 beta-carotene Nutrition 0.000 description 1
- 239000011648 beta-carotene Substances 0.000 description 1
- TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N beta-carotene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=CCCCC2(C)C TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N 0.000 description 1
- 229960002747 betacarotene Drugs 0.000 description 1
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 1
- 239000010495 camellia oil Substances 0.000 description 1
- 239000001390 capsicum minimum Substances 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 235000015067 sauces Nutrition 0.000 description 1
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000001040 synthetic pigment Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明公开了一种黄贡椒中黄色色素的提取和检测方法。本发明提供的提取方法，先采用植物油抽提溶剂进行提取，然后经过醇水混合液除去水溶性杂质，再经过多温度段硅胶柱洗脱，通过控制温度和洗脱溶剂，使黄贡椒中红色色素与黄色色素得到有效分离。检测方法以叶黄素、玉米黄素作为黄色色素的检测物质，用紫外分光光度计进行检测。该提取和检测方法能够有效提高黄贡椒中黄色色素的检测准确性和灵敏性，提取效果优异，且简单易操作，溶剂可回收再利用。
Description
技术领域
本发明涉及食品提取和检测技术领域，具体地，涉及一种黄贡椒中黄色色素的提取和检测方法。
背景技术
黄贡椒主要产于湖南衡东县，其具有皮薄肉厚，颜色鲜亮，兼具甜、辣、脆的特点，成熟后颜色臻至金黄色。衡东县种植黄贡椒已有400多年的历史，以三樟镇种植面积大，所产辣椒品质好、产量高、味道独特。黄贡椒目前也是湖南省地理标志农产品，除了作为特色土菜鲜食外，黄贡椒也被制成各种风味辣椒酱，如茶油、洋葱、红薯、刀豆、竹笋、豆豉、萝卜干和洋姜风味辣椒酱。
由于黄贡椒的种植需要衡东县得天独厚的地理条件，很大程度限制了黄贡椒的大面积种植。目前黄贡椒全国产量较少，也未开展对黄贡椒的深度研究。除了鲜食和制备辣椒酱外，市面上鲜有黄贡椒的其他深加工产品。成熟后的黄贡椒成亮黄色，含有丰富的黄色色素，黄色色素的成分包括β-胡萝卜素、叶黄素和玉米黄素等。目前对黄贡椒的开发深度不够，无法体现其黄色色素的利用价值。而叶黄素和玉米黄素等黄色色素作为一种天然的植物色素，其安全性高，无毒无害，直接添加到食品中，能够替代柠檬黄和日落黄等合成色素。且黄贡椒中的黄色色素除了作为天然色素外，其还具有其他特殊的生理功效，也具有重要的研究价值。但是目前并没有专门针对黄贡椒中黄色色素的提取方法和检测方法。且目前针对辣椒中提取和检测色素的方法较为复杂，对设备要求高。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的上述不足，提供一种黄贡椒中黄色色素的提取和检测方法，能够提取出杂质少的黄色色素，且具有高灵敏度和准确性。
本发明的第一个目的是提供一种黄贡椒中黄色色素的提取方法。
本发明的第二个目的是提供一种黄贡椒中黄色色素的检测方法。
本发明的第三个目的是提供所述黄贡椒中黄色色素的提取方法和/或黄贡椒中黄色色素的检测方法在制备提取和/或检测黄贡椒中黄色色素产品中的应用。
为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的：
一种黄贡椒中黄色色素的提取方法，包括以下步骤：
S1：粉碎黄贡椒，用植物油抽提溶剂浸提，制得浸提液；
S2：将步骤S1制备的浸提液与醇水混合液混合，分离，去除醇水混合相，得到色素粗提液；
S3：将步骤S2得到的色素粗提液温度调节至-5～5℃，用硅胶柱吸附，洗脱硅胶柱，收集流出液，得初次提纯液；
S4：将步骤S3得到的初次提纯液温度调节至20～35℃，用硅胶柱吸附，洗脱硅胶柱，收集流出液，得到黄贡椒中黄色色素。
优选地，所述黄贡椒中黄色色素为叶黄素和/或玉米黄素。
优选地，所述植物油抽提溶剂包含2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、甲基环戊烷和/或环己烷。
优选地，步骤S2中醇水混合液包括乙醇和水，所述乙醇和水的体积比为(2～5)：1。
更优选地，所述乙醇和水的体积比为3：1。
优选地，步骤S3中，色素粗提液温度调节至0℃。
优选地，步骤S4中，初次提纯液温度调节至30℃。
优选地，在步骤S3和S4中，洗脱硅胶柱所用洗脱液为乙酸乙酯-环己烷混合液。
更优选地，在步骤S3中，所述乙酸乙酯-环己烷混合液中乙酸乙酯和环己烷的体积比为(0.2～0.9)：1。
最优选地，在步骤S3中，所述乙酸乙酯-环己烷混合液中乙酸乙酯和环己烷的体积比为0.5：1。
更优选地，在步骤S4中，所述乙酸乙酯-环己烷混合液中乙酸乙酯与环己烷的体积比为(2.5～4)：1。
最优选地，在步骤S4中，所述乙酸乙酯-环己烷混合液中乙酸乙酯与环己烷的体积比为4：1。分别对低温和高温洗脱硅胶柱所用洗脱液进行控制，充分利用乙酸乙酯和环己烷不同比例下的极性，配合温度发挥作用，使黄贡椒中黄色色素有效分离，去除了红色色素的干扰。
一种黄贡椒中黄色色素的检测方法，用所述黄贡椒中黄色色素的提取方法提取黄贡椒中黄色色素，将所述黄贡椒中黄色色素溶于丙酮中，用紫外分光光度计测定和计算叶黄素和玉米黄素的含量。
紫外分光光度计计标准曲线的绘制：称取叶黄素和玉米黄素，分别溶于丙酮中，制备成叶黄素标准品原液和玉米黄素标准品原液，然后将所述叶黄素标准品原液和所述玉米黄素标准品原液用丙酮逐步稀释成系列溶液，所述系列溶液的稀释倍数依次为2倍、4倍、8倍、16倍和32倍，用紫外分光光度外从波长300～760nm间隔测定吸光值，所述间隔测定吸光值的过程为每间隔2nm测定一次吸光值，根据445±2nm和450±2nm处的吸光值与对应的浓度，分别绘制出叶黄素和玉米黄素的标准工作曲线。
将所述黄贡椒中黄色色素溶于丙酮中，用紫外分光光度计于445±2nm和450±2nm下测定叶黄素和玉米黄素的吸光值，根据吸光值计算叶黄素和玉米黄素的含量。
所述黄贡椒中黄色色素的提取方法和/或所述黄贡椒中黄色色素的检测方法在制备提取和/或检测黄贡椒中黄色色素产品中的应用。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明提供的黄贡椒中黄色色素的提取方法，先采用植物油抽提溶剂进行提取，然后经过醇水混合液除去水溶性杂质，再经过多温度段硅胶柱洗脱，通过控制温度和洗脱溶剂，使黄贡椒中红色色素与黄色色素得到有效分离，提取得到黄贡椒中黄色色素。该方法提取效果优异，且简单易操作，溶剂可回收再利用。
(2)本发明提供的黄贡椒中黄色色素的检测方法，以叶黄素、玉米黄素作为黄色色素的检测物质，采用紫外分光光度计进行检测。该提取和检测方法能够有效提高黄贡椒中黄色色素的检测准确性和灵敏性。
附图说明
图1为叶黄素的标准工作曲线。
图2为玉米黄素的标准工作曲线。
具体实施方式
下面结合说明书附图及具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
以下实施例和对比例中黄贡椒为同一批新鲜辣椒，先去除未成熟，有病虫害的，然后挑选出色泽、大小、成熟度一致的辣椒，备用。植物油抽提溶剂购买于湖北鑫润德化工有限公司。
实施例1黄贡椒中黄色色素的提取和检测方法
1.提取黄贡椒中的黄色色素
取黄贡椒100g，去辣椒柄，然后采用破碎机粉碎，再加入1L植物油抽提溶剂(所述植物油抽提溶剂为2-甲基戊烷、3-甲基戊烷、正己烷、甲基环戊烷和环己烷的混合物)，提取3次，合并提取液，制得浸提液；向浸提液中加入等体积的乙醇水混合液(乙醇和水的体积比为3：1)，充分混合后分离，去除乙醇水混合相，得到色素粗提液；然后将色素粗提液温度调节至0℃，上硅胶柱进行吸附，待硅胶柱吸附饱和后，采用乙酸乙酯-环己烷混合液(乙酸乙酯和环己烷的体积比为0.5：1)对硅胶柱进行洗脱，收集流出液，得初次提纯液；再将初次提纯液温度调节至30℃，上硅胶柱进行吸附，待硅胶柱吸附饱和后，采用乙酸乙酯-环己烷混合液(乙酸乙酯和环己烷的体积比为4：1)对硅胶柱进行洗脱，收集流出液，得到黄贡椒中黄色色素。
2.标准曲线的绘制
称取0.2g叶黄素和0.2g玉米黄素，分别溶于10mL丙酮中，制备成叶黄素标准品原液和玉米黄素标准品原液，然后将所述叶黄素标准品原液和所述玉米黄素标准品原液逐步稀释2倍、4倍、8倍、16倍和32倍，制备系列溶液，用紫外分光光度外从波长300～760nm每间隔2nm测定一次吸光值，根据445nm和450±2nm处的吸光值与对应的浓度，分别绘制出叶黄素和玉米黄素的标准工作曲线。图1和图2分别为叶黄素和玉米黄素的标准工作曲线，r2＝0.999，线性关系好。表1和2分别为叶黄素和玉米黄素的对应系列溶液的检测情况。
表1叶黄素对应系列溶液的检测情况
| 稀释倍数 | 浓度 | WL445.0 |
| 2倍 | 0.625 | 0.048 |
| 4倍 | 1.250 | 0.094 |
| 8倍 | 2.500 | 0.199 |
| 16倍 | 5.000 | 0.391 |
| 32倍 | 10.000 | 0.798 |
表2玉米黄素对应系列溶液的检测情况
| 稀释倍数 | 浓度 | WL445.0 |
| 2倍 | 0.625 | 0.040 |
| 4倍 | 1.250 | 0.081 |
| 8倍 | 2.500 | 0.165 |
| 16倍 | 5.000 | 0.322 |
| 32倍 | 10.000 | 0.633 |
3.检测分析
称取步骤1制备的黄色色素1mL溶于10mL丙酮中，用紫外分光光度计于445nm(叶黄素)和450nm(玉米黄素)下进行测定，根据吸光值通过图1和图2所示的标准曲线计算公式推算叶黄素和玉米黄素的含量。
实施例2黄贡椒中黄色色素的提取和检测方法
实施例2与实施例1黄贡椒中的黄色色素提取方法的区别在于，在乙酸乙酯-环己烷混合液中乙酸乙酯和环己烷的体积比不同。具体的，色素粗提液上硅胶柱进行吸附后，用乙酸乙酯-环己烷混合液(乙酸乙酯和环己烷的体积比为0.2：1)对硅胶柱进行洗脱；初次提纯液上硅胶柱进行吸附后，用乙酸乙酯-环己烷混合液(乙酸乙酯和环己烷的体积比为3：1)对硅胶柱进行洗脱。
标准曲线的绘制与检测分析方法与实施例1相同。
实施例3黄贡椒中黄色色素的提取和检测方法
实施例3与实施例1黄贡椒中的黄色色素提取方法的区别在于，在乙酸乙酯-环己烷混合液中乙酸乙酯和环己烷的体积比不同。具体的，色素粗提液上硅胶柱进行吸附后，用乙酸乙酯-环己烷混合液(乙酸乙酯和环己烷的体积比为0.9：1)对硅胶柱进行洗脱；初次提纯液上硅胶柱进行吸附后，用乙酸乙酯-环己烷混合液(乙酸乙酯和环己烷的体积比为2.5：1)对硅胶柱进行洗脱。
标准曲线的绘制与检测分析方法与实施例1相同。
实施例4精密度及检出限
1.实验方法
取无待测组分的试剂空白溶液(10mL丙酮)上紫外分光光度计测试11次，通过SD值计算出检出限。3倍SD值为检出限，10倍SD值为定量限，SD值计算公式如下：
然后按照实施例1的方法配置2.5mg/mL的叶黄素和3.5mg/mL玉米黄素，按照实施例1的方法进行前处理和上机测试，平行做6组实验，通过计算得到方法精密度。
2.试验结果
表3和表4中样品kb1～kb11代表空白样品，表3中样品1～6代表2.5mg/mL叶黄素的6组平行实验，表4中样品1～6代表3.5mg/mL叶黄素的6组平行实验。结果如表5所示，叶黄素和玉米黄素的检测限分别为0.0010mg/mL和0.0019mg/mL。如表6所示，叶黄素和玉米黄素的精密度，精密度好。
表3叶黄素空白样品及精密度测试结果
| 样品ID | 浓度 | WL445.0 |
| kb1 | 0.05111 | -0.00003 |
| kb2 | 0.05150 | 0.00000 |
| kb3 | 0.05188 | 0.00003 |
| kb4 | 0.05169 | 0.00002 |
| kb5 | 0.05169 | 0.00002 |
| kb6 | 0.05130 | -0.00002 |
| kb7 | 0.05073 | -0.00006 |
| kb8 | 0.05150 | 0.00000 |
| kb9 | 0.05111 | -0.00003 |
| kb10 | 0.05150 | 0.00000 |
| kb11 | 0.05111 | -0.00003 |
| 样品1 | 2.56904 | 0.20142 |
| 样品2 | 2.48760 | 0.19490 |
| 样品3 | 2.55436 | 0.20024 |
| 样品4 | 2.60471 | 0.20427 |
| 样品5 | 2.54291 | 0.19933 |
| 样品6 | 2.57381 | 0.20180 |
表4玉米黄素空白样品及精密度测试结果
表5叶黄素和玉米黄素检出限测试结果分析
表6叶黄素和玉米黄素检测空白及精密度测试结果分析
对比例1硅胶柱层析次数和温度对提取黄贡椒中的黄色色素的影响
对比例1与实施例1的区别在于：色素粗提液只经上一次硅胶柱，用乙酸乙酯-环己烷混合液(乙酸乙酯和环己烷的体积比为1.5：1)对硅胶柱进行洗脱。且不对温度进行控制。
标准曲线的绘制与检测分析方法与实施例1相同。
对比例2温度对提取黄贡椒中的黄色色素的影响
1.实验方法
对比例2与实施例1的区别在于：两次硅胶柱处理的温度不同。具体的，得到色素粗提液后，控制其温度为30℃；得初次提纯液后，将其温度调节至0℃。
标准曲线的绘制与检测分析方法与实施例1相同。
2.实验结果
上述实施例1～3和对比例1～2检测结果的平均值见表7。
表7实施例和对比例中的黄色色素检测结果
由表1的检测结果可知，本发明实施例1～3提供的提取检测方法，所提取的黄贡椒黄色色素含量更高，且效果明显优于对比例1～2。
计算实施例1与对比例1～2各10个样本间的相对标准偏差(RSD值)，其结果如表8所示。
表8实施例1和对比例1～2检测结果的相对标准偏差
| 黄色色素种类 | 实施例1 | 对比例1 | 对比例2 |
| 叶黄素 | 1.08 | 2.35 | 1.95 |
| 玉米黄素 | 1.13 | 3.56 | 2.62 |
由表2可以看出，本发明提供的提取检测方法，其检测结果的相对标准偏差RSD均低于1.15％，表明本发明检测方法具有良好的重复性和较高的精密度；其效果明显优于对比例。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，对于本领域的普通技术人员来说，在上述说明及思路的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种黄贡椒中黄色色素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：粉碎黄贡椒，用植物油抽提溶剂浸提，制得浸提液；
S2：将步骤S1制备的浸提液与醇水混合液混合，分离，去除醇水混合相，得到色素粗提液，所述醇水混合液包括乙醇和水，所述乙醇和水的体积比为3：1；
S3：将步骤S2得到的色素粗提液温度调节至0℃，用硅胶柱吸附，洗脱硅胶柱，收集流出液，得初次提纯液，所述洗脱硅胶柱所用洗脱液为乙酸乙酯-环己烷混合液，所述乙酸乙酯-环己烷混合液中乙酸乙酯和环己烷的体积比为(0.2～0.9)：1；
S4：将步骤S3得到的初次提纯液温度调节至30℃，用硅胶柱吸附，洗脱硅胶柱，收集流出液，得到黄贡椒中黄色色素，所述洗脱硅胶柱所用洗脱液为乙酸乙酯-环己烷混合液，所述乙酸乙酯-环己烷混合液中乙酸乙酯与环己烷的体积比为(2.5～4)：1；
所述黄贡椒中黄色色素为叶黄素和/或玉米黄素。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，在步骤S3中，所述乙酸乙酯-环己烷混合液中乙酸乙酯和环己烷的体积比为0.5：1。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，在步骤S4中，所述乙酸乙酯-环己烷混合液中乙酸乙酯与环己烷的体积比为4：1。
4.一种黄贡椒中黄色色素的检测方法，其特征在于，用权利要求1～3任一项所述黄贡椒中黄色色素的提取方法提取黄贡椒中黄色色素，将所述黄贡椒中黄色色素溶于丙酮中，用紫外分光光度计测定和计算叶黄素和玉米黄素的含量。
5.权利要求1～3任一项所述黄贡椒中黄色色素的提取方法在制备提取或检测黄贡椒中黄色色素产品中的应用。
6.权利要求4所述黄贡椒中黄色色素的检测方法在制备检测黄贡椒中黄色色素产品中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111661339.2A CN114279992B (zh) | 2021-12-30 | 2021-12-30 | 一种黄贡椒中黄色色素的提取和检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111661339.2A CN114279992B (zh) | 2021-12-30 | 2021-12-30 | 一种黄贡椒中黄色色素的提取和检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114279992A CN114279992A (zh) | 2022-04-05 |
| CN114279992B true CN114279992B (zh) | 2024-03-22 |
Family
ID=80879099
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111661339.2A Active CN114279992B (zh) | 2021-12-30 | 2021-12-30 | 一种黄贡椒中黄色色素的提取和检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114279992B (zh) |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101831198A (zh) * | 2010-05-27 | 2010-09-15 | 文雁君 | 一种辣椒红色素的制备方法 |
| CN101863813A (zh) * | 2010-06-03 | 2010-10-20 | 鲁东大学 | 一种从蛹虫草中分离的叶黄素及其提取分离方法 |
| CN102352121A (zh) * | 2011-11-02 | 2012-02-15 | 安徽大诚明农业科技有限公司 | 一种从黑糯玉米整穗中提取黑色素的方法 |
| CN105647227A (zh) * | 2015-12-30 | 2016-06-08 | 河南中大恒源生物科技股份有限公司 | 一种辣椒红色素黄红分离的方法 |
| CN106631953A (zh) * | 2016-12-29 | 2017-05-10 | 河南中大恒源生物科技股份有限公司 | 一种辣椒中β‑胡萝卜素的制备方法 |
| CN107056669A (zh) * | 2017-04-17 | 2017-08-18 | 文山永润辣素有限公司 | 一种从辣椒红中制备玉米黄素的方法 |
| CN110286179A (zh) * | 2019-08-08 | 2019-09-27 | 广西壮族自治区药用植物园 | 快速检测叶黄素循环色素的高效液相色谱法 |
| CN112578047A (zh) * | 2020-12-10 | 2021-03-30 | 浙江艾兰得生物科技有限公司 | 一种叶黄素、玉米黄素含量的高效液相色谱检测方法 |
| CN113116774A (zh) * | 2021-03-29 | 2021-07-16 | 广州领衔生物科技有限公司 | 一种天然植物提取物及其制备方法和在制备具有美白淡斑作用的产品中的应用 |
-
2021
- 2021-12-30 CN CN202111661339.2A patent/CN114279992B/zh active Active
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101831198A (zh) * | 2010-05-27 | 2010-09-15 | 文雁君 | 一种辣椒红色素的制备方法 |
| CN101863813A (zh) * | 2010-06-03 | 2010-10-20 | 鲁东大学 | 一种从蛹虫草中分离的叶黄素及其提取分离方法 |
| CN102352121A (zh) * | 2011-11-02 | 2012-02-15 | 安徽大诚明农业科技有限公司 | 一种从黑糯玉米整穗中提取黑色素的方法 |
| CN105647227A (zh) * | 2015-12-30 | 2016-06-08 | 河南中大恒源生物科技股份有限公司 | 一种辣椒红色素黄红分离的方法 |
| CN106631953A (zh) * | 2016-12-29 | 2017-05-10 | 河南中大恒源生物科技股份有限公司 | 一种辣椒中β‑胡萝卜素的制备方法 |
| CN107056669A (zh) * | 2017-04-17 | 2017-08-18 | 文山永润辣素有限公司 | 一种从辣椒红中制备玉米黄素的方法 |
| CN110286179A (zh) * | 2019-08-08 | 2019-09-27 | 广西壮族自治区药用植物园 | 快速检测叶黄素循环色素的高效液相色谱法 |
| CN112578047A (zh) * | 2020-12-10 | 2021-03-30 | 浙江艾兰得生物科技有限公司 | 一种叶黄素、玉米黄素含量的高效液相色谱检测方法 |
| CN113116774A (zh) * | 2021-03-29 | 2021-07-16 | 广州领衔生物科技有限公司 | 一种天然植物提取物及其制备方法和在制备具有美白淡斑作用的产品中的应用 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| 吴梧桐.生物制药工艺学.中国医药科技出版社,2004,第97-98页. * |
| 安登魁.药物分析.济南出版社,1992,第420页. * |
| 新鲜蔬菜中β-胡萝卜素提取和测定的研究;刘晓燕;陈章鑫;姜黎;;绵阳师范学院学报(第02期);全文 * |
| 用柱层析法分离分析辣椒色素中的黄色素;张书圣 等;青岛化工学院学报;第19卷(第4期);第347-351页 * |
| 蒲公英花黄色素的超声提取工艺及叶黄素含量测定;刁海鹏;孙体健;曹晓峰;黄达;贺晓薇;闫茜;;食品科技;20090120(01);全文 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114279992A (zh) | 2022-04-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Rodriguez-Amaya et al. | HarvestPlus handbook for carotenoid analysis | |
| Revathy et al. | Isolation, purification and identification of curcuminoids from turmeric (Curcuma longa L.) by column chromatography | |
| Fuleki et al. | Quantitative methods for anthocyanins. 1. Extraction and determination of total anthocyanin in cranberries. | |
| Costache et al. | Studies concerning the extraction of chlorophyll and total carotenoids from vegetables | |
| Taungbodhitham et al. | Evaluation of extraction method for the analysis of carotenoids in fruits and vegetables | |
| Zhao et al. | An effective method for the semi-preparative isolation of high-purity anthocyanin monomers from grape pomace | |
| Zeb et al. | Thin-layer chromatographic analysis of carotenoids in plant and animal samples | |
| Ignat et al. | Characterization of grape seed aqueous extract and possible applications in biological systems | |
| Philip et al. | Development of a method for the quantitative estimation of provitamin A carotenoids in some fruits | |
| Vayupharp et al. | Antioxidant properties and color stability of anthocyanin purified extracts from Thai waxy purple corn cob | |
| Rubashvili et al. | Extraction and analysis of the major carotenoids of agro-industrial waste materials using sequential extraction techniques and high performance liquid chromatography | |
| CN103149165A (zh) | 橙色大白菜类胡萝卜素提取与测定方法 | |
| Kim et al. | Changes in the phenolic composition of citrus fruits and leaves prepared by gamma irradiation of budsticks | |
| CN114279992B (zh) | 一种黄贡椒中黄色色素的提取和检测方法 | |
| Rodriguez-Amaya et al. | Importance of cis-isomer separation in determining provitamin A in tomato and tomato products | |
| CN109211805B (zh) | 一种贻贝类胡萝卜素提取物溯源性的验证分析方法 | |
| Bahreini et al. | Extraction, identification and thermal stability of anthocyanins from eggplant peel as a natural colorant | |
| Stewart | Identification of caffeine in citrus flowers and leaves | |
| Duma et al. | The content of plant pigments in red and yellow bell peppers. | |
| Aflaki | Optimization of carotenoid extraction in peel and flesh of cantaloupe (Cucumis melo L.) with ethanol solvent | |
| Yuniati et al. | Pigment Extraction Method for Anthocyanin Natural Resources in Indonesia: A Review | |
| Egorenko et al. | Cultivation of the Halobacterium salinarum biomass with high antioxidant activity for agricultural and food industry | |
| Ahmadi et al. | Comparative Extraction Efficacy of Different Organic Solvents for Leaf Chlorophylls and Carotenoids in (Portulaca oleracea L.) Varying with Growth Behavior and Stress Type | |
| Muntean | Carotenoids in Cucurbita fruits | |
| Heidari et al. | Influence of storage temperature, pH, light and varieties of grape on the stability of anthocyanin extract |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |