CN114262359A

CN114262359A - 一种卡非佐米杂质的制备方法

Info

Publication number: CN114262359A
Application number: CN202111418870.7A
Authority: CN
Inventors: 蒋玉伟; 米多龙; 李浩冬
Original assignee: Nanjing Baimai Biotechnology Co ltd
Current assignee: Nanjing Baimai Biotechnology Co ltd
Priority date: 2021-11-26
Filing date: 2021-11-26
Publication date: 2022-04-01

Abstract

本发明涉及一种卡非佐米杂质的制备方法，包括以下步骤：化合物Ⅰ在钯碳作用下，氢化还原双键得到化合物Ⅱ；化合物Ⅱ在三氟乙酸作用下脱去Boc保护得到化合物Ⅲ；在缩合剂作用下，化合物Ⅲ与卡非佐米主链Ⅳ通过有机碱与酰胺缩合剂作用反应得到化合物Ⅴ。本发明卡非佐米杂质的制备方法，制备过程无需使用柱层析、制备纯化等复杂技术手段，不需要苛刻的反应条件。制备方法操作简单，反应过程温和、收率和纯度高；可为原料制备过程中各中间体的质量控制提供高纯度的杂质对照品。

Description

一种卡非佐米杂质的制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种卡非佐米杂质的制备方法。

背景技术

卡非佐米(Carfilzomib)，化学名称为(2S)-N-((S)-1-((S)-4-甲基-1-((R)-2-甲基环氧乙烷-2-基)-1-氧代戊烷-2-基氨基甲酰基)-2-苯乙基)-2-((S)-2-(2-吗啉乙酰胺基)-4-苯基丁酰胺基)-4-甲基戊酰胺，分子式为C₄₀H₅₇N₅O₇结构如式(Ⅵ)所示：

。

卡非佐米注射液于2012年7月获美国FDA批准上市，用于采用其他药物治疗后失败的多发性骨髓瘤患者的治疗。多发性骨髓瘤是一种浆细胞恶性克隆性疾病，发病率逐年增加，已位居血液肿瘤的第二位，随着治疗水平的提高，虽然完全缓解率较高，但由于复发率较高，本品为患者提供了一种治疗药物的选择。

卡非佐米合成路线如下：

。

发明人在原料药制备时发现在起始步骤环氧化过程中，残留的化合物I可以继续发生反应，产生的杂质进一步带入到成品中，生成对应的结构为化合物Ⅴ。目前的原料药制备工艺必然会或多或少的产生式Ⅴ化合物，若所产生该杂质量超一定限度时，基于常规纯化方法如层析、析晶等是难以除去。

药物杂质与药物质量以及药物安全性密切相关，杂质对照品可帮助确定杂质的合理限度，对药品检验方法及质量标准的建立将会起着极大的促进作用。药物中杂质类型及其含量对于药物疗效和安全性影响较大，杂质Ⅴ是卡非佐米起始原料引入的杂质和关键物料反应所形成，该杂质会影响卡非佐米原料药的纯度，因此，在药物工艺开发过程中必须对药物杂质进行全面分析、控制。

杂质V作为卡非佐米合成过程中的杂质之一，在卡非佐米的合成中含量不高，难以通过柱层析、制备柱分离，不利于得到大量的、高纯度的杂质V做为杂质对照品。此外，目前也未见杂质Ⅴ的合成方法的公开报道。因此，有必要合成一种杂质V用于作为杂质对照，从而为各步的中间体控制杂质V提供重要参考依据。

发明内容

为解决上述问题，本发明公开了一种卡非佐米杂质的制备方法，该制备方法操作较简单，收率和纯度高。

为达到上述目的，本发明的技术方案如下：

一种卡非佐米杂质的制备方法，包括以下步骤：

（1）将化合物Ⅰ、催化剂加入溶剂A中，进行反应，氢化还原双键得到化合物Ⅱ；

（2）将化合物Ⅱ、三氟乙酸加入溶剂B中，反应脱去Boc保护得到化合物Ⅲ；

（3）在溶剂C中加入化合物Ⅲ、卡非佐米主链Ⅳ、有机碱和缩合剂，反应得到化合物Ⅴ；

。

化合物Ⅴ采用二丁酮、丙酮或丁酮进行重结晶。

进一步地，在步骤（1）中，所述化合物Ⅰ与催化剂的质量比为1：0.03-0.08，所述溶剂A与化合物Ⅰ的体积质量比为3-6：1。

进一步地，在步骤（1）中，所述催化剂为10%钯碳（干/湿）、20%钯碳（湿）；所述溶剂为甲醇、二氯甲烷、四氢呋喃中的一种或多种。

进一步地，在步骤（1）中，所述氢化还原的温度为0-30℃，氢化还原的时间为2-5h。

进一步地，在步骤（2）中，所述化合物Ⅱ与三氟乙酸的质量体积比为1：1.5-1：3.0，所述溶剂B与化合物Ⅱ的体积质量比为3-6：1 。

进一步地，在步骤（2）中，所述溶剂B为二氯甲烷。

进一步地，在步骤（2）中，所述反应的温度为-20-0℃，反应的时间为2-5h。

进一步地，在步骤（3）中，所述卡非佐米主链Ⅳ与化合物Ⅲ与缩合剂与有机碱摩尔比为1.0： 1.1-1.2：1.5-3.0：1.5-2.5；所述溶剂C与卡非佐米主链Ⅳ的体积质量比为5-15：1。

进一步地，在步骤（3）中，所述溶剂C为二甲基甲酰胺、二甲基甲酰胺中的一种或多种；所述缩合剂为1-羟基苯并三唑(HOBT)、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)、1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐(PyBOP)中的一种或多种；所述有机碱为二异丙基乙胺、三乙胺、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯中的一种或多种。

进一步地，在步骤（3）中，所述反应的温度为-15-5℃，反应的时间为2-10h。

本发明的有益效果：

本发明卡非佐米杂质的制备方法，制备过程无需使用柱层析、制备纯化等复杂技术手段，不需要苛刻的反应条件。制备方法操作简单，反应过程温和、收率和纯度高；可为原料制备过程中各中间体的质量控制提供高纯度的杂质对照品。能够有效鉴定佐非卡米制备过程中各步产生的杂质V是否在合理限度内，从而为佐非卡米注射剂临床使用安全性及有有效性提供了技术保障。

具体实施方式

下面结合具体实施方式，进一步阐明本发明，应理解下述具体实施方式仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。

实施例1

化合物Ⅱ制备

将 10g化合物Ⅰ、30ml甲醇和0.8g 10% Pd/C（湿）（8%w）加入至反应瓶中，N₂置换，保温20~30℃反应2h。过滤，≤45℃浓缩，干燥，得化合物Ⅱ，收率90.0 %。

实施例2

化合物Ⅱ制备

将5g化合物Ⅰ、30ml二氯甲烷和0.4g 10% Pd/C（干）（8%w）加入至反应瓶中，N₂置换，保温10-20℃搅拌2h。过滤，≤45℃浓缩，干燥，得化合物Ⅱ，收率88.7 %。

实施例3

化合物Ⅱ制备

将10g化合物Ⅰ、30ml四氢呋喃和0.3g 20% Pd/C（湿）（3%w）加入到反应瓶中，N₂置换，保温0-10℃搅拌5h。过滤，≤45℃浓缩，干燥，得化合物Ⅱ，收率85.2 %。

实施例4

化合物Ⅲ制备

将5g化合物Ⅱ、30ml二氯甲烷加入至反应瓶中，N₂下降温至-10~0℃，滴加入7.5ml三氟乙酸（1.5v/w），-10~0℃反应2h，加入15ml甲基叔丁醚和25ml正庚烷，≤45℃旋蒸，得黄色固体化合物Ⅲ，收率96.2%。

实施例5

化合物Ⅲ制备

将5g化合物Ⅱ、15ml二氯甲烷加入至反应瓶中，N₂下降温-20~ -10℃，滴加入15ml三氟乙酸（3.0v/w），-10~0℃保温5h，加入25ml甲基叔丁醚和45ml正庚烷，控制≤45℃浓缩，得黄色固体化合物Ⅲ，收率95.3%。

实施例6

化合物Ⅴ制备

将1.8g（3.1mmole，1.0eq）化合物Ⅳ、9ml二甲基甲酰胺加入到反应瓶，N₂下降温至-10~0℃，加入0.62g 1-羟基苯并三唑(HOBT)（4.6mmole，1.5eq）、1.74g 苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)（4.6mmole，1.5eq）、1.0g（3.6mmole，1.1eq）化合Ⅲ，滴加入1.9g二异丙基乙胺（4.6mmole，1.5eq），-5~5℃保温反应2h，加入40ml乙酸乙酯和40ml 8%碳酸钠溶液，搅拌分层，水相再用40ml乙酸乙酯提取。合并有机层，8%碳酸钠溶液洗涤4次，每次40ml。有机层用水洗3次，每次40ml。有机层再用40ml饱和氯化钠洗涤。≤45℃浓缩至基本不滴，反应瓶中加入20ml丁酮，60-70℃加热溶清，自然降温至室温，搅拌1h，继续却至-5~5℃，保温1h，抽滤，滤饼50℃烘干。得淡黄色固体1.92g，纯度96.9%，收率88.0%。

实施例7

化合物Ⅴ制备

将1.8g（3.1mmole，1.0eq）化合物Ⅳ、18ml二甲基乙酰胺加入至反应瓶，N₂保护下降温至-10~ 0℃，加入1.2g 1-羟基苯并三唑(HOBT)（7.2mmole，3eq）、1.0g（3.6mmole，1.1eq）化合Ⅲ，N₂保护下降温-15~-10℃，滴加入0.8g三乙胺（7.8mmole，2.5eq），-5~5℃保温10h，加入40ml乙酸乙酯和40ml 8%碳酸钠溶液，分层，水相再用40ml乙酸乙酯提取。合并有机层，8%碳酸钠溶液洗涤4次，每次80ml。有机层用水洗3次，每次40ml。有机层再用40ml饱和氯化钠溶液洗涤。≤45℃浓缩至基本不滴，反应瓶中加入20ml二丁酮，60-70℃加热溶清，溶清后，自然降温至室温，搅拌1h，然后冷却至-5~5℃，保温1h，抽滤，滤饼50℃烘干。得黄色固体1.86g，液相纯度98.1%，收率85.0%。

实施例8

化合物Ⅴ制备

将1.8g（3.1mmole，1.0eq）化合物Ⅳ、27ml二甲基乙酰胺加入至反应瓶，N₂保护下降温至-10~ 0℃，加入4.8g 1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐(PyBOP)（9.3mmole，3.0eq）、1.1g（3.7mmole，1.2eq）化合Ⅲ，N₂保护下降温至-15~-10℃，滴加入滴加入1.2g 1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯（7.8mmole，2.5eq），-5~5℃保温5h，加入40ml乙酸乙酯和40ml 8%碳酸钠溶液，搅拌分层，水相再用40ml乙酸乙酯提取。合并有机层，8%碳酸钠溶液洗涤4次，每次40ml。有机层用水洗3次，每次40ml。有机层再用40ml饱和氯化钠溶液洗涤。≤45℃浓缩至干，反应瓶中加入20ml丙酮，加热溶清，自然降温至室温，室温搅拌1h，继续冷却至-5~5℃，保温搅拌1h，抽滤，滤饼50℃烘干。得淡黄色固体1.97g，液相纯度97.3%，收率90.0%。

化合物Ⅴ：1H NMR（500MHz，DMSO-d6）：δ8.25（d，J=8.1Hz，1H），8.04-8.12（m，2H），7.90（d，J=8.1Hz，1H），7.28-7.31（m，2H），7.8-7.21（m，7H），7.13（s，1H），4.61（d，J=7.1Hz，1H）,4.34-4.41（m，3H），3.64（s，3H），3.01-3.04（m，3H），2.85-2.98（d，1H），2.65（s，1H），2.55（d，J=11.3Hz，1H），2.47（d，J=3.8Hz，4H），1.80-2.00（m，2H），1.56-1.58（m，2H），1.41（d，J=4.8Hz，4H），0.86-0.92（m，12H），0.82-0.85（m，6H）；13C NMR（500MHz，DMSO-d6）：δ213.02，171.47，170.89，170.64，168.76，141.44，137.31，128.98，128.16，127.88，126.11，125.68，66.08，61.29，54.55，53.39，53.12，51.71，50.97，40.79，40.00，39.92，39.84，39.67，39.50，39.34，39.17，39.00，38.46，37.31，35.67，34.24，31.31，24.02，24.00。MS（ESI），m/z：706.45（计算为C40H59N5O6H：706.44（[M+H]+））。

需要说明的是，以上内容仅仅说明了本发明的技术思想，不能以此限定本发明的保护范围，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰均落入本发明权利要求书的保护范围之内。

Claims

1.一种卡非佐米杂质的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将化合物Ⅰ、催化剂加入溶剂A中，反应得到化合物Ⅱ；

。

2.根据权利要求1所述的一种卡非佐米杂质的制备方法，其特征在于，在步骤（1）中，所述化合物Ⅰ与催化剂的质量比为1：0.03-0.08，所述溶剂A与化合物Ⅰ的体积质量比为3-6：1。

3.根据权利要求1所述的一种卡非佐米杂质的制备方法，其特征在于，在步骤（1）中，所述催化剂为10%钯碳、20%钯碳；所述溶剂A为甲醇、二氯甲烷、四氢呋喃中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的一种卡非佐米杂质的制备方法，其特征在于，在步骤（1）中，所述反应的温度为0-30℃，反应的时间为2-5h。

5.根据权利要求1所述的一种卡非佐米杂质的制备方法，其特征在于，在步骤（2）中，所述化合物Ⅱ与三氟乙酸的质量体积比为1：1.5-1：3.0，所述溶剂B与化合物Ⅱ的体积质量比为3-6：1。

6.根据权利要求1所述的一种卡非佐米杂质的制备方法，其特征在于，在步骤（2）中，所述溶剂B为二氯甲烷。

7.根据权利要求1所述的一种卡非佐米杂质的制备方法，其特征在于，在步骤（2）中，所述反应的温度为-20-0℃，反应的时间为2-5h。

8.根据权利要求1所述的一种卡非佐米杂质的制备方法，其特征在于，在步骤（3）中，所述卡非佐米主链Ⅳ与化合物Ⅲ与缩合剂与有机碱摩尔比为1.0：1.1-1.2：1.5-3.0：1.5-2.5；所述溶剂C与卡非佐米主链Ⅳ的体积质量比为5-15：1。

9.根据权利要求1所述的一种卡非佐米杂质的制备方法，其特征在于，在步骤（3）中，所述溶剂C为二甲基甲酰胺、二甲基甲酰胺中的一种或多种；所述缩合剂为1-羟基苯并三唑、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐、1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐中的一种或多种；有机碱为二异丙基乙胺、三乙胺、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯中的一种或多种。

10.根据权利要求1所述的一种卡非佐米杂质的制备方法，其特征在于，在步骤（3）中，所述反应的温度为-15-5℃，反应的时间为2-10h。