CN114250252B - 一种利用葡萄干发酵制备多功能甘油的方法 - Google Patents

一种利用葡萄干发酵制备多功能甘油的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种利用葡萄干发酵制备多功能甘油的方法，属于化妆品及食品领域。本发明选取的菌株是耐高渗透压的产甘油假丝酵母CCTCC M 93018，要解决的是产甘油假丝酵母在化妆品应用中的空白。使用产甘油假丝酵母发酵葡萄干得到发酵液中甘油含量可达到70.43g/L，DPPH自由基清除率可以达到99.30％，羟自由基清除率可达84.75％，发酵液中总酚含量可达2.86mg GAE/mL发酵液，总黄酮含量1.23mg RE/mL发酵液，是一种有效的多功能甘油制备方法。得到的产品富含活性成分，且具有优异的抗氧化性能，可以作为一种功能性甘油应用于化妆品制备中。

Description

一种利用葡萄干发酵制备多功能甘油的方法
技术领域
本发明涉及一种利用葡萄干发酵制备多功能甘油的方法，属于化妆品及食品领域。
背景技术
葡萄作为被种植最广泛的水果之一被大量应用于食品领域，多用制作葡萄酒和葡萄饮料和新鲜果肉食用，其中富含的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶提供了抗氧化活性。另外葡萄籽还作为中药被广泛应用于止血、镇痛。食品工业产生大量含有葡萄皮、葡萄籽的残渣，其中富含多种活性成分：黄酮醇类物质如欧洲皮素、山奈酚、杨梅酮等；黄烷醇类物质如儿茶素、表儿茶素等；酚酸类物质如：没食子酸、原儿茶酸、对羟基苯甲酸、咖啡酸、绿原酸等，这些活性成分使其在食品、化妆品等多领域有应用潜力。
酵母菌是一种典型的异养兼性厌氧型单细胞真菌，其应用可追溯至几千年前，它能够将糖转化为酒精、二氧化碳及其他代谢产物，因此作为一种天然的发酵剂被广泛地应用于发酵。酵母菌可以在发酵过程中分解原材料中的蛋白质、脂质、糖类及合成维生素，分解植物细胞壁，进一步破坏植物细胞壁聚合物之间的交联，释放植物细胞壁上的活性物质，产甘油假丝酵母WL2002-5 CCTCCM 93018是我国拥有自主知识产权的一株具有优良发酵性能的工业菌株，在中国专利CN1070235C中公开，公告日2001年8月29日，具有耐高温，高产量，高转化率，生产强度大等特点，居世界领先地位。产甘油假丝酵母在发酵植物基质的同时还可以生产甘油，可以制备得到一种含有甘油的植物基发酵化妆品复合物。
目前应用于化妆品领域的植物基发酵提取物，其使用的微生物大多为乳酸菌和霉菌，使用的植物基大多为大豆、米糠、花朵类，还有部分海藻类，暂时还没有使用微生物发酵葡萄干制备化妆品原料的应用。甘油是一种常见的化妆品添加剂，它具有优异的保湿能力，被广泛地添加于面霜、乳液、护手霜等产品的研发中，不仅如此，甘油还可以作为口感改良剂、乳化剂、载体溶剂等应用于食品领域。
发明内容
本发明提供了一种多功能甘油的制备方法，所述方法为，将产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)接种至含有葡萄干的培养基中发酵制备得到发酵液，从发酵液中提取得到多功能甘油。
在本发明的一种实施方式中，所述含有葡萄干的培养基的制备方法为：
将葡萄干冷冻后粉碎，将粉碎后的物料同水按照质量体积比为(400～500g)：(700～1000mL)的比例混合后煮沸，冷却、过滤后制备得到葡萄干滤液；向葡萄干滤液中添加5～15g/L的玉米浆，1～3g/L的尿素得到培养基。
在本发明的一种实施方式中，所述产甘油假丝酵母为产甘油假丝酵母CCTCC M93018。
在本发明的一种实施方式中，所述发酵条件为：25～30℃，200～300rpm。
在本发明的一种实施方式中，所述发酵条件为：在30℃，300rpm条件下，发酵时间为：0-66h。
在本发明的一种实施方式中，所述葡萄干滤液的制备方法为：
葡萄干于-40℃冷冻48h，使用食品破碎机搅碎成渣，按照1:2(w/v)比例添加水煮沸30～60min，冷却至室温后4层纱布过滤，制备得到。
在本发明的一种实施方式中，所述含有葡萄干的培养基中，葡萄糖的终浓度至为150～250g/L，还含有8g/L的玉米浆，2g/L的尿素。
在本发明的一种实施方式中，所述方法包括以下步骤：
(1)发酵培养基的制备：取50mL葡萄干水煮液，分为灭菌培养基(Sterilisation)和未灭菌培养基(un-Sterilisation)。
具体操作如下：葡萄干于-40℃冷冻48h，使用食品破碎机搅碎成渣，按照1：2(w/v)比例添加水煮沸30～60min，冷却至室温后4层纱布过滤，使得最终葡萄糖浓度为150～250g/L，添加8g/L的玉米浆，2g/L的尿素。
(2)发酵培养基经115℃高温灭菌20min。
(3)产甘油假丝酵母的活化：
①从甘油管中吸取产甘油假丝酵母400μL于10mL YPD培养基(葡萄糖20g/L，蛋白胨2g/L，酵母粉1g/L)于30℃培养24h；
②挑取菌液于YPD培养基平板划线培养(葡萄糖20g/L，蛋白胨2g/L，酵母粉1g/L)，30℃培养24h；
(4)产甘油假丝酵母种子液培养：
①产甘油假丝酵母接种至10mL YPD培养基(葡萄糖20g/L，蛋白胨2g/L，酵母粉1g/L)，30℃，200rpm培养12～18h得到一级种子液；
②取1～2mL一级种子液至50mL YPD培养基(葡萄糖200g/L，蛋白胨2g/L，酵母粉1g/L)，30℃，300rpm培养8～12h得到二级种子液。
(5)取适量二级种子液加入50mL发酵培养基(发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌))，在30℃，300rpm培养66h。
(6)取得样品高速离心处理，离心转速为10000r/min，离心时间为3～30min，从上清液中制备得到甘油。
本发明还提供了采用上述方法制备得到的多功能甘油。
本发明还提供了一种含有葡萄干的培养基在产甘油假丝酵母发酵制备多功能甘油中的应用。
在本发明的一种实施方式中，所述含有葡萄干的培养基的制备方法为：将葡萄干冷冻后粉碎，将粉碎后的物料同水按照质量体积比为(350-500g)：(700-1000mL)的比例混合后煮沸，冷却、过滤后制备得到葡萄干滤液；向葡萄干滤液中添加5～15g/L的玉米浆，1～3g/L的尿素得到培养基。
在本发明的一种实施方式中，所述葡萄干滤液的制备方法为：
葡萄干于-40℃冷冻48h，使用食品破碎机搅碎成渣，按照1：2(w/v)比例添加水煮沸30～60min，冷却至室温后4层纱布过滤，制备得到。
在本发明的一种实施方式中，所述产甘油假丝酵母为产甘油假丝酵母。
本发明还提供了一种含有上述多功能甘油的产品，所述产品为食品或化学品。
本发明还提供了上述多功能甘油在制备具有保湿功能，和/或抗衰老，和/或清除DPPH自由基的产品中的应用。
有益效果
(1)本发明使用的菌株产甘油假丝酵母CCTCC M 93018是一株具有多重抗逆性的工业微生物菌株，可以在多种环境压迫特别是高渗条件下保持生长优势。
(2)与现有化学合成或试剂提取植物提取化妆品添加成分相比，采用本发明的方法，制备得到的甘油不添加额外化学试剂，最大程度上降低了产品的致敏性和安全隐患，且得到的活性物质均来源于食品原料，可以保证使用的安全性，是一种绿色环保的化妆品添加成分的制备方法。采用本发明的方法制备得到是一种富含活性物质的多功能甘油产品，可以一步制备得到具有在食品、化妆品领域的应用潜力的甘油产品。
(3)本发明采用的发酵培养基为植物基发酵，所述植物基发酵提取样品省略了化合物提取精制工艺，节省了制备成本。
(4)采用本发明的方法得到的甘油含量可达到71.02g/L，且其DPPH自由基清除率可以达到99.30％，羟自由基清除率可达84.75％，发酵液中总酚含量可达2.86mg GAE/mL发酵液，总黄酮含量1.23mg RE/mL发酵液，是一种有效的多功能甘油制备方法。
附图说明
图1：产甘油假丝酵母在发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)中生长状况。
图2：产甘油假丝酵母分别在发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)中发酵产甘油的产量，产甘油假丝酵母发酵66h时甘油产量。
图3：产甘油假丝酵母分别在发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)中发酵60h后得到的发酵液中的DPPH自由基清除率，Control为对照组。
图4：产甘油假丝酵母分别在发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)中发酵60h后得到的发酵液中的羟自由基清除率，Control为对照组。
图5：产甘油假丝酵母分别在发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)中得到的发酵液中总酚含量。
图6：产甘油假丝酵母分别在发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)中得到的发酵液中总黄酮含量。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
以下实施例中产甘油假丝酵母为产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenesCCTCC M93018)，下述实施例中所涉及的葡萄干购自欧尚超市。
下述实施例中所涉及的检测方法如下：
DPPH自由基清除率的测定：
(1)取1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)12mg溶于100mL 95％乙醇。
(2)取95孔酶标板，设置样品管(T)、样品本底(T0)、DPPH管(C)、溶剂本底(C0)。
(3)取50μL样品溶液于T和T0管；取100μL水加入T和T0管，取150μL水加入C和C0管；取50μL DPPH溶液加入T和C管；取50μL 95％乙醇溶液加入T0、C0管；混匀后室温静置5min；517nm测定吸光度；其中T和C管需设立3组平行。
(4)DPPH自由基清除率计算公式：
其中T和C分别为三组平行数据的平均值。
羟自由基清除率的测定：
(1)溶剂：FeSO4溶液(8.0mmol/L)；水杨酸溶液(3.0mmol/L)；H2O2溶液(8.8mmol/L)。
(2)取95孔酶标板，设置样品管(A0)、样品本底(A)、DPPH管(A1)。
(3)取30μL样品溶液于A和A1管；分别取70、40、140μL水加入A0、A和A1管，取30μLFeSO4溶液加入A0、A和A1管；取100μL水杨酸溶液加入A0、A和A1管；取100μL H2O2溶液加入A0和A管；混匀后37℃孵育10min；510nm测定吸光度；每管数据需设立3组平行。
(4)羟自由基清除率计算公式：
总酚(TPC)的测定：
使用Foline-Ciocalteu法测定发酵液和对照中的总酚(TPC)含量，结果以每毫升发酵液中没食子酸当量(mg GAE/mL发酵液)表示，以水为阴性对照，没食子酸在0.015-0.075mg之间产生标准正交曲线。具体操作如下：
(1)取样品上清液和对照30μL于96孔酶标板；
(2)加入稀释10倍的福林酚试剂30μL；
(3)加入7.5％Na2CO3溶液120μL；
(4)加入水120μL；
(5)体系置于75℃孵育10min后在765nm处测定吸光度，每组数据设置3组平行。
总黄酮(TFC)的测定：
发酵液中总黄酮(TFC)含量的测定根据Byung-Taek等的方法稍作改变，结果以每毫升发酵液中的芦丁当量(mg RE/mL发酵液)表示，以水作为阴性对照，芦丁在0.06-0.12mg之间产生标准曲线。具体操作如下：
(1)取样品上清液和对照60μL于干净离心管；
(2)依次加入水65μL，30％的乙醇溶液375μL，5％的NaNO2溶液充分混匀；
(3)室温孵育5min；
(4)加入10％的Al(NO)3溶液30μL混匀；
(5)室温孵育6min；
(6)依次加入1.0M的NaOH溶液400μL，30％乙醇溶液30μL；
(7)室温孵育10min后510nm测定吸光度，每组数据设置3组平行。
葡萄糖浓度及甘油产量的检测：
葡萄糖含量和甘油产量使用HPLC色谱仪示差法检测，流动相为5.0mmol/L的H2SO4，流速为0.6mL/min，色谱柱为阳离子交换柱(HPX-87H，300×7.8mm；Bio-Rad；美国)，进样量为10μL。
实施例1：产甘油假丝酵母培养基的制备
具体步骤如下：
(1)葡萄干滤液的制备：
将葡萄干于-40℃冷冻48h后，采用食品磨粉机进行粉碎至颗粒状，按照1:2(w/v)比例添加水煮沸后保持30～60min后，冷却至室温，得到葡萄干水煮液，将葡萄干水煮液采用4层纱布进行过滤，取滤液；使用无菌水调节滤液中的葡萄糖浓度，使得滤液中最终葡萄糖浓度为150-250g/L。
(2)配制种子培养基1：葡萄糖20g/L，蛋白胨20g/L，酵母粉10g/L。
配制种子培养基2：葡萄糖200g/L，蛋白胨20g/L，酵母粉10g/L。
(3)配制发酵培养基：取50mL步骤(1)制备得到的葡萄干滤液，并添加10g/L玉米浆和2g/L的尿素，灭菌后得到灭菌的发酵培养基Sterilisation；
采用同样的方法制备发酵培养基，区别在于，不进行灭菌，得到未灭菌的发酵培养基un-Sterilisation。
实施例2：产甘油假丝酵母发酵制备甘油
(1)菌株的活化：
挑取产甘油假丝酵母CCTCC M 93018，接种于10mL实施例1制备得到的种子培养基1中，在30℃、200rpm条件下，摇床培养12～18h，得到一级种子液；
吸取2mL一级种子液接种于10mL种子培养基2中，在30℃、300rpm条件下，摇床培养8～12h，得到二级种子液。
(2)植物基发酵：
将步骤(1)制备得到的二级种子液按照OD600值为0.1的接种量，分别接种至50mL实施例1制备得到的灭菌发酵培养基(Sterilisation)和未灭菌的发酵培养基(un-Sterilisation)中；
分别在30℃，300rpm条件下培养66h，制备得到发酵液；其中，每隔6h取样一次，使用分光光度计测定发酵液在600nm下的吸光度，检测发酵培养基中菌株生长情况，结果如表1及图1所示。
表1：发酵培养基中菌株生长情况
结果显示，发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)中，发酵60h时菌株的生长状况几乎相同，表明：产甘油假丝酵母可以在葡萄干水煮液中生长，而且在葡萄糖浓度为150～200g/L时可以不经过灭菌操作直接进行发酵，节省灭菌成本。
(3)分别将步骤(2)得到的采用发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)取得的产物进行高速离心，离心条件为10000r/min，3min取上清，分别得到发酵液1(采用灭菌发酵培养基Sterilisation)和发酵液2(采用未灭菌发酵培养基un-Sterilisation)。
实施例3：产甘油假丝酵母在葡萄干培养基中的性能检测
对实施例2步骤(3)制备得到的发酵液1～2进行检测，具体方法如下：
(1)甘油产量：
采用HPLC检测发酵液1～2中的甘油产量，结果如图2所示：在发酵结束时，发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)中，甘油产量分别为71.02g/L和70.43g/L。
结果证明：产甘油假丝酵母可以利用葡萄糖水煮液中的营养物质代谢产生甘油。
(2)DPPH自由基清除率测定：
1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH自由基)具有单电子，在517nm具有强吸收，当有自由基清除剂存在与之配对时会使其吸收逐渐消失，DPPH自由基清除率被广泛应用于抗氧化能力的测定。
取0.05mL发酵液1～2，测定发酵过程中DPPH自由基清除率的变化。
实验结果如图3所示：产甘油假丝酵母发酵葡萄干水煮液样品具有极高的DPPH自由基清除率；
采用发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)中制备得到的发酵液的DPPH自由基清除率分别为93.98％和99.30％(发酵60h时)，对比初始值(0h时，62.01％；发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)培养基初始DPPH自由基清除率数值相差不足0.005，故以两者数值相同计算)分别增长了51.56％和60.14％。
对照组：具体实施方式同实施例2，区别在于，将发酵培养基调整为YPD培养基，制备得到发酵液；检测发酵液DPPH自由基清除率，结果显示，在发酵过程中DPPH自由基清除率无明显变化，均维持在50％左右。
实验证明：使用产甘油假丝酵母发酵葡萄干水煮液可以有效提高葡萄干水煮液的DPPH自由基清除率。
(3)羟自由基清除率测定：
对发酵液1～2进行羟自由基清除率的检测实验结果如图4所示，结果显示，产甘油假丝酵母发酵葡萄干水煮液样品具有极高的羟自由基清除率，发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)中制备得到的发酵液中分别为84.75％和84.40％，对比初始值(0h时，76.94％；发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)初始羟自由基清除率数值相差不足0.005，故以两者数值相同计算)分别增长了10.15％和9.70％。
实验证明：使用产甘油假丝酵母发酵葡萄干水煮液可以有效提高葡萄干水煮液的羟自由基清除率。
(4)发酵液中总酚(TPC)含量测定：
对发酵液1～2进行发酵液中总酚(TPC)含量测定，实验结果如图5所示，结果显示，产甘油假丝酵母发酵葡萄干水煮液可以提高发酵液中的TPC含量，发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)中得到的发酵液分别含有为2.86和2.39mg GAE/mL发酵液，对比初始值(0h时)的1.84和0.93mg GAE/mL发酵液，分别增长了55.43％和148.96％。
实验证明：使用产甘油假丝酵母发酵葡萄干水煮液可以有效提高葡萄干水煮液中的TPC含量。
(5)发酵液中总黄酮(TFC)含量测定：
对发酵液1～2进行发酵液中总黄酮(TFC)含量测定，实验结果如图6所示，结果显示，产甘油假丝酵母发酵葡萄干水煮液会降低发酵液中的TFC含量，发酵结束时发酵培养基Sterilisation(灭菌)和发酵培养基un-Sterilisation(未灭菌)得到的发酵液中分别含有为1.23和0.91mg RE/mL发酵液，对比初始值(0h时)的1.37和1.44mg RE/mL发酵液，分别降低了6.30％和36.81％。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (7)

1.一种多功能甘油混合物的制备方法，其特征在于，将产甘油假丝酵母(Candidaglycerinogenes)接种至含有葡萄干的培养基中发酵制备得到发酵液，从发酵液中提取得到多功能甘油混合物；所述产甘油假丝酵母为产甘油假丝酵母CCTCCM 93018；
所述含有葡萄干的培养基的制备方法为：
将葡萄干冷冻后粉碎，将粉碎后的物料同水按照质量体积比为(400～500g)：(700～1000mL)的比例混合后煮沸，冷却、过滤后制备得到葡萄干滤液；向葡萄干滤液中添加5～15g/L的玉米浆，1～3g/L的尿素得到培养基；
所述多功能甘油混合物中含有酚和黄酮。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵条件为：25～30℃，200～300rpm。
3.如权利要求1～2任一所述的方法，其特征在于，所述含有葡萄干的培养基中，葡萄糖的终浓度为150～250g/L。
4.采用权利要求1～3任一所述的方法制备得到的多功能甘油混合物；所述多功能甘油混合物中含有酚和黄酮。
5.一种含有葡萄干的培养基在产甘油假丝酵母发酵制备多功能甘油混合物中的应用；
所述多功能甘油混合物中含有酚和黄酮；
所述含有葡萄干的培养基为将葡萄干冷冻后粉碎，将粉碎后的物料同水按照质量体积比为(350-500g)：(700-1000mL)的比例混合后煮沸，冷却、过滤后制备得到葡萄干滤液；向葡萄干滤液中添加5～15g/L的玉米浆，1～3g/L的尿素得到培养基。
6.一种含有权利要求4所述的多功能甘油混合物的产品，其特征在于，所述产品为食品或化学品。
7.权利要求4所述的多功能甘油混合物在制备具有保湿功能，和/或抗衰老，和/或清除DPPH自由基的产品中的应用。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN1070235C (zh) * 1999-08-04 2001-08-29 无锡轻工大学 利用产甘油假丝酵母突变株好氧发酵生产甘油的方法

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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GB824184A (en) * 1955-05-16 1959-11-25 Ca Nat Research Council Production of polyhydric alcohols
CN1070235C (zh) * 1999-08-04 2001-08-29 无锡轻工大学 利用产甘油假丝酵母突变株好氧发酵生产甘油的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
葡萄酒中酵母菌高产甘油的研究进展;薛军侠;徐艳文;裴颖芳;杨莹;刘延琳;;微生物学杂志(05);第77-82页 *
野生葡萄及葡萄酒抗氧化活性和抗菌性研究;缪冰旋;《CNKI》;第33-39页 *

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