CN114250185B - 一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌及其应用 - Google Patents

一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌及其应用，该肠杆菌的分类命名为Enterobacter sp.HN01，其可用于降解气态疏水性对二甲苯同时以疏水性碳源下产生表面活性剂，经实验表明，肠杆菌Enterobactersp.HN01具有优异的对二甲苯降解能力，同时可稳定自产糖脂类生物表面活性剂，并且经耐受培养后，其可对30‑60mg/L对二甲苯达到100％降解，有效拓展了短杆状肠杆菌在环境修复中的应用，其在降解气态有机污染物对二甲苯中具有良好的应用前景。

Description

一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌及 其应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌及其应用。
背景技术
二甲苯是典型的挥发性有机污染物，其有三种异构体：邻二甲苯(o-xylene)，间二甲苯(m-xylene)以及对二甲苯(p-xylene)。其广泛应用于颜料、油漆等的稀释剂，印刷、橡胶、皮革工业的溶剂以及作为清洁剂和去油污剂，航空燃料的一种成分，化学工厂和合成纤维工业的原材料和中间物质，以及织物的纸张的涂料和浸渍料等，不仅具有强烈的恶臭气味，而且该类污染物会引起皮肤、眼睛、鼻子、喉咙或呼吸道系统的强烈刺激。
对二甲苯是二甲苯的异构体中最难被降解的有机物，在工业中用途广泛，而由于其沸点低、蒸汽压高，在生产和使用时大量挥发到环境中，危害人体健康和自然环境。此外，二甲苯的嗅阈值极低，在较低浓度时就具有强烈的臭味，对人的生理及心理健康也会产生不利影响，而且对二甲苯难溶于水，其利用率低，因此，目前环境保护中对二甲苯的去除和降解是非常必要和紧迫的。
近年来，虽有报道苯系物的降解菌的相关报导，但其降解效率较低，并且受不同苯系化合物的特性存在较大差异，降解菌株在不同苯系化合物中降解作用的局限性大，尤其对于挥发性难溶的恶臭有机废气的降解净化效果不足。
表面活性剂具有两亲性，其常用于提高生物反应器的效率，而传统的化学表面活性剂结构复杂且具有二次毒性，因此，寻求可利用微生物自产环境友好、可生物降解的天然生物表面活性剂，对于环境保护具有重要意义。
但目前降解菌主要仍在于单方面的降解特性或其生物学特性的研究，迄今未见有相关报道短杆状肠杆菌可降解气态对二甲苯同时可自产生物表面活性剂的相关研究或报道。
发明内容
鉴以此，本发明提出一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌及其应用，属于肠杆菌属的一个新变种，其具有优异的对二甲苯降解能力，同时自产生物表面活性剂，有效拓展了短杆状肠杆菌在环境修复中的应用，在降解气态有机污染物对二甲苯中具有良好的应用前景。
本发明的技术方案是这样实现的：
一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌，其分类命名为Enterobacter sp.HN01，保藏于广东微生物研究所菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO:62010；保藏地址为广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏日期为2021年10月25日。
进一步说明，所述肠杆菌Enterobacter sp.HN01的16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌的应用，该肠杆菌Enterobacter sp.HN01用于降解气态疏水性对二甲苯。
进一步说明，所述降解气态疏水性对二甲苯的方法，具体为采用肠杆菌Enterobacter sp.HN01经耐受培养后，其在20-40℃、pH为3-9的条件下，对浓度为30-60mg/L的气态疏水性对二甲苯完全降解。
进一步说明，所述肠杆菌Enterobacter sp.HN01经耐受培养，是将肠杆菌Enterobacter sp.HN01加入含半胱氨酸盐酸盐的液体培养基中，在28-35℃中培养3-5h，分离菌液，得到耐受菌株。
进一步说明，所述每1000mL液体培养基中，包括酵母提取物5.0-6.0g、蛋白胨3.0-5.0g、0.06-0.08mg半胱氨酸盐酸盐、0.1-0.2g维生素B1，余量为马铃薯汁。
一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌的应用，该肠杆菌Enterobacter sp.HN01在以疏水性碳源下产生表面活性剂的应用。
进一步说明，采用所述肠杆菌Enterobacter sp.HN01在降解气态疏水性对二甲苯时，产生表面活性剂。
进一步说明，所述产生表面活性剂的方法，具体为，由肠杆菌Enterobactersp.HN01在20-40℃、pH为3-9的条件下降解气态疏水性对二甲苯时，产生表面活性剂。
进一步说明，所述肠杆菌Enterobacter sp.HN01在降解气态疏水性对二甲苯的过程中，产生糖脂类生物表面活性剂。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明提出的肠杆菌Enterobacter sp.HN01可用于环境修复，对环境污染中的气态疏水性对二甲苯具有较高的降解效率，在实现高效降解对二甲苯的同时快速稳定生成环境友好、可生物降解的天然生物表面活性剂；并且通过进一步优化和控制肠杆菌Enterobacter sp.HN01在降解对二甲苯过程的反应条件，对肠杆菌Enterobacter sp.HN01的耐受培养下，不仅显著提高了对二甲苯的降解效率，可对30-60mg/L的对二甲苯达到100％的降解，并且降低高浓度对二甲苯对菌种的抑制作用明显降低，并保证表面活性剂的稳定生成。
本发明对在疏水性有机废气的净化方面具有重要意义，有利于促进生物降解菌在环境修复与保护的应用，并且实现高效稳定的生物表面活性剂的生成，有利于促进废气物资源的充分再生利用。
附图说明
图1为本发明实施例的肠杆菌HN01在电子显微镜下的形态图；
图2为本发明实施例的肠杆菌HN01自产表面活性剂的乳化作用成图；
图3为本发明实施例的肠杆菌HN01自产表面活性剂的种类鉴定图谱。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1-肠杆菌Enterobacter sp.HN01分离筛选与鉴定
本发明肠杆菌Enterobacter sp.HN01分离筛选自海南省海口市市某污水处理厂的好氧池活性污泥，肠杆菌Enterobacter sp.HN01的分离纯化方法，包括如下步骤：
1、制备驯化培养液，驯化培养液为无机盐培养水溶液，每1000mL无机盐培养水溶液中含有:1.2g K2HPO4·3H2O,1.2g KH2PO4,0.2g MgSO4·7H2O,0.4g NH4Cl,0.01g FeSO4·7H2O,和1mL微量元素水溶液，(其中，每1000mL微量元素水溶液中含有:0.2g CaCl2,0.2gMnSO4·4H2O,0.1g CuSO4·5H2O,0.2g ZnSO4·7H2O,0.09g CoCl2·6H2O,0.12g Na2MoO4·2H2O和0.006g H3BO3)；
2、将10mL好氧池污泥注入装有90mL无机盐培养水溶液的500mL顶空瓶中，并以200rpm培养；
3、采用10μL注射器加入过滤除菌的对二甲苯(1μL)，并用塞子密封瓶子后；在37℃培养数天，每24小时用气相色谱法测定顶空瓶中的对二甲苯浓度，直到对二甲苯浓度为0；当对二甲苯浓度下降到0，即得到初选降解菌；
降解率的测定：在对二甲苯生物降解的过程中定时取样通过气相色谱法测定降解率。降解率＝(对二甲苯初始浓度-对二甲苯终浓度)/对二甲苯初始浓度。
气相色谱法测定对二甲苯的浓度：采用福立9790ii气相色谱仪-氢火焰(GC-FID)，气相色谱的进样口温设定为度180℃，色谱柱柱温设定为90℃，检测器温度设定为220℃。使用500μL顶空气密针吸取顶空瓶中的体积为200μL气相进行采样测定。记录初始时刻的峰面积作为初始浓度，终了时刻的峰面积为终浓度。
4、本发明依据可自产表面活性剂的细菌普遍具有溶血性这一特性进行筛选，并配合了亚甲基蓝平板指示的变色效果来进一步筛选；将初步筛选的可以降解对二甲苯的细菌菌液在血琼脂平板上进行划线分离，在37℃恒温培养箱内培养，再从血平板上挑取菌落接种在亚甲基蓝平板上，可以产生变色反应的菌种，可初步视为具有对二甲苯降解能力并可以自产表面活性剂的细菌；
5、将初步筛选得到的菌种重复上述过程3次，得到对二甲苯降解能力同时自产生物表面活性剂的短杆状肠杆菌。
将纯化得到的菌落进行鉴定，鉴定结果如下：
(1)菌体的形态特性：
a.采用常规的细菌生理生化鉴定方法和电子显微镜观察，所筛选的肠杆菌的细胞染色为革兰氏阴性；在电子显微镜下观察，其形态为短杆状，部分近似球形，菌体大小为1-3μm，如图1所示。
b.菌落的形态特性:NA(营养琼脂)平板上培养2天，菌落圆形，凸起，边缘整齐，表面光滑。
c.肠杆菌主要的生理生化特征如表1所示：
表1肠杆菌的各项生理生化特征
Figure BDA0003453436330000051
注：+：阳性；－：阴性
上述结果表明本发明所筛选的细菌与肠杆菌属的生理生化特性很相似。
(2)提取细菌基因组DNA，采用细菌的16S rDNA通用引物：
上游引物：V4-515 F(5’-GTGCCAGCAGCCGCGGTAA-3’)
下游引物：V4-806 R(5’-GGACTACCAGGGTATCTAA-3’)
扩增其16S rDNA全部基因，测序结果如SEQ ID NO：1所示。
将SEQIDNO：1中所示的长为1364bp的16SrRNA基因序列在GenBank中进行序列同源性比对分析，发现该菌株与Enterobacter cloacae strain ACD1同源性达99.85％。综合上述的菌体形态特征、生长条件、生理生化特性、16S rRNA基因序列结果，确定本发明所筛选的菌株归属肠杆菌属的一个新变种，命名为肠杆菌(Enterobacter sp.)HN01。
该菌种兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力，目前保藏在广东微生物研究所菌种保藏中心(GDMCC)，保藏号为62010，保藏地址为广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏日期为2021年10月25日。
实施例2-肠杆菌Enterobacter sp.HN01对对二甲苯的降解
本实施例研究肠杆菌Enterobacter sp.HN01在环境修复中的应用，用于降解环境中的气体疏水性对二甲苯，其环境包括大气、水体或者土壤。
本发明将由实施例1筛选得到的肠杆菌Enterobacter sp.HN01进行对二甲苯降解能力的实验，具体方法如下：
1、根据降解实验需要，配置无机盐培养基：向500mL的顶空瓶中加入无机盐溶液100mL(每1000mL无机盐培养水溶液中含有:1.2g K2HPO4·3H2O，1.2g KH2PO4，0.2g MgSO4·7H2O，0.4g NH4Cl，0.01g FeSO4·7H2O，和1mL微量元素水溶液。其中，每1000mL微量元素水溶液中含有:0.2g CaCl2，0.2g MnSO4·4H2O，0.1g CuSO4·5H2O，0.2g ZnSO4·7H2O，0.09gCoCl2·6H2O，0.12g Na2MoO4·2H2O和0.006g H3BO3)，于121℃高压灭菌15mino
2、配制肠杆菌Enterobacter sp.HN01重悬菌液：
将筛选所得的具有对二甲苯降解能力的肠杆菌HN01接种至LB培养基中(LB培养基含有酵母提取物5.0g/L、蛋白胨10.0g/L、NaCl 5.0g/L)，置于37℃、200rprn的摇床中活化菌体48h，菌液离心，收集菌体，并采用无机盐培养水溶液洗涤三次，才用100mL无机盐溶液重悬，得肠杆菌Enterobacter sp.HN01重悬菌液，其中，无机盐水溶液的pH值为7。
实验1：
耐受培养：将筛选所得的肠杆菌Enterobacter sp.HN01接种至液体培养基中(每1000mL液体培养基中，包括酵母提取物5.5g、蛋白胨4.0g、0.15g维生素B1，余量为马铃薯汁)；在32℃中培养4h，分离菌液，得到耐受菌株；
将耐受菌株按照上述肠杆菌Enterobacter sp.HN01重悬菌液的制备方法，制备肠杆菌Enterobacter sp.HN01重悬菌液；
取100mL菌液用100mL针筒注射入提前加入了不同含量的对二甲苯的顶空瓶中，顶空瓶内对二甲苯的浓度分别为：30，40，45，50，55，60mg/L，在37℃，200rpm的摇床反应，定时取样，通过气相色谱法测定降解率和降解速率，降解率测定同实施例1；
实验2：
耐受培养：将筛选所得的肠杆菌Enterobacter sp.HN01接种至1L含半胱氨酸盐酸盐的液体培养基中(每1000mL液体培养基中，包括酵母提取物5.5g、蛋白胨4.0g、0.07mg半胱氨酸盐酸盐、0.15g维生素B1，余量为马铃薯汁)；在32℃中培养4h，分离菌液，得到耐受菌株；
将耐受菌株按照上述肠杆菌Enterobacter sp.HN01重悬菌液的制备方法，制备肠杆菌Enterobacter sp.HN01重悬菌液；
按照实验1将所得的菌液加入了不同含量的对二甲苯的顶空瓶中(30，40，45，50，55，60mg/L)，摇床反应，取样，测定降解率和降解速率。
单位时间的降解浓度mg/L＝对二甲苯初始浓度mg/L/降解所需时间，结果如表2所示；
表2肠杆菌Enterobacter sp.HN01对不同浓度对二甲苯的降解
Figure BDA0003453436330000071
从表2中可以看出，实验1中筛选得到肠杆菌(Enterobacter sp.)HN01经耐受处理后，以对二甲苯为碳源，于37℃，pH＝7，200rpm的培养条件下，对对二甲苯的降解能力在30-60mg/L内均可实现100％降解，随着其浓度的增加，其降解速率逐步提升，而在浓度在45mg/L时，其对二甲苯的降解速率降低；实验2中，其经含半胱氨酸盐酸盐培养基进行耐受处理后的肠杆菌(Enterobacter sp.)HN01，对二甲苯的降解速率明显提升，且其在55mg/L时，单位时间对二甲苯降解浓度仍可以达到1.0mg/L以上，表明耐受处理的肠杆菌(Enterobactersp.)HN01在高浓度对二甲苯中的活性高，降低高浓度对二甲苯对菌种的抑制作用明显降低。
实施例3-肠杆菌Enterobacter sp.HN01在降解对二甲苯时的表面活性剂的测定
本发明对筛选得到的肠杆菌(Enterobacter sp.)HN01产生生物表面活性剂能力进行实验：
依据实验2的方法制备肠杆菌Enterobacter sp.HN01重悬菌液，取100mL肠杆菌菌液，接种至含液体对二甲苯浓度为60mg/L试管中，于37℃，pH＝7，200rpm的摇床进行培养，待对二甲苯完全降解后，取其菌液上清液进行乳化能力测定。具体操作如下：
在试管中加入3mL花生油，将等量的菌液离心后，得到的无细胞上清液加入到同一试管中，剧烈震荡试管2min，随即静置24h，观察其乳化层高度；乳化指数＝(乳化层高度/试管中液体的总高度)×100％。
经过测定，本发明筛选得到的肠杆菌(Enterobacter sp.)HN01产生的的生物表面活性剂的乳化指数为44.27％，表明肠杆菌自产生物表面活性剂的乳化作用明显，证明其产生了生物表面活性剂。
实施例4-对肠杆菌Enterobacter sp.HN01生成的表面活性剂的鉴定
本发明对筛选得到的肠杆菌(Enterobacter sp.)HN01产生的生物表面活性剂能力进行核磁共振氢谱(1HNMR)鉴定，具体操作如下：
将实验2中耐受处理的肠杆菌(Enterobacter sp.)HN01在加入1ml液体对二甲苯的条件下进行培养，连续培养数周后，将菌液离心处理，去除菌体，用等量的乙酸乙酯反复萃取10min，分离得到有机相，将有机相在旋转蒸发仪中在50℃下蒸发得到棕色的固体，利用二甲基亚砜(DMSO)溶解，进行核磁共振氢谱(1HNMR)鉴定。
经过测定，本发明筛选得到的肠杆菌(Enterobacter sp.)HN01产生的的生物表面活性剂种类属于糖脂类生物表面活性剂，关键指示峰为存在着糖分子存在的糖苷键以及相关的脂肪族基团，相关鉴定结果如图3所示。
实施例5-对肠杆菌Enterobacter sp.HN01在不同条件下降解对二甲苯过程的表面活性剂生产能力的研究
(1)取100mL由实验2制备而得肠杆菌Enterobacter sp.HN01重悬菌液，接种至含液体对二甲苯浓度为50mg/L试管中，分别于20℃、30℃、37℃、40℃，pH为7，200rpm的摇床进行培养，待对二甲苯完全降解后，取其菌液上清液进行乳化能力测定及测定对二甲苯的降解速率，结果如下表3：
表3肠杆菌Enterobacter sp.HN01不同温度下的二甲苯降解速率和乳化指数
温度(℃) 对二甲苯降解时间(h) 乳化指数(％)
20 52 31.29
30 46 36.16
37 41 44.31
40 50 40.82
由上表可知，肠杆菌Enterobacter sp.HN01的对二甲苯的降解速率随着温度的上升而加快，其产生表面活性剂的最佳温度条件在30-37℃之间。
(2)取100mL由实验2制备而得肠杆菌Enterobacter sp.HN01重悬菌液，接种至含液体对二甲苯浓度为50mg/L试管中，分别于37℃，pH为3、5、7、9，200rpm的摇床进行培养，待对二甲苯完全降解后，取其菌液上清液进行乳化能力测定及测定对二甲苯的降解速率，结果如下表4：
表4肠杆菌Enterobacter sp.HN01不同pH下的二甲苯降解速率和乳化指数
Figure BDA0003453436330000091
Figure BDA0003453436330000101
由上表可知，肠杆菌Enterobacter sp.HN01可在其pH为3-9的范围内稳定降解对二甲苯，同时有效产生表面活性剂，其降解速率在pH＝7时的对二甲苯的降解速率最高，且乳化指数最高。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 海南大学
<120> 一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌及其应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1364
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
ggcgagcggc ggacgggtga gtaatgtctg ggaaactgcc tgatggaggg ggataactac 60
tggaaacggt agctaatacc gcataacgtc gcaagaccaa agagggggac cttcgggcct 120
cttgccatca gatgtgccca gatgggatta gctagtaggt ggggtaacgg ctcacctagg 180
cgacgatccc tagctggtct gagaggatga ccagccacac tggaactgag acacggtcca 240
gactcctacg ggaggcagca gtggggaata ttgcacaatg ggcgcaagcc tgatgcagcc 300
atgccgcgtg tatgaagaag gccttcgggt tgtaaagtac tttcagcggg gaggaaggtg 360
ttgaggttaa taacctcagc aattgacgtt acccgcagaa gaagcaccgg ctaactccgt 420
gccagcagcc gcggtaatac ggagggtgca agcgttaatc ggaattactg ggcgtaaagc 480
gcacgcaggc ggtctgtcaa gtcggatgtg aaatccccgg gctcaacctg ggaactgcat 540
tcgaaactgg caggctagag tcttgtagag gggggtagaa ttccaggtgt agcggtgaaa 600
tgcgtagaga tctggaggaa taccggtggc gaaggcggcc ccctggacaa agactgacgc 660
tcaggtgcga aagcgtgggg agcaaacagg attagatacc ctggtagtcc acgccgtaaa 720
cgatgtcgac ttggaggttg tgcccttgag gcgtggcttc cggagctaac gcgttaagtc 780
gaccgcctgg ggagtacggc cgcaaggtta aaactcaaat gaattgacgg gggcccgcac 840
aagcggtgga gcatgtggtt taattcgatg caacgcgaag aaccttacct actcttgaca 900
tccagagaac tttccagaga tggtttggtg ccttcgggaa ctctgagaca ggtgctgcat 960
ggctgtcgtc agctcgtgtt gtgaaatgtt gggttaagtc ccgcaacgag cgcaaccctt 1020
atcctttgtt gccagcggtc cggccgggaa ctcaaaggag actgccagtg ataaactgga 1080
ggaaggtggg gatgacgtca agtcatcatg gcccttacga gtagggctac acacgtgcta 1140
caatggcgca tacaaagaga agcgacctcg cgagagcaag cggacctcat aaagtgcgtc 1200
gtagtccgga ttggagtctg caactcgact ccatgaagtc ggaatcgcta gtaatcgtag 1260
atcagaatgc tacggtgaat acgttcccgg gccttgtaca caccgcccgt cacaccatgg 1320
gagtgggttg caaaagaagt agtagcttaa ccttcgggag ggcg 1364
<210> 2
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
gtgccagcag ccgcggtaa 19
<210> 3
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
ggactaccag ggtatctaa 19

Claims (9)

1.一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌，其特征在于：肠杆菌分类命名为Enterobacter sp.HN01，保藏于广东微生物研究所菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO:62010。
2.如权利要求1所述的一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌，其特征在于：所述肠杆菌Enterobacter sp.HN01的16S rRNA序列如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
3.如权利要求1所述的一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌的应用，其特征在于：所述肠杆菌Enterobacter sp.HN01用于降解气态疏水性对二甲苯。
4.如权利要求3所述的一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌的应用，其特征在于：所述降解气态疏水性对二甲苯的方法，具体为将肠杆菌Enterobactersp.HN01经耐受培养后，将其在20-40℃、pH为3-9的条件下，对底物浓度为30-60mg/L的气态疏水性对二甲苯的降解。
5.如权利要求3所述的一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌的应用，其特征在于：所述肠杆菌Enterobacter sp.HN01经耐受培养，是将肠杆菌Enterobactersp.HN01加入含半胱氨酸盐酸盐的液体培养基中，在28-35℃中培养3-5h，分离菌液，得到耐受菌株。
6.如权利要求5所述的一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌的应用，其特征在于：每1000mL液体培养基中，包括酵母提取物5.0-6.0g、蛋白胨3.0-5.0g、0.06-0.08mg半胱氨酸盐酸盐、0.1-0.2g维生素B1，余量为马铃薯汁。
7.如权利要求6所述的一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌的应用，其特征在于：采用所述肠杆菌Enterobacter sp.HN01在降解气态疏水性对二甲苯时，产生表面活性剂。
8.如权利要求7所述的一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌的应用，其特征在于：所述产生表面活性剂的方法，具体为，由肠杆菌Enterobacter sp.HN01经耐受培养后，在37℃、pH为7的条件下降解气态疏水性对二甲苯时，产生表面活性剂。
9.如权利要求8所述的一株兼具二甲苯降解和自产生物表面活性剂能力的肠杆菌的应用，其特征在于：所述肠杆菌Enterobacter sp.HN01在气态疏水性对二甲苯降解的过程中，产生糖脂类生物表面活性剂。
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