CN114223729A - 长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖组合物在配方奶粉中的应用 - Google Patents

长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖组合物在配方奶粉中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖组合物在配方奶粉中的应用。具体而言,本发明提供了一种长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖的组合物在制备具有可有效提升生物体对金黄色葡萄球菌感染的抵御能力、可提高生物体先天免疫和/或抗衰老功效的配方奶粉中的应用,其中,每100g配方奶粉中含有长双歧杆菌婴儿亚种1×103CFU~1×1012CFU,母乳低聚糖0.1g~10g。

Description

长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖组合物在配方奶粉中的 应用
技术领域
本发明是关于长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖组合物在制备配方奶粉中的应用。
背景技术
在上个千年,已有医学文献记载,未经母乳喂养的婴儿相对于母乳喂养的婴儿,有较高的疾病率和死亡率。母乳不仅为婴儿提供所需营养,母乳中的活性成分更为婴儿的肠道发育和免疫力完善提供保障。母乳喂养的婴儿与配方奶喂养的婴儿相比,肠道菌群中有益菌的相对丰度更高,特别是双歧杆菌和乳酸菌。
母乳通过菌群的传递,加上母乳低聚糖和母乳中的细胞因子等活性成分,为新生儿建立起健康的肠道菌群。婴儿每天通过母乳摄入107-108个细菌,包括乳酸菌和双歧杆菌。这些菌通过母乳直接传递给婴儿,部分可在婴儿肠道定植,促进生命早期肠道菌群的建立。婴儿肠道菌群的建立,对其肠道的发育,以及对健康和免疫系统有着短期,甚至终生的影响。
母乳低聚糖(Human Milk Oligosaccharides,简称HMOs)是人乳中存在的第三大乳化合物群体。其在婴幼儿早期发育中起着重要的作用。迄今为止,已经确定了130多不同的结构,但功能影响尚为未知。乳中大多数寡糖不能被消化,因此,HMO可以作为益生元。此外,HMO在免疫系统的成熟方面及其作为免疫调节剂的作用显示它对婴幼儿健康发育的重要性。目前,HMO已经被加入到婴儿配方食品中。
目前在婴幼儿配方粉、辅食及营养补充剂领域,需要有缓解婴幼儿肠道不适及提升自身抵御致病菌如金黄色葡萄球菌感染能力的解决方案。同时,在3岁以上儿童、青少年及成人领域,也需要缓解肠道不适及提升自身抵御致病菌如金黄色葡萄球菌感染能力的解决方案。
秀丽隐杆线虫(C.elegans)作为一种模型生物,在临床前研究与评估中有较好的应用前景。它具有较短的生命周期(21天),可复制和再生性较强,操作简便、透明且易于培养。它的基因组已全部被测序,并且有四分之一的基因与人类基因组是同源的。对线虫的基因进行编辑从而产生的基因突变的线虫生物体,可用作基因分析的实验手段。目前线虫在欧洲的立法中并不被认为是一种动物。它被广泛用作活体外的测定,比如转录组学、蛋白组学、代谢组学等。作为模式生物,它也常常被作为原料评估的第一个步骤,在功效原料的设计、体外酶或细胞实验、小鼠模型和临床实验前,往往用线虫作为高通量的手段来筛选测试原料的一些特性。
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)是一种革兰氏阳性菌,属于葡萄球菌属,是常见的食源性致病微生物。它广泛存在于自然环境中,在适当条件下,能产生肠毒素并能引起食物中毒,引发过多起由金黄色葡萄球菌导致的食源性微生物食物中毒事件。人体在受到金黄色葡萄球菌感染后,可能会出现恶心、呕吐、头晕等常见的食物中毒症状,并可能出现肠炎、肺炎、皮肤感染、伤口感染溃烂、脑膜炎等症状。
发明内容
本案发明人在研究中发现,一些长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖组合可提升生物体抵抗金黄色葡萄球菌感染的能力,从而提供了下述发明:
一方面,本发明提供了一种长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖的组合物在制备具有可有效提升生物体对金黄色葡萄球菌感染的抵御能力、可提高生物体先天免疫和/或抗衰老功效的配方奶粉中的应用,其中,每100g配方奶粉中含有长双歧杆菌婴儿亚种1×103CFU~1×1012CFU/100g,母乳低聚糖0.1g~10g。
另一方面,本发明还提供了一种具有可有效提升生物体对金黄色葡萄球菌感染的抵御能力、可提高生物体先天免疫和/或抗衰老功效的配方奶粉,其是将长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖添加到配方奶粉中制备得到的。
根据本发明的具体实施方案,本发明的所述配方奶粉中,所述长双歧杆菌婴儿亚种包括保藏编号为CGMCC No.21109的长双歧杆菌婴儿亚种(Bifidobacterium longumsubsp.infantis)YLGB-1496菌株。保藏编号为CGMCC No.21109的长双歧杆菌婴儿亚种菌株已于2020年12月05日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,保藏日期:2020年12月05日;保藏编号:CGMCC No.21109;分类命名:长双歧杆菌婴儿亚种(Bifidobacterium longum subsp.infantis)。本发明中将该菌株也称为YLGB-1496或GB-1496。
根据本发明的具体实施方案,本发明的所述配方奶粉中,总蛋白质含量为10g~20g/100g,乳清蛋白占总蛋白的比例为40%~70%;脂肪含量为15g~30g/100g;碳水化合物含量为50g~70g/100g。
根据本发明的具体实施方案,本发明的所述配方奶粉中,还含有亚油酸与α-亚麻酸,亚油酸含量为2700~4500mg/100g,α-亚麻酸含量为270~450mg/100g。
根据本发明的具体实施方案,本发明中的所述配方奶粉可以为婴幼儿配方粉(婴幼儿配方食品),也可以是非婴幼儿配方奶粉(如儿童配方奶粉、成人配方奶粉)。
根据本发明的具体实施方案,本发明的所述配方奶粉中,提供总蛋白的原料包括:生乳(牛/羊)、全脂奶粉(牛/羊)、脱脂奶粉(牛/羊)、乳清蛋白粉(牛/羊)、脱盐乳清粉中(牛/羊)、β-酪蛋白的一种或多种。具体地,基于1000重量份的上述配方奶粉,其原料包括:生乳(牛/羊)0~3500份,全脂奶粉0~260(牛/羊)份,乳清蛋白粉(牛/羊)0~120份,脱脂奶粉(牛/羊)0~400份,和/或脱盐乳清粉(牛/羊)0~600份,β-酪蛋白添加量为0-40份。
根据本发明的具体实施方案,本发明的所述配方奶粉中,提供脂肪的原料包括以下重量份的原料中的一种或多种:玉米油0-50份、大豆油0-65份、葵花籽油0-100份、1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯份0-240、椰子油0-30份、低芥酸菜籽油0-85份、亚麻籽油0-20份。
根据本发明的具体实施方案,本发明的配方奶粉中,提供碳水化合物的原料包括:乳糖0~500份,和/或含有乳糖的上述蛋白原料。
根据本发明的具体实施方案,本发明的配方奶粉中,除上述组分外,还可包括配方奶粉的常规组分,例如还可以包括营养素、膳食纤维、肌醇、牛磺酸、左旋肉碱、二十二碳六烯酸、二十碳四烯酸、叶黄素、核苷酸、乳铁蛋白中的一种或多种。优选包括复配营养素包。在一些优选的实施方案中,所述配方奶粉包括0-20份的营养素,所述营养素包括维生素和矿物质,或进一步选择性包括膳食纤维(低聚果糖、低聚半乳糖、多聚果糖等)、肌醇、牛磺酸、左旋肉碱、二十二碳六烯酸、二十碳四烯酸、叶黄素、核苷酸、乳铁蛋白中的一种或多种。复配营养素主要包括:复配维生素:维生素A、维生素D、维生素E、维生素K1、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟酸、叶酸、泛酸、维生素C、胆碱、生物素;复配矿物质:钠、钾、钙、磷、铜、铁、锌、锰、碘、硒、镁、钾及它们的衍生物。所述各维生素、矿物质的来源、含量及使用量,应该符合婴幼儿配方食品国家标准及相关法规。
根据本发明的具体实施方案,本发明的应用于制备配方奶粉的长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖的组合物中,所述母乳低聚糖包括2’-岩藻糖基乳糖、3’-岩藻糖基乳糖、乳糖-N-四糖、3’-唾液酸基乳糖、6’-唾液酸基乳糖中的一种或多种。
2’-岩藻糖基乳糖(2’-fucosyllactose,2’-FL),为岩藻糖与乳糖形成的三糖结构,是岩藻糖基类低聚糖的代表性物质。市售该物质通常为经微生物发酵法制备,与人乳中发现的2’-岩藻糖基乳糖具有相同结构。
3-岩藻糖基乳糖(3-fucosyllactose,3-FL),为岩藻糖与乳糖形成的三糖结构,与2’-岩藻糖基乳糖互为同分异构体,是岩藻糖基类低聚糖的代表性物质。市售该物质通常为经微生物发酵法制备,与人乳中发现的3-岩藻糖基乳糖具有相同结构。
乳糖-N-四糖(lacto-N-tetraose,LNT),为乳糖与四糖形成的六糖结构,是以核心糖链为基础结构且不含岩藻糖基或唾液酸基的低聚糖的代表性物质,市售该物质通常为经微生物发酵法制备,且与人乳中发现的乳糖-N-四糖具有相同结构。
3’-唾液酸基乳糖(3’-sialyllactose,3’-SL),为唾液酸与乳糖形成的三糖结构,与6’-唾液酸基乳糖互为同分异构体,是唾液酸基类低聚糖的代表性物质。市售该物质通常为经微生物发酵法制备,与人乳中发现的3’-唾液酸基乳糖具有相同结构。
6’-唾液酸基乳糖(6’-sialyllactose,6’-SL),为唾液酸与乳糖形成的三糖结构,与3’-唾液酸基乳糖互为同分异构体,是唾液酸基类低聚糖的代表性物质。市售该物质通常为经微生物发酵法制备,与人乳中发现的6’-唾液酸基乳糖具有相同结构。
根据本发明的具体实施方案,本发明的应用于制备配方奶粉的长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖的组合物中,母乳低聚糖包括2’-岩藻糖基乳糖。2’-岩藻糖基乳糖在所述母乳低聚糖中的含量可为80%以上,例如85%以上,90%以上,95%以上,或100%。
根据本发明的具体实施方案,本发明的应用于制备配方奶粉的长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖的组合物中,所述母乳低聚糖是由2’-岩藻糖基乳糖(2’-FL)、3-岩藻糖基乳糖(3-FL)、乳糖-N-四糖(LNT)、3’-唾液酸基乳糖(3’-SL)和6’-唾液酸基乳糖(6’-SL)中的至少二种、至少三种或至少四种组成的组合。
根据本发明的具体实施方案,本发明的应用于制备配方奶粉的长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖的组合物中,所述长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖的比例为1×103CFU~1×1012CFU:0.1g~10g,优选为1×106CFU~1×1010CFU:1g~10g。在本发明的一些更具体实施方案中,所述长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖的比例为1×108CFU:0.08g~0.3g。所述长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖的比例是以二者在同一组合物中的用量计。
根据本发明的具体实施方案,本发明的组合物的应用中,所述提升生物体对金黄色葡萄球菌感染抵御能力包括:提升个体预防金黄色葡萄球菌感染的能力,降低金黄色葡萄球菌感染个体的能力,和/或缓解金黄色葡萄球菌感染引起的各种症状例如食物中毒(包括恶心、呕吐、头晕等)、肠炎、肺炎、皮肤感染、伤口溃烂或脑膜炎等。
根据本发明的具体实施方案,本发明的组合物的应用中,所述生物体包括动物或人。
本发明的配方奶粉,因包括所述的长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖的组合物而具有可有效提升生物体对金黄色葡萄球菌感染的抵御能力、可提高生物体先天免疫和/或抗衰老功效。
另一方面,本发明还提供了一种制备所述配方奶粉的方法,该方法采用湿法或干法生产工艺,将长双歧杆菌婴儿亚种和母乳低聚糖组合物与配方中的其他原料混合,制备所述母乳化配方奶粉。其制备的工艺流程主要包括:配料、均质、浓缩杀菌、喷雾干燥、干混得到成品。本发明中,长双歧杆菌婴儿亚种可以在配料时一起混料(在婴儿配方粉中以灭活形式存在),优选在后混料过程中添加(在婴儿配方粉中以活菌形式存在)。本发明中,母乳低聚糖可以在配料时一起混料,也可以在后混料过程中添加。
综上所述,本发明发现包括长双歧杆菌婴儿亚种和母乳低聚糖的所述组合物具有可抗衰老、提高生物体先天免疫、可有效提升生物体对金黄色葡萄球菌感染的抵御能力,将其应用于配方奶粉中可抗感染、提高免疫力,具有广泛的应用前景。
附图说明
图1显示15mg/mL的母乳低聚糖2’-FL与益生菌YLGB-1496组合物对秀丽隐杆线虫受到金黄色葡萄球菌感染时存活率的影响。
用于专利程序的微生物保藏:
婴儿双歧杆菌YLGB-1496(或GB-1496)菌株:
保藏日期:2020年12月05日;
保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC);
保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所;
保藏编号:CGMCC No.21109;
分类命名:长双歧杆菌婴儿亚种(Bifidobacterium longum subsp.infantis)。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
除非另外专门定义,本文使用的所有技术和科学术语都与相关领域普通技术人员的通常理解具有相同的含义。
实施例中未详细注明的操作条件,按照所属领域的常规操作进行。
本发明中所用益生菌长双歧杆菌婴儿亚种YLGB-1496(来源为中国健康妈妈母乳,已于2020年12月05日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,保藏日期:2020年12月05日;保藏编号:CGMCC No.21109;分类命名:长双歧杆菌婴儿亚种(Bifidobacterium longum subsp.infantis))。
本发明中所用HMO原料均来自于Jennewein。
实施例1、含有益生菌与益生元组合物的婴儿配方奶粉(制备1000千克):
生牛乳1000千克,乳糖320千克,乳清蛋白粉WPC80%25千克,脱盐乳清粉D90 175千克,玉米油40千克,大豆油50千克,OPO结构脂140千克,α-乳清蛋白粉27千克,β-酪蛋白粉9千克,无水奶油1千克,低聚果糖粉17千克,低聚半乳糖浆40千克,母乳低聚糖(2’-FL)2千克,复配营养素17千克,DHA12千克,ARA22千克,长双歧杆菌亚种YLGB-1496 0.1千克,乳双歧杆菌0.1千克。
其中复配营养素包括复配维生素营养包约2.5千克、氯化胆碱营养包约0.75千克、钙粉营养包约6千克、矿物质营养包约1千克、氯化镁营养包约1.5千克和氯化钾营养包约2千克,各营养包的基料为乳糖。
含有益生菌与益生元组合物的婴儿配方奶粉具体制备工艺如下:
1)牛乳粗滤:将牛乳经过粗过滤及平衡缸脱气后,经过板式换热器预热后,经过分离机分离杂质。
2)牛乳均质杀菌:去除杂质后的生牛乳一部分进入均质机均质,另一部分不均质,二者在均质后进行混合进入杀菌系统杀菌。
3)粉类添加:各种粉类原料按配方经计量后通过风送系统统一加入到配粉罐中,并通过真空系统吸入真空混料罐中;
4)溶化配油:按配方要求将配方中规定的油脂放入化油间,化油间的温度保持在50~90℃,待油溶化后,打入混合油贮罐中,并按配方要求将混合油经油泵打入混料罐中;
5)营养素溶解添加:将钙粉、维生素、矿物质等营养素包用纯净水分别溶解后,依序添加到混料罐中,得到混合的料液。
6)母乳低聚糖溶解添加:将母乳低聚糖原料用步骤5中部分混合料液溶解后,添加到混料罐中,得到含2’FL的混合料液。
7)过滤:经含母乳低聚糖的混合料液经滤网过滤,去除原料中可能带入的物理杂质。
8)均质:混合后的料液通过均质机进行均质,将脂肪球进行机械处理,把它们分散成均匀一致的脂肪球。
9)冷却与贮存:均质后的料液进入板式换热器进行冷却:冷却至20℃以下,暂存在预存缸中,6小时内进入下道工序,搅拌器按设定需求开启。
10)浓缩杀菌:生产时使用双效浓缩,杀菌温度≥83℃,杀菌时间25秒。出料浓度均为50%干物质。
11)浓奶贮存、预热过滤、喷雾干燥:浓缩后的奶暂存在浓奶平衡罐。经刮板预热器预热到60℃,预热后物料经1mm孔径的过滤器过滤后,用高压泵打入干燥塔喷雾干燥,细粉按要求在塔顶或流化床附聚。进风温度:180℃,排风温度86℃,高压泵压力200bar,塔负压-4mba左右。
12)流化床干燥冷却:从干燥塔出来的粉再经流化床(一级)二次干燥后,经流化床(二级)冷却到30℃,得到奶粉主料。
13)分装:按照配方要求,将DHA、ARA或长双歧杆菌亚种YLGB-1496或乳双歧杆菌称量封袋分装。
14)干混:将称量好的DHA、ARA或长双歧杆菌亚种YLGB-1496与奶粉主料在干混机内混均。
15)筛粉:通过振动筛,使奶粉的颗粒度均匀,粉渣报废处理。
16)出粉:用经过消毒的集粉箱接粉,并由出粉间运至上粉间。
17)上粉:将奶粉按包装要求倒入大小包装机上的储粉罐中。
18)包装:400克自动包装机充氮包装。充氮时含氧量低于1%。900克铁听自动充氮包装含氧量低于5%。
19)装箱:将已包装的小袋装入纸箱中同时加入粉勺,用封箱机封口。
20)成品检验:对包装完后的产品按检验计划进行抽样检验。
21)入库贮存:经检验合格的产品入库贮存,要求在常温下贮存,湿度≤65%。
本产品中,母乳低聚糖2’FL的含量约为0.2g/100g;长双歧杆菌亚种YLGB-1496含量为1×106CFU/g。
实施例2、含有益生菌与益生元组合物的婴儿配方奶粉(制备1000千克):
生牛乳1000千克,脱脂奶粉250千块,乳糖150千克,乳清蛋白粉WPC34%50千克,脱盐乳清粉D90 225千克,OPO结构脂106千克,大豆油37千克,玉米油30千克,α-乳清蛋白粉10千克,β-酪蛋白粉10千克,低聚果糖粉5千克,低聚半乳糖浆15千克,大豆磷脂4千克,复配营养素11千克,DHA12千克,ARA 14千克,母乳低聚糖(2’FL)8千克,长双歧杆菌亚种YLGB-14960.2千克,核苷酸0.65千克。
其中复配营养素包括复配维生素营养包约1.5千克、氯化胆碱营养包约0.75千克、钙粉营养包约5千克、矿物质营养包约1千克、氯化镁营养包约0.75千克和氯化钾营养包约2千克,各营养包的基料为乳糖。产品制备工艺如实施例1。
本产品中,母乳低聚糖2’FL的含量约为0.8g/100g;长双歧杆菌亚种YLGB-1496含量为2×106CFU/g。
实施例3、含有益生菌与益生元组合物的婴儿配方奶粉(制备1000千克):
生牛乳1000千克,脱脂奶粉250千块,乳糖140千克,乳清蛋白粉WPC34%50千克,脱盐乳清粉D90 225千克,OPO结构脂106千克,大豆油37千克,玉米油30千克,α-乳清蛋白粉10千克,β-酪蛋白粉10千克,低聚果糖粉5千克,低聚半乳糖浆15千克,母乳低聚糖(2’FL)30千克,复配营养素11千克,DHA12千克,ARA14千克,长双歧杆菌亚种YLGB-1496 0.4千克,核苷酸0.65千克。
其中复配营养素包括复配维生素营养包约1.5千克、氯化胆碱营养包约0.75千克、钙粉营养包约5千克、矿物质营养包约1千克、氯化镁营养包约0.75千克和氯化钾营养包约2千克,各营养包的基料为乳糖。产品制备工艺如实施例1。
本产品中,母乳低聚糖2’FL的含量约为3g/100g;长双歧杆菌亚种YLGB-1496含量为4×106CFU/g。
实施例4、含有益生菌与益生元组合物的婴儿配方奶粉(制备1000千克):
生牛乳1000千克,脱脂奶粉250千块,乳糖165千克,乳清蛋白粉WPC34%50千克,脱盐乳清粉D90 225千克,OPO结构脂106千克,大豆油37千克,玉米油30千克,α-乳清蛋白粉10千克,β-酪蛋白粉10千克,低聚果糖粉5千克,低聚半乳糖浆15千克,母乳低聚糖5kg(其中2’FL 2.65kg,LNT 0.8kg),复配营养素11千克,DHA12千克,ARA 14千克,长双歧杆菌亚种YLGB-1496 0.4千克,核苷酸0.65千克。
其中复配营养素包括复配维生素营养包约1.5千克、氯化胆碱营养包约0.75千克、钙粉营养包约5千克、矿物质营养包约1千克、氯化镁营养包约0.75千克和氯化钾营养包约2千克,各营养包的基料为乳糖。产品制备工艺如实施例1。
本产品中,母乳低聚糖组合物其中2’FL的含量约为0.265g/100g,LNT的含量约为0.8g/100g;长双歧杆菌亚种YLGB-1496含量为4×106CFU/g。
长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖组合物功效实验
益生菌长双歧杆菌婴儿亚种YLGB-1496,用补充了1%半胱氨酸的MRS培养基来培养受试的益生菌,并在37℃厌氧环境中孵育过夜。收获菌体并用生理盐水溶液冲洗,调整益生菌浓度将其接种在含有线虫生长培养基的平皿中,每个培养皿平板中益生菌为1×108CFU或1×107CFU。
HMO用蒸馏水配置母乳低聚糖溶液。
线虫感染模型
获取了年龄一致的线虫并将其培养在含线虫琼脂培养基(NGM培养基,线虫培养基中含有大肠杆菌OP50为食物)的培养皿中,添加了不同剂量的HMO(15mg/mL)与益生菌(1×108CFU、1×107CFU)组合物进行共培养(每个线虫培养皿中加入的液体总体积是10mL。对于浓度为15mg/mL的HMO受试组,每个培养皿中HMO的最终量是150mg。因此每个培养皿平板中,益生菌与HMO的添加量比例为:1×108CFU:150mg,或1×107CFU:150mg)。在线虫成年后,它们被转移到接种了金黄色葡萄球菌ATCC25923的培养皿中,添加量为108~109CFU/mL,来模拟受到金黄色葡萄球菌感染的情况。各组别在感染阶段添加的干预物(益生菌和/或HMO)情况分别与培养阶段相同。使用了两个对照,分别是没有致病菌的条件(线虫培养皿中含有大肠杆菌OP50),以及有致病菌金黄色葡萄球菌感染但没有任何干预物的(只含有金黄色葡萄球菌的培养皿)。另设置培养阶段添加干预物而感染阶段没有任何干预物的组别、以及培养阶段未添加干预物而感染阶段添加干预物的组别。
将线虫培养几天后,对它们的存活率进行每日计数。如果线虫对铂丝没有反应,则可被认为是死亡。每种条件均进行了两次独立测定。
对存活曲线进行了统计学的比较分析,用GraphPad Prism 4统计学软件包进行了log rank survival显著性分析。用One-way ANOVA分析在感染第三天存活率的显著性差异。对各组在每一天的存活率数据,用Two-way ANOVA进行了统计分析,并用Dunnett’posthoc test进行了显著性分析。
实验结果
如图1所示,15mg/mL的HMO 2’-FL与YLGB-1496(108CFU)对于线虫受到金黄色葡萄球菌的感染情况下的存活率,都起到了显著的保护与提升作用(P<0.0001),并且二者的保护作用是比较相近的。而107的YLGB-1496菌对于此情况下的线虫存活率也有较好的保护作用,虽然此作用显著的低于108情况下的存活率(P<0.05)。当2’-FL与YLGB-1496菌株(108CFU)形成组合物,这种情况下对于线虫受到金葡菌感染时的存活率的提升作用,比单独的这两种物质,即单独菌株或者单独HMO,效果都显著更好,且组合物相比单独的原料,实现了22%的存活率提升(P<0.001)。可见当2’-FL与YLGB-GB1496形成组合物,二者体现了较好的协同效应。

Claims (9)

1.一种长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖的组合物在制备具有可有效提升生物体对金黄色葡萄球菌感染的抵御能力、可提高生物体先天免疫和/或抗衰老功效的配方奶粉中的应用,其中,每100g配方奶粉中含有长双歧杆菌婴儿亚种1×103CFU~1×1012CFU,母乳低聚糖0.1g~10g。
2.根据权利要求1所述的应用,其中,所述长双歧杆菌婴儿亚种包括保藏编号为CGMCCNo.21109的长双歧杆菌婴儿亚种(Bifidobacterium longum subsp.infantis)YLGB-1496菌株。
3.根据权利要求1所述的应用,其中,所述配方奶粉中,总蛋白质含量为10g~20g/100g,乳清蛋白占总蛋白的比例为40%~70%;脂肪含量为15g~30g/100g;碳水化合物含量为50g~70g/100g。
4.根据权利要求1或2所述的应用,其中,所述配方奶粉中,亚油酸含量为2700~4500mg/100g,α-亚麻酸含量为270~450mg/100g。
5.根据权利要求1所述的应用,其中,所述配方奶粉为婴幼儿配方粉或非婴幼儿配方奶粉。
6.根据权利要求1所述的应用,其中,所述配方奶粉中还包括营养素、膳食纤维、肌醇、牛磺酸、左旋肉碱、二十二碳六烯酸、二十碳四烯酸、叶黄素、核苷酸、乳铁蛋白中的一种或多种。
7.根据权利要求1所述的应用,其中,所述母乳低聚糖包括2’-岩藻糖基乳糖、3’-岩藻糖基乳糖、乳糖-N-四糖、3’-唾液酸基乳糖、6’-唾液酸基乳糖中的一种或多种。
8.根据权利要求1所述的应用,其中,所述提升生物体对金黄色葡萄球菌感染抵御能力包括:提升个体预防金黄色葡萄球菌感染的能力,降低金黄色葡萄球菌感染个体的能力,和/或缓解金黄色葡萄球菌感染引起的个体食物中毒、肠炎、肺炎、皮肤感染、伤口溃烂和/或脑膜炎。
9.一种具有可有效提升生物体对金黄色葡萄球菌感染的抵御能力、可提高生物体先天免疫和/或抗衰老功效的配方奶粉,其是根据权利要求1~8任一项所述的应用将长双歧杆菌婴儿亚种与母乳低聚糖添加到配方奶粉中制备得到的。
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