CN114206885A - 吡唑并[3,4-b]吡嗪shp2磷酸酶抑制剂 - Google Patents

吡唑并[3,4-b]吡嗪shp2磷酸酶抑制剂 Download PDF

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Abstract

本发明提供了新型式(I)吡嗪衍生物：或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐，其中取代基如本文所定义的。本发明还提供了包括所述化合物的药物组合物以及所述化合物在治疗疾病，例如癌症中的用途。式(I)：

Description

吡唑并[3,4-B]吡嗪SHP2磷酸酶抑制剂
技术领域
本发明涉及新型吡嗪衍生物、包括所述化合物的药物组合物以及所述化合物在治疗疾病，例如癌症中的用途。
相关申请
本申请与2019年8月20日提交的英国专利申请号1911928.8相关，所述英国专利申请的内容以全文引用的方式并入本文中。
背景技术
含Src同源区2(SH2)的蛋白酪氨酸磷酸酶2(SHP2)是一种由PTPN11基因编码的泛表达的蛋白酪氨酸磷酸酶。SHP2含有两个N端串联的SH2结构域(N-SH2、C-SH2)、催化磷酸酶(PTP)结构域和具有2个酪氨酸磷酸化位点的C端尾。
由于N-SH2与PTP结构域之间的自抑制相互作用，因此SHP2可在“开放”活性形式与“封闭”无活性形式之间切换。在双酪氨酰磷酸化肽与N-SH2结构域结合并且SHP2采用“开放”构象时会释放这种自然发生的自抑制，从而导致酶的活化和PTP结构域的暴露，以进行底物识别和催化。
PTPN11突变已经与包含癌症在内的若干种人类疾病相关联。胚胎PTPN11突变与如努南综合征(Noonan Syndrome)和豹皮综合征(Leopard Syndrome)等发育障碍相关，而体细胞突变则出现在如JMML等若干种类型的血液恶性肿瘤中并且在实体瘤中更为罕见。
SHP2是受体酪氨酸激酶(例如，EGFR、ALK、PDGFR)下游信号传导所必需的，并且在调节许多细胞过程，如响应于生长因子和细胞因子刺激的增殖方面发挥积极作用。先前的研究已经示出，SHP2作用于Ras的上游并且是MAPK通路完全、持续活化所必需的。RTK失调通常会导致宽范围的癌症，这使得SHP2成为RTK活化癌症中的有价值的靶标。据报告，SHP2还通过介导免疫检查点通路(例如，PD-1)在调节免疫应答方面发挥作用，因为基于免疫受体酪氨酸的抑制性基序(ITIM)与SHP2的SH2结构域结合以介导负信号。已经报告，一些SHP2抑制剂化合物对体外癌细胞的增殖和小鼠异种移植模型中的肿瘤体积的增加具有抑制作用(《自然(Nature)》(2016)535:148-152)。
本发明描述了一系列选择性地抑制SHP2并且具有抗癌活性的新型化合物。
发明内容
一方面，本发明提供了一种式(I)化合物：
Figure BDA0003499997860000021
或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐，其中：
R1是氢或羟基；
R2和R3独立地选自氢、卤素、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基和-CN；
X是O或CR4R5；
R4和R5独立地选自氢、卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基和卤代C1-4烷基；
R6和R7是氢、C1-4烷氧基或卤素(例如，氯或氟)，或者R6和R7接合以形成任选地被一个或多个(例如，1个、2个或3个)R10基团取代的环A；
环A是以下中的任一个：
(i)五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(ii)六元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(iii)六元非芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子；
R8选自卤代C1-4烷基(例如，-CF3)、-CH3和卤素(例如，氯或氟)；
R9选自氢、C1-4烷基(例如，-CH3)、卤代C1-4烷基(例如，-CF3)和卤素(例如，氯)；
R10独立地选自：卤素；氰基；氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)；羟基；＝O(氧代)；C1-4烷基(例如，-CH3、-CH(CH3)2或-CH2CH3)；卤代C1-4烷基(例如，-CHF2)；C1-4烷氧基(例如，-OCH3、-OCH2CH3和-OCH(CH3)2)；羟基C1-4烷基(例如，-CH2C(CH3)2OH、-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)；C1-4烷氧基C1-4亚烷基(例如，-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3)；C1-4烷基砜(例如，-SO2CH3)；氨基；单C1-4烷基氨基；二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)；氨基C1-4亚烷基(例如，-CH2NH2)；-C1-4亚烷基-C(＝O)NH(2-q)(C1-6烷基)q；-C0-4亚烷基-NHC(＝O)C1-6烷基；磺酰胺C0-4亚烷基(例如，-SO2NRx 2或-CH2SO2NRx 2，其中Rx独立地选自H和C1-6烷基)；3到6元环烷基；含有选自O、N或S的1个、2个、3个或4个杂原子的任选地经取代的五或六元不饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基；被3到6元环烷基取代的C1-4烷基；被含有选自O、N或S的1个、2个、3个或4个杂原子的任选地经取代的五或六元不饱和杂环基团取代的C1-4烷基，其中任选的取代基选自C1-4烷基；被含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四或六元饱和杂环基团取代的C1-4烷基，其中任选的取代基选自C1-4烷基；以及含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四或六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基；并且
q选自0、1和2。
在本发明的另外的方面，提供了一种用于预防或治疗如本文所述的疾病或病状的式(I)化合物、用于预防或治疗如本文所述的疾病或病状的方法、包括式(I)化合物的药物组合物以及用于合成式(I)化合物的方法，所述用于预防或治疗如本文所述的疾病或病状的方法包括向患者施用式(I)化合物。
定义
除非上下文另有说明，否则本文件所有部分(包含本发明的用途、方法和其它方面)中对式(I)的提及包含对如本文所定义的所有其它子式、子组、实施例和实例的提及。
“效力”是药物活性的度量，以产生给定强度的效果所需的量来表示。高效药物会在低浓度下诱发较大应答。效力与亲和力和功效成比例。亲和力是药物与受体结合的能力。功效是受体占用与在分子、细胞、组织或系统水平启动反应的能力之间的关系。
术语“抑制剂”是指酶抑制剂，其是一种可阻断或抑制由SHP2介导的生物应答的配体或药物。抑制剂通过与酶上的活性位点或变构位点结合来介导所述抑制剂的作用，或者抑制剂可以在通常不参与对酶的活性的生物调节的独特结合位点处相互作用。抑制可以直接或间接引起，并且可以通过任何机制和在任何生理水平介导。因此，由配体或药物进行的抑制本身可能会在不同情况下以在功能上有所不同的方式表现出来。抑制活性可以是可逆的或不可逆的，这取决于抑制剂-酶复合物的寿命，这进而取决于抑制剂-酶结合的性质。
如本文所用，术语“介导的”，如例如与如本文所述的SHP2结合使用(并且例如应用于各种生理过程、疾病、状态、病状、疗法、治疗或干预)，旨在限制性地操作，使得所述术语所应用于的各种过程、疾病、状态、病状、治疗和干预是蛋白质发挥生物作用的那些过程、疾病、状态、病状、治疗和干预。在所述术语应用于疾病、状态或病状的情况下，蛋白质所发挥的生物作用可以是直接的或间接的，并且对于疾病、状态或病状的症状(或所述疾病、所述状态或所述病状的病因或进展)的表现来说可以是必要的和/或充分的。因此，蛋白质功能(并且具体地，功能的异常水平，例如过表达或表达不足)不一定是疾病、状态或病状的近端病因：而是，经考虑，介导的疾病、状态或病状包含具有多因素病因和复杂进展的那些疾病、状态或病状，所讨论的蛋白质仅部分参与其中。在所述术语应用于治疗、预防或干预的情况下，蛋白质所发挥的作用可以是直接的或间接的，并且对于治疗、预防或干预结果的操作来说可以是必要的和/或充分的。因此，由蛋白质介导的疾病状态或病状包含对任何特定癌症药物或治疗的抗性的发展。
如本文在治疗病状，即状态、病症或疾病的上下文中所使用的术语“治疗”通常涉及无论是针对人还是针对动物(例如，在兽医应用中)的治疗和疗法，其中一些期望的治疗效果是例如对病状的进展的抑制得以实现并且包含进展速率降低、进展速率停止、病状改善、正在治疗的至少一种与病状相关或由病状引起的症状减轻或缓解以及病状治愈。例如，治疗可以是减轻病症的一种或若干种症状或完全根除病症。
如本文在治疗病状，即状态、病症或疾病的上下文中所使用的术语“预防”(即，使用化合物作为预防措施)通常涉及无论是针对人还是针对动物(例如，在兽医应用)的预防(prophylaxis或prevention)，其中一些期望的预防效果得以实现，例如预防疾病的发生或抵御疾病。预防包含完全和绝对阻断病症的所有症状持续无限的时间段、仅仅减缓疾病的一种或若干种症状的发作或降低疾病发生的可能性。
对如癌症等疾病状态或病状的预防或治疗的提及包含在其范围内缓解或降低例如癌症的发病率。
相对于单个的化合物/药剂在单独施用时的治疗效果，本发明的组合可以产生治疗有效的效果。
术语“有效”包含有利效果，如累加性、协同作用、副作用减少、毒性降低、疾病进展时间增加、存活时间增加、一种药剂对另一种药剂的敏化或复敏或应答率提高。有利地，有效的效果可以允许向患者施用较低剂量的每种或任一种组分，由此降低化学疗法的毒性，同时产生和/或维持相同的治疗效果。本发明上下文中的“协同”效应是指由组合产生的治疗效果大于组合中的药剂在单独提供时的治疗效果的总和。本发明的上下文中的“累加”效应是指由组合产生的治疗效果大于组合中的药剂中的任何药剂在单独提供时的治疗效果。如本文所用，术语“应答率”在实体瘤的情况下是指在给定时间点，例如12周时，肿瘤的大小减小的程度。因此，例如，50％的应答率意指肿瘤大小减小50％。本文对“临床应答”的提及是指50％或更高的应答率。“部分响应”在本文中被定义为小于50％的应答率。
如本文所用，术语“组合”，如应用于两种或更多种化合物和/或药剂，旨在定义其中两种或更多种药剂结合的材料。此上下文中的术语“组合(combined)”和“组合(combining)”应相应地进行解释。
组合中的两种或更多种化合物/药剂的结合可以是物理的或非物理的。物理结合的组合的化合物/药剂的实例包含：
·包括混合(例如在相同单位剂量内)的两种或更多种化合物/药剂的组合物(例如，单一调配物)；
·包括其中两种或更多种化合物/药剂化学/物理化学地连接(例如，通过交联、分子团聚或与共同媒剂部分结合)的材料的组合物；
·包括其中两种或更多种化合物/药剂化学/物理化学地共包装(例如，安置在脂质囊泡、颗粒(例如，微粒或纳米颗粒)或乳液液滴之上或之内)的材料的组合物；
·其中两种或多种化合物/药剂共包装或共存在(例如，作为单位剂量阵列的一部分)的药物试剂盒、药物包或患者包；
非物理结合的组合的化合物/药剂的实例包含：
·包括两种或更多种化合物/药剂中的至少一种化合物/药剂以及针对所述至少一种化合物临时结合以形成两种或更多种化合物/药剂的物理结合的说明的材料(例如，非单一调配物)；
·包括两种或更多种化合物/药剂中的至少一种化合物/药剂以及针对与两种或更多种化合物/药剂的组合疗法的说明的材料(例如，非单一调配物)；
·包括两种或多种化合物/药剂中的至少一种化合物/药剂以及针对向患者群体施用的说明的材料，其中两种或多种化合物/药剂中的其它化合物/药剂已经(或正在)施用；
·包括两种或更多种化合物/药剂中的量或形式特别适用于与两种或多种化合物/药剂中的其它化合物/药剂组合使用的至少一种化合物/药剂的材料。
如本文所用，术语“组合疗法”旨在定义包括使用两种或更多种化合物/药剂的组合(如上文所定义)的疗法。因此，在本申请中对“组合疗法”、“组合”和化合物/药剂“组合”使用的提及可以指化合物/药剂作为同一总体治疗方案的一部分施用。因此，两种或更多种化合物/药剂中的每种化合物/药剂的剂量学可以不同：每种化合物/药剂可以同时或在不同时间施用。因此，应当了解，组合中的化合物/药剂可以在同一药物调配物中(即，一起)或在不同的药物调配物中(即，单独)依次施用(例如，之前或之后)或同时施用。同时在同一调配物是作为单一调配物，而同时在不同的药物调配物中是非单一的。关于施用途径，组合疗法中的两种或更多种化合物/药剂中的每种化合物/药剂的剂量学也可以有所不同。
如本文所用，术语“药物试剂盒”定义了一个或多个单位剂量的阵列的药物组合物以及给药装置(例如，测量装置)和/或递送装置(例如，吸入器或注射器)，所述药物组合物和所述给药装置和/或递送装置任选地全部包含在共同的外部包装内。在包括两种或更多种化合物/药剂的组合的药物试剂盒中，单个的化合物/药剂可以是单一或非单一的调配物。泡罩包内可以含有单位剂量。药物试剂盒可以任选地进一步包括使用说明。
如本文所用，术语“药物包”定义了一个或多个单位剂量的阵列的药物组合物，任选地包含在共同的外部包装内。在包括两种或更多种化合物/药剂的组合的药物包中，单个的化合物/药剂可以是单一或非单一的调配物。泡罩包内可以含有单位剂量。药物包可以任选地进一步包括使用说明。
如本文所用，术语“任选地经取代的”是指可以是未经取代的或可以被如本文所定义的取代基取代的基团。
如本文所用，前缀“Cx-y”(其中x和y是整数)是指给定基团中的碳原子的数量。因此，C1-6烷基含有1到6个碳原子，C3-6环烷基含有3到6个碳原子，C1-4烷氧基含有1到4个碳原子，并且以此类推。
如本文所用，术语“氨基”是指基团-NH2。
如本文所用，术语“卤代”或“卤素”是指氟、氯、溴或碘，具体地，氟或氯。
化合物中的每个或每一个氢(如烷基中的氢或被称为氢的位置)包含氢的所有同位素，具体地1H和2H(氘)。
如本文所用，术语“氧代”是指基团＝O。
如本文所用，术语“C1-4烷基”，作为基团或基团的一部分，分别是指含有1到4个碳原子的直链或支链饱和烃基。此类基团的实例包含甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等。
如本文所用，术语“C2-4烯基”或“C2-6烯基”，作为基团或基团的一部分，分别是指含有2到4个或2到6个碳原子并且含有碳碳双键的直链或支链烃基。此类基团的实例包含C3-4烯基或C3-6烯基，如乙烯基(ethenyl/vinyl)、1-丙烯基、2-丙烯基(烯丙基)、异丙烯基、丁烯基、丁-1,4-二烯基、戊烯基和己烯基。
如本文所用，术语“C2-4炔基”或“C2-6炔基”，作为基团或基团的一部分，分别是指具有2到4个或2到6个碳原子并且含有碳碳三键的直链或支链烃基。此类基团的实例包含C3-4炔基或C3-6炔基，如乙炔基和2丙炔基(炔丙基)。
如本文所用，术语“C1-4烷氧基”，作为基团或作为基团的一部分，是指-O-C1-4烷基，其中C1-4烷基如本文所定义。此类基团的实例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等。
如本文所用，术语“C3-6环烷基”是指由3到6个碳原子构成的饱和单环烃环。此类基团的实例包含环丙基、环丁基、环戊基或环己基等。
如本文所用，术语“C3-6环烯基”是指具有一个或多个(通常为一个)碳碳双键的由3到6个碳原子构成的部分饱和单环烃环。此类基团的实例包含环戊烯基、环己烯基和环己二烯基。
如本文所用，术语“羟基C1-4烷基”，作为基团或基团的一部分，是指如本文所定义的其中一个或多于一个(例如，1个、2个或3个)氢原子被羟基替换的C1-4烷基。因此，术语“羟基C1-4烷基”包含单羟基C1-4烷基和多羟基C1-4烷基。可以有一个、两个、三个或更多个氢原子被羟基替换，因此羟基C1-4烷基可以具有一个、两个、三个或更多个羟基。此类基团的实例包含羟甲基、羟乙基、羟丙基等。
如本文所用，术语“卤代C1-4烷基”，作为基团或基团的一部分，是指如本文所定义的其中一个或多于一个(例如，1个、2个或3个)氢原子被卤素替换的C1-4烷基。因此，术语“卤代C1-4烷基”包含单卤代C1-4烷基和多卤代C1-4烷基。可以有一个、两个、三个或更多个氢原子被卤素替换，因此卤代C1-4烷基可以具有一个、两个、三个或更多个卤素。此类基团的实例包含氟乙基、氟甲基、二氟甲基、三氟甲基或三氟乙基等。
如本文所用，术语“卤代C1-4烷氧基”，作为基团或基团的一部分，是指如本文所定义的其中一个或多于一个(例如，1个、2个或3个)氢原子被卤素替换的-O-C1-4烷基。因此，术语“卤代C1-4烷氧基”包含单卤代C1-4烷氧基和多卤代C1-4烷氧基。可以有一个、两个、三个或更多个氢原子被卤素替换，因此卤代C1-4烷氧基可以具有一个、两个、三个或更多个卤素。此类基团的实例包含氟乙氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基等。
除非上下文另有说明，否则如本文所用的术语“杂环基”应包含芳香族系统和非芳香族环系统两者。因此，例如，术语“杂环基”在其范围内包含芳香族、非芳香族、不饱和的、部分饱和的和饱和的杂环基环系统。通常，除非上下文另有说明，否则此类基团可以是单环或双环的(包含稠合、螺环和桥接的双环基团)并且可以含有例如3到12个环成员，更通常为5到10个环成员。对4到7个环成员的提及包含环中的4个、5个、6个或7个原子，并且对4到6个环成员的提及包含环中的4个、5个或6个原子。单环基团的实例是含有3个、4个、5个、6个、7个和8个环成员，更通常为3到7个或4到7个，并且优选地5个、6个或7个环成员，更优选地5个或6个环成员的基团。双环基团的实例是包含8个、9个、10个、11个和12个环成员，并且更通常为9个或10个环成员的那些双环基团。杂环基可以是具有5到12个环成员，更通常为5到10个环成员的杂芳基。在本文提及杂环基的情况下，除非上下文另有说明，否则杂环基环可以任选地被一个或多个(例如，1个、2个、3个或4个，具体地一个或两个)如本文所定义的取代基取代，即，可以是未经取代的或经取代的。
杂环基可以是例如五元或六元单环或由稠合的五元环和六元环或两个稠合的六元环或两个稠合的五元环形成的双环结构。每个环可以含有至多五个具体地选自氮、硫和氧以及氮或硫的氧化形式的杂原子。具体地，杂环基环将含有至多4个杂原子，更具体地至多3个杂原子，更通常为至多2个，例如单个杂原子。在一个实施例中，杂环基环将含有一个或两个选自N、O、S和N或S的氧化形式的杂原子。在一实施例中，杂环基环含有至少一个环氮原子。杂环基环中的氮原子可以是碱性的，如在咪唑或吡啶的情况下，或基本上非碱性的，如在吲哚或吡咯氮的情况下。通常，存在于杂环基中的碱性氮原子数量，包含环的任何氨基取代基在内，将小于五个。
杂环基可以通过碳原子或杂原子(例如，氮)连接。同样，杂环基可以在碳原子上或在杂原子(例如，氮)上被取代。
五元芳香族杂环基的实例包含但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、呋喃基、噁唑基、噁二唑基、噁三唑基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、异噻唑基、吡唑基、三唑基和四唑基。
六元芳香族杂环基团的实例包含但不限于吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基和三嗪基。
术语“杂芳基”在本文中用于表示具有芳香族特征的杂环基。术语“杂芳基”涵盖多环(例如，双环)环系统，其中一个或多个环是非芳香族的，条件是至少一个环是芳香族的。在此类多环系统中，基团可以通过芳香族环或通过非芳香族环连接。
杂芳基的实例是含有五到十二个环成员，更通常为五到十个环成员的单环和双环基团。
五元杂芳基的实例包含但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、呋咱基、噁唑基、噁二唑基、噁三唑基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、异噻唑基、吡唑基、三唑基和四唑基。
六元杂芳基的实例包含但不限于吡啶、吡嗪、哒嗪、嘧啶和三嗪。
双环杂芳基可以是例如选自以下的基团：
a)含有1个、2个或3个环杂原子的与5或6元环稠合的苯环；
b)含有0个、1个、2个或3个环杂原子的与5或6元环稠合的吡啶环；
c)含有0个、1个或2个环杂原子的与5或6元环稠合的嘧啶环；
d)含有0个、1个、2个或3个环杂原子的与5或6元环稠合的吡咯环；
e)含有0个、1个或2个环杂原子的与5或6元环稠合的吡唑环；
f)含有0个、1个或2个环杂原子的与5或6元环稠合的咪唑环；
g)含有0个、1个或2个环杂原子的与5或6元环稠合的噁唑环；
h)含有0个、1个或2个环杂原子的与5或6元环稠合的异噁唑环；
i)含有0个、1个或2个环杂原子的与5或6元环稠合的噻唑环；
j)含有0个、1个或2个环杂原子的与5或6元环稠合的异噻唑环；
k)含有0个、1个、2个或3个环杂原子的与5或6元环稠合的噻吩环；
l)含有0个、1个、2个或3个环杂原子的与5或6元环稠合的呋喃环；
m)含有1个、2个或3个环杂原子的与5或6元环稠合的环己基环；和
n)含有1个、2个或3个环杂原子的与5或6元环稠合的环戊基环。
含有一个五元环与另一个五元环稠合的双环杂芳基的具体实例包含但不限于咪唑并噻唑(例如，咪唑并[2,1-b]噻唑)和咪唑并咪唑(例如，咪唑并[1,2-a]咪唑)。
含有六元环与五元环稠合的双环杂芳基的具体实例包含但不限于苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、异苯并噁唑基、苯丙异噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、异苯并呋喃基、吲哚基、异吲哚基、吲嗪基、吲哚啉基、异吲哚啉基、嘌呤基(例如，腺嘌呤基、鸟嘌呤基)、吲唑基、吡唑并嘧啶基(例如，吡唑并[1,5-a]嘧啶)、三唑并嘧啶基(例如，[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶基)、苯并间二氧杂环戊烯基、咪唑并吡啶基和吡唑并吡啶基(例如，吡唑并[1,5-a]吡啶基)。
含有两个稠合的六元环的双环杂芳基的具体实例包含但不限于喹啉基、异喹啉基、色满基、硫色满基、异色满基、色烯基、异色烯基、苯并二噁烷基、喹嗪基、苯并噁嗪基、吡啶并吡啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、酞嗪基、萘啶基和蝶啶基。
含有芳香族环和非芳香族环的多环杂芳基的实例包含四氢异喹啉基、四氢喹啉基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并呋喃基、2,3-二氢-苯并[1,4]二噁英基、苯并[1,3]二噁英基、4,5,6,7-四氢苯并呋喃基、四氢三唑吡嗪基(例如，5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪基)、色满基、硫色满基、异色满基、色烯基、异色烯基、苯并二噁烷基、苯并噁嗪基、苯并二氮杂卓基和吲哚啉基。
含氮杂芳基环必须含有至少一个环氮原子。含氮杂芳基环可以是N-连接的或C-连接的。另外，每个环可以含有至多约四个具体地选自氮、硫和氧的其它杂原子。具体地，杂芳基环将含有至多3个杂原子，例如1个、2个或3个，更通常为至多2个氮，例如单个氮。杂芳基环中的氮原子可以是碱性的，如在咪唑或吡啶的情况下，或基本上非碱性的，如在吲哚或吡咯氮的情况下。通常，存在于杂芳基中的碱性氮原子数量，包含环的任何氨基取代基在内，将小于五个。
含氮杂芳基的实例包含但不限于单环基团，如吡啶基、吡咯基、咪唑基、噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、噁三唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、呋喃基、吡唑基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三嗪基、三唑基(例如，1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基)、四唑基，以及双环基团，如喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基和苯并异噻唑基、吲哚基、3H-吲哚基、异吲哚基、吲嗪基、异吲哚啉基、嘌呤基(例如，腺嘌呤[6-氨基嘌呤]、鸟嘌呤[2-氨基-6-羟基嘌呤])、吲唑基、喹嗪基、苯并噁嗪基、苯并二氮杂卓基、吡啶并吡啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、酞嗪基、萘啶基和蝶啶基。
含有芳香族环和非芳香族环的含氮多环杂芳基的实例包含四氢异喹啉基、四氢喹啉基和二氢吲哚基。
除非上下文另有说明，否则术语“非芳香族”涵盖不具有芳香族特征的不饱和环系统、部分饱和的和饱和的杂环基环系统。术语“不饱和”和“部分饱和”是指其中环结构含有共享多于一个价键的环，即环含有至少一个多键，例如C＝C、C≡C或N＝C键。术语“饱和”是指其中环原子之间没有多键的环。饱和杂环基包含哌啶基、吗啉基和硫代吗啉基。部分饱和杂环基包含吡唑啉基，例如吡唑啉-2-基和吡唑啉-3-基。
非芳香族杂环基的实例是具有3到12个环成员，更通常为5到10个环成员的基团。此类基团可以是单环的或双环的，例如具有3到7个环成员，具体地4到6个环成员。具体地，此类基团具有1到5个或1到4个杂原子环成员(更通常为1个、2个或3个杂原子环成员)，通常选自氮、氧和硫以及其氧化形式。杂环基可以含有例如环醚部分(例如，如在四氢呋喃和二噁烷中)、环硫醚部分(例如，如在四氢噻吩和二噻烷中)、环胺部分(例如，如在吡咯烷中)、环酰胺部分(例如，如在吡咯烷酮中)、环硫代酰胺、环硫酯、环脲(例如，如在咪唑啉-2-酮中)、环酯部分(例如，如在丁内酯中)、环砜(例如，如在环丁砜和环丁砜中)、环亚砜、环磺酰胺和其组合(例如，硫代吗啉)。
具体实例包含吗啉基、哌啶基(例如，哌啶-1-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基和哌啶-4-基)、哌啶酮基、吡咯烷基(例如，吡咯烷-1-基、吡咯烷-2-基和吡咯烷-3-基)、吡咯烷酮基、氮杂环丁烷基、吡喃基(2H-吡喃或4H-吡喃)、二氢噻吩基、二氢吡喃基、二氢呋喃基、二氢噻唑基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、二噁烷基、噁烷基(也被称为四氢吡喃基)(例如，噁烷-4-基)、咪唑啉基、咪唑啉酮基、噁唑啉基、噻唑啉基、吡唑啉-2-基、吡唑烷基、哌嗪酮基、哌嗪基和N-烷基哌嗪，如N-甲基哌嗪基。通常，典型的非芳香族杂环基包含饱和基团，如哌啶基、吡咯烷基、氮杂环丁烷基、吗啉基、哌嗪基和N-烷基哌嗪，N-甲基哌嗪基。
在含氮非芳香族杂环基环中，所述环必须含有至少一个环氮原子。含氮杂环基环可以是N-连接的或C-连接的。杂环基可以含有例如环胺部分(例如，如在吡咯烷基中)、环酰胺(如吡咯烷基、哌啶酮基或己内酰胺基)、环磺酰胺(如异噻唑烷基1,1-二氧化物、[1,2]噻嗪基1,1-二氧化物或[1,2]硫氮杂环庚烷基1,1-二氧化物)和其组合。
含氮非芳香族杂环基的具体实例包含氮丙啶基、吗啉基、硫代吗啉基、哌啶基(例如，哌啶-1-基、哌啶-2基、哌啶-3-基和哌啶-4-基)、吡咯烷基(例如，吡咯烷-1-基、吡咯烷-2-基和吡咯烷-3-基)、吡咯烷酮基、二氢噻唑基、咪唑啉基、咪唑啉酮基、噁唑啉基、噻唑啉基、6H-1,2,5-噻二嗪基、吡唑啉-2-基、吡唑啉-3-基、吡唑烷基、哌嗪基和N-烷基哌嗪，如N-甲基哌嗪基。
杂环基可以是多环稠合环系统或桥接环系统，如双环烷烃、三环烷烃的氧杂类似物和氮杂类似物(例如，金刚烷和氧杂金刚烷)。对于稠合环系统和桥接环系统之间的区别的解释，参见《高等有机化学(Advanced Organic Chemistry)》,Jerry March,第4版，威利国际科学出版公司(Wiley Interscience),第131-133页,1992。
然而，在环状基团或环的定义中，陈述了环状基团含有一定数量的杂原子环成员，例如，如在短语“含有0个、1个或2个氮环成员的5或6元环”中，这应被认为意指除了所指定的一定数量的杂原子环成员外，其余的环成员是碳原子。
式(I)化合物可以含有可以通过一个或多个键连接到分子的其余部分的饱和环状基团。当环状基团通过两个或更多个键连接到分子的其余部分时，这些键(或这些键中的两个键)可以与环的同一原子(通常为碳原子)或环的不同原子形成。如果键与环的同一原子形成，则会产生其中单个原子(通常为季碳)与两个基团结合的环状基团。换句话说，当式(I)化合物包含环状基团时，所述基团可以通过键与分子的其余部分连接，或者所述环状基团和分子的其余部分可以具有共同的原子，例如螺化合物。
杂环基可以各自为未经取代的或被一个或多个(例如，1个、2个或3个)取代基取代。例如，杂环基或碳环基可以是未经取代的或被1个、2个、3个或4个取代基取代，并且具体地，所述杂环基或所述碳环基是未经取代的或具有1个、2个或3个如本文所定义的取代基。在环状基团是饱和的情况下，可以有2个取代基连接到同一碳(其中所述取代基是相同的所谓的孪位或偕二取代)。
只有在取代基的组合产生稳定或化学上可行的化合物(即，在40℃或更低温度下保持至少一周时基本不改变的化合物)时，才允许诸如此类组合。
具体地，构成本发明的化合物的各种官能团和取代基被选择成使得本发明的化合物的分子量不超过1000。更通常，化合物的分子量将小于750，例如小于700、或小于650、或小于600或小于550。更具体地，分子量小于525并且例如为500或更小。
具体实施方式
本发明提供了式(I)化合物：
Figure BDA0003499997860000121
或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐，其中X、R1、R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义。
X
X是O或CR4R5。
当X是CR4R5时，R4和R5独立地选自氢、卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基和卤代C1-4烷基。
在一个实施例中，R4和R5独立地选自氢、卤素、C1-4烷基和卤代C1-4烷基(例如，卤代C1烷基)。
在一个实施例中，X是O，并且式(I)化合物是式(Ia)化合物：
Figure BDA0003499997860000131
在一个实施例中，X是CR4R5，并且式(I)化合物是式(Ib)化合物：
Figure BDA0003499997860000132
其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9如本文所定义。
具体地，X是O，并且式(I)化合物是式(Ia)化合物。
在一个实施例中，X是CR4R5，并且R4和R5独立地选自氢、卤素(例如，氟、氯、溴或碘，具体地氟)和卤代C1-4烷基(例如，单卤代甲基、二卤代甲基和三卤代甲基，其中卤代选自氟、氯、溴或碘)。
在一个实施例中，X是CR4R5，并且R4和R5独立地选自氢、氟和三氟甲基。
在一个实施例中，X是CR4R5，并且R4和R5是氢。
在一个实施例中，X是CR4R5，并且R4和R5是卤素(例如，氟)。
在一个实施例中，X是CR4R5，并且R4是氢并且R5选自卤素(例如，氟、氯、溴或碘，具体地氟)和卤代甲基(例如，单卤代甲基、二卤代甲基和三卤代甲基，其中卤代选自氟、氯、溴或碘)。
在一个实施例中，X是CR4R5，并且R4是氢并且R5是氟或三氟甲基。
在一个实施例中，X是CR4R5，并且R4是氢并且R5是氟。
在一个实施例中，X是CR4R5，并且R4是氢并且R5是三氟甲基。
在一个实施例中，X是CR4R5，并且R4是氢并且R5选自卤素(例如，氟、氯、溴或碘，具体地氟)和卤代甲基(例如，单卤代甲基、二卤代甲基和三卤代甲基，其中卤代选自氟、氯、溴或碘)，并且式(Ib)化合物是式(Ib')化合物：
Figure BDA0003499997860000141
其中R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8和R9是如本文所定义。
在式(Ib')化合物的一个实施例中，R5是氟或三氟甲基，具体地氟。
在一个实施例中，X是CR4R5，并且R4是氢并且R5选自卤素(例如，氟、氯、溴或碘，具体地氟)和卤代甲基(例如，单卤代甲基、二卤代甲基和三卤代甲基，其中卤代选自氟、氯、溴或碘)，并且式(Ib)化合物是式(Ib")化合物：
Figure BDA0003499997860000142
其中R1、R2、R3、R5、R6、R7、R8和R9是如本文所定义。
在式(Ib")化合物的一个实施例中，R5是氟或三氟甲基，具体地三氟甲基。
R1
R1是氢或羟基。
在一个实施例中，R1是氢，并且式(I)化合物是式(II)化合物：
Figure BDA0003499997860000151
其中X、R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义。
在一个实施例中，R1羟基，并且式(I)化合物是式(III)化合物：
Figure BDA0003499997860000152
其中X、R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义。
具体地，R1羟基，并且式(I)化合物是式(III)化合物。
具体地，R1羟基，并且X是O，并且式(III)化合物是式(III')化合物：
Figure BDA0003499997860000153
其中R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义。
R2和R3
R2和R3独立地选自氢、卤素、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基和-CN。
在一个实施例中，R2和R3独立地选自氢、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基和-CN。在一个实施例中，R2和R3是氢。
在一个实施例中，R2是氢，并且R3选自C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基和-CN。
在一个实施例中，R2是氢，并且R3选自C1-4烷基、卤代C1-4烷基和羟基C1-4烷基。
在一个实施例中，R2是氢，并且R3是C1-4烷基，例如-CH3。
在一个实施例中，R2是氢，并且R3是卤素，例如-F。
在一个实施例中，R2是卤素，例如-F，并且R3是氢。
在一个实施例中，R2和R3是卤素，例如-F。
在一个实施例中，R2是氢，并且R3选自C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基和-CN，并且式(I)化合物是式(IV)化合物：
Figure BDA0003499997860000161
其中X、R1、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义。
在一个实施例中，式(IV)化合物是式(IV')化合物：
Figure BDA0003499997860000162
其中X、R1、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义。
在一个实施例中，式(IV)化合物是式(IV")化合物：
Figure BDA0003499997860000171
其中X、R1、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义。
在式(IV)、(IV')和(IV")化合物的一个实施例中，R3选自C1-4烷基、卤代C1-4烷基和羟基C1-4烷基。
在式(IV)、(IV')和(IV")化合物的一个实施例中，R3选自C1-4烷基，例如-CH3。
具体地，式(IV)化合物是式(IV")化合物，R3选自C1-4烷基，例如-CH3。
在式(IV)、(IV')和(IV")化合物的一个实施例中，R3选自C1-4烷基，例如-CH3，并且X是O。
具体地，式(IV)化合物是式(IV")化合物，R3选自C1-4烷基，例如-CH3，并且X是O。
R8
R8选自卤代C1-4烷基(例如，-CF3)、-CH3和卤素(例如，氯或氟)。
在一个实施例中，R8选自C1-4烷基(例如，-CH3)、卤代C1-4烷基(例如，-CF3)和氯。
在一个实施例中，R8选自-CH3、氯和氟。
在一个实施例中，R8是卤素(例如，氟、氯、溴或碘，例如氟或氯)，并且式(I)化合物是式(V)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000172
其中X、R1、R2、R3、R6、R7和R9如本文所定义的，并且R8是卤素，具体地其中R8是氯。
在一个实施例中，R8选自甲基、氯和氟。
在一个实施例中，R8选自氯和氟。
在一个实施例中，R8是甲基。
具体地，R8是氟。
具体地，R8是氯。
在式(V)化合物的一个实施例中，X是CR4R5。
具体地，在式(V)化合物的一个实施例中，X是O。
在式(V)化合物的一个实施例中，R1是氢。
具体地，在式(V)化合物的一个实施例中，R1是羟基。
具体地，在式(V)化合物的一个实施例中，X是O，并且R1是羟基。
R9
R9选自氢、C1-4烷基(例如，-CH3)、卤代C1-4烷基(例如，-CF3)和卤素(例如，氯)。
在一个实施例中，R9选自氢、-CH3、-CF3、氯和氟。
在一个实施例中，R9选自氢、-CH3、-CF3和氯。
具体地，R9是氢，并且式(I)化合物是式(VI)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000181
其中X、R1、R2、R3、R6、R7和R8如本文所定义。
在式(VI)化合物的一个实施例中，X是CR4R5。
具体地，在式(VI)化合物的一个实施例中，X是O。
在式(VI)化合物的一个实施例中，R1是氢。
具体地，在式(VI)化合物的一个实施例中，R1是羟基。
具体地，在式(VI)化合物的一个实施例中，R8是卤素，例如氯。
具体地，在式(VI)化合物的一个实施例中，X是O，R1是羟基，并且R8是氯。
R6和R7
R6和R7是氢、C1-4烷氧基或卤素(例如，氯或氟)，或者R6和R7接合以形成任选地被一个或多个(例如，1个、2个或3个)R10基团取代的环A。
在一个实施例中，R6和R7是氢或卤素(例如，氯或氟)，或者R6和R7接合以形成任选地被一个或多个(例如，1个、2个或3个)R10基团取代的环A；
环A是以下中的任一个：
(i)五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(ii)六元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(iii)六元非芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子；并且
R10独立地选自：卤素；氰基；氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)；羟基；＝O(氧代)；C1-4烷基(例如，-CH3、-CH(CH3)2或-CH2CH3)；卤代C1-4烷基(例如，-CHF2)；C1-4烷氧基(例如，-OCH3、-OCH2CH3和-OCH(CH3)2)；羟基C1-4烷基(例如，-CH2C(CH3)2OH、-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)；C1-4烷氧基C1-4亚烷基(例如，-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3)；C1-4烷基砜(例如，-SO2CH3)；氨基；单C1-4烷基氨基；二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)；氨基C1-4亚烷基(例如，-CH2NH2)；-C1-4亚烷基-C(＝O)NH(2-q)(C1-6烷基)q；-C0-4亚烷基-NHC(＝O)C1-6烷基；磺酰胺C0-4亚烷基(例如，-SO2NRx 2或-CH2SO2NRx 2，其中Rx独立地选自H和C1-6烷基)；3到6元环烷基；含有选自O、N或S的1个、2个、3个或4个杂原子的任选地经取代的五或六元不饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基；被3到6元环烷基取代的C1-4烷基；被含有选自O、N或S的1个、2个、3个或4个杂原子的任选地经取代的五或六元不饱和杂环基团取代的C1-4烷基，其中任选的取代基选自C1-4烷基；被含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四或六元饱和杂环基团取代的C1-4烷基，其中任选的取代基选自C1-4烷基；以及含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四或六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基；并且
q选自0、1和2。
在一个实施例中，R6和R7是氢、C1-4烷氧基或氟，或者R6和R7接合以形成任选地被一个或多个(例如，1个、2个或3个)R10基团取代的环A。
在一个实施例中，R6和R7是氢或氟，或者R6和R7接合以形成任选地被一个或多个(例如，1个、2个或3个)R10基团取代的环A；
环A是以下中的任一个：
(i)五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(ii)六元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(iii)六元非芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子；并且
R10独立地选自：卤素；氰基；氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)；羟基；＝O(氧代)；C1-4烷基(例如，-CH3、-CH(CH3)2或-CH2CH3)；卤代C1-4烷基(例如，-CHF2)；C1-4烷氧基(例如，-OCH3、-OCH2CH3和-OCH(CH3)2)；羟基C1-4烷基(例如，-CH2C(CH3)2OH、-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)；C1-4烷氧基C1-4亚烷基(例如，-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3)；C1-4烷基砜(例如，-SO2CH3)；氨基；单C1-4烷基氨基；二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)；氨基C1-4亚烷基(例如，-CH2NH2)；-C1-4亚烷基-C(＝O)NH(2-q)(C1-6烷基)q；-C0-4亚烷基-NHC(＝O)C1-6烷基；磺酰胺C0-4亚烷基(例如，-SO2NRx 2或-CH2SO2NRx 2，其中Rx独立地选自H和C1-6烷基)；3到6元环烷基；含有选自O、N或S的1个、2个、3个或4个杂原子的任选地经取代的五或六元不饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基；被3到6元环烷基取代的C1-4烷基；被含有选自O、N或S的1个、2个、3个或4个杂原子的任选地经取代的五或六元不饱和杂环基团取代的C1-4烷基，其中任选的取代基选自C1-4烷基；被含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四或六元饱和杂环基团取代的C1-4烷基，其中任选的取代基选自C1-4烷基；以及含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四或六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基；并且
q选自0、1和2。
在一个实施例中，R6和R7是氢或卤素(例如，氯或氟)。
在一个实施例中，R6和R7是氢、C1-4烷氧基或氟。
在一个实施例中，R6和R7是氢或C1-4烷氧基。
在一个实施例中，R6和R7是氢。
具体地，R7是氢，并且R6是卤素(例如，氯或氟)，并且式(I)化合物是式(VII)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000211
具体地，在式(VII)化合物的一个实施例中，R8是氟。
具体地，在式(VII)化合物的一个实施例中，R8是氯。
在式(VII)化合物的一个实施例中，X是CR4R5。
具体地，在式(VII)化合物的一个实施例中，X是O。
在式(VII)化合物的一个实施例中，R1是氢。
具体地，在式(VII)化合物的一个实施例中，R1是羟基。
具体地，在式(VII)化合物的一个实施例中，R8是卤素，例如氯或氟。
具体地，在式(VII)化合物的一个实施例中，R9是氢。
具体地，在式(VII)化合物的一个实施例中，X是O，R1是羟基，R9是氢，并且R8是氯或氟。
在一个实施例中，R6和R7接合以形成任选地被一个或多个(例如，1个、2个或3个)R10基团取代的环A；
其中环A是以下中的任一个：
(i)五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(ii)六元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(iii)六元非芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子。
在一个实施例中，环A是五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)或六元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子。
在一个实施例中，环A是吡唑基、噻唑基、吡嗪基和吡啶基。然后，此环与稠合的苯并部分分别形成吲唑基、苯并噻唑基、喹喔啉基或喹啉基。
在一个实施例中，环A是五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子。
在一个实施例中，环A是五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)或六元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子。
在一个实施例中，环A是五元含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和、O和S的一个或两个额外杂原子。
在一个实施例中，环A是五元含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个额外杂原子。
在一个实施例中，环A是五元含氮杂环，其中所述杂环任选地含有一个额外杂原子，所述一个额外杂原子是N或S。
在一个实施例中，环A是五元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子。
在一个实施例中，环A是五元含氮杂环，其中所述杂环含有一个额外杂原子，所述一个额外杂原子是N。
在一个实施例中，环A是五元芳香族含氮杂环，其中所述杂环含有一个额外杂原子，所述一个额外杂原子是N。
在一个实施例中，环A是五元含氮杂环，其中所述杂环含有一个额外杂原子，所述一个额外杂原子是S。
在一个实施例中，环A是五元芳香族含氮杂环，其中所述杂环含有一个额外杂原子，所述一个额外杂原子是S。
在一个实施例中，环A是吡咯基、咪唑基、噁唑基、噁二唑基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、异噻唑基、吡唑基和三唑基，例如其中环A是噻唑基或吡唑基。
在一个实施例中，环A是五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子，并且式(I)化合物是式(VIII)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000231
其中X、R1、R2、R3、R8、R9和R10如本文所定义的，并且5-Het是五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子。
在一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000232
选自表I中的以下选项，其中c是0、1、2或3：
表I
Figure BDA0003499997860000233
Figure BDA0003499997860000241
Figure BDA0003499997860000251
例如，部分
Figure BDA0003499997860000261
选自表I中的选项A、B、C、D、E、F、G、H、I、O、P和Q。
具体地，部分
Figure BDA0003499997860000262
选自表I中的选项C、D、E、F、G、H、I、O、P和Q。
具体地，部分
Figure BDA0003499997860000263
选自表I中的选项D、H、P和Q。在一个实施例中，部分选自D和H。
具体地，部分
Figure BDA0003499997860000264
选自：
Figure BDA0003499997860000265
其中c是0、1、2或3，例如
Figure BDA0003499997860000271
其中c是0、1、2或3。
具体地，部分
Figure BDA0003499997860000272
选自
Figure BDA0003499997860000273
具体地，式(VIII)化合物是式(VIIIa)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000274
其中X、R1、R2、R3、R8、R9和R10如本文所定义的，例如其中R10是C1-4烷基。
具体地，式(VIIIa)化合物是式(VIIIb)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000281
其中X、R1、R2、R3、R8和R9如本文所定义。
具体地，式(VIIIa)化合物是式(VIIIc)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000282
其中X、R1、R2、R3、R8和R9如本文所定义。
具体地，式(VIII)化合物是式(IX)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000283
其中X、R1、R2、R3、R8、R9和R10如本文所定义。
具体地，式(VIII)化合物是式(IXa)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000291
其中X、R1、R2、R3、R8和R9如本文所定义的，并且R10独立地选自C1-4烷基(例如，-CH3)和卤素(例如，氯)。具体地，当在氮或碳原子上时，R10独立地选自C1-4烷基(例如，-CH3)，并且当在碳原子上时，选自卤素(例如，氯)。
具体地，式(VIII)化合物是式(IXb)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000292
其中X、R1、R2和R3如本文所定义。
具体地，式(VIII)化合物是式(X)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000301
其中X、R1、R2、R8、R9和R10如本文所定义。
具体地，在式(VIII)、(VIIIa)、(VIIIb)、(VIIIc)、(IX)、(IXa)和(X)化合物的一个实施例中，R8是卤素，例如氯或氟。
具体地，在式(VIII)、(VIIIa)、(VIIIb)、(VIIIc)、(IX)、(IXa)和(X)化合物的一个实施例中，R8是氟。
具体地，在式(VIII)、(VIIIa)、(VIIIb)、(VIIIc)、(IX)、(IXa)和(X)化合物的一个实施例中，R8是氯。
在式(VIII)、(VIIIa)、(VIIIb)、(VIIIc)、(IX)、(IXa)和(X)化合物的一个实施例中，X是CR4R5。
具体地，在式(VIII)、(VIIIa)、(VIIIb)、(VIIIc)、(IX)、(IXa)和(X)化合物的一个实施例中，X是O。
在式(VIII)、(VIIIa)、(VIIIb)、(VIIIc)、(IX)、(IXa)和(X)化合物的一个实施例中，R1是氢。
具体地，在式(VIII)、(VIIIa)、(VIIIb)、(VIIIc)、(IX)、(IXa)和(X)化合物的一个实施例中，R1是羟基。
具体地，在式(VIII)、(VIIIa)、(VIIIb)、(VIIIc)、(IX)、(IXa)和(X)化合物的一个实施例中，R9是氢。
具体地，在式(VIII)、(VIIIa)、(VIIIb)、(VIIIc)、(IX)、(IXa)和(X)化合物的一个实施例中，X是O，R1是羟基，R9是氢，并且R8是氯或氟。
在一个实施例中，环A是以下中的任一个：
(i)六元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(ii)六元非芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子。
在一个实施例中，环A是六元芳香族含氮杂环，并且式(I)化合物是式(XI)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000311
其中X、R1、R2、R3、R8、R9和R10如本文所定义的，并且6-Het是以下任一个：
(i)六元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(iii)六元非芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子。
当环A是六元含氮环时，如果环是芳香族的，则环可以任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子。然而，如果六元含氮环是非芳香族的，则环可以任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子，即环可能不包含为O的另外的杂原子。
在一个实施例中，6-Het是六元含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子。
具体地，6-Het是六元含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N的一个或两个额外杂原子。
具体地，6-Het是六元含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N的一个额外杂原子。
具体地，6-Het是六元含氮杂环，其中所述杂环含有一个额外杂原子，所述一个额外杂原子是N。
在一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000321
选自表II中的以下选项，其中c是0、1、2或3：
表II
Figure BDA0003499997860000322
Figure BDA0003499997860000331
具体地，部分
Figure BDA0003499997860000332
选自表II中的选项D、E、G和H，更具体地选自D、E和H，例如D。
具体地，部分
Figure BDA0003499997860000333
选自：
Figure BDA0003499997860000334
其中c是0、1、2或3。
具体地，部分
Figure BDA0003499997860000341
是：
Figure BDA0003499997860000342
其中c是0、1、2或3。
具体地，部分
Figure BDA0003499997860000343
选自表II中的选项E和G，更具体地选项G。
具体地，部分
Figure BDA0003499997860000344
选自：
Figure BDA0003499997860000345
其中c是0、1、2或3。
具体地，部分
Figure BDA0003499997860000346
是：
Figure BDA0003499997860000351
其中c是0、1、2或3。
在一个实施例中，式(I)化合物是式(XII)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000352
其中X、R1、R2、R3、R8、R9和R10如本文所定义。
在一个实施例中，式(XII)化合物是式(XIIa)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000353
其中X、R1、R2、R3、R8和R9如本文所定义。
在一个实施例中，式(XII)化合物是式(XIIb)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000361
其中X、R1、R2、R3、R8、R9和R10如本文所定义。
在一个实施例中，式(XII)化合物是式(XIIc)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000362
其中X、R1、R2、R3、R8、R9和R10如本文所定义。
在式(XIIc)化合物的一个实施例中，R10是卤素、氰基、C1-4烷基(例如，-CH3、-CH(CH3)2或-CH2CH3)、卤代C1-4烷基(例如，-CHF2)、C1-4烷氧基(例如，-OCH3、-OCH2CH3和-OCH(CH3)2)、羟基C1-4烷基(例如，-CH2C(CH3)2OH、-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)、氨基、单C1-4烷基氨基、二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)、氨基C1-4亚烷基(例如，-CH2NH2)和含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四到六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基。
在式(XIIc)化合物的一个实施例中，R10是二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)、C1-4烷氧基(例如，-OCH3、-OCH2CH3和-OCH(CH3)2)、卤代C1-4烷基(例如，-CF3)和含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四到六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基。
在一个实施例中，环A包含与苯环相邻(即，直接键合)的氮原子，并且式(I)化合物是式(XIIIa)或(XIIIb)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐，即：
Figure BDA0003499997860000371
其中X、Q、R1、R2、R3、R8、R9和R10如本文所定义。
R10独立地选自：卤素；氰基；氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)；羟基；＝O(氧代)；C1-4烷基(例如，-CH3、-CH(CH3)2或-CH2CH3)；卤代C1-4烷基(例如，-CHF2)；C1-4烷氧基(例如，-OCH3、-OCH2CH3和-OCH(CH3)2)；羟基C1-4烷基(例如，-CH2C(CH3)2OH、-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)；C1-4烷氧基C1-4亚烷基(例如，-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3)；C1-4烷基砜(例如，-SO2CH3)；氨基；单C1-4烷基氨基；二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)；氨基C1-4亚烷基(例如，-CH2NH2)；-C1-4亚烷基-C(＝O)NH(2-q)(C1-6烷基)q；-C1-4亚烷基-NHC(＝O)C1-6烷基；磺酰胺C0-4亚烷基(例如，-SO2NRx 2或-CH2SO2NRx 2，其中Rx独立地选自H和C1-6烷基)；3到6元环烷基；含有选自O、N或S的1个、2个、3个或4个杂原子的任选地经取代的五或六元不饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基；被3到6元环烷基取代的C1-4烷基；被含有选自O、N或S的1个、2个、3个或4个杂原子的任选地经取代的五或六元不饱和杂环基团取代的C1-4烷基，其中任选的取代基选自C1-4烷基；被含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四或六元饱和杂环基团取代的C1-4烷基，其中任选的取代基选自C1-4烷基；以及含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四或六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基；并且
q选自0、1和2。
在一个实施例中，R10独立地选自卤素、氰基、氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)、羟基、＝O(氧代)、C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基(例如，-OCH3)、羟基C1-4烷基(例如，-CH2C(CH3)2OH、-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)、C1-4烷氧基C1-4亚甲基(例如，-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3)、C1-4烷基砜(例如，-SO2CH3)、氨基、单C1-4烷基氨基、二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)、氨基C1-4亚甲基(例如，-CH2NH2)、-C1-4亚甲基-C(＝O)NH(2-q)(C1-6烷基)q、-C1-4亚甲基-NHC(＝O)C1-6烷基、磺酰胺C0-4亚甲基(例如，-SO2NRx 2或-CH2SO2NRx 2，其中Rx独立地选自H和C1-6烷基)和含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四到六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基；并且
q选自0、1和2。
在一个实施例中，R10独立地选自卤素、氰基、氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)、羟基、＝O(氧代)、C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基(例如，-OCH3)、羟基C1-4烷基(例如，-CH2C(CH3)2OH、-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)、-C1-4亚甲基C1-4烷氧基(例如，-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3)、C1-4烷基砜(例如，-SO2CH3)、氨基、单C1-4烷基氨基、二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)、-C1-4亚甲基氨基(例如，-CH2NH2)、-C1-4亚甲基-C(＝O)NH(2-q)(C1-6烷基)q、-C1-4亚甲基-NHC(＝O)C1-6烷基、-C0-4亚甲基磺酰胺(例如，-SO2NRx 2或-CH2SO2NRx 2，其中Rx独立地选自H和C1-6烷基)和含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四到六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基。
在一个实施例中，存在两个取代基R10；一个R10是＝O(氧代)，并且一个R10独立地选自卤素、氰基、氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)、羟基、C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基(例如，-OCH3)、羟基C1-4烷基(例如，-CH2C(CH3)2OH、-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)、C1-4烷氧基C1-4亚甲基(例如，-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3)、C1-4烷基砜(例如，-SO2CH3)、氨基、单C1-4烷基氨基、二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)、氨基C1-4亚甲基(例如，-CH2NH2)、-C1-4亚甲基-C(＝O)NH(2-q)(C1-6烷基)q、-C1-4亚甲基-NHC(＝O)C1-6烷基、磺酰胺C0-4亚甲基(例如，-SO2NRx 2或-CH2SO2NRx 2，其中Rx独立地选自H和C1-6烷基)和含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四到六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基。
在一个实施例中，q是0或1。具体地，q是1。具体地，q是2。
在一个实施例中，不存在取代基或存在一个取代基R10。具体地，存在一个取代基R10。
具体地，存在两个取代基R10。具体地，不存在取代基R10。
在一个实施例中，R10独立地选自卤素、氰基、氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)、羟基、＝O(氧代)、C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基(例如，-OCH3)、羟基C1-4烷基(例如，-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)、二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)和C1-4烷氧基C1-4亚甲基(例如，-CH2-O-CH3)，例如其中R10独立地选自卤素、氰基、羟基、＝O(氧代)和C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)。
在一个实施例中，R10独立地选自卤素、氰基、氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)、羟基、＝O(氧代)、C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基(例如，-OCH3)、羟基C1-4烷基(例如，-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)和C1-4烷氧基C1-4亚甲基(例如，-CH2-O-CH3)，例如其中R10独立地选自卤素、氰基、羟基、＝O(氧代)和C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)。
在一个实施例中，R10独立地选自卤素、氰基、氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)、羟基、＝O(氧代)、C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基(例如，-OCH3)、羟基C1-4烷基(例如，-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)和C1-4烷氧基C1-4亚甲基(例如，-CH2-O-CH3)，例如其中R10独立地选自卤素、氰基、羟基、＝O(氧代)和C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)。
在一个实施例中，R10独立地选自卤素、氰基、羟基、＝O(氧代)和C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)，例如其中R10独立地选自羟基、＝O(氧代)和C1-4烷基(例如，-CH3)。
在一个实施例中，R10独立地选自卤素(例如，氯或氟)、＝O(氧代)、C1-4烷基(例如，-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2)、C1-4烷氧基(例如，-OCH3)和二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)，例如其中R10独立地选自卤素、＝O(氧代)和C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)。
在一个实施例中，R10独立地选自卤素(例如，氯)、氰基、氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)、C1-4烷氧基(例如，-OCH3、-OCH2CH3和-OCH(CH3)2)、＝O(氧代)、C1-4烷基(例如，-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2)、羟基C1-4烷基(例如，-CH2OH、-CH2CH2OH或-CH2C(CH3)2OH)、卤代C1-4烷基(例如，-CHF2)、二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)、C1-4烷氧基C1-4亚甲基(例如，-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3)、-C0-4亚甲基-C(＝O)NH(2-q)(C1-6烷基)q(例如，-CO-N(CH3)2、-CH2-CH2-CO-N(CH3)2、-CH2-CO-N(CH3)2、-CH2-CO-NH(C(CH3)3)或-CH2-CO-NH(CH3))、含有O或N的四或六元饱和杂环基团(例如，四氢呋喃基、吗啉代、氮杂环丁烷基或氧杂环丁烷基)和被含有选自O、N和S(例如，N或O)的1个、2个、3个或4个杂原子的任选地经取代的五或六元不饱和杂环基团(例如，五元杂环基团)取代的C1-4烷基(例如，C1烷基)，其中任选的取代基选自C1-4烷基(例如，-CH3)。
在一个实施例中，R10是卤素(例如，氯)、氰基、C1-4烷基(例如，-CH3、-CH(CH3)2或-CH2CH3)、卤代C1-4烷基(例如，-CHF2)、C1-4烷氧基(例如，-OCH3、-OCH2CH3或-OCH(CH3)2)、C1-4烷氧基C1-4亚甲基(例如，-CH2OCH3)、二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)或含有选自O或N的1个或2个杂原子的任选地经取代的(例如，未经取代的)四或六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基(例如，吗啉基或氮杂环丁烷基)。
在一个实施例中，R10是-C0-4亚甲基-C(＝O)NH(2-q)(C1-6烷基)q，其选自-C1-4亚甲基-C(＝O)NH(2-q)(C1-6烷基)q(例如，-CH2-CH2-CO-N(CH3)2、-CH2-CO-N(CH3)2、-CH2-CO-NH(C(CH3)3)或-CH2-CO-NH(CH3)和-CO-N(CH3)2)。
在一个实施例中，R10独立地选自卤素、氰基、羟基、＝O(氧代)和C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)，例如其中R10独立地选自C1-4烷基(例如，-CH3)、卤素或氧代。
在一个实施例中，R10独立地选自＝O(氧代)、羟基和C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)。具体地，R10独立地选自＝O(氧代)、羟基和-CH3。
具体地，存在一个取代基R10，并且R10选自＝O(氧代)、羟基和-CH3。
具体地，存在一个取代基R10，并且R10是-CH3。
在一个实施例中，存在两个取代基R10，并且一个R10是＝O(氧代)并且一个R10是C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)。
在一个实施例中，存在两个取代基R10，并且一个是卤素，例如氯并且一个R10是C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)。
在一个实施例中，R10是C1-4烷基(例如，-CH3、-CH2CH3或-CH(CH3)2)。
在一个实施例中，R10是卤素，例如氯。
在一个实施例中，R10是含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四或六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基。
在一个实施例中，R10是含有选自O和N的1个或2个杂原子的任选地经取代的四或六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基。
在一个实施例中，R10是含有选自O和N的1个或2个杂原子的四或六元饱和杂环基团(例如，吗啉基或氮杂环丁烷基)。
在一个实施例中，R10独立地选自卤素(例如，氯)、C1-4烷氧基(例如，-OCH3)、＝O(氧代)、C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)、羟基C1-4烷基(例如，-CH2CH2OH或-CH2OH)、二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)、C1-4烷氧基C1-4亚甲基(例如，-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3)和含有O的四或六元饱和杂环基团(例如，四氢呋喃)。
应当理解，对杂环和取代基R10的上述定义覆盖环的所有可能的互变异构体形式。因此，例如，以下化合物可以以下互变异构形式存在并且都落入式(I)的范围内：
Figure BDA0003499997860000411
而且，例如，以下化合物可以以下互变异构形式存在并且都落入式(I)的范围内：
Figure BDA0003499997860000412
在一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000413
选自：
Figure BDA0003499997860000421
在一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000422
选自：
Figure BDA0003499997860000423
在一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000431
选自：
Figure BDA0003499997860000432
在一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000433
选自：
Figure BDA0003499997860000434
在一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000435
选自：
Figure BDA0003499997860000436
Figure BDA0003499997860000441
具体地，在一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000442
选自：
Figure BDA0003499997860000443
具体地，在一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000444
是：
Figure BDA0003499997860000445
具体地，在一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000446
是：
Figure BDA0003499997860000451
取代基的组合
在一个实施例中，式(I)化合物是式(XIV')化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000452
其中X、R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义。
在一个实施例中，式(XIV')化合物是式(XV)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000453
其中R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义。
在一个实施例中，式(XV)化合物是式(XVI)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000461
其中R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义。
在一个实施例中，式(XVI)化合物是式(XVIa)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000462
其中R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义。
在一个实施例中，式(XVIa)化合物是式(XVIb)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000463
其中R6、R7、R8和R9如本文所定义。
在一个实施例中，式(XVIb)化合物是式(XVII)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000471
其中R6、R7和R8如本文所定义。在一个实施例中，R8是卤素。
在一个实施例中，式(XVII)化合物是式(XVIII)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐：
Figure BDA0003499997860000472
其中R1、R2、R3、R8、R9、A和R10如本文所定义。
在式(XVIII)化合物的一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000473
选自以下，其中R8是卤素：
Figure BDA0003499997860000474
Figure BDA0003499997860000481
具体地，在式(XVIII)化合物的一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000482
选自以下，其中R8是卤素：
Figure BDA0003499997860000483
例如
Figure BDA0003499997860000484
特定的化合物组
一方面，本发明提供了一种式(I*)化合物：
Figure BDA0003499997860000491
或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐，其中：
R1是氢或羟基；
R2是氢；
R3是氢或C1-4烷基(例如，-CH3)；
X是O或CR4R5；
其中当X是CR4R5时，R4和R5独立地选自氢、卤素(例如，氟)和任选地被一个或多个卤素取代的C1-4烷基(例如，-CF3)；
R6和R7独立地选自氢和卤素(例如，氯或氟)；
或R6和R7接合以形成任选地被一个或多个(例如，1个、2个或3个)R10基团取代的环A；
其中环A是包括一个或两个氮原子(例如，两个氮原子)的五元或六元芳香族杂环；
R8是卤素(例如，氯或氟)；
R9是氢；
R10独立地选自卤素(例如，氯)、C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)、C1-4烷氧基(例如，-OCH3)、二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)、卤代C1-4烷基(例如，-CF3)和含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四到六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基(例如，吗啉基或氮杂环丁烷基)。
在式I*的化合物的一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000501
选自：
Figure BDA0003499997860000502
具体地，在式I*的化合物的一个实施例中，部分
Figure BDA0003499997860000503
选自：
Figure BDA0003499997860000511
例如
Figure BDA0003499997860000512
特定化合物
在一个实施例中，本发明提供了式(I)化合物，所述化合物是实例1-27之一或其互变异构体、N-氧化物、药学上可接受的盐或溶剂化物。
在一个实施例中，本发明提供了选自以下化合物的式(I)化合物或其互变异构体、N-氧化物、药学上可接受的盐或溶剂化物：
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；
(3S,4S)-8-{3-[5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基]-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基}-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺；
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(2-氯苯基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；和
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(5-氯-3-甲氧基喹喔啉-6-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇。
在一个实施例中，本发明提供了式(I)化合物或其互变异构体、N-氧化物、药学上可接受的盐或溶剂化物，所述化合物为以下化合物：
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇。
在一个实施例中，本发明提供了式(I)化合物或其互变异构体、N-氧化物、药学上可接受的盐或溶剂化物，所述化合物为以下化合物：
(3S,4S)-8-{3-[5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基]-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基}-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺。
在一个实施例中，本发明提供了式(I)化合物或其互变异构体、N-氧化物、药学上可接受的盐或溶剂化物，所述化合物为以下化合物：
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(2-氯苯基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇。
在一个实施例中，本发明提供了式(I)化合物或其互变异构体、N-氧化物、药学上可接受的盐或溶剂化物，所述化合物为以下化合物：
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇。
在一个实施例中，本发明提供了式(I)化合物或其互变异构体、N-氧化物、药学上可接受的盐或溶剂化物，所述化合物为以下化合物：
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(5-氯-3-甲氧基喹喔啉-6-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇。
为免生疑问，应当理解，一个取代基的每个一般和具体实施例和实例可以与一个或多个，具体地所有如本文所定义的其它取代基的每个一般和具体实施例和实例组合，并且本申请涵盖所有此类实施例。
在一个实施例中，本发明提供了如本文所定义的式(I)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐，其中X、R1、R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义的，并且其中所述式(I)化合物不是：
Figure BDA0003499997860000521
即不是6-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)-3-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇。
在一个实施例中，本发明提供了如本文所定义的式(I)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐，其中X、R1、R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义的，并且其中所述式(I)化合物不是：
Figure BDA0003499997860000531
或其盐或互变异构体
即不是6-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)-3-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇或其盐或互变异构体。
在一个实施例中，本发明提供了如本文所定义的式(I)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐，其中X、R1、R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义的，并且其中所述式(I)化合物不是WO2019213318中的实例16。
在一个实施例中，本发明提供了如本文所定义的式(I)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐，其中X、R1、R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义的，并且其中所述式(I)化合物不是：
Figure BDA0003499997860000532
即不是不是(6-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)-3-(2-氟-3-氯苯基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇。
在一个实施例中，本发明提供了如本文所定义的式(I)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐，其中X、R1、R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义的，并且其中所述式(I)化合物不是：
Figure BDA0003499997860000541
或其盐或互变异构体
即不是不是(6-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)-3-(2-氟-3-氯苯基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇或其药学上可接受的盐或互变异构体。
在一个实施例中，本发明提供了如本文所定义的式(I)化合物或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐，其中X、R1、R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文所定义的，并且其中所述式(I)化合物不是WO2019183364中的实例19C。
盐、溶剂化物、互变异构体、异构体、N-氧化物、酯、前药和同位素
对式(I)、其子组(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ib')、(Ib")、(II)、(III)、(III')、(IV)、(IV')、(IV")、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(VIIIa)、(VIIIb)、(VIIIc)、(IX)、(IXa)、(X)、(XI)、(XII)、(XIIa)、(XIIb)、(XIIb)、(XIIc)、(XIIIa)、(XIIIb)、(XIV)、(XIV')、(XV)、(XVI)、(XVIa)、(XVIb)、(XVII)、(XVIII)和(I*))化合物和任何实例的提及还包含例如其离子形式、盐、溶剂化物、异构体(除非指定，否则包含几何和立体化学异构体)、互变异构体、N-氧化物、酯、前药、同位素和保护形式，如下文所讨论的；具体地，其盐或互变异构体或异构体或N-氧化物或溶剂化物；并且更具体地，其盐或互变异构体或N-氧化物或溶剂化物。在一个实施例中，对式(I)、其子组(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ib')、(Ib")、(II)、(III)、(III')、(IV)、(IV')、(IV")、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(VIIIa)、(VIIIb)、(VIIIc)、(IX)、(IXa)、(X)、(XI)、(XII)、(XIIa)、(XIIb)、(XIIb)、(XIIc)、(XIIIa)、(XIIIb)、(XIV)、(XIV')、(XV)、(XVI)、(XVIa)、(XVIb)、(XVII)、(XVIII)和(I*))化合物和任何实例的提及还包含其盐或互变异构体或溶剂化物。
盐
许多式(I)化合物可以盐，例如酸加成盐的形式存在，或者在某些情况下以有机和无机碱的盐，如羧酸盐、磺酸盐和磷酸盐的形式存在。所有这些盐都在本发明的范围内，并且对式(I)化合物的提及包含所述化合物的盐形式。
本发明的盐可以通过常规化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成，所述常规化学方法如以下文献中所描述的方法：《药用盐：特性、选择和使用(PharmaceuticalSalts:Properties,Selection,and Use)》,P.Heinrich Stahl(编者),Camille G.Wermuth(编者),ISBN:3-90639-026-8,精装,共388页,2002年8月。此类盐通常可以通过使这些化合物的游离酸或碱形式与适当的碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中进行反应来制备；通常，如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈等非水性介质是优选的。
酸加成盐(单盐或二盐)可以用各种各样的酸(无机酸和有机酸两者)形成。酸加成盐的实例包含用选自以下的酸形成的单盐或二盐：乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、海藻酸、抗坏血酸(例如，L-抗坏血酸)、L-天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、丁酸、(+)樟脑酸、樟脑-磺酸、(+)-(1S)-樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、柠檬酸、环拉酸、十二烷基硫酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、甲酸、富马酸、粘酸、龙胆酸、葡庚糖酸、D-葡糖酸、葡糖醛酸(例如，D-葡糖醛酸)、谷氨酸(例如，L-谷氨酸)、α-氧代戊二酸、乙醇酸、马尿酸、氢卤酸(例如，氢溴酸、盐酸、氢碘酸)、羟乙磺酸、乳酸(例如，(+)-L-乳酸、(±)-DL-乳酸)、乳糖酸、马来酸、苹果酸、(-)-L-苹果酸、丙二酸、(±)-DL-扁桃酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、萘-1,5-二磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、磷酸、丙酸、丙酮酸、L-焦谷氨酸、水杨酸、4-氨基-水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、单宁酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、对甲苯磺酸、十一碳烯酸和戊酸以及酰化氨基酸和阳离子交换树脂。
盐的一个特定群组由从以下形成的盐组成：乙酸、盐酸、氢碘酸、磷酸、硝酸、硫酸、柠檬酸、乳酸、琥珀酸、马来酸、苹果酸、羟乙磺酸、富马酸、苯磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸(甲磺酸盐)、乙磺酸、萘磺酸、戊酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、葡糖醛酸和乳糖酸。一种特定的盐为盐酸盐。
在一个实施例中，化合物是钠盐或甲磺酸盐。
如果化合物是阴离子的或具有可以是阴离子的官能团(例如，-COOH可以是-COO-)，那么盐可以用有机或无机碱形成，从而产生适合的阳离子。适合的无机阳离子的实例包含但不限于如Li+、Na+和K+等碱金属离子、如Ca2+和Mg2+等碱土金属阳离子以及如Al3+或Zn+等其它阳离子。适合的有机阳离子的实例包含但不限于铵离子(即，NH4 +)和取代的铵离子(例如，NH3R+、NH2R2 +、NHR3 +、NR4 +)。一些适合的取代的铵离子的实例是衍生自以下的那些：甲胺、乙胺、二乙胺、丙胺、二环己胺、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、苄胺、苯基苄胺、胆碱、葡甲胺和氨丁三醇以及如赖氨酸和精氨酸等氨基酸。常见的季铵离子的实例是N(CH3)4 +。
在式(I)化合物含有胺官能团的情况下，这些化合物可以例如根据本领域的技术人员熟知的方法通过与烷化剂反应来形成季铵盐。此类季铵化合物在本发明的式(I)的范围内。
本发明的化合物可以以单盐或二盐形式存在，这取决于由其形成盐的酸的pKa。
本发明的化合物盐形式通常是药学上可接受的盐，并且药学上可接受的盐的实例在Berge等人,1977,“药学上可接受的盐(Pharmaceutically Acceptable Salts)”《药物科学杂志(J.Pharm.Sci.)》,第66卷,第1-19页中进行了讨论。然而，也可以将药学上不可接受的盐制备为中间体形式，然后可以将所述中间体形式转化为药学上可接受的盐。例如可以可用于本发明的化合物的纯化或分离的此类非药学上可接受的盐形式也形成本发明的一部分。
在本发明的一个实施例中，提供了一种药物组合物，其包括含有浓度大于10mg/ml，通常大于15mg/ml并且通常大于20mg/ml的以盐的形式的如本文所描述的式(I)化合物和其子组和实例的溶液(例如，水溶液)。
N-氧化物
含有胺官能团的式(I)化合物也可以形成N-氧化物。本文对含有胺官能团的式(I)化合物的提及还包含N-氧化物。
在化合物含有若干个胺官能团时，可以将一个或多于一个氮原子氧化形成N-氧化物。N-氧化物的具体实例是含氮杂环基团的叔胺或氮原子的N-氧化物。
可以通过用氧化剂，如过氧化氢或过酸(例如，过氧羧酸)处理对应的胺来形成N-氧化物，例如参见《高级有机化学(Advanced Organic Chemistry)》,Jerry March,第4版,威利国际科学出版社,第页。更具体地，可以通过L.W.Deady(《合成通讯(Syn.Comm.)》1977,7,509-514)的程序来制备N-氧化物，其中胺化合物与间氯过氧苯甲酸(MCPBA)例如在惰性溶剂，如二氯甲烷中反应。
在本发明的一个实施例中，化合物是N-氧化物，例如来自R6或R7基团上的氮原子，例如吡啶N-氧化物。
几何异构体和互变异构体
式(I)化合物可以以多种不同的几何异构体和互变异构形式存在，并且对式(I)化合物的提及包含所有这些形式。为免生疑问，在化合物可以以若干种几何异构体或互变异构体形式之一存在并且仅具体描述或显示一种几何异构体或互变异构体形式的情况下，式(I)仍然涵盖所有其它形式。
例如，某些杂芳基环可以两种互变异构体形式存在，如下文所示的A和B。为简洁起见，式可以展示一种形式，但所述式将被视为涵盖两种互变异构体形式。
Figure BDA0003499997860000571
互变异构体形式的其它实例包含例如酮形式、烯醇形式和烯醇盐形式，如呈例如以下互变异构体对：酮/烯醇(如下所展示)、亚胺/烯胺、酰胺/亚胺醇、脒/烯二胺、亚硝基/肟、硫酮/烯硫醇和硝基/酸硝基。
Figure BDA0003499997860000572
立体异构体
除非另外提及或指明，否则化合物的化学名称表示所有可能的立体化学异构体形式的混合物。
立体中心以通常的方式展示，例如使用“虚”或“实”楔线。
Figure BDA0003499997860000573
在化合物被描述为两种非对映异构体/差向异构体的混合物的情况下，立体中心的构型未指定并用直线表示。
在式(I)化合物含有一个或多个手性中心并且可以以两个或多个光学异构体的形式存在的情况下，除非上下文另有要求，否则对式(I)化合物的提及包含其所有光学异构体形式(例如，对映异构体、差向异构体和非对映异构体)，无论呈单个的光学异构体还是混合物(例如，外消旋或非外消旋混合物)或两个或更多个光学异构体的形式。
光学异构体可以通过其光学活性来进行描述和鉴定(即，呈+和-异构体或d和l异构体的形式)，或者光学异构体也可以使用由Cahn、Ingold和Prelog开发的“R和S”命名法在其绝对立体化学方面进行表征，参见《高级有机化学》Jerry March,第4版,纽约约翰·威利父子出版公司(John Wiley&Sons,New York,)1992,第109-114页，并且还参见Cahn、Ingold和Prelog,《应用化学国际版-英语(Angew.Chem.Int.Ed.)》1966,5,385-415。
光学异构体可以通过多种技术分离，包含手性色谱法(在手性载体上进行色谱法)，并且此类技术是本领域技术人员众所周知的。
作为手性色谱法的替代方案，光学异构体可以通过以下来分离：与如(+)-酒石酸、(-)-焦谷氨酸、(-)-二甲苯甲酰-L-酒石酸、(+)-扁桃酸、(-)-苹果酸和(-)-樟脑磺酸等手性酸形成非对映异构体盐，通过优先结晶分离非对映异构体，并且然后解离盐，以得到游离碱的单个的对映异构体。
另外，对映异构体分离可以通过将对映异构体纯的手性助剂共价连接到化合物上并且然后使用如色谱法灯常规方法进行非对映异构体分离来实现。然后裂解上述共价键以产生适当的对映异构体纯的产物。
当式(I)化合物以两种或更多种光学异构体形式存在时，一对对映异构体中的一个对映异构体可能例如在生物活性方面表现出优于另一个对映异构体的优势。因此，在某些情况下，可能期望使用一对对映异构体中的仅一个对映异构体或多个非对映异构体中的仅一个非对映异构体作为治疗剂。
因此，本发明提供了含有具有一个或多个手性中心的式(I)化合物的组合物，其中式(I)化合物的至少55％(例如，至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％)呈单个光学异构体(例如，对映异构体或非对映异构体)形式存在。在一个一般实施例中，式(I)化合物的总量的99％或更多(例如，基本上全部)可以呈单个光学异构体(例如，对映异构体或非对映异构体)形式存在。
涵盖双键的化合物可以在所述双键处具有E(异侧)或Z(同侧)立体化学。二价环或(部分)饱和基团上的取代基可以具有顺式或反式构型。术语顺式和反式在本文中使用时依照化学摘要命名法(《有机化学杂志(J.Org.Chem.1970,35(9),2849-2867)并且是指环部分上的取代基的位置。
特别关注的是那些立体化学纯的式(I)化合物。当式(I)化合物例如被指定为R时，这意指所述化合物基本上不含S异构体。如果式(I)化合物例如被指定为E，则这意指所述化合物基本上不含Z异构体。术语顺式、反式、R、S、E和Z是本领域技术人员众所周知的。
同位素变化
本发明包含本发明的所有药学上可接受的同位素标记的化合物，即式(I)化合物，其中一个或多个原子被具有相同原子序数但原子质量或质量数不同于通常在自然界中发现的原子质量或质量数的原子替代。
适合包含在本发明的化合物中的同位素的实例包括以下同位素：如2H(D)和3H(T)等氢、如11C、13C和14C等碳、如36Cl等氯、如18F等氟、如123I、125I和131I等碘、如13N和15N等氮、如15O、如17O和18O等氧、如32P等磷和如35S等硫。
某些同位素标记的式(I)化合物，例如那些掺入放射性同位素的化合物，可用于药物和/或底物组织分布研究。式(I)化合物还可以具有有价值的诊断特性，因为所述化合物可以用于检测或鉴定经标记化合物与其它分子、肽、蛋白质、酶或受体之间复合物的形成。检测或鉴定方法可以使用用如放射性同位素、酶、荧光物质、发光物质(例如，鲁米诺、鲁米诺衍生物、荧光素、水母发光蛋白和荧光素酶)等标记剂标记的化合物等。放射性同位素氚即3H(T)和放射性同位素碳-14即14C由于其易于掺入和现成的检测手段而对此目的特别有用。
用较重的同位素，如氘，即2H(D)取代可以提供因更大的代谢稳定性而产生的某些治疗优势，例如增加的体内半衰期或降低的剂量需求，并且因此可以在一些情况下使用。
具体地，本申请中对氢的每一次提及都应被理解为涵盖1H和2H，无论氢是明确定义的，还是氢隐式地存在以满足相关原子(具体地，碳)的价。
用如11C、18F、15O和13N等正电子发射同位素取代可以在用于检查靶标占有率的正电子发射断层扫描(PET)研究中有用。
同位素标记的式(I)化合物通常可以使用适当的同位素标记的试剂替代先前采用的未经标记试剂通过本领域的技术人员已知的常规技术或通过类似于所附实例和制备中描述的那些方法的方法来制备。
酯
式(I)还涵盖携带羧酸基团或羟基的式(I)化合物的酯，如羧酸酯、酰氧基酯和磷酸酯。酯的实例是含有基团-C(＝O)OR的化合物，其中R是酯取代基，例如C1-7烷基、C3-12杂环基或C5-12芳基，通常是C1-6烷基。酯基团的特定实例包含但不限于-C(＝O)OCH3、-C(＝O)OCH2CH3、-C(＝O)OC(CH3)3和-C(＝O)OPh。酰氧基(逆酯基团)的实例由-OC(＝O)R表示，其中R是酰氧基取代基，例如C1-6烷基、C3-12杂环基或C5-12芳基，通常是C1-6烷基。酰氧基的具体实例包含但不限于-OC(＝O)CH3(乙酰氧基)、-OC(＝O)CH2CH3、-OC(＝O)C(CH3)3、-OC(＝O)Ph和-OC(＝O)CH2Ph。磷酸酯的实例是衍生自磷酸的那些磷酸酯。
在本发明的一个实施例中，式(I)在其范围内包含携带羧酸基团或羟基的式(I)化合物的酯。在本发明的另一个实施例中，式(I)在其范围内不包含携带羧酸基团或羟基的式(I)化合物的酯。
溶剂化物和结晶形式
式(I)还涵盖化合物的任何多晶形式和如水合物、醇化物等溶剂化物。
本发明的化合物可以例如与水形成溶剂化物(即，水合物)或与常见的有机溶剂形成溶剂化物。如本文所用，术语“溶剂化物”意指本发明的化合物与一种或多种溶剂分子的物理结合。这种物理结合涉及不同程度的离子键合和共价键合，包含氢键合。在某些情况下溶剂化物将能够分离，例如，当一个或多个溶剂分子掺入结晶固体的晶格中时。术语“溶剂化物”旨在涵盖溶液相和可分离的溶剂化物两者。合适的溶剂化物的非限制性实例包含与水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸或乙醇胺等组合的本发明的化合物。本发明的化合物在其在溶液中时可以发挥其生物效应。
溶剂化物在药物化学中是众所周知的。溶剂化物对用于制备物质的方法(例如，与所述物质的纯化有关)、物质的储存(例如，所述物质的稳定性)和物质的易于处理来说可能很重要，并且通常作为化学合成的分离或纯化阶段的一部分形成。本领域技术人员可以通过标准和长期使用的技术确定通过用于制备给定化合物的分离条件或纯化条件是否已经形成了水合物或其它溶剂化物。此类技术的实例包含热重分析(TGA)、差示扫描量热法(DSC)、X射线晶体学(例如，单晶X射线晶体学或X射线粉末衍射)和固态NMR(SS-NMR，也被称为魔角旋转NMR或MAS-NMR)。此类技术与NMR、IR、HPLC和MS一样是熟练化学工作人员的标准分析工具试剂盒的一部分。
可替代地，技术人员可以使用结晶条件有意形成溶剂化物，所述结晶条件包含特定溶剂化物所需的溶剂量。此后，可以使用本文所描述的标准方法来确定溶剂化物是否已经形成。
此外，本发明的化合物可以具有一种或多种多晶型物或无定形结晶形式并且因此旨在包含在本发明的范围内。
复合物
式(I)在其范围内还包含化合物的复合物(例如，与化合物的包合复合物或包合物，如环糊精，或与金属的复合物)。包合复合物、包合物和金属复合物可以通过技术人员众所周知的方法形成。
前药
式(I)还涵盖式(I)化合物的任何前药。例如，“前药”意指在体内转化为具有式(I)的生物活性化合物的任何化合物。
例如，一些前药是活性化合物的酯(例如，生理学上可接受的代谢不稳定酯)。在代谢期间，酯基团(-C(＝O)OR)被裂解以产生活性药物。此类酯可以通过例如以下形成：使母体化合物中的任何羧酸基团(-C(＝O)OH)酯化，在适当情况下，预先保护存在于母体化合物中的任何其它反应性基团，如果需要的话，则然后进行脱保护。
此类代谢不稳定酯的实例包含式-C(＝O)OR的酯，其中R是：
C1-7烷基(例如，-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-sBu、-iBu、-tBu)；C1-7氨基烷基(例如，氨基乙基；2-(N,N-二乙基氨基)乙基；2-(4-吗啉代)乙基)；和酰氧基-C1-7烷基(例如，酰氧基甲基；酰氧基乙基；新戊酰氧基甲基；乙酰氧基甲基；1-乙酰氧基乙基；1-(1-甲氧基-1-甲基)乙基-羰基氧乙基；1-(苯甲酰氧基)乙基；异丙氧基-羰基氧甲基；1-异丙氧基-羰基氧乙基；环己基-羰基氧甲基；1-环己基-羰基氧乙基；环己氧基-羰基氧甲基；1-环己氧基-羰基氧乙基；(4-噁烷基氧基)羰基氧甲基；1-(4-噁烷基氧基)羰基氧乙基；(4-噁烷基)羰基氧甲基；和1-(4-四氢吡喃基)羰基氧乙基)。
而且，一些前药会被酶促活化以产生活性化合物或在进行进一步化学反应后产生活性化合物的化合物(例如，如在抗原定向酶前药疗法(ADEPT)、基因定向酶前药疗法(GDEPT)和配体定向酶前药疗法(LIDEPT)等中)。例如，前药可以是糖衍生物或其它糖苷缀合物，或者可以是氨基酸酯衍生物。在一个实施例中，式(I)在其范围内不包含式(I)化合物的前药。
用于制备式(I)化合物的方法
在此部分中，如在本申请的所有其它部分中，除非上下文另有说明，否则对式(I)的提及还包含其所有其它子式(例如，式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ib')、(Ib")、(II)、(III)、(III')、(IV)、(IV')、(IV")、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(VIIIa)、(VIIIb)、(VIIIc)、(IX)、(IXa)、(X)、(XI)、(XII)、(XIIa)、(XIIb)、(XIIb)、(XIIc)、(XIIIa)、(XIIIb)、(XIV)、(XIV')、(XV)、(XVI)、(XVIa)、(XVIb)、(XVII)、(XVIII)和(I*))和如本文所定义的实例，除非上下文另有说明。
式(I)化合物可以根据技术人员众所周知的合成方法制备。
根据本发明的另外的方面，提供了一种用于制备式(I)化合物或其互变异构体、立体异构体、N-氧化物、药学上可接受的盐或溶剂化物的方法，所述方法包括：
(a)使式(A)化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000621
其中X、R1、R2和R3如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且P表示保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，并且Z是金属残留物(如卤化锌，例如氯化锌)或离去基团(如卤素，例如碘或溴)
与式(B)化合物或其受保护版本偶联
Figure BDA0003499997860000622
其中R6、R7、R8和R9如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且V表示金属或类金属残留物(如硼酸、硼酸频哪醇酯、卤化镁或卤化锌，例如硼酸、硼酸频哪醇酯)或离去基团，如卤素，
随后进行适于去除所述保护基团的脱保护反应；和/或
(b)使式(C)化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000623
其中R1、R6、R7、R8和R9如上文针对所述式(I)化合物所定义的，P表示保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，L是离去基团(如氯)，
与式(D)化合物或其受保护衍生物偶联，其中X、R2和R3如上文针对所述式(I)化合物所定义的
Figure BDA0003499997860000631
和/或，
(c)使式(K)化合物或其受保护衍生物，
Figure BDA0003499997860000632
其中X、R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文针对所述式(I)化合物所定义的，P表示胺保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)、N,N-二甲基氨磺酰基或氢，L3是离去基团(如卤素，例如溴)：
(i)在存在金属催化剂(如(1,3二异丙基咪唑-2-亚基)(3-氯吡啶基)二氯化钯(II))的情况下与式CH3M的有机金属物种反应，其中M是金属(例如，CH3-Zn-Hal，其中Hal是卤素，例如氯、溴或碘)，以得到式(I)化合物，其中R1是H；或
(ii)在存在光氧化还原催化剂(如[Ir{dFCF3ppy}2(bpy)]PF6)、金属催化剂(如氯化镍(II)乙二醇二甲基醚复合物)、配体(如4,4'-二叔丁基-2,2'-二吡啶基)、碱基(如磷酸二钾)和光源(如蓝色LED)的情况下与烷基硼酸酯(如2-(三甲基甲硅烷基)-乙氧基甲基三氟硼酸钾)反应，以得到式(I)化合物，其中R1是OH；和/或
(d)使用肼或其受保护肼衍生物使式(R)化合物或其受保护衍生物环化，
Figure BDA0003499997860000641
其中X、R1、R2、R3、R6、R7、R8和R9如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且L1表示合适的离去基团，如卤素；和/或
在每种情况下任选地随后进行脱保护步骤；或
(e)使式(I)化合物的受保护衍生物脱保护；和/或
(f)使式(I)化合物或其受保护衍生物与另外的式(I)化合物或其受保护衍生物相互转化；和/或
(g)任选地形成式(I)化合物的药学上可接受的盐。
在一个实施例中，用于制备式(I)化合物或其互变异构体、立体异构体、N-氧化物、药学上可接受的盐或溶剂化物的方法包括：
(a)使式(A)化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000642
其中X、R1、R2和R3如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且P表示保护基团(如2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM或THP)或为氢，并且Z是离去基团(如卤素，例如碘或溴)
与式(B)化合物或其受保护版本偶联
Figure BDA0003499997860000643
其中R6、R7、R8和R9如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且V表示金属或类金属残留物(如硼酸、硼酸频哪醇酯、卤化镁或卤化锌，例如硼酸、硼酸频哪醇酯)或离去基团，如卤素，和/或
(b)使式(I)化合物的受保护衍生物脱保护；和/或
(c)使式(I)化合物或其受保护衍生物与另外的式(I)化合物或其受保护衍生物相互转化；和/或
(d)任选地形成式(I)化合物的药学上可接受的盐。
制备方法(a)、(b)、(c)和(d)
式(B)化合物可商购获得，或使用与实例所中描述的那些方法类似的方法来制备。
方法(a)通常包括使式(A)化合物与式(B)化合物在合适的温度下在合适的溶剂、合适的碱和合适的催化剂中反应。合适的碱的实例是碳酸钾或磷酸钾。合适的催化剂的实例是[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)二氯化物。合适的溶剂的实例是1,2-二甲氧基乙烷或四氢呋喃。
在Z是如卤化锌等金属残留物时，所述方法通常包括使式(A)化合物与式(B)化合物反应，其中V是离去基团，如卤素。通常，用如异丙基氯化镁氯化锂复合物溶液等试剂对溶解于合适的溶剂，如四氢呋喃中的式(A)化合物，其中Z是离去基团，如卤素，进行处理，持续合适的时间，如35分钟，以完全实现金属化。将新形成的有机镁物种用合适的金属盐，如氯化锌进行处理以实现转移金属化，并且任选地搅拌持续合适的时间，如10分钟，并且然后使其温热到合适的温度，如室温持续一段时间，如40分钟。将所产生的杂芳基锌试剂直接用于使用如甲烷磺酸(2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-联苯)(2'-甲基氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(SPhos G4 palladacycle)等合适的催化剂在合适的温度，如室温下与式(B)进行的持续合适的时间，如18小时的交叉偶联反应中。
式(D)化合物或其受保护衍生物获得自可商购获得的起始材料、由文献程序制备或使用本申请中所概述的实例内所指示的方法或其类似方法制备。
式(C)化合物或其受保护衍生物，具体地其中R1是氢，可以通过以下获得：使式(E)化合物：
Figure BDA0003499997860000651
其中P表示合适的胺保护基团(如2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，并且L1和L2独立地表示离去基团(如卤化物，例如氯、溴或碘)，与式(B)化合物或其受保护衍生物反应，所述反应使用的方法类似于方法(a)。
式(E)化合物获得自可商购获得的起始材料、由文献程序制备或使用本专利中所概述的实例内所指示的方法或其类似方法制备。
式(A)的化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使用合适的碱，如二异丙基乙胺使式(E)化合物，其中R1是H，与式(D)的化合物或其受保护衍生物在合适的溶剂，如二甲基亚砜或N-甲基-2-吡咯烷酮中在合适的温度，如80℃到150℃下反应。
式(A)的化合物或其受保护衍生物可以获得自式(F)的化合物或其受保护衍生物
Figure BDA0003499997860000661
其中X、R2和R3如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且P表示合适的胺保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，
通过例如使用合适的卤化剂(如N-碘代琥珀酰亚胺)引入合适的离去基团Z，如卤素，然后进行任选的脱保护步骤以引入胺保护基团P(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)。
式(A)化合物或其受保护衍生物，具体地其中R1是H或-OH，可以通过以下获得：使式(X')化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000662
其中R1是氢或羟基，P表示保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，并且L1和L2独立地表示离去基团(如卤化物，例如氯、溴或碘)，与式(D)化合物或其受保护衍生物反应。
式(X')化合物，具体地其中R1是OH，或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(Y)化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000671
其中P表示保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，并且L1和L2独立地表示离去基团(如卤化物，例如氯、溴或碘)，与甲醇在存在光氧化还原催化剂(如2,4,5,6-四(9H-咔唑-9-基)间苯二甲腈)、如过氧乙酸叔丁酯溶液等过氧化物试剂、酸(如TFA)和光源(如蓝色LED)的情况下在如DMSO等溶剂中反应。可替代地，反应可以用过量的醇，如甲醇在存在如硝酸银(II)等金属盐、如过硫酸铵等氧化剂、酸(如TFA)的情况下在如DMSO等溶剂或水和热源(30-150℃)中进行。
可替代地，式(X')化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(W')化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000672
其中P表示保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，并且L1是离去基团(如卤素，例如碘或溴)，与合适的卤化剂(如N-溴代琥珀酰亚胺或N-碘代琥珀酰亚胺)反应，以引入离去基团，如卤素(例如，溴或碘)。
式(W')化合物或其受保护衍生物，具体地其中R1是氢，可以通过以下获得：使式(Y')化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000673
其中P表示保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，并且L1是离去基团(如卤素，例如碘或溴)，与有机金属残留物(如有机镁物种，例如氯化甲基镁)反应。
式(Y')化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(Z)化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000681
其中P表示保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，并且L1是离去基团(如卤素，例如碘或溴)，与氧化剂(如过酸试剂，例如三氟过乙酸)反应。
式(F)化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(G)或(G')化合物或(G)和(G')的混合物和其受保护衍生物反应
Figure BDA0003499997860000682
其中X、R1、R2和R3如上文针对所述式(I)化合物所定义的，通过使用合适的酸(如TFA)使烷氧基乙烯基醚和胺分子内环化。在此类条件下，一个或多个保护基团也可以被去除，并且因此环化步骤之后可以任选地进行重新保护步骤，例如用二碳酸二叔丁酯，以得到N-Boc衍生物。
式(G)和(G')化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(H)化合物或其受保护衍生物，
Figure BDA0003499997860000683
其中X、R1、R2和R3如上文针对所述式(I)化合物所定义的，其中Z是离去基团(如卤素)
与烷氧基乙烯基衍生物，如(E)-1-乙氧基乙烯-2-硼酸频哪醇酯通过金属催化剂(例如使用乙酸钯以及合适的配体，如2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基联苯，即Sphos，和如磷酸钾等碱)反应。反应可以在合适的溶剂或溶剂组合，如乙腈和水中，和在合适的温度，如70℃下进行。
式(H)化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(J)化合物：
Figure BDA0003499997860000691
与式(D)化合物或其受保护衍生物反应，其中Z是离去基团(如卤素)并且V是离去基团(如卤素)，所述反应是用合适的碱(如N,N-二异丙基乙胺)在合适的溶剂(如N-甲基-2-吡咯烷酮)中在合适的温度(如120℃)下进行的。
式(K)化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(L)化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000692
其中X、R2和R3如上文针对所述式(I)化合物所定义的，P表示胺保护基团(如2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)、N,N-二甲基胺磺酰基或为氢，L2是离去基团(如卤素，例如碘)，L3是离去基团(如卤素，例如溴)，与式(B)化合物反应，所述反应使用如针对(a)所概述的程序等程序进行。
式(L)化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(M)化合物：
Figure BDA0003499997860000693
其中P表示合适的保护基团，如2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基(SEM)或N,N-二甲基胺磺酰基，L1是离去基团，如氯，L2是离去基团，如碘，并且L3是离去基团，如溴，与式(D)的化合物反应，所述反应使用如针对(b)所概述的程序等程序进行。
式(M)化合物或其受保护衍生物可以获得自可商购获得的起始材料、由文献程序制备或使用本专利中所概述的实例内所指示的方法或类似方法制备。
可替代地，式(L)化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(N)化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000701
其中R2和R3如上文针对所述式(I)化合物所定义的，P表示胺保护基团(如2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，与合适的卤化剂(如N-溴代琥珀酰亚胺或N-碘代琥珀酰亚胺)反应，以引入离去基团，如卤素(例如，溴或碘)。
式(N)化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(O)化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000702
其中R2和R3如上文针对所述式(I)化合物所定义的，与合适的卤化剂，如N-碘代琥珀酰亚胺反应，以引入离去基团，如卤素，并在合适的条件下反应，以引入保护基团。
式(O)化合物或其受保护衍生物，其中X是氮，可以通过以下获得：使式(P)化合物：
Figure BDA0003499997860000703
其中R2和R3如上文针对所述式(I)化合物所定义的，L2是离去基团，如氯，与合适的肼衍生物，如水合肼反应。
式(P)化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(Q)化合物：
Figure BDA0003499997860000704
与式(D)化合物或其受保护衍生物反应，其中L1和L2是离去基团，如氯。
式(Q)化合物或其受保护衍生物获得自可商购获得的起始材料，或由文献程序制备或使用本专利中所概述的实例内所指示的方法或类似方法制备。
式(R)化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(S)化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000711
其中R1、R6、R7、R8和R9如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且L1和L2两者表示合适的离去基团，如卤素，与式(D)化合物反应。
式(S)化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(T)化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000712
其中R1、R6、R7、R8和R9如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且L1和L2两者表示合适的离去基团，如卤素，与合适的氧化剂，如氧化镁(IV)反应。
式(T)化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(U)化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000713
其中R1如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且L1和L2两者表示合适的离去基团，如卤素，与式(B)化合物反应，其中V是金属或类金属残留物(如卤化镁)。
式(U)化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(V')化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000714
其中R1如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且L1和L2两者表示合适的离去基团，如卤素，与合适的氧化剂，如戴斯-马丁高碘烷(Dess-Martin periodinane)反应。
式(V)化合物或其受保护衍生物可以通过以下获得：使式(W)化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000721
其中R1如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且L1和L2独立地表示合适的离去基团，如卤素，与醇，如甲醇在存在光氧化还原催化剂(如2,4,5,6-四(9H-咔唑-9-基)间苯二甲腈)、如过氧乙酸叔丁酯溶液等氧化剂、酸(如TFA)和光源(如蓝色LED)的情况下在如DMSO等溶剂中反应。
式(W)化合物或其受保护衍生物获得自可商购获得的起始材料，或由文献程序制备或使用本专利中所概述的实例内所指示的方法或类似方法制备。
式(T)化合物或其受保护衍生物也可以通过以下获得：使式(Z')化合物或其受保护衍生物：
Figure BDA0003499997860000722
其中R6、R7、R8和R9如上文针对所述式(I)化合物所定义的，与式(W)化合物反应。所述方法通常包括使式(W)化合物与如2,2,6,6-四甲基哌啶基氯化镁氯化锂复合物溶液等试剂反应，持续合适的时间，如2.5小时，以完全实现金属化。将新形成的有机镁物种用式(Z')化合物进行处理，并使其温热至例如室温，并搅拌持续合适的时间，如18小时。
式(Z')化合物或其受保护衍生物使用本专利中所概述的实例内所指示的方法或类似方法制备。
使式(I)化合物的受保护衍生物脱保护
方法(e)通常包括任何合适的脱保护反应，所述脱保护反应的条件将取决于保护基团的性质。
当保护基团P表示SEM时，此种脱保护反应将通常包括在合适的溶剂中使用合适的酸，然后用乙二胺去除在对SEM保护基团进行酸脱保护期间形成的羟甲基加合物。例如，酸可以适当地包括三氟乙酸或氯化氢，并且溶剂可以适当地包括二氯甲烷、DMF或甲醇。任选地，可以使用溶剂的混合物，例如水和甲醇。第二步骤涉及在真空中进行浓缩，然后将粗材料溶解于合适的溶剂，如甲醇中，并在合适的溶剂，如甲醇中用合适的清除剂，如乙二胺进行处理。
在保护基团是N,N-二甲基胺磺酰基(SO2NMe2)的情况下，可以在合适的温度下使用较强的酸，如三氟甲磺酸。
当R1＝OH并且保护基团P表示SEM时，此种脱保护反应通常将使用合适的酸(例如，甲磺酸或TFA)在合适的溶剂(例如，DCM，有或没有水)中进行，然后用乙二胺或氨在合适的溶剂(例如，DCM、CHCl3、IPA、MeOH、水或其混合物)中去除在对SEM保护基团进行的酸脱保护期间形成的羟甲基加合物。例如，脱保护反应包括在室温下在DCM/水混合物中使用甲磺酸，并且第二步骤涉及在DCM和水的混合物中用乙二胺和/或氨处理粗产物。
当R1＝H并且保护基团P表示THP时，此种脱保护反应通常将包括在介于室温与40℃之间的温度下在合适的溶剂(例如，二噁烷、MeOH)中使用合适的酸(例如，HCl)。
在其它情况下，当R1＝H并且化合物仅用Boc保护时，此种脱保护反应通常将包括在合适的溶剂(DCM、MeOH、二噁烷)中使用合适的酸(例如，TFA或HCl)。
可以根据本文所描述的作为用于制备式(I)化合物的通用程序的程序、方法1-5进行脱保护。
式(I)化合物的药学上可接受的盐的形成
盐的形成可以通过以下进行：用化学计量或过量的药学上可接受的有机或无机酸处理呈溶解于合适的溶剂中的游离碱形式的式(I)化合物，然后通过本领域众所周知的方法，例如蒸发溶剂或结晶分离出所产生的盐。
概述
如果适当的话，先前在方法(a)、(b)和(c)中所描述的反应之后或之前是本领域技术人员已知的一种或多种反应，并且以适当的顺序进行以实现上文所定义的必要取代，以得到其它式(I)化合物。其条件可以在文献中找到的此类反应的非限制性实例包含：
反应性官能团的保护；
反应性官能团的脱保护；
卤化；
脱卤；
脱烷基化；
胺、苯胺、醇和苯酚的烷基化和芳基化；
羟基上的光延反应；
适当基团上的环加成反应；
硝基、酯、氰基、醛的还原；
过渡金属催化的偶联反应；
酰基化；
磺酰基化/引入磺酰基；
皂化/酯基水解；
酯基的酰胺化或酯交换；
羧基的酯化或酰胺化；
卤素交换；
用胺、硫醇或醇进行亲核取代；
还原胺化；
在羰基和羟胺基上形成肟；
S-氧化；
N-氧化；和
盐化。
本领域的技术人员已知一系列众所周知的官能团相互转化用于将前体化合物转化为式I化合物，并在《高级有机化学》Jerry March,第4版,约翰·威利父子出版公司,1992中进行了描述。例如，可能的金属催化的官能化，如使用有机锡试剂(Stille反应)、格氏试剂(Grignard reagent)和与亲氮体的反应，在“钯试剂和催化剂(Palladium Reagents andCatalysts)”[Jiro Tsuji,Wiley,ISBN 0-470-85032-9]和《用于有机合成的有机钯化学手册(Handbook of OrganoPalladium Chemistry for Organic Synthesis)》[第1卷,编辑Ei-ichi Negishi,威利出版公司,ISBN 0-471-31506-0]中进行了描述。
保护基团：
在上文所描述的反应中的许多反应中，可能需要保护一个或多个基团以防止反应在分子上不令人期望的位置处发生。保护基团的实例和对官能团进行保护和脱保护的方法可以在《有机合成中的保护基团(Protective Groups in Organic Synthesis)》(T.Green和P.Wuts；第3版；约翰威利父子出版公司,1999)中找到。
羟基可以受保护例如作为醚(-OR)或酯(-OC(＝O)R)，例如作为：叔丁基醚；四氢吡喃基(THP)醚；苄基、二苯甲基(benzhydryl)(二苯甲基(diphenylmethyl))或三苯甲基(trityl)(三苯甲基(triphenylmethyl))醚；三甲基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基醚；或乙酰基酯(-OC(＝O)CH3)。
醛或酮基团可以受保护例如分别作为缩醛(R-CH(OR)2)或缩酮(R2C(OR)2)，其中羰基(>C＝O)用例如伯醇进行处理。醛或酮基团很容易通过在存在酸的情况下使用大量过量的水进行水解而再生。
胺基可以受保护例如作为胺(-NRCO-R)或氨基甲酸酯(-NRCO-OR)，例如作为：甲基酰胺(-NHCO-CH3)；氨基甲酸苄酯(-NHCO-OCH2C6H5、-NH-Cbz或NH-Z)；作为氨基甲酸叔丁酯(-NHCO-OC(CH3)3、-NH-Boc)；氨基甲酸2-联苯-2-丙酯(-NHCO-OC(CH3)2C6H4C6H5、-NH-Bpoc)；作为氨基甲酸9-芴基甲基(-NH-Fmoc)；作为氨基甲酸6-硝基藜芦酯(-NH-Nvoc)；作为氨基甲酸2-三甲基甲硅烷酯(-NH-Teoc)；作为氨基甲酸2,2,2-三氯乙酯(-NH-Troc)；作为氨基甲酸烯丙酯(-NH-Alloc)；或作为氨基甲酸2(-苯基磺酰基)乙酯(-NH-Psec)。
例如，在式I化合物中含有氨基，氨基可以借助于如上文所定义的保护基团而受到保护，一个优选的基团是叔丁氧基羰基(Boc)，同时引入另外的官能化。当随后不需要对氨基进行修饰时，可以通过反应序列携带保护基团，以得到式(I)化合物的N-保护形式，然后可以通过标准方法(例如，在Boc基团的情况下用酸进行处理)使所述N-保护形式脱保护，以得到式(I)化合物。
胺的其它保护基团，如环胺和杂环N-H基团，包含甲苯磺酰基(toluenesulfonyl)(甲苯磺酰基(tosyl))和甲磺酰基(methanesulfonyl)(甲磺酰基(mesyl))、如对甲氧基苄基(PMB)等苄基和四氢吡喃(THP)基团。
羧酸基团可以受保护作为酯，例如作为：C1-7烷基酯(例如，甲基酯、叔丁基酯)；C1-7卤代烷基酯(例如，C1-7卤代烷基酯)；三C1-7烷基甲硅烷基-C1-7烷基酯；C5-20芳基-C1-7烷基酯(例如，苄基酯；硝基苄基酯；对甲氧基苄基酯。硫基受保护例如作为硫醚(-SR)，例如作为：苄基硫醚；乙酰氨基甲基醚(-S-CH2NHC(＝O)CH3)。
本发明的化合物的分离和纯化
可以根据本领域技术人员众所周知的标准技术分离和纯化本发明的化合物，此类方法的实例包含色谱技术，如柱色谱法(例如，快速色谱法)和HPLC。在对化合物进行纯化中特别有用的一种技术是制备型液相色谱法，其使用质谱法作为检测从色谱柱出现的经纯化的化合物的手段。
制备型LC-MS是用于纯化有机小分子，如本文所述的化合物的标准且有效的方法。可以改变用于液相色谱法(LC)和质谱法(MS)的方法，以更好地分离粗材料并改进MS对样品的检测。制备型梯度LC方法的优化将涉及不同的柱、挥发性洗脱液和改性剂以及梯度。用于优化制备型LC-MS方法然后并且使用所述方法对化合物进行纯化的方法是本领域众所周知的。此类方法在Rosentreter U、Huber U.；制备型LC/MS中的最佳馏分收集(Optimalfraction collecting in preparative LC/MS)；《组合化学杂志(J Comb Chem.)》2004；6(2),159-64和Leister W、Strauss K、Wisnoski D、Zhao Z、Lindsley C.,开发用于化合物文库的制备型纯化和解析分析的定制高通量制备型液相色谱法/质谱仪平台(Developmentof a custom high-throughput preparative liquid chromatography/massspectrometer platform for the preparative purification and analyticalanalysis of compound libraries)；《组合化学杂志》2003；5(3)；322-9中进行了描述。下文在本申请的实例部分中(在标题“质量导向纯化LC-MS系统”下)对用于通过制备型LC-MS对化合物进行纯化的此种系统的实例进行了描述。
式(I)化合物和其盐的重结晶方法可以通过技术人员众所周知的方法进行——参见例如(P.Heinrich Stahl(编辑)、Camille G.Wermuth(编辑),ISBN:3-90639-026-8,《药用盐手册：特性、选择和使用(Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use)》,第8章,出版商Wiley-VCH)。当直接从反应混合物中分离时，从有机反应获得的产物很少是纯的。如果化合物(或其盐)是固体，则可以通过由合适的溶剂再结晶来对所述化合物进行纯化和/或结晶。良好的再结晶溶剂应在升高的温度下溶解适量的要纯化的物质，但在较低的温度下仅溶解少量的物质。所述良好的再结晶溶剂应在低温下容易溶解杂质或根本不溶解。最后，溶剂应容易从经纯化的产物中去除。这通常意指所述溶剂具有相对较低的沸点，并且本领域技术人员将了解用于特定物质的再结晶溶剂，或者如果无法获知所述信息，则对若干种溶剂进行测试。为了得到经纯化材料的良好产率，使用最少量的热溶剂来溶解所有不纯材料。实际上，使用的溶剂比所需的溶剂多3-5％，因此溶液不会饱和。如果不纯化合物含有不溶于溶剂的杂质，则可以通过过滤并且然后使溶液结晶来将所述杂志去除。另外，如果不纯化合物含有痕量的对化合物来说非天然的有色材料，可以通过向热溶液中添加少量脱色剂，例如活性炭、将所述有色材料过滤并且然后使所述有色材料结晶来去除所述有色材料。通常在冷却溶液时会自发地发生结晶。如果未发生结晶，则可以通过将溶液冷却到室温以下或通过添加纯材料的单晶(晶种)来诱导结晶。也可以通过使用抗溶剂或共溶剂进行再结晶和/或优化产率。在这种情况下，将化合物在升高的温度下溶解于合适的溶剂中，过滤，然后添加所需化合物在其中具有低溶解度的额外溶剂以帮助结晶。然后通常将晶体使用真空过滤分离，洗涤，并且然后干燥，例如在烘箱中或通过干燥。
用于纯化的方法的其它实例包含升华，其包含例如使用指形冷冻器在真空下进行加热步骤以及由熔体进行结晶(《结晶技术手册(Crystallization TechnologyHandbook)》第2版,由A.Mersmann编辑,2001)。
生物效应
设想本发明的化合物将可用于药物或疗法中。已经示出本发明的化合物、其亚组和实例可抑制SHP2。此种抑制会导致肿瘤细胞增殖得以抑制并且针对癌细胞的T细胞免疫应答得以活化，这可用于预防或治疗本文所描述的疾病状态或病状，例如下文所讨论的疾病和病状以及上文在“背景技术”部分所描述的SHP2在其中发挥了作用的疾病和病状。因此，例如，设想本发明的化合物将可用于缓解癌症或减少癌症的发病率、预防或治疗由SHP2介导的疾病或病状，例如，如在MAPK通路的上游组件(如RAS、KRAS和NRAS)内存在活化突变的癌症或受体酪氨酸激酶(RTK)活化的癌症等疾病或病状。本发明化合物可以可用于治疗成人群体。本发明的化合物可以可用于治疗小儿群体。
已经示出本发明的化合物是SHP2的良好抑制剂。式(I)化合物能够与SHP2结合并且对SHP2表现出效力。本发明的化合物针对SHP2的效力已经使用本文所描述的测定方案和本领域已知的其它方法确定。更具体地，式(I)化合物和其亚组对SHP2具有效力。
本发明的某些化合物是IC50值小于0.1μM，具体地小于0.01或0.001μM的那些化合物。
由于SHP2主要通过活化RAS-ERK信号传导通路在细胞存活和增殖中的作用以及在肿瘤发生中的作用，因此其功能已经涉及许多疾病。由于所述化合物对SHP2具有亲和力，因此预期所述化合物可以得到证明可用于治疗或预防一系列疾病或病状，包含与细胞积聚相关的病症(例如，癌症、自身免疫性病症、炎症和再狭窄)、过度凋亡导致细胞损失的病症(例如，中风、心力衰竭、神经退行性疾病，如阿尔茨海默病(Alzheimers'disease)、帕金森病(Parkinson'sdisease)、亨廷顿病(Huntington's disease)、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、AIDS、局部缺血(中风、心肌梗塞)和骨质疏松症)，或治疗自身免疫性疾病，如多发性硬化症(MS)。
因此，还设想如本文所定义的本发明的化合物可以可用于治疗其它病状，如炎症、肝炎、溃疡性结肠炎、胃炎、自身免疫、炎症、再狭窄、中风、心力衰竭、如阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、肌强直性营养不良和肌萎缩性脊髓侧索硬化症等神经退行性病状、AIDS、如创伤性脑损伤、脊髓损伤、脑缺血、脑缺血/再灌注(I/R)损伤、急慢性CNS损伤缺血等局部缺血、中风或心肌梗塞、如骨质疏松症等肌肉骨骼系统退行性疾病、如多发性硬化症(MS)和I型糖尿病等自身免疫性疾病以及如因程序性细胞死亡失控而导致的视网膜变性等眼部疾病。
由于所述化合物对SHP2具有活性，因此预期所述化合物可以得到证明可用于治疗或预防增殖性病症，如癌症。
可以治疗(或抑制)的癌症(和其良性对应物)的实例包含但不限于：上皮起源的肿瘤(腺瘤和各种类型的癌，包含腺癌、鳞癌、移行细胞癌和其它癌)，如膀胱和泌尿道癌、乳腺癌、胃肠道癌(包含食道癌、胃癌、小肠癌、结肠癌、肠癌、结肠直肠癌、直肠癌和肛门癌)、肝癌(肝细胞癌)、胆囊和胆道系统癌、外分泌胰腺癌、肾癌(例如，肾细胞癌)、肺癌(例如，腺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、细支气管肺泡癌和间皮瘤)、头颈癌(例如，舌癌、口腔癌、喉癌、咽癌、鼻咽癌、扁桃体癌、唾液腺癌、鼻腔癌和鼻窦癌)、卵巢癌、输卵管癌、腹膜癌、阴道癌、外阴癌、阴茎癌、睾丸癌、宫颈癌、子宫肌层癌、子宫内膜癌、甲状腺癌(例如，甲状腺滤泡癌)、脑癌、肾上腺癌、前列腺癌、皮肤癌和附件癌(例如，黑色素瘤、基底细胞癌、鳞状细胞癌、角化棘皮瘤、异常增生痣)；血液系统恶性肿瘤(即，白血病、淋巴瘤)和癌变前血液系统病症和交界性恶性肿瘤病症，包含血液系统恶性肿瘤和相关淋巴群系病状(例如，急性淋巴细胞性白血病[ALL]、慢性淋巴细胞性白血病[CLL]、B细胞淋巴瘤如弥漫大B细胞淋巴瘤[DLBCL]、滤泡性淋巴瘤、伯基特淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma)、套细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤和白血病、自然杀伤[NK]细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤(Hodgkin’slymphoma)、毛细胞白血病、意义不明的单克隆丙种球蛋白病、浆细胞瘤、多发性骨髓瘤以及移植后淋巴组织增殖性病症)以及血液系统恶性肿瘤和相关骨髓群系病状(例如，急性骨髓性白血病[AML]、慢性骨髓性白血病[CML]、慢性粒单核细胞性白血病[CMML]、高嗜酸性粒细胞综合征、如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症和原发性骨髓纤维化等骨髓增殖性病症、骨髓增生综合症、骨髓增生异常综合症以及早幼粒细胞性白血病)；间质起源的肿瘤，例如软组织、骨或软骨的肉瘤，如骨肉瘤、纤维肉瘤、软骨肉瘤、横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤、脂肪肉瘤、血管肉瘤、卡波西肉瘤(Kaposi's sarcoma)、尤文氏肉瘤(Ewing's sarcoma)、滑膜肉瘤、上皮样肉瘤、胃肠道间质瘤、良性和恶性组织细胞瘤以及隆突性皮肤纤维肉瘤；中枢或外周神经系统的肿瘤(例如，星型细胞瘤(例如，神经胶质瘤)、神经瘤和恶性胶质瘤、脑膜瘤、室管膜瘤、松果体肿瘤和神经鞘瘤)；内分泌肿瘤(例如，垂体瘤、肾上腺瘤、胰岛细胞瘤、甲状旁腺瘤、类癌瘤和甲状腺髓样癌)；眼部肿瘤和附件肿瘤(例如，视网膜母细胞瘤)；生殖细胞瘤和滋养细胞瘤(例如，畸胎瘤、精原细胞瘤、无性细胞瘤、葡萄胎和绒毛膜癌)；以及小儿肿瘤和胚胎性肿瘤(例如，髓母细胞瘤、神经母细胞瘤、威耳姆氏瘤(Wilms tumor)以及原始神经外胚层瘤)；或使所述患者易患恶性肿瘤(例如，着色性干皮症(Xeroderma Pigmentosum))的先天性或其它方面的综合症。
细胞的生长是一种严密控制的功能。癌症是异常细胞生长的一种状况，当细胞以不受控制的方式复制(数量增加)、不受控制地生长(变大)和/或通过细胞凋亡(程序性细胞死亡)、坏死或失巢凋亡而经历减少的细胞死亡时会产生癌症。在一个实施例中，异常细胞生长选自不受控制的细胞增殖、过度的细胞生长或减少的程序性细胞死亡。具体地，异常细胞生长的病状或疾病是癌症。
因此，在本发明用于治疗包括异常细胞生长(即，不受控制和/或快速的细胞生长)的疾病或病状的药物组合物、用途或方法中，在一个实施例中，包括异常细胞生长的疾病或病状是癌症。
本发明的化合物可以可用于治疗转移和转移癌。转移或转移性疾病是疾病从一个器官或部分扩散到另一个非相邻器官或部分。可以通过本发明的化合物治疗的癌症包含原发性肿瘤(即，癌细胞在起始部位处)、局部侵袭(癌细胞穿透和浸润局部区域中的周围正常组织)和转移性(或继发性)肿瘤，即由恶性细胞形成的肿瘤，所述恶性细胞通过血流循环(血源性扩散)或通过淋巴管或跨过体腔(种植性)循环到身体内其它部位和组织。具体地，本发明的化合物可以可用于治疗转移和转移癌。
在一个实施例中，血液系统恶性肿瘤是白血病。在另一个实施例中，血液系统恶性肿瘤是淋巴瘤。在一个实施例中，癌症是AML。在另一个实施例中，癌症是CLL。
在一个实施例中，本发明的化合物用于预防或治疗白血病，如急性或慢性白血病，具体地急性骨髓性白血病(AML)、急性淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)或慢性骨髓性白血病(CML)。在一个实施例中，本发明的化合物用于预防或治疗淋巴瘤，如急性或慢性淋巴瘤，具体地伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤或弥漫性大B细胞淋巴瘤。
在一个实施例中，本发明的化合物用于预防或治疗急性骨髓性白血病(AML)或急性淋巴细胞性白血病(ALL)。
癌症可以是对用SHP2抑制剂治疗敏感的癌症。癌症可以是过表达SHP2的癌症。癌症可以是属于SHP2野生型的癌症。癌症可以是属于突变型SHP2的癌症。在一个实施例中，癌症在SHP2中具有活化突变。
特定的癌症包含肝细胞癌、黑色素瘤、食道癌、肾癌、结肠癌、结肠直肠癌、肺癌，例如NSCLC、间皮瘤或肺腺癌、乳腺癌、膀胱癌、胃肠癌、卵巢癌和前列腺癌。
特定的癌症包含那些具有活化的SHP2(活化突变、经扩增的和/或SHP2野生型过表达)的癌症，例如肝细胞癌、乳腺癌、肺癌、结肠直肠癌和神经母细胞瘤。
特定的癌症包含在RAS-RAF-MEK-ERK通路中具有致癌改变的那些癌症，包含KRAS的突变型形式。
特定的癌症包含RTK活性导致疾病或对癌症疗法具有抗性的那些癌症。
本发明的化合物将特别可用于治疗或预防与升高的Ras、BRAF和/或MEK信号传导相关或特征在于存在升高的Ras、BRAF和/或MEK信号传导的类型的癌症。
Ras、BRAF或MEK信号传导水平升高在许多癌症中发现并且与不良预后相关。另外，具有活化Ras突变的癌症也可能对SHP2抑制剂敏感。Ras信号传导和Ras突变水平升高可以通过本文所概述的技术进行鉴定。
另外的癌症子集由NRas黑色素瘤和NRas AML组成。
另一个癌症子集由KRas肺癌、KRas胰腺癌和KRas结肠直肠癌(CRC)组成。
在一个实施例中，癌症是结肠直肠、乳腺、肺和脑。
在一个实施例中，癌症是小儿癌症。
在一个实施例中，癌症是乳腺癌、白血病、肺癌、肝癌、胃癌、喉癌或口腔癌。
特定的癌症是否是对SHP2抑制剂敏感的癌症可以通过题为“诊断方法”的部分中所阐述的方法来确定。
另外的方面提供了化合物用于制备用于治疗如本文所描述的疾病或病状，具体地癌症的药物的用途。
某些癌症对用特定药物治疗具有抗性。这可能是由于肿瘤的类型(最常见的上皮恶性肿瘤固有地具有化学抗性，而前列腺对当前可用的化学疗法或放射疗法方案具有相对抗性)，或者随着疾病的进展或作为治疗的结果，抗性可能会自发产生。在这方面，对前列腺的提及包含对抗雄激素疗法，具体地阿比特龙(abiraterone)或恩杂鲁胺(enzalutamide)具有抗性的前列腺或去势抗性前列腺。类似地，对多发性骨髓瘤的提及包含硼替佐米(bortezomib)不敏感的多发性骨髓瘤或难治性多发性骨髓瘤，并且对慢性骨髓性白血病的提及包含伊米替尼(imitanib)不敏感的慢性骨髓性白血病和难治性慢性骨髓性白血病。在这方面，对间皮瘤的提及包含对拓扑异构酶毒剂、烷化剂、抗微管蛋白剂、抗叶酸剂、铂化合物和放射疗法具有抗性的间皮瘤，特别是对顺铂(cisplatin)具有抗性的间皮瘤。对黑色素瘤的提及包含对用BRAF和/或MEK抑制剂治疗具有抗性的黑色素瘤。
化合物还可以通过使细胞对化学疗法敏感并作为抗转移剂而可用于治疗肿瘤生长、发病原、对化学疗法和放射疗法的抗性。
所有类型的治疗性抗癌干预必然会增加施加在靶肿瘤细胞上的压力。SHP2的抑制剂表示一类具有以下效力的化疗药物：(i)使恶性细胞对抗癌药物和/或治疗敏感；(ii)缓解或减少对抗癌药物和/或治疗的抗性的发生率；(iii)逆转对抗癌药物和/或治疗的抗性；(iv)增强抗癌药物和/或治疗的活性；(v)延迟或防止对抗癌药物和/或治疗的抗性的发生。
在一个实施例中，本发明提供了一种用于治疗由SHP2介导的疾病或病状的化合物。在另外的实施例中，由SHP2介导的疾病是特征在于SHP2过表达和/或活性增加的癌症。
另外的方面提供了化合物用于制备用于治疗如本文所述的疾病或病状，具体地癌症的药物的用途。
在一个实施例中，提供了一种用于预防或治疗由SHP2介导的疾病或病状的化合物。
在一个实施例中，提供了包括有效量的至少一种如所定义的化合物的药物组合物。在本发明的另外的方面，提供了如本发明中所定义的化合物。
在一个实施例中，提供了一种用于预防或治疗癌症的方法，所述方法包括向哺乳动物施用包括至少一种如所定义的化合物的药物的步骤。
诊断方法
在施用式(I)化合物之前，可以对患者进行筛选以确定所述患者正在或可能经受的疾病或病状是否是将易于用抑制SHP2的化合物治疗的疾病或病状。术语“患者”包含人类和兽医受试者，如灵长类动物，具体地人类患者。
例如，可以对从患者取得的生物样品进行分析，以确定患者正在或可能经受的病状或疾病，如癌症是否是特征在于遗传异常或蛋白质表达异常从而导致SHP2水平的上调或SHP2下游的生化通路的上调的病状或疾病。
导致SHP2活化或敏化的此类异常的实例如下：影响SHP2表达的调节通路的丧失或抑制；受体或其配体的上调；细胞遗传畸变；或受体或配体的突变体的存在。SHP2上调，具体地SHP2过表达或具有其活化突变体或包含Ras同种型中的活化突变，如KRAS的肿瘤可能对SHP2的抑制剂特别敏感。
已在细胞系和原发性肿瘤中检测到Ras突包含但不限于黑色素瘤、结肠直肠癌、非小细胞肺癌以及胰腺癌、前列腺癌、甲状腺癌、泌尿道癌和上呼吸道癌(《癌症研究(CancerRes.)》2012；72:2457–2467)。
术语上调包含升高的表达或过表达，包含基因扩增(即，多基因拷贝)、细胞遗传畸变和通过转录或翻译后效应增加的表达。因此，可以对患者进行诊断测试以检测SHP2上调的标志物特性。术语诊断包含筛选。标志物包含基因标志物，包含例如对DNA组成的测量以鉴定SHP2扩增或存在SHP2突变或鉴定存在Ras突变(例如，KRAS)。术语标志物还包含具有SHP2上调的特性的标志物，包含上述蛋白质的蛋白质水平、蛋白质状态和mRNA水平。基因扩增包含大于7个拷贝以及介于2个拷贝与7个拷贝之间的增益。
用于检测KRAS突变的诊断测定在de Castro等人《英国癌症杂志(Br.J.Cancer.)》2012年7月10日；107(2):345-51.doi:10.1038/bjc.2012.259.Epub 2012年6月19日,“用于在福尔马林固定的结肠直肠癌样本中检测KRAS突变的三种方法的比较(A comparison ofthree methods for detecting KRAS mutations in formalin-fixed colorectalcancer specimens.)”以及其中引用的参考文献中进行了描述。
诊断测试和筛选通常对选自以下的生物样品(即身体组织或体液)进行：肿瘤活检样品、血液样品(脱落的肿瘤细胞的分离和富集)、脑脊液、血浆、血清、唾液、粪便活检、痰、染色体分析、胸水、腹膜液、口腔涂片、皮肤活检或尿液。
鉴定和分析细胞遗传畸变、基因扩增、突变和蛋白质上调的方法是本领域技术人员已知的。筛选方法可以包含但不限于标准方法，如通过常规的桑格尔(Sanger)或下一代测序方法进行DNA序列分析、逆转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)、RNA测序(RNAseq)、nanostring杂交接近度RNA nCounter测定(nanostring hybridisation proximity RNAnCounter assay)或原位杂交，如荧光原位杂交(FISH)或等位基因特异性聚合酶链反应(PCR)。较新的下一代测序(NGS)技术，如大规模并行测序允许进行全外显子组测序或全基因组测序。
在通过RT-PCR进行筛选时，通过创建mRNA的cDNA拷贝、然后通过PCR扩增cDNA来评估肿瘤中的mRNA水平。PCR扩增的方法、引物的选择和用于扩增的条件是本领域技术人员已知的。核酸操纵和PCR通过标准方法来进行，如在例如以下文献中所描述：Ausubel,F.M.等人编辑(2004)《当代分子生物学实验指南(Current Protocols in Molecular Biology)》,约翰威利父子公司或Innis,M.A.等人编辑(1990)《PCR方案：方法和应用指南(PCRProtocols:a guide to methods and applications)》,学术出版社(Academic Press),圣地亚哥。涉及核酸技术的反应和操纵还在Sambrook等人,(2001),第3版,《分子克隆：实验室手册(Molecular Cloning:A Laboratory Manual)》,冷泉港实验室出版社(Cold SpringHarbor Laboratory Press)中进行了描述。可替代地，可以使用可商购获得的RT-PCR试剂盒(例如罗氏分子生化(Roche Molecular Biochemicals))或如以下美国专利中所阐述的方法：4,666,828；4,683,202；4,801,531；5,192,659、5,272,057、5,882,864和6,218,529，并且所述美国专利通过引用并入本文中。用于评估mRNA表达的原位杂交技术的实例是荧光原位杂交(FISH)(参见Angerer(1987)《酶学方法(Meth.Enzymol.)》,152:649)。
通常，原位杂交包括以下主要步骤：(1)将要分析的组织固定；(2)对样品进行预杂交处理以增加靶核酸的可及性并减少非特异性结合；(3)使核酸混合物与生物结构或组织中的核酸进行杂交；(4)杂交后清洗以去除杂交中未结合的核酸片段；以及(5)对杂交的核酸片段进行检测。此类应用中使用的探针通常用例如放射性同位素或荧光报告基因标记。某些探针足够长，例如从约50个、100个或200个核苷酸到约1000个或更多个核苷酸，以能够在严格条件下与靶核酸特异性杂交。用于执行FISH的标准方法在例如以下文献中进行了描述：Ausubel,F.M.等人编辑(2004)《当代分子生物学实验指南》约翰威利父子公司和荧光原位杂交：技术综述(Fluorescence In Situ Hybridization:Technical Overview)JohnM.S.Bartlett《癌症分子诊断、方法和方案(Molecular Diagnosis of Cancer,Methodsand Protocols)》第2版；ISBN:1-59259-760-2；2004年3月,第077-088页；《系列：分子医学方法(Series:Methods in Molecular Medicine.)》
用于基因表达谱的方法，由(DePrimo等人(2003),《BMC癌症(BMC Cancer)》,3:3)描述。简而言之，方案如下：使用(dT)24寡聚物从多腺苷酸化mRNA引发第一链cDNA合成、然后用随机六聚体引物合成第二链cDNA从总RNA合成双链cDNA。将双链cDNA用作模板以使用生物素化核糖核苷酸在体外转录cRNA。根据由昂飞公司(Affymetrix)(美国加利福尼亚州圣克拉拉(Santa Clara,CA,USA))描述的方案对cRNA进行化学片段化，并且然后在人类基因组阵列上与基因特异性寡核苷酸探针杂交过夜。可替代地，单核苷酸多态性(SNP)阵列是一种DNA微阵列，其可以用于检测群体内的多态性。
可替代地，由mRNA表达的蛋白质产物可以通过以下进行评估：肿瘤样品的免疫组织化学、用微孔板进行固相免疫分析、蛋白质印迹、2维SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、ELISA、流式细胞仪和本领域已知的用于检测特异性蛋白质的其它方法，例如毛细管电泳。检测方法将包含使用位点特异性抗体。技术人员将会认识到，所有这些众所周知的技术都可以用于检测SHP2的上调、检测SHP2或SHP2变体或突变体或本发明案例中的SHP2的负调节因子的丧失。
如SHP2等蛋白质的异常水平可以用标准的蛋白质测定，例如本文所描述的那些测定来测量。也可以例如通过使用来自Chemicon国际公司(Chemicon International)的测定对蛋白质水平进行测量来检测组织样品，例如肿瘤组织中的升高的水平或过表达。将从样品裂解物中免疫沉淀所关注的蛋白质并对其水平进行测量。测定方法还包含使用标志物。
换句话说，可以通过肿瘤对SHP2过表达或突变型SHP2进行测量。
用于评估基因拷贝变化的方法包含细胞遗传实验室中常用的技术，如MLPA(多重连接依赖性探针扩增)、检测异常拷贝数的多重PCR方法或其它可以检测基因扩增、获得和缺失的PCR技术。
在适当的情况下，也可以利用前功能测定，例如测量癌症患者的循环白血病细胞，以评估对用SHP2抑制剂进行激发的应答。
因此，所有这些技术也可以用于鉴定特别适于用本发明化合物治疗的肿瘤。
因此，本发明的另外的方面包含根据本发明的化合物用于制备用于治疗或预防已经进行过筛选并且已经确定患有或有风险患有将易于用SHP2抑制剂治疗的疾病或病状的患者的疾病状态或病状的药物的用途。
本发明的另一方面包含用于预防或治疗选自具有SHP2扩增的亚群的患者的癌症的本发明化合物。
本发明的另一方面包含用于预防或治疗具有SHP2阴性调节因子丧失的患者的癌症的本发明化合物。
本发明的另一方面包含用于预防或治疗选自具有RTK驱动的MAPK信号传导通路活化的亚群的患者的癌症的本发明化合物。
对血管正常化进行的MRI确定(例如，使用MRI梯度回波、自旋回波和对比度增强来测量血容量、相对血管大小和血管通透性)与循环生物标志物组合也可以用于鉴定适于用本发明化合物治疗的患者。
因此，本发明的另外的方面是一种用于诊断和治疗由SHP2介导的疾病状态或病状的方法，所述方法包括(i)筛选患者以确定所述患者正在或可能经受的疾病或病状是否是易于用SHP2抑制剂治疗的疾病或病状；以及(ii)在指出患者因此易患的疾病或病状的情况下，之后向患者施用如本文所定义的式(I)化合物和其亚组或实例。
本发明化合物的优点
式(I)化合物与现有技术化合物相比具有许多优点。本发明化合物在以下一个或多个方面可能具有特别的优点：
(i)优越的效力；
(ii)优越的体内功效；
(iii)优越的PK；
(iv)优越的代谢稳定性；
(v)优越的口服生物利用度；
(vi)优越的物理化学特性；和/或
(vii)优越的安全特性或治疗指数(TI)。
优越的效力和体内功效
式(I)化合物对SHP2的亲和力增加，并且具体地，针对已知对SHP2拮抗剂敏感的细胞系的细胞效力增加。
增强的靶标参与是药物化合物中非常令人期望的特性，因为其允许减少药物剂量并且在SHP2活性于毒性作用之间有良好的分离(“治疗窗口”)。
式(I)化合物对SHP2细胞系的细胞效力增强和/或选择性改进。由于针对SHP2的效力增强，因此本发明化合物在癌症细胞系和体内模型中的体内功效增强。
优越的PK和代谢稳定性
式(I)化合物可以具有有利的ADMET特性，例如更好的代谢稳定性(例如，如用小鼠肝微粒体测定的)、更好的P450谱、短半衰期和/或有益的清除率(例如，低或高清除率)。还发现许多式(I)化合物具有改进的PK谱。
这些特征可以赋予在体循环中有更多可用药物到达适当作用部位以发挥其治疗作用的优势。增加药物浓度以在肿瘤中发挥药理学作用潜在地使得功效提高，这由此允许减少要施用的剂量。因此，式(I)化合物应表现出降低的剂量需求并且应更容易调配和施用。
这使得SHP2活性与毒性作用之间有良好的分离(“治疗窗口”)。许多式(I)化合物的功效所需的Cmax有所降低(由于更好的SHP2效力和/或PK)。
优越的口服生物利用度
潜在地，本发明化合物具有适于口服暴露(口服暴露或AUC)的物理化学特性。具体地，式(I)化合物可以表现出改进的口服生物利用度或改进的口服吸收再现性。口服生物利用度可以被定义为经口服途径给药时化合物的血浆暴露量与经静脉(i.v.)途径给药时化合物的血浆暴露量的比率(F)，以百分比表示。
具有大于10％、20％或30％，更特别地大于40％的口服生物利用度(F值)化合物是特别有利的，因为它们可以口服施用，而不是肠胃外施用，或者也可以通过肠胃外施用。
优越的物理化学特性
式(I)化合物可以具有有利的物理化学特性，特别是在酸性条件下的化学稳定性和降低的亲脂性。
亲脂性可以使用分配系数(logP)或分布系数(logD)来测量。分配系数是平衡时两个不混溶相(正辛醇与水)之间未电离化合物的浓度的比率，而分配系数是所有形式的化合物(电离加未电离)在两相中的每个相中的浓度之和的比率。高亲脂性与较差的类药物特性相关，如低水溶解度、较差的药代动力学特性(低口服生物利用度)、不令人期望的药物代谢和高混杂性。具有最佳亲脂性的化合物在药物开发中可能有更大的成功机会。然而，由于所涉及靶标的亲脂性，在保持可接受水平的抑制蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)的效力的同时，实现降低的logP(或计算出的logP，clogP)可能具有挑战性。
优越的安全特性或治疗指数(TI)
在20世纪90年代后期，美国FDA批准的许多药物在发现它们与心功能不全导致的死亡有关时不得不停止在美国销售。随后发现，这些药物的副作用是由于心脏细胞中的hERG通道受阻而引起心律失常的发生。hERG通道是钾离子通道家族中的一员，所述钾离子通道家族的第一个成员于20世纪80年代后期在突变型黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster fruitfly)中鉴定出(参见Jan,L.Y.和Jan,Y.N.(1990).离子通道超家族(Superfamily of Ion Channels).《自然》,345(6277):672)。hERG钾离子通道的生物物理特性在Sanguinetti,M.C.、Jiang,C.、Curran,M.E.和Keating,M.T.(1995).遗传性心律失常与获得性心律失常之间的机制联系：HERG对Ikr钾通道进行编码(AMechanistic LinkBetween an Inherited and an Acquired CardiacArrhythmia:HERG encodes the Ikrpotassium channel).《细胞(Cell)》,81:299-307和Trudeau,M.C.、Warmke,J.W.、Ganetzky,B.和Robertson,G.A.(1995).HERG是电压门控钾通道家族中的人内向整流作用(HERG,a Human Inward Rectifier in the Voltage-Gated Potassium ChannelFamily).《科学(Science)》269:92-95。因此，消除hERG阻断活性仍然是开发任何新药物的重要考虑因素。
具有降低的hERG活性和/或在活性与hERG活性之间有良好分离的化合物具有较大的“治疗窗口”或“治疗指数”。用于测量hERG活性的一种方法是膜片钳电生理学方法。用于测量功能性hERG活性的替代性方法包含hERG结合测定，其可以使用从稳定表达hERG通道的细胞或可商购获得的表达hERG通道的细胞系中分离的可商购获得的膜。
化合物还可以具有改进的心脏安全指数(CSI)[CSI＝hERG IC50/Cmax(未结合)](Shultz等人,《药物化学杂志(J.Med.Chem.),2011；Redfern等人,《心血管研究(Cardiovasc.Res.)》,2003)。这可能是由于hERG IC50的增加或功效所需的Cmax的降低(由于更好的效力和/或PK)。特定化合物可以在体内示出CV优点。
特定化合物具有降低的hERG离子通道阻断活性。化合物针对hERG的平均IC50值可以比化合物在细胞增殖测定中的IC50值大30倍、或大40倍或大50倍。
药物调配物
虽然单独施用活性化合物是可能的，但活性化合物通常以药物组合物(例如，调配物)的形式存在。
因此，本发明进一步提供了如上文所定义的药物组合物以及制备药物组合物的方法，所述药物组合物包括(例如，混合)至少一种式(I)化合物(和其如本文所定义的亚组)以及一种或多种药学上可接受的赋形剂和任选地如本文所描述的其它治疗剂或预防剂。
药学上可接受的赋形剂可以选自例如载体(例如，固体、液体或半固体载体)、佐剂、稀释剂、填充剂或膨胀剂、造粒剂、包衣剂、释放控制剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、防腐剂、抗氧化剂、缓冲剂、悬浮剂、增稠剂、调味剂、甜味剂、掩味剂、稳定剂或药物组合物中常规使用的任何其它赋形剂。下面更详细地阐述了用于各种类型的药物组合物的赋形剂的实例。
如本文所用，术语“药学上可接受的”是指在合理医学判断的范围内适用于与受试者(例如，人类受试者)的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏应答或其它问题或并发症、与合理的益处/风险比相称的化合物、材料、组合物和/或剂型。在与调配物的其它成分相容的意义上，每种赋形剂也必须是“可接受的”。
可以根据已知技术调配含有式(I)化合物的药物组合物，参见例如雷明顿氏药物科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)》,马克出版公司(Mack PublishingCompany),美国宾夕法尼亚州伊斯顿。
药物组合物可以呈适于口服、肠胃外、局部、鼻内、支气管内、舌下、眼、耳、直肠、阴道内或经皮施用的任何形式。在组合物旨在用于肠胃外施用时，可以将所述组合物调配用于静脉内、肌肉内、腹膜内、皮下施用或通过注射、输注或其它递送方式直接递送到靶器官或组织中。可以通过团注、短期输注或长期输注并且可以通过被动递送或通过使用合适的输注泵或注射器驱动器进行递送。
适合肠胃外施用的药物调配物包含水性和非水性无菌注射溶液，所述溶液可以含有抗氧化剂、缓冲剂、杀菌剂、共溶剂、表面活性剂、有机溶剂混合物、环糊精复合剂、乳化剂(用于形成和稳定乳液调配物)、用于形成脂质体的脂质体组分、用于形成聚合凝胶的可胶凝聚合物、冻干保护剂以及用于尤其使活性成分以可溶形式稳定并使调配物与预期接受者的血液等渗的药剂组合。肠胃外施用的药物调配物也可以采用水性和非水性无菌悬浮液的形式，所述悬浮液可以包含悬浮剂和增稠剂(R.G.Strickly,口服和可注射调配物中的增溶赋形剂(Solubilizing Excipients in oral and injectable formulations),《药物研究(Pharmaceutical Research)》,2004年第21(2)卷,第201-230页)。
调配物可以存在于单位剂量或多剂量容器，例如密封的安瓿、小瓶和预填充注射器中，并且可以在仅需要在使用前一刻添加无菌液体载体，例如注射用水的冷冻干燥(冻干)条件下储存。在一个实施例中，调配物作为活性药物成分提供在瓶中，以便随后使用适当的稀释剂进行重构。
药物调配物可以通过冻干式(I)化合物或其亚组来制备。冻干是指使组合物冷冻干燥的程序。因此，冷冻干燥和冻干在本文中用作同义词。
临时注射溶液和悬浮液可以由无菌粉末、颗粒剂和片剂制备。
用于肠胃外注射的本发明药物组合物还可以包括药学上可接受的无菌水性或非水性溶液、分散体、悬浮液或乳液以及用于在使用前重构成无菌可注射溶液或分散体的无菌粉末。合适的水性和非水性载体、稀释剂、溶剂或媒剂的实例包含水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)、羧甲基纤维素和其合适的混合物、植物油(如葵花籽油、红花油、玉米油或橄榄油)和可注射有机酯，如油酸乙酯。可以例如通过使用如卵磷脂等增稠材料、通过在分散液的情况下维持所需粒度以及通过使用表面活性剂来维持适当的流动性。
本发明的组合物还可以含有佐剂，如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。可以通过包含各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等来确保防止微生物的作用。还可以令人期望的是包含调节张度的药剂，如糖、氯化钠等。通过包含延迟吸收的如单硬脂酸铝和明胶等药剂可以实现可注射药物形式的延长的吸收。
在本发明的一个典型实施例中，药物组合物呈适于例如通过注射或输注静脉内施用的形式。对于静脉内施用，溶液可以按原样给药，或可以在施用前注射到输注袋(含有药学上可接受的赋形剂，如0.9％盐水或5％右旋糖)中。
在另一个典型实施例中，药物组合物呈适于皮下(s.c.)施用的形式。
适于口服施用的药物剂型包含片剂(包衣或未包衣)、胶囊(硬壳或软壳)、囊片、丸剂、锭剂、糖浆、溶液、粉剂、颗粒剂、酏剂和悬浮剂、舌下片剂、薄片或贴剂，如口腔贴片。
因此，片剂组合物可以含有单位剂量的活性化合物以及惰性稀释剂或载体，如糖或糖醇，例如乳糖、蔗糖、山梨糖醇或甘露糖醇，和/或非糖衍生的稀释剂，如碳酸钠、磷酸钙、碳酸钙，或纤维素或其衍生物，如微晶纤维素(MCC)、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素和淀粉，如玉米淀粉。片剂还可以含有标准成分，如粘合剂和造粒剂，如聚乙烯吡咯烷酮、崩解剂(例如，可溶胀交联聚合物，如交联羧甲基纤维素)、润滑剂(例如，硬脂酸盐)、防腐剂(例如，对羟基苯甲酸酯)、抗氧化剂(例如，BHT)、缓冲剂(例如，磷酸盐或柠檬酸盐缓冲液)和泡腾剂，如柠檬酸盐/碳酸氢盐混合物。此类赋形剂是众所周知的，并且无需在此详细讨论。
片剂可以被设计为在与胃液接触时释放药物(速释片剂)或在延长的时间段内或在GI道的特定区域以受控方式释放(控释片剂)。
胶囊调配物可以属于硬明胶或软明胶种类，并且可以含有呈固体、半固体或液体形式的活性组分。明胶胶囊可以由动物明胶或其合成的或植物衍生的等同物形成。
固体剂型(例如，片剂、胶囊等)可以是包衣的或未包衣的。包衣既可以作为保护膜(例如，聚合物、蜡或清漆)，也可以作为用于控制药物释放或用于美学或鉴定目的的机制。包衣(例如，EudragitTM型聚合物)可以被设计为在胃肠道内的期望位置处释放活性组分。因此，包衣可以被选择成以在胃肠道内在某些pH条件下降解，由此在胃中或在回肠、十二指肠、空肠或结肠中选择性地释放化合物。
作为包衣的替代或除包衣之外，药物可以存在于包括可以适于以受控方式在胃肠道中释放化合物的释放控制剂，例如释放延迟剂的固体基质中。可替代地，药物可以存在于可以适于在胃肠道中在不同酸度或碱度的条件下选择性地释放化合物的聚合物包衣，例如聚甲基丙烯酸酯聚合物包衣中。可替代地，基质材料或缓释包衣可以采用可侵蚀聚合物(例如，马来酸酐聚合物)的形式，在剂型穿过胃肠道时，所述可侵蚀聚合物基本上连续受到侵蚀。在另一个替代方案中，包衣可以设计成在肠道中在微生物作用下崩解。作为另外的替代方案，活性化合物可以调配在提供对化合物的释放的渗透性控制的递送系统中。渗透性释放和其它延迟释放或持续释放调配物(例如，基于离子交换树脂的调配物)可以根据本领域技术人员众所周知的方法来制备。
可以将式(I)化合物调配有载体并以纳米颗粒的形式施用，所述纳米颗粒的增加的表面积有助于所述化合物的吸收。另外，纳米颗粒提供了直接渗透到细胞中的可能性。纳米颗粒药物递送系统在Ram B Gupta和Uday B.Kompella编辑的“用于药物递送的纳米颗粒技术(Nanoparticle Technology for Drug Delivery)”,英富曼卫生保健出版社(InformaHealthcare),ISBN 9781574448573,2006年3月13日出版中进行了描述。用于药物递送的纳米颗粒还在《控制释放杂志(J.Control.Release)》,2003,91(1-2),167-172和Sinha等人,《分子癌症治疗学(Mol.Cancer Ther.)》8月1日,(2006)5,1909中进行了描述。
药物组合物通常包括大约1％(w/w)到大约95％的活性成分和99％(w/w)到5％(w/w)的药学上可接受的赋形剂或赋形剂的组合。通常，药物组合物包括大约20％(w/w)到大约90％的活性成分和80％(w/w)到10％(w/w)的药学上可接受的赋形剂或赋形剂的组合。药物组合物包括大约1％到大约95％，通常大约20％到大约90％的活性成分。根据本发明的药物组合物可以是例如呈单位剂量形式，例如呈安瓿、小瓶、栓剂、预填充注射器、糖衣丸、片剂或胶囊的形式。
药学上可接受的赋形剂可以根据调配物的期望物理形式进行选择，并且可以例如选自稀释剂(例如，固体稀释剂，如填充剂或膨胀剂；以及液体稀释剂，如溶剂和共溶剂)、崩解剂、缓冲剂、润滑剂、助流剂、释放控制剂(例如，缓释剂或延迟聚合物或蜡)、粘合剂、造粒剂、颜料、增塑剂、抗氧化剂、防腐剂、调味剂、掩味剂、张度调节剂和包衣剂。
技术人员将具有选择适当量的成分用于调配物的专业知识。例如，片剂和胶囊通常含有0-20％崩解剂、0-5％润滑剂、0-5％助流剂和/或0-99％(w/w)填充剂/或膨胀剂(这取决于药物剂量)。所述片剂和所述胶囊还可以含有0-10％(w/w)聚合物粘合剂、0-5％(w/w)抗氧化剂、0-5％(w/w)颜料。缓释片剂将另外含有0-99％(w/w)聚合物(这取决于剂量)。片剂或胶囊的薄膜包衣通常含有0-10％(w/w)控释(例如，延迟)聚合物、0-3％(w/w)颜料和/或0-2％(w/w)增塑剂。
肠胃外调配物通常含有0-20％(w/w)缓冲剂、0-50％(w/w)助溶剂和/或0-99％(w/w)注射用水(WFI)(这取决于剂量和是否冻干)。用于肌肉内贮库的调配物也可以含有0-99％(w/w)油。
用于口服施用的药物组合物可以通过以下来获得：将活性成分与固体载体组合；如果需要的话，将所产生的混合物制粒；并且如果需要或必要的话，在加入适当的赋形剂后将混合物加工成片剂、糖衣丸芯或胶囊。所述药物组合物也可以掺入允许活性成分以测得量扩散或释放的聚合物或蜡质基质中。
本发明的化合物也可以被调配为固体分散体。固体分散体是两种或更多种固体的均匀极细分散相。固溶体(分子分散系统)是一种固体分散体，众所周知其用于制药技术(参见Chiou和Riegelman,《药物科学杂志(J.Pharm.Sci.,60,1281-1300(1971))并且可用于提高溶解速率和提高水溶性差的药物的生物利用度。
本发明还提供了包括本文所描述的固溶体的固体剂型。固体剂型包含片剂、胶囊、咀嚼片和可分散或泡腾片。已知的赋形剂可以与固溶体共混以提供期望的剂型。例如，胶囊可以含有与(a)崩解剂和润滑剂或(b)崩解剂、润滑剂和表面活性剂共混的固溶体。另外，胶囊可以含有膨胀剂，如乳糖或微晶纤维素。片剂可以含有与至少一种崩解剂、润滑剂、表面活性剂、膨胀剂和助滑剂共混的固溶体。咀嚼片可以含有与膨胀剂、润滑剂和如果需要的话，另外的甜味剂(如人造甜味剂)和合适的调味剂共混的固溶体。固溶体也可以通过将药物和合适的聚合物的溶液喷洒到惰性载体，如糖珠(“非粉末(non-pareil)”)的表面上来形成。随后可以将这些珠填充到胶囊中或压制成片剂。
药物调配物可以以在单个包装，通常是泡罩包中含有整个治疗过程的“患者包”的形式呈递给患者。与传统处方相比，患者包具有优点，在所述传统处方中，药剂师将患者的药物供应与散装供应分开，因为患者始终可以获得患者包中所含有的包装说明书，而所述包装说明书通常在患者处方中缺失。已经示出包含包装说明书可提高患者对医师的指示的依从性。
用于局部使用和鼻腔递送的组合物包含软膏、乳膏、喷雾剂、贴剂、凝胶、液滴和插入物(例如，眼内插入物)。此类组合物可以根据已知方法调配。
用于直肠或阴道内施用的调配物的实例包含子宫托和栓剂，它们可以例如由含有活性化合物的成型的可模压或蜡型材料形成。活性化合物的溶液也可以用于直肠施用。
用于通过吸入施用的组合物可以采用可吸入粉末组合物或液体或粉末喷雾剂的形式，并且可以使用粉末吸入器装置或气雾剂分配装置以标准形式施用。此类装置是众所周知的。对于通过吸入施用，粉末调配物通常包括活性化合物以及惰性固体粉末稀释剂，如乳糖。
式(I)化合物将通常以单位剂型存在，并且因此将通常含有足够的化合物以提供期望水平的生物活性。例如，调配物可以含有1纳克到2克活性成分，例如1纳克到2毫克活性成分。在这些范围内，化合物的特定子范围是0.1毫克到2克活性成分(更通常的是10毫克到1克，例如50毫克到500毫克)，或1微克到20毫克(例如1微克到10毫克，例如0.1毫克到2毫克活性成分)。
对于口服组合物，单位剂型可以含有1毫克到2克，更通常地10毫克到1克，例如50毫克到1克，例如100毫克到1克活性化合物。
活性化合物将以足以实现期望治疗效果的量施用于有需要的患者(例如，人类或动物患者)。
治疗方法
如本文所定义的式(I)化合物和亚组可以可用于预防或治疗由SHP2介导的一系列疾病状态或病状。此类疾病状态和病状的实例在上文中进行了阐述。
化合物通常施用于需要此种施用的受试者，例如人类或动物患者，通常是人类。
化合物将通常以治疗或预防有用且通常无毒的量施用。然而，在某些情形下(例如在危及生命的疾病的情况下)，施用式(I)化合物的益处可能超过任何毒性作用或副作用的缺点，在这种情况下，可能认为期望以与毒性程度相关的量施用化合物。
化合物可以在延长的时期内施用以维持有益的治疗效果，或者可以仅施用持续较短时间段。可替代地，所述化合物可以以连续方式或以提供间歇给药的方式(例如，脉动方式)施用。
式(I)化合物的典型的每日剂量的范围可以为每千克体重100皮克到100毫克。本发明的化合物也可以通过团注或连续输注来施用。
所施用的化合物的量和所使用的组合物的类型将与所治疗的疾病或生理条件的性质相称，并且将由医师判断。
使用本发明的化合物作为单一药剂或将本发明的化合物与通过不同机制起作用以调节细胞生长的另一种药剂组合从而治疗癌症发展的特性特征中的两个特性特征可能是有益的。可以进行组合实验，例如，如Chou TC、Talalay P.剂量-效应关系的定量分析：多种药物或酶抑制剂的组合效应(Quantitative analysis of dose-effectrelationships:the combined effects of multiple drugs or enzyme inhibitors).《酶调节进展(Adv Enzyme Regulat)》1984；22:27–55中所描述的。
如本文所定义的化合物可以作为唯一的治疗剂施用，或者所述化合物可以以与用于治疗特定的疾病状态，例如肿瘤性疾病，如上文所定义的癌症的一种或多种其它化合物(或疗法)的组合疗法施用。在一个实施例中，组合疗法包括式I化合物和用于治疗癌症的一种或多种其它抗癌化合物(或疗法)。为了治疗上述病状，本发明的化合物可以有利地与一种或多种其它药用剂，更具体地与其它抗癌剂或佐剂(疗法中的支持剂)组合用于癌症疗法。
可以与式(I)化合物一起(无论是同时或以不同的时间间隔)施用的其它治疗剂或治疗的实例包含但不限于：
1.拓扑异构酶I抑制剂；
2.抗代谢物和核苷衍生物；
3.微管蛋白靶向剂，包含长春花生物碱(vinca alkaloid)、埃坡霉素(epothilone)、微管蛋白结合剂和紫杉烷(taxane)；
4.DNA结合剂，如铂药剂和蒽环类，以及拓扑异构酶II抑制剂；
5.烷化剂；
6.单克隆抗体；
7.抗激素，如GnRA、雌激素受体拮抗剂、选择性雌激素受体调节剂(SERM)、芳香酶抑制剂、抗雄激素；
8.信号转导抑制剂；
9.蛋白酶体抑制剂；
10.DNA甲基转移酶抑制剂；
11.重组干扰素和类视黄醇；
12.染色质靶向疗法；
13.放射疗法；和/或
14.其它治疗或预防剂。
可以与式(I)化合物一起(无论是同时或以不同的时间间隔)施用的其它治疗剂或治疗的实例包含但不限于：
I.铂化合物；
II.紫杉烷化合物；
III.拓扑异构酶I抑制剂；
IV.拓扑异构酶II抑制剂；
V.长春花生物碱；
VI.核苷衍生物；
VII.抗代谢物；
VIII.烷化剂；
IX.其它细胞毒性物；
X.蒽环类、蒽二酮类和相关药物；
XI.埃坡霉素；
XII.DNA甲基转移酶抑制剂；
XIII.组蛋白甲基转移酶抑制剂；
XIV.抗叶酸剂；
XV.细胞毒性抗生素；
XVI.微管蛋白结合剂；
XVII.信号转导抑制剂；
XVIII.有丝分裂激酶抑制剂：
XIX.CDK抑制剂；
XX.PI3K/AKT通路抑制剂；
XXI.ERK抑制剂；
XXII.Hsp90抑制剂；
XXIII.单克隆抗体、抗体衍生物、双特异性抗体和“抗体样”治疗性蛋白或其它治疗性蛋白和相关药剂；
XXIV.雌激素受体拮抗剂或选择性雌激素受体调节剂(SERM)或雌激素合成抑制剂；
XXV.芳香酶抑制剂和相关药物；
XXVI.抗雄激素(即，雄激素受体拮抗剂)和相关药剂；
XXVII.激素和其类似物；
XXVIII.类固醇；
XXIX.甾体细胞色素P450 17α-羟化酶-17,20-裂解酶抑制剂(CYP17)；
XXX.促性腺激素释放激素激动剂或拮抗剂(GnRAs)；
XXXI.糖皮质激素；
XXXII.分化剂；
XXXIII.刺猬信号通路抑制剂(Hedgehog pathway inhibitor)；
XXXIV.脱氢酶抑制剂；
XXXV.输出蛋白1抑制剂；
XXXVI.聚合酶抑制剂；
XXXVII.法呢基转移酶抑制剂；
XXXVIII.染色质靶向疗法；
XXXIX.靶向泛素-蛋白酶体通路的药物，包含蛋白酶体抑制剂；
XL.光动力学药物；
XLI.海洋生物体衍生的抗癌剂；
XLII.用于放射免疫疗法的放射性标记的药物；
XLIII.端粒酶抑制剂；
XLIV.基质金属蛋白酶抑制剂；
XLV.重组干扰素和白介素；
XLVI.选择性免疫应答调节剂；
XLVII.治疗性疫苗；
XLVIII.细胞因子活化剂；
XLIX.细胞因子缀合物；
L.三氧化二砷；
LI.G蛋白偶联受体(GPCR)抑制剂；
LII.酶；
LIII.DNA修复抑制剂；
LIV.死亡受体激动剂；
LV.其它免疫疗法；
LVI.细胞死亡(细胞凋亡)调节剂；
LVII.基因修饰符或编辑器；
LVIII.溴结构域抑制剂；
LIX.用于根治性、姑息性或预防性目的(或用于辅助或新辅助目的)的放射疗法；和/或
LX.预防剂(辅助剂)；即减少或缓解与化学疗法药剂相关的一些副作用的药剂。
在一个实施例中，组合疗法包括式I化合物和用于治疗癌症的一种或多种其它抗癌化合物(或疗法)，任选地与放射疗法和/或预防剂组合。在一个实施例中，组合疗法包括式I化合物与放射疗法和/或预防剂组合。
抗癌剂或佐剂(或其盐)的具体实例包含但不限于选自以下组(I)-(LIX)和任选地组(LX)的药剂中的任何药剂：
I.铂化合物，例如顺铂(任选地与氨磷汀(amifostine)组合)、卡铂(carboplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、双环铂(dicycloplatin)、七铂(heptaplatin)、洛铂(lobaplatin)、奈达铂(nedaplatin)、沙铂(satraplatin)或四硝酸三铂(triplatintetranitrate)，具体地顺铂、卡铂或奥沙利铂；
II.紫杉烷化合物，例如紫杉醇(paclitaxel)、紫杉醇蛋白结合颗粒(AbraxaneTM)、多西他赛(docetaxel)、卡巴他赛(cabazitaxel)、拉罗他赛(larotaxel)；奥他赛(ortataxel)、替司他赛(tesetaxel)或司莫他赛(simotaxel)，具体地紫杉醇、紫杉醇蛋白结合颗粒(AbraxaneTM)或多西他赛；
III.拓扑异构酶I抑制剂，例如喜树碱(camptothecin)化合物，例如喜树碱、伊立替康(irinotecan)(CPT11)、SN-38、拓扑替康(topotecan)、苔藓抑素(bryostatin)、卡利他汀(callystatin)、诺吉替康(nogitecan)、贝洛替康(belotecan)、艾沙替康(exatecan)、鲁比替康(rubitecan)或勒托替康(lurtotecan)，具体地喜树碱、伊立替康或拓扑替康；
IV.拓扑异构酶II抑制剂，例如抗肿瘤表鬼臼毒素或鬼臼毒素衍生物，例如依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、索布佐生(sobuzoxane)、依替卡林(edotecarin)、氨萘非特(amonafide)、氨柔比星(amrubicin)或匹杉琼(pixantrone)，具体地依托泊苷或替尼泊苷；
V.长春花生物碱，例如长春碱、长春新碱(vincristine)、脂质体长春新碱(Onco-TCS)、长春瑞滨(vinorelbine)、长春地辛(vindesine)、长春氟宁(vinflunine)、长春维西尔(vinvesir)、艾日布林(eribulin)或萨力巴拉斯汀(thaliblastine)；具体地长春碱、长春新碱或长春瑞滨；
VI.核苷衍生物，例如5-氟尿嘧啶(5-FU，任选地与亚叶酸，例如LV5FU2组合)、吉西他滨(gemcitabine)、卡培他滨(capecitabine)、替加氟(tegafur)(任选地与被称为UFT的尿嘧啶组合，或与被称为TS-1或S1的吉美拉西(gimeracil)和奥替拉西钾(oteracilpotassium)组合)、克拉屈滨(cladribine)、阿糖胞苷(cytarabine)(Ara-C、胞嘧啶阿拉伯糖苷)、氟达拉滨(fludarabine)、氯法拉滨(clofarabine)、奈拉滨(nelarabine)；福罗地辛(forodesine)、多西氟尿苷(doxifluridine)、加洛他滨(galocitabine)、沙帕他滨(sapacitabine)、乙嘧替氟(emitefur)或曲沙他滨(troxacitabine)；
VII.抗代谢物，例如氯法拉滨、氨基蝶呤(aminopterin)或甲氨蝶呤(methotrexate)、阿扎胞苷(azacitidine)、阿糖胞苷、氟尿苷(floxuridine)、喷司他丁(pentostatin)、硫鸟嘌呤、硫嘌呤、6-巯基嘌呤、羟基脲(羟基尿素)或曲氟尿苷(trifluridine)(任选地与地匹福林(tipiracil)组合)；
VIII.烷化剂，例如氮芥(nitrogen mustard)或亚硝基脲(nitrosourea)，例如环磷酰胺、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、卡莫司汀(chlorambucil)(BCNU)、氨莫司汀(ambamustine)、苯达莫司汀(bendamustine)、噻替哌(thiotepa)、美法仑(melphalan)、苏消安(treosulfan)、洛莫司汀(lomustine)(CCNU)、白消安(busulfan)、达卡巴嗪(dacarbazine)、雌莫司汀(estramustine)、福莫司汀(fotemustine)、异环磷酰胺(任选地与美司钠(mesna)组合)、哌柏溴烷(pipobroman)、丙卡巴肼(procarbazine)、链脲佐菌素(streptozocin)、替莫唑胺(temozolomide)、尿嘧啶、甲氯乙胺、盐酸甲氯乙胺、甲基环己基氯乙基亚硝基脲、尼莫司汀(nimustine)(ACNU)、泼尼莫司汀(prednimustine)、甲氯乙胺、依托糖苷(etoglucid)；链脲佐菌素(streptozotocin)、伊洛福芬(irofulven)、二溴卫矛醇(mitolactol)、葡磷酰胺(glufosfamide)、依磷环磷酰胺(evofosfamide)、乙烯亚胺或甲基三聚氰胺，包含六甲三聚氰胺、三亚乙基三聚氰胺、三羟甲基三聚氰胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺或三羟甲基三聚氰胺；
IX.其它细胞毒性物，如尾海兔素(dolastatin)、五加素(eleutherobin)、水鬼蕉碱(pancratistatin)、匍枝珊瑚醇A(sarcodictyin A)或海绵抑制素(spongistatin)；
X.蒽环类、蒽二酮类和相关药物，例如柔红霉素(daunorubicin)、多柔比星(doxorubicin)(任选地与右雷佐生(dexrazoxane)组合)、多柔比星的脂质体调配物(例如，CaelyxTM、MyocetTM、DoxilTM)、伊达比星(idarubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、表柔比星(epirubicin)、安吖啶(amsacrine)或戊柔比星(valrubicin)；
XI.埃坡霉素，例如伊沙匹隆(ixabepilone)、帕土匹龙(patupilone)、BMS-310705、埃坡霉素A、埃坡霉素B、脱氧埃坡霉素B(也被称为埃坡霉素D或KOS-862)、氮杂埃坡霉素B(也被称为BMS-247550)、奥立马利(aulimalide)、异奥立马利(isolaulimalide)或吕瑟罗宾(luetherobin)；
XII.DNA甲基转移酶抑制剂，例如替莫唑胺(temozolomide)、氮杂胞苷(azacytidine)、地西他滨(decitabine)(单独的或与胞苷脱氨酶抑制剂，如西达珠定(cedazurdine)组合)或瓜地他滨(guadecitabine)(SGI-110)；
XIII.组蛋白甲基转移酶抑制剂，例如EZH2抑制剂，例如他泽美司他(tazemetostat)、PF-06821497、CPI-1205或CPI-0209；
XIV.抗叶酸剂，例如甲氨蝶呤、培美曲塞二钠(pemetrexed disodium)、雷替曲塞(raltitrexed)、普拉曲沙(pralatrexate)、依达曲沙(edatrexate)或三甲曲沙(trimetrexate)；
XV.细胞毒性抗生素，例如抗霉素D(antinomycin D)、博来霉素(bleomycin)、丝裂霉素C(mitomycin C)、更生霉素(dactinomycin)、胭脂红霉素(carminomycin)、道诺霉素(daunomycin)、左旋咪唑(levamisole)、普卡霉素(plicamycin)、光神霉素(mithramycin)、阿柔比星(aclarubicin)、吡柔比星(pirarubicin)、蒽霉素(anthramycin)、氮杂丝氨酸(azaserine)、仙人掌霉素(cactinomycin)、加利车霉素(calicheamicin)、卡拉比星(carabicin)、卡西霉素(carzinophilin)、嗜铬霉素(chromomycin)、依索比星(esorubicin)、拉霉素(esperamicin)、格尔德霉素(geldanamycin)、马西罗霉素(marcellomycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培普霉素(peplomycin)、嘌呤霉素(puromycin)、奎拉霉素(quelamycin)、瑞贝卡霉素(rebeccamycin)、罗柔比星(rodorubicin)、链霉黑素(streptonigrin)、链脲佐菌素(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、动力霉素(dynemicin)，包含动力霉素A、辛那霉素(centanamycin)(CC-1065)，包含其阿多来新(adozelesin)、卡泽来辛(carzelesin)和比泽来新(bizelesin)合成类似物、多卡霉素(duocarmycin)，包含合成类似物比布鲁来新(pibrozelesin)(KW-2189)或净司他丁(zinostatin)；
XVI.微管蛋白结合剂，例如考布他汀(combrestatin)、秋水仙碱(colchicine)、地美可辛(demecolcine)、那可品(noscapine)或诺考达唑(nocodazole)；
XVII.信号转导抑制剂，如激酶抑制剂，例如受体酪氨酸激酶抑制剂(例如EGFR(表皮生长因子受体(Erbb1)抑制剂)、VEGFR(血管内皮生长因子受体)抑制剂、PDGFR(血小板衍生生长因子受体)抑制剂、FGFR(成纤维细胞生长因子受体)抑制剂、Axl抑制剂、MTKI(多靶点激酶抑制剂)、c-Kit抑制剂、其它Erbb抑制剂，例如Errb2(HER2)、Errb3(HER3)或Errb4(HER4)、Trk抑制剂、Flt3抑制剂、JAK抑制剂、RET抑制剂、MET抑制剂、Btk抑制剂、ALK抑制剂、ROS1抑制剂、FYN抑制剂、Src抑制剂、Bcr-Abl抑制剂、己糖激酶抑制剂、Raf抑制剂、ROCK抑制剂、MEK抑制剂或PI3K抑制剂，例如伊马替尼(imatinib)、厄洛替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、阿法替尼(afatinib)(双EGFR/HER2)、布加替尼(brigatinib)(ALK/EGFR)、奥希替尼(osimertinib)(EGFR)、阿莫替尼(almonertinib)(EGFR)、奥穆替尼(olmutinib)(EGFR)、埃克替尼(icotinib)(EGFR)、阿氟替尼(alflutinib)(EGFR)、拉泽替尼(lazertinib)(EGFR)、佐利非替尼(zorifertinib)(EGFR)、美法替尼(mefatinib)(EGFR)、舒替替尼(sutetinib)(EGFR)、达沙替尼(dasatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、多维替尼(dovitinib)(CHIR 258)、阿西替尼(axitinib)(AG-13736)、尼罗替尼(nilotinib)、凡德他尼(vandetanib)、瓦他利尼(vatalinib)、沙拉卡替尼(saracatinib)(AZD-0530)、博舒替尼(bosutinib)、巴非替尼(bafetinib)(NS-187)、阿比为替尼(abivertinib)(EGFR、Btk)、莫博测替尼(mobocertinib)(EGFR、Erbb2)、安洛替尼(anlotinib)(多重激酶)、奥法坡替尼(avapritinib)(KIT、PDGF)、乐伐替尼(lenvatinib)(E-7080)(多重激酶)、匹罗替尼(pyrotinib)(多重激酶)、氯尼达明(lonidamine)(己糖激酶)、BMS-690514、尼达尼布(nintedanib)(酪氨酸激酶)、帕纳替尼(ponatinib)(多重激酶)、替沃扎尼(tivozanib)(KRN-951)(多重激酶)、R-1530(多重激酶)、瓦他拉尼碱(vatalanib)(PDGF、VEGF)、PF-337210(VEGF)、AEE-788(多重激酶)、替伐替尼(XL-647(多重激酶)、K-0706、利普替尼(ripretinib)(KIT、PDGF)、达克替尼(dacomitinib)(EGFR、Erbb2/Erbb4)、来那替尼(neratinib)(EGFR、Erbb2/Erbb4)、伐利替尼(varlitinib)(EGFR、Erbb2/Erbb4)、图卡替尼(tucatinib)(Erbb2)、拉罗替尼(larotrectinib)(Trk)、厄达替尼(erdafitinib)(FGFR)、英菲替尼(infigratinib)(FGFR)、培米加替尼(pemigatinib)(FGFR)、罗加替尼(rogaratinib)(FGFR)、地扎替尼(derazantinib)(FGFR)、E-7090(FGFR)、HMPL-453(FGFR)、唑来替尼(zoligratinib)(FGFR)、福替巴替尼(futibatinib)(FGFR)、布立尼布(brivanib)(FGFR、VEGFR)、Ki 23057(FGFR)、索凡替尼(surufatinib)(FGFR、VEGFR)帕唑帕尼(pazopanib)(GW 786034)、西地尼布(cediranib)(KIT、VEGFR、PDGFR)、奥兰替尼(orantinib)(FGF、PDGF、VEGF)、H3B-6527、MAX-40279、ICP-105、特拉替尼(telatinib)(BAY-57-9352)(KIT、PDGFR、VEGFR)、哌加他尼(pegaptanib)(VEGFR)、司马沙尼(semaxanib)(MAPK、VEGFR)、奎扎替尼(quizartinib)(AC-220)(Flt3、KIT、PDGFR)、克劳拉尼(crenolanib)(CP 868596)(Flt3、PDGFR)、来他替尼(lestaurtinib)(多重激酶)、卡博替尼(Cabozantinib)(XL-184)(VEGFR2、Axl、MET、RET)、色波喀替尼(selpercatinib)(RET)、坎普替尼(capmatinib)(MET)、MK-2461(MET)、SU-11274(MET)、PHA-665752(MET)、依鲁替尼(ibrutinib)(Btk)、阿卡拉布鲁替尼(acalabrutinib)(Btk)、阿新尼布(Bcr-Abl)、氟马替尼(flumatinib)(Abl)、赞布替尼(zanubrutinib)(Btk)、鲁索替尼(ruxolitinib)(JAK)、伊他新替尼(itacitinib)(JAK)、帕奎替尼(pacritinib)(JAK)、莫莫替尼(momelotinib)(JAK)、INCB-52793(JAK)、古萨新替尼(gusacitinib)(JAK/SYK)、伊吉那替尼(ilginatinib)(JAK)、瑟杜拉替尼(cerdulatinib)(Syk、JAK)、菲珠替尼(fedratinib)(TG-101348)(Flt3、Jak2、RET)、坦度替尼(tandutinib)(Flt3、KIT、PDGF)、培西达替尼(pexidartinib)(KIT、Flt3)、米哚妥林(midostaurin)(Flt3、KIT、PKC)、凑替拉卡赛里(zotiraciclib)(FLT3)、艾乐替尼(alectinib)(ALK)、克唑替尼(crizotinib)(ALK)、色瑞替尼(ceritinib)(ALK)、劳拉替尼(lorlatinib)(ALK、Ros1)、恩曲替尼(entrectinib)(ALK、Ros1、TRK)、马赛替尼(masitinib)(多重激酶)、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、威罗非尼(vemurafenib)(PLX4032或RG7204)、达拉非尼(dabrafenib)、恩口拉非尼(encorafenib)、瑞格拉非尼(regorafenib)(BAY-73-4506)(FGFR3、KIT)、司美替尼(selumetinib)(AZD6244)、曲美替尼(trametinib)(GSK121120212)、滨美替尼(binimetinib)(BRAF、MEK)、考比替尼(cobimetinib)(MEK)、米达替尼(mirdametinib)(PD325901)(MEK)、拉发霉替尼(refametinib)(MEK)、优泼塞替(uprosertib)(AKT、MEK)、匹马塞替(pimasertib)(MEK)、达克里斯(dactolisib)(BEZ235)、布巴里斯(buparlisib)(BKM-120；NVP-BKM-120)、奥佩里斯(alpelisib)(BYL719)(PI3)、寇帕里斯(copanlisib)(BAY-80-6946)、帕萨里斯(paxalisib)(PI3K/mTOR/AKT通路)、S-49076(多重激酶)、瑞哥塞替(rigosertib)(多重激酶)、瑞巴替尼(rebastinib)(多重激酶)、ZSTK-474、非美司他(fimepinostat)(CUDC-907)(PI3K和HDAC)、阿碧托里斯(apitolisib)(GDC-0980；RG-7422)、皮克提里斯(pictilisib)(GDC-0941、RG-7321、GNE-477)、艾代拉里斯(idelalisib)(以前被称为CAL-101、GS 1101、GS-1101、IC87114)、塞拉贝里斯(serabelisib)(MLN1117、INK1117)(PI3K)、萨帕尼塞替(sapanisertib)(MLN0128(INK128))、杜维里斯(duvelisib)(IPI-145、INK1197)(PI3K)、依帕塔塞替(ipatasertib)(GDC-0068)、阿芙拉塞替(afuresertib)、MK-2206、MK-8156、SKLB-1028、LY294002、SF1126或PI-103、搜诺里斯(sonolisib)(PX-866)、GSK1059615(PI3K)、皮拉瑞里斯(pilaralisib)(XL147)(PI3K)；SF-1126(多重激酶)或AT13148或pan-Raf抑制剂，如PLX8394、RAF-265，或其它信号转导抑制剂，如mTOR抑制剂，包含西罗莫司(temsirolimus)、依维莫司(everolimus)(RAD 001)和RAS抑制剂，如AMG-510、LY-3499446、MRTX-849或ARS-3248，或异戊二烯基转移酶抑制剂，如安卓奎诺尔(antroquinonol)；
XVIII.有丝分裂激酶抑制剂，如极光激酶抑制剂，例如AT9283、巴拉塞替(barasertib)(AZD1152)、达鲁色替(danusertib)(PHA-739358)、阿利色替(alisertib)(MLN-8237)或CYC-116，或PLK(polo样激酶抑制剂)，如PLK-1或PLK-4，包含瑞哥塞替、安范塞替(onvansertib)、CYC-140、GSK-461364、CFI-400945或沃拉塞替(volasertib)；
XIX.CDK抑制剂，例如AT7519、劳斯考文汀(roscovitine)、塞利西利(seliciclib)、阿洛西迪布(alvocidib)(夫拉平度(flavopiridol))、玻玛西林(abemaciclib)、地那昔利布(dinaciclib)(SCH-727965)、7-羟基星形孢菌素(UCN-01)、JNJ-7706621、PHA533533、ZK-304709、凑替拉卡赛里或AZD-5438，包含CDK4抑制剂，如帕博西尼(palbociclib)(PD332991)、玻玛西林、地那昔利布、勒罗西利布(lerociclib)、特拉西利布(trilaciclib)或瑞博西利布(ribociclib)(LEE-011)；
XX.PI3K/AKT通路抑制剂，包含PKA/B和/或PKB(akt)抑制剂、PI3K抑制剂、mTOR抑制剂和/或钙调蛋白抑制剂(叉头易位抑制剂)，例如PI3K抑制剂，如阿哌利塞(apitolisib)、布帕尼西(buparlisib)、库潘尼西(copanlisib)、皮克立西(pictilisib)、达托里昔布(dactolisib)、艾代拉里斯(idelalisib)、色雷利塞(serabelisib)、达维利西(duvelisib)、依帕塔塞替、阿博利布(alpelisib)、阿芙拉塞替、帕萨里斯、搜诺里斯、皮拉里昔布(pilaralisib)、非美司他(CUDC-907)、SKLB-1028、GSK1059615(PI3K)、ZSTK-474、GSK-2636771、萨摩托里斯(samotolisib)(LY-3023414)、LY294002、SF1126和PI-103，mTOR抑制剂，如西罗莫司(最初称为雷帕霉素(rapamycin))和雷帕霉素类似物，如RAD 001(依维莫司)、CCI779(替西罗莫司(temsirolemus))、AP23573和地磷莫司(ridaforolimus)、或沙帕色替(sapanisertib)(MLN0128(INK128)、mTOR复合物I(mTORCI)和mTORC2的双重抑制剂、PKA/B(或C)抑制剂，例如哌立福辛(perifosine)、依帕塔塞替、优泼塞替、阿芙拉塞替、MK-2206、MK-8156、AT13148、卡皮法塞替(AZD5363)、曲西瑞滨(triciribine)、恩扎妥林(Enzastaurin)、XL-418、GSK-690693或RX-0201；
XXI.ERK抑制剂包含尤里塞替尼(ulixertinib)、ASTX029、LY3214996、LTT462、MK-8353、SCH772984、AZD-0364、ASN-007或KO-947；
XXII.Hsp90抑制剂，例如欧娜莱斯布(onalespib)(AT13387)、除莠霉素(herbimycin)、格尔德霉素(herbimycin)(GA)、17-烯丙氨基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)，例如NSC-330507、Kos-953和CNF-1010、17-二甲氨基乙基氢氯化物-17-去甲氧基格尔德霉素盐酸盐(17-DMAG)，例如NSC-707545和Kos-1022、NVP-AUY922(VER-52296)、NVP-BEP800、CNF-2024(BIIB-021，口服嘌呤)、阿螺旋霉素(allvespimycin)、甘乃特斯皮布(ganetespib)(STA-9090)、SNX-5422(SC-102112)或IPI-504或皮米特斯皮(pimitespib)；
XXIII.单克隆抗体(未缀合的或与放射性同位素、毒素或其它试剂，例如细胞毒性抗癌剂，如抗体药物缀合物缀合)、抗体衍生物、双特异性抗体和“抗体样”治疗性蛋白(如
Figure BDA0003499997860001011
或Fab衍生物)或其它治疗性蛋白和相关药剂，如抗CD、抗VEGFR、抗HER2或抗EGFR抗体，例如利妥昔单抗(rituximab)(CD20)、奥法木单抗(ofatumumab)(CD20)、替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)(CD20)、GA101(CD20)、托西莫单抗(tositumomab)(CD20)、维妥珠单抗(veltuzumab)(CD20)、依帕珠单抗(epratuzumab)(CD22)、林妥珠单抗(lintuzumab)(CD33)、吉妥单抗(gemtuzumabozogamicin)(CD33)、阿仑珠单抗(alemtuzumab)(CD52)、加利昔单抗(galiximab)(CD80)、曲妥珠单抗(trastuzumab)(HER2抗体)、帕妥珠单抗(pertuzumab)(HER2)、曲妥珠单抗-DM1(HER2)、阿多曲妥珠单抗美坦新(ado-trastuzumab emtansine)、伐目曲妥珠单抗特瑞科斯坦卡(fam-trastuzumab deruxtecan)、艾图单抗(ertumaxomab)(HER2和CD3)、西妥昔单抗(cetuximab)(EGFR)、马妥珠单抗(matuzumab)(EGFR)、帕尼单抗(panitumumab)(EGFR)、耐昔妥珠单抗(necitumumab)(EGFR)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)(EGFR)、扎鲁木单抗(zalutumumab)(EGFR)、贝伐珠单抗(bevacizumab)(VEGF)、雷莫芦单抗(ramucirumab)(VEGFR)、卡妥单抗(catumaxumab)(EpCAM和CD3)、阿巴伏单抗(abagovomab)(CA125)、法鲁珠单抗(farletuzumab)(叶酸受体)、埃罗妥珠单抗(elotuzumab)(CS1)、地诺单抗(denosumab)(RANK配体)、芬妥木单抗(figitumumab)(IGF1R)、CP751,871(IGF1R)、马帕木单抗(mapatumumab)(TRAIL受体)、metMAB(met)、米妥莫单抗(mitumomab)(GD3神经节苷脂)、纳图莫单抗斯它酚多(naptumomab estafenatox)(5T4)、司妥昔单抗(siltuximab)(IL6)、扎诺米单抗(zanolimumab)(CD4)、SGN40(CD40)、非拉妥组单抗(ficlatuzumab)(抗HGF)、博纳吐单抗(blinatumomab)(CD3调节剂；B淋巴细胞抗原CD19调节剂)、他法西他单抗(tafasitamab-cxix)(CD19)、本妥昔单抗(brentuximab vedotin)(CD30)、达雷木单抗(daratumumab)(IgG1κ抗体)、莫西姆单抗(moxetumomab)、雷珠单抗(ranibizumab)(抗VEGF)、恩福单抗(enfortumab vedotin)、沙丘珠单抗(sacituzumab govitecan)、奥比妥珠单抗(obinutuzumab)(CD20)、奥英妥珠单抗(inotuzumab ozogamicin)(CD22)、贝兰他单抗莫福(belantamab mafodotin)、布伦妥昔单抗(brentuximab vedotin)(CD30)、奥比妥珠单抗(obinutuzumab)(CD20)、莫加木珠单抗(mogamulizumab)(CCR4)、维波达单抗(polatuzumab vedotin)(CD79b)、伊萨图昔单抗(isatuximab)(CD38)、地妥昔单抗(dinutuximab)(GD2)、奥拉曲单抗(olaratumab)(IMC 3G3、PDGF mAb)、玛格妥昔单抗(margetuximab)、抗FGFR MAb(IMC-D11)、抗PDGF受体-βmAb(1B3)、阿柏西普(aflibercept)(AVE-0005)(VEGF陷阱)或免疫调节抗体，包含检查点抑制剂或药剂，如CTLA-4阻断抗体和/或针对PD-1和PD-L1和/或PD-L2的抗体，例如伊匹单抗(ipilimumab)(CTLA4)、MK-3475(派姆单抗(pembrolizumab)，原名兰伯丽珠单抗(Lambrolizumab)，抗PD-1)、纳武单抗(nivolumab)(抗PD-1)、BMS-936559(抗PD-L1)、MPDL320A、AMP-514或MEDI4736(抗PD-L1)或曲美木单抗(tremelimumab)(原名替西利姆单抗(ticilimumab)，CP-675,206，抗CTLA-4)；阿特珠单抗(atezolizumab)(抗PDL1)、度伐单抗(durvalumab)(抗PDL1)、阿维鲁单抗(avelumab)(抗PDL1)、西米普利单抗(cemiplimab)(抗PD-1)、匹地珠单抗(pidilizumab)(抗PD-1)；PDR-001(抗PD-1)、斯巴达珠单抗(spartalizumab)(抗PD-1)、益普索单抗(ipilumumab)(抗CTLA-4)、阿巴西普(abatacept)(抗体片段和与CTLA-4的缀合物)、抗LAG3，如瑞拉利单抗(relatlimab)、LAG-525、TSR-033、IBI-110或FS-118和抗OX40(CD134)药剂，例如MOXR0916、MEDI6469、PF-04518600、MEDI0562、BMS986178、ISB-830、KY-1005或INCAGN-1949；
XXIV.雌激素受体拮抗剂或选择性雌激素受体调节剂(SERM)或雌激素合成抑制剂，例如他莫昔芬(tamoxifen)、氟维司群(fulvestrant)、托瑞米芬(toremifene)、屈洛昔芬(droloxifene)、法洛德(faslodex)、雷洛昔芬(raloxifene)或酮昔芬(keoxifene)；
XXV.芳香酶抑制剂和相关药物，如依西美坦(exemestane)、阿那曲唑(anastrozole)、来曲唑(letrozole)、睾内酯氨基鲁米特(testolactoneaminoglutethimide)、米托坦(mitotaneor)或伏洛唑(vorozole)；法卓唑(fadrozole)、利罗唑(liarozole)、阿他美坦(atamestane)、福美坦(formestane)、右旋氨基鲁米特(dexaminoglutethimide)或三氯司坦(trilostane)；
XXVI.抗雄激素(即，雄激素受体拮抗剂)和相关药剂，例如比卡鲁胺(bicalutamide)、尼鲁他胺(nilutamide)、氟他胺(flutamide)、环丙孕酮(cyproterone)、酮康唑(ketoconazole)、阿帕鲁胺(apalutamide)、达洛鲁胺(darolutamide)或恩杂鲁胺(enzalutamide)；
XXVII.激素和其类似物，如甲羟孕酮(medroxyprogesterone)、己烯雌酚(diethylstilbestrol)(又名乙芪酚)或奥曲肽(octreotide)；非那雄胺(finasteride)、氟氢可的松(fludrocortisone)、氟甲睾酮(fluoxymesterone)、阿佐昔芬(arzoxifene)、帕瑞肽(pasireotide)或伐普肽(vapreotide)；
XXVIII.类固醇，例如丙酸屈莫他酮(dromostanolone propionate)、醋酸甲地孕酮(megestrol acetate)、诺龙(nandrolone)(癸酸酯、苯丙酸酯)、氟甲雌酮(fluoxymestrone)、棉酚(gossypol)、卡甾酮(calusterone)、表甾烷醇(epitiostanol)或美匹司坦(mepitiostane)；
XXIX.甾体细胞色素P450 17α-羟化酶-17,20-裂解酶抑制剂(CYP17)，例如阿比特龙(abiraterone)；或法卓唑(fadrozole)；
XXX.促性腺激素释放激素激动剂或拮抗剂(GnRA)，例如阿巴瑞克(abarelix)、醋酸戈舍瑞林(goserelin acetate)、醋酸组瑞林(histrelin acetate)、醋酸亮丙瑞林(leuprolide acetate)、曲普瑞林(triptorelin)、布舍瑞林(buserelin)、地洛瑞林(deslorelin)；亮丙瑞林(leuprorelin)或那法瑞林(nafarelin)；
XXXI.糖皮质激素，例如泼尼松(prednisone)、泼尼松龙(prednisolone)或地塞米松(dexamethasone)；
XXXII.分化剂，例如类视黄醇(retinoids)、类维甲酸(rexinoids)、维生素D(vitamin D)或视黄酸(retinoic acid)和视黄酸代谢阻断剂(RAMBA)，例如维甲酸(accutane)、阿利维甲酸(alitretinoin)、贝沙罗汀(bexarotene)或维甲酸(tretinoin)；维甲酰酚胺(fenretinide)、异维A酸(isotretinoin)或RII视黄胺(RII retinamide)；
XXXIII.刺猬信号通路抑制剂，如格拉吉布(glasdegib)、维莫德吉(vismodegib)或索尼德吉布(sonidegib)；
XXXIV.脱氢酶抑制剂，如异柠檬酸脱氢酶抑制剂，包含依那昔布(enasidenib)、艾伏尼布(ivosidenib)、沃亚昔布(vorasidenib)、IDH-305、奥路塔昔布(olutasidenib)、DS-1001b、恩氟代尼(enfludenib)，二氢旋位酸脱氢酶抑制剂，包含拉弗尼莫司(laflunimus)、苯醌(brequinar)、ASLAN-003、AG-636、BAY-2402234或PTC-299；或丙酮酸脱氢酶抑制剂，如咪司他(devimistat)或KULA-18；
XXXV.输出蛋白1抑制剂，如塞利尼索(selinexor)、厄坦尼索(eltanexor)、沃尔第尼索(verdinexor)或弗莱泽尼索(felezonexor)；聚合酶抑制剂，如DNA或RNA聚合酶抑制剂，包含鲁比内替丁(lurbinectedin)；
XXXVI.法呢基转移酶抑制剂)，例如替比法尼(tipifarnib)；
XXXVII.染色质靶向疗法，如组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂，例如丁酸钠、辛二酰苯胺异羟酰胺酸(SAHA)、缩酚酸肽(FR 901228)、达西司他(dacinostat)(NVP-LAQ824)、R306465/JNJ-16241199、JNJ-26481585、曲古菌素A(trichostatin A)、伏立诺他(vorinostat)、衣原体(Chlamydocin)、A-173、JNJ-MGCD-0103、PXD-101、制牙菌素(apicidin)；贝立诺他(belinostat)、帕比司他(panobinostat)、罗米肽脂(romidepsin)、瑞米吉他(resminostat)、阿比西诺他(abexinostat)、恩替诺特(entinostat)、奎诺司他(quisinostat)、普西诺他(pracinostat)、替非诺司他(tefinostat)、莫西替诺(mocetinostat)、吉维诺司他(givinostat)或非美平他(fimepinostat)；
XXXVIII.靶向泛素-蛋白酶体通路的药物，包含蛋白酶体抑制剂，例如硼替佐米、卡非佐米(carfilzomib)、伊沙佐米(ixazomib)、马里左米(marizomib)(盐孢菌素a)、奥普罗佐米(oprozomib)、乌苯美塞(ubenimex)、CEP-18770MLN-9708或ONX-0912；NEDD8抑制剂；HDM2拮抗剂、艾达索林(idasanutlin)(RG7388)、HDM-201、KRT-232(AMG-232)、nutlin 3a、RG7112、CGM-097、ALRN-6924、Debio-0123、LY-3143921、MI-773(SAR405838)、米拉德美坦(milademetan)(DS-3032b)、APG-115或BI-907828或ASTX295或UBX0101；去泛素酶抑制剂(DUB)；泛素特异性蛋白酶抑制剂，如HBX-41108；
XXXIX.光动力学药物，例如卟啉钠(porfimer sodium)或替莫泊芬(temoporfin)；
XL.海洋生物衍生的抗癌剂，如曲布替丁(trabectidin)；
XLI.用于放射免疫疗法的放射性标记药物，例如使用β颗粒发射同位素(如碘-131、钇-90)或α颗粒发射同位素(如铋-213或锕-225)，例如替伊莫单抗(ibritumomab)、碘托西莫单抗(Iodine tositumomab)、α镭223；碘苯胍(iobenguane)或镏Lu 177多塔特；
XLII.端粒酶抑制剂，例如端粒抑素；
XLIII.基质金属蛋白酶抑制剂，例如巴蒂马斯塔(batimastat)、马里马司他(marimastat)、百武斯德他(prinostat)或酶特斯他(metastat)；
XLIV.重组干扰素(如干扰素-γ和干扰素α)和白介素(例如，白介素2)，例如阿地白介素(aldesleukin)、地尼白介素(denileukin diftitox)、干扰素α2a、干扰素α2b或聚乙二醇干扰素α2b；
XLV.选择性免疫应答调节剂，例如里多巴胺(thalidomide)或里多巴胺衍生物，如来那多胺(lenalidomide)；或泊马度胺(pomalidomide)(ENMD 0995、CC-4047)；
XLVI.治疗性疫苗，如西普鲁塞-T(Proveng)OncoVex、旁观内BCG活、mDC3疫苗、PEPIDH1M疫苗、T-VEC或IDH1靶向疫苗；
XLVII.细胞因子激活剂，包含哌替巴尼(picibanil)、罗默肽(romurtide)、西佐非仑(sizofiran)、病毒素(virulizin)或胸腺素(thymosin)；
XLVIII.细胞因子缀合物，如细胞因子-毒素缀合物，包含塔格索夫(tagraxofusp)；
XLIX.三氧化二砷；
L.G-蛋白偶联受体(GPCR)抑制剂，例如阿曲生坦(atrasentan)；
LI.酶，如L-天冬酰胺酶、聚乙二醇化酶、拉布立酶或聚乙二醇化酶；
LII.DNA修复抑制剂，如PARP抑制剂，例如奥拉帕尼(olaparib)、卢卡帕尼(rucaparib)、维利帕瑞布(veliparib)、阿尼帕瑞(iniparib)、INO-1001、AG-014699、ONO-2231；或他拉唑帕尼(talazoparib)；
LIII.死亡受体激动剂(例如，TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体)，如马帕姆单抗(mapatumumab)(原名HGS-ETR1)、康珠单抗(conatumumab)(原名AMG 655)、PRO95780、来沙木单抗(lexatumumab)、度拉纳明(dulanermin)、CS-1008、阿陂马单抗(apomab)或重组TRAIL配体，如重组人TRAIL/Apo2配体；
LIV.其它免疫疗法，如溶瘤病毒、如泰利莫齐拉赫帕雷溶瘤病毒(talimogenelaherparepvec)(T-VEC)；CAR-T细胞疗法，如抗CD-19CAR T细胞疗法，例如替萨根微核素(tisagenlecleucel)、轴突阿霉素(axicabtagene ciloleucel)、利索卡布他素(lisocabtagene)、阿德肯帕他素(idecabtagene)、布鲁克素他素(brexucabtageneautoleucel)(KTE-X19)；工程T细胞受体(TCR-T)治疗；TLR激动剂，如摩托利莫德(motolimod)、咪喹莫特(imiquimod)、瑞他特里莫特(rintatolimod)或瑞西喹莫特(resiquimod)或免疫检查点抑制剂，如PD-1/PD-L1抑制剂，例如拉替尼(lazertinib)、CA-170、CCX-4503、PCC0208025(BMS202)、GS-4224、INCB-086550或RRx-001；
LV.细胞死亡(凋亡)调节剂，包含Bcl-2(B细胞淋巴瘤2)拮抗剂，如维奈托克试剂(venetoclax)(ABT-199或GDC-0199)、ABT-737、ABT-263、TW-37、沙布托克(sabutoclax)、奥布托克(obatoclax)和MIM1和IAP拮抗剂，包含LCL-161(诺华试剂(Novartis))、Debio-1143(德铂菲玛(Debiopharma)/阿森纳(Ascenta))、AZD5582、比里纳潘特(Birinapant)/TL-32711(四联症(TetraLogic))、CUDC-427/GDC-0917/RG-7459(Genentech)、JP1201(Joyant)、T-3256336(Takeda)、GDC-0152(Genentech)、ASTX660或HGS-1029/AEG-40826(HGS/Aegera)；和髓细胞白血病-1(MCL-1是BCL2家族的成员)抑制剂，包含AMG-176、MIK665和S63845；
LVI.基因修饰符或编辑器，如CRISPR/Cas9、锌指核酸酶或合成核酸酶或TALEN；
LVII.溴结构域抑制剂，包含BET抑制剂，如GSK525762、GSK2820151、OTX-015/MK-8628、BMS-986158、CPI-0610、RO6870810/TEN-010、RVX000222、FT-1101、ABBV-075、BAY1238097、INCB054329、INCB057643、PLX51107或ZEN003694；
LVIII.用于根治性、姑息性或预防性目的(或用于辅助或新辅助目的)的放射疗法；和/或
LIX.预防剂(辅助剂)；即减少或缓解与化学疗法药剂相关的一些副作用的药剂，例如
a)止吐剂；
b)防止或缩短化学疗法相关的中性粒细胞减少症持续时间并防止因血小板、红细胞或白细胞水平降低而引起的并发症的药剂，例如白细胞介素-11(例如奥普瑞白介素)、促红细胞生成素(EPO)(例如，依泊汀α(epoetin alfa)、依泊汀β(epoetin beta))或其类似物(如达贝泊汀α)、集落刺激因子类似物，如粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)(例如，沙格司亭(sargramostim))或粒细胞集落刺激因子(G-CSF)或其类似物(例如，斐格司汀(filgrastim)、聚乙二醇斐格司汀(pegfilgrastim)、勒诺格司汀(lenograstim)、里瑞地司汀(leridistim)、米利莫司汀(mirimostim)、莫格兰莫司汀(molgramostim)、那托司亭(nartograstim))；
c)抑制骨吸收的药剂，例如狄诺塞麦(denosumab)或双膦酸盐，例如唑来膦酸(zoledronate)、唑来膦酸(zoledronic acid)、帕米膦酸(pamidronate)或伊班膦酸(ibandronate)；
d)抑制炎性应答的药剂，如地塞米松、泼尼松或泼尼松龙；
e)用于降低患有肢端肥大症或其它罕见激素产生肿瘤的患者的生长激素和IGF-I(和其它激素)的血液水平的药剂，例如激素生长抑素激素的合成形式，例如醋酸奥曲肽兰瑞肽(octreotide acetate lanreotide)；
f)降低叶酸水平的药物的解毒剂，如甲酰四氢叶酸(leucovorin)或亚叶酸(folinic acid)；
g)止痛剂，例如阿片类，如吗啡(morphine)、二吗啡(diamorphine)或芬太尼(fentanyl)；
h)非甾体抗炎药(NSAID)，如COX-2抑制剂，例如塞来昔布(celecoxib)、依托考昔(etoricoxib)或罗美昔布(lumiracoxib)；
i)用于粘膜炎的药剂，例如帕利夫明(palifermin)；
j)调节抗癌药物的代谢的药剂，即PK增强剂，例如P450(例如3A4抑制剂)，如共比司他(cobicistat)、或胞苷脱氨酶抑制剂(例如泽布拉林(zebularine)、四氢尿嘧啶或西达尿嘧啶)或胸腺嘧啶磷酸化酶抑制剂(例如替吡拉西尔(tipiracil))；和/或
k)用于治疗副作用，包含厌食、恶病质、水肿或血栓栓塞发作的药剂，如醋酸甲地孕酮。
在一个实施例中，式I化合物与如上文所描述的RAS-MAPK通路抑制剂，如BRAF抑制剂、RAF抑制剂、MEK抑制剂或ERK抑制剂组合。
本发明的组合中存在的每种化合物可以以单独不同的剂量方案和通过不同的途径给予。因此，两种或更多种药剂中的每种药剂的剂量学可以不同：每种药剂可以同时或在不同时间施用。本领域技术人员将通过他或她的公知常识了解要使用的给药方案和组合疗法。例如，本发明的化合物可以与根据其现有组合方案施用的一种或多种其它药剂组合使用。下面提供了标准组合方案的实例。
在式(I)化合物以与一种、两种、三种、四种或更多种其它治疗剂(通常一种或两种治疗剂，更通常一种治疗剂)的组合疗法施用时，所述化合物可以同时或依次施用。在后一种情况下，两种或多种化合物将在一段时间内以足以确保实现有利或协同效应的量和方式施用。在一个实施例中，将式(I)化合物施用于接受用一种或多种治疗性化合物治疗的患者。应当理解，典型的施用方法和顺序以及组合的每个组分的相应剂量和方案将取决于所施用的本发明的特定其它药剂和化合物、其施用途径、所治疗的特定肿瘤和所治疗的特定宿主。
本领域技术人员可以确定根据本发明的化合物和一种或多种其它抗癌剂作为组合给予时的重量比。所述比率以及确切的施用剂量和频率取决于根据本发明的特定化合物和所使用的其它抗癌剂、所治疗的特定病状、所治疗病状的严重程度、年龄、体重、性别、饮食、施用时间和特定患者的一般身体状况、施用方式以及个体可能服用的其它药物，如本领域技术人员众所周知的。此外，很明显，可以降低或增加有效日剂量，这取决于所治疗的受试者的应答和/或取决于开出本发明化合物的医生的评价。
本发明的化合物还可以与合适的标准化学疗法方案组合施用，这可以由本领域技术人员确定(例如，如《JCO临床癌症通知(JCO Clin Cancer Inform)》4:60-70中所描述的)，包含例如PC(紫杉醇和卡铂)、FR(氟达拉滨和利妥昔单抗)、CHOP(环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松)、CVP(环磷酰胺、长春新碱和泼尼松)、FCM(氟达拉滨、环磷酰胺和米托蒽醌、FCR(氟达拉滨、环磷酰胺、利妥昔单抗)、hyperCVAD(超分次环磷酰胺、长春新碱、多柔比星、地塞米松、甲氨蝶呤和阿糖胞苷)、ICE(异磷酰胺、卡铂和依托泊苷)、MCP(米托蒽醌、苯丁酸氮芥和泼尼松龙)、R-CHOP(利妥昔单抗加CHOP)、RCVP(利妥昔单抗加CVP)、R-FCM(利妥昔单抗加FCM)、R-ICE(利妥昔单抗-ICE)、ICE-V(ICE加长春新碱)、R-MCP(利妥昔单抗-MCP)或FOLFOX或FLOX(亚叶酸、氟尿嘧啶和奥沙利铂)。
本发明的化合物也可以与非化学疗法，如放射疗法、光动力学疗法、基因疗法、外科手术和饮食控制组合施用。放射治疗可以用于根治性、姑息性、辅助性、新辅助性或预防性目的。
本发明化合物还具有用于放射疗法和化学疗法的肿瘤细胞增敏的治疗应用。因此，本发明的化合物可以用作“放射增敏剂”和/或“化学增敏剂”或可以与另一种“放射增敏剂”和/或“化学增敏剂”组合给予。在一个实施例中，本发明化合物用作化学增敏剂。
术语“放射增敏剂”被定义为以治疗有效量施用于患者以增加细胞对电离辐射的敏感性和/或促进可用电离辐射治疗的疾病的治疗的分子。
术语“化学增敏剂”被定义为以治疗有效量施用于患者以增加细胞对化学疗法的敏感性和/或促进可用化学疗法治疗的疾病的治疗的分子。
许多癌症治疗方案目前使用放射增敏剂与X射线辐射组合。X射线活化的放射增敏剂的实例包含但不限于以下：甲硝唑、米索硝唑、去甲基米索硝唑、哌莫硝唑、依他硝唑、尼莫唑、丝裂霉素C、RSU 1069、SR 4233、EO9、RB 6145、烟酰胺、5-溴脱氧尿苷(BUdR)、5-碘脱氧尿苷(IUdR)、溴脱氧胞苷、氟脱氧尿苷(FudR)、羟基脲、顺铂和其治疗有效的类似物和衍生物。
癌症的光动力疗法(PDT)使用可见光作为增感剂的放射活化剂。光动力放射增敏剂的实例包含但不限于以下：血卟啉衍生物、光敏蛋白、苯并卟啉衍生物、锡卟啉、脱镁硼化物-a、细菌叶绿素-a、萘酞菁、酞菁、锌酞菁和其治疗有效的类似物和衍生物。
放射增敏剂可以与治疗有效量的一种或多种其它化合物组合使用，包含但不限于：促进放射增敏剂掺入靶细胞的化合物；控制治疗剂、营养物和/或氧气流向靶细胞的化合物；在有或没有额外辐射的情况下作用于肿瘤的化学治疗剂；或用于治疗癌症或其它疾病的其它治疗有效化合物。
化学增敏剂可以与治疗有效量的一种或多种其它化合物组合使用，包含但不限于：促进化学增敏剂掺入靶细胞的化合物；控制治疗剂、营养物和/或氧气流向靶细胞的化合物；作用于肿瘤的化学治疗剂；或用于治疗癌症或其它疾病的其它治疗有效化合物。发现钙拮抗剂，例如维拉帕米可与抗肿瘤剂组合使用，以在对所接受的化学治疗剂有抗性的肿瘤细胞中建立化学敏感性并增强此类化合物在药物敏感性恶性肿瘤中的功效。
对于与另一种化学治疗剂的组合疗法的用途，式(I)化合物和一种、两种、三种、四种或更多种其它治疗剂可以例如一起调配成含有两种、三种、四种或更多种治疗剂的剂型，即含有所有组分的单一药物组合物。可替代地，单独的治疗剂可以单独调配并以试剂盒的形式一起存在，任选地附有所述试剂盒的使用说明。
在一个实施例中，本发明进一步提供了一种组合药物，其中式(I)化合物和至少一种或多种治疗剂物理结合。在一个实施例中，式(I)化合物和至少一种或多种治疗剂：(a)混合；(b)化学/物理化学连接；(c)化学/物理化学共包装；(d)未混合但共包装或共存在。
在另一个实施例中，式(I)化合物和至少一种或多种治疗剂非物理结合。在另一个实施例中，这任选地进一步包含(a)关于式(I)化合物与至少一种或多种治疗剂的临时结合以形成两种或更多种化合物的物理结合的说明；(b)与式(I)化合物和至少一种或多种治疗剂的组合疗法的说明；或(c)对患者群体的施用说明。
当单个的药剂以试剂盒的形式存在时，所述试剂盒可以包括两种或更多种单独的药物组合物：式(I)化合物和一种或多种另外的药物化合物。试剂盒可以包括用于容纳单独的组合物的容器，如分开的瓶或分开的箔包装。容器的额外实例包含注射器、盒子和袋子。在一些实施例中，试剂盒包括使用单独组分的说明。当分开的组分优选地以不同的剂型(例如口服和肠胃外)施用，以不同的剂量间隔施用，或当开处方的卫生保健专业人员需要滴定组合的单个的组分时，试剂盒形式是特别有利的。
在另外的实施例中，本发明提供了如本文所定义的化合物的组合和另一种治疗剂，例如如上所定义的另一种治疗剂。
在另一个实施例中，本发明提供了一种药物组合物，其包括如本文所定义的化合物以及药学上可接受的载体和一种或多种如上所定义的治疗剂。
在一个实施例中，药物组合物包括式I化合物以及药学上可接受的载体和任选地一种或多种治疗剂。
在另一个实施例中，本发明涉及根据本发明的组合在制备用于抑制肿瘤细胞生长的药物组合物中的用途。
在另外的实施例中，本发明涉及作为用于同时、分开或依次用于治疗患有癌症的患者的组合制剂的含有式I化合物和一种或多种抗癌剂的产物。
在另一个实施例中，本发明涉及用于治疗本文所定义的疾病或病状的式(I)化合物，其中患者正在接受用一种或多种其它治疗性化合物进行的治疗。
实例
现在将通过参考以下实例中所描述的具体实施例来说明但不限制本发明。例如，使用IUPAC规则、使用自动命名包，如AutoNom(MDL)对化合物进行命名，或由化学品供应商对化合物进行命名。在实例中，使用了以下缩写。
AcOH 乙酸
Aq. 水溶液
B2pin2 双(频哪醇)二硼
Boc 叔丁氧基羰基
BuLi 丁基锂
Cbz 羧基苄基
DCE 1,2-二氯乙烷
DCM 二氯甲烷
DIPEA N,N-二异丙基乙胺
DMF N,N-二甲基甲酰胺
DMP 戴斯-马丁高碘烷
DMSO 二甲基亚砜
Et3N 三乙胺
EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
Et2O 二乙醚
Et3SiH 三甲基甲硅烷基
HOAt 1-羟基氮杂苯并三唑
HPLC 高压液相色谱法
IPA 异丙醇
KOtBu 叔丁醇钾
LED 发光二极管
MeCN 乙腈
MeOH 甲醇
Min 分钟
MS 质谱分析法
NaBH(OAc)3 三乙酰氧基硼氢化钠
NaOEt 乙醇钠
NaOtBu 叔丁醇钠
NBS N-溴代琥珀酰亚胺
NMP N-甲基-2-吡咯烷酮
NMR 核磁共振光谱法
Pd/C 碳负载钯
Pd2(dba)3 三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
Pd(OAc)2 乙酸钯(II)
Pd(PPh3)4 四(三苯基膦)钯(0)
石油 沸点范围为40-60℃的石油醚馏分
RT 室温
Sat 饱和的
SEM 2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基
SiO2 二氧化硅
TBAF 四丁基氟化铵
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
TMBE 叔丁基甲基醚
TLC 薄层色谱法
TMSOTf 三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯
合成方法
所有起始材料和溶剂均从商业来源获得或根据文献引用制备。除非另有说明，否则所有反应都进行搅拌。常规地，有机溶液经无水硫酸镁干燥。在Parr氢化器、Thales H-立法体流动反应器上在所述条件下或在氢气球下进行氢化。在CEM Discover和Smithcreator微波反应器中、使用可变功率微波辐射加热至恒定温度进行微波反应。常规地，在自动快速色谱法系统，如CombiFlash Companion或CombiFlash RF系统上使用预包装的二氧化硅(230-400目，40-63μm)盒进行正相柱色谱法。SCX购自Supelco并在使用前用1M盐酸处理。除非另有说明，否则要纯化的反应混合物首先用MeOH稀释并用几滴AcOH酸化。将此溶液直接装载到SCX上并用MeOH洗涤。然后通过用溶剂，如含1％NH3的MeOH洗涤来将期望的材料洗脱。用Strata NH2(55μm，
Figure BDA0003499997860001121
)柱进行NH2离子交换硅胶纯化，直接装载到NH2柱上，并用溶剂，如甲醇洗脱。
Figure BDA0003499997860001122
KP-NH SNAP硅胶柱购自
Figure BDA0003499997860001123
使用购自
Figure BDA0003499997860001124
的
Figure BDA0003499997860001125
SNAP Ultra C18硅胶柱进行反相纯化。
NMR数据
在400MHz的Bruker Avance III质谱仪、AL400(400MHz；由JEOL生产)、Mercury400(400MHz；由安捷伦科技有限公司(Agilent Technologies,Inc.)生产)、500MHz BrukerAvance III HD NMR质谱仪或Bruker Avance NEO NMR质谱仪(400MHz)上获取1H NMR光谱。使用氯仿-d、二甲基亚砜-d6或四甲基硅烷内部标准品的中心峰作为参考。对于NMR数据，在指定的质子数小于分子中的理论质子数的情况下，假定明显丢失的信号被溶剂和/或水峰模糊。另外，在质子NMR溶剂中获得质谱时，NH和/或OH质子与溶剂发生交换，并且因此通常不会观察到此类信号。
分析型和制备型LC-MS系统
分析型LC-MS系统和方法描述
在以下的实例中，使用下文所阐述的系统和操作条件通过质谱法对化合物进行表征。在存在同位素不同的原子并引用单个质量的情况下，针对化合物引用的质量为单同位素质量(即，35Cl；79Br等)。
岛津Nexera(Shimadzu Nexera)
HPLC系统： 岛津SIL-30AC自动取样器/2x岛津LC-30AD泵
质谱检测器： 岛津LCMS-2020单四极MS
第二检测器： 岛津SPD-M20A二极管阵列检测器
MS操作条件
Figure BDA0003499997860001131
安捷伦1290InfinityII-6130LC-MS系统
HPLC系统： 安捷伦1290Infinity II
质谱检测器： 安捷伦6130单四极
第二检测器： 安捷伦1290Infinity II二极管阵列检测器
MS操作条件
Figure BDA0003499997860001132
Figure BDA0003499997860001141
用沃特斯公司(Waters Corporation)制造的SQD在以下两种条件下交替测量LCMS质谱，并示出[M+H]+值。
MS检测：ESI阳性
UV检测：254nm
柱流动速率：0.5毫升/分钟
流动相：水/乙腈(0.1％甲酸)
注射体积：1μL
方法
柱：Acguity BEH，2.1×50mm，1.7μm
梯度：
Figure BDA0003499997860001142
制备型LC-MS系统和方法描述
制备型LC-MS是用于纯化有机小分子，如本文所述的化合物的标准且有效的方法。可以改变用于液相色谱法(LC)和质谱法(MS)的方法，以更好地分离粗材料并改进MS对样品的检测。制备型梯度LC方法的优化将涉及不同的柱、挥发性洗脱液和改性剂以及梯度。用于优化制备型LC-MS方法然后并且使用所述方法对化合物进行纯化的方法是本领域众所周知的。此类方法在Rosentreter U、Huber U.；制备型LC-MS中的最佳馏分收集；《组合化学杂志》2004；6(2),159-64和Leister W、Strauss K、Wisnoski D、Zhao Z、Lindsley C.,开发用于化合物文库的制备型纯化和解析分析的定制高通量制备型液相色谱法/质谱仪平台；《组合化学杂志》2003；5(3)；322-9中进行了描述。
下文描述了通过制备型LC-MS对化合物进行纯化的若干种系统，但本领域技术人员应当了解，可以使用对于所描述的那些系统和方法来说是替代性的系统和方法。根据本文所提供的信息，或使用替代性色谱系统，本领域技术人员可以通过制备型LC-MS对本文所描述的化合物进行纯化。
质量导向纯化LC-MS系统
制备型LC-MS是用于纯化有机小分子，如本文所述的化合物的标准且有效的方法。可以改变用于液相色谱法(LC)和质谱法(MS)的方法，以更好地分离粗材料并改进MS对样品的检测。制备型梯度LC方法的优化将涉及不同的柱、挥发性洗脱液和改性剂以及梯度。用于优化制备型LC-MS方法然后并且使用所述方法对化合物进行纯化的方法是本领域众所周知的。此类方法在Rosentreter U、Huber U.；制备型LC/MS中的最佳馏分收集；《组合化学杂志》2004；6(2),159-64和Leister W、Strauss K、Wisnoski D、Zhao Z、Lindsley C.,开发用于化合物文库的制备型纯化和解析分析的定制高通量制备型液相色谱法/质谱仪平台；《组合化学杂志》2003；5(3)；322-9中进行了描述。
下文描述了通过制备型LC-MS对化合物进行纯化的一种此类系统，但本领域技术人员应当了解，可以使用对于所描述的那些系统和方法来说是替代性的系统和方法。具体地，可以使用基于正相制备型LC的方法代替此处描述的反相方法。大多数制备型LC-MS系统使用反相LC和挥发性酸性改性剂，因为此方法对于小分子的纯化非常有效，而且洗脱液与正离子电喷雾质谱仪兼容。可替代地，使用其它色谱溶液，例如正相LC，可替代地，如上文所描述的分析方法中所概述的缓冲流动相、碱性改性剂等可以用于对化合物进行纯化。
安捷伦1260LC-MS制备型系统
硬件：
自动取样器：G2260A Prep ALS
泵：用于制备型流量梯度的2x G1361A Prep泵、用于泵送制备流量中的改性剂的G1311CQuat Pump VL和用于补充泵流的G1310B Iso泵
UV检测器：G1365C 1260MWD
MS检测器：G6120B四极杆LC-MS
馏分收集器：2x G1364B 1260FC-PS
G1968D有源分离器
软件：
安捷伦OpenLab C01.06
安捷伦MS操作条件：
Figure BDA0003499997860001161
柱：
1.沃特斯XBridge Prep C18 5m OBD 100×19mm
通常用于基于碳酸氢铵的方法
2.沃特斯SunFire Prep C18 OBD 5m 100×19mm
通常用于基于TFA的方法
3.沃特斯XBridge Prep苯基5m OBD 100×19mm
通常用于基于中性pH的乙酸铵的方法
4.Supelco Ascentis RP-胺5m 100×21.2mm
通常用于基于甲酸的方法
5.Phenomenex Synergi Fusion-RP 4m 100×21.2mm
通常用于基于甲酸的方法
洗脱液：
溶剂A：水
溶剂B：乙腈
溶剂C：可用改性剂的选择：
含2.5％三氟乙酸的水
水中含2.5％甲酸
含250mM碳酸氢铵的水，pH 9.4
250mM乙酸铵
补充溶剂：
90:10的甲醇:水+0.2％甲酸(针对所有色谱法类型)
方法：
根据分析迹线选择最合适的制备型色谱法类型。典型的例行程序是使用最适合化合物结构的色谱法类型(低或高pH)运行分析型LC-MS。一旦分析迹线示出良好的色谱，就选择合适的相同类型的制备型方法。低和高pH色谱法的典型运行条件是：
流动速率：25毫升/分钟
梯度：通常所有梯度都有0.4分钟的初始步长，其中95％A +5％B(在具有另外的改性剂C的情况下)。然后根据分析迹线选择6.6分钟的梯度以实现良好的分离(例如，针对早期保留化合物，B为5％到50％；针对中间保留化合物，B为35％到80％；以此类推)。
洗涤：在梯度结束时进行1.6分钟的洗涤步骤
补充流动速率：0.8毫升/分钟
溶剂：
所有化合物通常溶解在100％MeOH或100％DMSO中
根据所提供的信息，本领域技术人员可以通过制备型LC-MS对本文所描述的化合物进行纯化。
沃特斯Fractionlynx系统
硬件：
2767双回路自动取样器/馏分收集器
2525制备型泵
用于柱选择的CFO(柱流体组织器)
RMA(沃特斯试剂管理器)作为补充泵
沃特斯ZQ质谱仪
沃特斯2996光电二极管阵列检测器
沃特斯ZQ质谱仪
软件：
Masslynx 4.1
沃特斯MS运行条件：
Figure BDA0003499997860001181
可替代地，在以下条件下进行反相制备型HPLC柱色谱法。
Figure BDA0003499997860001182
安捷伦InfinityLabLC/MSD
使用维持在40℃的温度下并在4或15分钟内以2.5毫升/分钟的恒定流动速率用适于化合物的亲脂性的线性乙腈梯度洗脱的沃特斯X-Select CSH C18(2.5μm，4.6×30mm)或沃特斯X-Bridge BEH C18(2.5μm，4.6×30mm)进行LCMS分析。流动相的水相部分是0.1％甲酸(CSH C18柱)或10mM碳酸氢铵(BEH C18柱)。使用Agilent VWD或DAD检测器在254nm下记录LC-UV色谱图。使用具有正离子模式与负离子模式之间的切换的电喷雾电离的安捷伦MSD检测器记录质谱。调整样品浓度以得到足够的UV应答。
沃特斯AcquityQDa
使用维持在40℃的温度下并在3或10分钟内以0.77毫升/分钟的恒定流动速率用适于化合物的亲脂性的线性乙腈梯度洗脱的沃特斯Acquity CSH C18或BEH C18柱(2.1×30mm)进行UPLC/MS分析。流动相的水相部分是0.1％甲酸(CSH C18柱)或10mM碳酸氢铵(BEHC18柱)。使用沃特斯Acquity PDA检测器在210nm与400nm之间记录LC-UV色谱图。使用具有正离子模式与负离子模式之间的切换的电喷雾电离的沃特斯Acquity QDa检测器记录质谱。调整样品浓度以得到足够的UV应答。
非手性制备型色谱法
所描述的化合物实例已经过HPLC纯化，如果指出，使用按照如Snyder L.R.、DolanJ.W.,高性能梯度洗脱线性溶剂强度模型的实际应用(High-Performance GradientElution The Practical Application of the Linear-Solvent-Strength Model),威利父子出版公司,霍博肯,2007中所描述的建议开发的方法。
手性制备型色谱法
使用手性固定相(CSP)进行制备型分离是应用于对映体混合物分解的自然技术。同样，其可以应用于非对映异构体和非手性分子的分离。用于优化CSP上的制备型手性分离然后并且使用所述方法对化合物进行纯化的方法是本领域众所周知的。此类方法在Beesley T.E.、Scott R.P.W.；《手性色谱法(Chiral Chromatography)》；威利父子出版公司,奇切斯特,1998中进行了描述。
制备1：6-氯-3-碘-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪
Figure BDA0003499997860001191
步骤1：6-氯-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪
将6-氯-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(17.85g，113.7mmol)和TsOH.H2O(0.1当量)于THF(150mL)中的溶液在冰上冷却(内部温度约10℃)。在5分钟内缓慢添加二氢吡喃(20.6mL，227.4mmol)。将冷却浴去除，并将反应混合物搅拌90分钟。添加EtOAc(250mL)，并将有机相用饱和NaHCO3(150mL)、盐水洗涤，并且然后使其干燥(MgSO4)。对另外的17.8g重复此操作。将来自两次运行的有机层蒸发，以得到约55g橙色固体。添加TBME(40mL)和庚烷(400mL)，并将混合物加热至90℃，并且然后使其冷却。出现极少量棕色沉淀物，将所述棕色沉淀物通过过滤去除。搅拌滤液，直至产物结晶为止。通过过滤收集产物，以得到呈白色结晶固体的批次1(20g)。将滤液浓缩至约30mL，并且然后用庚烷(100mL)稀释，以诱导结晶。通过过滤收集批次2(15.8g，白色结晶固体)。MS：[M+H]+＝239。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.79(s,1H),8.61(s,1H),5.95(dd,J＝10.2,2.6Hz,1H),3.94(qd,J＝13.2,4.1,1.9Hz,1H),3.77-3.69(m,1H),2.49-2.41(m,1H),2.08-2.01(m,1H),1.95(dq,J＝13.0,3.5Hz,1H),1.86-1.72(m,1H),1.62-1.55(m,2H)。
步骤2：6-氯-1-(噁烷-2-基)-1H-4λ5-吡唑并[3,4-b]吡嗪-4-酮
将6-氯-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(18g，75.41mmol)溶解于MeCN(150mL)中并在冰上冷却。分批添加尿素过氧化氢复合物(14.9g，158.4mmol)。在15分钟内逐滴添加呈30mL的溶液(MeCN)形式的三氟乙酸酐(20.9mL，150.8mmol)，保持内部温度<10℃。将反应混合物在0-5℃下搅拌30分钟，并且然后在1小时内使其温热至室温。形成浓稠的沉淀物，并添加另外的50mL MeCN以使其流动。将混合物倒入4M硫代硫酸钠(100mL)、NaHCO3(50g固体)和冰冷水(300mL)的经搅拌混合物中。将混合物搅拌10分钟，并且然后添加DCM(300mL)。将DCM层分离，并用另外的DCM(2×100mL)萃取水层。将DCM层合并，并用水(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并蒸发至干。对另外的18g 6-氯-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪重复所述过程。将来自两次运行的粗产物合并，并由EtOAc(300mL)再结晶。通过过滤收集结晶材料，将所述结晶材料溶解于PhMe中并蒸发，以得到呈白色结晶固体的6-氯-1-(噁烷-2-基)-1H-4λ5-吡唑并[3,4-b]吡嗪-4-酮(11g，28％，作物1)。将滤液浓缩并溶解于热的EtOAc(40mL)中。添加庚烷(400mL)，并将混合物加热，直至所有材料溶解为止。使溶液冷却，并将产物结晶。通过过滤收集产物，将所述产物溶解于PhMe中并蒸发，以得到6-氯-1-(噁烷-2-基)-1H-4λ5-吡唑并[3,4-b]吡嗪-4-酮(18.46g，48％，作物2)。MS：[M+H]+＝255。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.70(s,1H),8.55(s,1H),5.91(dd,J＝10.1,2.6Hz,1H),4.01-3.91(m,1H),3.79-3.68(m,1H),2.45-2.34(m,1H),2.08-1.97(m,1H),1.93(dq,J＝13.1,3.6Hz,1H),1.86-1.73(m,1H),1.61-1.55(m,2H)。
步骤3：6-氯-5-甲基-1-(噁烷-2-基)1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪
在1小时15分钟内将甲基氯化镁(于二乙醚中3.0M)(163ml，489mmol)添加到在干冰/丙酮浴上冷却至-60℃(内部温度)的6-氯-1-(噁烷-2-基)-1H-4λ5-吡唑并[3,4-b]吡嗪-4-酮(41.5g，163mmol)于甲苯(833ml)中的溶液。将混合物在此温度下搅拌6小时，然后用饱和NH4Cl(400mL)淬灭，并用水(300mL)和EtOAc(300mL)稀释。将各相分离，并用EtOAc(2×300mL)萃取水相。将有机物合并，并用盐水(300mL)洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩，以得到呈红色固体的粗产物(38.6g)。在回流下将粗残留物溶解于乙腈(50mL)中。将溶液冷却到室温。通过过滤分离沉淀物，用异己烷(50mL)洗涤，以得到米色固体(约17g)。在回流下将固体(作物1)在乙腈(25mL)中再加热一次。将溶液冷却到室温，过滤粉棕色固体，用己烷(10mL)洗涤，并在40℃下在真空烘箱中干燥过夜，以得到呈粉棕色固体的标题化合物(11.92g)。MS:[M+H]+＝253,255。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.47(s,1H),5.91(dd,J＝10.2,2.6Hz,1H),3.97-3.88(m,1H),3.77-3.66(m,1H),2.70(s,3H),2.49-2.42(m,1H),2.06-2.00(m,1H),1.94(dq,J＝13.1,3.5Hz,1H),1.83-1.72(m,1H),1.61-1.55(m,2H)。
步骤4：6-氯-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪
将氯化氢(于1,4-二噁烷中4.0M)的溶液(128ml，513mmol)逐滴添加到6-氯-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(33.21g，131mmol)于甲醇(633ml)中的悬浮液中。将棕色混合物在室温下搅拌过夜。浓缩后，将残留物溶解于MeOH-CHCl3(1/1混合物；400mL)中，并且然后用NaHCO3水溶液(于400mL中55g)碱化。用MeOH-CHCl3(1/1混合物；4×400mL)萃取分离的水层。将有机物合并，用盐水(300mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩，以得到粗米色固体(28.5g)。将材料悬浮于异己烷(3×200mL)中，通过过滤收集，在40℃下在真空下干燥过夜，以得到呈米色固体的6-氯-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(20.73g，121mmol，92％产率)。MS:[M+H]+＝169。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ14.13(s,1H),8.41(s,1H),2.68(s,3H)。
步骤5：6-氯-3-碘-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪
将1-碘吡咯烷-2,5-二酮(55.3g，246mmol)添加到6-氯-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(20.73g，123mmol)于N,N-二甲基甲酰胺(409mL)中的溶液中。将混合物在50℃下搅拌6小时。将反应混合物缓慢添加到饱和硫代硫酸钠水溶液(400mL)和水(400mL)的快速搅拌混合物中。通过过滤收集沉淀物，并用水(3×200mL)和异己烷(100mL)洗涤。将固体溶解于THF(300mL)中，在Na2SO4上干燥，过滤，并在真空中浓缩，以得到呈奶油状固体(在真空烘箱中在40℃下干燥)的6-氯-3-碘-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(19.42g，64.6mmol，52.6％产率)。用EtOAc(3×400mL)萃取水层。将有机物合并，在Na2SO4上干燥，并在真空中浓缩，以得到棕红色油。添加水(200mL)。形成米色固体，将所述米色固体过滤并用水(2×200mL)洗涤。将固体在真空烘箱中在40℃下干燥。分离出呈米色固体的6-氯-3-碘-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(12.86g，41.5mmol，33.7％产率)。MS:[M+H]+＝295。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ14.49(s,1H),2.70(s,3H)。
步骤6：6-氯-3-碘-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪
将3,4-二氢-2H-吡喃(50mL，547mmol)和对甲苯磺酸一水合物(2.085g，10.96mmol)添加到6-氯-3-碘-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(32.28g，110mmol)于THF(647mL)中的溶液中。将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物在真空中在30℃下浓缩至体积的一半后，将混合物倒入NaHCO3(36.8g，438mmol)于水(300mL)中的溶液中。用EtOAc(200mL)萃取水层。将有机物合并，并用盐水(200mL)洗涤，在Na2SO4上干燥，过滤，并在真空中浓缩，以得到粉棕色固体，将所述粉棕色固体干载于硅胶上并通过硅胶色谱法(330g柱；梯度洗脱，0-100％，DCM/己烷)纯化，以得到白色固体(33.98g)。将固体悬浮于异己烷(100mL)中，并搅拌1小时，然后过滤，用异己烷(50ml)洗涤，并在真空烘箱中在40℃下干燥。分离出呈白色固体的6-氯-3-碘-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(31.29g，81mmol，73.9％产率)。MS:[M+H]+＝379。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ5.88(dd,J＝10.3,2.5Hz,1H),3.97-3.88(m,1H),3.77-3.66(m,1H),2.72(s,3H),2.47-2.37(m,1H),2.06-1.98(m,1H),1.94(dq,J＝13.0,3.4Hz,1H),1.83-1.71(m,1H),1.64-1.52(m,2H)。
制备2：6-氯-3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪
Figure BDA0003499997860001221
在0℃下在30分钟内将(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷(56.8ml，321mmol)添加到6-氯-3-碘-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(75g，267mmol)和DIPEA(93mL，535mmol)于THF(1118mL)中的溶液中。搅拌18小时后，将反应混合物在真空中浓缩成黄色溶液，将所述黄色溶液用饱和氯化铵(500mL)、然后用水(300mL)处理并用EtOAc(2×400mL)萃取。将合并的有机相浓缩，然后通过硅胶色谱法(1kg盒，0-10％EtOAc/异己烷)纯化，以得到成淡黄色固体(在真空烘箱中在40℃下干燥)的6-氯-3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪。MS：[M+H]+＝411。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ8.58(s,1H),5.79(s,2H),3.74-3.63(m,2H),1.00-0.89(m,2H),-0.03(s,9H)。
制备3：(6-氯-3-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇
Figure BDA0003499997860001231
向6-氯-3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(68.5g，165mmol)于甲醇(700mL)中的溶液中添加硝酸银(14g，82mmol)。将混合物加热至40℃，然后在30分钟内添加过硫酸钠(110g，462mmol)于水(210mL)中的溶液。将混合物在40℃下搅拌1小时，然后冷却。将混合物用碳酸钠(49.0g，462mmol)于水(2L)中的溶液小心稀释，并通过过滤收集沉淀物。用二氯甲烷:甲醇(9:1，1L)萃取滤饼，然后浓缩到松散硅胶(150g)上。将硅酸盐通过硅胶色谱法(1Kg，0-10％EtOAc/DCM)纯化，以得到呈白色固体的(6-氯-3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇(27.9g，60.8mmol，36.8％产率)。MS：[M+H]+＝441。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ5.73(s,2H),5.59(t,J＝6.0Hz,1H),4.80(d,J＝6.1Hz,2H),3.68-3.53(m,2H),0.91-0.79(m,2H),-0.09(s,9H)。
制备4：5-溴-4-氯-2-甲基-2H-吲唑
Figure BDA0003499997860001232
将亚硝酸钠(58.6g，0.85mol)于水(98ml)中的溶液在机械搅拌下添加到4-溴-3-氯-2-甲基苯胺(150g,0.68mol)于乙酸(3L)中的冰浴冷却溶液中，并将混合物在环境温度下老化1小时。将大部分溶剂蒸发，并将残余物悬浮于水(500mL)中并过滤，用水(250ml×4)、石油(250ml×4)洗涤，并在真空中在40℃下干燥，以得到5-溴-4-氯-1H-吲唑(130g)，1HNMR(400MHz,DMSO-d6):13.61(1H,s),8.16(1H,s),7.62(1H,d),7.53(1H,dd)。
将固体三甲基氧鎓四氟硼酸盐(258g，1.74mol)填装到冰浴冷却的5-溴-4-氯-1H-吲唑(367g，1.59mol)于EtOAc(1.9L)中的溶液中，并将所产生的混合物在环境温度下搅拌4小时。将反应混合物用石油(1.9L)稀释，并老化10分钟，然后过滤，用石油(400mL×2)洗涤。将滤饼与饱和碳酸氢钠(1.5L)、EtOAc(2L)合并，并将各相分离。将有机相用饱和碳酸氢钠洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩，以得到标题化合物(236g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.53(1H,s),7.56(1H,dd),7.48(1H,d),4.20(3H,s)。
制备5：5-溴-4-氯-2-乙基-2H-吲唑
Figure BDA0003499997860001241
将固体三乙基氧鎓六氟磷酸盐(20g，80.6mmol)添加到于EtOAc(186mL)中的5-溴-4-氯-1H-吲唑(12.4g，53.7mmol)中，并将所产生的混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用饱和碳酸氢钠(125ml)淬灭，并将各相分离。将水溶液用EtOAc(70mL)萃取，并将合并的有机物用盐水(70mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩。在乙醇(125ml)和EtOAc(125mL)中用活性炭(12.5g)处理红色/棕色残余物。在环境温度下搅拌后，将混合物过滤并在真空中浓缩，以得到标题化合物(9.88g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.58(1H,s),7.58(1H,dd),7.48(1H,d),4.49(2H,q),1.52(3H,t)。
制备6：5-溴-3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑
Figure BDA0003499997860001242
在0℃下向5-溴-4-氯-2-甲基-2H-吲唑(5g，20.3mmol)于DMF(50mL)中的溶液中添加NCS(2.99g，22.4mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。在室温下添加水(150mL)。将混合物在室温下搅拌1小时。收集沉淀物，用水洗涤，并在减压下在60℃干燥3小时，以得到标题化合物(5.63g)。MS：[M+H]+＝279,281。
制备7：5-溴-4-氯-2,3-二甲基-2H-吲唑
Figure BDA0003499997860001243
将正丁基锂(于己烷中2.5M，4mL，10.0mmol)添加到二异丙胺(1.5mL，10.5mmol)于THF(10mL)中的经冷却(-10℃)溶液中。将混合物搅拌10分钟，然后冷却至-78℃。向此溶液中添加5-溴-4-氯-2-甲基-2H-吲唑(2.0g，8.15mmo)于THF(10mL)中的溶液。将混合物温热至0℃持续10分钟，然后重新冷却至-78℃。添加碘甲烷(0.66mL，10.6mmol)，并将混合物在-78℃下搅拌1小时。将混合物用饱和NH4Cl水溶液(30mL)淬灭，并用EtOAc(3×30mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将粗产物通过硅胶柱色谱法(梯度洗脱，15-75％EtOAc/异己烷)纯化，以得到标题化合物(1.7g)。MS：[M+H]+＝259,261,263。
制备8：7-溴-2,8-二氯喹喔啉
Figure BDA0003499997860001251
步骤1：4-溴-3-氯-2-硝基苯胺
在2L三颈烧瓶中，用NBS(61.9g，348mmol)分批处理3-氯-2-硝基苯胺(60g，348mmol)于AcOH(600mL)中的溶液。将所产生的橙色溶液在80℃下加热1.5小时。将反应混合物冷却至室温并倒入搅拌的冰水(800mL)中。通过过滤收集所产生的橙色沉淀物，用水(200mL)洗涤。收集橙色残余物，并溶解于EtOAc(500mL)中。将溶液用MgSO4干燥，过滤，并将溶剂在真空中浓缩，以得到橙色固体(86.5g)。将残余物由10％EtOAc/异己烷(500mL)再结晶。将所产生的固体过滤，用异己烷(100mL)冲洗，并在真空中干燥，以得到淡橙色固体(39.88g，158.6mmol，46％)。将滤液在真空中浓缩，以得到橙色固体。将残余物由10％Ac/异己烷(250mL)再结晶。将所产生的固体过滤，用异己烷(50mL)冲洗，并在真空中干燥，以得到淡橙色固体(20g，79.53mmol，23％)。DMSO-d6中的1H NMR:(7.55(1H,d),6.84(1H,d),6.40(2H,s)。
步骤2：N-(4-溴-3-氯-2-硝基苯基)-N-[(叔丁氧基)羰基]氨基甲酸叔丁酯
在2L三颈烧瓶中，用二碳酸二叔丁酯(99g，452mmol)于THF(200mL)中的溶液在<10℃下(内部温度，冰浴)分批处理的4-溴-3-氯-2-硝基苯胺(59.88g，226mmol)于THF(400mL)中的溶液。分批添加N,N-二甲基吡啶-4-胺(2.76g，22.62mmol)，并将所产生的橙色溶液在室温下搅拌18小时。将反应混合物在真空中浓缩，以得到浅棕色固体。将残余物与异己烷(300mL)一起研磨。将所产生的固体过滤，用异己烷(50mL)冲洗，并在真空中干燥，以得到呈粘性无色固体的期望产物(97.5g，214mmol，94％产率)。CDCl3中的1H NMR:7.81(1H,d),7.16(1H,d),1.45(18H,s)。
步骤3：N-(4-溴-3-氯-2-硝基苯基)氨基甲酸叔丁酯
在2L三颈烧瓶中，用三氟乙酸(32.9g，427mmol)于DCM(250mL)中的溶液处理N-(4-溴-3-氯-2-硝基苯基)-N-[(叔丁氧基)羰基]氨基甲酸叔丁酯(97.5g，214mmol)于DCM(600mL)中的溶液。将所产生的橙色溶液在室温下搅拌0.5小时。将反应混合物用饱和的NaHCO3水溶液(300mL)淬灭至中性pH。将各相分离，并用DCM(2×100mL)萃取水层。将有机萃取物合并，并经MgSO4干燥，过滤，并在真空中浓缩，以得到呈淡橙色固体的N-(4-溴-3-氯-2-硝基苯基)氨基甲酸叔丁酯(75g，212mmol，99％产率)。CDCl3中的1H NMR:8.06(1H,d),7.72(1H,d),7.12(1H,s),1.53(9H,s)。
步骤4：2-[(4-溴-3-氯-2-硝基苯基)[(叔丁氧基)羰基]氨基]乙酸乙酯
在1L三颈烧瓶中，用2-溴乙酸乙酯(24.59ml，222mmol)于DMF(125mL)中的溶液在<10℃(内部温度，冰浴)下分批处理的N-(4-溴-3-氯-2-硝基苯基)氨基甲酸叔丁酯(75g，211mmol)和碳酸铯(138g，422mmol)于DMF(300mL)中的悬浮液。将所产生的橙色悬浮液在<10℃下搅拌0.5小时。将反应混合物在EtOAc(300mL)与水(300mL)之间分配。用EtOAc(2×200mL)萃取水层。将有机萃取物合并，并用饱和盐水(2×100mL)洗涤，并且然后经MgSO4干燥，过滤，并在真空中浓缩，以得到深橙色油(约100mL)。将深橙色油添加到经搅拌的水(200mL)中。通过过滤收集所产生的橙色沉淀物，用水(50mL)洗涤，并在真空中干燥，以得到橙色固体(107g，196mmol，93％产率)。DMSO-d6中的1H NMR:8.14(1H,d),7.57(1H,t),4.40-3.98(4H,m),1.41-1.15(12H,m)。
步骤5：2-[(4-溴-3-氯-2-硝基苯基)氨基]乙酸乙酯
在2L三颈烧瓶中，用三氟乙酸(75ml，978mmol)于DCM(200mL)中的溶液分批处理2-[(4-溴-3-氯-2-硝基苯基)[(叔丁氧基)羰基]氨基]乙酸乙酯(107g，196mmol)于DCM(600mL)中的溶液。将所产生的橙色溶液在室温下搅拌18小时。将反应混合物用饱和的NaHCO3水溶液(700mL)淬灭，然后缓慢分批添加固体NaHCO3(40g，476mmol)至中性pH。将各相分离，并用DCM(2×250mL)萃取水层。将有机萃取物合并，并用饱和盐水(1×150mL)洗涤，并且然后经MgSO4干燥，过滤，并在真空中浓缩，以得到呈淡橙色固体的2-[(4-溴-3-氯-2-硝基苯基)氨基]乙酸乙酯(77.47g，184mmol，94％产率)。DMSO-d6中的1HNMR:7.68(1H,d),6.78(1H,d),6.70(1H,t),4.12(2H,q),4.04(2H,d),1.20(3H,t)。
步骤6：7-溴-8-氯-1,2,3,4-四氢喹喔啉-2-酮
在2L三颈烧瓶中，用连二亚硫酸钠(71.2g，409mmol)于水(200mL)中的溶液在0℃(内部温度，冰浴)下分批处理的2-[(4-溴-3-氯-2-硝基苯基)氨基]乙酸乙酯(35.93g，96mmol)于THF(200mL)和MeOH(200mL)中的溶液。将所产生的橙色悬浮液在室温下搅拌2小时。将反应混合物用水(50mL)稀释，并缓慢分批添加固体碳酸钠(65g，613mmol)直至pH 9。将MeOH和THF在真空中去除，并用Me-THF(2×250mL)萃取水溶液。将有机萃取物合并，并用饱和盐水(1×150mL)洗涤，并且然后经MgSO4干燥，过滤，并在真空中浓缩，以得到呈粘稠绿色固体的7-溴-8-氯-3,4-四氢喹喔啉-2(1H)-酮(26.4g，96mmol，94％产率)。DMSO-d6中的1H NMR:9.93(1H,s),7.14(1H,d),6.63(1H,d),6.40(1H,br s),3.75(2H,s)。
步骤7：7-溴-8-氯喹喔啉-2-醇
在2L三颈烧瓶中，用叔丁醇钾(39.1g，349mmol)在<10℃下(内部温度，冰浴)分批处理的7-溴-8-氯-1,2,3,4-四氢喹喔啉-2-酮(60g，174mmol)于THF(425mL)和MeOH(425mL)中的溶液。将所产生的橙色悬浮液在空气流下在室温下搅拌18小时。添加水(200mL)，然后缓慢添加AcOH(50mL)。通过过滤收集所产生的橙色沉淀物，用水(100mL)洗涤，然后用TBME(50mL)洗涤，并在真空中干燥，以得到呈浅橙色固体的7-溴-8-氯喹喔啉-2-醇(41.81g，155mmol，89％产率)。DMSO-d6中的1H NMR:8.17(1H,s),7.69-7.55(2H,br s)。
步骤8：7-溴-2,8-二氯喹喔啉
在1L三颈烧瓶中，用三氯氧磷(36.2ml，388mmol)于MeCN(50mL)中溶液在N2下在50℃下逐滴处理7-溴-8-氯喹喔啉-2-醇(35g，129mmol)于MeCN(300mL)中的悬浮液。将所产生的棕色悬浮液在80℃下加热3小时，并且然后冷却至室温。将深棕色反应混合物在真空中浓缩，并通过与PhMe(250mL)共沸来去除POCl3。将棕色残余物溶解于MeCN(500mL)中，并通过缓慢添加到水(约30℃)中来淬灭混合物。添加EtOAc(500mL)，并将混合物过滤，从而获得深棕色固体。将粗固体溶解于EtOAc(200mL)中并与滤液合并。将各相分离。用EtOAc(3×200mL)萃取水层。将有机萃取物合并，并用饱和盐水(1×200mL)洗涤，并且然后经MgSO4干燥，过滤，并在真空中浓缩，以得到深橙色固体(34.52g，96％，粗产物)。将粗产物通过硅胶色谱法(330g盒，0-30％DCM/异己烷)纯化，以得到呈淡灰白色固体的7-溴-2,8-二氯喹喔啉(27.69g，99mmol，76％产率)。DMSO-d6中的1H NMR:9.13(1H,s),8.23(1H,d),8.08(1H,d)。
制备9：7-溴-8-氯-2-甲氧基喹喔啉
Figure BDA0003499997860001281
将7-溴-2,8-二氯喹喔啉(2g，7.12mmol)和碳酸钾(3.94g，28.5mmol)在100mL三颈烧瓶中合并于MeOH(40mL)中。将所产生的无色悬浮液在65℃(内部温度)下加热18小时。将反应混合物冷却至室温。添加水(150mL)，并将沉淀物过滤，以得到呈轻量无色固体的7-溴-8-氯-2-甲氧基喹喔啉(1.79g，6.48mmol，91％产率)。MS：[M+H]+＝275。DMSO-d6中的1H NMR:8.69(1H,s),8.00-7.89(2H,m),4.10(3H,s)。
制备10：7-溴-8-氯-N,N-二甲基喹喔啉-2-胺
Figure BDA0003499997860001282
在100mL三颈烧瓶中，用7-溴-2,8-二氯喹喔啉(2.01g，7.16mmol)在0℃(内部温度，冰浴)下处理2M二甲胺于THF中的溶液(22mL，44.0mmol)。将所产生的黄色溶液温热至室温并搅拌3小时。将反应混合物在真空中浓缩并在EtOAc(50mL)与饱和NaHCO3水溶液(50mL)之间分配。将各层分离，并用EtOAc(2×50mL)萃取水相。将有机萃取物合并，并用饱和盐水(1×50mL)洗涤，并且然后经MgSO4干燥，过滤，并在真空中浓缩，以得到呈淡黄色固体的7-溴-8-氯-N,N-二甲基喹喔啉-2-胺(1.98g，6.77mmol，95％产率)。MS：[M+H]+＝288。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.76(s,1H),7.72(d,J＝8.8Hz,1H),7.63(d,J＝8.8Hz,1H),3.29(s,6H)。
制备11：2-(氮杂环丁烷-1-基)-7-溴-8-氯喹喔啉
Figure BDA0003499997860001283
将氮杂环丁烷(0.49mL，7.20mmol)添加到7-溴-2,8-二氯喹喔啉(1.00g,3.60mmol)和三乙胺(1.00mL，7.20mmol)于THF(5mL)中的溶液中，并且混合物立即变成黄色。在室温下搅拌80小时，并且然后在EtOAc与饱和NaHCO3水溶液之间分配。将各相分离，用EtOAc萃取水相，并将合并的有机相用盐水洗涤，干燥(MgSO4+疏水性玻璃料)并浓缩，以得到标题化合物(1.05g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.36(1H,s),7.71(1H,d),7.64(1H,d),4.28(4H,t),2.49-2.41(2H,m)。
制备12：7-溴-8-氯-2-(吗啉-4-基)喹喔啉
Figure BDA0003499997860001291
使用与制备11中类似的程序由7-溴-2,8-二氯喹喔啉和吗啉制备7-溴-8-氯-2-(吗啉-4-基)喹喔啉。
制备13：4-氯-2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2H-吲唑
Figure BDA0003499997860001292
方法A
将5-溴-4-氯-2-甲基-2H-吲唑(12.14g，49.45mmol)、双(频哪醇)二硼(18.83g，74.18mmol)、[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯钯(II)复合物与二氯甲烷(4.038g，4.945mmol)和乙酸钾(9.706g，98.90mmol)于1,4-二噁烷(120mL)中的混合物脱气，用氮气吹扫，并在120℃下搅拌5小时。将反应冷却至室温，通过硅藻土垫过滤，并用EtOAc洗涤。将滤液在真空中浓缩。将残余物通过NH硅胶柱色谱法(梯度洗脱，0-70％EtOAc/己烷)纯化，以得到标题化合物(14.36g)。MS：[M+H]+＝293,295。
方法B
将iPrMgCl.LiCl(于THF中1.3M，63mL，82.0mmol)添加到在氮气下在冰上冷却至<5℃的内部温度的5-溴-4-氯-2-甲基-2H-吲唑(10.00g，40.73mmol)于THF(100mL)中的溶液中。在整个添加过程中将混合物保持低于10℃的内部温度，并且然后在<5℃下搅拌5小时。将混合物冷却至-10℃的内部温度，并添加异丙氧基频哪醇硼烷(25.00mL，122.6mmol)。将混合物在此温度下搅拌1小时，并且然后用水淬灭。添加饱和NH4Cl水溶液，并且然后用EtOAc萃取水性混合物。将合并的有机相用水、盐水洗涤，并干燥(MgSO4)，并浓缩。将残余物溶解于IPA中，并且然后添加水以引起沉淀。通过过滤收集固体。将固体用石油一起进一步研磨，并且然后通过过滤收集，以得到浅黄色固体(10.18g，34.79mmol，85％)。
制备14：4-氯-2-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2H-吲唑
Figure BDA0003499997860001301
使用5-溴-4-氯-2-乙基-2H-吲唑按照上述制备10进行制备。MS：[M+H]+＝307。
制备15：(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)硼酸
Figure BDA0003499997860001302
将5-溴-3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑(36.4g，130mmol)于THF(364mL)中的经搅拌溶液在氮气下冷却至5℃(内部温度)。在25分钟内通过套管逐滴添加含异丙基氯化镁-氯化锂复合物(200mL，260mmol)的THF(1.3M)。在添加的持续时间内使温度保持在5℃下。在1小时的过程内使混合物温热至室温。将混合物重新冷却至5℃，并且然后在10分钟内通过套管添加硼酸三异丙酯(100ml，431mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时，然后冷却至5℃，并用AcOH(145ml，2533mmol)淬灭。将混合物逐滴添加到经搅拌水(6L)中，通过过滤收集沉淀物，以得到粗产物。将产物溶解于NaOH(10.5g，263mmol)于水(350mL)中的溶液中，然后用TBME(350mL)洗涤。用1M HCl(300mL，300mmol)处理水层，并通过过滤收集沉淀物，以得到呈米色固体的(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)硼酸(23.9g，88mmol，67.6％产率)。MS：[M+H]+＝245。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.33(s,2H),7.51(d,J＝8.7Hz,1H),7.27(d,J＝8.6Hz,1H),4.12(s,3H)。
制备16：8-氯-N,N-二甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹喔啉-2-胺
Figure BDA0003499997860001303
使用三个抽空/氮气回填循环将双频哪醇二硼(2.58g，10.16mmol)、7-溴-8-氯-N,N-二甲基喹喔啉-2-胺(1.98g，6.77mmol)和乙酸钾(1.994g，20.31mmol)于1,4-二噁烷(20mL)中的悬浮液脱气。然后用Pd(dppf)Cl2(0.495g，0.677mmol)处理反应混合物，并重复脱气循环。将所产生的红色悬浮液在100℃(内部温度)下加热1.5小时。将反应混合物冷却至室温，然后在真空中浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法(24g盒，0-100％DCM/异己烷)纯化，以得到呈淡黄色固体的标题化合物(790mg)。MS：[M+H]+＝334。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.77(s,1H),7.75(d,1H),7.46(d,1H),3.32(s,6H),1.35(s,12H)。
以类似的方式制备以下硼酸盐：
Figure BDA0003499997860001311
制备17：3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-甲醛
Figure BDA0003499997860001312
在0℃下向5-溴-3,4-二氯-2-甲基-吲唑(10.0g，35.7mmol)于THF(100mL)中的溶液中添加异丙基氯化镁-氯化锂复合物(于THF中1.3mol/L，55mL，71.4mmol)，并且然后将混合物在0℃下搅拌1小时。然后，在相同温度下添加DMF(11.0mL，143mmol)，并将混合物在0℃下搅拌30分钟，用饱和NH4Cl水溶液淬灭，并用水稀释。将混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且然后浓缩，以得到浅橙色固体。将粗产物用EtOAc/庚烷(1:1，10mL)悬浮，并在室温下搅拌1小时。收集沉淀物，用己烷洗涤，并在减压下在50℃下干燥3小时，以得到标题化合物(5.50g)。MS：[M+H]+＝229,231
制备18：4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-甲醛
Figure BDA0003499997860001313
使用与上述制备17中类似的程序由5-溴-4-氯-2-甲基-2H-吲唑制备4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-甲醛。MS：[M+H]+＝195。
制备19：(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)(3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-基)甲醇
Figure BDA0003499997860001321
在-60℃下向溴3,5-二氯-2-甲基-吡嗪(391mg，2.40mmol)于THF(5mL)中的溶液中添加2,2,6,6-四甲基哌啶基氯化镁氯化锂复合物(于THF中1mol/L，2.88mL，2.88mmol)。搅拌45分钟后，在相同温度下向混合物中添加3,4-二氯-2-甲基-吲唑-5-甲醛(500mg,2.18mmol)，并且然后在-60℃下搅拌10分钟，然后将混合物在室温下搅拌30分钟。用饱和NH4Cl水溶液淬灭后，将混合物用水稀释，并用EtOAc萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且然后浓缩，以得到棕色残余物，将所述棕色残余物通过硅胶柱色谱法(EtOAc/己烷)纯化，以得到呈浅黄色无定形状的标题化合物(510mg)。MS：[M+H]+＝391,393。
制备20：(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)(3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-基)甲醇
Figure BDA0003499997860001322
使用与上述制备19中类似的程序由4-氯-2-甲基-吲唑-5-甲醛和3,5-二氯-2-甲基-吡嗪制备标题化合物。MS：[M+H]+＝357。
制备21：3,4-二氯-5-(3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-羰基)-2-甲基-2H-吲唑
Figure BDA0003499997860001323
在室温下将氧化锰(IV)(1.93g，19.5mmol)添加到(3,4-二氯-2-甲基-吲唑-5-基)-(3,5-二氯-6-甲基-吡嗪-2-基)甲醇(510mg，1.301mmol)于氯仿(10.2mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌6小时。将另外的氧化锰(IV)(1.93g，19.5mmol)添加到反应混合物中。将混合物在室温下搅拌18小时。过滤后，将滤液浓缩，以得到浅黄色固体，将所述浅黄色固体悬浮于己烷中，通过过滤收集，在真空下在50℃下干燥，以得到标题化合物(490mg)。MS：[M+H]+＝389,391。
制备22：4-氯-5-(3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-羰基)-2-甲基-2H-吲唑
Figure BDA0003499997860001331
在室温下向(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)(3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-基)甲醇(0.32g，0.895mmol)于DCM(8.95mL)中的经搅拌溶液中添加氧化锰(IV)(1.56g，17.9mmol)。将悬浮液搅拌过夜，然后将所述悬浮液过滤，用DCM(3x)洗涤，并浓缩，以得到标题化合物(0.231g)，所述标题化合物无需进一步纯化即可使用，MS:[M+H]+＝355。
制备23：(S)-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺
Figure BDA0003499997860001332
在室温下向通过如WO2016203405中所描述的方法制备的(4S)-4-((叔丁基亚磺酰基)氨基)-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(0.10g，0.28mmol)于MeOH(1mL)中的溶液添加含4M HCl的1,4-二噁烷(0.70mL，2.8mmol)。将混合物在50℃下搅拌30分钟，冷却至室温。在减压下去除挥发物，将残余物与甲苯共沸，并且所产生的粗产物(S)-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺盐无需进一步纯化即可使用。MS：[M+H]+＝157。
制备24：(1R)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺
Figure BDA0003499997860001341
使用与制备23中类似的程序使通过如WO2016203405中所描述的方法制备的(1R)-1-((叔丁基亚磺酰基)氨基)-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯脱保护。所产生的(1R)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺双盐酸盐无需进一步纯化即可使用。
制备25：(3S,4S)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺盐酸盐
Figure BDA0003499997860001342
步骤1：(2S)-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]丙酸乙酯
将(2S)-2-羟基丙酸乙酯(95.0g，0.8mol)于DCM(1L)中的反应混合物冷却至0℃，然后添加咪唑(81.6g，1.2mol)和TBSCl(133.3g，0.88mol)，在环境温度下搅拌约1.5小时。将反应混合物倒入水(1.0L)中，用DCM(2×500mL)萃取，然后用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝50/1到20/1)纯化，以得到呈无色油的产物(180.0g，97％)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:4.33(s,1H),4.22(s,2H),1.44(d,J＝6.7Hz,3H),1.32(t,J＝7.1Hz,3H),0.97(s,9H),0.15(s,6H)。
步骤2：(2S)-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]丙醛
将(2S)-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]丙酸乙酯(131.0g，0.56mol)于甲苯(800mL)中的溶液冷却至-60℃，逐滴添加DIBAL-H(1.5M，560mL，0.85mol)，然后在60℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入水(800mL)中，用EtOAc(2×500mL)萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，以得到粗产物。所述粗产物无需进一步纯化即可用于下一步骤。
步骤3：4-[(2S)-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-1-羟丙基]哌啶-1,4-二羧酸1-叔丁酯4-乙酯
将二异丙胺(65.0g，0.64mol)于THF(400mL)中的溶液冷却至-20℃。逐滴添加n-BuLi(2.5M，224mL，0.56mol)，然后在-10℃下搅拌1小时。在-10℃下逐滴添加含哌啶-1,4-二羧酸1-叔丁酯4-乙酯(110.0g，0.43mol)的THF(200mL)，然后在N2下在-10℃到环境温度下搅拌1小时。在-10℃下逐滴添加含(2S)-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]丙醛(120.0g，0.64mol)的THF(200mL)，然后在-10℃到0℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入饱和的NH4Cl(1L)中，用EtOAc(2×500mL)萃取，将合并的EtOAc相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝50/1到30/1到20/1)纯化，以得到呈黄色油的产物(70.0g，37％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.29-4.09(m,2H),4.06-3.88(m,2H),3.79(d,1H),3.60-3.48(m,1H),2.78(s,2H),2.66-2.25(m,1H),2.24-1.94(m,2H),1.74(m,2H),1.50-1.37(m,9H),1.34-1.18(m,5H),1.12(d,3H),0.91(s,10H),0.04(s,6H)。
步骤4：4-[(2S)-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-1-羟丙基]-4-(羟甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
在0℃下向4-[(2S)-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-1-羟丙基]哌啶-1,4-二羧酸1-叔丁酯4-乙酯(70.0g，0.157mol)于THF(700mL)中的溶液中添加LiBH4(2M，118mL，0.236mol)，然后在环境温度下搅拌过夜。将混合物倒入水(500mL)中，在环境温度下搅拌20分钟，用EtOAc(2×300mL)萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，以得到粗产物(60.0g)。所述粗产物无需进一步纯化即可用于下一步骤。
步骤5：4-[(2S)-1,2-二羟丙基]-4-(羟甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
向4-[(2S)-2-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-1-羟丙基]-4-(羟甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(60.0g，0.149mol)于THF(600mL)中的经冷却(0℃)溶液添加TBAF(1M，223mL，0.223mol)，并在环境温度下搅拌2小时。添加NaHCO3(水溶液600mL)，在环境温度下搅拌10分钟，用EtOAc(2×300mL)萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，通过二氧化硅柱(DCM/MeOH＝100/1到50/1到30/1)纯化，以得到呈黄色油的产物(37.0g，86％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.02-3.87(m,1H),3.74(m,4H),3.36(d,4H),3.10(s,2H),1.66(s,3H),1.40(s,10H),1.31(s,3H)。
步骤6：(3S)-4-羟基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯
向4-[(2S)-1,2-二羟丙基]-4-(羟甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(37.0g，0.127mol)于THF(400mL)中的经冰冷却溶液中分批添加NaH(17.8g，0.44mol)，然后添加TsCl(25.5g，0.134mol)于THF(200mL)中的溶液，并将反应混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物倒入冰和NH4Cl(水溶液600mL)中，用EtOAc(3×400mL)萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，通过二氧化硅柱(DCM/MeOH＝100/1到50/1到30/1)纯化，以得到呈黄色油的产物(20.0g，58％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:3.94-3.57(m,4H),3.45(d,1H),2.96(s,2H),1.70(s,3H),1.42(s,10H),1.29(m,4H)。
步骤7：(3S)-3-甲基-4-氧代-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯
向(3S)-4-羟基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(20.0g，0.074mol)于DCM(200mL)中的经冰冷却溶液中分批添加DMP(37.5g，0.088mol)。将反应混合物在环境温度下搅拌1小时，倒入NaHCO3(水溶液)中，用DCM萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，以得到呈黄色油的产物(19.0g，95％)。所述产物可直接用于下一步骤。
步骤8：(3S,4S)-3-甲基-4-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯
向(3S)-3-甲基-4-氧代-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(11.0g，0.04mol)于THF(250mL)中的溶液中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(9.9g，0.08mol)、Ti(OEt)4(36.5g，0.16mol)，并将反应混合物在75℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至-10℃，逐滴添加LiBH4(2M，30mL，0.06mol)，然后在-10℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入冰和NH4Cl(水溶液300mL)和EtOAc(300mL)中，在环境温度下搅拌20分钟，然后通过硅藻土过滤。将反应混合物用EtOAc(2×300mL)萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝10/1到5/1到3/1到2/1)纯化，以得到产物(7.0g，47％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:5.07(d,J＝11.0Hz,1H),4.06(s,1H),3.74(m,3H),3.37(d,3H),2.84(s,2H),1.69-1.50(m,2H),1.39(s,11H),1.15(s,9H),1.06(m,3H)。
步骤9：(3S,4S)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺盐酸盐
向(3S,4S)-3-甲基-4-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(5.8g，15.5mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中添加HCl/二噁烷(4M，39mL，155mmol)，然后在50℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却到环境温度并在真空中浓缩。将粗产物溶解于水(50mL)中，用EtOAc(3×40mL)萃取。将水相冷冻干燥，以得到呈黄色固体的产物的HCl盐(4.0g)。MS：[M+H]+＝171。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:4.44(m,1H),4.05-3.88(m,2H),3.67(s,1H),3.58-3.39(m,2H),3.22-3.01(m,2H),1.98(m,4H),1.34(s,3H)。
制备26：1-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸叔丁酯
Figure BDA0003499997860001371
步骤1：4-甲酰基-4-(丙-2-烯-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将4-甲酰基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1200.0g，5.63mol)于THF(10L)中的反应混合物冷却至-25℃，然后添加烯丙基溴(816.5g，6.75mol)，然后分批添加t-BuOK(757.8g，6.75mol)。将反应混合物在-25℃到-15℃下搅拌约45分钟，然后倒入冰NH4Cl(水溶液8L)中，用EtOAc萃取，通过盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并在真空中浓缩。将粗产物通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝50/1到20/1到10/1)纯化，以得到呈无色油的标题化合物(920.0g，64.5％)。1H NMR(CDCl3):9.49(1H,s),5.63(1H,m),5.09(2H,m),3.79(2H,m),2.96(2H,m),2.23(2H,d),1.93(2H,m),1.44(10H,m)。
步骤2：4-(1-羟基丙-2-烯-1-基)-4-(丙-2-烯-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将4-甲酰基-4-(丙-2-烯-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(400.0g，1.58mol)于THF(4L)中的溶液冷却至-60℃，添加乙烯基溴化镁(1.90L，1.90mol)，然后在室温下搅拌1小时。将混合物倒入NH4Cl(水溶液，5L)中，用EtOAc萃取，通过盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，以得到呈棕色油的产物(426.0g，95.8％)。
1H NMR(CDCl3):5.93(2H,m),5.24(2H,m),5.07(2H,t),4.00 91H,d),3.69(2H,m),3.12(2H,m),2.30(1H,m),2.19(1H,m),1.74(1H,m),1.60-1.53(2H,m)1.49(11H,m)。
步骤3：1-羟基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸叔丁酯
向4-(1-羟基丙-2-烯-1-基)-4-(丙-2-烯-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(10.0g，35.3mmol)于甲苯(150mL)中的溶液中添加GrubbsII(0.91g，1.07mmol)，并将反应在90℃下搅拌7小时。将混合物通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝20/1到10/1到5/1)纯化，以得到呈棕色油的期望产物(7.1g，78.9％)。
1H NMR(CDCl3):5.92(1H,m),5.83(1H,m),4.30(1h,s),3.58(2H,m),3.16(2H,m),2.22(2H,dd),1.74(2H,m),1.46-1.76(12H,m)。
步骤4：1-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸叔丁酯
将1-羟基-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸叔丁酯(100.0g，0.39mol)于DCM(600mL)中的溶液冷却至0℃，然后添加戴斯-马丁(184g，0.43mol)，并将混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物倒入NaHCO3(1.8L)和NaHSO3(1.5L)中，用DCM萃取，将合并的DCM相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，以得到粗产物。将粗产物倒入石油醚/EtOAc＝4:1中，并搅拌过夜，过滤，并在真空中浓缩，以得到呈浅红色固体的标题化合物(57.6g，58％)。1HNMR(CDCl3):7.6(1H,m),6.18(1H,m),4.09(2H,br s),2.90(2H,m),2.61(2H,s),1.77(2H,m),1.46(9H,s),1.27(2H,d)。
制备27：(1R)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯
Figure BDA0003499997860001381
步骤1：(3R)-3-羟基-1-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯
反应分三批进行。
将CuCl(0.59g，6.0mmol)、(S)-Tol-BINAP(4.05g，6.0mmol)、t-BuONa(0.57g，6.0mmol)于THF(450mL)中的混合物在室温下搅拌30分钟。添加含B2pin2(55.6g，0.22mol)的THF(250mL)，在室温下搅拌15分钟。添加含1-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸叔丁酯(50.0g，0.2mol)的THF(250mL)和MeOH(12.7g，0.4mol)，并将反应混合物在室温下搅拌过夜。添加水(1L)和NaBO3(153.1g，0.99mol)，并将反应混合物在室温下搅拌1小时。将三个批次合并，过滤，用EtOAc萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，以得到粗产物。将粗产物悬浮于EtOAc中，并在0℃下搅拌1小时，过滤，并干燥，以得到产物的一部分(79.3g)。将滤液在真空中浓缩，通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝20/1到10/1到3/1)纯化，以得到呈白色固体的产物的另一部分(37.5g)。
1H NMR(CDCl3):4.62(1H,m),3.89(2H,m),3.03(2H,m),2.63(1H,dd),2.43(1H,dd),2.10(1H,m),1.63(3H,m),1.45(9H,s),1.30(3H,m)。
步骤2：(3R)-3-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-1-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯
向(3R)-3-羟基-1-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(100.0g，0.37mol)于DMF(900mL)中的溶液中添加咪唑(37.9g，0.56mol)、TBSCl(67.2g，0.46mol)，并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入水(5L)中，用EtOAc萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝20/1到10/1到3/1)纯化，以得到呈黄色油的产物(118.7g，79.4％)。
1H NMR(CDCl3):4.44(1H,m),3.83(2H,d),2.95(2H,m),2.31(1H,dd),2.27(1H,dd),2.03(2H,m),1.93(1H,m),1.71(1H,m),1.40(9H,s),1.21(2H,m),0.82(9H,s),0.03(9H,s)。
步骤3：(1R,3R)-3-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-1-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯
将(3R)-3-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-1-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(120.0g，0.31mol)于THF(2L)中的溶液中添加亚磺酰胺(75.8g，0.61mol)、Ti(OEt)4(285.4g，1.25mol)，并将反应混合物在65℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至-60℃，逐滴添加LiBH4(940mL，0.94mol)，并在-60℃下搅拌3小时。将反应混合物倒入NH4Cl(水溶液)中，用EtOAc萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝10/1到5/1到3/1)纯化，以得到呈黄色油的产物(59.7g，39％)。1H NMR(CDCl3):4.29(1H,m),3.90(2H,d),3.76(1H,m),3.30(1H,m),3.02(2H,m),2.33(1H,m),1.60-1.80(7H,m),1.44(9H,s),1.20(9H,s),0.86(9H,s),0.034(6H,s)。
步骤4：(1R,3R)-3-羟基-1-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯
向(1R,3R)-3-[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]-1-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(38.0g，77.74mmol)于THF(230mL)中的溶液中添加TBAF(155.5mL，155.5mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物倒入水中，用EtOAc萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩，通过二氧化硅柱(DCM/MeOH＝50/1到30/1到20/1)纯化，以得到呈棕色油的期望产物(26.1g，89.7％)。1H NMR(DMSO-d6):5.06(1H,m),4.68(1H,d),4.03(1H,m),3.78(2H,m),3.06(1H,m),2.73(2H,m),2.15(1H,m),1.61(4H,m),1.39(10H,m),1.26(2H,m),1.20(9H,s)。
步骤5：(1R)-1-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]-3-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯
在0℃下向(1R,3R)-3-羟基-1-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(23.3g，0.062mol)于DCM(500mL)中的溶液中添加戴斯-马丁(39.6g，0.093mmol)，并将混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液萃取，通过硅藻土过滤。用DCM萃取滤液，并将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将所产生的残余物通过二氧化硅柱(CH2Cl2/MeOH＝50/1到40/1到30/1v/v)纯化，以得到呈黄色油的产物(21.44g，92.4％)。
步骤6：(1R)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯
在室温下向(1R)-1-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]-3-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(10.00g，0.027mol)于二噁烷(200mL)中的溶液中添加HCl(于二噁烷中6M，200mL)，然后将混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物用固体NaHCO3中和至PH＝9，添加Boc2O(23.44g，0.11mol)。将混合物在室温下搅拌，同时维持PH≥9。将混合物用饱和NaHCO3水溶液萃取，通过硅藻土过滤。用DCM萃取滤液，并将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并在真空中浓缩。将残余物通过二氧化硅柱(DCM/MeOH＝50/1到40/1到30/1)纯化，以得到呈黄色油的产物(21.44g，92.4％)。
步骤7：(1R)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯
在0℃下向(1R)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(1.00g，2.71mmol)于DCM(20mL)中的溶液中添加Deoxo Fluor(2.40g，10.85mmol)，然后使混合物温热至室温，并且然后在50℃下搅拌过夜。将混合物在冰水浴中用饱和NaHCO3水溶液淬灭，用EtOAc萃取，并将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩。将所产生的残余物通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝20/1到15/1到10/1v/v)纯化，以得到呈白色固体的产物(600.0mg，56.6％)。1H NMR(CDCl3):4.55(1H,d),4.01-3.93(3H,m),2.85(2H,d),2.56(1H,m),2.26(1H,m),2.02(2H,m),1.66(1H,m),1.44(21H,s).19FNMR(CDCl3):-86.45(d)。
制备28：(1R)-4,4-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺
Figure BDA0003499997860001401
向(1R)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(543mg，1.39mmol)于DCM(4mL)中的溶液中添加TFA(4mL)，并将溶液搅拌过夜。将溶剂蒸发，以得到标题化合物的双-TFA盐，其无需进一步纯化即可使用。1H NMR(400MHz,Me-d3-OD):3.69(1H,t),3.54-3.36(2H,m),3.22-3.08(2H,m),2.93-2.77(1H,m),2.69-2.53(1H,m),2.52-2.35(2H,m),2.15-2.03(1H,m),1.97-1.77(3H,m)。
制备29：N-[(1R,3R)-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-基]氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA0003499997860001411
步骤1：1-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸苄酯
向1-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸叔丁酯(30.0g，0.20mol)于DCM(1000mL)中的混合物中添加TFA(150mL)，然后将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物在真空中浓缩，以得到不纯的中间体，所述不纯的中间体可直接用于下一步骤。向不纯的中间体于THF(100mL)和H2O(400mL)中的混合物添加NaHCO3(50.4g，0.60mol)以将溶液的PH调整为8-9。将混合物冷却至0℃，并逐滴添加Cbz-Cl(51.2g，0.30mol)于THF(100mL)中的溶液。添加完成后，使反应混合物温热至室温，并搅拌过夜。将反应混合物用EtOAc萃取，并将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩。将所产生的残余物通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝10/1到2/1)纯化，以得到呈棕色油的产物(49.5g，87.5％)。
步骤2：1-氧代-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸卞酯
将1-氧代-8-氮杂螺[4.5]癸-2-烯-8-羧酸苄酯(10.8g，37.9mmol)于THF(150mL)中的溶液冷却至0℃，然后添加三甲基(三氟甲基)硅烷(6.5g，45.4mmol)、TBAF(0.76mL，0.76mmol)。将混合物在0℃下搅拌1.5小时。在0℃下用2M HCl水溶液(40mL)将混合物淬灭。将溶液用饱和NH4Cl水溶液稀释并用EtOAc萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩。将所产生的残余物通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝10/1到3/1)纯化，以得到呈黄色油的产物(4.4g，32.6％)。
步骤3：(1R,3R)-1-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸卞酯
将1-氧代-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸卞酯(19.0g，0.05mol)、(R)-叔丁烷亚磺酰胺(13.0g，0.11mol)和Ti(OEt)4(48.78g，0.21mol)于THF(400mL)中的溶液在80℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至-78℃，添加MeOH(86mL)和LiBH4(于THF中2M；160mL)。使反应混合物在搅拌下温热至室温。将混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭，通过硅藻土过滤。用EtOAc萃取滤液，并将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩。将所产生的残余物通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝10/1到1/1)纯化，以得到呈白色固体的产物(14.68g，59.7％)。
步骤4：(1R,3R)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸卞酯
向(1R,3R)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸卞酯(15.2g，0.033mol)于MeOH(130mL)中的溶液中添加含HCl的二噁烷(6M，15mL)。将混合物在室温下搅拌1小时。然后将反应混合物在真空中浓缩。将所产生的残余物溶解于DCM中，添加DIPEA(21.32g，0.165mol)和Boc2O(10.8g，0.050mol)。将反应混合物在环境温度下搅拌72小时。将混合物用饱和NH4Cl水溶液稀释，用DCM萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩。将所产生的残余物通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝15/1到6/1)纯化，以得到呈白色固体的产物(6.27g，41.5％)。
步骤5：N-[(1R,3R)-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-基]氨基甲酸叔丁酯
向(1R,3R)-1-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸卞酯(3.0g，6.57mmol)于EtOH(120mL)中的溶液中添加10％Pd/C(1.0g)，并将反应混合物在H2气球下在室温下搅拌12小时。将混合物通过硅藻土过滤，将滤液在真空中浓缩，以得到呈白色固体的产物(2.09g，98.6％)。MS：[M+H]+＝323。1H NMR(CDCl3):4.51(1H,d),3.82(1H,m),3.00(2H,br s),2.70(2H,m),2.52(1H,m),2.03(2H,br s),1.75(2H,m),1.60(2H,m),1.44-1.25(12H,m).19F NMR(CDCl3):-71.41。
制备30：(1R,3S)-3-氟-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺
Figure BDA0003499997860001421
步骤1：(1R,3S)-3-氟-1-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯
向(1R,3R)-3-羟基-1-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(10.2g，27.2mmol)于DCM(220mL)中的溶液中逐滴添加DAST(7.02g，43.6mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌90分钟。将反应混合物倒入NaHCO3(水溶液)中并在0℃下搅拌10分钟。用DCM萃取混合物，并将有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩。将所产生的残余物通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝10/1到2/1)纯化，以得到呈黄色固体的产物(7.2g，100％)。
步骤2：(1R,3S)-1-{[(卞氧基)羰基]氨基}-3-氟-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸卞酯
向(1R,3S)-3-氟-1-[(2-甲基丙烷-2-亚磺酰基)氨基]-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(6.20g，16.5mmol)于MeOH(60mL)中的溶液中添加HCl(于二噁烷中6M，40mL)，并将反应混合物在45℃下搅拌45分钟。将反应混合物在真空中浓缩，并将所产生的残留物溶解于H2O(50mL)中。将NaHCO3添加到混合物中，并调整PH＝8-9。将NaHCO3(8.30g，98.8mmol)添加到反应混合物中并冷却至0℃，然后逐滴添加含Cbz-Cl(8.40g，49.4mmol)的THF(50mL)。将混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用EtOAc萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，在真空中浓缩。将所产生的残余物通过二氧化硅柱(石油醚/EtOAc＝10/1到6/1到3/1)纯化，以得到呈黄色油的产物(6.0g，82.8％)。
步骤3：(1R,3S)-3-氟-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺
将(1R,3S)-1-{[(卞氧基)羰基]氨基}-3-氟-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸卞酯(3.7g，8.4mmol)和10％Pd/C(1.0g)于EtOH(100mL)中的混合物在H2气球下在室温下搅拌72小时。将混合物通过硅藻土过滤，并将滤液在真空中浓缩，以得到呈绿色半固体的产物(1.1g，75.9％)。MS：[M+H]+＝173。1H NMR(CDCl3):5.19(0.5H,m),5.06(0.5H,m),3.14(1H,m),2.97(2H,m),2.71(2H,m),2.29-2.17(2H,m),1.98-1.54(5H,m),1.39-1.10(4H,m)。19FNMR:-164.27
制备31：{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇
Figure BDA0003499997860001431
将(6-氯-3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇(15g，33.7mmol)、(3S,4S)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺二盐酸盐(9.4g，38.7mmol)和DIPEA(20mL，115mmol)在乙腈(150mL)中加热至80℃持续2小时。将混合物用20％盐水(650mL)稀释，然后用乙酸乙酯(3×250mL)萃取。将合并的有机相干燥(Na2SO4)，过滤并在减压下浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法(330g盒，0-10％MeOH/DCM)纯化，以得到呈黄色泡沫的标题化合物(18.4g，30.4mmol，90％产率)。MS：[M+H]+＝575。
方法1：(4S)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(实例3)
Figure BDA0003499997860001441
步骤1：将6-氯-3-碘-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(750mg，1.98mmol)、(S)-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺二盐酸盐(636mg，2.78mmol)、DIPEA(3.45mL，19.8mmol)和NMP(7.5mL)的混合物在120℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，并添加二碳酸二叔丁酯(4.55mL，19.8mmol)。在室温搅拌2小时后，向混合物中添加水，并用EtOAc萃取。将有机层用水和盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(梯度洗脱，0-100％EtOAc/己烷)纯化，以得到N-[(4S)-8-[3-碘-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-基]氨基甲酸叔丁酯(880mg)。MS：[M+H]+＝599。
步骤2：将N-[(4S)-8-[3-碘-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-基]氨基甲酸叔丁酯(330mg，0.551mmol)、4-氯-2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2H-吲唑(194mg，0.662mmol)、K3PO4(176mg，0.827mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)磷化氢)二氯钯(II)(39.0mg，0.0551mmol)、1,4-二噁烷(3.3mL)和水(0.33mL)的混合物在80℃下搅拌2小时，冷却至室温，倒入水中，并用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(梯度洗脱，0-100％EtOAc/己烷)纯化，以得到N-[(4S)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-基]氨基甲酸叔丁酯(240mg)。MS：[M+H]+＝637,639。
步骤3：在室温下向N-[(4S)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-基]氨基甲酸叔丁酯(240mg，0.377mmol)于MeOH(4.0mL)中的混合物添加含4M HCl的1,4-二噁烷(2mL，8mmol)。将混合物在室温下搅拌5小时并在真空中浓缩。将残余物通过NH硅胶柱色谱法(梯度洗脱，0-20％MeOH/CHCl3)纯化，以得到标题化合物(90.0mg)。MS：[M+H]+＝453,455。NMR：1H-NMR(DMSO-D6)δ:13.62(1H,br s),8.56(1H,s),7.68(1H,dd,J＝8.8,0.9Hz),7.62(1H,d,J＝8.8Hz),4.24(3H,s),3.97(1H,dd,J＝8.5,6.5Hz),3.72(1H,d,J＝8.4Hz),3.62(1H,d,J＝8.4Hz),3.54-3.46(2H,m),3.17(1H,d,J＝5.0Hz),3.09(1H,t,J＝6.0Hz),3.02-2.96(2H,m),2.56(3H,s),1.88-1.73(3H,m),1.56-1.49(2H,m)。
方法2：(3S,4S)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(实例6)
Figure BDA0003499997860001451
步骤1：将6-氯-3-碘-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(200mg，0.528mmol)、(3S,4S)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺二盐酸盐(154mg，0.634mmol)、DIPEA(0.920mL，5.28mmol)和NMP(2.0mL)的混合物在120℃下搅拌1.5小时。将反应混合物冷却至室温，并添加二碳酸二叔丁酯(1.15g，19.8mmol)。在室温搅拌4小时后，向混合物中添加水，并用EtOAc萃取。将有机层用水和盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(梯度洗脱，0-70％EtOAc/己烷)纯化，以得到N-[(3S,4S)-8-[3-碘-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-基]氨基甲酸叔丁酯(265mg)。MS：[M+H]+＝612。
步骤2：将N-[(3S,4S)-8-[3-碘-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-基]氨基甲酸叔丁酯(258mg，0.421mmol)、4-氯-2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2H-吲唑(148mg，0.506mmol)、K3PO4(179mg，0.842mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)磷化氢)二氯钯(II)(14.9mg，0.0211mmol)、1,4-二噁烷(2.6mL)和水(0.26mL)的混合物在80℃下搅拌2小时，冷却至室温，倒入水中，并用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(梯度洗脱，0-90％EtOAc/己烷)纯化，以得到N-[(3S,4S)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-基]氨基甲酸叔丁酯(203mg)。MS：[M+H]+＝651,653。
步骤3：在室温下向N-[(3S,4S)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-基]氨基甲酸叔丁酯(203mg，0.312mmol)于MeOH(4.0mL)中的溶液中添加含4M HCl的1,4-二噁烷(4.0mL，8mmol)。将混合物在室温下搅拌1小时并在真空中浓缩。将残余物通过NH硅胶柱色谱法(梯度洗脱，0-10％MeOH/CHCl3)纯化，以得到(3S,4S)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(126mg)。MS：[M+H]+＝467,469。1H-NMR(DMSO-D6)δ:13.61(1H,br s),8.56(1H,s),7.68(1H,dd,J＝8.8,0.9Hz),7.62(1H,d,J＝8.9Hz),4.23(3H,s),4.13-4.03(1H,m),3.69(1H,d,J＝8.8Hz),3.52(1H,d,J＝8.3Hz),3.42(2H,q),3.16-2.97(2H,m),2.93(1H,d,J＝5.0Hz),2.55(3H,s),1.95-1.73(1H,m),1.70-1.55(1H,m),1.09(3H,d,J＝6.6Hz)。
方法3：{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(实例8)
Figure BDA0003499997860001471
步骤1：将(6-氯-3-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇(0.8g，1.82mmol)、(3S,4S)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺二盐酸盐(0.53g，2.18mmol)和三乙胺(0.885mL，6.35mmol)于NMP(3.63mL)中的混合物在N2下在105℃下加热2小时。添加盐水溶液(30％)和EtOAc，将各相分离，并将有机相用30％盐水溶液(x3)进一步洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(梯度洗脱，0-12％MeOH/EtOAc)纯化，以得到{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(0.925g)。MS：[M+H]+＝575。
步骤2：在真空下向{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(0.925g，1.61mmol)、(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)硼酸(0.788g，3.22mmol)、双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)磷化氢)二氯钯(II)(0.0912g，0.129mmol)和K3PO4(1.03g，4.83mmol)的混合物中添加1,4-二噁烷(8.0mL)和水(1.6mL)。用N2回填器皿并蒸发，并用N2再回填2次。将混合物在50℃下加热5小时。将反应用EtOAc/30％盐水溶液稀释，将各相分离，然后将水相萃取到EtOAc(x2)中。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将残余物通过KP-NH柱色谱法(梯度洗脱，0-14％MeOH/EtOAc)纯化，以得到{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(0.813g)。MS：[M+H]+＝647。
步骤3：在室温下向{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(0.813g，1.26mmol)于DCM(12.2mL)和水(0.488mL)中的溶液中添加甲磺酸(1.63mL，25.1mmol)。将混合物快速搅拌30分钟。将反应混合物添加到Na2CO3溶液和CHCl3/IPA(3:1)的快速搅拌混合物中。将各相分离，并将水相进一步萃取到CHCl3/IPA(3:1)(x2)中。将CHCl3/IPA溶液与约5mL浓缩氨水溶液一起搅拌2小时。将各相分离，并将有机萃取物干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩成粉末。通过C18(干载)柱色谱法使用5％(MeCN/0.1％TFA)/(H2O/0.1％TFA)到95％(MeCN/0.1％TFA)/(H2O/0.1％TFA)洗脱对残余物进行纯化。将饱和NaHCO3添加到期望的馏分来进行中和，将MeCN蒸发，并通过过滤收集固体。将残余物通过KP-NH柱色谱法(梯度洗脱，0-8％MeOH/DCM)纯化，以提供{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(0.186mg)。MS：[M+H]+＝517。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):13.69(1H,s),7.71(1H,d),7.65(1H,d),5.33(1H,t),4.60(2H,d),4.19(3H,s),4.13-4.04(1H,m),3.69(1H,d),3.64-3.49(3H,m),3.28-3.11(2H,m),2.93(1H,d),1.97-1.73(2H,m),1.70-1.55(2H,m),1.10(3H,d)。
方法4：{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-[5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基]-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(实例17)
Figure BDA0003499997860001481
步骤1：将N1,N1,N2,N2-四乙基乙烷-1,2-二胺(4.78ml，22.43mmol)添加到(3S,4S)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺,2HCl(1.5g，6.17mmol)和(6-氯-3-碘-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇(2.472g,5.61mmol)于NMP(4.5mL)中的溶液中。将反应在105℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，用30％盐水溶液(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机相浓缩，然后通过色谱法(120g柱；甲醇/二氯甲烷：0-10％)纯化，以得到{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(2.82g)。MS：[M+H]+＝575。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ5.60(s,2H),5.56(t,1H),4.60(d,2H),4.07(q,1H),3.69-3.60(m,3H),3.58(t,2H),3.48(d,1H),3.30-3.27(m,1H),3.26-3.19(m,1H),2.91(d,1H),1.92-1.85(m,1H),1.80-1.73(m,1H),1.67-1.53(m,2H),1.31(s,2H),1.08(d,3H),0.88-0.80(m,2H),-0.10(s,9H)。
步骤2：将{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(500mg，0.870mmol)、8-氯-N,N-二甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹喔啉-2-胺(459mg，1.377mmol)、PdCl2dppf(72.0mg，0.098mmol)和磷酸钾(626mg，2.95mmol)于1,4-二噁烷(12.2mL)和水(4.0mL)中的混合物在N2流下脱气并在30℃下搅拌3.5小时。将反应冷却，用水(100mL)稀释，并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将有机相合并，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法(12g盒，甲醇/二氯甲烷0-20％)纯化，以得到{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-[5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基]-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(510mg)。MS：[M+H]+＝654
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.81(s,1H),7.90(d,1H),7.61(d,1H),5.74(s,2H),5.41(t,1H),4.59(d,2H),4.08(m,1H),3.73-3.61(m,5H),3.51(d,1H),3.31(s,6H),3.28-3.20(m,1H),2.93(d,1H),1.96-1.88(m,1H),1.84-1.74(m,1H),1.69-1.56(m,2H),1.35(s,2H),1.13-1.04(m,4H),0.92-0.84(m,2H),-0.09(s,9H)。
步骤3：将{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-[5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基]-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(510mg，0.779mmol)溶解于二氯甲烷(8mL)和水(0.35mL)中。然后添加甲磺酸(0.5mL，7.79mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌15分钟。将反应混合物添加到以下的快速搅拌混合物中：饱和NaHCO3水溶液(20mL)和氯仿:异丙醇(3:1，25mL)。将有机相分离，将水溶液用氯仿:异丙醇(3:1，2×25mL)进一步萃取。将合并的有机相浓缩，然后悬浮于甲醇(4mL)和乙二胺(0.5mL，7.79mmol)中。将悬浮液在室温下搅拌2小时。将悬浮液在真空中浓缩，然后通过色谱柱(KPNH 11g)使用甲醇/二氯甲烷：0-90％纯化，以得到{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-[5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基]-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(89mg)。MS：[M+H]+＝524 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ13.74(s,1H),8.79(s,1H),7.88(d,1H),7.67(d,1H),5.33(t,1H),4.59(d,2H),4.07(m,1H),3.69(d,1H),3.62-3.54(m,2H),3.52(d,1H),3.32(s,6H),3.27-3.19(m,1H),3.19-3.11(m,1H),2.93(d,1H),1.95-1.86(m,1H),1.83-1.74(m,1H),1.67-1.55(m,2H),1.37(s,2H),1.09(d,3H)。
方法5：{6-[(1R)-1-氨基-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(实例7)
Figure BDA0003499997860001501
步骤1：使用与方法3，步骤1中类似的程序由(6-氯-3-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇和(1R)-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺双-TFA盐制备{6-[(1R)-1-氨基-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇。MS：[M+H]+＝595。
步骤2：使用与方法3，步骤2中类似的程序由{6-[(1R)-1-氨基-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇和4-氯-2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2H-吲唑制备{6-[(1R)-1-氨基-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇。MS：[M+H]+＝633。
步骤3：将{6-[(1R)-1-氨基-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(63mg，0.1mmol)于DCM(2mL)和TFA(2mL)中的溶液搅拌2小时。将反应混合物用DCM稀释，添加饱和NaHCO3水溶液，并用CHCl3/IPA(3:1)萃取产物。将溶剂蒸发，将残余物溶解于MeOH(3mL)中，并添加乙二胺(1mL)，搅拌1小时，并将溶剂蒸发。添加水，并用CHCl3/IPA(3:1)萃取产物。将溶剂蒸发，并将粗产物在KP-NH柱上使用DCM/MeOH(0-5％)洗脱来进行纯化，以得到{6-[(1R)-1-氨基-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(4.3mg)。MS：[M+H]+＝503。
1H NMR(400MHz,Me-d3-OD):8.43(1H,s),7.67(2H,s),4.78(2H,s),4.29(3H,s),3.92-3.70(2H,m),3.18-3.01(3H,m),2.60-2.39(2H,m),2.19-2.01(3H,m),2.01-1.80(1H,m),1.62(1H,d),1.52(1H,d)。
(4S)-8-[3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(实例4)
Figure BDA0003499997860001511
步骤1：在室温下向(S)-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺二盐酸盐(127mg，0.554mmol)于NMP(3.0mL)中的溶液添加3,4-二氯-5-(3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-羰基)-2-甲基-2H-吲唑(150mg，0.385mmol)和DIPEA(0.670mL，3.85mmol)。将混合物在室温下搅拌17小时。向反应混合物中添加二碳酸二叔丁酯(0.884ml，3.85mmol)。将混合物在室温下搅拌4小时。添加另外的二碳酸二叔丁酯(0.442mL，1.92mmol)，并在室温下搅拌2小时，用水稀释，用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(EtOAc/己烷)纯化，以得到N-[(4S)-8-[6-氯-5-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-羰基)-3-甲基吡嗪-2-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-基]氨基甲酸叔丁酯(146mg)。MS：[M+H]+＝609,611。
步骤2：在室温下向N-[(4S)-8-[6-氯-5-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-羰基)-3-甲基吡嗪-2-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-基]氨基甲酸叔丁酯(146mg，0.239mmol)于EtOH(5.0mL)中的溶液中添加水合肼(0.116mL，2.394mmol)。将混合物在80℃下搅拌3小时。在相同温度下将另外的水合肼(0.058mL，1.20mmol)添加到反应混合物中。将混合物在80℃下搅拌1小时。然后将反应溶液真空浓缩，并将残余物通过硅胶柱色谱法(EtOAc/己烷)纯化，以得到N-[(4S)-8-[3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-基]氨基甲酸叔丁酯(8.0mg)。MS：[M+H]+＝587,589。
步骤3：在室温下将N-[(4S)-8-[3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-基]氨基甲酸叔丁酯(8.0mg，0.0136mmol)添加到TFA(2.0mL)中。将混合物在室温下搅拌30分钟。然后将反应溶液真空浓缩，并将残余物通过NH硅胶柱色谱法(MeOH/CHCl3)纯化，以得到(4S)-8-[3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(5.1mg)。MS：[M+H]+＝487,489。1H-NMR(DMSO-d6)NMR(DMSO-S:[M+H]嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺，然后将反应溶液真空浓缩，并将残余物纯化，3.62(1H,d,J＝8.5Hz),3.54-3.46(2H,m),3.12-3.06(1H,m),3.03-2.95(2H,m),2.56(3H,s),1.88-1.73(3H,m),1.57-1.49(2H,m)。
(1R,3R)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺(实例1)
Figure BDA0003499997860001531
步骤1：在0℃下向4-氯-5-(3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-羰基)-2-甲基-2H-吲唑(180mg，0.5mmol)于NMP(4mL)中的溶液中添加DIPEA(0.1mL，1.0mmol)和N-[(1R,3R)-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-基]氨基甲酸叔丁酯(161mg，0.5mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时。添加水，并用EtOAc萃取产物。将有机相用盐水(3x)洗涤，干燥，过滤，并将溶剂蒸发。将粗产物通过硅胶柱色谱法(EtOAc/己烷)纯化，以得到N-[(1R,3R)-8-[6-氯-5-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-羰基)-3-甲基吡嗪-2-基]-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-基]氨基甲酸叔丁酯(197mg)。MS：[M+H]+＝641。
步骤2：向N-[(1R,3R)-8-[6-氯-5-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-羰基)-3-甲基吡嗪-2-基]-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-基]氨基甲酸叔丁酯(197mg，0.31mmol)于EtOH中的溶液中添加水合肼(50-60％，60μL，0.62mmol)，并将反应混合物在回流下加热4小时。将溶剂蒸发，添加饱和NaHCO3，并用DCM萃取产物。将有机相干燥，将溶剂蒸发。将粗产物在KP-NH柱上通过硅胶柱色谱法(EtOAc/己烷)纯化，以得到N-[(1R,3R)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-基]氨基甲酸叔丁酯(79mg)。MS：[M+H]+＝619。
步骤3：向N-[(1R,3R)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-基]氨基甲酸叔丁酯(74mg，0.12mmol)于MeOH(3mL)中的溶液中添加HCl-二噁烷(4M，3mL)，并将混合物搅拌4小时。将溶剂蒸发，以得到呈HCl盐的(1R,3R)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺(62mg)。MS：[M+H]+＝519。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6-D2O):8.53(1H,s),7.68(1H,dd),7.58(1H,d),4.22(3H,s),3.35(1H,t),3.15-3.05(1H,m),3.05-2.92(2H,m),2.55(3H,s),2.43-2.36(1H,m),2.15-2.05(1H,m),1.92-1.70(5H,m),1.66-1.54(2H,m)。
(1R)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺(实例2)
Figure BDA0003499997860001541
使用与针对(1R,3R)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺(实例1)所描述的那些程序类似的程序由4-氯-5-(3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-羰基)-2-甲基-2H-吲唑和(1R)-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺双-TFA盐制备标题化合物；除了步骤2是在回流下进行的之外，并且省略了步骤3。将产物溶解于MeOH中并用HCl/Et2O处理，以产生呈黄色固体的标题化合物的HCl盐。MS:[M+H]+＝487。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):8.57(1H,s),8.48(3H,s),7.69(1H,dd),7.63(1H,d),4.25(3H,s),3.73-3.49(3H,m),3.09-2.93(2H,m),2.87-2.69(1H,m),2.65-2.55(4H,m),2.05(1H,t),1.89-1.77(1H,m),1.72(1H,d),1.61(1H,d)。
表1
使用合适的胺和硼酸酯(或硼酸)(其制备如上所述)通过与方法1-5中所描述的那些方法类似和/或相似的以下方法来制备表1中的实例。通常使用柱色谱法(Biotage KP-NH、SiO2或C18柱)来对标题化合物进行纯化。在一些情况下，通过将HCl-二噁烷添加到化合物的溶液中并蒸发至干来将标题化合物制备为HCl盐。
Figure BDA0003499997860001551
Figure BDA0003499997860001561
Figure BDA0003499997860001571
Figure BDA0003499997860001581
Figure BDA0003499997860001591
Figure BDA0003499997860001601
Figure BDA0003499997860001611
Figure BDA0003499997860001621
Figure BDA0003499997860001631
Figure BDA0003499997860001641
Figure BDA0003499997860001651
Figure BDA0003499997860001661
用于制备某些化合物的替代性方法
实例8：{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇
Figure BDA0003499997860001662
步骤1：将{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(制备31)(1当量)、(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)硼酸(制备15)(1.9摩尔当量)和K3PO4(3摩尔当量)于1,4-二噁烷(10vol.)和水(3vol.)中的溶液脱气，抽空/用氮气重新加压3次，然后加热至50℃。然后在50℃下添加Pd(amphos)Cl2(0.1摩尔当量)于1,4-二噁烷(1.5vol.)中的经脱气悬浮液，并将混合物在50℃下加热1小时。将混合物过滤，然后用水(27vol.)稀释，并且然后用乙酸乙酯(3×15vol.)萃取。将合并的有机相在减压下浓缩，以得到深黄色油。将粗产物通过硅胶柱色谱法(0-10％含1M NH3的甲醇/乙酸乙酯)纯化，以得到呈黄色泡沫的(6-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)-3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇(86％产率)。MS：[M+H]+＝647。
步骤2：将甲磺酸(3.3vol)*于水(0.9vol.)*中的溶液逐滴添加到(6-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)-3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇(1当量)于二氯甲烷(11vol.)中的快速搅拌、经冷却(10℃)溶液中。将混合物温热至室温，然后快速搅拌45分钟。将混合物用水(9vol.)稀释，然后将有机相去除。将水相用另外一份二氯甲烷(9vol)洗涤，然后分离。将水层逐滴添加到28％氢氧化铵水溶液(18vol.)和二氯甲烷(9vol.)的快速搅拌溶液中。维持快速搅拌18小时。将所产生的非均质混合物过滤，以得到奶油状固体。将固体用水(3.5vol.)洗涤，然后悬浮于甲醇(7.4vol.)中，并与乙二胺(10摩尔当量)一起在室温下搅拌1小时。通过过滤收集固体，并用甲醇(2×0.9vol.)洗涤，以得到奶油状固体。将固体与DCM:MeOH(9:1，9vol.)和乙醇(9vol.)一起进一步研磨。将固体溶解于甲磺酸(2.1摩尔当量)于水(3.7vol.)中的溶液中，然后用异己烷(2×1.8vol.)洗涤。然后将水层添加到28％氢氧化铵水溶液(10.7摩尔当量NH3)于水(3.7vol.)中的快速搅拌混合物中。通过过滤收集所产生的固体，并用水(2×0.9vol)洗涤，以得到浅色奶油状固体。将固体在热甲醇(7.4vol.)中研磨，以得到呈浅色奶油状固体的标题化合物(65％产率)。
*相对于起始材料的体积当量
实例10：(3S,4S)-8-{3-[5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基]-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基}-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺：
Figure BDA0003499997860001671
步骤1：将(3S,4S)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺二盐酸盐(1当量)和6-氯-3-碘-5-甲基-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪(制备1)(1摩尔当量)溶解于1-甲基吡咯烷-2-酮(4vol.)中，并添加N1,N1,N2,N2-四乙基乙烷-1,2-二胺(4摩尔当量)。将溶液在120℃下搅拌3小时。然后，将反应冷却至室温过夜。将反应混合物添加到水(250vol.)中。用EtOAc(3×250vol)萃取悬浮液。将合并的有机相用盐水(250vol.)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，并且然后浓缩，以得到粗棕色油。将粗产物通过色谱柱(使用0-100％EtOAc/己烷，然后使用10％MeOH/DCM洗脱)纯化，以得到棕色油。将油通过色谱柱(使用0-10％MeOH/DCM洗脱)进一步纯化，以得到呈棕色粘性固体的(3S,4S)-8-(3-碘-5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(62％产率)。MS：[M+H]+＝513。NMR(500MHz,DMSO-d6)δ5.75(dd,1H),4.11-4.03(m,1H),3.96-3.89(m,1H),3.67(d,J＝8.5Hz,1H),3.66-3.60(m,1H),3.50(dd,J＝8.5,1.6Hz,1H),3.48-3.41(m,2H),3.20-3.13(m,1H),3.13-3.05(m,1H),2.93(dd,J＝5.1,1.6Hz,1H),2.58(s,3H),2.48-2.41(m,1H),2.05-1.97(m,1H),1.93-1.83(m,3H),1.81-1.51(m,7H),1.09(d,J＝6.4Hz,3H)。
步骤2：在真空下向(3S,4S)-8-(3-碘-5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(1当量)、8-氯-N,N-二甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹喔啉-2-胺(制备16)(2摩尔当量)、Pd(amphos)Cl2(0.08摩尔当量)和K3PO4(3摩尔当量)的混合物中添加1,4-二噁烷(10vol.)和水(2vol)。用N2回填器皿并蒸发，并用N2再回填3次。将混合物在50℃下加热2小时。使反应混合物变成深棕色溶液。加热2小时后，将所产生的灰绿色悬浮液冷却至室温并用EtOAc和30％盐水溶液稀释。将各相分离，并用EtOAc进一步萃取水相。将合并的有机萃取物通过相层分离器干燥，过滤并浓缩。Biotage柱(KP-NH)使用0％-100％EtOAc/异己烷洗脱；然后至100％DCM，以得到呈黄色固体的(3S,4S)-8-(3-(5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基)-5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(82％产率)。MS：[M+H]+＝592。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.80(s,1H),7.88(d,J＝8.4Hz,1H),7.58(d,J＝8.4Hz,1H),5.92(dd,J＝10.1,2.6Hz,1H),4.09(q,1H),4.01-3.97(m,1H),3.73-3.67(m,2H),3.54-3.51(m,1H),3.51-3.43(m,1H),3.31(s,6H),3.23-3.16(m,1H),3.14-3.07(m,1H),2.95(d,J＝5.1Hz,1H),2.55(s,3H),2.53-2.51(m,2H),2.12-2.05(m,1H),2.01-1.96(m,1H),1.95-1.88(m,1H),1.84-1.74(m,2H),1.71-1.64(m,1H),1.64-1.56(m,3H),1.35(s,2H),1.10(d,J＝6.4Hz,3H)。
步骤3：在室温下向(3S,4S)-8-(3-(5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基)-5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(1当量)于MeOH(18vol.)中的溶液添加HCl(于1,4-二噁烷中4.0M)(18vol.)。将混合物温热至40℃并搅拌1小时。将反应在真空下浓缩，以得到橙色固体，然后将所述橙色固体在NaHCO3水溶液与CHCl3/IPA(3:1)之间分配。将各相分离，并将水相用2×CHCl3/IPA(3:1)进一步萃取。将合并的有机萃取物通过相层分离器干燥，并在真空中浓缩，以得到粗黄色固体。通过色谱柱使用Biotage柱(干载KP-NH)使用0-10％MeOH/DCM洗脱对粗产物进行纯化，以得到呈黄色固体的(3S,4S)-8-{3-[5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基]-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基}-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(47％产率)。MS：[M+H]+＝508(M+H)+。
实例22：{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(5-氯-3-甲氧基喹喔啉-6-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇
Figure BDA0003499997860001691
步骤1：使用三个抽空/氮气回填循环将{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-碘-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(制备31)(1当量)、8-氯-2-甲氧基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)喹喔啉(1.7摩尔当量)和K3PO4(3摩尔当量)于1,4-二噁烷(11vol.)和水(0.9vol.)中的悬浮液脱气。添加Pd(amphos)Cl2(0.1摩尔当量)于1,4-二噁烷(0.9vol.)中的预先加热(50℃)的经脱气悬浮液，并重复脱气循环。将所产生的黄色悬浮液在50℃下加热2小时。将反应混合物冷却至室温，并且然后在DCM(45vol.)与水(45vol.)之间分配。将各相分离，并用DCM(2×45vol.)萃取水层。将有机萃取物合并，并用饱和盐水(45vol.)洗涤，干燥(相分离器)，并在真空中浓缩，以得到深橙色油。将粗产物通过硅胶柱色谱法(0-10％(0.7M胺/MeOH)/DCM)纯化，以得到呈粘性黄色泡沫的(6-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)-3-(5-氯-3-甲氧基喹喔啉-6-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇(87％产率)。MS：[M+H]+＝641。1H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.75(s,1H),8.13(d,J＝8.5Hz,1H),7.97(d,J＝8.5Hz,1H),5.76(s,2H),5.43(t,J＝5.8Hz,1H),4.60(d,J＝5.7Hz,2H),4.14(s,3H),4.12-4.05(m,1H),3.78-3.62(m,5H),3.52(d,J＝8.4Hz,1H),3.38-3.29(m,1H),3.29-3.20(m,1H),2.94(d,J＝5.0Hz,1H),2.00-1.86(m,1H),1.86-1.74(m,1H),1.71-1.55(m,2H),1.32(s,2H),1.10(d,J＝6.4Hz,3H),0.93-0.84(m,2H),-0.08(s,9H)。
步骤2：用甲磺酸(10摩尔当量)逐滴处理(6-((3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)-3-(5-氯-3-甲氧基喹喔啉-6-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基)甲醇(1当量)于DCM(8vol.)和水(0.8vol.)中的(双相)溶液。将所产生的橙色(双相)溶液在室温下搅拌1小时。将甲磺酸(10摩尔当量)再填装到反应混合物中，并将溶液在室温下搅拌另外1小时。将反应混合物用DCM(17vol)和水(26vol.)稀释并剧烈搅拌，同时逐滴添加28％氢氧化铵水溶液(17vol.)。将反应混合物剧烈搅拌1小时。将所产生的沉淀物过滤并用水洗涤，以得到浅黄色固体。收集滤液，并在CHCl3/IPA(3:1，43vol.)与水(43vol.)之间分配。将各相分离，并用3:1CHCl3/IPA溶液(3×43vol.)萃取水层。将有机相合并，干燥(相分离器)，并将溶剂在真空中去除，以得到另外一批黄色固体。将合并的浅黄色固体悬浮于MeOH(8vol.)中，并添加乙烷-1,2-二胺(5摩尔当量)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将不均匀混合物过滤，以得到浅黄色固体。将粗产物通过硅胶色谱法(0-10％(0.7M胺/MeOH)/DCM)纯化，以得到呈浅黄色固体的{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(5-氯-3-甲氧基喹喔啉-6-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇(23％产率)。MS：[M+H]+＝511。
生物测定
SHP2生物化学测定
通过测量替代底物6,8-二氟甲基伞形酮磷酸酯(DiFMUP)向荧光产物6,8-二氟甲基伞形酮(DiFMU)的转化来监测SHP2活性。
在添加6,8-二氟甲基伞形酮磷酸酯(DiFMUP)(赛默飞世尔公司(Thermo Fisher)D6567)之前，将SHP2与测试化合物和活化肽pIRS1(H2N-LN(pY)IDLDLV-(PEG)8-LST(pY)ASINFQK-酰胺)一起预温育30分钟。最终测定浓度为10pM SHP2、0.25μM pIRS1肽、50μMDiFMUP、25mM Bis-Tris丙烷、pH 7.0、150mM NaCl、0.05％(v/v)Tween-20、0.5mM TCEP和5％(v/v)DMSO。然后通过在BMG Pherastar读取器上监测激发360nm/发射450nm的荧光，在30分钟内测量反应速率。使用四参数逻辑曲线拟合根据归一化的剂量-应答图计算IC50值。
细胞pERK抑制测定
将HCC827细胞(美国马纳萨斯的ATCC)在补充有10％FBS的RPMI培养基中以1×105个细胞/孔的密度接种到96孔板中，并温育24小时。首先将化合物稀释在DMSO中，然后稀释到无血清培养基中，然后一式三份添加到细胞中，以得到最终浓度0.1％的DMSO。在5％CO2/空气的加湿气氛中，将板在37℃下温育0.5小时。
化合物处理后，去除培养基，并通过向每个孔中添加50μL裂解缓冲液(美国比佛利的细胞信号传导技术公司(Cell Signaling Technology,Beverly,USA))来裂解细胞。然后将板在晃动的情况下在室温下温育25分钟。按照试剂盒说明使用
Figure BDA0003499997860001711
磷酸化-p44/42MAPK(Thr202/Tyr204)夹心ELISA(美国比佛利的细胞信号传导技术公司)测量裂解物中的pERK水平。简而言之，在96孔ELISA板中，将50μL细胞裂解物添加到50μL ELISA样品稀释剂中，并在4℃下温育过夜。洗涤后，每孔添加100μL检测抗体，并将板在37℃下温育1小时。再次洗涤板，并在每孔添加100μl HRP连接的二级抗体的情况下，在37℃下温育30分钟。最终洗涤后，每孔添加100μL TMB底物，并将板在37℃下温育以显色。通过在每孔中添加100μL终止溶液来终止显色。在SpectraMax Gemini读取器(英国阿克菲尔德的分子装置公司(Molecular Devices,Uckfield,Uk))上在450nm下对板进行读取。
从每个样品孔的信号中减去空白孔(没有添加细胞)的平均信号。然后，使用DMSO处理的样品作为对照，将pERK的水平表示为“对照百分比”。使用GraphPad Prism第6版(美国加利福尼亚州拉荷亚的GraphPad软件公司(GraphPad Software,La Jolla,USA))生成剂量应答曲线，并使用四参数逻辑曲线拟合进行拟合。
结果
表2–从如本文所描述的测定获得的生物数据
实例 SHP2(IC50,μM) 细胞pERK测定(IC50，μM)
1 0.020 0.074
2 0.017 0.081
3 0.0056 0.040
4 0.0053 --
5 0.0076 0.046
6 0.018 0.012
7 0.011 0.0063
8 0.0071 0.0036
9 0.018 0.045
10 0.019 0.017
11 66％@0.030 0.032
12 0.015 0.033
13 35％@0.010 0.095
14 0.013 0.15
15 0.0076 0.059
16 0.0070 0.0062
17 0.014 0.0053
18 37％@0.0030 0.0049
19 0.0098 0.10
20 0.0071 0.0041
21 0.015 0.0057
22 0.011 0.0084
23 0.0054 0.0058
24 0.011 0.0064
25 0.024 0.028
26 0.028 0.018
在获得了多于一个数据点的情况下，上表示出了这些数据点的平均值(例如，几何或算术平均值)。
用于细胞增殖的组合方案
式(I)化合物(化合物1)与(化合物II)组合的效果可以使用以下技术来测定。
方案1
将来自人类癌症细胞系的细胞(例如，如可从商购来源获得的，如ATCC或ECCAC)例如以2×103-4×103细胞/孔的浓度接种到96孔组织培养板上。在添加化合物或媒剂对照(例如，0.1-0.5％DMSO)之前，允许细胞恢复16-24小时。
可以根据以下时间表之一在0.1％-0.5％(v/v)二甲基亚砜(DMSO)中添加化合物的剂量应答矩阵；
a)并发72小时。
b)化合物I持续24小时，然后化合物II持续48小时。
c)化合物II持续24小时，然后化合物I持续48小时。
在化合物温育总共72-96小时后，添加20μl阿尔玛蓝(Alamar blue)。在37℃下进一步温育6小时后，可以在例如Spectramax Gemini读取器(分子装置公司；激发535nm，发射590nm)上对板进行读取。使用S形剂量应答等式(美国加利福尼亚州拉荷亚的GraphPad软件公司)计算GI50值。然后可以确定在存在变化剂量的化合物I的情况下化合物II的GI50或IC50。
可替代地，在化合物温育总共72-96小时后，将细胞用冰冷的10％(w/v)三氯乙酸在冰上固定1小时，并且然后使用板洗涤器(Labsystems Wellwash Ascent)用dH20洗涤四次，并风干。然后在室温下用含0.4％(w/v)磺酰罗丹明B(西格玛公司(Sigma))的1％乙酸染色细胞20分钟，然后用1％(v/v)乙酸洗涤四次，并风干，然后添加10mM Tris缓冲液以溶解染料。通过例如在Wallac Victor2板读取器(1420多标记计数器，珀金埃尔默生命科学公司(Perkin Elmer Life Sciences))上在Abs490 nm或Abs570 nm下进行读取来对比色产物进行定量。确定在存在变化剂量的化合物I的情况下化合物II的GI50或IC50。
当GI50或IC50在存在次有效剂量的化合物I的情况下向下偏移，确定协同作用。当对化合物II和化合物I的应答加在一起产生的效果相当于单独的两个化合物之和的效果时，确定累加性。拮抗作用被定义为使GI50或IC50向上偏移的作用，即对两种化合物的应答小于两种化合物作用之和的作用。
方案2
将来自人类癌症细胞系的细胞(例如，如可从商购来源获得的，如ATCC或ECCAC)例如以2×103-4×103细胞/孔的浓度接种到96孔组织培养板上。在添加化合物或媒剂对照(例如，0.1-0.5％DMSO)之前，允许细胞恢复16-24小时。
在化合物总共温育120小时后，添加100μl CellTiter-Glo
Figure BDA0003499997860001731
(普洛麦格公司(Promega))。在室温下短暂温育10分钟后，可以使用光度计在例如Envision读取器(珀金埃尔默公司)上对板进行读取。使用XLfit计算IC50和抑制％值。然后可以确定在存在不同剂量的化合物I的情况下化合物II的IC50或抑制％。
使用自定义R脚本对原始数据文件进行分批处理来进行协同分析。生成了各种数字和图形输出来总结数据。使用SynergyFinder来使用四个独立的数学参考模型(Loewe累加性、Bliss独立性、最高单个药剂和ZIP)来确定两种测试化合物是否表现出协同作用。
方案3
可以使用如下所示的细胞系和培养基。细胞系获自ATCC或健康科学研究资源库。
Figure BDA0003499997860001741
可以使用384孔培养板(781086，葛莱娜第一生化国际公司(Greiner Bio-OneInternational)来进行细胞存活率测量测定。通过普通方法收集每个细胞系，然后悬浮在含有10％胎牛血清的指定培养基中。将每孔接种的细胞数量设定为500细胞/20μL。在5％CO2下在37°℃下温育24小时后，通过使用D300e数字分配器(帝肯(Tecan))将具有抗肿瘤效应的化合物I和化合物II或媒剂(DMSO)添加到每个孔中。将化合物I的浓度设定为10个浓度。将每种抗癌剂的浓度设定为8个浓度，包含0nM。在将药物添加到细胞后，将细胞进一步在5％CO2下在37°℃下温育3天。通过向每个孔添加20μL
Figure BDA0003499997860001742
(普洛麦格公司)溶液、将细胞在室温下温育10分钟并且然后使用板读取器(ARVO)测量每个孔的化学发光强度来计算细胞存活率。
确定每个药物组合浓度下的组合指数(CI)值。两种药物的组合作用评估如下(《药理科学趋势(Trends Pharmacol.Sci.)》4,450-454,1983；《药理学综述(Pharmacol Rev.)》2006,58(3),621-81)。
CI范围(上限) 说明
<0.1 非常强大的协同作用
0.1-0.3 强大的协同作用
0.3-0.7 协同作用
0.7-0.85 适度的协同作用
0.85-0.9 轻微的协同作用
0.9-1 几乎可加
1-1.2 轻微的拮抗作用
1.2-1.45 适度的拮抗作用
1.45-3.3 拮抗作用
3.3-10 强大的拮抗作用
>10 非常强大的拮抗作用
当然应当理解，本发明不旨在限于仅通过示例的方式描述的上述实施例的细节。
药物调配物实例
(i)片剂调配物
通过将适量的化合物(例如，50-250mg)与适当的稀释剂、崩解剂、压缩剂和/或助滑剂混合来制备含有式(I)化合物的片剂组合物。一种可能的片剂包括50mg化合物和197mg乳糖(BP)作为稀释剂和3mg硬脂酸镁作为润滑剂并以已知方式压制形成片剂。压制而成的片剂可以任选地进行薄膜包衣。
(ii)胶囊调配物
通过将100-250mg式(I)化合物与等量乳糖混合并将所产生的混合物填充到标准硬明胶胶囊中来制备胶囊调配物。可以根据需要以适当的量包含适当的崩解剂和/或助滑剂。
(iii)可注射调配物I
可以通过将式(I)化合物(例如，以盐形式)溶解在含有10％丙二醇的水中以得到1.5重量％的活性化合物浓度来制备通过注射施用的肠胃外组合物。然后将溶液制成等渗溶液，通过过滤或最终灭菌进行灭菌，装入安瓿或小瓶或预填充注射器中，并密封。
(iv)可注射调配物II
通过将式(I)化合物(例如，以盐形式)(2mg/ml)和甘露醇(50mg/ml)溶解在水中、将溶液无菌过滤或通过最终灭菌来灭菌并装入可密封的1ml小瓶或安瓿或预填充注射器中来制备注射用肠胃外组合物。
(v)可注射调配物III
可通过将式(I)化合物(例如，以盐形式)以20mg/ml溶解在水中并且然后调整等渗性来制备用于通过注射或输注进行静脉内递送的调配物。然后将小瓶密封，并通过高压灭菌，或装入安瓿或小瓶或预填充注射器中，通过过滤灭菌，并密封。
(vi)可注射调配物IV
可通过将式(I)化合物(例如，以盐形式)以20mg/ml溶解在含有缓冲液(例如，0.2M乙酸盐，pH 4.6)的水中来制备通过注射或输注进行静脉内递送的调配物。然后将小瓶、安瓿或预填充注射器密封，并通过高压灭菌或通过过滤灭菌，并密封。
(vii)皮下或肌肉内注射调配物
通过将式(I)化合物与药用级玉米油混合以得到5-50mg/ml的浓度来制备用于皮下或肌肉内施用的组合物。将组合物灭菌，并装入合适的容器中。
(viii)冻干调配物I
将调配的式(I)化合物的等分试样放入50ml小瓶中并冻干。在冻干期间，使用一步冷冻方案将组合物在(-45℃)下冷冻。将温度升至-10℃以进行退火，然后在-45℃下降至冷冻，然后在+25℃下初次干燥大约3400分钟，然后进行二次干燥，如果温度达到50℃，则增加步骤。将初次和二次干燥期间的压力设定为80毫托。
(ix)冻干调配物II
将调配的如本文所定义的式(I)化合物或其盐的等分试样放入50mL小瓶中并冻干。在冻干期间，使用一步冷冻方案将组合物在(-45℃)下冷冻。将温度升至-10℃以进行退火，然后在-45℃下降至冷冻，然后在+25℃下初次干燥大约3400分钟，然后进行二次干燥，如果温度达到50℃，则增加步骤。将初次和二次干燥期间的压力设定为80毫托。
(x)用于静脉内施用的冻干调配物III
通过将式I化合物溶解在缓冲液中来制备水性缓冲溶液。将缓冲溶液装入容器(例如1型玻璃小瓶)，进行过滤以去除颗粒物质，然后将其部分密封(例如，通过Fluorotec活塞)。如果化合物和调配物足够稳定，则通过在121℃下高压灭菌合适的时间段对调配物进行灭菌。如果调配物对高压灭菌不稳定，则可以使用合适的过滤器对其进行灭菌，并在无菌条件下装入无菌小瓶中。使用合适的循环将溶液冷冻干燥。冷冻干燥循环完成后，将小瓶用氮气回填至大气压力，加塞并固定(例如，用铝卷边)。对于静脉内施用，冷冻干燥的固体可以用药学上可接受的稀释剂，如0.9％盐水或5％右旋糖重构。溶液可以按原样给药，或可以在施用前进一步稀释到输注袋(含有药学上可接受的稀释剂，如0.9％盐水或5％右旋糖)中。
(xii)瓶装粉末剂
通过用式(I)化合物填充瓶子或小瓶来制备用于口服施用的组合物。然后用合适的稀释剂，例如水、果汁或可商购获得的媒剂，如OraSweet或Syrspend对组合物进行重构。可以将重构的溶液分配到给药杯或口服注射器中以进行施用。

Claims (35)

1.一种式(I)化合物：
Figure FDA0003499997850000011
或其互变异构体或溶剂化物或药学上可接受的盐，其中：
R1是氢或羟基；
R2和R3独立地选自氢、卤素、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基和-CN；
X是O或CR4R5；
R4和R5独立地选自氢、卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基和卤代C1-4烷基；
R6和R7是氢、C1-4烷氧基或卤素(例如，氯或氟)，或者R6和R7接合以形成任选地被一个或多个(例如，1个、2个或3个)R10基团取代的环A；
环A是以下中的任一个：
(i)五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(ii)六元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(iii)六元非芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子；
R8选自卤代C1-4烷基(例如，-CF3)、-CH3和卤素(例如，氯或氟)；
R9选自氢、C1-4烷基(例如，-CH3)、卤代C1-4烷基(例如，-CF3)和卤素(例如，氯)；
R10独立地选自：卤素；氰基；氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)；羟基；＝O(氧代)；C1-4烷基(例如，-CH3、-CH(CH3)2或-CH2CH3)；卤代C1-4烷基(例如，-CHF2)；C1-4烷氧基(例如，-OCH3、-OCH2CH3和-OCH(CH3)2)；羟基C1-4烷基(例如，-CH2C(CH3)2OH、-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)；C1-4烷氧基C1-4亚烷基(例如，-CH2-O-CH3或-CH2-CH2-O-CH3)；C1-4烷基砜(例如，-SO2CH3)；氨基；单C1-4烷基氨基；二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)；氨基C1-4亚烷基(例如，-CH2NH2)；-C1-4亚烷基-C(＝O)NH(2-q)(C1-6烷基)q；-C0-4亚烷基-NHC(＝O)C1-6烷基；磺酰胺C0-4亚烷基(例如，-SO2NRx 2或-CH2SO2NRx 2，其中Rx独立地选自H和C1-6烷基)；3到6元环烷基；含有选自O、N或S的1个、2个、3个或4个杂原子的任选地经取代的五或六元不饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基；被3到6元环烷基取代的C1-4烷基；被含有选自O、N或S的1个、2个、3个或4个杂原子的任选地经取代的五或六元不饱和杂环基团取代的C1-4烷基，其中任选的取代基选自C1-4烷基；被含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四或六元饱和杂环基团取代的C1-4烷基，其中任选的取代基选自C1-4烷基；以及含有选自O、N或S的1个或2个杂原子的任选地经取代的四或六元饱和杂环基团，其中任选的取代基选自C1-4烷基；并且
q选自0、1和2。
2.根据权利要求1所述的式(I)化合物，其中X是O。
3.根据权利要求1所述的式(I)化合物，其中X是CR4R5，并且R4和R5独立地选自氢、卤素和任选地被一个或多个卤素取代的C1-4烷基(例如，任选地被一个或多个卤素取代的C1烷基)。
4.根据权利要求1或3中任一项所述的式(I)化合物，其中X是CR4R5，并且R4是氢并且R5选自卤素(例如，氟、氯、溴或碘，具体地氟)和卤代甲基(例如，单卤代甲基、二卤代甲基和三卤代甲基，其中卤代选自氟、氯、溴或碘)。
5.根据权利要求1到4中任一项所述的式(I)化合物，其中R1是羟基。
6.根据权利要求1到4中任一项所述的式(I)化合物，其中R1是氢。
7.根据权利要求1到6中任一项所述的式(I)化合物，其中R2是氢，并且R3选自C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基和-CN。
8.根据权利要求1到7中任一项所述的式(I)化合物，其中R2是氢，并且R3是C1-4烷基，例如-CH3。
9.根据权利要求1到8中任一项所述的式(I)化合物，其中R8选自-CH3、氯和氟。
10.根据权利要求1到9中任一项所述的式(I)化合物，其中R8是氯。
11.根据权利要求1到10中任一项所述的式(I)化合物，其中R9是氢。
12.根据权利要求1到11中任一项所述的式(I)化合物，其中R6和R7是氢或卤素(例如，氯或氟)。
13.根据权利要求1到11中任一项所述的式(I)化合物，其中R6和R7接合以形成任选地被一个或多个(例如，1个、2个或3个)R10基团取代的环A；
其中环A是以下中的任一个：
(i)五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(ii)六元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(iii)六元非芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子。
14.根据权利要求13所述的式(I)化合物，其中环A是五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)或六元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子。
15.根据权利要求14所述的化合物，其中环A是五元含氮杂环(例如，芳香族环或非芳香族环)，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子。
16.根据权利要求15所述的化合物或其互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是五元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子。
17.根据权利要求1到13中任一项所述的化合物或其互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是以下中的任一个：
(i)六元芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N、O和S的一个或两个额外杂原子；或
(ii)六元非芳香族含氮杂环，其中所述杂环任选地含有选自N和S的一个或两个额外杂原子。
18.根据权利要求1到12中任一项所述的化合物，其中部分
Figure FDA0003499997850000031
选自本文中的表I或表II。
19.根据权利要求18所述的化合物或其互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其中部分
Figure FDA0003499997850000041
选自：
Figure FDA0003499997850000042
例如
Figure FDA0003499997850000043
或选自：
Figure FDA0003499997850000044
例如
Figure FDA0003499997850000045
20.根据权利要求1到19中任一项所述的化合物，其中R10独立地选自卤素、氰基、氰基C1-4烷基(例如，-CH2-CN)、羟基、＝O(氧代)、C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基(例如，-OCH3)、羟基C1-4烷基(例如，-CH(CH3)CH2OH、-CH(CH3)OH、-CH2CH2OH或-CH2OH)、二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)和C1-4烷氧基C1-4亚甲基(例如，-CH2-O-CH3)，例如其中R10独立地选自卤素、氰基、羟基、＝O(氧代)和C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)。
21.根据权利要求1到20中任一项所述的化合物，其中R10独立地选自卤素、氰基、羟基、＝O(氧代)、C1-4烷氧基(例如，-OCH3)、二C1-4烷基氨基(例如，-N(CH3)2)和C1-4烷基(例如，-CH3或-CH2CH3)，例如其中R10独立地选自羟基、＝O(氧代)和C1-4烷基(例如，-CH3)。
22.根据权利要求1所述的化合物或其互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R6和R7接合以形成环A，并且所述式(I)化合物是式(XVIII)化合物：
Figure FDA0003499997850000051
23.根据权利要求1所述的化合物或其互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述化合物选自：
(1R,3R)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-(三氟甲基)-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺；
(1R)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺；
(4S)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺；
(4S)-8-[3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺；
(4S)-8-[3-(4-氯-2-乙基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺；
(3S,4S)-8-[3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺；
{6-[(1R)-1-氨基-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(4-氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；
(3S,4S)-8-[3-(5-氯-3-甲氧基喹喔啉-6-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺；
(3S,4S)-8-{3-[5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基]-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基}-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺；
(4S)-8-{3-[5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基]-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基}-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺；
7-{6-[(1R)-1-氨基-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-3-基}-8-氯-N,N-二甲基喹喔啉-2-胺；
(4S)-8-[3-(5-氯-3-甲氧基喹喔啉-6-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺；
(1R)-8-[3-(5-氯-3-甲氧基喹喔啉-6-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺；
(1R)-8-[3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-8-氮杂螺[4.5]癸-1-胺；
{6-[(1R)-1-氨基-3,3-二氟-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-[5-氯-3-(二甲基氨基)喹喔啉-6-基]-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(2,3-二氯苯基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；
(3S,4S)-8-[3-(3-氯-2-氟苯基)-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基]-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺；
{6-[(1R,3S)-1-氨基-3-氟-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3,4-二氯-2-甲基-2H-吲唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(4-氯-2,3-二甲基-2H-吲唑-5-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(5-氯-3-甲氧基喹喔啉-6-基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(3-氯-2-氟苯基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；
{6-[(3S,4S)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基]-3-(2-氯苯基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-5-基}甲醇；
(3S,4S)-8-{3-[3-(氮杂环丁烷-1-基)-5-氯喹喔啉-6-基]-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基}-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺；以及
(3S,4S)-8-{3-[5-氯-3-(吗啉-4-基)喹喔啉-6-基]-5-甲基-1H-吡唑并[3,4-b]吡嗪-6-基}-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺。
24.一种组合，其包括根据权利要求1到23中任一项所述的式(I)化合物以及一种或多种(例如，1种或2种)其它治疗剂(例如，抗癌剂)。
25.一种药物组合物，其包括根据权利要求1到23中任一项所述的式(I)化合物或根据权利要求24所述的组合。
26.根据权利要求1到23中任一项所述的化合物、根据权利要求24所述的组合或根据权利要求25所述的药物组合物，所述化合物、所述组合或所述药物组合物用于疗法中。
27.根据权利要求1到23中任一项所述的化合物、根据权利要求24所述的组合或根据权利要求25所述的药物组合物，所述化合物、所述组合或所述药物组合物用于预防或治疗由SHP2介导的疾病状态或病状。
28.根据权利要求1到23中任一项所述的化合物、根据权利要求24所述的组合或根据权利要求25所述的药物组合物，所述化合物、所述组合或所述药物组合物用于预防或治疗如本文所述的疾病状态或病状。
29.根据权利要求1到23中任一项所述的化合物、根据权利要求24所述的组合或根据权利要求25所述的药物组合物，所述化合物、所述组合或所述药物组合物用于预防或治疗癌症。
30.一种根据权利要求1到23中任一项所述的化合物、根据权利要求24所述的组合或根据权利要求25所述的药物组合物用于制备用于预防或治疗如本文所述的疾病状态或病状的药物的用途。
31.一种用于预防或治疗如本文所述的疾病或病状的方法，所述方法包括向患者施用根据权利要求1到23中任一项所述的化合物、根据权利要求24所述的组合或根据权利要求25所述的药物组合物。
32.根据权利要求1到23中任一项所述的化合物或根据权利要求24所述的药物组合物，所述化合物或所述药物组合物用于预防或治疗癌症，其中所述化合物与一种或多种其它治疗剂(例如，抗癌剂)或疗法组合使用。
33.根据权利要求1到23中任一项所述的化合物，其与一种或多种其它治疗剂(例如，抗癌剂)或疗法用于组合疗法。
34.一种用于制备根据权利要求1到23中任一项所述的式(I)化合物或其互变异构体、立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物的方法，所述方法包括：
(a)使式(A)化合物或其受保护衍生物：
Figure FDA0003499997850000081
其中X、R1、R2和R3如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且P表示保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，并且Z是金属残留物(如卤化锌，例如氯化锌)或离去基团(如卤素，例如碘或溴)
与式(B)化合物或其受保护版本偶联
Figure FDA0003499997850000082
其中R6、R7、R8和R9如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且V表示金属或类金属残留物(如硼酸、硼酸频哪醇酯、卤化镁或卤化锌，例如硼酸、硼酸频哪醇酯)或离去基团，如卤素，
随后进行适于去除所述保护基团的脱保护反应；或
(b)使式(C)化合物或其受保护衍生物：
Figure FDA0003499997850000083
其中R1、R6、R7、R8和R9如上文针对所述式(I)化合物所定义的，X是CH，P表示保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，L是离去基团(如氯)，
与式(D)化合物或其受保护衍生物偶联，其中X、R2和R3如上文针对所述式(I)化合物所定义的
Figure FDA0003499997850000091
或
(c)使式(K)化合物或其受保护衍生物，
Figure FDA0003499997850000092
其中X、R2、R3、R6、R7、R8和R9如本文针对所述式(I)化合物所定义的，P表示胺保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)、N,N-二甲基氨磺酰基或氢，L3是离去基团(如卤素，例如溴)：
(i)在存在金属催化剂(如(1,3二异丙基咪唑-2-亚基)(3-氯吡啶基)二氯化钯(II))的情况下与式CH3M的有机金属物种反应，其中M是金属(例如，CH3-Zn-Hal，其中Hal是卤素，例如氯、溴或碘)，以得到式(I)化合物，其中R1是H；或
(ii)在存在光氧化还原催化剂(如[Ir{dFCF3ppy}2(bpy)]PF6)、金属催化剂(如氯化镍(II)乙二醇二甲基醚复合物)、配体(如4,4'-二叔丁基-2,2'-二吡啶基)、碱基(如磷酸二钾)和光源(如蓝色LED)的情况下与烷基硼酸酯(如2-(三甲基甲硅烷基)-乙氧基甲基三氟硼酸钾)反应，以得到式(I)化合物，其中R1是OH；或
(d)使用肼或其受保护肼衍生物使式(R)化合物或其受保护衍生物环化，
Figure FDA0003499997850000101
其中X、R1、R2、R3、R6、R7、R8和R9如上文针对所述式(I)化合物所定义的，并且L1表示合适的离去基团，如卤素；
在每种情况下任选地随后进行脱保护步骤；或
(e)使式(I)化合物的受保护衍生物脱保护；或
(f)使式(I)化合物或其受保护衍生物与另外的式(I)化合物或其受保护衍生物相互转化；或
(g)任选地形成式(I)化合物的药学上可接受的盐。
35.一种用于制备根据权利要求38所述的式(I)化合物或其互变异构体、立体异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物的方法，其中所述式(A)化合物是通过以下产生的：使式(X')化合物或其受保护衍生物：
Figure FDA0003499997850000102
其中R1如权利要求1所定义的，P表示保护基团(如2-四氢吡喃；THP或2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基；SEM)或为氢，并且L1和L2独立地表示离去基团(如卤化物，例如氯、溴或碘)，
与式(D)化合物或其受保护衍生物反应：
Figure FDA0003499997850000103
其中X、R2和R3如权利要求1所定义的。
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