CN114159545A - 一种含有酵素的美白抗皱组合物及其在药品中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种含有酵素的美白抗皱组合物及其在药品中的应用。本发明以甘草、天竺葵和绿茶为原料发酵制备得到了复合酵素联合多肽使用后，能够具有较好的抑制黑色素合成以及抑制黑色素细胞增殖的功效，可以用于化妆品领域以及药物领域，具有很好的应用前景和市场价值。

Description

一种含有酵素的美白抗皱组合物及其在药品中的应用
技术领域
本发明涉及药物领域和化妆品领域，更具体的，涉及一种含有酵素的美白抗皱组合物及其在药品中的应用。
背景技术
因为“一白遮三丑”的传统美观念，亚洲女性对于美白的追求就像人类对于光明的追求一样从未停止，胭脂水粉几乎是每个成年女性的必备品，到了现在，更是有遮瑕膏、粉底、散粉、粉饼等林林总总的粉饰家族，粉饰美白、粉饰太平。其实，美白就像是治病，治标不如治本，只有把内在肤质调理好，根治影响美白的罪魁祸首——黑色素，肌肤才能展现真正由内而外的自然美白光彩。美白效果比较好的产品如婉香年华活肤蛋白，针对皮肤美白，可以进行内部调理。
黑色素是在黑素小体中生成，底物酪氨酸在限速酶—酪氨酸酶(TYR)的催化作用下变成了多巴醌之后，进行一系列的自氧化反应与连接反应，最终生成褐黑素，而褐黑素呈现红色，在正常情况下，黑色素皮质素受体1(MC1R)表达正常，则褐黑素合成会受到抑制；当MC1R发生突变时，褐黑素就会表达，使肤色偏红，而多巴醌又可以形成无色的多巴色素，一方面多巴色素在无需酶的作用下经过一系列的反应最终形成了黑真黑素，另一方面它也能在酪氨酸酶相关蛋白2(TRP2)和酪氨酸酶相关蛋白1(TRP1)的催化作用下最终形成棕真黑素.其中黑真黑素呈现黑色，其含量低时呈现灰色；棕真黑素呈现棕色，其含量低时表现为棕色.皮肤中两种真黑素含量的高低形成了不同的肤色.此外，真黑素和褐黑素两种色素属于高分子形式的黑色素，不溶于水，以粉末形式存在；而其它的色素分子或中间产物属于低分子形式的黑色素，可溶于水。
酪氨酸酶家族即TYR、TRP1和TRP2在黑色素合成和色素沉积中起着非常重要的作用，TYR是一种含铜离子的跨膜糖蛋白，其基因在细胞核中转录成mRNA之后，进入到细胞质中，在核糖体上经酶催化作用后翻译成肽链.然后在内质网上经过一系列的修饰如糖基化修饰，再进入高尔基体，最终转移至黑素小体中，成为有活性的TYR，之后便可以催化底物酪氨酸变成多巴，从而开启黑色素的合成。
研究发现天然植物活性成分作为化妆品美白添加剂，具有温和、持久、安全性高等特性。黄酮类化合物广泛存在于植物界，其中许多具有清除皮肤中自由基、促进皮肤新陈代谢、减少色素沉着、润泽肌肤等作用。黄酮类化合物可分为七大类，包括：黄酮、黄酮醇、黄烷醇、黄烷酮、异黄酮、查耳酮、儿茶素。黄酮类化合物结构在原理上是与酪氨酸酶的底物形成竞争性抑制作用，因此具有美白功效。许多提取植物提取物，如桑叶黄酮、甘草提取物、芦荟苦素、葛根黄酮类物质、槐豆黄酮类提取物，均通过抑制酪氨酸酶活性来控制黑色素的生成，可以达到美白的效果。其中使用最多的天然成分是甘草提取物。如妮维雅美白防护日霜中加有甘草精华；雅芳美白系列产品中也含有甘草提取物；迪奥(上海)生产的美白护肤露中同时加入了维生素C、熊果苷和甘草酸3种美白成分。甘草提取物近些年来广泛的用于高档化妆品中，它的功效在护肤领域是被广泛认可的，随着提取工艺的完善，能更好、更有效的运用到人们的生活中。
酵素是一类包含了酶及其产酶微生物和相关调节因子以及相互作用因子，如激活剂及抑制剂、协同及反馈调控因子等的物质。人体肌肤中存在多种酵素，以帮助表皮细胞的再生以及皮脂腺、汗腺的分泌。随着年龄增大，体内酵素相对减少，皮肤衰老。因此，酵素成为一类新兴的化妆品功效添加剂。我国对酵素化妆品的认识还处于起步阶段，真正进入市面的产品相对较少，大部分含酵素的化妆品均为国外品牌，如欧洲碧欧泉，日本资生堂、高丝，韩国的the face shop等。因此，开发一种全新的国产的富含酵素的美白化妆品或者抑制黑色素合成的药物是目前迫切需要解决的技术问题。
发明内容
本发明克服现有技术的缺陷，提供了一种具有美白化妆品或者抑制黑色素合成的药物。
进一步的，本发明提供一种复合酵素。
所述复合酵素的制备方法是，将新鲜的甘草、天竺葵和绿茶按照2:1:0.5的重量比洗净切碎后，加入纯净水榨汁制备得到浑浊液，加入纤维素酶和果胶酶，酶活比1：5对浑浊液进行酶解，酶添加量1000U/g，酶解温度55℃，酶解时间150min，酶解结束后90℃灭酶10min；随后加入红糖和酵母膏搅拌混匀，加入发酵罐中杀菌后，接入1％wt保加利亚乳杆菌Lactobacillus bulgaricus(德氏乳杆菌保加利亚亚种)CICC 6098于28℃条件下厌氧发酵3d，按照1％wt的比例接入酵母菌(安琪酵母)并于28℃条件下微搅拌发酵2d，然后之后转入25℃条件下后熟1d；发酵结束发酵液进行离心处理，得到复合酵素原液和固体残渣。将原液进行减压浓缩，通过减压干燥，得到甘草、天竺葵和绿茶复合酵素粉备用。
其中，天竺葵是全能的护肤花，适合各种皮肤状况，能平衡皮脂分泌而使皮肤变得饱满，能很好地促进血液循环，让苍白粗糙的皮肤回复红润和活力，发明人研究发现了天竺葵含有美白的组分。绿茶有很强的抗菌作用和抑酶作用，发明人发现绿茶具有很强的抗氧化特性，同时能够分泌能够抑制黑色素合成的酶系。甘草在美白护肤方面能阻止黑色素的产生，并且可防止皮肤粗糙，保持细腻、光泽和弹性，长期使用也不会会出现不良反应。发明人通过针对40多种常见的植物进行研究组合，通过接近300种组合实验，筛选获得了将甘草、天竺葵和绿茶复合发酵酵素具有较好的美白抑制黑色素合成的效果进而获得了本发明。
本发明还提供一种能够抑制黑色素合成的酪氨酸酶抑制剂多肽，所述多肽为YZLS-3多肽或者YZLS-7多肽，其中YZLS-3多肽序列如SEQ ID NO：1所示。本发明的多肽是前期通过多肽库筛选获得的具有较好抑制人酪氨酸酶活性的多肽，所述多肽的IC50分别是为5.6mmol/L和5.3mmol/L。
进一步的，本发明提供一种复合酵素联合多肽在制备美白化妆品中的用途，其中，复合酵素是按照如下方法制备获得的：甘草、天竺葵和绿茶通过按照2:1:0.5的重量比洗净切碎后，加入纯净水榨汁制备得到浑浊液，加入纤维素酶和果胶酶，酶活比1：5对浑浊液进行酶解，酶添加量1000U/g，酶解温度55℃，酶解时间150min，酶解结束后90℃灭酶10min；随后加入红糖和酵母膏搅拌混匀，加入发酵罐中杀菌后，接入1％wt保加利亚乳杆菌Lactobacillus bulgaricus(德氏乳杆菌保加利亚亚种)CICC 6098于28℃条件下厌氧发酵3d，按照1％wt的比例接入酵母菌(安琪酵母)并于28℃条件下微搅拌发酵2d，然后之后转入25℃条件下后熟1d；发酵结束发酵液进行离心处理，得到复合酵素原液和固体残渣。将原液进行减压浓缩，通过减压干燥，得到甘草、天竺葵和绿茶复合酵素粉备用。多肽是序列如SEQID NO：1所示的多肽。
本发明的化妆品组合物可以本领域常规制备的任何制剂制备，并且可以配制，例如，但不限于，溶液，悬浮液，乳液，糊剂，凝胶，乳膏，洗剂，粉末，肥皂，含表面活性剂的清洁剂，油，粉末基础，乳液基础，蜡基础，喷雾剂等。更具体地说，它可以制备成软化妆水，营养化妆水，营养霜，按摩霜，香精，眼霜，清洁霜，清洁泡沫，清洁水，包装，喷雾或粉末的形式。
当本发明的制剂为糊剂时，乳膏或凝胶，动物油，植物油，蜡，石蜡，淀粉，着色剂，纤维素衍生物，聚乙二醇，硅氧烷，膨润土，二氧化硅，滑石或氧化锌等可用作载体组分。
当本发明的制剂是粉末或喷雾剂时，乳糖，滑石，二氧化硅，氢氧化铝，硅酸钙或聚酰胺粉末可以用作载体组分，并且可以另外包含推进剂，例如氯氟烃，丙烷/丁烷或二甲醚，特别是当制剂是喷雾剂时。
当本发明的制剂是溶液或乳液时，溶剂，增溶剂或乳化剂用作载体组分，例如水，乙醇，异丙醇，碳酸乙酯，乙酸乙酯，苯甲醇，苯甲酸苄酯，丙二醇，1，3-丁二醇油，甘油脂族酯，聚乙二醇或脱水山梨糖醇的脂肪酸酯。
当本发明的制剂是悬浮液时，载体组分可使用液体稀释剂如水，乙醇或丙二醇，悬浮剂如乙氧基化异硬脂醇，聚氧乙烯山梨糖醇酯和聚氧乙烯山梨糖醇酯，微晶纤维素，氢氧化铝，膨润土，琼脂或着色剂等。
可以使用脂肪醇硫酸盐，脂肪醇醚硫酸盐，磺基琥珀酸单酯，咪唑啉鎓衍生物，甲基牛磺酸，肌氨酸盐，脂肪酸酰胺醚硫酸盐，烷基酰胺甜菜碱，脂肪醇，脂肪酸甘油酯，脂肪酸二乙醇酰胺，植物油，羊毛脂衍生物或乙氧基化甘油脂肪酸酯等。
本发明的化妆品组合物可单独使用或通过外涂，或通过用不同于本发明的另一种化妆品组合物外涂。另外，根据本发明的具有优异的皮肤保湿效果和皮肤屏障改善效果的化妆品组合物可以按照常规的使用方法使用，并且可以根据使用者的皮肤状况或口味改变使用次数。
进一步的，本发明还提供一种复合酵素联合多肽在制备抑制黑色素细胞增殖的药物中的用途，其中，复合酵素是按照如下方法制备获得的：甘草、天竺葵和绿茶通过按照2:1:0.5的重量比洗净切碎后，加入纯净水榨汁制备得到浑浊液，加入纤维素酶和果胶酶，酶活比1：5对浑浊液进行酶解，酶添加量1000U/g，酶解温度55℃，酶解时间150min，酶解结束后90℃灭酶10min；随后加入红糖和酵母膏搅拌混匀，加入发酵罐中杀菌后，接入1％wt保加利亚乳杆菌Lactobacillus bulgaricus(德氏乳杆菌保加利亚亚种)CICC 6098于28℃条件下厌氧发酵3d，按照1％wt的比例接入酵母菌(安琪酵母)并于28℃条件下微搅拌发酵2d，然后之后转入25℃条件下后熟1d；发酵结束发酵液进行离心处理，得到复合酵素原液和固体残渣。将原液进行减压浓缩，通过减压干燥，得到甘草、天竺葵和绿茶复合酵素粉备用。多肽是序列如SEQ ID NO：1所示的多肽。
根据本公开的用于抑制黑色素细胞增殖的组合物可包含药学上可接受的载体。包含药学上可接受的载体的组合物可以是各种口服或胃肠外制剂的形式。当配制该组合物时，可以使用典型的稀释剂或赋形剂，例如填料，增量剂，粘合剂，湿润剂，崩解剂，表面活性剂等。
口服固体制剂包括片剂，丸剂，散剂，颗粒剂，胶囊等，这些固体制剂可以通过将至少一种化合物与至少一种赋形剂如淀粉碳酸钙，蔗糖，乳糖凝胶等以及简单的赋形剂混合来制备也可以使用润滑剂如硬脂酸镁滑石等。用于口服给药的液体制剂的例子包括悬浮液，内部使用的液体，乳液，糖浆等。除了常用的简单稀释剂如水和液体石蜡外，各种赋形剂如湿润剂，甜味剂，芳香剂，防腐剂等也可以是包含。
用于胃肠外给药的制剂包括灭菌的水溶液，非水溶液，悬浮液，乳剂，冻干产品和栓剂。非水溶液或悬浮液可含有丙二醇聚乙二醇，植物油如橄榄油，可注射的酯如油酸乙酯等作为栓剂WITEPSOL MACROGOL TWEEN 61可可脂月桂酸脂甘油明胶等的基质。
该药物组合物可以是选自下组的制剂形式：丸剂，散剂，颗粒剂，胶囊，悬浮液，内服液体，乳剂，糖浆剂，无菌水溶液一种非水溶液，一种悬浮液，一种乳剂，一种冻干物和一种栓剂。
此外，如上所述，该药物组合物可以给药以治疗各种疾病，包括黑色素瘤和/或与之相关的症状。
本公开的组合物以药学有效量给药。本文所用术语“药学有效量”是指足以以适用于医疗的合理利益/风险比治疗疾病的量。该组合物的有效剂量水平可根据受试者的类型，疾病的严重程度，受试者的年龄和性别，药物敏感性的活性，给药时间，给药途径，排泄速率，联合使用的治疗药物的持续时间来确定该组合物与医学领域已知的其它因素结合。
本公开的药物组合物可以单独给药或与其它治疗剂联合给药，并且可以与常规治疗剂顺序或同时给药。该组合物可以以单剂型或多剂型给药。重要的是，考虑到所有上述因素，以能够表现出最大效果而不引起副作用的最小量施用该组合物。本公开的药物组合物可以以0.001-100mg/kg的剂量给予成人。
只要到达目标组织，就可以采用任何常规途径给药该药物组合物。根据目的，本公开的组合物可以腹膜内，静脉内，肌肉内，皮下，皮内，口鼻内，肺内或直肠内给药但不限于此。此外，该组合物可以使用能够将活性成分递送到靶细胞的任何系统给药。
有益效果
本发明以甘草、天竺葵和绿茶为原料发酵制备得到了复合酵素联合多肽使用后，能够具有较好的抑制黑色素合成以及抑制黑色素细胞增殖的功效，可以用于化妆品领域以及药物领域，具有很好的应用前景和市场价值。
附图说明
图1黑色素细胞增殖抑制实验结果图
具体实施方式
以下，将通过制备实施例和实施例详细解释本发明。然而，提供以下制备实施例和实施例只是为了举例说明本公开，本公开不限于以下制备实施例和实施例。
实施例1甘草、天竺葵和绿茶复合酵素的制备
将新鲜的甘草、天竺葵和绿茶按照200g:100g:50g的重量比洗净切碎后，加入1L的纯净水榨汁制备得到浑浊液，加入纤维素酶和果胶酶，酶活比1：5对浑浊液进行酶解，酶添加量1000U/g，酶解温度55℃，酶解时间150min，酶解结束后90℃灭酶10min；随后加入红糖30g和15g酵母膏搅拌混匀，加入发酵罐中杀菌后，接入1％wt保加利亚乳杆菌Lactobacillus bulgaricus(德氏乳杆菌保加利亚亚种)CICC 6098于28℃条件下厌氧发酵3d，按照1％wt的比例接入酵母菌(安琪酵母)并于28℃条件下微搅拌发酵2d，然后之后转入25℃条件下后熟1d；发酵结束发酵液进行离心处理，得到复合酵素原液和固体残渣。将原液进行减压浓缩，通过减压干燥，得到甘草、天竺葵和绿茶复合酵素粉备用。
实施例2甘草、天竺葵复合酵素的制备
将新鲜的甘草、天竺葵按照200g:100g的重量比洗净切碎后，加入1L的纯净水榨汁制备得到浑浊液，加入纤维素酶和果胶酶，酶活比1：5对浑浊液进行酶解，酶添加量1000U/g，酶解温度55℃，酶解时间150min，酶解结束后90℃灭酶10min；随后加入红糖30g和15g酵母膏搅拌混匀，加入发酵罐中杀菌后，接入1％wt保加利亚乳杆菌Lactobacillusbulgaricus(德氏乳杆菌保加利亚亚种)CICC 6098于28℃条件下厌氧发酵3d，按照1％wt的比例接入酵母菌(安琪酵母)并于28℃条件下微搅拌发酵2d，然后之后转入25℃条件下后熟1d；发酵结束，发酵液进行离心处理，得到复合酵素原液和固体残渣。将原液进行减压浓缩，通过减压干燥，得到甘草和天竺葵复合酵素粉备用。
实施例3甘草酵素的制备
将新鲜的甘草200g洗净切碎后，加入1L的纯净水榨汁制备得到浑浊液，加入纤维素酶和果胶酶，酶活比1：5对浑浊液进行酶解，酶添加量1000U/g，酶解温度55℃，酶解时间150min，酶解结束后90℃灭酶10min；随后加入红糖30g和15g酵母膏搅拌混匀；加入发酵罐中杀菌后，接入1％wt保加利亚乳杆菌Lactobacillus bulgaricus(德氏乳杆菌保加利亚亚种)CICC 6098于28℃条件下厌氧发酵3d，按照1％wt的比例接入酵母菌(安琪酵母)并于28℃条件下微搅拌发酵2d，然后之后转入25℃条件下后熟1d；发酵结束发酵液进行离心处理，得到酵素原液和固体残渣。将原液进行减压浓缩，通过减压干燥，得到甘草酵素粉备用。
实施例4酵素对酪氨酸酶抑制活性测定
反应在96孔培养板中进行，总反应体系为200μL:不同浓度的酵素溶液40μL；67.0mmol/L磷酸盐缓冲液80μL；100U/mL酪氨酸酶溶液40μL。调零孔仅加67.0mmol/L磷酸盐缓冲液200μL。加样完毕后，混匀，将其置于37℃水浴孵箱中孵育20min，用酶联免疫检测仪检测反应产物在490nm波长处的特异性吸光值(A490)，重复测试4次。按照下式计算不同酵素对酪氨酸酶的抑制率:酪氨酸酶抑制率(％)＝[(A－B)－(C－D)]/(A－B)×100％。其中，A＝A490－酵素+酶；B＝A490－酵素－酶；C＝A490+酵素+酶；D＝A490+酵素－酶。同时以抑制率对抑制剂浓度作图，根据抑制曲线求得各化合物的IC50值(抑制率为50％时的抑制剂浓度)，结果见表1。
表1酵素对酪氨酸酶的抑制活性
样品名称 IC<sub>50</sub>(mmol/L)
实施例1制备的复合酵素 57.62±8.42
实施例2制备的复合酵素 99.73±19.51
实施例3制备的酵素 167.62±23.10
PBS(空白对照) -
曲酸(阳性对照) 0.325±0.007
由表1可以看出，实施例1-3制备的酵素与阳性对照曲酸相比均有一定的酪氨酸酶抑制活性，其中以实施例1制备的酵素的的抑制作用最强，实施例2制备的酵素次之。由于曲酸存在明显的副作用，而实施例1制备的复合酵素从天然植物中混合发酵制备的，所采用的发酵菌均是食用菌，无毒副作用，因此，可作为一种良好的美白产品。
实施例5酵素及多肽的动物实验
将豚鼠，体重(250±20)g，随机分组每组10只，将背部皮肤部位去除被毛，经UVB紫外线照射，波长为310nm，累计照射总量5000mJ/cm2。每天照射1次，每次1h，持续7d，未照射部位以斑试器覆盖。在每只豚鼠背部取相对独立的2块区域作为给药区，分别为治疗组和空白对照组以及不治疗模型组。取封闭式斑试器，将受试药物或对照以约(1.0±0.05)mL置于斑试器内，与皮肤直接接触，固定斑试器，敷用时间为6h，试验结束后用温水清除残留受试物。具体的分为如下几组给药：
实验组1：实施例1制备的复合酵素配置成为10mg/mL浓度,1mL给药；
实验组2：实施例1制备的复合酵素配置成为10mg/mL浓度,YZLS-3多肽(SEQ IDNO：1)配置成为10mg/mL，按照0.5mL复合酵素+0.5mL多肽组合给药；
实验组3：实施例2制备的复合酵素配置成为10mg/mL浓度,1mL给药；
实验组4：实施例3制备的复合酵素配置成为10mg/mL浓度,1mL给药；
实验组5：YZLS-3多肽(SEQ ID NO：1)配置成为10mg/mL，按照1mL给药；
阳性对照组6：熊果苷配置成为10mg/mL，按照1mL给药；
阴性对照组：每次涂抹0.9％生理盐水1mL；
连续给药6周，安乐处死动物后取皮肤组织。用mexmeter仪检测黑色素指数(MI)，基于单光谱反射和吸收的原理，获得皮肤MI含量数据。所取皮肤组织经10％多聚甲醛溶液固定，常规石蜡切片，分别进行如下组织化学染色。L-多巴染色：切片经脱蜡处理，0.1％L-多巴溶液中37℃浸泡4h，镜下观察染色变化，PBS冲洗，蒸馏水冲洗，HE复染。Fontana-Masson氨银染色：切片经脱蜡处理和水洗后，置于氨银溶液中，60℃水浴放置60min，用0.1％氯化金染色10min，去离子水冲洗，再用5％Na2S203溶液浸泡5min，分别用自来水和去离子水冲洗，最后用0.2％核固红染色5min，去离子水冲洗。常规脱水，二甲苯透明和中性树胶封片。对染色后组织学切片进行显微拍照，采用Image-ProPlus6.0分析软件对图像进行如下分析。对L-多巴染色的黑色颗粒进行分级，1级：基底细胞和棘层偶见黑素颗粒；2级：黑素颗粒分布以基底层为主，且分布不连续；3级：基底细胞和棘层均可见呈连续带状分布的黑素颗粒；4级：基底细胞和棘层可见大量呈连续带状分布的黑素颗粒，且角质细胞内可见较多黑素帽(附着于细胞核的黑素颗粒呈帽状)；5级：表皮全层密布黑素颗粒，可见较多黑素帽。结果如表2所示。
表2不同组分效果比较
Figure BDA0003443536400000091
Figure BDA0003443536400000101
从表1的结果可以看出，酵素和多肽以及阳性对照组与模型组相比，皮肤内黑素含量均得到有效降低，黑素颗粒染色分级也得到下降。提示使用酵素和多肽以及阳性对照无处理后，对表皮细胞内黑色素颗粒的含量影响较显著，特别是实施例1的复合酵素和多肽联合使用后，黑色素指数(MI)只有352±18.7，黑素颗粒染色分级只有1.9±0.2，得到了显著的增白效果。而且，在六周实验结束时小鼠皮肤没有溃疡、病变的情形，小鼠生活正常，表明酵素和多肽也无明显的细胞毒性。
实施例6复合酵素及多肽对黑色素细胞增殖的影响
取对数生长期的B16黑色素瘤细胞，胰蛋白酶消化后，使用RPMI-1640完全培养基配制成细胞密度为5x104的细胞悬浮液接种于96孔板，每孔200μL，置于5％CO2、37℃培养箱中培养。贴壁35h后，弃去培养基。向96孔板中加人200μL分别浓度为(0、50、100、200、500μg/mL)的实施例1的酵素、多肽以及二者等量的混合物的完全培养基；对照组加入等体积的完全培养基。每一个样品浓度设置6个复孔，板培养24h。用酶标仪于570nm测定每孔细胞的OD值A。以A表示细胞增殖活性，结果如图1所示。
从图1的结果可以看出，本发明制备的实施例1的复合酵素本身就具有抑制黑色素细胞增殖的特性，和本发明制备的多肽一起使用后，具有协同的显著的提高抑制效果的特性，在500μg/mL的浓度条件下，其OD值更是降低到0.1±0.03，具有显著的抑制效果。
根据实施例的结果可以看出，本发明制备的复合酵素联合多肽使用后，能够具有较好的抑制黑色素合成以及抑制黑色素细胞增殖的功效，可以用于化妆品领域以及药物领域，具有很好的应用前景和市场价值。
序列表
<110> 北京远胜达生物科技发展有限公司
<120> 一种含有酵素的美白抗皱组合物及其在药品中的应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Val Met Thr Gly Lys Ile Ser Arg Ala Arg Lys Val Ala
1 5 10

Claims (8)

1.一种复合酵素联合多肽在制备抑制黑色素细胞增殖的药物中的用途，其中，复合酵素是按照如下方法制备获得的：甘草、天竺葵和绿茶通过按照2:1:0.5的重量比洗净切碎后，加入纯净水榨汁制备得到浑浊液，加入纤维素酶和果胶酶，酶活比1：5对浑浊液进行酶解，酶添加量1000U/g，酶解温度55℃，酶解时间150min，酶解结束后90℃灭酶10min；随后加入红糖和酵母膏搅拌混匀，加入发酵罐中杀菌后，接入1％wt保加利亚乳杆菌CICC 6098于28℃条件下厌氧发酵3d，按照1％wt的比例接入酵母菌并于28℃条件下微搅拌发酵2d，然后之后转入25℃条件下后熟1d；发酵结束发酵液进行离心处理，得到复合酵素原液和固体残渣；将原液进行减压浓缩，通过减压干燥，得到甘草、天竺葵和绿茶复合酵素粉；多肽是YZLS-3多肽，序列如SEQ ID NO：1所示。
2.如权利要求1所述的用途，其特征在于药物包含药学上可接受的载体。
3.如权利要求2所述的用途，其特征在于可接受的载体包括稀释剂或赋形剂。
4.如权利要求2所述的用途，其特征在于稀释剂或赋形剂包括填料，增量剂，粘合剂，湿润剂，崩解剂，或表面活性剂。
5.一种复合酵素联合多肽在制备美白化妆品中的用途，其中，复合酵素是按照如下方法制备获得的：甘草、天竺葵和绿茶通过按照2:1:0.5的重量比洗净切碎后，加入纯净水榨汁制备得到浑浊液，加入纤维素酶和果胶酶，酶活比1：5对浑浊液进行酶解，酶添加量1000U/g，酶解温度55℃，酶解时间150min，酶解结束后90℃灭酶10min；随后加入红糖和酵母膏搅拌混匀，加入发酵罐中杀菌后，接入1％wt保加利亚乳杆菌CICC 6098于28℃条件下厌氧发酵3d，按照1％wt的比例接入酵母菌并于28℃条件下微搅拌发酵2d，然后之后转入25℃条件下后熟1d；发酵结束发酵液进行离心处理，得到复合酵素原液和固体残渣；将原液进行减压浓缩，通过减压干燥，得到甘草、天竺葵和绿茶复合酵素粉；多肽是YZLS-3多肽，序列如SEQ ID NO：1所示。
6.如权利要求1所述的用途，其特征在于化妆品为悬浮液，乳液，糊剂，凝胶，乳膏，或洗剂的形式。
7.如权利要求2所述的用途，其特征在于化妆品为软化妆水，营养化妆水，营养霜，按摩霜，香精，眼霜，清洁霜，清洁泡沫，清洁水。
8.一种具有抑制黑色素合成功能的YZLS-3多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。
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