CN114159473A - 一种用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂及制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂及制备方法,包括,步骤S1,将睾丸组织分离后得到的精原干细胞在温控室内的反应釜上进行贴壁纯化处理;步骤S2,纯化后的精原干细胞放置于温控室内慢冻降温处理后保存;步骤S3,控制装置根据待复苏精原干细胞保存时间获取待复苏精原干细胞活性标准值,对步骤S1的吹打装置的吹打效率和步骤S2的梯度降温阶段的降温速率进行调节。本发明设置控制装置,控制装置根据待复苏精原干细胞活性与待复苏精原干细胞活性标准值相比较,控制装置调节慢冻降温处理的降温速率,和所述吹打装置的吹打效率,以提高下一精原干细胞的活性。

Description

一种用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂及制备方法
技术领域
本发明涉及干细胞制剂制备领域,尤其涉及一种用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂及制备方法。
背景技术
男性的生殖系统会随着年龄的增大或疾病的影响,会出现性功能衰退、前列腺增生等一系列生殖系统问题。干细胞是再造和恢复组织器官结构与功能的源泉细胞,通过干细胞疗法,可以靶向修复生殖系统因衰老、疾病,引起的性功能减退,恢复或增强性功能,年轻体壮没有性功能障碍的人,通过干细胞治疗可保持良好的性能力。
干细胞具有组织再生修复的作用,可以新生睾丸间质细胞,修复受损的肾脏和睾丸间质细胞,分泌足量的雄性激素,恢复和增强性功能,提高男性性生活质量,干细胞在男性生殖中的作用包括,第一,增殖、分化作用,最好的干细胞来源是从胚胎组织取得,因为它的细胞在人体中起到神奇的增殖、分化作用,它可以分化出人体所需的细胞;第二、新生睾丸间质细胞移植干细胞可以新生睾丸间质细胞,修复受损的肾脏和睾丸间质细胞,分泌足量的雄性激素,恢复和增强性功能,提高男性性生活质量;第三、性功能得到明显改善,干细胞疗法能使绝大多数男性的性功能得到明显提高和改善,勃起有力,坚挺、持久,性欲、性频率和性生活满意程度都有明显提高;第四、修复生殖系统衰老退化、干细胞修复生殖系统衰老退化、恢复功能的效果与代替性使用男性激素和伟哥有着本质上的区别,对身体没有任何副作用,可以长期性恢复效果与功能;第五、提高机体的反应能力,移植干细胞,能够提高机体的反应能力,使动作更加轻易灵活;移植2~3天后,睡眠质量将会改善,恢复红润的气色,让人富有朝气和活力,从而使人在整体上恢复到年轻状态;第六、修复生殖器衰老器官,移植干细胞能分化出大量的神经细胞,替换神经系统中衰老的细胞。新生神经细胞生命活力旺盛、代谢能力强,可以及时将代谢废物排出,并且能够分泌足量的神经营养因子和神经递质,从而提高神经信号的传递速度。
现有男性干细胞制剂的制备在冷冻保存的处理上,一是无法实现快速降温至目标温度,二是无法实现冷冻保存之后直接液氮保存,避免温度急速升高导致制剂冷冻效果降低,导致制剂复苏后活性不符合标准。
发明内容
为此,本发明提供一种用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法,可以解决无法根据复苏后干细胞的活性对制备过程和冷冻过程进行调节,以使下一干细胞活性符合标准的技术问题。
为实现上述目的,本发明提供一种用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法,包括:
步骤S1,将睾丸组织分离后得到的精原干细胞在温控室内的反应釜上进行贴壁纯化处理,其中,贴壁纯化处理为将分离后的精原干细胞置于反应釜上,经过预设贴壁时间,弃去未贴壁的细胞,控制装置将胰酶通过吹打装置注入反应釜对贴壁细胞进行消化处理,经过预设消化时间,弃去未贴壁细胞,重复消化处理预设次数后,得到纯化后的精原干细胞;
步骤S2,纯化后的精原干细胞放置于所述温控室内慢冻降温处理后保存,其中,慢冻降温处理包括梯度降温阶段和液氮降温阶段,控制装置控制传动装置调节设置于所述传动装置上的反应釜与目标降温装置的距离,慢冻降温处理后,控制装置控制机械手将反应釜抓取至液氮降温装置进行速冻,将速冻后的精原干细胞保存至冰箱内;
步骤S3,所述控制装置根据待复苏精原干细胞保存时间获取待复苏精原干细胞活性标准值,控制装置根据待复苏精原干细胞活性与待复苏精原干细胞活性标准值相比较,对慢冻降温处理的降温速率和吹打效率进行调节;
在所述步骤S3中,当所述控制装置获取待复苏精原干细胞活性小于待复苏精原干细胞活性标准值,控制装置判定提高慢冻降温处理的降温速率和降低吹打效率,其中,控制装置获取慢冻降温处理的降温速率大于预设降温速率时,控制装置控制所述传动装置内的第一电机的动力参数增长所述反应釜与所述目标降温装置的距离,降低所述温控装置的温度,控制装置获取慢冻降温处理的降温速率小于预设降温速度时,控制装置控制第一电机的动力参数缩短反应釜与目标降温装置的距离;所述控制装置将获取的所述反应釜内消化处理时产生的气泡量与预设气泡量相比较,对获取的吹打效率进行调节,其中,控制装置获取的吹打效率大于预设值,控制装置控制吹打装置的第二电机提高吹打力度,和控制设置于反应釜下方的第三电机的动力参数提高反应釜的转动速率,控制装置获取的吹打效率小于预设值,控制装置控制吹打装置的第二电机降低吹打力度,和控制设置于反应釜下方的第三电机的动力参数降低反应釜的转动速率,以提高精原干细胞活性。
进一步地,所述控制装置预设保存时间T,控制装置根据当前待复苏精原干细胞保存时间t获取待复苏精原干细胞活性标准值,其中,
当t≤T1,所述控制装置选取第一预设活性标准值B1为待复苏精原干细胞活性标准值;
当T1<t≤T2,所述控制装置选取第二预设活性标准值B2为待复苏精原干细胞活性标准值;
当T2<t≤T3,所述控制装置选取第三预设活性标准值B3为待复苏精原干细胞活性标准值;
当t>T3,所述控制装置选取第四预设活性标准值B4为待复苏精原干细胞活性标准值;
其中,所述控制装置预设保存时间T,设定第一预设保存时间T1、第二预设保存时间T2、第三预设保存时间T3,控制装置预设活性标准值B,设定第一预设活性标准值B1、第二预设活性标准值B2、第三预设活性标准值B3、第四预设活性标准值B4。
进一步地,所述控制装置将获取当前精原干细胞的活性b与待复苏精原干细胞活性标准值Bi相比较,判定当前精原干细胞活性是否符合预设标准,其中,
当b≤Bi,所述控制装置判定当前精原干细胞活性不符合预设标准;
当b>Bi,所述控制装置判定当前精原干细胞活性符合预设标准;
其中,i=1,2,3,4。
进一步地,所述控制装置判定当前精原干细胞活性不符合预设标准时,控制装置获取当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值与预设活性差值相比较,判定对慢冻降温处理的降温速率和吹打效率进行调节,其中,
当b-Bi≤△b1,所述控制装置提高慢冻降温处理的降温速率Vw至Vw1以及降低吹打效率Pd至Pd1;
当△b1<b-Bi<△b2,所述控制装置降低吹打效率Pd1至Pd2;
当b-Bi≥△b2,所述控制装置提高慢冻降温处理的降温速率Vw至Vw2;
其中,所述控制装置预设活性差值△b,设定第一预设活性差值△b1,第二预设活性差值△b2。
进一步地,当所述控制装置获取当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值小于等于第一预设活性差值时,控制装置提高慢冻降温处理的降温速率Vw至Vw1,设定Vw1=Vw×(1+(△b1-b+Bi)/△b1),同时控制装置降低吹打效率Pd至Pd1,设定Pd1=Pd×(1-(△b1-b+Bi)2/△b1);当所述控制装置获取当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值在第一预设活性差值和第二预设活性差值之间时,当△b1<b-Bi<△b2,所述控制装置降低吹打效率Pd1至Pd2,设定Pd2=Pd×(1-(b-Bi-△b1)×(△b2-b+Bi)/(△b1×△b2));当所述控制装置获取当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值大于等于第二预设活性差值时,当,所述控制装置提高慢冻降温处理的降温速率Vw至Vw2,设定Vw2=Vw×(1+(b-Bi-△b2)/△b2)。
进一步地,所述控制装置预设降温速率标准值Vw0,控制装置将获取的慢冻降温处理的降温速率Vwp与预设降温速率标准值相比较,对所述反应釜与所述目标降温装置的距离和所述温控装置的温度进行调节,其中,
当Vwp≥Vw0,所述控制装置将所述反应釜与所述目标降温装置的距离L增长至L1,设定L1=L×(1+(Vwp-Vw0)/Vw0),将所述温控装置的温度W降低至W1,设定W1=W×(1+(Vwp-Vw0)/Vw0);
当Vwp<Vw0,所述控制装置将所述反应釜与所述目标降温装置的距离L缩短至L2,设定L2=L×(1-(Vw0-Vwp)/Vw0);
其中,p=1,2。
进一步地,所述控制装置预设距离H,控制装置将调节后的所述反应釜与所述目标降温装置的距离Lq与预设距离相比较,对控制反应釜与目标降温装置的距离的第一电机动力参数进行调节,其中,
当Lq≤H,所述控制装置将所述第一电机的动力参数F1降低至F11,设定F11=F1×(1-(H-Lq)/H);
当Lq>H,所述控制装置将所述第一电机的动力参数F1提高至F12,设定F12=F1×(1-(Lq-H)/H);
其中,q=1,2。
进一步地,所述控制装置预设吹打效率X,控制装置将调节后的吹打效率Pdr与预设吹打效率相比较,对控制吹打力度的第二电机的动力参数和控制反应釜转动速率的第三电机的动力参数进行调节,其中,
当Pdr≤X1,所述控制装置降低第二电机的动力参数F2至F21,设定F21=F2×(1-(X1-Pdr)2/X1),同时降低第三电机的动力参数F3至F31,设定F31=F3×(1-(X1-Pdr)2/X1);
当X1<Pdr<X2,所述控制装置降低第三电机的动力参数F3至F32,设定F32=F3×(1-(Pdr-X1)×(X2-Pdr)/(X1×X2));
当Pdr≥X2,所述控制装置降低第二电机的动力参数F2至F22,设定F22=F2×(1-(Pdr-X2)/(2×X2));
其中,所述控制装置预设吹打效率X,设定第一预设吹打效率X1,第二预设吹打效率X2,r=1,2。
进一步地,在所述步骤S1中,气泡检测器获取吹打装置注入反应釜后,反应釜内气泡量g,所述控制装置通过气泡检测器获取吹打时的气泡量与预设气泡量G相比较,对控制吹打力度的第二电机动力参数进行调节,其中,
当g≤G1,所述控制装置不对所述第二电机动力参数进行调节;
当G1<g<G2,所述控制装置将第二电机动力参数F2j降低至F2j1,设定F2j1=F2j×(1-(g-G1)×(G2-g)/(G1×G2));
当g≥G2,所述控制装置将第二电机动力参数F2j降低至F2j2,设定F2j2=F2j×(1-(g-G2)2/G2);
其中,所述控制装置预设气泡量G,设定第一预设气泡量G1,第二预设气泡量G2,j=1,2。
进一步地,本发明提供一种用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂,所述男性生殖系统干细胞复合制剂包括精原干细胞100pg与2 ml激活剂,其中,每份激活剂包括10%人血红蛋白和90%生理盐水。
与现有技术相比,本发明的有益效果在于,本发明设置有控制装置,当所述控制装置获取待复苏精原干细胞活性小于待复苏精原干细胞活性标准值,控制装置判定提高慢冻降温处理的降温速率和降低吹打效率,其中,控制装置获取慢冻降温处理的降温速率大于预设降温速率时,控制装置控制所述传动装置内的第一电机的动力参数增长所述反应釜与所述目标降温装置的距离,降低所述温控装置的温度,控制装置获取慢冻降温处理的降温速率小于预设降温速度时,控制装置控制第一电机的动力参数缩短反应釜与目标降温装置的距离;所述控制装置将获取的所述反应釜内消化处理时产生的气泡量与预设气泡量相比较,对获取的吹打效率进行调节,其中,控制装置获取的吹打效率大于预设值,控制装置控制吹打装置的第二电机提高吹打力度,和控制设置于反应釜下方的第三电机的动力参数提高反应釜的转动速率,控制装置获取的吹打效率小于预设值,控制装置控制吹打装置的第二电机降低吹打力度,和控制设置于反应釜下方的第三电机的动力参数降低反应釜的转动速率,以提高精原干细胞活性。
尤其,本发明根据精原干细胞的保存时间对其复苏后的活性有一定影响的因素,控制装置设置有保存时间,并将设置的保存时间划分为明确的三个标准,并将当前待复苏精原干细胞的保存时间与预设保存时间相比较,选取最佳的活性标准值为待复苏精原干细胞活性标准值,其中,若控制装置获取的待复苏精原干细胞的保存时间小于等于第一预设保存时间,控制装置选取较大的活性标准值为待复苏精原干细胞的活性标准值,依次,控制装置获取的待复苏精原干细胞保存时间越长,控制装置选取的活性标准值越小为该待复苏精原干细胞活性标准值。
尤其,本发明控制装置预设有活性差值,控制装置根据当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值与预设活性差值相比较,对慢冻降温处理的降温速率和吹打效率进行调节,其中,若控制装置获取的当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值小于等于第一预设活性差值,说明当前精原干细胞的活性极差,控制装置通过提高慢冻降温处理的降温速率以提高下一精原干细胞的冻存效果,同时降低吹打效率以避免因吹打效率过快导致下一具有活性的精原干细胞被冲洗,若控制装置获取的当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值在第一预设活性差值和第二预设活性差值之间,说明当前精原干细胞活性较差,控制装置通过降低吹打效率,以提高具有活性的精原干细胞的数量,保障保存后的精原干细胞的活性,若控制装置获取的当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值大于等于第二预设活性差值,说明当前精原干细胞的活性略差,控制装置通过提高降温速率以加快冻存达到目标温度的时间,提高冻存效果,以使下一精原干细胞活性符合标准。
尤其,本发明通过设置目标降温装置和温控装置,其中,目标降温装置用于将其温度按照梯度降温参数降温,温控装置用于对温控室内的温度进行调节,尤其是对反应釜的待保存的精原干细胞的温度进行调节,以使反应釜内精原干细胞的降温速率符合调节后的降温速率,更进一步的,控制装置获取调节后的降温速率大于等于预设降温速率标准值,控制装置增长反应釜与所述目标降温装置的距离,同时将温控装置的温度降低,以使反应釜与降温后的温控装置的距离缩短,进而提高降温速率,若控制装置获取调节后降温速率小于预设降温速率标准值,控制装置缩短所述反应釜与所述目标降温装置的距离,以提高降温速率。
尤其,本发明设置有距离参数,控制装置将调节后的反应釜与目标降温装置的距离与预设距离相比较,对控制反应釜与目标降温装置的距离的第一电机的动力参数进行调节,当控制装置获取调节后反应釜与目标降温装置的距离小于等于预设距离,控制装置通过降低第一电机的动力参数,降低当前反应釜与目标降温装置的距离,反之,当控制装置获取调节后反应釜与目标降温装置的距离大于预设距离,控制装置通过提高第一电机的动力参数,将当前反应釜与目标降温装置的距离增长,以满足控制装置获取的调节后的距离参数。
尤其,本发明控制装置将吹打效率划分为两个标准,控制装置获取的调节后吹打效率与预设吹打效率相比较,通过控制吹打力度和反应釜的转动速率对吹打效率进行调节,本发明设置通过第二电机控制吹打装置的吹打力度,第三电机控制反应釜的转动速率,其中,控制装置获取调节后吹打效率小于等于第一预设吹打效率时,控制装置通过同时大幅度降低第二电机动力参数进而降低吹打力度和降低第三电机动力参数进而降低反应釜转速,大幅度降低吹打效率,控制装置获取调节后吹打效率在第一预设吹打效率和第二预设吹打效率之间,控制装置通过降低第三电机动力参数降低反应釜转速,小幅度的降低吹打效率,控制装置获取调节后吹打效率大于等于第二预设吹打效率,控制装置通过小幅度的降低第二电机动力参数进而降低吹打力度,以使当前吹打效率符合调节后的吹打效率参数。
尤其,本发明通过在步骤S1的吹打过程中设置气泡检测器对反应釜内产生的气泡量与预设气泡量相比较,对控制吹打力度的第二电机动力参数进行调节,其中,若反应釜内气泡量小于等于第一预设气泡量,说明当前吹打过程符合标准,控制装置不对吹打力度进行调节,若反应釜内气泡量在第一预设气泡量和第二预设气泡量之间,说明当前吹打力度较大,需对吹打力度进行控制,避免产生过多的气泡,控制装置小幅度降低当前控制吹打力度的第二电机的动力参数以降低吹打力度,反应釜内气泡量大于等于第二预设气泡量,说明当前吹打力度过大,避免产生过多的气泡影响精原干细胞的活性,控制装置大幅度降低当前控制吹打力度的第二电机的动力参数以降低吹打力度。
附图说明
图1为发明实施例用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备系统正视图;
图2为发明实施例用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备系统侧视图;
图3为发明实施例反应室结构示意图;
图4为发明实施例反应釜结构示意图;
图5为发明实施例反应室俯视图;
图6为发明实施例用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的和优点更加清楚明白,下面结合实施例对本发明作进一步描述;应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用于解释本发明,并不用于限定本发明。
下面参照附图来描述本发明的优选实施方式。本领域技术人员应当理解的是,这些实施方式仅仅用于解释本发明的技术原理,并非在限制本发明的保护范围。
需要说明的是,在本发明的描述中,术语“上”、“下”、“左”、“右”、“内”、“外”等指示的方向或位置关系的术语是基于附图所示的方向或位置关系,这仅仅是为了便于描述,而不是指示或暗示所述装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制。
此外,还需要说明的是,在本发明的描述中,除非另有明确的规定和限定,术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解,例如,可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或一体地连接;可以是机械连接,也可以是电连接;可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连,可以是两个元件内部的连通。对于本领域技术人员而言,可根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
请参阅图1所示,其为本发明实施例用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备系统正视图,请参阅图2所示,其为本发明实施例用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备系统侧视图,包括,温控室1,其用于对精原干细胞进行处理,所述温控室内设置有目标降温装置11,其用于控制其温度至目标降温的温度,所述目标降温装置另一侧设置有温控装置12,所述温控装置用于对反应釜的降温速率进行调节,所述目标降温装置与温控装置之间设置有传动装置,所述传送装置包括设置于所述目标降温装置上的第一电机14、与所述第一电机相连接的第一滑杆15以及设置于滑杆上的第一套环16,所述第一套环上设置有反应室13,所述反应室上设置有若干反应釜,所述温控室远离目标降温装置和温控装置一侧设置有液氮降温装置19,所述液氮降温装置内设置有第四电机191,所述第四电机上设置有伸缩杆192,所述伸缩杆上设置有机械手193,所述机械手用于抓取所述反应室上的反应釜,并将其送入液氮降温装置内进行速冻保存。
请参阅图3所示,其为本发明实施例反应室结构示意图,请参阅图5所示,其为本发明实施例反应室俯视图,包括,用于调节反应室转动第五电机18,以及与第五电机相连接的第一连接件17,反应室通过第五电机控制反应室的转动,以便机械手对反应室上的反应釜进行抓取;所述反应室上设置有若干反应釜,每个反应釜131一侧设置有吹打装置,所述吹打装置用于对反应釜内液体进行吹打。
请参阅图4所示,其为本发明实施例反应釜结构示意图,包括,所述反应釜131下方设置有第三电机1314,所述反应釜与第三电机通过第二连接件1315相连接,所述反应釜一侧设置有吹打装置,所述吹打装置包括高度调节机构和吹打机构,其中,所述高度调节机构包括第六电机1316,与第六电机相连接的第二滑杆1317,所述第二滑杆上设置有第二套环1318,所述二滑杆上还设置有两个限位块,分别设置于第二套环的上方和下方,用于限制第二套环的高度调节量,所述第二套环与吹打机构相连接,所述吹打机构包括吹打筒,控制吹打板移动的第二电机1311,以及设置于所述吹打筒底部的电磁阀1312,使用中,胰酶消化液通过电磁阀注入吹打筒,吹打板在第二电机的控制下向下移动,向反应釜注入胰酶,胰酶注射完毕后,控制装置将吹打机构提升,同时,第二电机控制吹打板向上移动,提高吹洗腔的体积,控制装置将吹打机构降低,第二电机控制吹打板向下移动,实现吹打反应液的过程。
请参阅图6所示,其为本发明实施例用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法示意图,包括,
步骤S1,将睾丸组织分离后得到的精原干细胞在温控室内的反应釜上进行贴壁纯化处理,其中,贴壁纯化处理为将分离后的精原干细胞置于反应釜上,经过预设贴壁时间,弃去未贴壁的细胞,控制装置将胰酶通过吹打装置注入反应釜对贴壁细胞进行消化处理,经过预设消化时间,弃去未贴壁细胞,重复消化处理预设次数后,得到纯化后的精原干细胞;
步骤S2,纯化后的精原干细胞放置于所述温控室内慢冻降温处理后保存,其中,慢冻降温处理包括梯度降温阶段和液氮降温阶段,控制装置控制传动装置调节设置于所述传动装置上的反应釜与目标降温装置的距离,慢冻降温处理后,控制装置控制机械手将反应釜抓取至液氮降温装置进行速冻,将速冻后的精原干细胞保存至冰箱内;
步骤S3,所述控制装置根据待复苏精原干细胞保存时间获取待复苏精原干细胞活性标准值,控制装置根据待复苏精原干细胞活性与待复苏精原干细胞活性标准值相比较,对慢冻降温处理的降温速率和吹打效率进行调节;
在所述步骤S3中,当所述控制装置获取待复苏精原干细胞活性小于待复苏精原干细胞活性标准值,控制装置判定提高慢冻降温处理的降温速率和降低吹打效率,其中,控制装置获取慢冻降温处理的降温速率大于预设降温速率时,控制装置控制所述传动装置内的第一电机的动力参数增长所述反应釜与所述目标降温装置的距离,降低所述温控装置的温度,控制装置获取慢冻降温处理的降温速率小于预设降温速度时,控制装置控制第一电机的动力参数缩短反应釜与目标降温装置的距离;所述控制装置将获取的所述反应釜内消化处理时产生的气泡量与预设气泡量相比较,对获取的吹打效率进行调节,其中,控制装置获取的吹打效率大于预设值,控制装置控制吹打装置的第二电机提高吹打力度,和控制设置于反应釜下方的第三电机的动力参数提高反应釜的转动速率,控制装置获取的吹打效率小于预设值,控制装置控制吹打装置的第二电机降低吹打力度,和控制设置于反应釜下方的第三电机的动力参数降低反应釜的转动速率,以提高精原干细胞活性。
具体而言,本发明实施例慢冻降温处理中的梯度降温阶段即目标降温装置的目标温度分别是-20℃、-40℃和-80℃。
所述控制装置预设保存时间T,控制装置根据当前待复苏精原干细胞保存时间t获取待复苏精原干细胞活性标准值,其中,
当t≤T1,所述控制装置选取第一预设活性标准值B1为待复苏精原干细胞活性标准值;
当T1<t≤T2,所述控制装置选取第二预设活性标准值B2为待复苏精原干细胞活性标准值;
当T2<t≤T3,所述控制装置选取第三预设活性标准值B3为待复苏精原干细胞活性标准值;
当t>T3,所述控制装置选取第四预设活性标准值B4为待复苏精原干细胞活性标准值;
其中,所述控制装置预设保存时间T,设定第一预设保存时间T1、第二预设保存时间T2、第三预设保存时间T3,控制装置预设活性标准值B,设定第一预设活性标准值B1、第二预设活性标准值B2、第三预设活性标准值B3、第四预设活性标准值B4。
尤其,本发明根据精原干细胞的保存时间对其复苏后的活性有一定影响的因素,控制装置设置有保存时间,并将设置的保存时间划分为明确的三个标准,并将当前待复苏精原干细胞的保存时间与预设保存时间相比较,选取最佳的活性标准值为待复苏精原干细胞活性标准值,其中,若控制装置获取的待复苏精原干细胞的保存时间小于等于第一预设保存时间,控制装置选取较大的活性标准值为待复苏精原干细胞的活性标准值,依次,控制装置获取的待复苏精原干细胞保存时间越长,控制装置选取的活性标准值越小为该待复苏精原干细胞活性标准值。
具体而言,本发明实施例不对预设的保存时间以及活性标准值进行限定,本发明实施例提供一种优选的实施方案,其中预设时间为1-18个月,其中,第一预设保存时间0-1个月、第二预设保存时间1-3个月、第三预设保存时间3-18个月,控制装置预设活性标准值70-90%,设定第一预设活性标准值85-90%、第二预设活性标准值80-85%、第三预设活性标准值75-80%、第四预设活性标准值70-75%。
其中,所述控制装置将获取当前精原干细胞的活性b与待复苏精原干细胞活性标准值Bi相比较,判定当前精原干细胞活性是否符合预设标准,其中,
当b≤Bi,所述控制装置判定当前精原干细胞活性不符合预设标准;
当b>Bi,所述控制装置判定当前精原干细胞活性符合预设标准;
其中,i=1,2,3,4。
具体而言,所述控制装置判定当前精原干细胞活性不符合预设标准时,控制装置获取当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值与预设活性差值相比较,判定对慢冻降温处理的降温速率和吹打效率进行调节,其中,
当b-Bi≤△b1,所述控制装置提高慢冻降温处理的降温速率Vw至Vw1以及降低吹打效率Pd至Pd1;
当△b1<b-Bi<△b2,所述控制装置降低吹打效率Pd1至Pd2;
当b-Bi≥△b2,所述控制装置提高慢冻降温处理的降温速率Vw至Vw2;
其中,所述控制装置预设活性差值△b,设定第一预设活性差值△b1,第二预设活性差值△b2。
具体而言,当所述控制装置获取当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值小于等于第一预设活性差值时,控制装置提高慢冻降温处理的降温速率Vw至Vw1,设定Vw1=Vw×(1+(△b1-b+Bi)/△b1),同时控制装置降低吹打效率Pd至Pd1,设定Pd1=Pd×(1-(△b1-b+Bi)2/△b1);当所述控制装置获取当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值在第一预设活性差值和第二预设活性差值之间时,当△b1<b-Bi<△b2,所述控制装置降低吹打效率Pd1至Pd2,设定Pd2=Pd×(1-(b-Bi-△b1)×(△b2-b+Bi)/(△b1×△b2));当所述控制装置获取当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值大于等于第二预设活性差值时,当,所述控制装置提高慢冻降温处理的降温速率Vw至Vw2,设定Vw2=Vw×(1+(b-Bi-△b2)/△b2)。
具体而言,本发明控制装置预设有活性差值,控制装置根据当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值与预设活性差值相比较,对慢冻降温处理的降温速率和吹打效率进行调节,其中,若控制装置获取的当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值小于等于第一预设活性差值,说明当前精原干细胞的活性极差,控制装置通过提高慢冻降温处理的降温速率以提高下一精原干细胞的冻存效果,同时降低吹打效率以避免因吹打效率过快导致下一具有活性的精原干细胞被冲洗,若控制装置获取的当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值在第一预设活性差值和第二预设活性差值之间,说明当前精原干细胞活性较差,控制装置通过降低吹打效率,以提高具有活性的精原干细胞的数量,保障保存后的精原干细胞的活性,若控制装置获取的当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值大于等于第二预设活性差值,说明当前精原干细胞的活性略差,控制装置通过提高降温速率以加快冻存达到目标温度的时间,提高冻存效果,以使下一精原干细胞活性符合标准。
其中,所述控制装置预设降温速率标准值Vw0,控制装置将获取的慢冻降温处理的降温速率Vwp与预设降温速率标准值相比较,对所述反应釜与所述目标降温装置的距离和所述温控装置的温度进行调节,其中,
当Vwp≥Vw0,所述控制装置将所述反应釜与所述目标降温装置的距离L增长至L1,设定L1=L×(1+(Vwp-Vw0)/Vw0),将所述温控装置的温度W降低至W1,设定W1=W×(1+(Vwp-Vw0)/Vw0);
当Vwp<Vw0,所述控制装置将所述反应釜与所述目标降温装置的距离L缩短至L2,设定L2=L×(1-(Vw0-Vwp)/Vw0);
其中,p=1,2。
具体而言,本发明通过设置目标降温装置和温控装置,其中,目标降温装置用于将其温度按照梯度降温参数降温,温控装置用于对温控室内的温度进行调节,尤其是对反应釜的待保存的精原干细胞的温度进行调节,以使反应釜内精原干细胞的降温速率符合调节后的降温速率,更进一步的,控制装置获取调节后的降温速率大于等于预设降温速率标准值,控制装置增长反应釜与所述目标降温装置的距离,同时将温控装置的温度降低,以使反应釜与降温后的温控装置的距离缩短,进而提高降温速率,若控制装置获取调节后降温速率小于预设降温速率标准值,控制装置缩短所述反应釜与所述目标降温装置的距离,以提高降温速率。
其中,所述控制装置预设距离H,控制装置将调节后的所述反应釜与所述目标降温装置的距离Lq与预设距离相比较,对控制反应釜与目标降温装置的距离的第一电机动力参数进行调节,其中,
当Lq≤H,所述控制装置将所述第一电机的动力参数F1降低至F11,设定F11=F1×(1-(H-Lq)/H);
当Lq>H,所述控制装置将所述第一电机的动力参数F1提高至F12,设定F12=F1×(1-(Lq-H)/H);
其中,q=1,2。
具体而言,本发明设置有距离参数,控制装置将调节后的反应釜与目标降温装置的距离与预设距离相比较,对控制反应釜与目标降温装置的距离的第一电机的动力参数进行调节,当控制装置获取调节后反应釜与目标降温装置的距离小于等于预设距离,控制装置通过降低第一电机的动力参数,降低当前反应釜与目标降温装置的距离,反之,当控制装置获取调节后反应釜与目标降温装置的距离大于预设距离,控制装置通过提高第一电机的动力参数,将当前反应釜与目标降温装置的距离增长,以满足控制装置获取的调节后的距离参数。
其中,所述控制装置预设吹打效率X,控制装置将调节后的吹打效率Pdr与预设吹打效率相比较,对控制吹打力度的第二电机的动力参数和控制反应釜转动速率的第三电机的动力参数进行调节,其中,
当Pdr≤X1,所述控制装置降低第二电机的动力参数F2至F21,设定F21=F2×(1-(X1-Pdr)2/X1),同时降低第三电机的动力参数F3至F31,设定F31=F3×(1-(X1-Pdr)2/X1);
当X1<Pdr<X2,所述控制装置降低第三电机的动力参数F3至F32,设定F32=F3×(1-(Pdr-X1)×(X2-Pdr)/(X1×X2));
当Pdr≥X2,所述控制装置降低第二电机的动力参数F2至F22,设定F22=F2×(1-(Pdr-X2)/(2×X2));
其中,所述控制装置预设吹打效率X,设定第一预设吹打效率X1,第二预设吹打效率X2,r=1,2。
具体而言,本发明控制装置将吹打效率划分为两个标准,控制装置获取的调节后吹打效率与预设吹打效率相比较,通过控制吹打力度和反应釜的转动速率对吹打效率进行调节,本发明设置通过第二电机控制吹打装置的吹打力度,第三电机控制反应釜的转动速率,其中,控制装置获取调节后吹打效率小于等于第一预设吹打效率时,控制装置通过同时大幅度降低第二电机动力参数进而降低吹打力度和降低第三电机动力参数进而降低反应釜转速,大幅度降低吹打效率,控制装置获取调节后吹打效率在第一预设吹打效率和第二预设吹打效率之间,控制装置通过降低第三电机动力参数降低反应釜转速,小幅度的降低吹打效率,控制装置获取调节后吹打效率大于等于第二预设吹打效率,控制装置通过小幅度的降低第二电机动力参数进而降低吹打力度,以使当前吹打效率符合调节后的吹打效率参数。
其中,在所述步骤S1中,气泡检测器获取吹打装置注入反应釜后,反应釜内气泡量g,所述控制装置通过气泡检测器获取吹打时的气泡量与预设气泡量G相比较,对控制吹打力度的第二电机动力参数进行调节,其中,
当g≤G1,所述控制装置不对所述第二电机动力参数进行调节;
当G1<g<G2,所述控制装置将第二电机动力参数F2j降低至F2j1,设定F2j1=F2j×(1-(g-G1)×(G2-g)/(G1×G2));
当g≥G2,所述控制装置将第二电机动力参数F2j降低至F2j2,设定F2j2=F2j×(1-(g-G2)2/G2);
其中,所述控制装置预设气泡量G,设定第一预设气泡量G1,第二预设气泡量G2,j=1,2。
具体而言,本发明通过在步骤S1的吹打过程中设置气泡检测器对反应釜内产生的气泡量与预设气泡量相比较,对控制吹打力度的第二电机动力参数进行调节,其中,若反应釜内气泡量小于等于第一预设气泡量,说明当前吹打过程符合标准,控制装置不对吹打力度进行调节,若反应釜内气泡量在第一预设气泡量和第二预设气泡量之间,说明当前吹打力度较大,需对吹打力度进行控制,避免产生过多的气泡,控制装置小幅度降低当前控制吹打力度的第二电机的动力参数以降低吹打力度,反应釜内气泡量大于等于第二预设气泡量,说明当前吹打力度过大,避免产生过多的气泡影响精原干细胞的活性,控制装置大幅度降低当前控制吹打力度的第二电机的动力参数以降低吹打力度。
其中,用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂包括所述精原干细胞100pg与2 ml激活剂,其中,每份激活剂包括10%人血红蛋白和90%生理盐水。其中pg为皮克,重量单位。
至此,已经结合附图所示的优选实施方式描述了本发明的技术方案,但是,本领域技术人员容易理解的是,本发明的保护范围显然不局限于这些具体实施方式。在不偏离本发明的原理的前提下,本领域技术人员可以对相关技术特征做出等同的更改或替换,这些更改或替换之后的技术方案都将落入本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法,其特征在于,包括:
步骤S1,将睾丸组织分离后得到的精原干细胞在温控室内的反应釜上进行贴壁纯化处理,其中,贴壁纯化处理过程为,将分离后的精原干细胞置于反应釜上,经过预设贴壁时间,弃去未贴壁的细胞,控制装置将胰酶通过吹打装置注入反应釜对贴壁细胞进行消化处理,经过预设消化时间,弃去未贴壁细胞,重复消化处理预设次数后,得到纯化后的精原干细胞;
步骤S2,纯化后的精原干细胞放置于所述温控室内慢冻降温处理后保存,其中,慢冻降温处理包括梯度降温阶段和液氮降温阶段,控制装置控制传动装置调节设置于所述传动装置上的反应釜与目标降温装置的距离,慢冻降温处理后,控制装置控制机械手将反应釜抓取至液氮降温装置进行速冻,将速冻后的精原干细胞保存至冰箱内;
步骤S3,所述控制装置根据待复苏精原干细胞保存时间获取待复苏精原干细胞活性标准值,控制装置根据待复苏精原干细胞活性与待复苏精原干细胞活性标准值相比较,控制装置通过控制所述传动装置内的第一电机的动力参数增长所述反应釜与所述目标降温装置的距离,控制所述温控装置的温度以调节慢冻降温处理的降温速率,控制装置通过控制吹打装置的第二电机降低吹打力度,控制设置于反应釜下方的第三电机的动力参数降低反应釜的转动速率对吹打效率进行调节,以提高下一精原干细胞的活性。
2.根据权利要求1所述的用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法,其特征在于,所述控制装置预设保存时间T,控制装置根据当前待复苏精原干细胞保存时间t获取待复苏精原干细胞活性标准值,其中,
当t≤T1,所述控制装置选取第一预设活性标准值B1为待复苏精原干细胞活性标准值;
当T1<t≤T2,所述控制装置选取第二预设活性标准值B2为待复苏精原干细胞活性标准值;
当T2<t≤T3,所述控制装置选取第三预设活性标准值B3为待复苏精原干细胞活性标准值;
当t>T3,所述控制装置选取第四预设活性标准值B4为待复苏精原干细胞活性标准值;
其中,所述控制装置预设保存时间T,设定第一预设保存时间T1、第二预设保存时间T2、第三预设保存时间T3,控制装置预设活性标准值B,设定第一预设活性标准值B1、第二预设活性标准值B2、第三预设活性标准值B3、第四预设活性标准值B4。
3.根据权利要求2所述的用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法,其特征在于,所述控制装置将获取当前精原干细胞的活性b与待复苏精原干细胞活性标准值Bi相比较,判定当前精原干细胞活性是否符合预设标准,其中,
当b≤Bi,所述控制装置判定当前精原干细胞活性不符合预设标准;
当b>Bi,所述控制装置判定当前精原干细胞活性符合预设标准;
其中,i=1,2,3,4。
4.根据权利要求3所述的用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法,其特征在于,所述控制装置判定当前精原干细胞活性不符合预设标准时,控制装置获取当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值与预设活性差值相比较,判定对慢冻降温处理的降温速率和吹打效率进行调节,其中,
当b-Bi≤△b1,所述控制装置提高慢冻降温处理的降温速率Vw至Vw1以及降低吹打效率Pd至Pd1;
当△b1<b-Bi<△b2,所述控制装置降低吹打效率Pd1至Pd2;
当b-Bi≥△b2,所述控制装置提高慢冻降温处理的降温速率Vw至Vw2;
其中,所述控制装置预设活性差值△b,设定第一预设活性差值△b1,第二预设活性差值△b2。
5.根据权利要求4所述的用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法,其特征在于,当所述控制装置获取当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值小于等于第一预设活性差值时,控制装置提高慢冻降温处理的降温速率Vw至Vw1,设定Vw1=Vw×(1+(△b1-b+Bi)/△b1),同时控制装置降低吹打效率Pd至Pd1,设定Pd1=Pd×(1-(△b1-b+Bi)2/△b1);当所述控制装置获取当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值在第一预设活性差值和第二预设活性差值之间时,当△b1<b-Bi<△b2,所述控制装置降低吹打效率Pd1至Pd2,设定Pd2=Pd×(1-(b-Bi-△b1)×(△b2-b+Bi)/(△b1×△b2));当所述控制装置获取当前精原干细胞与待复苏精原干细胞活性标准值的差值大于等于第二预设活性差值时,当,所述控制装置提高慢冻降温处理的降温速率Vw至Vw2,设定Vw2=Vw×(1+(b-Bi-△b2)/△b2)。
6.根据权利要求5所述的用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法,其特征在于,所述控制装置预设降温速率标准值Vw0,控制装置将获取的慢冻降温处理的降温速率Vwp与预设降温速率标准值相比较,对所述反应釜与所述目标降温装置的距离和所述温控装置的温度进行调节,其中,
当Vwp≥Vw0,所述控制装置将所述反应釜与所述目标降温装置的距离L增长至L1,设定L1=L×(1+(Vwp-Vw0)/Vw0),将所述温控装置的温度W降低至W1,设定W1=W×(1+(Vwp-Vw0)/Vw0);
当Vwp<Vw0,所述控制装置将所述反应釜与所述目标降温装置的距离L缩短至L2,设定L2=L×(1-(Vw0-Vwp)/Vw0);
其中,p=1,2。
7.根据权利要求6所述的用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法,其特征在于,所述控制装置预设距离H,控制装置将调节后的所述反应釜与所述目标降温装置的距离Lq与预设距离相比较,对控制反应釜与目标降温装置的距离的第一电机动力参数进行调节,其中,
当Lq≤H,所述控制装置将所述第一电机的动力参数F1降低至F11,设定F11=F1×(1-(H-Lq)/H);
当Lq>H,所述控制装置将所述第一电机的动力参数F1提高至F12,设定F12=F1×(1-(Lq-H)/H);
其中,q=1,2。
8.根据权利要求4所述的用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法,其特征在于,所述控制装置预设吹打效率X,控制装置将调节后的吹打效率Pdr与预设吹打效率相比较,对控制吹打力度的第二电机的动力参数和控制反应釜转动速率的第三电机的动力参数进行调节,其中,
当Pdr≤X1,所述控制装置降低第二电机的动力参数F2至F21,设定F21=F2×(1-(X1-Pdr)2/X1),同时降低第三电机的动力参数F3至F31,设定F31=F3×(1-(X1-Pdr)2/X1);
当X1<Pdr<X2,所述控制装置降低第三电机的动力参数F3至F32,设定F32=F3×(1-(Pdr-X1)×(X2-Pdr)/(X1×X2));
当Pdr≥X2,所述控制装置降低第二电机的动力参数F2至F22,设定F22=F2×(1-(Pdr-X2)/(2×X2));
其中,所述控制装置预设吹打效率X,设定第一预设吹打效率X1,第二预设吹打效率X2,r=1,2。
9.根据权利要求8所述的用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂制备方法,其特征在于,在所述步骤S1中,气泡检测器获取吹打装置注入反应釜后,反应釜内气泡量g,所述控制装置通过气泡检测器获取吹打时的气泡量与预设气泡量G相比较,对控制吹打力度的第二电机动力参数进行调节,其中,
当g≤G1,所述控制装置不对所述第二电机动力参数进行调节;
当G1<g<G2,所述控制装置将第二电机动力参数F2j降低至F2j1,设定F2j1=F2j×(1-(g-G1)×(G2-g)/(G1×G2));
当g≥G2,所述控制装置将第二电机动力参数F2j降低至F2j2,设定F2j2=F2j×(1-(g-G2)2/G2);
其中,所述控制装置预设气泡量G,设定第一预设气泡量G1,第二预设气泡量G2,j=1,2。
10.一种用于改善男性生殖系统干细胞复合制剂,其制备方法采用权利要求1-9任一项所述的制备方法,其特征在于,所述男性生殖系统干细胞复合制剂包括精原干细胞100pg与2 ml激活剂,其中,每份激活剂包括10%人血红蛋白和90%生理盐水。
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