CN114107145B - 一种重组微生物及其在生产1,3-丙二醇中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及基因工程和生物发酵技术领域，具体公开了一种重组微生物及其在生产1,3‑丙二醇中的应用。本发明提供了一种重组微生物，所述重组微生物与出发菌株相比，过表达甘油‑3‑磷酸脱氢酶与甘油‑3‑磷酸酶的融合蛋白，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述出发菌株为谷氨酸棒杆菌。利用本发明的重组微生物进行1,3‑丙二醇生产，生物安全度高、产量高、操作简便且成本低廉。

Description

一种重组微生物及其在生产1,3-丙二醇中的应用
技术领域
本发明涉及基因工程和生物发酵技术领域，具体地说，涉及一种重组微生物及其在生产1,3-丙二醇中的应用。
背景技术
1，3-丙二醇是一种重要的化工原料，可作为有机溶剂应用于油墨、印染、涂料、润滑剂、抗冻剂等行业，其最主要的用途是作为聚酯和聚氨酯合成的单体，特别是与对苯二甲酸聚合生成聚对苯二甲酸丙二酯(PTT)。PTT与PET(聚对苯二甲酸乙二醇酯)、PBT(聚对苯二甲酸丁二醇酯)相比具有更优良的性能，例如更好的耐污染性、韧性和回弹性以及抗紫外性能等，此外还具有耐磨、吸水性低、低静电等优点。因此PTT被认为是PET的升级产品，具有广阔的市场前景。
目前，1，3-丙二醇的生产方法主要包括化学法和生物法。化学法通常是以环氧丙烷或者丙烯为原料通过复杂的催化过程合成1，3-丙二醇。化学合成法的缺点是副产物多，选择性差，操作条件需高温高压，设备投资巨大，原料为不可再生资源。因此，化学法生产1，3-丙二醇的工艺技术路线目前基本已经淘汰。
生物法生产1，3-丙二醇目前主要包含两条技术路线：一、以甘油为原料利用天然微生物生产1，3-丙二醇；二、以葡萄糖为原料利用重组微生物生产1，3-丙二醇。目前，工业上利用甘油生产1，3-丙二醇的工艺主要采用克雷伯氏肺炎杆菌(如中国专利CN200810105722.8)。这个工艺路线的主要缺点是：一、克雷伯氏肺炎杆菌为条件致病菌，其生产过程中生物安全性需要严格控制；二、大量副产物如乙酸、乳酸，丁二酸，2，3-丁二醇的合成，使得整个后提取过程变得十分复杂；三、甘油的来源有限，价格随市场波动大。
现有技术中还有一种是以葡萄糖为原料利用重组大肠杆菌生产1，3-丙二醇的方法。杜邦公司通过在大肠杆菌内外源表达来自酿酒酵母的甘油3-磷酸脱氢酶及甘油3-磷酸酶和来自克雷伯氏肺炎杆菌的甘油脱水酶及其激活因子并利用大肠杆菌自身的NADPH依赖的醇脱氢酶YqhD，实现了从葡萄糖到1，3-丙二醇的一步转化(CN200380104657.2)。这一工艺路线的缺点是大肠杆菌的生物安全性较差，大肠杆菌的发酵培养需要使用昂贵的原料酵母粉，因此该技术不利于产业化规模化生产。
因此，有必要对生物法生产1，3-丙二醇进行进一步研究。
发明内容
本发明的目的是提供一种重组微生物，通过该单一重组微生物可将可发酵糖高效生物转化为1,3-丙二醇，生物安全度高、产量高、操作简便且成本低廉。
本发明的技术方案如下：
一种重组微生物，所述重组微生物与出发菌株相比，过表达甘油-3-磷酸脱氢酶与甘油-3-磷酸酶的融合蛋白，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述出发菌株为谷氨酸棒杆菌。
所述融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
甘油-3-磷酸脱氢酶与甘油-3-磷酸酶催化磷酸二羟基丙酮的还原及进一步的脱磷酸化产生甘油，是合成1，3-丙二醇的关键步骤之一。本发明发现在谷氨酸棒杆菌中单独表达甘油-3-磷酸脱氢酶与甘油-3-磷酸酶，甘油的产量及1，3-丙二醇的产量低。进而，本发明通过大量的研究发现，通过表达一种甘油-3-磷酸脱氢酶与甘油-3-磷酸酶的融合蛋白(氨基酸序列如SEQ ID No.1所示)，可以在谷氨酸棒杆菌中实现甘油和1，3-丙二醇的高效生产。
本发明提出利用重组谷氨酸棒杆菌作为底盘来发酵生产1,3-丙二醇。谷氨酸棒杆菌是一种食品安全级的微生物，广泛应用于氨基酸的生产，比如谷氨酸和赖氨酸的生产。利用谷氨酸棒杆菌来发酵生产1,3-丙二醇解决了生物安全性的问题。谷氨酸棒杆菌能够利用不同的廉价原料进行发酵，所述含可发酵糖的原料包括糖蜜，蔗糖、葡萄糖、淀粉水解液、木糖、甘露糖、木质纤维素水解液等。同时谷氨酸棒杆菌还可以使用廉价的玉米浆作为营养成分替代昂贵的酵母粉，可以进一步降低原料的成本。发酵过程中的菌体可以作为产品，用在饲料添加剂当中。本发明方法操作简单，成本低廉，1,3-丙二醇得率高，副产物少，有利于进一步简化1,3-丙二醇的分离过程。
本发明中，所述重组微生物还具有提高的二醇脱水酶的表达和/或酶活性。
优选，所述提高的二醇脱水酶的表达和/或酶活性，通过过表达二醇脱水酶及其激活因子实现，所述二醇脱水酶及其激活因子的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
本发明中，所述重组微生物还具有提高的醇脱氢酶的表达和/或酶活性。
优选，所述提高的醇脱氢酶的表达和/或酶活性，通过过表达醇脱氢酶实现，所述醇脱氢酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
本发明通过在谷氨酸棒杆菌中过表达一种融合的甘油-3-磷酸脱氢酶-甘油-3-磷酸酶，使谷氨酸棒杆菌能高效利用不同碳源合成甘油，甘油在外源的二醇脱水酶及其激活因子以及醇脱氢酶的作用下最终生成1,3-丙二醇。
本发明还提供一种上述重组微生物的如下任一种应用：
(1)在发酵生产1,3-丙二醇中的应用；
(2)在用于生产1,3-丙二醇的微生物遗传育种中的应用；
(3)在降低生物法合成1,3-丙二醇的成本中的应用；
(4)在提高生物法合成1,3-丙二醇的安全性中的应用。
本发明另提供一种发酵生产1,3-丙二醇的方法，其包括培养上述的重组微生物的步骤。
培养所述重组微生物时的碳源可为糖蜜，蔗糖、葡萄糖、淀粉水解液、木糖、甘露糖、木质纤维素水溶液中的一种或多种。
本发明又提供一种构建生产1，3-丙二醇的重组微生物的方法，其包括使出发菌株过表达甘油-3-磷酸脱氢酶与甘油-3-磷酸酶的融合蛋白，或进一步过表达二醇脱水酶及其激活因子和醇脱氢酶的步骤；所述出发菌株为谷氨酸棒杆菌；所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述二醇脱水酶及其激活因子的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述醇脱氢酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
本发明的有益效果至少在于：
本发明发现在微生物(谷氨酸棒杆菌)中表达一种重组的甘油-3-磷酸脱氢酶与甘油-3-磷酸酶的融合蛋白(SEQ ID No.1)可以显著提高1，3-丙二醇的产量，与单独表达甘油-3-磷酸脱氢酶及甘油-3-磷酸酶相比菌株相比，重组微生物对于1，3-丙二醇的产量可以提高10％以上，因而具有重要的应用前景。且本发明重组微生物能够利用不同的廉价原料进行发酵，可以使用廉价的玉米浆作为营养成分替代昂贵的酵母粉，可以进一步降低原料的成本，同时解决了生物安全性以及菌株对底物与产物的耐受性问题。同时发酵过程中的菌体可以作为产品，用在饲料添加剂当中。以本发明的重组微生物进行1，3-丙二醇的生产，还具有副产物少，能够进一步简化1,3-丙二醇的分离过程的优势。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的优选实施方式进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改和替换。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1在谷氨酸棒杆菌中过表达甘油-3-磷酸脱氢酶与甘油-3-磷酸酶的融合蛋白和非融合蛋白
具体的构建方法如下：
人工设计一种甘油-3-磷酸脱氢酶与甘油-3-磷酸酶的融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。通过基因合成一段包含trc启动子以及上述融合蛋白编码序列的片段，其核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。
作为对照，同时基因合成一段包含trc启动子以及表达非融合的甘油-3-磷酸脱氢酶与甘油-3-磷酸酶基因的片段，其核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。
将质粒pEC-K18mob2(Journal of Biotechnology 104(2003)287-299)用EcoRI进行酶切，利用Gibson Assembly试剂盒(NEB)分别将上述包含SEQ ID No.5和SEQ ID No.6的片段一步连接到pEC-K18mob2上，获得的重组质粒分别命名为pEC-gpd-gpp-fusion和pEC-gpd-gpp-unfusion。
进一步人工合成包含sod启动子(序列如SEQ ID No.7)，醇脱氢酶基因yqhD(序列如SEQ ID No.4)，二醇脱水酶基因pduCDEGH(序列如SEQ ID No.3)的DNA片段，该DNA片段的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示。将质粒pEC-gpd-gpp-fusion和pEC-gpd-gpp-unfusion分别用XbaI酶进行酶切，利用Gibson Assembly试剂盒(NEB)分别将包含SEQ ID No.8的DNA片段插入到上述两个质粒中，获得的重组质粒分别命名为pEC-gpd-gpp-fusion-yqhD-pduCDEGH和pEC-gpd-gpp-unfusion-yqhD-pduCDEGH。
利用电穿孔仪(伯乐)将pEC-gpd-gpp-fusion-yqhD-pduCDEGH和pEC-gpd-gpp-unfusion-yqhD-pduCDEGH通过电转化转入到谷氨酸棒杆菌ATCC 13032中，电击条件为电压2.5KV，电阻600Ω，电容25μF(电击杯宽度为2mm)。在含25mg/L的卡那霉素LB平板上筛选获得重组菌，分别命名为C.glutamicum-fusion和C.glutamicum-unfusion。
实施例2重组谷氨酸棒杆菌的发酵培养
将重组谷氨酸棒杆菌C.glutamicum-fusion和C.glutamicum-unfusion在LB平板上过夜培养。从该新鲜平板上单菌落接种到含有30ml种子培养基的250ml带档板摇瓶中，32℃，200rpm培养12小时。
种子培养基的配方包括(g/L)：葡萄糖25，(NH4)2SO4 5.0,K2HPO4 1.5,MgSO4 1.0,MnSO4 0.005,FeSO4 0.005,玉米浆30，卡那霉素0.025。
以10％的接种量将种子液接种到2L发酵培养基当中，发酵采用5L的发酵罐，控制温度为30℃，通气量为1vvm，调整转速使得溶氧水平保持在5％以上，通过流加氨水控制pH值稳定在7.0左右。流加600g/L的葡萄糖以维持发酵液中的葡萄糖浓度高于10g/L。
发酵培养基配方包括(g/L)：葡萄糖100，(NH4)2SO4 30.0,K2HPO4 2.5,MgSO4 1.0,MnSO4 0.010,FeSO4 0.010,玉米浆15，生物素0.0005,盐酸硫胺素0.005，维生素B120.005。
代谢物的检测方法为高效液相色谱法(HPLC)，所用液相色谱柱为Aminex HPX-87HColumn(300×7.8mm)，流动相为5mM H2SO4，流速0.8mL/min，检测温度65℃，检测器为示差检测器。
发酵周期为48小时，C.glutamicum-fusion可以产82g/L的1,3-丙二醇。而对照菌株C.glutamicum-unfusion仅产52g/L的1,3-丙二醇。因此，通过过表达本发明所构建的甘油-3-磷酸脱氢酶与甘油-3-磷酸酶的融合蛋白可以显著提高1，3-丙二醇的产量，具有重要应用价值。
此外，本实施例进一步将上述发酵培养基中的葡萄糖更换为蔗糖进行发酵培养，同时将流加液中的葡萄糖更换为蔗糖，而其他的培养成分及含量保持不变，发酵条件及控制条件保持一致。发酵周期为48小时，C.glutamicum-fusion可以产86g/L的1,3-丙二醇。而对照菌株C.glutamicum-unfusion仅产50g/L的1,3-丙二醇。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
序列表
<110> 清华大学
<120> 一种重组微生物及其在生产1，3-丙二醇中的应用
<130> KHP211122743.3
<160> 8
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 636
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Met Ser Ala Ala Ala Asp Arg Leu Asn Leu Thr Ser Gly His Leu Asn
1 5 10 15
Ala Gly Arg Lys Arg Ser Ser Ser Ser Val Ser Leu Lys Ala Ala Glu
20 25 30
Lys Pro Phe Lys Val Thr Val Ile Gly Ser Gly Asn Trp Gly Thr Thr
35 40 45
Ile Ala Lys Val Val Ala Glu Asn Cys Lys Gly Tyr Pro Glu Val Phe
50 55 60
Ala Pro Ile Val Gln Met Trp Val Phe Glu Glu Glu Ile Asn Gly Glu
65 70 75 80
Lys Leu Thr Glu Ile Ile Asn Thr Arg His Gln Asn Val Lys Tyr Leu
85 90 95
Pro Gly Ile Thr Leu Pro Asp Asn Leu Val Ala Asn Pro Asp Leu Ile
100 105 110
Asp Ser Val Lys Asp Val Asp Ile Ile Val Phe Asn Ile Pro His Gln
115 120 125
Phe Leu Pro Arg Ile Cys Ser Gln Leu Lys Gly His Val Asp Ser His
130 135 140
Val Arg Ala Ile Ser Cys Leu Lys Gly Phe Glu Val Gly Ala Lys Gly
145 150 155 160
Val Gln Leu Leu Ser Ser Tyr Ile Thr Glu Glu Leu Gly Ile Gln Cys
165 170 175
Gly Ala Leu Ser Gly Ala Asn Ile Ala Thr Glu Val Ala Gln Glu His
180 185 190
Trp Ser Glu Thr Thr Val Ala Tyr His Ile Pro Lys Asp Phe Arg Gly
195 200 205
Glu Gly Lys Asp Val Asp His Lys Val Leu Lys Ala Leu Phe His Arg
210 215 220
Pro Tyr Phe His Val Ser Val Ile Glu Asp Val Ala Gly Ile Ser Ile
225 230 235 240
Cys Gly Ala Leu Lys Asn Val Val Ala Leu Gly Cys Gly Phe Val Glu
245 250 255
Gly Leu Gly Trp Gly Asn Asn Ala Ser Ala Ala Ile Gln Arg Val Gly
260 265 270
Leu Gly Glu Ile Ile Arg Phe Gly Gln Met Phe Phe Pro Glu Ser Arg
275 280 285
Glu Glu Thr Tyr Tyr Gln Glu Ser Ala Gly Val Ala Asp Leu Ile Thr
290 295 300
Thr Cys Ala Gly Gly Arg Asn Val Lys Val Ala Arg Leu Met Ala Thr
305 310 315 320
Ser Gly Lys Asp Ala Trp Glu Cys Glu Lys Glu Leu Leu Asn Gly Gln
325 330 335
Ser Ala Gln Gly Leu Ile Thr Cys Lys Glu Val His Glu Trp Leu Glu
340 345 350
Thr Cys Gly Ser Val Glu Asp Phe Pro Leu Phe Glu Ala Val Tyr Gln
355 360 365
Ile Val Tyr Asn Asn Tyr Pro Met Lys Asn Leu Pro Asp Met Ile Val
370 375 380
Val Ile Trp Gly Leu Thr Thr Lys Pro Leu Ser Leu Lys Val Asn Ala
385 390 395 400
Ala Leu Phe Asp Val Asp Gly Thr Ile Ile Ile Ser Gln Pro Ala Ile
405 410 415
Ala Ala Phe Trp Arg Asp Phe Gly Lys Asp Lys Pro Tyr Phe Asp Ala
420 425 430
Glu His Val Ile Gln Val Ser His Gly Trp Arg Thr Phe Asp Ala Ile
435 440 445
Ala Lys Phe Ala Pro Asp Phe Ala Asn Glu Glu Tyr Val Asn Lys Leu
450 455 460
Glu Ala Glu Ile Pro Val Lys Tyr Gly Glu Lys Ser Ile Glu Val Pro
465 470 475 480
Gly Ala Val Lys Leu Cys Asn Ala Leu Asn Ala Leu Pro Lys Glu Lys
485 490 495
Trp Ala Val Ala Thr Ser Gly Thr Arg Asp Met Ala Gln Lys Trp Phe
500 505 510
Glu His Leu Gly Ile Arg Arg Pro Lys Tyr Phe Ile Thr Ala Asn Asp
515 520 525
Val Lys Gln Gly Lys Pro His Pro Glu Pro Tyr Leu Lys Gly Arg Asn
530 535 540
Gly Leu Gly Tyr Pro Ile Asn Glu Gln Asp Pro Ser Lys Ser Lys Val
545 550 555 560
Val Val Phe Glu Asp Ala Pro Ala Gly Ile Ala Ala Gly Lys Ala Ala
565 570 575
Gly Cys Lys Ile Ile Gly Ile Ala Thr Thr Phe Asp Leu Asp Phe Leu
580 585 590
Lys Glu Lys Gly Cys Asp Ile Ile Val Lys Asn His Glu Ser Ile Arg
595 600 605
Val Gly Gly Tyr Asn Ala Glu Thr Asp Glu Val Glu Phe Ile Phe Asp
610 615 620
Asp Tyr Leu Tyr Ala Lys Asp Asp Leu Leu Lys Trp
625 630 635
<210> 2
<211> 1911
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
atgtccgcag cagctgatcg tctgaacctg acctccggcc acctcaacgc cggtcgcaaa 60
cgctcctcct ccagcgtctc cctgaaggca gcagaaaagc ctttcaaggt taccgttatc 120
ggttccggta actggggcac caccatcgct aaggttgtag ctgagaactg caagggctac 180
ccagaggtct tcgcaccgat cgttcagatg tgggtcttcg aggaagaaat caacggtgag 240
aagcttaccg agatcatcaa cactcgccac cagaacgtca agtacctccc aggcatcacc 300
ctgccagaca accttgttgc caacccagac ctcatcgact ccgtgaagga cgttgacatc 360
atcgttttca acatcccaca tcagttcctc ccacgcatct gttctcaact caagggccac 420
gttgactccc acgttcgcgc aatctcctgc cttaagggtt tcgaagttgg tgctaagggc 480
gtacagcttc tgtcctccta catcaccgaa gagctgggta tccagtgcgg cgcactgagc 540
ggcgcgaaca tcgcaaccga ggtggctcag gaacactggt ccgagaccac cgttgcttac 600
cacatcccaa aggacttccg tggcgagggt aaggatgttg accacaaggt tctcaaggcc 660
ctgttccacc gcccttactt ccacgtttcc gttatcgagg acgtcgccgg catctccatc 720
tgcggagcac tgaagaacgt cgtagctctt ggttgcggtt tcgtcgaagg cctgggatgg 780
ggcaataacg cttccgcagc aatccagcgc gtgggcctgg gcgaaatcat ccgtttcggc 840
cagatgttct tcccagagtc ccgtgaggaa acctactacc aggaatcagc tggtgttgca 900
gacctgatca ccacctgtgc aggaggtcgc aacgtcaagg tcgcacgcct catggctact 960
tccggtaagg acgcttggga gtgcgagaag gagctcctga acggtcagtc tgctcagggc 1020
ctgatcacct gcaaggaggt acacgagtgg ctggagacat gcggctccgt cgaagacttc 1080
cctctcttcg aggctgtata ccagatcgtc tacaacaact acccaatgaa gaacctccct 1140
gacatgatcg tagttatatg gggtctgact accaagcctt tgtcactcaa ggtcaacgct 1200
gctcttttcg acgtcgacgg taccattatc atctctcagc cagctatcgc ggccttctgg 1260
cgcgacttcg gcaaggataa gccgtacttc gatgcggaac acgtcatcca ggtctcacac 1320
ggttggcgca ccttcgacgc aatcgctaag ttcgcaccag attttgcaaa cgaagagtac 1380
gtaaacaagc tggaggcaga gatcccagtt aagtacggcg aaaagtccat cgaggtccct 1440
ggtgctgtca agctctgcaa cgcactgaac gcactcccaa aggaaaagtg ggcagtcgcg 1500
accagcggca ctcgtgacat ggctcagaag tggttcgagc acctgggcat ccgtcgtcct 1560
aagtacttca tcaccgcaaa cgacgtcaag cagggcaagc ctcacccaga gccatacctc 1620
aagggccgta acggcctggg ctaccctatc aacgagcagg acccatccaa gtccaaggtc 1680
gttgtcttcg aagacgcacc agctggcatt gcagctggca aggcagctgg ctgtaagatc 1740
attggcatcg caactacctt cgatctggac ttcctgaagg agaagggctg cgacattatc 1800
gtcaagaacc acgaatccat ccgcgtcggt ggttacaacg ctgagactga tgaggttgag 1860
ttcatcttcg acgactacct ctacgctaag gacgaccttc tcaagtggta a 1911
<210> 3
<211> 5089
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
atgagatcga aaagatttga agcactggcg aaacgccctg tgaatcagga tggtttcgtt 60
aaggagtgga ttgaagaggg ctttatcgcg atggaaagcc ctaacgatcc caaaccttct 120
atccgcatcg tcaacggcgc ggtgaccgaa ctcgacggta aaccggttga gcagttcgac 180
ctgattgacc actttatcgc gcgctacggc attaatctcg cccgggccga agaagtgatg 240
gccatggatt cggttaagct cgccaacatg ctctgcgacc cgaacgttaa acgcagcgac 300
atcgtgccgc tcactaccgc gatgaccccg gcgaaaatcg tggaagtggt gtcgcatatg 360
aacgtggtcg agatgatgat ggcgatgcaa aaaatgcgcg cccgccgcac gccgtcccag 420
caggcgcatg tcactaatat caaagataat ccggtacaga ttgccgccga cgccgctgaa 480
ggcgcatggc gcggctttga cgaacaggag accaccgtcg ccgtggcgcg ctacgcgccg 540
ttcaacgcca tcgccctgct ggtgggttca caggttggcc gccccggcgt cctcacccag 600
tgttcgctgg aagaagccac cgagctgaaa ctgggcatgc tgggccacac ctgctatgcc 660
gaaaccattt cggtatacgg tacggaaccg gtgtttaccg atggcgatga cactccatgg 720
tcgaaaggct tcctcgcctc ctcctacgcc tcgcgcggcc tgaaaatgcg ctttacctcc 780
ggttccggtt ctgaagtaca gatgggctat gccgaaggca aatcgatgct ttatctcgaa 840
gcgcgctgca tctacatcac caaagccgcc ggggtgcaag gcctgcagaa tggctccgtc 900
agctgtatcg gcgtaccgtc cgccgtgccg tccgggatcc gcgccgtact ggcggaaaac 960
ctgatctgct cagcgctgga tctggagtgc gcctccagca acgatcaaac ctttacccac 1020
tcggatatgc ggcgtaccgc gcgtctgctg atgcagttcc tgccaggcac cgacttcatc 1080
tcctccggtt actcggcggt gccgaactac gacaacatgt tcgccggttc caacgaagat 1140
gccgaagact tcgatgacta caacgtgatc cagcgcgacc tgaaggtcga tggcggcctg 1200
cggccggtgc gtgaagagga cgtgatcgcc attcgcaaca aagccgcccg cgcgctgcag 1260
gcggtatttg ccggcatggg tttgccgcct attacggatg aagaagtaga agccgccacc 1320
tacgcccacg gttcaaaaga tatgcctgag cgcaatatcg tcgaggacat caagtttgct 1380
caggagatca tcaacaagaa ccgcaacggc ctggaagtgg tgaaagccct ggcgaaaggc 1440
ggcttccccg atgtcgccca ggacatgctc aatattcaga aagccaagct caccggcgac 1500
tacctgcata cctccgccat cattgttggc gagggccagg tgctctcggc cgtgaatgac 1560
gtgaacgatt atgccggtcc ggcaacaggc taccgcctgc aaggcgagcg ctgggaagag 1620
attaaaaata tcccgggcgc gctcgatccc aatgaacttg gctaaggggt gaaaaatgga 1680
aattaacgaa acgctgctgc gccagattat cgaagaggtg ctgtcggaga tgaaatcagg 1740
cgcagataag ccggtctcct ttagcgcgcc tgcggcttct gtcgcctctg ccgcaccggt 1800
cgccgttgcg cctgtgtccg gcgacagctt cctgacggaa atcggcgaag ccaaacccgg 1860
cacgcagcag gatgaagtca ttattgccgt cgggccagcg tttggtctgg cgcaaaccgc 1920
caatatcgtc ggcattccgc ataaaaatat tctgcgcgaa gtgatcgccg gcattgagga 1980
agaaggcatc aaagcccggg tgatccgctg ctttaagtct tctgacgtcg ccttcgtggc 2040
agtggaaggc aaccgcctga gcggctccgg catctcgatc ggtattcagt cgaaaggcac 2100
caccgtcatc caccagcgcg gcctgccgcc gctttccaat ctggaactct tcccgcaggc 2160
gccgctgctg acgctggaaa cctaccgtca gattggcaaa aacgccgcgc gctacgccaa 2220
acgcgagtcg ccgcagccgg tgccgacgct taacgatcag atggctcgtc ccaaatacca 2280
ggcgaagtcg gccattttgc acattaaaga gaccaaatac gtggtgacgg gcaaaaaccc 2340
gcaggaactg cgcgtggcgc tttaacaaag gatatcccga tgaataccga cgcaattgaa 2400
tccatggtac gcgacgtgct gagccggatg aacagcctac aggacgggat aacgcccgcg 2460
ccagccgcgc cgacaaacga caccgttcgc cagccaaaag ttagcgacta cccgttagcg 2520
acccgccatc cggagtgggt caaaaccgct accaataaaa cgctcgatga cctgacgctg 2580
gagaacgtat taagcgatcg cgttacggcg caggacatgc gcatcactcc ggaaacgctg 2640
cgtatgcagg cggcgatcgc ccaggatgcc ggacgcgatc ggctggcgat gaactttgag 2700
cgggccgcag agctcaccgc ggttcccgac gaccgaatcc ttgagatcta caacgccctg 2760
cgcccatacc gttccaccca ggcggagcta ctggcgatcg ctgatgacct cgagcatcgc 2820
taccaggcac gactctgtgc cgcctttgtt cgggaagcgg ccgggctgta catcgagcgt 2880
aagaagctga aaggcgacga ttaacagggg gtaagcatgc gctatatcgc tggcattgat 2940
attggcaact cctcgacaga agtcgccctg gcgacggtcg atgacgcagg tgtgctgaac 3000
actcgccaca gcgcgttggc tgaaaccacg ggtataaaag gcacattacg aaatgtgttc 3060
ggtatccagg aggcgctaac gcaggcggca aaagcggccg gcattcagct cagcgatatt 3120
tcgcttattc gcattaacga agccacgccg gtcattggcg atgtggcgat ggaaaccatc 3180
acggaaacca tcatcaccga gtccaccatg atcggccata acccgaagac acccggcggc 3240
gtcggactgg gggtcggcat caccatcaca ccagaggcgc tgctgtcctg ctccgcggac 3300
actccctata ttctggtggt ctcctcggcc tttgactttg ccgatgtcgc cgcgatggtc 3360
aatgcggcaa cggcagcggg ctatcagata accggcatta ttttgcagca ggatgacggc 3420
gtgctggtca ataaccggct acagcaaccg ctaccggtga tcgacgaagt tcagcatatc 3480
gaccggattc cacttggcat gctggcggcc gtcgaggtcg ctttacccgg taagatcatc 3540
gaaacgctct ccaaccccta cggtattgcg accgttttcg atctcaacgc cgaggagacc 3600
aaaaatatcg tgccaatggc gcgggcgctg attggcaacc gctcggccgt ggtggtgaaa 3660
accccctccg gcgacgtcaa ggcccgcgct attccggcag gtaatctgct gctcatcgct 3720
caagggcgca gcgtacaggt tgatgtggcc gccggggcgg aagccatcat gaaagcggtt 3780
gacggctgcg gcaaactgga caacgtcgcg ggagaagcgg gcaccaatat cggcggcatg 3840
ctagagcacg tgcgccagac catggcggag cttaccaata agccagctca ggagatccgc 3900
attcaggatc tgctggccgt tgatacggcg gtgccagtca gcgtgaccgg cggtcttgcg 3960
ggggagttct cgctggagca ggcggtgggt atcgcctcga tggtcaagtc ggatcgcctg 4020
cagatggccc tcatcgcccg tgaaattgag cacaaactgc agattgcggt tcaggtgggc 4080
ggcgccgaag cggaggcggc cattcttggg gcgctcacca ctcccggcac cacgcgcccg 4140
ctggcgatcc tcgatctggg cgccgggtcg accgacgcct ccattatcaa tgcgcaggga 4200
gagatcagcg ccactcacct ggccggcgcc ggcgatatgg tcacgatgat catcgcccgc 4260
gagctggggc ttgaggaccg ctacctggcg gaagagatca aaaaatatcc gctggctaaa 4320
gtcgaaagcc tgtttcatct gcgtcatgaa gacggcagcg tccagttttt tccgtcggcc 4380
ttaccaccga cggtatttgc ccgcgtctgc gtggtgaaac cggatgaact ggttcccctg 4440
cccggcgatc tgccgctgga gaaagtgcgc gccattcgcc gtagcgccaa atcacgcgtc 4500
tttatcacca acgccctgcg agcgttacgc caggtgagcc ctaccggcaa cattcgcgac 4560
atcccgttcg tggtgctggt gggcggctcg tccctcgatt tcgagatccc ccagctggtc 4620
accgacgcgc tggcgcacta ccggctggtt gccgggcgcg gcaacatccg cggctgtgaa 4680
ggcccacgca atgcggtcgc cagcggatta ctcctttcct ggcaaaaagg aggcacacat 4740
ggagagtagc gtagtcgccc ccgccatcgt cattgccgtc actgacgaat gcagcgaaca 4800
gtggcgcgat gtcctgctgg gcattgaaga ggaaggcatt ccttttgttc tgcagccgca 4860
gaccggcggc gatcttatcc atcacgcctg gcaggcggcg cagcgttcgc cgctgcaggt 4920
aggcatcgcc tgcgaccggg aacggctcat cgtgcactac aaaaatttac ccgcatcaac 4980
tccgttgttt tcgctgatgt atcaccagaa caggctggcc cggcgaaaca ctggcaacaa 5040
tgcggctcgt ctcgtcaaag ggatcccatt tcgggatcgc catgcttaa 5089
<210> 4
<211> 1164
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
atgaacaact ttaatctgca caccccaacc cgcattctgt ttggtaaagg cgcaatcgct 60
ggtttacgcg aacaaattcc tcacgatgct cgcgtattga ttacctacgg cggcggcagc 120
gtgaaaaaaa ccggcgttct cgatcaagtt ctggatgccc tgaaaggcat ggacgtgctg 180
gaatttggcg gtattgagcc aaacccggct tatgaaacgc tgatgaacgc cgtgaaactg 240
gttcgcgaac agaaagtgac tttcctgctg gcggttggcg gcggttctgt actggacggc 300
accaaattta tcgccgcagc ggctaactat ccggaaaata tcgatccgtg gcacattctg 360
caaacgggcg gtaaagagat taaaagcgcc atcccgatgg gctgtgtgct gacgctgcca 420
gcaaccggtt cagaatccaa cgcaggcgcg gtgatctccc gtaaaaccac aggcgacaag 480
caggcgttcc attctgccca tgttcagccg gtatttgccg tgctcgatcc ggtttatacc 540
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cgcgccaacg tcatgtgggc ggcgactcag gcgctgaacg gtttgattgg cgctggcgta 780
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cgcgctaagc tgctgcaata tgctgaacgc gtctggaaca tcactgaagg ttccgatgat 960
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gaagagcacg gcatgaccca actgggcgaa aatcatgaca ttacgttgga tgtcagccgc 1140
cgtatatacg aagccgcccg ctaa 1164
<210> 5
<211> 2011
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
tgagctgttg acaattaatc atccggctcg tataatgtgt ggaattgtga gcggataaca 60
atttcacaca ggaaacagac catggaagga ggacaattcc atgtccgcag cagctgatcg 120
tctgaacctg acctccggcc acctcaacgc cggtcgcaaa cgctcctcct ccagcgtctc 180
cctgaaggca gcagaaaagc ctttcaaggt taccgttatc ggttccggta actggggcac 240
caccatcgct aaggttgtag ctgagaactg caagggctac ccagaggtct tcgcaccgat 300
cgttcagatg tgggtcttcg aggaagaaat caacggtgag aagcttaccg agatcatcaa 360
cactcgccac cagaacgtca agtacctccc aggcatcacc ctgccagaca accttgttgc 420
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ccagatcgtc tacaacaact acccaatgaa gaacctccct gacatgatcg tagttatatg 1260
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ctaccctatc aacgagcagg acccatccaa gtccaaggtc gttgtcttcg aagacgcacc 1800
agctggcatt gcagctggca aggcagctgg ctgtaagatc attggcatcg caactacctt 1860
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ctacgctaag gacgaccttc tcaagtggta a 2011
<210> 6
<211> 2058
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
ttgacaatta atcatccggc tcgtataatg tgtggaattg tgagcggata acaatttcac 60
acaggaaaca gaccatgact agtaaggagg acaattccat ggctgctgct gctgatagat 120
taaacttaac ttccggccac ttgaatgctg gtagaaagag aagttcctct tctgtttctt 180
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tcactgagga actaggtatt caatgtggtg ctctatctgg tgctaacatt gccaccgaag 660
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ttgccttagg ttgtggtttc gtcgaaggtc taggctgggg taacaacgct tctgctgcca 900
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gtgaaaagga gttgttgaat ggccaatccg ctcaaggttt aattacctgc aaagaagttc 1140
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tacatgaaga ttagatttat tggatccagg aaacagacta gaattatggg attgactact 1320
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tctcaaccag ccattgctgc attctggagg gatttcggta aggacaaacc ttatttcgat 1440
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<212> DNA
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ccaattattc cgggcttgtg acccgctacc cgataaatag gtcggctgaa aaatttcgtt 120
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
aacaggaatg ttcctttcga aaattgagga agccttatgc ccttcaaccc tacttagctg 60
ccaattattc cgggcttgtg acccgctacc cgataaatag gtcggctgaa aaatttcgtt 120
gcaatatcaa caaaaaggcc tatcattggg aggtgtcgca ccaagtactt ttgcgaagcg 180
ccatctgacg gattttcaaa agatgtatat gctcggtgcg gaaacctacg aaaggatttt 240
ttacccaagg agatatacca tgaacaactt taatctgcac accccaaccc gcattctgtt 300
tggtaaaggc gcaatcgctg gtttacgcga acaaattcct cacgatgctc gcgtattgat 360
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gaaaggcatg gacgtgctgg aatttggcgg tattgagcca aacccggctt atgaaacgct 480
gatgaacgcc gtgaaactgg ttcgcgaaca gaaagtgact ttcctgctgg cggttggcgg 540
cggttctgta ctggacggca ccaaatttat cgccgcagcg gctaactatc cggaaaatat 600
cgatccgtgg cacattctgc aaacgggcgg taaagagatt aaaagcgcca tcccgatggg 660
ctgtgtgctg acgctgccag caaccggttc agaatccaac gcaggcgcgg tgatctcccg 720
taaaaccaca ggcgacaagc aggcgttcca ttctgcccat gttcagccgg tatttgccgt 780
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gccagaaaac tacgatgtgc gcgccaacgt catgtgggcg gcgactcagg cgctgaacgg 1020
tttgattggc gctggcgtac cgcaggactg ggcaacgcat atgctgggcc acgaactgac 1080
tgcgatgcac ggtctggatc acgcgcaaac actggctatc gtcctgcctg cactgtggaa 1140
tgaaaaacgc gataccaagc gcgctaagct gctgcaatat gctgaacgcg tctggaacat 1200
cactgaaggt tccgatgatg agcgtattga cgccgcgatt gccgcaaccc gcaatttctt 1260
tgagcaatta ggcgtgccga cccacctctc cgactacggt ctggacggca gctccatccc 1320
ggctttgctg aaaaaactgg aagagcacgg catgacccaa ctgggcgaaa atcatgacat 1380
tacgttggat gtcagccgcc gtatatacga agccgcccgc taaaaggaga tataccatga 1440
gatcgaaaag atttgaagca ctggcgaaac gccctgtgaa tcaggatggt ttcgttaagg 1500
agtggattga agagggcttt atcgcgatgg aaagccctaa cgatcccaaa ccttctatcc 1560
gcatcgtcaa cggcgcggtg accgaactcg acggtaaacc ggttgagcag ttcgacctga 1620
ttgaccactt tatcgcgcgc tacggcatta atctcgcccg ggccgaagaa gtgatggcca 1680
tggattcggt taagctcgcc aacatgctct gcgacccgaa cgttaaacgc agcgacatcg 1740
tgccgctcac taccgcgatg accccggcga aaatcgtgga agtggtgtcg catatgaacg 1800
tggtcgagat gatgatggcg atgcaaaaaa tgcgcgcccg ccgcacgccg tcccagcagg 1860
cgcatgtcac taatatcaaa gataatccgg tacagattgc cgccgacgcc gctgaaggcg 1920
catggcgcgg ctttgacgaa caggagacca ccgtcgccgt ggcgcgctac gcgccgttca 1980
acgccatcgc cctgctggtg ggttcacagg ttggccgccc cggcgtcctc acccagtgtt 2040
cgctggaaga agccaccgag ctgaaactgg gcatgctggg ccacacctgc tatgccgaaa 2100
ccatttcggt atacggtacg gaaccggtgt ttaccgatgg cgatgacact ccatggtcga 2160
aaggcttcct cgcctcctcc tacgcctcgc gcggcctgaa aatgcgcttt acctccggtt 2220
ccggttctga agtacagatg ggctatgccg aaggcaaatc gatgctttat ctcgaagcgc 2280
gctgcatcta catcaccaaa gccgccgggg tgcaaggcct gcagaatggc tccgtcagct 2340
gtatcggcgt accgtccgcc gtgccgtccg ggatccgcgc cgtactggcg gaaaacctga 2400
tctgctcagc gctggatctg gagtgcgcct ccagcaacga tcaaaccttt acccactcgg 2460
atatgcggcg taccgcgcgt ctgctgatgc agttcctgcc aggcaccgac ttcatctcct 2520
ccggttactc ggcggtgccg aactacgaca acatgttcgc cggttccaac gaagatgccg 2580
aagacttcga tgactacaac gtgatccagc gcgacctgaa ggtcgatggc ggcctgcggc 2640
cggtgcgtga agaggacgtg atcgccattc gcaacaaagc cgcccgcgcg ctgcaggcgg 2700
tatttgccgg catgggtttg ccgcctatta cggatgaaga agtagaagcc gccacctacg 2760
cccacggttc aaaagatatg cctgagcgca atatcgtcga ggacatcaag tttgctcagg 2820
agatcatcaa caagaaccgc aacggcctgg aagtggtgaa agccctggcg aaaggcggct 2880
tccccgatgt cgcccaggac atgctcaata ttcagaaagc caagctcacc ggcgactacc 2940
tgcatacctc cgccatcatt gttggcgagg gccaggtgct ctcggccgtg aatgacgtga 3000
acgattatgc cggtccggca acaggctacc gcctgcaagg cgagcgctgg gaagagatta 3060
aaaatatccc gggcgcgctc gatcccaatg aacttggcta aggggtgaaa aatggaaatt 3120
aacgaaacgc tgctgcgcca gattatcgaa gaggtgctgt cggagatgaa atcaggcgca 3180
gataagccgg tctcctttag cgcgcctgcg gcttctgtcg cctctgccgc accggtcgcc 3240
gttgcgcctg tgtccggcga cagcttcctg acggaaatcg gcgaagccaa acccggcacg 3300
cagcaggatg aagtcattat tgccgtcggg ccagcgtttg gtctggcgca aaccgccaat 3360
atcgtcggca ttccgcataa aaatattctg cgcgaagtga tcgccggcat tgaggaagaa 3420
ggcatcaaag cccgggtgat ccgctgcttt aagtcttctg acgtcgcctt cgtggcagtg 3480
gaaggcaacc gcctgagcgg ctccggcatc tcgatcggta ttcagtcgaa aggcaccacc 3540
gtcatccacc agcgcggcct gccgccgctt tccaatctgg aactcttccc gcaggcgccg 3600
ctgctgacgc tggaaaccta ccgtcagatt ggcaaaaacg ccgcgcgcta cgccaaacgc 3660
gagtcgccgc agccggtgcc gacgcttaac gatcagatgg ctcgtcccaa ataccaggcg 3720
aagtcggcca ttttgcacat taaagagacc aaatacgtgg tgacgggcaa aaacccgcag 3780
gaactgcgcg tggcgcttta acaaaggata tcccgatgaa taccgacgca attgaatcca 3840
tggtacgcga cgtgctgagc cggatgaaca gcctacagga cgggataacg cccgcgccag 3900
ccgcgccgac aaacgacacc gttcgccagc caaaagttag cgactacccg ttagcgaccc 3960
gccatccgga gtgggtcaaa accgctacca ataaaacgct cgatgacctg acgctggaga 4020
acgtattaag cgatcgcgtt acggcgcagg acatgcgcat cactccggaa acgctgcgta 4080
tgcaggcggc gatcgcccag gatgccggac gcgatcggct ggcgatgaac tttgagcggg 4140
ccgcagagct caccgcggtt cccgacgacc gaatccttga gatctacaac gccctgcgcc 4200
cataccgttc cacccaggcg gagctactgg cgatcgctga tgacctcgag catcgctacc 4260
aggcacgact ctgtgccgcc tttgttcggg aagcggccgg gctgtacatc gagcgtaaga 4320
agctgaaagg cgacgattaa cagggggtaa gcatgcgcta tatcgctggc attgatattg 4380
gcaactcctc gacagaagtc gccctggcga cggtcgatga cgcaggtgtg ctgaacactc 4440
gccacagcgc gttggctgaa accacgggta taaaaggcac attacgaaat gtgttcggta 4500
tccaggaggc gctaacgcag gcggcaaaag cggccggcat tcagctcagc gatatttcgc 4560
ttattcgcat taacgaagcc acgccggtca ttggcgatgt ggcgatggaa accatcacgg 4620
aaaccatcat caccgagtcc accatgatcg gccataaccc gaagacaccc ggcggcgtcg 4680
gactgggggt cggcatcacc atcacaccag aggcgctgct gtcctgctcc gcggacactc 4740
cctatattct ggtggtctcc tcggcctttg actttgccga tgtcgccgcg atggtcaatg 4800
cggcaacggc agcgggctat cagataaccg gcattatttt gcagcaggat gacggcgtgc 4860
tggtcaataa ccggctacag caaccgctac cggtgatcga cgaagttcag catatcgacc 4920
ggattccact tggcatgctg gcggccgtcg aggtcgcttt acccggtaag atcatcgaaa 4980
cgctctccaa cccctacggt attgcgaccg ttttcgatct caacgccgag gagaccaaaa 5040
atatcgtgcc aatggcgcgg gcgctgattg gcaaccgctc ggccgtggtg gtgaaaaccc 5100
cctccggcga cgtcaaggcc cgcgctattc cggcaggtaa tctgctgctc atcgctcaag 5160
ggcgcagcgt acaggttgat gtggccgccg gggcggaagc catcatgaaa gcggttgacg 5220
gctgcggcaa actggacaac gtcgcgggag aagcgggcac caatatcggc ggcatgctag 5280
agcacgtgcg ccagaccatg gcggagctta ccaataagcc agctcaggag atccgcattc 5340
aggatctgct ggccgttgat acggcggtgc cagtcagcgt gaccggcggt cttgcggggg 5400
agttctcgct ggagcaggcg gtgggtatcg cctcgatggt caagtcggat cgcctgcaga 5460
tggccctcat cgcccgtgaa attgagcaca aactgcagat tgcggttcag gtgggcggcg 5520
ccgaagcgga ggcggccatt cttggggcgc tcaccactcc cggcaccacg cgcccgctgg 5580
cgatcctcga tctgggcgcc gggtcgaccg acgcctccat tatcaatgcg cagggagaga 5640
tcagcgccac tcacctggcc ggcgccggcg atatggtcac gatgatcatc gcccgcgagc 5700
tggggcttga ggaccgctac ctggcggaag agatcaaaaa atatccgctg gctaaagtcg 5760
aaagcctgtt tcatctgcgt catgaagacg gcagcgtcca gttttttccg tcggccttac 5820
caccgacggt atttgcccgc gtctgcgtgg tgaaaccgga tgaactggtt cccctgcccg 5880
gcgatctgcc gctggagaaa gtgcgcgcca ttcgccgtag cgccaaatca cgcgtcttta 5940
tcaccaacgc cctgcgagcg ttacgccagg tgagccctac cggcaacatt cgcgacatcc 6000
cgttcgtggt gctggtgggc ggctcgtccc tcgatttcga gatcccccag ctggtcaccg 6060
acgcgctggc gcactaccgg ctggttgccg ggcgcggcaa catccgcggc tgtgaaggcc 6120
cacgcaatgc ggtcgccagc ggattactcc tttcctggca aaaaggaggc acacatggag 6180
agtagcgtag tcgcccccgc catcgtcatt gccgtcactg acgaatgcag cgaacagtgg 6240
cgcgatgtcc tgctgggcat tgaagaggaa ggcattcctt ttgttctgca gccgcagacc 6300
ggcggcgatc ttatccatca cgcctggcag gcggcgcagc gttcgccgct gcaggtaggc 6360
atcgcctgcg accgggaacg gctcatcgtg cactacaaaa atttacccgc atcaactccg 6420
ttgttttcgc tgatgtatca ccagaacagg ctggcccggc gaaacactgg caacaatgcg 6480
gctcgtctcg tcaaagggat cccatttcgg gatcgccatg cttaa 6525

Claims (9)

1.一种重组微生物，其特征在于，所述重组微生物与出发菌株相比，过表达甘油-3-磷酸脱氢酶与甘油-3-磷酸酶的融合蛋白，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述出发菌株为谷氨酸棒杆菌；所述融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
2.根据权利要求1所述的重组微生物，其特征在于，所述重组微生物具有提高的二醇脱水酶的表达和/或酶活性。
3.根据权利要求2所述的重组微生物，其特征在于，所述提高的二醇脱水酶的表达和/或酶活性，通过过表达二醇脱水酶及其激活因子实现，所述二醇脱水酶及其激活因子的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
4.根据权利要求1-3任一项所述的重组微生物，其特征在于，所述重组微生物具有提高的醇脱氢酶的表达和/或酶活性。
5.根据权利要求4所述的重组微生物，其特征在于，所述提高的醇脱氢酶的表达和/或酶活性，通过过表达醇脱氢酶实现，所述醇脱氢酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
6.权利要求1-5任一项所述的重组微生物的如下任一种应用：
(1)在发酵生产1,3-丙二醇中的应用；
(2)在降低生物法合成1,3-丙二醇的成本中的应用；
(3)在提高生物法合成1,3-丙二醇的安全性中的应用。
7.一种发酵生产1,3-丙二醇的方法，其特征在于，包括培养权利要求1-5任一项所述的重组微生物的步骤。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，培养所述重组微生物时的碳源为糖蜜，蔗糖、葡萄糖、淀粉水解液、木糖、甘露糖、木质纤维素水溶液中的一种或多种。
9.一种构建生产1，3-丙二醇的重组微生物的方法，其特征在于，包括使出发菌株过表达甘油-3-磷酸脱氢酶与甘油-3-磷酸酶的融合蛋白，或进一步过表达二醇脱水酶及其激活因子和醇脱氢酶的步骤；所述出发菌株为谷氨酸棒杆菌；所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQID No.1所示；所述二醇脱水酶及其激活因子的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述醇脱氢酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
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