CN114098092A - 一种粉葛益生元及其制备方法、应用方法 - Google Patents
一种粉葛益生元及其制备方法、应用方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种粉葛益生元及其制备方法、应用方法。所述粉葛益生元是从鲜粉葛中提取出的抗消化、低持水性的膳食纤维，聚合度范围为30‑200呈乳白色至浅黄色粉末状；制备方法包括：将鲜粉葛除去粗纤维后，将粗提物分散于溶剂中，在90‑98℃预处理25‑40min；再121℃压热25‑35min，冷却至常压55‑60℃，加入普鲁兰酶脱支，取出后在100℃下灭酶，在4℃下重结晶，干燥后粉碎过筛；再用柠檬酸缓冲液配制成乳液，并分步依次加入胃蛋白酶、耐高温α‑淀粉酶、葡萄糖苷酶，酶解完成后高温灭酶后沉淀，洗涤沉淀物后烘干、过筛，制得粉葛益生元。本发明所得粉葛益生元能够减少肝脏脂质堆积，调节炎症反应，改善血糖水平和肝功能，毒副作用小。
Description
技术领域
本发明属于中医药药食同源营养物质及制备领域，具体涉及一种粉葛益生元及其制备方法、应用方法。
背景技术
非酒精性脂肪肝（NAFLD）是除酒精和其他明确的损肝因素所致，以肝细胞脂肪变性和脂质沉积为主要特征的临床病理综合征，其进一步可进展为非酒精性脂肪性肝炎、肝硬化、甚至肝细胞癌，早期干预至关重要。随着生活方式和饮食习惯的改变，NAFLD 的发病率呈逐年增多趋势，该疾病的治疗与预防是全球性问题。
现有技术中，针对NAFLD的治疗,常用药有降脂类药物如洛伐他汀、辛伐他汀等，可抑制肝内脂质的合成，但其伴有头痛、胃肠道反应等副作用，甚至还可引起肝毒性。这些药物带来的副作用影响了患者的身体健康和生活质量。
发明内容
鉴于现有技术中的上述缺陷或不足，本发明旨在提供一种粉葛益生元及其制备方法、应用方法，提高非酒精脂肪肝的防治效果。
为了实现上述目的，本发明实施例采用如下技术方案：
第一方面，本发明实施例还提供了一种粉葛益生元的制备方法，所述制备方法包括：
步骤A，将鲜粉葛经清洗、去皮、切块后，加入5-8倍重量的水，粉碎、过筛除去粗纤维后，静置，经沉淀得到粉葛粗提物；
步骤B，粉葛粗提物分散于溶剂中，加热至90-98℃预处理25-40min；再置于高压蒸汽灭菌锅中，121℃处理25-35min，高温处理完毕后取出，自然冷却至常压55-60℃，得到第一中间液；
步骤C，在第一中间液中加入普鲁兰酶，酶解脱支6-8h，取出脱支后的样品在100℃下放置15min进行灭酶，在4℃下进行重结晶20-30h，60℃鼓风干燥后粉碎过筛，得到脱支粉葛粗提物；其中普鲁兰酶加入量为30-120U/g干基；
步骤D，将适量所述脱支粉葛粗提物，用PH 2.0的柠檬酸缓冲液配制成10-30%的乳状液，并分步依次加入50-150U/g干基粗提物的胃蛋白酶、50-150U/g干基粗提物的耐高温α-淀粉酶、100-200U/g干基粗提物的葡萄糖苷酶，酶解完成后高温灭酶，得到第二中间液；
步骤E，将所述第二中间液进行沉淀，再分别用水和80-100%乙醇洗涤沉淀物至少各三次，将所得沉淀物烘干、粉碎、过筛，制得粉葛益生元。
上述方案中，所述粉葛粗提物分散于溶剂，具体为：将步骤A中的沉淀物加5-8倍重量的水漂洗、沉淀2-3次；再加入5-8倍重量的水，搅拌均匀后均匀分散于水中。
上述方案中，所述粉葛粗提物分散于溶剂，具体为：将步骤A中的沉淀物进行漂洗后，烘干、粉碎、过筛，得到粉末；再将粉末分散于0.1-0.4mol/L 醋酸钠溶液中并用醋酸调节PH至5.2，配制成10-30%（m/v）乳状液。
上述方案中，步骤D中所述分步依次加入，具体包括：加入胃蛋白酶，40℃酶解0.5-1h；调pH至6.0，添加耐高温α-淀粉酶，95℃酶解20-50分钟；调pH至4.5,加入淀粉葡萄糖苷酶，60℃酶解0.5-2h。
第二方面，本发明实施例还提供了一种粉葛益生元，所述粉葛益生元通过上述粉葛益生元的制备方法制备得到，是从鲜粉葛中提取出的抗消化、低持水性的膳食纤维，聚合度范围为30-200，呈现状态为乳白色至浅黄色粉末。
上述方案中，所述乳白色至浅黄色粉末，粒度为80-120目。
第三方面，本发明实施例又提供了一种上述粉葛益生元的应用方法，将所述粉葛益生元用于制备预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的产品。
第四方面，本发明实施例还提供了上述粉葛益生元的应用方法，将所述粉葛益生元用于制备非治疗目的干预非酒精性脂肪肝的产品。
上述方案中，所述产品，包括但不限于食品、保健品、营养品或药物；在产品制备中，所述粉葛益生元可作为主要原料、辅料或功能因子使用。
上述方案中，所述粉葛益生元用于降低血脂、减少肝脏脂质堆积，减轻体重，同时调节炎症反应，降低并发症的产生；至少具有以下一种非酒精性脂肪肝症状改善的作用：
(a)降低游离脂肪酸引起的炎症反应；
(b)降低血脂；
(c)降低肝脏重；
(d)降低血糖，改善葡萄糖耐量；
(e)调节肝脏脂质代谢；
(f)降低肝脏脂质堆积；
(g)改善肝脏功能。
本发明实施例所提供的技术方案具有如下有益效果：
本申请实施例所提供的粉葛益生元及其制备方法、应用方法，以粉葛为原料，制备了粉葛益生元，提供了一种新的针对非酒精脂肪肝的防治途径，既能够减轻体重，降低血脂，减少肝脏脂质堆积，改善血糖水平和肝功能，预防和/或改善非酒精性脂肪肝的效果强；又能够调节炎症反应，降低并发症的产生，缓解肝脏脂肪变性；且毒副作用小。
当然，实施本发明的任一产品或方法并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来说，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他附图。
图1是本发明实施例所提供的粉葛益生元的制备方法流程图；
图2是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠体重变化量的影响分析图；
图3是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠肝重的影响分析图；
图4是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠肝脏甘油三酯水平的影响分析图；
图5是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠口服葡萄糖耐受量曲线的影响分析图；
图6是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠口服葡萄糖耐量曲线下面积的影响分析图；
图7是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠肝脏脂质积累的影响SEM图；
图8是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠血清低密度脂蛋白水平的影响分析图；
图9是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠血清高密度脂蛋白水平的影响分析图；
图10是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠血清胆固醇水平的影响分析图；
图11是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠血清甘油三酯水平的影响分析图；
图12是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠血清谷草转氨酶水平的影响分析图；
图13是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠血清谷丙转氨酶水平的影响分析图；
图14是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠血清中炎症因子TNF-α水平的影响分析图；
图15是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠血清中炎症因子MCP-1水平的影响分析图；
图16是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠血清中炎症因子IL-1β水平的影响分析图；
图17是本发明实施例粉葛益生元对非酒精性脂肪肝模型小鼠血清中炎症因子IL-6水平的影响分析图。
具体实施方式
本申请发明人在发现上述问题后，对NAFLD及其治疗药物进行了深入分析。研究发现，饮食可显著调节肠道微生物组和NAFLD发展相关的代谢途径，肠道、饮食和肝脏之间密切相关，可通过在药食同源的动植物中寻找可用于预防或治疗NAFLD营养物质，实现对NAFLD的临床防治。其中，粉葛是一种豆科葛属植物，民间食用历史悠久，富含多种营养物质，且生物活性强，是一种药食同源的粮食作物。
粉葛为豆科多年生藤本植物甘葛藤的块根。性凉，味甘、辛，归太阳、阳明、太阴经，属辛凉解表药，具有解肌退热、透发麻疹、升津止渴、升阳止泻的功效。近年来发现粉葛对长期过食肥甘厚腻导致的肝、脾、肾三脏功能失调，痰湿、瘀血内生、脂肪肝等症有较好的临床治疗效果。
另外，益生元是一些不被宿主消化吸收却能够选择性地促进体内有益菌的代谢和增殖，从而改善宿主健康的有机物质。益生元在小肠中不能被酶解，但在人的肠胃道结肠中可以与挥发性脂肪酸(Short-Chain Fatty Acids,SCFAs)起发酵反应，对人体内短链脂肪酸和肠道微生物多样性起重要的调节作用。益生元可以通过调节肠道菌群丰度、种类以及SCFAs等代谢产物含量，维护肠道的正常生理功能，增强机体的代谢能力，控制疾病的发生。益生元常以低聚糖、多糖的形式存在于多种植物中。
而作为生物活性较强的粉葛，常用作食物直接食用，无法充分发挥粉葛的功效。基于此，本申请提出了一种粉葛益生元及其制备方法、应用方法，提取出鲜粉葛中含有的非纤维类难消化物质作为粉葛益生元，经动物实验验证该粉葛益生元具有显著的预防和治疗非酒精性脂肪肝的效果。
应注意的是，以上现有技术中的方案所存在的缺陷，均是发明人在经过实践并仔细研究后得出的结果，因此，上述问题的发现过程以及下文中本发明实施例针对上述问题所提出的解决方案，都应该是发明人在本发明过程中对本发明做出的贡献。
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征也可以相互组合。
本申请提供了一种粉葛益生元的制备方法。参见图1，所述制备方法包括：
步骤A，将鲜粉葛经清洗、去皮、切块后，加入5-8倍重量的水，粉碎、过筛除去粗纤维后，静置，经沉淀得到粉葛粗提物。
步骤B，粉葛粗提物分散于溶剂中，加热至90-98℃预处理25-40min；再置于高压蒸汽灭菌锅中，压力为常用范围，通常为0.11-0.25MPa，选优为0.12 MPa ，于121℃处理25-35min，高温处理完毕后取出，自然冷却至常压55-60℃，得到第一中间液。
本步骤中，所述粉葛粗提物分散于溶剂中可以通过不同的方式实现。
实现方式一：将步骤A中的沉淀物加5-8倍重量的水漂洗、沉淀2-3次；再加入5-8倍重量的水，搅拌均匀后均匀分散于水中。
实现方式二：将步骤A中的沉淀物进行漂洗后，烘干、粉碎、过筛，得到粉末；再将粉末分散于0.1-0.4mol/L 醋酸钠溶液中并用醋酸调节PH至5.2，配制成10-30%（m/v）乳状液。
步骤C，在第一中间液中加入普鲁兰酶，酶解脱支（30-120U/g干基）6-10h，取出脱支后的样品在100℃下放置15min进行灭酶，在4℃下进行重结晶20-30h，60℃鼓风干燥后粉碎过筛，得到脱支粉葛粗提物。
步骤D，将适量所述脱支粉葛粗提物，用柠檬酸缓冲液（PH 2.0）配制成10-30%的乳状液，并分步依次加入胃蛋白酶（50-150U/g干基）、耐高温α-淀粉酶（50-150U/g干基）、葡萄糖苷酶（100-200U/g干基），酶解完成后高温灭酶，得到第二中间液。所述干基即为脱支粉葛粗提物。
本步骤中，所述依次加入，具体包括：加入胃蛋白酶（50-150U/g干基粗提物），40℃酶解0.5-1h；调pH至6.0，添加耐高温 α-淀粉酶（50-150U/g干基淀粉），95℃酶解20-50分钟；调pH至4.5,加入淀粉葡萄糖苷酶（100-200U/g干基淀粉），60℃酶解0.5-2h。
步骤E，将所述第二中间液进行沉淀，再分别用水和80-100%乙醇洗涤沉淀物至少各三次，将所得沉淀物烘干、粉碎、过筛，制得粉葛益生元。
本步骤中，所述洗涤过程具体为：将沉淀后的第二中间液去上清液，清水洗涤沉淀物，6000rpm离心去除上清液，重复三次；然后以95%乙醇洗涤沉淀物，6000rpm离心去除上清液，重复三次。所述过筛，具体为过120目筛。
本申请实施例还提出了一种粉葛益生元，所述粉葛益生元通过上述粉葛益生元的制备方法制得，是从鲜粉葛中提取出的抗消化、低持水性的膳食纤维，聚合度范围为30-200，呈现状态为乳白色至浅黄色粉末。优选地，本实施例所提供的所述乳白色至浅黄色粉末，粒度为80-120目。
下面以鲜粉葛为例，对上述粉葛益生元的制备方法进行详细说明。
实施例1
取1kg鲜粉葛，经清洗、去皮、切块后，加入15kg饮用水，粉碎，过筛除去粗纤维后，静置，取沉淀物加3kg饮用水漂洗、沉淀2-3次。加入5kg饮用水，搅拌均匀后，于95℃加热预处理30min后,再经121℃压热处理30min，冷却至常压58℃，得到第一中间液。
在所述第一中间液中加入30000U普鲁兰酶脱支10h，取出脱支后的样品在100℃下放置15min进行灭酶，在温度4℃下进行重结晶24h，得到脱支粉葛粗提物。
将脱支粉葛粗提物分散于0.135mol/L柠檬酸缓冲液（PH2.0）配制成15%乳状液。加入80U/g干基粗提物的胃蛋白酶，40℃酶解1h。调pH到6.0，加入80U/g干基粗提物的耐高温α-淀粉酶，95℃酶解30min。调pH到4.5,添加120U/g干基粗提物的淀粉葡萄糖苷酶，60℃酶解1h。离心去除上清液，清水沉淀洗涤，离心去除上清液（重复三次），接着95%乙醇洗涤沉淀，离心去除上清液（重复三次）；粉碎、过120目筛，得到粉葛益生元。
所得到的粉葛益生元，是一种抗消化、低持水性的膳食纤维，聚合度范围大于等于80，呈现状态为乳白色偏黄粉末。
实施例2
取0.5kg鲜粉葛，经清洗、去皮、切块后，加入8kg饮用水，粉碎，过筛除去粗纤维后，静置，取沉淀物作为粉葛粗提取。取0.5kg粉葛粗提物，分散于0.2mol/L 醋酸钠溶液(PH5.2)中，配制成30%乳状液，98℃预处理40min后,置于高压蒸汽灭菌锅121℃高压35min，随后取出自然冷却至60℃，得到第一中间液。
在所述第一中间液中加入120U/g干基的普鲁兰酶，58℃下酶解8h，灭酶，取出样品冷却至室温后4℃下老化30h。随后将样品60℃鼓风干燥，粉碎过120目筛后，得到脱支粉葛粗提物。
将脱支粉葛粗提物分散于0.135mol/L柠檬酸缓冲液（PH2.0）配制成30%乳状液。加入150U/g干基重的胃蛋白酶，40℃酶解1h。调pH到6.0加入150U/g干基重的耐高温α-淀粉酶，95℃酶解30min。调pH到4.5,添加200U/g干基重的淀粉葡萄糖苷酶，60℃酶解1h。离心去除上清液，清水沉淀洗涤，离心去除上清液（重复三次），接着90%乙醇洗涤沉淀，离心去除上清液（重复三次）；粉碎、过120目筛，得到粉葛益生元。
所得到的粉葛益生元，是一种抗消化、低持水性的膳食纤维，聚合度范围为150-200，呈现状态为浅黄色粉末。
实施例3
取1kg鲜粉葛，经清洗、去皮、切块后，加入15kg饮用水，粉碎，过筛除去粗纤维后，静置，取沉淀物作为粉葛粗提取。取0.5kg粉葛粗提物，分散于0.2mol/L 醋酸钠溶液(PH5.2)中，配制成10%乳状液，90℃预处理25min后,置于高压蒸汽灭菌锅121℃高压25min，随后取出自然冷却至55℃，得到第一中间液。
在所述第一中间液中加入70U/g普鲁兰酶，58℃下酶解6h，灭酶，取出样品冷却至室温后4℃下老化20 h。随后将样品60℃鼓风干燥，粉碎过120目筛后，得到脱支粉葛粗提物。
将脱支粉葛粗提物分散于0.135mol/L柠檬酸缓冲液（PH2.0）配制成10%乳状液。加入50U/g干基重的胃蛋白酶，40℃酶解1h。调pH到6.0加入50U/g干基重的耐高温α-淀粉酶，95℃酶解30min。调pH到4.5,添加100U/g干基重的淀粉葡萄糖苷酶，60℃酶解1h。离心去除上清液，清水沉淀洗涤，离心去除上清液（重复三次），接着乙醇溶液洗涤沉淀，离心去除上清液（重复三次）；粉碎、过120目筛，得到粉葛益生元。
所得到的粉葛益生元，是一种抗消化、低持水性的膳食纤维，聚合度范围大于等于30，呈现状态为乳白色粉末。
基于上述实施例所制备的粉葛益生元，本申请实施例还提供了一种粉葛益生元的应用方法，将所述粉葛益生元用于制备预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的产品。
基于上述实施例所制备的粉葛益生元，本申请实施例还提供了一种粉葛益生元的应用方法，将所述粉葛益生元用于制备非治疗目的干预非酒精性脂肪肝的产品。
上述两种实施例中所述产品，包括但不限于食品、保健品、营养品或药物。在产品制备中，所述粉葛益生元可作为主要原料、辅料或功能因子使用。
其中，所述粉葛益生元增加了双歧杆菌、乳酸杆菌等有益菌群丰度，同时降低了拟杆菌、大肠杆菌等菌群丰度。通过对菌群的调节改善了肠道菌群代谢产物，如降低乙醇、内毒素（LPS）含量，增加了短链脂肪酸的产量， 同时调节胆汁酸代谢及肠道激素，从而降低血脂、减少肝脏脂质堆积，减轻体重，同时调节炎症反应，降低并发症的产生。例如，至少具有以下一种非酒精性脂肪肝症状改善的作用：
(a)降低游离脂肪酸引起的炎症反应；
(b)降低血脂；
(c)降低肝脏重；
(d)降低血糖，改善葡萄糖耐量；
(e)调节肝脏脂质代谢；
(f)降低肝脏脂质堆积；
(g)改善肝脏功能。
所述产品中粉葛益生元含量，根据各种相关因素来确定，包括患者体重、年龄、性别、产品形式以及症状严重程度等。
当产品为食品、保健品、营养品时，本申请合适的产品形式包括溶液、即可食用的产品如即可饮用的速溶饮料、液体食物如软饮料、果汁、运动饮料、乳饮料、冰冻牛奶、酸奶饮料或汤、固体食物如浓缩物、粉末或颗粒等。所述产品中可任选含有常规食品添加剂，如乳化剂、稳定剂、甜味剂、调味剂、着色剂、防腐剂、螯合剂、渗透剂、缓冲剂或pH 调节剂、酸化剂、增稠剂、组织形成剂等。
当产品为药品时，本申请合适的产品形式包括常规剂型、或以软凝胶、小胶囊、粉末、浆液、液体悬浮液、乳剂和溶液等。软胶囊中，优选将活性成分溶解或悬浮于合适的液体中，如脂肪油、石蜡油或液体聚乙二醇。可以任选加入稳定剂。口服药物或膳食补充剂形式可以通过制药领域公知的常规配制方法制得，即通过将活性物质和可食用的药学上可接受的固体或液体载体和/或赋形剂一起混合，例如填充剂如纤维素、乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇和磷酸钙，和粘合剂如淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素和/ 或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。任选的添加剂包括润滑剂和流动调节剂，如硅酸、二氧化硅、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁/ 钙、聚乙二醇(PEG) 稀释液；崩解剂如淀粉、羧甲基淀粉、交联PVP、琼脂、褐藻酸和藻酸盐；着色剂、调味剂和熔化剂。可以将染料或色素加入片剂或糖衣丸包衣中，例如为了辨别的目的或指示活性成分的不同剂量。其给药方式为任何适于人给药的形式，尤其是给药于胃肠道的任何部位，肠给药、优选口服给药和通过管或导管给药都涵盖于本申请中。
可以采用如下标准动物临床实验来验证本申请所提供的粉葛益生元对非酒精脂肪肝症状的改善作用。
验证案例1：粉葛益生元对非酒精性脂肪肝小鼠脂质代谢和血糖水平的影响。
取SPF 级雄性C57BL/6小鼠48只，体重（20±2）g, 将动物统一饲养在没有特定病原体的动物房中，室内光线以12小时光照/黑暗交替循环。室内温度控制在(20±2)℃,湿度控制在60±5%。适应性喂养1周后，将小鼠随机分为四组：正常对照组（Con）、模型对照组(Mod)、低剂量（0.5g/kg）益生元组(LRS)、高剂量（5g/kg）益生元组(HRS)；每组12只。正常对照组为正常小鼠，其他组别小鼠均为非酒精性脂肪肝模型小鼠。1-3周为预处理阶段，给药组包括LRS组和HRS组，给药组小鼠灌胃粉葛益生元，其它组别灌胃等体积蒸馏水。4-15周继续灌胃给药，另外此时开始造模，Con组饲喂普通饲料，其他组别饲喂高脂饲料并在此基础上饮用含1%葡聚糖硫酸钠DSS的溶液，饮用1%DSS溶液7天，然后改为饮用蒸馏水10天，此为一个周期，共有五个周期。观察体重变化，五个周期后处死所有小鼠，保存血清，肝脏等组织用于后续检测分析。取血清采用分光光度法测定生化指标，小鼠处死后解剖取肝脏，脂肪等脏器组织做病理切片。检测结果如图2-13所示。图中，#表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05；##表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01；###表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.001；*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05；**表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01。
在实验期间，检测各组小鼠每周的体重变化，并计算小鼠每周体重占初始体重的百分比。如图2所示，Con组小鼠体重缓慢增加，到15周实验结束时较前增加为131.53%±5.72%；Mod组小鼠体重随时间的延长总体趋势增加，到实验结束时，小鼠体重较初始体重增加为145.50%±5.44%。LRS组与HRS组小鼠体重随时间的延长总体趋势增加，到实验结束时，小鼠体重较初始体重增加为140.92%±7.38%、134.3%±10.82。说明粉葛益生元对小鼠体重增长有抑制作用。
如图3所示，###表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.001，即Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠肝重水平显著升高；*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，**表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01，即用药组与Mod组相比，低、高剂量益生元用药组肝重水平显著降低，其中高剂量益生元组HRS降低非酒精性脂肪肝组模型小鼠肝脏较为显著，且与Con组无显著性差异，表明低、高剂量益生元用药组具有降非酒精性脂肪模型小鼠肝重水平效果，其中高剂量用药组效果相对更好，并从统计学角度显示与正常水平无差异。
如图4所示，##表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01，即Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠肝脏甘油三酯水平显著升高；*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，即用药组与Mod组相比，高剂量益生元用药组HRS肝重水平显著降低，且与Con组无显著性差异，表明高剂量益生元用药组具有降非酒精性脂肪模型小鼠肝脏甘油三酯水平效果，并从统计学角度显示与正常水平无差异。
由图3-4分析可知，饲喂第15周时，Mod组小鼠肝脏重量显著升高，LRS、HRS组可有效降低小鼠肝脏重量，相比Mod组，分别下降了16.30％和17.39％；Mod组小鼠肝脏中的甘油三酯（TG）含量显著升高，LRS、HRS组可以有效降低小鼠肝脏中的TG水平，相比Mod组，分别下降了28.91％和34.04％，改善了肝脏脂肪变性。
如图5-6所示，在第15周时，小鼠口服葡萄糖耐量OGTT曲线显示，Mod组小鼠0min时血糖在10以上，15min时血糖上升最高到21.97±4.09，相比Con组升高31.49％；随后四组小鼠血糖均开始下降，在120min时，Con组小鼠血糖下降到7.43±0.72，LRS、HRS组血糖分别恢复在11.5±1.07、10.02±1.62水平，而Mod组在11.9±1.51。如图6所示，###表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.001，即Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠血糖曲线下面积显著升高；##表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01，即LRS组与 Con组具有统计学差异；*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，即用药组与Mod组相比，HRS组血糖曲线下面积显著降低，且与Con组无显著性差异，表明高剂量益生元用药组具有提高非酒精性脂肪模型小鼠葡萄糖耐性效果，并从统计学角度显示与正常水平无差异。通过小鼠OGTT曲线下面积AUC可以看出，Mod组相比Con组显著升高，LRS、HRS组有所下降，其中HRS组相比Mod组显著下降。如图5-6所示，非酒精性脂肪肝小鼠血糖水平较高，糖耐量受损，导致血糖调节失衡，粉葛益生元可以有效降低血糖水平，改善葡萄糖耐量。
如图7所示，通过肝脏病理切片(HE染色：左；油红染色：右)可以看出，和Con组(第一排)相比，Mod组(第二排)小鼠肝脏出现脂肪变性，即出现大小不一的空泡(脂滴)或橘黄色脂滴，将细胞核挤向一侧，肝细胞体积增大，肿胀，细胞核明显，局部出现炎症反应。LRS组(第三排)与HRS组(第四排)中小鼠肝脏组织空泡(脂滴)面积变小，炎症反应降低，肝脏脂质堆积有明显的缓解，并随剂量的增加呈现出更显著效果。由图6可知，粉葛益生元可以预防或/和改善非酒精性脂肪肝小鼠的肝脏脂肪积聚。
如图8所示，#表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，即Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠血清低密度脂蛋白水平显著升高；*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，即用药组与Mod组相比，HRS组低密度脂蛋白水平显著降低，且与Con组无显著性差异，表明高剂量益生元用药组具有降非酒精性脂肪模型小鼠血清低密度脂蛋白水平效果，并从统计学角度显示与正常水平无差异。
如图9所示，##表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01，即Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠血清高密度脂蛋白水平显著降低；*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，即用药组与Mod组相比，HRS组血清高密度脂蛋白水平显著升高，且与Con组无显著性差异，表明高剂量益生元用药组具有升高非酒精性脂肪模型小鼠血清高密度脂蛋白水平效果，并从统计学角度显示与正常水平无差异。
如图10所示，#表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，即Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠血清甘油三酯显著升高；*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，即用药组与Mod组相比，HRS组血清甘油三酯水平显著降低，且与Con组无显著性差异，表明高剂量益生元用药组具有降低非酒精性脂肪模型小鼠血清甘油三酯水平效果，并从统计学角度显示与正常水平无差异。
如图11所示，##表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01，即Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠血清总胆固醇显著升高；*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，即用药组与Mod组相比，HRS组血清高密度脂蛋白水平显著降低，且与Con组无显著性差异，表明高剂量益生元用药组具有降低非酒精性脂肪模型小鼠血清总胆固醇水平效果，并从统计学角度显示与正常水平无差异。
由图8-11可知，通过小鼠血清生化指标分析低密度脂蛋白(LDL-c)、高密度脂蛋白(HDL-c)、血清胆固醇(TG)、血清甘油三酯(TC)可以发现，Mod组血清中LDL、TG和TC的水平相比对照组升高，LRS、HRS组下调三者的水平，并随剂量增加呈现更显著效果，HDL在Mod组水平较低，HRS组显著上调HDL水平。
如图12所示，Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠血清天冬氨酸转氨酶水平显著升高；用药组与Mod组相比，益生元用药组血清天冬氨酸转氨酶水平无显著性差异，表明高剂量益生元用药组不能降低非酒精性脂肪模型小鼠血清天冬氨酸转氨酶。
如图13所示，##表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01，即Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠血清丙氨酸转氨酶水平显著升高；*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，即用药组与Mod组相比，HRS组血清丙氨酸转氨酶水平显著降低，且与Con组无显著性差异，表明高剂量益生元用药组具有降低非酒精性脂肪模型小鼠血清丙氨酸转氨酶水平效果，并从统计学角度显示与正常水平无差异。
由图12-13可知，小鼠肝脏功能指标中血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）在Mod组中均有不同程度升高，说明出现了一定程度的肝功能受损和炎症反应，HRS可下调血清ALT、AST水平以有效恢复肝脏功能。
由图1-13分析可知，粉葛益生元可以减肥降脂，调节脂质代谢，改善肝脏功能，降低血糖水平，改善葡萄糖耐量。
验证案例2：粉葛益生元对非酒精性脂肪肝小鼠血清中炎症因子TNFα、MCP-1、IL-1β、IL-6的影响。
取SPF 级雄性C57BL/6小鼠48只，体重（20±2）g, 将动物统一饲养在没有特定病原体的动物房中，室内光线以12小时光照/黑暗交替循环。室内温度控制在(20±2)℃,湿度控制在60±5%。适应性喂养1周后，将小鼠随机分为四组：即正常对照组（Con）、模型对照组(Mod)、低剂量（0.5g/kg）给药组(LRS)、高剂量（5g/kg）给药组(HRS)；每组12只。1-3周为预处理阶段，给药组小鼠灌胃粉葛益生元，其它组别灌胃等体积蒸馏水。4-15周继续灌胃给药，此外此时开始造模，Con组饲喂普通饲料，其他组别饲喂高脂饲料并在此基础上饮用含1%DSS 的溶液，饮用1% DSS溶液7天，然后改为饮用蒸馏水10天，此为一个周期，共有五个周期。观察体重变化，五个周期后处死所有小鼠，保存血清，肝脏等组织用于后续检测分析。取血清采用分光光度法测定生化指标，小鼠处死后解剖取肝脏，脂肪等脏器组织做病理切片。检测结果如图14-17所示。图中，#表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05；##表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01；###表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.001；*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05；**表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01。
如图14所示，*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，即Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠肿瘤坏死因子-α水平显著升高；**表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01，即用药组与Mod组相比，低、高剂量益生元用药组肿瘤坏死因子-α水平显著水平显著降低，其中HRS组降低非酒精性脂肪肝组模型小鼠肝脏较为显著，且与Con组无显著性差异，表明低、高剂量益生元用药组具有降低非酒精性脂肪模型小鼠肿瘤坏死因子-α水平效果，其中HRS组效果较好，并从统计学角度显示与正常水平无差异。
如图15所示，##表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01，即Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠血清单核细胞趋化因子水平显著升高；**表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01，即用药组与Mod组相比，HRS组血清单核细胞趋化因子水平显著降低，且与Con组无显著性差异，表明高剂量益生元用药组有降低非酒精性脂肪模型小鼠血清单核细胞趋化因子水平效果，并从统计学角度显示与正常水平无差异。
如图16所示，###表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.001，即Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠血清白细胞介素-1β水平显著升高；*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，**表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01，即用药组与Mod组相比，低、高剂量益生元用药组血清白细胞介素-1β水平显著水平显著降低，其中HRS组降低非酒精性脂肪肝组模型小鼠肝脏较为显著，且与Con组无显著性差异，表明低、高剂量益生元用药组具有可以降非酒精性脂肪模型小鼠血清白细胞介素-1β水平效果，其中高剂量用药组效果较好，并从统计学角度显示与正常水平无差异。
如图17所示，##表示与Con组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.01，即Mod组与Con组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠血清白细胞介素-6水平显著升高；*表示与Mod组相比，根据显著性检验方法所得概率p<0.05，即用药组与Mod组相比，HRS组血清白细胞介素-6水平显著降低，且与Con组无显著性差异，表明高剂量益生元用药组有降低非酒精性脂肪模型小鼠血清白细胞介素-6水平效果，并从统计学角度显示与正常水平无差异。
由图14-17分析可知，饲喂第15周时，非酒精性脂肪肝模型小鼠血清中的促炎症因子TNFα、MCP-1、IL-1β、IL-6显著升高，LRS、HRS可以有效降低小鼠肝脏中的炎症因子水平,其中HRS组更为显著，相比Mod组，分别下降了33.46%、35.86％、46.14％和44.48%，降低血清中炎症因子的水平，缓解小鼠肝脏中的脂肪变性程度。
由以上可以看出，本申请实施例所提供的粉葛益生元及其制备方法、应用方法，以粉葛为原料，制备了粉葛益生元，提供了一种新的针对非酒精脂肪肝的防治途径，既能够减轻体重，降低血脂，减少肝脏脂质堆积，改善血糖水平和肝功能，预防和/或改善非酒精性脂肪肝的效果强；又能够调节炎症反应，降低并发症的产生，缓解肝脏脂肪变性；且毒副作用小。
以上描述仅为本发明的较佳实施例以及对所运用技术原理的说明，并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的优选实施例。本领域技术人员应当理解，本发明中所涉及的发明范围，并不限于上述技术特征的特定组合而成的技术方案，同时也应涵盖在不脱离所述发明构思的情况下，由上述技术特征或其等同特征进行任意组合而形成的其它技术方案。基于本发明的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
Claims (10)
1.一种粉葛益生元的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：
步骤A，将鲜粉葛经清洗、去皮、切块后，加入5-8倍重量的水，粉碎、过筛除去粗纤维后，静置，经沉淀得到粉葛粗提物；
步骤B，粉葛粗提物分散于溶剂中，加热至90-98℃预处理25-40min；再置于高压蒸汽灭菌锅中，121℃处理25-35min，高温处理完毕后取出，自然冷却至常压55-60℃，得到第一中间液；
步骤C，在第一中间液中加入普鲁兰酶，酶解脱支6-10h，取出脱支后的样品在100℃下放置15min进行灭酶，在4℃下进行重结晶20-30h，60℃鼓风干燥后粉碎过筛，得到脱支粉葛粗提物；其中普鲁兰酶加入量为30-120U/g干基；
步骤D，将适量所述脱支粉葛粗提物，用PH 2.0的柠檬酸缓冲液配制成10-30%的乳状液，并分步依次加入50-150U/g干基粗提物的胃蛋白酶、50-150U/g干基粗提物的耐高温α-淀粉酶、100-200U/g干基粗提物的葡萄糖苷酶，酶解完成后高温灭酶，得到第二中间液；
步骤E，将所述第二中间液进行沉淀，再分别用水和80-100%乙醇洗涤沉淀物至少各三次，将所得沉淀物烘干、粉碎、过筛，制得粉葛益生元。
2.根据权利要求1所述的粉葛益生元的制备方法，其特征在于，所述粉葛粗提物分散于溶剂，具体为：将步骤A中的沉淀物加5-8倍重量的水漂洗、沉淀2-3次；再加入5-8倍重量的水，搅拌均匀后均匀分散于水中。
3.根据权利要求1所述的粉葛益生元的制备方法，其特征在于，所述粉葛粗提物分散于溶剂，具体为：将步骤A中的沉淀物进行漂洗后，烘干、粉碎、过筛，得到粉末；再将粉末分散于0.1-0.4mol/L 醋酸钠溶液中并用醋酸调节PH至5.2，配制成m/v浓度为10-30%的乳状液。
4.根据权利要求1至3任一项所述的粉葛益生元的制备方法，其特征在于，步骤D中所述分步依次加入，具体包括：加入胃蛋白酶，40℃酶解0.5-1h；调pH至6.0，添加耐高温α-淀粉酶，95℃酶解20-50分钟；调pH至4.5,加入淀粉葡萄糖苷酶，60℃酶解0.5-2h。
5.一种粉葛益生元，其特征在于，所述粉葛益生元由权利要求1-4任一项制备方法进行制备，是从鲜粉葛中提取出的抗消化、低持水性的膳食纤维，聚合度范围为30-200，呈现状态为乳白色至浅黄色粉末。
6.根据权利要求5所述的粉葛益生元，其特征在于，所述乳白色至浅黄色粉末，粒度为80-120目。
7.一种如权利要求5或6所述粉葛益生元的应用方法，其特征在于，将所述粉葛益生元用于制备预防和/或治疗非酒精性脂肪肝的产品。
8.根据权利要求7所述的粉葛益生元的应用方法，其特征在于，所述产品，包括食品、保健品、营养品或药物；在产品制备中，所述粉葛益生元作为主要原料、辅料或功能因子使用。
9.根据权利要求7所述的粉葛益生元的应用方法，其特征在于，所述粉葛益生元用于降低血脂、减少肝脏脂质堆积，减轻体重，同时调节炎症反应，降低并发症的产生；至少具有以下一种非酒精性脂肪肝症状改善的作用：
(a)降低游离脂肪酸引起的炎症反应；
(b)降低血脂；
(c)降低肝脏重；
(d)降低血糖，改善葡萄糖耐量；
(e)调节肝脏脂质代谢；
(f)降低肝脏脂质堆积；
(g)改善肝脏功能。
10.一种如权利要求5或6所述粉葛益生元的应用方法，将所述粉葛益生元用于制备非治疗目的干预非酒精性脂肪肝的产品。
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103385437A (zh) * | 2013-06-28 | 2013-11-13 | 江苏农林职业技术学院 | 一种葛根功能性食品及其制备方法 |
| CN104026513A (zh) * | 2014-06-05 | 2014-09-10 | 湖南中医药大学 | 一种采用复合酶法制备即食葛根全粉的方法 |
| CN108308242A (zh) * | 2018-05-09 | 2018-07-24 | 河南中医药大学 | 一种降糖通便的葛纤饼干 |
| CN110771905A (zh) * | 2019-11-18 | 2020-02-11 | 江西中医药大学 | 一种酶法制备具有良好膨胀性葛根膳食纤维的方法 |
| CN113215207A (zh) * | 2021-05-06 | 2021-08-06 | 江西中医药大学 | 一种葛根抗性淀粉的制备方法及应用 |
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103385437A (zh) * | 2013-06-28 | 2013-11-13 | 江苏农林职业技术学院 | 一种葛根功能性食品及其制备方法 |
| CN104026513A (zh) * | 2014-06-05 | 2014-09-10 | 湖南中医药大学 | 一种采用复合酶法制备即食葛根全粉的方法 |
| CN108308242A (zh) * | 2018-05-09 | 2018-07-24 | 河南中医药大学 | 一种降糖通便的葛纤饼干 |
| CN110771905A (zh) * | 2019-11-18 | 2020-02-11 | 江西中医药大学 | 一种酶法制备具有良好膨胀性葛根膳食纤维的方法 |
| CN113215207A (zh) * | 2021-05-06 | 2021-08-06 | 江西中医药大学 | 一种葛根抗性淀粉的制备方法及应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 钟海雁;韩军;苏勇;李忠海;: "从葛根渣中酶法制备膳食纤维", 作物学报, vol. 31, no. 12, pages 1606 - 1610 * |
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