CN114081175A - 一种组合物及其在制备改善睡眠的产品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及食品和保健食品技术领域，尤其涉及一种组合物及其在制备改善睡眠的产品中的应用。本发明提供的组合物由γ‑氨基丁酸和核桃肽组成，经验证，组合物中两种组分产生增效协同作用，能够提高GABA、NE和/或Ach的水平，抑制5‑HT的水平，从而起到改善睡眠的作用。其效果显著优于单一组分的对照组。

Description

一种组合物及其在制备改善睡眠的产品中的应用

技术领域

本发明涉及食品或保健食品技术领域，尤其涉及一种组合物及其在制备改善睡眠的产品中的应用。

背景技术

随着社会发展，生活节奏加快及竞争压力日益激烈，睡眠问题却成为当前困扰人们生活质量的突出性问题。据统计我国失眠患者近年来也呈上升趋势，根据中国睡眠协会的数据报告显示，超过3亿中国人有睡眠障碍，成年人失眠发生率高达38.2％。睡眠质量差是多种疾病的危险因素，与高血压、冠心病、糖尿病等都有密切的关系，同时还会影响人的心理和大脑健康状况，使人疲劳、焦虑、抑郁，学习能力和记忆力降低。

相关研究表明，与睡眠密切相关的神经递质有5-HT、GABA、谷氨酸(Gh)、多巴胺(DA)等。提高大脑中GABA、Ach、NE含量，降低5-HT含量，调节睡眠-觉醒机制相关神经递质的平衡，对于改善睡眠具有积极作用。

目前治疗失眠的一类是镇静催眠类药物、褪黑素等。这类药物虽疗效确切，短期可见成效，但其不良反应较大，如头晕目眩、乏力、影响记忆力、易造成药物依赖性和戒断症状。用于调理睡眠障碍的另一类产品就是利用传统的中医理论的中药大复方，组方大且原料多，往往起效慢，作用机理不明确，且口味较难被接受。因此，进一步开发具有有助于改善睡眠的食品或保健品显得尤为重要。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种组合物及其在制备改善睡眠的产品中的应用，组合物靶点明确，两种组分相互配合，共同起到了良好的增效协同作用。

本发明提供的组合物包括γ-氨基丁酸和核桃肽；其中γ-氨基丁酸和核桃肽的质量比为(1/3～3)：1。

一些实施例中，本发明提供的组合物中所述γ-氨基丁酸和核桃肽的质量比为1/3：1。

一些实施例中，本发明提供的组合物中所述γ-氨基丁酸和核桃肽的质量比为1：1。

一些实施例中，本发明提供的组合物中所述γ-氨基丁酸和核桃肽的质量比为3：1。

本发明所述的组合物在制备神经递质调节的制剂中的应用。

本发明中，所述神经递质包括：NE、DA、5-HT、GABA和/或Ach。

本发明中，所述调节包括：提高GABA、NE和/或Ach的水平，抑制5-HT的水平。

研究表明，与睡眠密切相关的神经递质有5-HT、GABA、谷氨酸(Gh)、多巴胺(DA)等。机理分析发现组合物能增高大脑中GABA、Ach、NE含量，降低5-HT含量，调节睡眠-觉醒机制中神经递质的相互平衡，从而调节睡眠，具有改善睡眠的保健功能。

本发明所述的组合物在制备改善睡眠的产品中的应用。

本发明中，所述改善睡眠包括：提高入睡率、延长睡眠时间和/或缩短睡眠潜伏时间。

本发明还提供了一种改善睡眠的产品，其包括本发明所述的组合物和保健品中可接受的辅料，或食品中可接受的原料。

本发明所述的产品为保健品或食品。

本发明提供的改善睡眠的保健品中包括本发明所述的组合物和保健品中可接受的辅料。

本发明所述的保健品的剂型为片剂、丸剂、口服液剂、胶囊剂、糖浆剂、滴丸剂或颗粒剂。其中，所述胶囊剂为硬胶囊剂或软胶囊剂。所述片剂为口服片剂或口腔片剂。所述口服片剂为普通压制片、分散片、泡腾片、咀嚼片、包衣片或缓控释片。所述保健品中可接受的辅料为水果粉、食用香精、甜味剂、酸味剂、填充剂、润滑剂、防腐剂、助悬剂、食用色素、稀释剂、乳化剂、崩解剂或增塑剂中的一种或两者以上的混合物。

本发明所述的改善睡眠的食品中包括本发明所述的组合物和食品中可接受的原料。

本发明所述的食品包含液态食品或固态食品，所述液态食品包括液态乳制品或乳饮料，所述液态乳制品包括动物基乳制品和植物基乳制品，所述动物基乳制品包括：纯奶、发酵乳、乳酸菌饮料等，所述植物基乳制品包括：豆奶、花生奶、杏仁奶等。所述固态食品包括乳粉或其他乳制品；所述乳粉包括：全脂乳粉、脱脂乳粉、部分脱脂乳粉、调制乳粉或牛初乳粉；所述其他乳制品包括：炼乳、奶油、乳酪或冰淇淋。

本发明提供的组合物由γ-氨基丁酸和核桃肽组成，经验证，组合物中两种组分产生增效协同作用，能够提高GABA、NE和/或Ach的水平，抑制5-HT的水平，从而起到改善睡眠的作用，其效果显著优于空白对照组。

附图说明

图1示各组对GABA水平影响的组间比较；

图2示各组对Ach水平影响的组间比较。

具体实施方式

本发明提供了一种组合物及其在制备改善睡眠的产品中的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明采用的原料皆为普通市售品，皆可于市场购得。

其中，制备所述核桃肽的原料来自于有机农场种植核桃，经过脱壳冷榨去油，前处理除杂，再经过食品级酶解，过滤干燥后得到由2-3个氨基酸组成的小分子植物肽，小分子肽含量大于80％，其分子量主要分布于：200～600Da。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例

参照《保健食品检验与评价技术规范(2003版)》中“十改善睡眠功能检验方法”中的方法，经过动物实验的直接睡眠实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验、巴比妥钠睡眠潜伏期实验，发现组合物较单一使用其中任何一种都具有更好的改善睡眠作用，体现了组合物的协同增效作用。说明本发明组合物配比更加合理有效，互相协同作用达到改善睡眠的功效。

1、受试动物

SPF级6周龄雄性BALB/C小鼠，体重约18-20g，每组14只

2、受试样品如表1：

表1

3、实验方法及结果：

3.1直接睡眠实验

实验第30天，灌胃后观察小鼠是否出现睡眠现象(观察时间为1小时)。睡眠以翻正反射消失为指标。如超过30s不能翻正者，即认为翻正反射消失，进入睡眠。翻正反射恢复即为动物觉醒。翻正反射消失至恢复这段时间为动物睡眠时间，记录对照组与实验组入睡动物数及睡眠时间。从而判定受试物是否有直接睡眠作用。

结果显示单一组分或者组合物均无直接睡眠作用。

3.2延长戊巴比妥睡眠时间实验

各组小鼠末次灌胃干预30min后，依据预实验结果以50mg/kg戊巴比妥钠剂量腹腔注射，注射量为0.1ml/10g，记录腹腔注射后翻正反射消失和恢复时间，以翻正反射消失至恢复之间的时间为小鼠睡眠时间，比较各干预组与对照组小鼠睡眠时间的差异，判定受试样品能否延长戊巴比妥钠睡眠时间。如实验组睡眠时间延长，且有统计学差异，则实验结果阳性，说明受试物对戊巴比妥钠有加强作用。

表2功效组合物促进戊巴比妥钠小鼠睡眠时间的影响

组别	睡眠时间(min)
		空白对照	49.46±10.59
对照A	59.31±17.03
		对照B	56.01±15.23
组合物1	68.19±5.57*
		组合物2	67.34±15.36*
组合物3	71.75±9.61*

注：*表示差异有显著性，P＜0.05

与对照组比较，γ-氨基丁酸和核桃肽单独使用小鼠睡眠时间分别延长19.91％和13.24％，但差异无统计学意义(P＞0.05)；而1/3倍γ-氨基丁酸+核桃肽、1倍γ-氨基丁酸+核桃肽、3倍γ-氨基丁酸+核桃肽小鼠睡眠时间延长，实验结果阳性。

3.3戊巴比妥钠阈下剂量催眠试验

各组小鼠末次灌胃干预20min后，依据预实验结果以25mg/kg戊巴比妥钠阈下剂量腹腔注射，注射量为0.1ml/10g，以小鼠翻正反射消失达1min以上者为入睡标准，记录30min内入睡动物数，计算睡眠发生率，比较对照组与实验组入睡动物数之间的差异，入睡动物发生率增加有显著性，则实验结果阳性

表3阈下剂量实验结果

组别	入睡只数	入睡率％
			空白对照	3	21.42
对照A	5	35.71
			对照B	4	28.57
组合物1	7	50.00
			组合物2	9	64.28*
组合物3	9	64.28*

注：*表示差异有显著性，P＜0.05

与对照组比较，γ-氨基丁酸和核桃肽单独使用、1/3倍γ-氨基丁酸+核桃肽小鼠入睡率增加，但差异无统计学意义(P＞0.05)；1倍γ-氨基丁酸+核桃肽、3倍γ-氨基丁酸+核桃肽小鼠入睡率显著增加，实验结果阳性。

3.4巴比妥钠睡眠潜伏期实验

在巴比妥钠致睡剂量的基础上，观察受试物是否能缩短入睡潜伏期，若睡眠潜伏期缩短，则说明受试物对巴比妥钠有促进作用。实验第31天，灌胃给予受试样品20min后，给各组动物腹腔注射巴比妥钠260mg/kg，注射量为0.1ml/10(g·bw)。以小鼠翻正反射消失为指标，比较实验组与空白对照组睡眠潜伏期之间的差异。睡眠潜伏期缩短有显著性，则实验结果阳性。

表4巴比妥钠睡眠潜伏期实验结果

组别	睡眠潜伏期时间(min)
		空白对照	27.25±4.12
对照A	25.64±2.79
		对照B	23.22±2.74*
组合物1	24.23±0.79*
		组合物2	28.41±6.55
组合物3	23.72±2.35*

注：*表示差异有显著性，P＜0.05

与空白对照组比较，γ-氨基丁酸组、γ-氨基丁酸+核桃肽组小鼠睡眠潜伏期分别缩短5.91％和3.56％，但差异无统计学意义(P＞0.05)；核桃肽单独使用、1/3倍γ-氨基丁酸+核桃肽、3倍γ-氨基丁酸+核桃肽小鼠睡眠潜伏期时间缩短，实验结果阳性。

3.5脑组织神经递质检测方法

动物完成巴比妥钠睡眠潜伏期实验后，继续干预4天，以消除巴比妥钠对动物生理影响。小鼠剪头处死，以眼科剪分离动物头部皮肤，使用镊子分离动物头骨，暴露脑组织，采集动物完整脑组织，进行神经递质NE、DA、5-HT、GABA、Ach检测。

表5脑组织神经递质检测结果

分组	GABA(ug/g)	NE(ng/g)	Ach(ng/g)	5-HT(ng/g)	DA(ng/g)
						空白对照	599.30±45.71	17.49±6.80	642.92±36.46	44.48±17.95	9.34±1.42
对照A	686.06±43.80*	17.69±12.81	700.80±34.92*	21.34±7.21*	12.68±5.30
						对照B	715.51±57.11*	36.87±14.15*	733.46±29.74*	27.67±13.25*	9.24±1.25
组合物1	777.17±38.39*	40.55±23.46*	808.14±58.34*	29.01±17.07*	13.06±9.28
						组合物2	758.32±28.34*	33.92±8.88*	853.19±78.16*	28.36±18.95*	15.46±4.25
组合物3	880.45±94.44*	16.34±13.73	817.28±66.80*	19.38±3.30*	11.63±7.26

注：*表示与空白对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)

综合分析以上结果：

当延长睡眠时间、戊巴比妥钠域下剂量和巴比妥钠睡眠潜伏期中至少两者有效，且潜伏期中无明显直接睡眠作用时，判定组合物有效。结果如下：

表6

注：+表示结果阳性；*表示相关指标升高P＜0.05；#表示相关指标降低P＜0.05；-表示指标无显著性变化

(1)与γ-氨基丁酸单独使用比较，1/3倍γ-氨基丁酸+核桃肽，1倍γ-氨基丁酸+核桃肽、3倍γ-氨基丁酸+核桃肽组小鼠脑组织GABA含量显著升高，差异有统计学意义(P＜0.05)；

(2)与核桃肽单独使用比较，1/3倍γ-氨基丁酸+核桃肽、3倍γ-氨基丁酸+核桃肽组小鼠脑组织GABA含量显著升高，差异有统计学意义(P

＜0.05)；

(3)与γ-氨基丁酸单独使用比较，1/3倍γ-氨基丁酸+核桃肽，1倍γ-氨基丁酸+核桃肽、3倍γ-氨基丁酸+核桃肽组小鼠脑组织Ach含量显著升高，差异有统计学意义(P＜0.05)；

(4)与核桃肽单独使用比较，1/3倍γ-氨基丁酸+核桃肽、1倍γ-氨基丁酸+核桃肽、3倍γ-氨基丁酸+核桃肽组小鼠脑组织Ach含量显著升高，

差异有统计学意义(P＜0.05)。

以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.组合物，其特征在于，包括γ-氨基丁酸和核桃肽；其中γ-氨基丁酸和核桃肽的质量比为(1/3～3)：1。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述γ-氨基丁酸和核桃肽的质量比为1/3：1。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述γ-氨基丁酸和核桃肽的质量比为1：1。

4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述γ-氨基丁酸和核桃肽的质量比为3：1。

5.权利要求1～4任一项所述的组合物在制备神经递质调节的制剂中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述神经递质包括：NE、5-HT、GABA和/或Ach。

7.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于，所述调节包括：提高GABA、NE和/或Ach的水平，抑制5-HT的水平。

8.权利要求1～4任一项所述的组合物在制备改善睡眠的产品中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述改善睡眠包括：提高入睡率、延长睡眠时间和/或缩短睡眠潜伏时间。

10.一种改善睡眠的产品，其特征在于，包括权利要求1～4任一项所述的组合物和保健品中可接受的辅料，或食品中可接受的原料。

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