CN114057646A - 一种吡唑衍生物及其在制备抗肿瘤药物方面的应用 - Google Patents

一种吡唑衍生物及其在制备抗肿瘤药物方面的应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于药物化学领域，具体公开了一种吡唑衍生物及其在制备抗肿瘤药物方面的应用。本发明以不同取代基的苯乙酮为原料，经克莱森缩合，关环，再经取代，水解反应，酰胺偶联反应最终得到一系列新的吡唑类衍生物。本发明通过四氮唑盐还原法(MTT)对新化合物进行抗癌活性测试，结果显示合成的一系列吡唑类衍生物具有较好的抗癌活性。

Description

一种吡唑衍生物及其在制备抗肿瘤药物方面的应用
技术领域
本发明属于药物化学领域，特别涉及一种吡唑环衍生物及其制备方法和在抗肿瘤活性中的应用。
背景技术
据美国有关研究者统计，过去十年里，全球癌症发病率升高了33％。仅2015年，就有1750万人被诊断为癌症，并有870万人因此死亡。世界卫生组织日前表示，目前癌症已成全球第二大死因，预计未来几十年癌症新发病例数将大幅增加，到2040年全球新发病例数将比2020年增加近五成。由于化疗的巨大副作用，因此需要设计和开发具有最小副作用以及更高效力的候选药物。
在过去的几十年中，抗癌药物已经从化学合成的化合物中开发。目前制药行业已经花费数十亿美元用于发现安全，有高选择性的吡唑类抗癌药物。最近，已经合成了大量有趣的吡唑衍生物。
吡唑(式a)是一种具有两个相邻氮原子C3H3N2H的五元杂环。它表现出广谱的药理活性，如抗微生物，抗惊厥，抗癌，镇痛，抗炎等。
Figure BDA0003409670020000011
由于其不同的治疗潜力，基于含有1,2-二芳基取代的杂环化合物，吡唑环通常是最畅销的药品。市场上可用的重要吡唑类药物是阿哌沙班、塞来昔布、依碳酸瑞格列净、洛那唑、托吡唑、去甲昔布等等。塞来昔布和鲁索利替尼(式b)是重要的吡唑类衍生物抗癌药物。
Figure BDA0003409670020000021
2016年，Alam等人合成了一系列吡唑类衍生物，并针对H460细胞进行了生物活性测试，其中，1-苯基-3-(4-氯苯基)吡唑类似物(式c)显示出对H460癌细胞具有比较强的抑制活性(A.R.Alam,et al.Bioorganic Chemistry,2016,69:77-90)。
Figure BDA0003409670020000022
本发明以吡唑环为中心骨架，设计和合成了一系列结构新颖的衍生物，并筛选新衍生物的抗肿瘤活性。
发明内容
本发明以不同取代基的苯乙酮为原料，经克莱森缩合，关环，再经取代，水解反应，酰胺偶联反应最终得到一系列新的吡唑类衍生物。
吡唑环类似物结构(式I)
Figure BDA0003409670020000031
Figure BDA0003409670020000032
吡唑环衍生物的合成路线如下所示(式2)：
Figure BDA0003409670020000041
吡唑类衍生物的具体合成方法步骤如下：
具体合成步骤为：
(1)冰浴下，将取代酮1和草酸二乙酯溶解在溶剂中，加入新鲜制备的乙醇钠，继续搅拌至变为室温。生成β酮酸酯化合物2。其中溶剂为无水乙醇；取代酮1：草酸二乙酯：乙醇钠的摩尔比为1:1.5:3；冰浴下搅拌30min，室温搅拌10h；其中所述取代酮的取代基R1为卤素原子，甲基，甲氧基，硝基，氰基等中的一种。
(2)冰浴下，将化合物2溶解在溶剂中，加入肼一水合物，继续搅拌至室温。关环形成吡唑环结构化合物3。其中溶剂为乙酸；化合物2：肼一水合物的摩尔比为1：1.2；冰浴下搅拌10min，室温搅拌8h。
(3)将化合物3溶解在溶剂中，加入碱和取代氯化苄，加热反应，生成化合物4。其中溶剂为乙腈；碱为碳酸钾；化合物3：碳酸钾：取代氯化苄的摩尔比为1：1.2：1.3；加热回流温度为90℃，反应时间为12h；其中所述取代基氯化苄的取代基R2为卤原子，甲基，硝基等。
(4)将化合物4溶解在溶剂中，加入碱溶液，室温反应，生成化合物5。其中溶剂为甲醇；碱溶液为4N氢氧化钠溶液；室温搅拌10h。
(5)将化合物5和活化剂溶解在溶剂中，冰浴下加入化合物A(Bioorganic&Medicinal Chemistry,2018,26:2320-2330)，再加入缚酸剂和酰胺偶联剂后继续搅拌至室温，得到吡唑类酰胺衍生物6。其中溶剂为N,N-二甲基甲酰胺；活化剂为HOAT(1-羟基-7-氮杂苯并三氮唑)；缚酸剂为N-甲基吗啡啉；酰胺偶联剂1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐；冰浴下反应1.5～2h，至室温下反应12h。
化合物A结构式为：
Figure BDA0003409670020000051
与现有技术相比，本发明的有益效果为：。本发明以不同取代基的苯乙酮为原料，经克莱森缩合，关环，再经取代，水解反应，酰胺偶联反应最终得到一系列新的吡唑类衍生物。本发明通过四氮唑盐还原法(MTT)对新化合物进行抗癌活性测试，结果显示合成的一系列吡唑类衍生物具有较好的抗癌活性，对肺癌细胞有选择性抑制活性效果。
具体实施方式
现在结合实例对本发明做进一步的说明，但本发明不局限于这些实施例。吡唑类衍生物的制备：
实施例1：
Figure BDA0003409670020000061
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(6a)的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-苯基丁酸乙酯的制备
冰浴下，将苯乙酮(500mg,3.4mmol)和草酸二乙酯(0.61mL,5.2mmol)溶解乙醇钠(5mL,20％质量含量,0.01mmol)室温搅拌10h。冰浴下，用4N盐酸调pH至2-3，乙酸乙酯萃取，再用饱和食盐水洗涤有机相，浓缩得粗产物，直接进行下一步。
步骤二：4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
将步骤一的粗产物溶解在10mL的乙酸中，冰浴下加入肼一水合物(0.3mL，6.2mmol)，室温下搅拌8h。乙酸乙酯萃取，再用饱和食盐水洗涤有机相，浓缩柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝5:1)，得到740.6mg乳白色固体化合物3，两步产率共82％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.71(dd,J＝8.1,1.6Hz,2H),7.40–7.29(m,3H),6.99(s,1H),4.19(q,J＝7.1Hz,2H),1.21(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
将苯基吡唑-1-甲酸酯(500mg,2.3mmol)溶解在10mL乙腈中，加入碳酸钾(415.4mg,3mmol)和氯化苄(0.27ml,2.3mmol),90℃搅拌回流，反应12h。乙酸乙酯萃取，再用饱和食盐水洗涤有机相，浓缩柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝50：1)，得到538.4mg白色固体化合物4，产率为76％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.90–7.86(m,2H),7.45–7.40(m,3H),7.37–7.24(m,4H),7.21–7.18(m,2H),5.77(s,2H),4.30(q,J＝7.1Hz,2H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-苯基吡唑-1-羧酸的制备
将N-2苄基-苯基吡唑-1-甲酸酯(538.4mg,1.8mmol)溶解在12mL甲醇中，加入4mL4N氢氧化钠溶液，室温搅拌10h。冰浴条件下加入4N盐酸调pH至4，乙酸乙酯萃取，再用饱和食盐水洗涤有机相，浓缩，得到425.5mg白色固体化合物5，产率为87％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
将N-2苄基-苯基吡唑-1-羧酸(30mg,0.1mmol)和HOAT(24.5mg,0.2mmol)溶解在5mL DMF中，搅拌10min后，加入化合物A(38.5mg,0.1mmol),冰浴下加入N-甲基吗啡啉(0.009mL,0.08mmol)搅拌10min,加入EDCl(24.8mg,0.1mmol)，保持0℃搅拌1.5h,至室温反应12h。乙酸乙酯萃取，再用饱和食盐水洗涤有机相，浓缩柱层析(二氯甲烷：甲醇＝40：1)，得到19mg白色固体化合物6a，产率为34％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.78(d,J＝8.6Hz,1H),8.09(q,J＝4.5Hz,1H),7.76(d,J＝7.2Hz,2H),7.57(s,1H),7.47–7.20(m,10H),7.13-7.11(m,2H),5.73–5.56(m,2H),4.63(ddd,J＝10.4,8.6,4.4Hz,1H),3.11(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.92(dd,J＝13.6,10.6Hz,1H),2.63(d,J＝4.6Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.8,159.0,148.9,141.0,137.7,136.4,132.4,132.0,130.2,129.2,128.9,128.4,128.2,128.0,127.3,125.0,121.4,104.9,54.2,53.7,36.9,25.7.
实施例2
Figure BDA0003409670020000081
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-邻甲基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-邻甲基苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-邻甲基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共75％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.44(d,J＝7.3Hz,1H),7.28–7.18(m,3H),6.92(s,1H),4.28(q,J＝7.1Hz,2H),2.40(s,3H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-邻甲基苯甲基吡唑-1-甲酸酯的制备方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为73％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.60–7.56(m,1H),7.36–7.20(m,8H),7.17(s,1H),5.77(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),2.44(s,3H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-邻甲基苯甲基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为85％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-邻甲基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备方法同实施例1步骤五，得到白色固体6b，产率为29％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.91(dd,J＝34.6,8.7Hz,1H),8.19–8.16(m,1H),7.57–7.45(m,2H),7.37–7.17(m,10H),7.12(d,J＝6.8Hz,2H),5.77–5.60(m,2H),4.63(td,J＝10.8,10.1,6.5Hz,1H),3.11(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),,2.94(t,J＝12.2Hz,1H),2.62(d,J＝4.5Hz,3H),2.47(s,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.9,159.1,149.2,141.1,137.8,135.4,135.2,132.0,132.0,131.0,130.2,129.2,128.5,128.3,128.3,127.8,127.4,127.3,126.0,121.4,107.8,54.20,53.6,36.9，25.7,21.2.
实施例3
Figure BDA0003409670020000091
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-间甲基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-间甲基苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-间甲基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共76％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.54–7.50(m,2H),7.27(t,J＝7.6Hz,1H),7.15–7.13(m,1H),7.02(s,1H),4.25(q,J＝7.1Hz,2H),2.35(s,3H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-间甲基苯基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为76％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.72(s,1H),7.66(d,J＝7.9Hz,1H),7.40(s,1H),7.35–7.23(m,4H),7.20–7.13(m,3H),5.76(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),2.34(s,3H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-间甲基苯基苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为84％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-间甲基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6c，产率为32％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.84(d,J＝8.7Hz,1H),8.17(d,J＝4.6Hz,1H),7.59–7.54(m,3H),7.45(s,1H),7.39–7.09(m,10H),5.73–5.55(m,2H),4.63(ddd,J＝10.6,8.6,4.3Hz,1H),3.12(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.95(dd,J＝13.6,10.7Hz,1H),2.62(d,J＝4.5Hz,3H),2.35(s,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.9,159.0,149.0,141.1,138.0,137.7,136.3,132.3,132.0,130.2,129.2,128.8,128.6,128.4,128.3,127.3,125.5,122.2,121.4,105.1,54.2,53.6,36.9,25.7,21.1.
实施例4
Figure BDA0003409670020000101
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对甲基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-对甲苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-对甲基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共80％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.58(d,J＝8.1Hz,2H),7.18(d,J＝8.0Hz,2H),6.96(s,1H),4.22(q,J＝7.1Hz,2H),2.35(s,3H),1.23(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-对甲基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为76％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.76(d,J＝8.1Hz,2H),7.37–7.18(m,8H),5.75(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),2.31(s,3H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-对甲基苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为86％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对甲苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6d，产率为34％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.78(d,J＝8.6Hz,1H),8.10(d,J＝4.6Hz,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,2H),7.57(s,1H),7.37(d,J＝10.3Hz,2H),7.31–7.18(m,7H),7.11(d,J＝6.7Hz,2H),5.71–5.55(m,2H),4.63(ddd,J＝10.7,8.6,4.3Hz,1H),3.11(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.93(dd,J＝13.6,10.7Hz,1H),2.63(d,J＝4.5Hz,3H),2.32(s,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.9,159.1,149.0,141.1,137.8,137.3,136.4,132.0,130.3,129.7,129.5,129.2,128.4,128.3,127.4,125.0,121.4,104.7,54.2,53.6,36.9,25.7,20.8.
实施例5
Figure BDA0003409670020000111
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对甲氧基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-对甲氧基苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-对甲氧基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共80％。
步骤三：N-2苄基-4-对甲氧基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为75％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.83–7.77(m,2H),7.35–7.23(m,4H),7.29–7.17(m,2H),7.00–6.95(m,2H),5.74(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),3.78(s,3H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-对甲氧基苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为85％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对甲氧基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6e，产率为32％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.75(d,J＝8.6Hz,1H),8.09(d,J＝4.7Hz,1H),7.68(d,J＝8.8Hz,2H),7.57(s,1H),7.38(d,J＝7.9Hz,1H),7.29–7.19(m,6H),7.11–7.10(m,2H),7.01(d,J＝8.9Hz,2H),5.70–5.54(m,2H),4.62(ddd,J＝10.6,8.5,4.4Hz,1H),3.78(s,1H),3.10(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.92(dd,J＝13.6,10.6Hz,1H),2.62(d,J＝4.5Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ170.9,159.1,159.1,148.8,141.0,137.8,136.3,132.0,130.3,129.2,128.4,128.2,127.3,127.3,126.3,125.1,121.4,114.3,104.4,55.2,54.1,53.5,36.9,25.7.
实施例6
Figure BDA0003409670020000121
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对氟苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-对氟苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-对氟苯基吡唑-1-甲酸酯的制备方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共80％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.71–7.65(m,2H),7.10–7.02(m,2H),6.92(s,1H),4.23(q,J＝7.1Hz,2H),1.24(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-对氟苯基吡唑-1-甲酸酯的制备方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为77％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.96–7.90(m,2H),7.43(s,1H),7.36–7.18(m,7H),5.76(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-对氟苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为84％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对氟苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6f，产率为33％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.78(d,J＝8.6Hz,1H),8.10(d,J＝4.6Hz,1H),7.78(dd,J＝8.7,5.6Hz,2H),7.56(s,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),7.30–7.19(m,7H),7.12–7.01(m,2H),5.71–5.55(m,2H),4.63(ddd,J＝10.6,8.6,4.4Hz,1H),3.10(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.91(dd,J＝13.6,10.6Hz,1H),2.63(d,J＝4.5Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ171.3,159.4,148.5,141.5,138.1,137.0,132.4,130.7,129.7,129.5,129.4,128.8,128.7,127.8,127.5,127.4,121.8,116.4,116.1,105.3,54.6,54.1,37.4,26.1.
实施例7
Figure BDA0003409670020000141
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-间氟苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-间氟苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-间氟苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共78％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.54–7.46(m,2H),7.36(td,J＝8.0,5.9Hz,1H),7.05–7.00(m,2H),4.32(q,J＝7.1Hz,2H),1.32(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-间氟苯基吡唑-1-甲酸酯的制备方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为78％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.76–7.67(m,2H),7.53(s,1H),7.46(td,J＝8.0,6.1Hz,1H),7.36–7.14(m,6H),5.77(s,2H),4.30(q,J＝7.1Hz,2H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-间氟苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为83％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-间氟苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6g，产率为33％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.78(d,J＝8.6Hz,1H),8.10(d,J＝4.8Hz,1H),7.65(d,J＝7.9Hz,2H),7.57(s,1H),7.38–7.18(m,9H),7.11(d,J＝6.2Hz,2H),5.71–5.54(m,2H),4.63(ddd,J＝10.7,8.6,4.3Hz,1H),3.11(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.93(dd,J＝13.6,10.7Hz,1H),2.63(d,J＝4.5Hz,3H),2.32(s,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ170.8,164.2,161.0,158.9,147.9,147.7,141.0,137.5,136.7,134.9,134.8,132.0,131.1,131.0,130.3,129.2,128.4,128.3,127.4,127.4,121.4,121.1,114.9,114.6,111.6,111.3,105.4,54.2,53.8,37.0,25.7.
实施例8
Figure BDA0003409670020000151
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-邻氟苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-(2-氟苯基)丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-邻氟苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共76％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.85(t,J＝7.7Hz,1H),7.35-7.27(m,1H),7.20–7.11(m,3H),4.34(q,J＝7.1Hz,2H),1.33(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-邻氟苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为77％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.98(td,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.41(q,J＝6.3,5.4Hz,1H),7.35–7.20(m,8H),5.79(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-邻氟苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为80％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-邻氟苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6h，产率为23％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.93(d,J＝8.6Hz,1H),8.11(d,J＝4.8Hz,1H),7.94(t,J＝6.9Hz,1H),7.56(s,1H),7.45–7.17(m,10H),7.12(d,J＝6.4Hz,2H),5.77–5.61(m,2H),4.64(td,J＝9.4,8.6,4.4Hz,1H),3.10(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.95(t,J＝12.2Hz,1H),2.63(d,J＝4.5Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.9,160.9,158.9,157.6,143.4,141.1,137.6,136.1,131.9,130.2,129.9,129.8,129.8,129.2,128.4,128.2,127.9,127.4,124.8,121.4,120.1,120.0,116.4,116.2,108.2,108.0,54.2,53.8,36.7,25.7.
实施例9
Figure BDA0003409670020000161
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对氯苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-对氯苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-对氯苯基吡唑-1-甲酸酯的制备方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共78％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.67(d,J＝8.5Hz,2H),7.36(d,J＝8.6Hz,2H),7.00(s,1H),4.30(q,J＝7.1Hz,2H),1.31(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-对氯苯基吡唑-1-甲酸酯的制备方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为78％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.90(d,J＝8.6Hz,2H),7.50–7.43(m,3H),7.34–7.24(m,3H),7.19(d,J＝7.0Hz,2H),5.76(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-对氯苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为85％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对氯苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备方法同实施例1步骤五，得到白色固体6i，产率为34％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.80(d,J＝8.6Hz,1H),8.10(q,J＝4.1Hz,1H),7.78–7.76(m,2H),7.57(s,1H),7.52–7.49(m,2H),7.41–7.36(m,2H),7.31–7.18(m,5H),7.12(dd,J＝7.9,2.1Hz,2H),5.73–5.55(m,2H),4.64(ddd,J＝10.5,8.5,4.4Hz,1H),3.11(dd,J＝13.7,4.4Hz,1H),2.92(dd,J＝13.5,10.7Hz,1H),2.63(d,J＝4.6Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ170.8,158.9,147.8,141.0,137.5,136.6,132.5,132.0,131.3,130.3,129.2,129.0,128.4,128.2,127.4,126.7,121.4,105.1,54.9,54.2,53.7,36.9,25.7.
实施例10
Figure BDA0003409670020000171
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-间氯苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-间氯苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-间氯苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共75％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.78(s,1H),7.65(dt,J＝6.8,1.8Hz,1H),7.36–7.28(m,2H),7.07(s,1H),4.35(q,J＝7.1Hz,2H),1.35(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-间氯苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为76％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.94(t,J＝1.7Hz,1H),7.85(dt,J＝7.5,1.5Hz,1H),7.54(s,1H),7.47–7.38(m,2H),7.36–7.24(m,3H),7.21–7.18(m,2H),5.77(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-间氯苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为83％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-间氯苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6j，产率为32％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.78(d,J＝8.7Hz,1H),8.12(d,J＝4.7Hz,1H),7.77(t,J＝1.8Hz,1H),7.71(d,J＝7.6Hz,1H),7.57(s,1H),7.51–7.46(m,2H),7.42–7.36(m,2H),7.31–7.18(m,5H),7.12(dd,J＝7.6,1.9Hz,2H),5.73–5.56(m,2H),4.64(ddd,J＝10.4,8.6,4.4Hz,1H),3.11(dd,J＝13.6,4.5Hz,1H),2.92(dd,J＝13.6,10.6Hz,1H),2.63(d,J＝4.5Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ170.8,158.8,147.5,141.0,137.5,136.7,134.5,133.7,132.0,131.0,130.2,129.2,128.4,128.3,127.8,127.4,124.5,123.5,121.4,105.4,54.2,53.8,37.0,25.7.
实施例11
Figure BDA0003409670020000191
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对溴苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-对溴苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-对溴苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共80％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.60(d,J＝8.6Hz,2H),7.52–7.49(m,2H),7.00(s,1H),4.30(q,J＝7.1Hz,2H),1.30(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-对溴苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为79％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.86–7.81(m,2H),7.63–7.58(m,2H),7.47(s,1H),7.36–7.23(m,3H),7.21–7.18(m,2H),5.76(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-对溴苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为84％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对溴苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6k，产率为33％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.84(d,J＝8.6Hz,1H),8.14(d,J＝4.5Hz,1H),7.72–7.63(m,4H),7.57(s,1H),7.44(s,1H),7.37(d,J＝7.9Hz,1H),7.32–7.17(m,5H),7.13–7.10(m,2H),5.72–5.54(m,2H),4.63(td,J＝9.5,8.6,4.3Hz,1H),3.11(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.97–2.88(m,1H),2.62(d,J＝4.5Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ170.8,158.9,147.8,141.0,137.5,136.6,132.0,131.9,131.6,130.2,129.2,128.4,128.2,127.4,127.0,121.4,121.0,105.1,54.2,53.7,36.9,25.7.
实施例12
Figure BDA0003409670020000201
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-间溴苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-间溴苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-间溴苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共79％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.98(t,J＝1.7Hz,1H),7.73–7.70(m,1H),7.48(ddd,J＝8.0,2.0,1.0Hz,1H),7.30(d,J＝8.13Hz,1H),7.10(s,1H),4.38(q,J＝7.1Hz,2H),1.37(t,J＝7.2Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-间溴苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为79％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.08(t,J＝1.7Hz,1H),7.89(m,J＝7.9Hz,1H),7.53-7.51(m,2H),7.40–7.26(m,4H),7.21–7.19(m,2H),5.76(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-间溴苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为80％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-间溴苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6l，产率为32％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.84(d,J＝8.7Hz,1H),8.18(d,J＝4.6Hz,1H),7.91(t,J＝1.6Hz,1H),7.75(d,J＝7.8Hz,1H),7.58–7.52(m,3H),7.44–7.36(m,2H),7.32–7.2(m,5H),7.11(dd,J＝7.5,1.8Hz,2H),5.73–5.56(m,2H),4.64(ddd,J＝10.6,8.6,4.4Hz,1H),3.12(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.94(dd,J＝13.6,10.6Hz,1H),2.63(d,J＝4.5Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.8,158.8,147.4,141.0,137.5,136.6,134.7,132.0,131.2,130.7,130.3,129.2,128.4,128.3,127.4,123.9,122.3,1214,105.5,54.2,53.8,37.0,25.7.
实施例13
Figure BDA0003409670020000211
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-邻溴苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-邻溴苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-邻溴苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共79％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.66(dd,J＝8.0,1.3Hz,1H),7.59(dd,J＝7.7,1.8Hz,1H),7.36(td,J＝7.6,1.3Hz,1H),7.26–7.20(m,2H),4.40(q,J＝7.1Hz,2H),1.39(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-邻溴苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为79％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.72(td,J＝7.8,1.5Hz,2H),7.45(td,J＝7.5,1.3Hz,1H),7.35–7.22(m,7H),5.78(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-邻溴苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为77％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-邻溴苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6m，产率为30％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.91(d,J＝8.6Hz,1H),8.14(q,J＝4.5Hz,1H),7.74(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.66(dd,J＝7.7,1.8Hz,1H),7.56(s,1H),7.48–7.42(m,2H),7.38–7.19(m,7H),7.17–7.12(m,2H),5.75–5.57(m,2H),4.62(ddd,J＝10.6,8.4,4.4Hz,1H),3.09(dd,J＝13.5,4.4Hz,1H),2.94(dd,J＝13.6,10.7Hz,1H),2.62(d,J＝4.6Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.9,158.9,148.0,141.1,137.6,135.4,133.5,133.4,132.0,131.0,130.2,129.9,129.2,128.4,128.3,127.9,127.4,127.4,121.4,121.0,108.5,54.3,53.8,36.8,25.6.
实施例14
Figure BDA0003409670020000221
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对硝基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-对硝基苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-对硝基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共84％。
步骤三：N-2苄基-4-对硝基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为82％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.27(d,J＝8.8Hz,2H),8.16(d,J＝8.7Hz,2H),7.66(s,1H),7.31(ddd,J＝12.6,7.8,5.9Hz,3H),7.21(dd,J＝6.6,1.7Hz,2H),5.80(s,2H),4.31(q,J＝7.1Hz,2H),1.29(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-对硝基苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为70％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对硝基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6n，产率为33％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.78(d,J＝8.6Hz,1H),8.12(d,J＝4.7Hz,1H),7.69(d,J＝8.8Hz,2H),7.57(s,1H),7.39–7.18(m,7H),7.11(dd,J＝7.6,1.9Hz,2H),7.01(d,J＝8.8Hz,2H),5.71–5.53(m,2H),4.63(ddd,J＝10.5,8.5,4.3Hz,1H),3.78(s,3H),3.11(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.93(dd,J＝13.6,10.6Hz,1H),2.63(d,J＝4.5Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ171.0,159.2,148.9,141.1,137.8,136.4,136.3,132.0,130.3,129.3,128.4,128.3,127.4,126.4,125.1,121.4,114.3,104.4,55.2,53.6,36.9,25.7.
实施例15
Figure BDA0003409670020000241
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-间硝基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-间硝基基苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-间硝基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共82％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.65(t,J＝2.0Hz,1H),8.20–8.17(m,2H),7.60(t,J＝8.0Hz,1H),7.22(s,1H),4.44(q,J＝7.1Hz,2H),1.42(d,J＝14.3Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-间硝基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为82％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.66(s,1H),8.34(d,J＝7.7Hz,1H),8.19(dd,J＝8.0,2.4Hz,1H),7.75–7.68(m,2H),7.34-7.27(m,3H),7.21(d,J＝6.8Hz,2H),5.80(s,2H),4.31(q,J＝7.1Hz,2H),1.29(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-间硝基苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为75％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-间硝基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6o，产率为32％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.87(d,J＝8.7Hz,1H),8.52(t,J＝2.0Hz,1H),8.2–8.13(m,3H),7.75(t,J＝8.0Hz,1H),7.64(s,1H),7.57(d,J＝1.8Hz,1H),7.39–7.36(m,1H),7.32–7.18(m,5H),7.12(dd,J＝7.7,1.9Hz,2H),5.78–5.59(m,2H),4.65(ddd,J＝10.5,8.7,4.4Hz,1H),3.12(dd,J＝13.6,4.5Hz,1H),2.93(dd,J＝13.6,10.5Hz,1H),2.63(d,J＝4.5Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.8,158.7,148.3,146.9,140.9,137.4,136.9,134.0,132.0,131.1,130.7,130.3,129.2,128.4,128.3,127.5,127.4,122.6,121.4,119.2,105.7,54.2,53.9,37.0,25.7.
实施例16
Figure BDA0003409670020000251
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-邻硝基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-邻硝基苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-邻硝基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共80％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.79(dd,J＝8.0,1.3Hz,1H),7.73(dd,J＝7.7,1.5Hz,1H),7.64(td,J＝7.6,1.3Hz,1H),7.51(td,J＝7.8,1.5Hz,1H),6.98(s,1H),4.41(q,J＝7.1Hz,2H),1.40(t,J＝7.2Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-邻硝基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为78％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.87(ddd,J＝19.4,7.9,1.4Hz,1H),7.67(dtd,J＝45.2,7.6,1.4Hz,1H),7.35–7.25(m,2H),7.18–7.16(m,1H),5.71(s,1H),4.28(q,J＝7.1Hz,1H),1.26(t,J＝7.1Hz,2H).
步骤四：N-2苄基-4-邻硝基苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为75％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-邻硝基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6p，产率为32％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.89(d,J＝8.6Hz,1H),8.12(d,J＝4.7Hz,1H),7.88(d,J＝7.9Hz,1H),7.78-7.72(m,2H),7.64–7.54(m,2H),7.37(d,J＝7.9Hz,1H),7.30–7.17(m,6H),7.10–7.07(m,2H),5.61(q,J＝14.7Hz,2H),4.62(dt,J＝13.2,4.6Hz,1H),3.09(dd,J＝13.6,4.5Hz,1H),2.95-2.87(m,1H),2.62(d,J＝4.6Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.8,158.6,148.6,144.7,141.0,137.3,136.3,132.5,131.9,130.2,130.1,129.4,129.2,128.3,128.2,127.4,127.4,125.5,123.8,121.4,107.0,54.2,53.9,36.8,25.6.
实施例17
Figure BDA0003409670020000261
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对氰基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-对氰基苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-对氰基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共83％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ7.96–7.93(m,2H),7.74–7.71(m,2H),7.20(s,1H),4.44(q,J＝7.1Hz,2H),1.43(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-对氰基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为83％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.09(d,J＝8.0Hz,2H),7.88(d,J＝8.0Hz,2H),7.63(s,1H),7.35-7.19(m,3H),7.20(d,J＝7.5Hz,2H),5.79(s,2H),4.31(q,J＝7.1Hz,2H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-对氰基苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为82％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-对氰基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6q，产率为34％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.84(d,J＝8.6Hz,1H),8.11(d,J＝4.7Hz,1H),7.95–7.89(m,4H),7.56(s,1H),7.52(s,1H),7.37(d,J＝7.8,2.1Hz,1H),7.31–7.18(m,5H),7.12(dd,J＝7.6,2.0Hz,2H),5.74–5.57(m,2H),4.65(dq,J＝10.5,4.5Hz,1H),3.11(dd,J＝13.6,4.5Hz,1H),2.91(dd,J＝13.6,10.6Hz,1H),2.63(d,J＝4.6Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.8,158.8,147.2,140.9,137.3,136.9,136.7,133.0,132.0,130.3,129.2,128.4,128.3,127.5,127.4,125.6,121.4,118.8,110.2,105.9,54.2,53.9,37.0,25.7.
实施例18
Figure BDA0003409670020000281
(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-间氰基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-间氰基苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-间氰基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二，得到乳白色固体，两步产率共83％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.26–8.18(m,2H),7.87(d,J＝7.7Hz,1H),7.65(t,J＝7.8Hz,1H),7.04(s,1H),4.40(q,J＝7.2Hz,2H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H).
步骤三：N-2苄基-4-间氰基苯基吡唑-1-甲酸酯的制备方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为82％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.34(d,J＝1.7Hz,1H),8.23(dd,J＝7.9,1.5Hz,1H),7.82–7.80(m,1H),7.69-7.61(m,2H),7.36-7.27(m,3H),7.22–7.20(m,2H),5.78(s,2H),4.31(q,J＝7.1Hz,2H),1.29(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2苄基-4-间氰基苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为82％。
步骤五：(S)-1-苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-间氰基苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6r，产率为32％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.79(d,J＝8.6Hz,1H),8.13–8.06(m,3H),7.81(d,J＝7.7Hz,1H),7.66(t,J＝7.8Hz,1H),7.53(d,J＝17.1Hz,2H),7.39–7.11(m,8H),5.73–5.56(m,2H),4.65(dq,J＝8.7,4.6Hz,1H),3.11(dd,J＝13.6,4.5Hz,1H),2.95-2.87(m,1H),2.63(d,J＝4.2Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.8,158.8,147.0,140.9,137.4,136.9,133.6,132.0,131.5,130.3,130.3,129.5,129.3,128.4,128.3,127.4,121.4,118.6,112.1,105.5,54.2,53.9,37.0,25.7.
实施例19
Figure BDA0003409670020000291
(S)-1-对甲基苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二。
步骤三：N-2对甲基苄基-4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为84％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.89–7.86(m,2H),7.45–7.39(m,3H),7.36–7.30(m,1H),7.14–7.08(m,4H),5.71(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),2.24(s,3H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2对甲基苄基-4-苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为80％。
步骤五：(S)-1-对甲基苄基-3-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6s，产率为32％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.77(d,J＝8.6Hz,1H),8.10(d,J＝4.7Hz,1H),7.76(d,J＝7.1Hz,2H),7.57(s,1H),7.46–7.29(m,6H),7.21(t,J＝7.7Hz,1H),7.05(dd,J＝9.6,4.6Hz,4H),5.67–5.50(m,2H),4.67–4.59(m,1H),3.11(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.92(dd,J＝13.6,10.6Hz,1H),2.63(d,J＝4.4Hz,3H),2.23(s,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.9,159.1,148.8,141.0,136.5,136.3,134.7,132.4,132.0,130.3,129.2,128.9,128.2,128.0,127.4,125.0,121.4,104.9,54.2,53.4,36.91,25.7,20.7.
实施例20
Figure BDA0003409670020000301
(S)-1-间甲基苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二。
步骤三：N-2间甲基苄基-4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为81％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.88(d,J＝7.4Hz,2H),7.43-7.34(m,4H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),7.09–6.95(m,3H),5.72(s,2H),4.30(q,J＝7.1Hz,2H),2.25(s,3H),1.28(t,J＝7.0Hz,3H).
步骤四：N-2间甲基苄基-4-苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为80％。
步骤五：(S)-1-间甲基苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6t，产率为32％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.79(d,J＝8.6Hz,1H),8.10(d,J＝4.7Hz,1H),7.78–7.75(m,2H),7.58(s,1H),7.47–7.30(m,6H),7.23–7.11(m,2H),7.04(d,J＝7.5Hz,1H),6.96(s,1H),6.89(d,J＝7.6Hz,1H),5.66–5.54(m,2H),4.62(ddd,J＝10.5,8.5,4.4Hz,1H),3.10(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.93(dd,J＝13.6,10.6Hz,1H),2.63(d,J＝4.5Hz,3H),2.22(s,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.9,159.1,148.8,141.1,137.6,137.5,136.5,132.4,132.0,130.2,129.2,128.9,128.3,128.2,128.0,127.9,125.0,124.5,121.4,104.9,54.2,53.6,36.9,25.6,21.0.
实施例21
Figure BDA0003409670020000311
(S)-1-邻甲基苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二。
步骤三：N-2邻甲基苄基-4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为79％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.89–7.86(m,2H),7.46–7.31(m,4H),7.21-7.04(m,3H),6.54(d,J＝7.4Hz,1H),5.76(s,2H),4.25(q,J＝7.1Hz,2H),2.37(s,3H),1.23(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2邻甲基苄基-4-苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为80％。
步骤五：(S)-1-邻甲基苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6u，产率为31％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.78(d,J＝8.6Hz,1H),8.08(d,J＝4.7Hz,1H),7.76(d,J＝7.1Hz,2H),7.56(s,1H),7.44(t,J＝7.1Hz,3H),7.38–7.27(m,3H),7.22–7.09(m,3H),7.02(t,J＝7.2Hz,1H),6.56(d,J＝7.6Hz,1H),5.65(q,J＝15.4Hz,2H),4.60(td,J＝9.4,8.6,4.4Hz,1H),3.09(dd,J＝13.6,4.5Hz,1H),2.91(dd,J＝13.6,10.5Hz,1H),2.62(d,J＝4.2Hz,3H),2.31(s,3H).13CNMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.9,159.0,148.8,141.0,136.8,136.3,135.1,132.4,132.0,130.2,129.9,129.2,128.9,128.2,128.0,127.1,126.5,125.9,124.9,121.4,104.9,54.2,51.5,36.9,25.6,18.8.
实施例22
Figure BDA0003409670020000321
(S)-1-对溴苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二。
步骤三：N-2对溴苄基-4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为82％。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.88(d,J＝7.3Hz,2H),7.53(d,J＝8.3Hz,2H),7.42(t,J＝7.4Hz,3H),7.34(t,J＝7.2Hz,1H),7.15(d,J＝8.2Hz,2H),5.73(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2对溴苄基-4-苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为85％。
步骤五：(S)-1-对溴苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6v，产率为33％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.85(d,J＝8.6Hz,1H),8.13(d,J＝4.7Hz,1H),7.77(d,J＝7.0Hz,2H),7.56(s,1H),7.48–7.17(m,10H),7.09(d,J＝7.7Hz,1H),5.74–5.53(m,2H),4.62(ddd,J＝10.6,8.6,4.4Hz,1H),3.12(dd,J＝13.6,4.5Hz,1H),2.93(dd,J＝13.6,10.6Hz,1H),2.63(d,J＝4.5Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.8,158.9,149.1,141.0,140.4,136.5,132.3,132.0,130.6,130.3,130.2,130.0,129.2,129.0,128.2,128.1,126.4,125.0,121.6,121.4,105.1,54.2,53.1,36.9,25.7.
实施例23
Figure BDA0003409670020000341
(S)-1-间溴苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二。
步骤三：N-2间溴苄基-4-取代苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为82％。
步骤四：N-2间溴苄基-4-取代苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为83％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.89–7.86(m,2H),7.49–7.27(m,7H),7.16(d,J＝7.8Hz,1H),5.76(s,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤五：(S)-1-间溴苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6w，产率为31％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.85(d,J＝8.6Hz,1H),8.13(d,J＝4.7Hz,1H),7.77(d,J＝7.0Hz,2H),7.56(s,1H),7.48–7.17(m,10H),7.09(d,J＝7.7Hz,1H),5.74–5.53(m,2H),4.62(ddd,J＝10.6,8.6,4.4Hz,1H),3.12(dd,J＝13.6,4.5Hz,1H),2.93(dd,J＝13.6,10.6Hz,1H),2.63(d,J＝4.5Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.8,158.9,149.1,141.0,140.4,136.5,132.3,132.0,130.6,130.3,130.2,130.0,129.2,129.0,128.2,128.1,126.4,125.0,121.6,121.4,105.1,54.2,53.1,36.9,25.7.
实施例24
Figure BDA0003409670020000351
(S)-1-邻溴苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二。
步骤三：N-2邻溴苄基-4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为82％。
步骤四：N-2邻溴苄基-4-苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为83％。
步骤五：(S)-1-邻溴溴苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6x，产率为31％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.87(d,J＝8.7Hz,1H),8.13(d,J＝4.7Hz,1H),7.78–7.76(m,2H),7.61(dd,J＝7.3,1.9Hz,1H),7.55(s,2H),7.45(t,J＝7.4Hz,2H),7.37–7.16(m,6H),6.45(dd,J＝7.1,2.2Hz,1H),5.69(q,J＝16.0Hz,2H),4.58(ddd,J＝10.5,8.6,4.4Hz,1H),3.10(dd,J＝13.5,4.5Hz,1H),2.93(dd,J＝13.6,10.6Hz,1H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.8,158.7,149.3,141.0,137.1,137.1,132.4,132.3,132.0,130.2,129.2,129.1,128.9,128.2,128.1,127.9,127.8,125.0,121.4,121.3,105.0,54.9,54.2,36.9,25.6.
实施例25
Figure BDA0003409670020000361
(S)-1-对硝基苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二。
步骤三：N-2对硝基苄基-4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为82％。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.16(d,J＝8.7Hz,2H),7.84(d,J＝7.3Hz,2H),7.45–7.33(m,5H),7.21(s,1H),5.89(s,2H),4.32(q,J＝7.1Hz,2H),1.36(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2对硝基苄基-4-苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为85％。
步骤五：(S)-1-对硝基苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6y，产率为33％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.83(d,J＝8.7Hz,1H),8.09–8.06(m,2H),7.78–7.76(m,2H),7.62–7.43(m,6H),7.36(t,J＝7.3Hz,2H),7.26(d,J＝7.7Hz,1H),7.17(t,J＝7.7Hz,1H),6.65–6.62(m,1H),6.07–5.89(m,2H),4.55(ddd,J＝10.4,8.6,4.5Hz,1H),3.09(dd,J＝13.6,4.5Hz,1H),2.90(dd,J＝13.6,10.5Hz,1H),2.60(d,J＝4.5Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.7,158.6,149.4,147.3,140.9,136.9,134.1,133.3,132.3,132.0 130.2,129.2,129.0,128.6,128.2,125.1,124.7,121.3,105.2,54.1,51.4,36.9,25.6.
实施例26
Figure BDA0003409670020000371
(S)-1-间硝基苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
步骤一：2,4-二氧代-4-苯基丁酸乙酯的制备
方法同实施例1步骤一。
步骤二：4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤二。
步骤三：N-2间硝基苄基-4-苯基吡唑-1-甲酸酯的制备
方法同实施例1步骤三，得到白色固体，产率为82％。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ8.19(d,J＝1.6Hz,1H),8.13(d,J＝8.2Hz,1H),7.85–7.82(m,2H),7.62(d,J＝7.8Hz,1H),7.51–7.32(m,4H),7.21(s,1H),5.89(s,2H),4.34(q,J＝7.1Hz,2H),1.37(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤四：N-2间硝基苄基-4-苯基吡唑-1-羧酸的制备
方法同实施例1步骤四，得到白色固体，产率为82％。
步骤五：(S)-1-间硝基苄基-N-[3-(3-溴苯基)-1-酰化甲氨基-2-基]-3-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺的制备
方法同实施例1步骤五，得到白色固体6z，产率为33％。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.85(d,J＝8.7Hz,1H),8.14-8.10(m,2H),8.02(d,J＝1.6Hz,1H),7.80–7.77(m,2H),7.61–7.52(m,3H),7.48–7.43(m,3H),7.38–7.27(m,3H),7.18(t,J＝7.7Hz,1H),5.85–5.69(m,2H),4.65–4.57(m,1H),3.10(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.91(dd,J＝13.6,10.7Hz,1H),2.62(d,J＝4.5Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6):δ170.8,158.9,149.3,147.7,141.0,139.9,136.6,134.0,132.2,132.0,130.2,130.0,129.2,129.0,128.2,125.1,122.4,122.0,121.4,105.2,54.2,53.1,36.9,25.6.
抗癌活性的应用
以H460(大细胞肺癌)、MCF-7(乳腺癌细胞)、A549(非小细胞肺癌细胞)3种癌细胞为测试细胞株，五氟尿嘧啶作为阳性对照，取对数生长期的癌细胞，100ul/孔接种于96孔板中，待长到70％-80％/孔(指细胞融合度达到70％-80％)，以50μM进行药物干预72h，每组进行3次平行测试，结果见表1。
表1.新化合物的抗癌活性测试结果
Figure BDA0003409670020000381
Figure BDA0003409670020000391
测试结果表明，新化合物对MCF-7基本没有抑制率，对H460，A549均表现出抑制率，但存在明显的选择性。对H460和A549的抑制活性而言，吡唑3位苯环上有取代基的新化合物比N-1位苄基上有取代基的新化合物具有更好的抑制活性。
筛选出较高抑制率的新衍生物选取H460(大细胞肺癌)、A549(非小细胞肺癌细胞)两种癌细胞为测试细胞株，运用MTT法对所合成的吡唑环衍生物进行体外抗癌活性测试，以五氟尿嘧啶作为阳性对照。取对数生长期的癌细胞，离心后用RPMI1640或DMEM的培养液稀释，100uL/孔，接种于96孔板中。37℃培养过夜，然后加入不同浓度的样品，再孵育72h，加入10.0uL的MTT溶液(5mg·mL-1)，于37℃孵化4h后，每孔加入100uLDMSO(溶解紫色甲臜晶体)。10分钟后，先震荡一会，后将孔板置于自动微孔板分光光度计上，在570nm测定吸收度值，并用Bliss法计算半数有效抑制浓度(IC50)(表2)每组样品进行3次平行测试。
表2.化合物IC50值
Figure BDA0003409670020000401
从表2结果看出，新化合物6b(R1＝2-Me,R2＝H),6e(R1＝4-OMe,R2＝H),6g(R1＝3-F,R2＝H),6h(R1＝2-F,R2＝H),6j(R1＝3-Cl,R2＝H)和6n(R1＝4-NO2,R2＝H)对H460和A549的细胞增殖具有比较强的抑制作用，特别是6j和6n，其对两种癌细胞的增殖都有显著的抑制活性(IC50值在12-16μM之间)。该结果表明，吡唑3位苯环上有吸电子取代基(例如，NO2，F和Cl等)的新化合物具有更好的抗肿瘤细胞增殖的活性。

Claims (4)

1.一种吡唑环衍生物，其特征在于，所述吡唑环衍生物的结构如式1所示：
Figure FDA0003409670010000011
2.一种如权利要求1所述的吡唑环衍生物在制备抗肿瘤药物方面的应用。
3.如权利要求2所述的吡唑环衍生物的应用，其特征在于：所述的吡唑环衍生物的结构式为：
Figure FDA0003409670010000012
R1＝CH3，OCH3，H，F，Cl，NO2中的一种；R2＝H或Br。
4.如权利要求3所述的吡唑环衍生物的应用，其特征在于：所述的吡唑环衍生物为以下结构式中的一种：
Figure FDA0003409670010000021
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023165168A1 (zh) * 2022-10-27 2023-09-07 常州大学 吡唑类衍生物作为β2肾上腺素受体别构调节剂,拮抗剂和激动剂的应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012038904A1 (fr) * 2010-09-24 2012-03-29 Sanofi Derives de nicotinamide, leur preparation et leur application en therapeutique
CN103787976A (zh) * 2014-02-25 2014-05-14 山东大学 1-芳基-3-芳基-1h-吡唑-5-甲羟肟酸类衍生物及其应用
CN104546843A (zh) * 2015-01-28 2015-04-29 山东大学齐鲁医院 一种吡唑酰腙衍生物在制备抗乳腺癌药物中的应用
CN104606191A (zh) * 2015-01-28 2015-05-13 山东大学齐鲁医院 碳酰肼在制备抗脑癌药物中的应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012038904A1 (fr) * 2010-09-24 2012-03-29 Sanofi Derives de nicotinamide, leur preparation et leur application en therapeutique
CN103787976A (zh) * 2014-02-25 2014-05-14 山东大学 1-芳基-3-芳基-1h-吡唑-5-甲羟肟酸类衍生物及其应用
CN104546843A (zh) * 2015-01-28 2015-04-29 山东大学齐鲁医院 一种吡唑酰腙衍生物在制备抗乳腺癌药物中的应用
CN104606191A (zh) * 2015-01-28 2015-05-13 山东大学齐鲁医院 碳酰肼在制备抗脑癌药物中的应用

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023165168A1 (zh) * 2022-10-27 2023-09-07 常州大学 吡唑类衍生物作为β2肾上腺素受体别构调节剂,拮抗剂和激动剂的应用

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