CN114019158A - 联检试纸条和检测试剂盒 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种联检试纸条和检测试剂盒。该联检试纸条包括底板和位于所述底板上的样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫，样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫从底板的一端至另一端顺次连接，包被膜上设置有与不同抗原对应的且相互间隔的质控线和检测线，各抗原对应的检测线较其质控线更靠近样品垫，各检测线上包被有与抗原对应的捕获抗体，各质控线上包被有各自的抗原。上述联检试纸条联检时变异系数小，精密度好。

Description

联检试纸条和检测试剂盒
技术领域
本发明涉及免疫检测技术领域，特别是涉及一种联检试纸条和检测试剂盒。
背景技术
IL-6是一种细胞因子，属于白细胞介素的一种，能够刺激参与免疫反应的细胞增殖、分化并提高其功能。IL-6及其受体与炎症性疾病的有关，它是多功能炎性细胞因子，在炎症反应中起重要作用。在炎症反应中IL-6的升高早于其他细胞因子，因此，IL-6是一般细菌感染或全身性炎症反应引起的SIRS脓毒症早期敏感性的预警指标。PCT在正常人体内的含量非常低，病毒感染及非细菌感染性炎症反应中无明显升高，但在严重细菌性感染、脓毒败血症患者的体内PCT水平会显著升高，是诊断细菌感染或脓毒症非常敏感、特异的血清标志物。PCT检测主要应用于：怀疑感染或不明原因发热患者的鉴别诊断、脓毒血症的诊断、治疗效果监测；呼吸系统感染的鉴别诊断、治疗监测、抗生素使用的管理；手术后是否发生细菌感染的监测；是否由感染引起的发热、白细胞异常的鉴别诊断；自身免疫性疾病与感染的鉴别诊断；放疗、化疗后是否由感染引起的发热的鉴别诊断；新生儿不明原因的发热、疑似感染的鉴别诊断。抗菌药物使用前需对PCT及白介IL-6两项感染血清学指标的检测。
抗菌药物使用前需对降钙素原(PCT)及白介素6(IL-6)两项感染血清学指标的检测。PCT/IL-6联合检测具有以下优势：①IL-6在炎症出现后1h内即开始升高，并诱导PCT和其他急相蛋白逐渐升高，IL-6可填补PCT未升高前的空窗期，从而对感染更早预警；②联合检测可避免单独PCT在新生儿刚出生48h内因生理性升高而掩盖因感染而导致的病理性升高，从而能更早更快提示新生儿刚出生时是否受到感染；③联合检测相对于单独检测，对重度感染和脓毒症的诊断灵敏度和特异性更高；④联合检测可以辅助鉴别诊断革兰氏阳性菌还是革兰氏阴性菌感染，从而更精准指导抗生素使用。因此，PCT/IL-6联合检测具有明确的临床意义和市场需求。
针对这种市场需求，目前已存在多种免疫联检技术，包括串联式免疫试纸条。串联式免疫试纸条是将不同待检物质的检测原料依次制备在同一试纸条上，形成距离结合垫远近不一的检测线。具体地，这类产品主要由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜(NC膜)、吸水垫和底板等组成，其中，结合垫上包被有针对不同待检物质的标记抗体，硝酸纤维素膜中设置有不同待检物质的检测线及一条共用质控线。然而，与单独定量检测相比，目前的联合检测的产品用于定量检测时变异系数大，精密度较低。
发明内容
基于此，有必要提供一种能够改善联合检测时精密度较低问题的联检试纸条。
一种联检试纸条，包括底板和位于所述底板上的样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫，所述结合垫上包被有不同抗原对应的标记抗体，所述包被膜上设置有与不同抗原对应的且相互间隔的质控线和检测线，各所述检测线上包被有与所述抗原对应的捕获抗体，各所述捕获抗体用于捕获各自的抗原与对应的标记抗体形成的复合物，各所述质控线上包被有各自的抗原。
本申请经研究发现，传统的检测试纸条共用质控线，质控线上的信号强度往往不会随检测线上的信号强度变化，而质控线上结合的不同抗原对应的游离标记抗体的信号值并不会随检测线上结合的标记抗体的浓度变化而变化，或者变化微小，这导致检测线信号强度与质控线信号强度的比值变化小而线性范围窄，变异系数大，从而精密度较低。而上述联检试纸条包括多条质控线，各质控线上包被的是各自的抗原，这使得不同抗原拥有各自的特异性质控线，质控线上的信号强度会随游离的标记抗体的浓度变化而明显变化，检测更加灵敏，检测线信号强度与质控线信号强度的比值变化大而线性范围更大，变异系数更小，进而提高联合检测的精密度。
在其中一个实施例中，各所述抗原分别独立地选自C-反应蛋白、血清淀粉样蛋白A、降钙素原、白细胞介素6、尿微量白蛋白、β2-微球蛋白、视黄醇结合蛋白、胱抑素C、人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、D-二聚体、肌钙蛋白I、肌钙蛋白T、N末端脑钠肽、N-末端脑钠肽前体、脑尿钠肽、肌酸激酶同工酶和肌红蛋白中的一种。
在其中一个实施例中，各所述标记抗体均偶联有标记物。
在其中一个实施例中，所述标记物为小分子荧光素、荧光蛋白、荧光染料、稀土离子及其螯合剂、半导体纳米微晶粒、胶体金或胶体银。
在其中一个实施例中，所述联检试纸条用于检测不同的第一抗原和第二抗原，所述结合垫上设置有第一标记抗体和第二标记抗体，所述包被膜上设置有相互间隔的第一检测线、第二检测线、第一质控线和第二质控线，所述第一检测线上包被有与所述第一抗原对应的第一捕获抗体，所述第二检测线上包被有与所述第二抗原对应的第二捕获抗体，所述第一质控线上包被有所述第一抗原，所述第二质控线上包被有所述第二抗原。
在其中一个实施例中，所述第一检测线较所述第一质控线更靠近所述样品垫，所述第二检测线较所述第二质控线更靠近所述样品垫。
在其中一个实施例中，所述第一检测线、所述第一质控线、所述第二检测线和所述第二质控线在沿所述包被膜的靠近所述样品垫的一端向其靠近所述吸水垫的一端的方向上间隔设置。
在其中一个实施例中，所述联检试纸条用于检测IL-6和降钙素原，所述第一检测线上包被有用于捕获IL-6与IL-6标记抗体所形成的复合物的IL-6捕获抗体，所述第一质控线上包被有IL-6；所述第二检测线上包被有用于捕获降钙素原与降钙素原标记抗体形成的复合物的降钙素原捕获抗体，第二质控线上包被有降钙素原。
在其中一个实施例中，所述联检试纸条用于检测N-末端脑钠肽前体和ST2，所述第一检测线上包被有用于捕获N-末端脑钠肽前体与N-末端脑钠肽前体标记抗体所形成的复合物的N-末端脑钠肽前体捕获抗体，所述第一质控线上包被有N-末端脑钠肽前体；所述第二检测线上包被有用于捕获ST2与ST2标记抗体形成的复合物的ST2捕获抗体，第二质控线上包被有ST2。
一种检测试剂盒，包括上述的联检试纸条。
附图说明
图1为一实施例的联检试纸条的示意图；
图2为另一实施例的联检试纸条的示意图；
图3为实施例1中独立检测IL-6的试纸条的检测结果；
图4为实施例1中独立检测PCT的试纸条的检测结果；
图5为实施例1中共用质控线联检试纸条检测PCT的结果；
图6为实施例1中共用质控线联检试纸条检测IL-6的结果；
图7为实施例1中抗原质控线联检试纸条检测PCT的结果；
图8为实施例1中抗原质控线联检试纸条检测IL-6的结果；
图9为实施例2中独立检测NT-proBNP的试纸条的检测结果；
图10为实施例2中独立检测ST2的试纸条的检测结果；
图11为实施例2中共用质控线联检试纸条检测NT-proBNP的结果；
图12为实施例2中共用质控线联检试纸条检测ST2的结果；
图13为实施例2中抗原质控线联检试纸条检测NT-proBNP的结果；
图14为实施例2中抗原质控线联检试纸条检测ST2的结果。
附图标记：
10、联检试纸条；110、底板；120、样品垫；130、结合垫；140、包被膜；150、吸水垫；141、第一检测线；142、第二检测线；143、第一质控线；144、第二质控线。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使本发明公开内容更加透彻全面。
需要说明的是，当元件被表述“固定于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上、或者其间可以存在一个或多个居中的元件。当一个元件被表述“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件、或者其间可以存在一个或多个居中的元件。当使用术语“垂直的”、“水平的”、“左”、“右”、“上”、“下”、“内”、“外”、“底部”等指示方位或位置关系时，是为基于附图所示的方位或位置关系，仅为了便于描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本申请的限制。此外，术语“第一”、“第二”等仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文中“ST2”为“可溶性生长刺激表达基因2蛋白”的简称。
请参阅图1，本申请一实施方式提供了一种联检试纸条10，该联检试纸条10用于检测至少两种不同的抗原。具体地，该联检试纸条10包括底板110和位于底板110上的样品垫120、包被膜140和吸水垫150，样品垫120、包被膜140和吸水垫150从底板110的一端至另一端顺次连接，包被膜140上设置有与不同抗原对应的且相互间隔的质控线和检测线，各抗原对应的检测线较其质控线更靠近样品垫120，各检测线上包被有与抗原对应的捕获抗体，各质控线上包被有各自的抗原。
上述联检试纸条10通过双抗体夹心法的原理实现检测。具体地，在使用时，将待检测样本和与不同抗原对应的标记抗体混合后加到样品垫120上，抗原与对应的标记抗体特异性结合形成的抗原-标记抗体复合物，在毛细管力的作用下，该复合体向吸水垫150运动。在各自的检测线上，抗原-标记抗体复合物与对应的捕获抗体发生特异性结合形成标记抗体-抗原-捕获抗体复合物而被固定在检测线上，并产生信号。当各抗原的游离标记抗体运动到各自的质控线上时，游离标记抗体与质控线上包被的抗原发生特异性结合而被固定在质控线上并产生信号。并且，各检测线上的信号强度与对应的质控线上的信号强度呈反比。因此，通过质控线与检测线的结合可以对抗原进行定性或定量的检测。
本申请经研究发现，传统的检测试纸条共用质控线，质控线上的信号强度往往不会随检测线上的信号强度变化，质控线上结合的不同抗原对应的游离标记抗体的信号值并不会随检测线上结合的标记抗体的浓度变化而变化，或者变化微小，这导致检测线信号强度与质控线信号强度的比值变化小而变异系数大，线性范围窄。而上述联检试纸条10包括多条质控线，各质控线上包被的是各自的抗原，这使得不同抗原拥有各自的特异性质控线，并且质控线上的信号强度会随游离的标记抗体的浓度变化而明显变化，这使得检测更加灵敏，检测线信号强度与质控线信号强度的比值变化大而变异系数更小，精密度更高。
具体地，底板110为其他部件提供支撑；样品垫120用于加样；吸水垫150用于使得样品在联检试纸条10上能自样品垫120、经包被膜140上的检测线向质控线运动。可选地，包被膜140为硝酸纤维素、醋酸纤维素膜、尼龙膜、PVDF膜或Fusion 5滤纸。可选地，吸水垫150为吸水垫。
可选地，各抗原分别独立地选自C-反应蛋白、血清淀粉样蛋白A、降钙素原、白细胞介素6、尿微量白蛋白、β2-微球蛋白、视黄醇结合蛋白、胱抑素C、人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、D-二聚体、肌钙蛋白I、肌钙蛋白T、N末端脑钠肽、N-末端脑钠肽前体、脑尿钠肽、肌酸激酶同工酶和肌红蛋白中的一种。可以理解的是，抗原不限于上述。
在一些实施例中，样品垫120与包被膜140部分重叠，包被膜140与吸水垫150部分重叠。在一个可选地具体示例中，样品垫120的与包被膜140重叠的部分位于包被膜140远离底板110的一侧，包被膜140的与吸水垫150重叠的部分位于吸水垫150靠近底板110的一侧。
请参阅图2，在一些实施例中，联检试纸条10还包括结合垫130。具体地，结合垫130位于底板110上，结合垫130位于样品垫120和包被膜140之间且与样品垫120和包被膜140相接，结合垫130上包被有各抗原对应的标记抗体。
在其中一个实施例中，标记抗体偶联有标记物。可选地，标记物为小分子荧光素、荧光蛋白、荧光染料、稀土离子及其螯合剂、半导体纳米微晶粒、胶体金或胶体银。具体地，各标记抗体均标记有信号物质。可选地，各信号物质分别独立地选自发色团、地高辛标记探针、电子致密物质、胶体金及产生可检测信号的酶中的至少一种。可选地，发色团选自荧光基团、量子点、荧光微球、发光化合物和染料中的至少一种。在一些实施例中，发色团为发光化合物。例如，吖啶酯及其衍生物、金刚烷、鲁米诺、异鲁米诺等。可选地，吖啶酯及其衍生物选自吖啶酯、吖啶酯磺酰胺、吖啶酯甲苯磺酰胺、吖啶酯对甲基磺酰胺及吖啶酯三氟甲基磺酰胺中的至少一种。可选地，电子致密物质为放射性分子。例如32P，35S或125I。可选地，产生可检测信号的酶选自辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶中的一种。可以理解的是，信号物质不限于上述，还可以是其他能够被肉眼直接观察到或借助仪器检测到的具有颜色的物质。
可选地，结合垫130与样品垫120部分重叠，结合垫130与包被膜140部分重叠。在一个可选地具体示例中，样品垫120的与结合垫130重叠的部分位于结合垫130远离底板110的一侧，结合垫130的与包被膜140重叠的部分位于包被膜140远离底板110的一侧。可以理解的是，在上述联检试纸条10包括结合垫130时，待测样本在加到样品垫120之前，不必先与各抗原的标记抗体混合。此时，待各测抗原时是在结合垫130上与结合垫130上包被的各抗原对应的标记抗体特异性结合。
请参阅图2，在一些实施例中，上述联检试纸条10用于检测不同的第一抗原和第二抗原。对应地，包被膜140上设置有相互间隔的第一检测线141、第二检测线142、第一质控线143和第二质控线144，第一检测线141较第一质控线143更靠近样品垫120，第二检测线142较第二质控线144更靠近样品垫120，第一检测线141上包被有与第一抗原对应的第一捕获抗体，第二检测线142上包被有与第二抗原对应的第二捕获抗体，第一质控线143上包被有第一抗原，第二质控线144上包被有第二抗原。第一质控线143、第一检测线141和第一捕获抗体与第一抗原对应设计；第二质控线144、第二检测线142和第二捕获抗体与第二抗原对应设计。
可选地，第一检测线141、第一质控线143、第二检测线142和第二质控线144在沿包被膜140的靠近样品垫120的一端向包被膜140的靠近吸水垫150的一端的方向上依次间隔设置。
可选地，第一检测线141、第二检测线142、第一质控线143和第二质控线144在沿包被膜140的靠近样品垫120的一端向包被膜140的靠近吸水垫150的一端的方向上依次间隔设置。
可选地，上述用于检测两种不同抗原的联检试纸条10还包括结合垫130。具体地，结合垫130上包被有能与第一抗原特异性结合的第一标记抗体和能与第二抗原特异性结合的第二标记抗体。当然，此时结合垫130与其他部件的位置如上文所述，第一标记抗体和第二标记抗体所标记的信号物质也如上文所述。
在一些实施例中，上述联检试纸条10用于检测IL-6和降钙素原。具体地，第一检测线141上包被有用于捕获IL-6与IL-6标记抗体所形成的复合物的IL-6捕获抗体，第一质控线143上包被有IL-6；第二检测线142上包被有用于捕获降钙素原与降钙素原标记抗体形成的复合物的降钙素原捕获抗体，第二质控线144上包被有降钙素原。
在其中一个实施例中，上述用于检测IL-6和降钙素原的联检试纸条10还包括结合垫130，结合垫130上包被有IL-6标记抗体和降钙素原标记抗体。当然，此时结合垫130与其他部件的位置如上文所述，IL-6标记抗体和降钙素原标记抗体所标记的信号物质也如上文所述。
在另一些实施例中，上述联检试纸条10用于检测N-末端脑钠肽前体和ST2，第一检测线141上包被有用于捕获N-末端脑钠肽前体与N-末端脑钠肽前体标记抗体所形成的复合物的N-末端脑钠肽前体捕获抗体，第一质控线143上包被有N-末端脑钠肽前体；第二检测线142上包被有用于捕获ST2与ST2标记抗体形成的复合物的ST2捕获抗体，第二质控线144上包被有ST2。
在其中一个实施例中，上述用于检测N-末端脑钠肽前体和ST2的联检试纸条10还包括结合垫130，结合垫130上包被有N-末端脑钠肽前体标记抗体和ST2标记抗体。当然，此时结合垫130与其他部件的位置如上文所述，N-末端脑钠肽前体标记抗体和ST2标记抗体所标记的信号物质也如上文所述。
此外，本申请一实施方式还提供了一种检测试剂盒，该检测试剂盒包括上述任一实施例的联检试纸条10。
具体地，上述检测试剂盒包括盒体和收纳在盒体中的联检试纸条10。
上述检测试剂盒包括上述联检试纸条10，具有上述联检试纸条10相应的优点。
此外，本申请一实施方式还提供了一种同时检测不同抗原的方法，该方法包括以下步骤：使用上述联检试纸条10对待测样本进行定性或定量检测。
在一些实施例中，上述方法为定性检测方法。此时，上述方法包括以下步骤：将待测样本加到上述联检试纸条10的样品垫120上后，观察检测线和质控线；及根据观察结果对待测样本中的抗原进行定性。在检测线和对应的质控线上均有信号时，判定待测样本中存在与质控线上相同的抗原；在检测线上无信号且对应的质控线上有信号时，判定待测样本中没有与质控线上相同的抗原；在检测线上有信号但对应的质控线上无信号时，判定检测无效。
在一些实施例中，上述方法为定量检测方法。此时，上述方法包括以下步骤：将待测样本加到上述联检试纸条10的样品垫120上后，检测检测线和质控线上的信号强度；及根据检测结果对待测样本中的抗原进行定量。各抗原对应的检测线上的信号强度与其质控线上的信号强度呈反比。通过检测不同浓度下的不同抗原的信号强度，制备各抗原浓度与其信号强度之间的关系曲线，从而根据待测样本中不同抗原的信号强度和对应的关系曲线，计算待测样本中各抗原的浓度。
在其中一个实施例中，抗原为两种，信号强度为荧光强度。
上述同时检测不同抗原的方法采用上述联检试纸条10检测待测样本，线性范围较宽，线性更好，灵敏度更高，精密度更好，检测结果更加准确。
具体实施例
以下结合具体实施例进行详细说明。以下实施例如未特殊说明，则不包括除不可避免的杂质外的其他组分。实施例中采用试剂和仪器如非特别说明，均为本领域常规选择。实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规条件，例如文献、书本中所述的条件或者生产厂家推荐的方法实现。以下实施例中的抗体均来自菲鹏生物。
实施例1
采用抗原质控线联检试纸条、共用质控线试纸条、独立检测IL-6的试纸条、独立检测PCT的试纸条分别对30例临床样本进行检测，以评价不同试纸条的性能。其中：
抗原质控线联检试纸条结构如图2所示，由底板和位于底板上的样品垫、结合垫和NC膜(硝酸纤维素膜)和吸水垫组成。结合垫上包被有能与PCT特异性结合的PCT荧光标记抗体和能与IL-6特异性结合的IL-6荧光标记抗体，NC膜上包被四条带，从样品垫端至吸水垫端分别是T1带、C1带、T2带和C2带；T1带上包被有IL-6的捕获抗体，能捕捉来自结合垫上的IL-6抗原-IL-6荧光标记抗体复合物，并形成“IL-6抗体-IL-6抗原-IL-6荧光标记抗体”复合物；C1带上包被有IL-6，可与游离的IL-6荧光标记抗体结合；T2带上包被有PCT捕获抗体，能捕捉来自结合垫上的PCT抗原-PCT荧光标记抗体复合物，形成“PCT抗体-PCT抗原-PCT荧光标记抗体”复合物；C2带上包被有PCT，可与游离的PCT荧光标记抗体结合。即抗原质控线联检试纸条上存在单独的IL-6和PCT检测系统，T1带和C1带对应IL-6检测，T2带和C2带对应PCT检测。
在使用时，将待检测样本加入样品垫上，在侧向毛细管作用下，待检测样本先经过结合垫时IL-6和PCT抗原分别与结合垫上的IL-6荧光标记抗体、PCT荧光标记抗体发生特异的免疫结合，再经过T1带，IL-6抗原-IL-6荧光标记抗体复合物与IL-6捕获抗体发生特异的免疫结合，形成“IL-6抗体-IL-6抗原-IL-6荧光标记抗体”复合物，T1带产生荧光信号。当经过T1的待测样本流经C1带时，游离的IL-6荧光标记抗体与C1上包被的IL-6抗原发生特异的免疫结合，从而被固定在C1带中产生荧光信号。当经过C1的待测样本流经T2带时，PCT抗原-PCT荧光标记抗体复合物与PCT捕获抗体发生特异的免疫结合，形成“PCT抗体-PCT抗原-PCT荧光标记抗体”复合物，T2带产生荧光信号。当经过T2的样本流经C2带时，游离的PCT荧光标记抗体与C2上包被的PCT抗原发生特异的免疫结合，从而被固定在C2带中产生荧光信号。然后，采用荧光免疫分析仪检测出的四条带的荧光强度以峰面积体现，并通过仪器自身的计算软件计算T1/C1值、T2/C2(T1峰面积/C1峰面积、T2峰面积/C2峰面积)，拟合至已设定的标准曲线，荧光免疫分析仪自动换算出相应待检样本中IL-6、PCT的浓度值。当然，T1带、T2带分别与C1带、C2带的荧光强度成反比，从而可以矫正样本个体差异，计算T/C可以增加不同浓度样本间的信号差值。
共用质控线试纸条的结构大致与抗原质控线联检试纸条相同，其不同在于，质控线为一条，即，在NC膜上包被三条带，从样品垫端至吸水垫端分别是T1带、T2带和C带。C带上包被的是羊抗鼠IgG，其能捕捉游离的IL-6荧光标记抗体和PCT荧光标记抗体。
独立检测IL-6的试纸条(单检IL-6)的结构与抗原质控线联检试纸条大致相同，其不同在于，包被膜上只有两条带，T1带和C1带；
独立检测PCT的试纸条(单检PCT)与抗原质控线联检试纸条大致相同，其不同在于，包被膜上只有两条带，T2带和C2带。
检测结果如表1所示。
表1
Figure BDA0003392108430000131
Figure BDA0003392108430000141
对表1的数据进行分析，结果如图3～图8所示。其中，图3为独立检测IL-6的试纸条的检测结果；图4为独立检测PCT的试纸条的检测结果；图5为共用质控线联检试纸条检测PCT的结果；图6为共用质控线联检试纸条检测IL-6的结果；图7为抗原质控线联检试纸条检测PCT的结果；图8为抗原质控线联检试纸条检测IL-6的结果；图3～图8中，横坐标为对应的被检物质浓度，纵坐标为对应的检测线与质控线的峰面积之比。
取3例临床样本进行精密度测试，结果如表2所示。
表2
Figure BDA0003392108430000142
Figure BDA0003392108430000151
由上述结果可知，本实施的抗原质控联检试纸条的精密度都明显优于共用C带的试纸条，与单检产品相当。
实施例2
采用抗原质控线联检试纸条、共用质控线试纸条、独立检测N-末端脑钠肽前体(NT-proBNP)的试纸条、独立检测ST2的试纸条分别对30例临床样本进行检测，以评价不同试纸条的性能。其中：
本实施例的抗原质控线联检试纸条与实施例1的抗原质控线联检试纸条大致相同，其不同在于：本实施例的抗原质控线联检试纸条的样品垫上包被的是NT-proBNP荧光标记抗体和ST2荧光标记抗体，而实施例1抗原质控线联检试纸条的结合垫上包被的是IL-6荧光标记抗体、PCT荧光标记抗体；本实施例的T1带上包被的是NT-proBNP捕获抗体，能捕捉来自结合垫上的NT-proBNP-NT-proBNP荧光标记抗体复合物，并形成NT-proBNP抗体-NT-proBNP抗原-NT-proBNP荧光标记抗体复合物，而实施例1的T1带上包被的是IL-6捕获抗体；本实施例的C1包被的是NT-proBNP，而实施例1的C1带上包被的是IL-6；本实施例的T2带上包被的是ST2捕获抗体，能捕捉来自结合垫上的ST2-ST2荧光标记抗体复合物，并形成ST2抗体-ST2抗原-ST2荧光标记抗体复合物，而实施例1的T2带上包被的是PCT捕获抗体；本实施例1的C2包被的是ST2，而实施例1的C2带上包被的是PCT。
本实施例的共用质控线试纸条的结构大致与本实施例的抗原质控线联检试纸条相同，其不同在于，质控线为一条，即，在NC膜上包被三条带，从样品垫端至吸水垫端分别是T1带、T2带和C带。C带上包被的是羊抗鼠IgG，其能捕捉游离NT-proBNP荧光标记抗体和ST2荧光标记抗体。
独立检测NT-proBNP的试纸条的结构与抗原质控线联检试纸条大致相同，其不同在于，包被膜上只有两条带，T1带和C1带；
独立检测ST2的试纸条与抗原质控线联检试纸条大致相同，其不同在于，包被膜上只有两条带，T2带和C2带。
检测结果如表3所示。
表3
Figure BDA0003392108430000161
Figure BDA0003392108430000171
对表3的数据进行分析，结果如图9～图14所示。其中，图9为独立检测NT-proBNP的试纸条的检测结果；图10为独立检测ST2的试纸条的检测结果；图11为共用质控线联检试纸条检测NT-proBNP的结果；图12为共用质控线联检试纸条检测ST2的结果；图13为抗原质控线联检试纸条检测NT-proBNP的结果；图14为抗原质控线联检试纸条检测ST2的结果；图9～图14中，纵坐标为检测线与质控线的峰面积之比。
取3例临床样本进行精密度测试，结果如表4所示。
表4
Figure BDA0003392108430000172
Figure BDA0003392108430000181
由上述结果可知，本实施的抗原质控联检试纸条的精密度都明显优于共用C带的试纸条，与单检产品相当。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，便于具体和详细地理解本发明的技术方案，但并不能因此而理解为对发明专利保护范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。应当理解的是，在本领域技术人员在本发明提供的技术方案的基础上，通过合乎逻辑的分析、推理或有限的试验得到的技术方案，均在本发明所附权利要求的保护范围内。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求的内容为准，说明书及附图可以用于解释权利要求的内容。

Claims (10)

1.一种联检试纸条，其特征在于，包括底板和位于所述底板上的样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫，所述结合垫上包被有不同抗原对应的标记抗体，所述包被膜上设置有与不同抗原对应的且相互间隔的质控线和检测线，各所述检测线上包被有各自的捕获抗体，各所述捕获抗体用于捕获各自的抗原与对应的标记抗体形成的复合物，各所述质控线上包被的是各自的抗原。
2.根据权利要求1所述的联检试纸条，其特征在于，各所述抗原分别独立地选自ST2、C-反应蛋白、血清淀粉样蛋白A、降钙素原、白细胞介素6、尿微量白蛋白、β2-微球蛋白、视黄醇结合蛋白、胱抑素C、人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、D-二聚体、肌钙蛋白I、肌钙蛋白T、N末端脑钠肽、N-末端脑钠肽前体、脑尿钠肽、肌酸激酶同工酶和肌红蛋白中的一种。
3.根据权利要求1所述的联检试纸条，其特征在于，各所述标记抗体均偶联有标记物。
4.根据权利要求3所述的联检试纸条，其特征在于，所述标记物为小分子荧光素、荧光蛋白、荧光染料、稀土离子及其螯合剂、半导体纳米微晶粒、胶体金或胶体银。
5.根据权利要求1～4任一项所述的联检试纸条，其特征在于，所述联检试纸条用于检测不同的第一抗原和第二抗原，所述结合垫上设置有第一标记抗体和第二标记抗体，所述包被膜上设置有相互间隔的第一检测线、第二检测线、第一质控线和第二质控线，所述第一检测线上包被有与所述第一抗原对应的第一捕获抗体，所述第二检测线上包被有与所述第二抗原对应的第二捕获抗体，所述第一质控线上包被有所述第一抗原，所述第二质控线上包被有所述第二抗原。
6.根据权利要求5所述的联检试纸条，其特征在于，所述第一检测线较所述第一质控线更靠近所述样品垫，所述第二检测线较所述第二质控线更靠近所述样品垫。
7.根据权利要求6所述的联检试纸条，其特征在于，所述第一检测线、所述第一质控线、所述第二检测线和所述第二质控线在沿所述包被膜的靠近所述样品垫的一端向其靠近所述吸水垫的一端的方向上间隔设置；或所述第一检测线、所述第二检测线、所述第一质控线和所述第二质控线在沿所述包被膜的靠近所述样品垫的一端向其靠近所述吸水垫的一端的方向上间隔设置。
8.根据权利要求6所述的联检试纸条，其特征在于，所述联检试纸条用于检测IL-6和降钙素原，所述第一检测线上包被有用于捕获IL-6与IL-6标记抗体所形成的复合物的IL-6捕获抗体，所述第一质控线上包被有IL-6；所述第二检测线上包被有用于捕获降钙素原与降钙素原标记抗体形成的复合物的降钙素原捕获抗体，第二质控线上包被有降钙素原。
9.根据权利要求6所述的联检试纸条，其特征在于，所述联检试纸条用于检测N-末端脑钠肽前体和ST2，所述第一检测线上包被有用于捕获N-末端脑钠肽前体与N-末端脑钠肽前体标记抗体所形成的复合物的N-末端脑钠肽前体捕获抗体，所述第一质控线上包被有N-末端脑钠肽前体；所述第二检测线上包被有用于捕获ST2与ST2标记抗体形成的复合物的ST2捕获抗体，第二质控线上包被有ST2。
10.一种检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～9任一项所述的联检试纸条。
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