CN113975316A - 葛根芩连组合物在制备治疗血栓药物中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明旨在提供葛根芩连组合物在制备治疗血栓药物中的用途，所述的葛根芩连组合物由以下重量份的原料制成：葛根80‑120、黄芩20‑50、黄连20‑50、炙甘草10‑40。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药领域，具体涉及葛根芩连组合物在制备治疗血栓药物中的用途。
背景技术
新型冠状病毒(SARS-Co V-2)是人畜共患的正单链RNA病毒，可引起新型冠状病毒肺炎 (COVID-19)。新冠肺炎是一种新型的呼吸道传染性疾病，有研究表明近20％的新冠肺炎患者 会出现凝血功能异常，且几乎所有的重型和危重型患者存在凝血功能紊乱。经统计，普通病 房和重症监护病房(ICU)的患者中，急性肺栓塞(APE)的发生率分别为5.4％～40％和15％～ 35.3％，而尸检报告中可高达50％。急性肺栓塞诱发机制可能包括以下三点：病毒直接入侵内 皮细胞导致内皮细胞功能障碍、血管收缩，从而致使器官产生缺血、微血管渗漏、组织水肿 相关的炎症及促凝反应；促炎细胞因子尤其是可溶性白细胞介素2受体(IL-2R)、白细胞介 素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平升高，引起内皮细胞正常抗血栓和抗炎功能 丧失，进而导致凝血失调、血小板活化等；低氧血症致使机体的低纤维蛋白处于溶解状态和 高凝状态。在新冠肺炎中，炎症反应可能在血栓并发症的发生中起重要作用。炎症反应可以 通过释放因子(血管性血友病因子、组织因子和中性粒细胞)来阻断纤溶，激活内皮细胞和天 然免疫细胞，从而促进血栓形成。
葛根芩连汤是《伤寒论》中治疗热利挟表的处方,主要由葛根、黄芩、黄连、炙甘草组成， 功用为清热止痢，表里双解。临床研究表明，葛根芩连丸可以改善COVID-19患者发热、咳 嗽、乏力、咳嗽、胸闷等症状，对恶心、呕吐、大便稀溏等胃肠道症状具有良好疗效，同时 可以缩短新冠病毒核酸转阴时间，促进肺部炎症吸收，且未见不良反应。
发明内容
葛根芩连组合物在制备治疗血栓药物中的用途，所述的葛根芩连组合物由以下重量份的 原料制成：
葛根80-120、黄芩20-50、黄连20-50、炙甘草10-40。
葛根芩连组合物在制备抑制炎症反应诱导的血栓药物中的用途，所述的葛根芩连组合物 由以下重量份的原料制成：
葛根80-120、黄芩20-50、黄连20-50、炙甘草10-40。
葛根芩连组合物在制备抑制炎症反应诱导的肺部静脉血栓药物中的用途，所述的葛根芩 连组合物由以下重量份的原料制成：
葛根80-120、黄芩20-50、黄连20-50、炙甘草10-40。
所述的葛根芩连组合物为葛根芩连提取物。
所述葛根芩连提取物为水提物、乙醇提取物。
所述的葛根芩连提取物的制备方法包括以下步骤：
取黄芩，用体积百分比40％-60％乙醇做溶剂，浸渍12-36小时后进行渗漉，收集相当于 黄芩重量5-15的漉液，浓缩至80℃下相对密度为1.15-1.30的浓缩液a，黄芩渗漉药渣备用；
取黄连，用体积百分比40％-60％乙醇做溶剂，浸渍12-36小时后进行渗漉，收集相当于 黄连重量5-15倍的漉液，浓缩至80℃下相对密度为1.15-1.30的浓缩液b，黄连渗漉药渣备 用；
葛根加入相当于全部药材重量4-12倍的水先煎30分钟，再加入黄芩、黄连渗漉药渣及 炙甘草继续煎煮两次，每次1-3小时，合并煎液，滤过，浓缩至适当相对密度时，加入浓缩 液a、浓缩液b；
浓缩至80℃下相对密度为1.03-1.08的稠膏，即得；或者，减压低温干燥制成干膏，即 得。
上述葛根芩连组合物与医药学上可接受的载体在制备治疗血栓药物制剂中的用途。
上述葛根芩连组合物与医药学上可接受的载体在制备抑制炎症反应诱导的血栓药物制剂 方面的用途。
上述的葛根芩连组合物与医药学上可接受的载体在制备抑制炎症反应诱导的肺部静脉血 栓药物制剂方面的用途。
所述的药物制剂的剂型包括所述的药物制剂的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、 丸剂、煎膏剂。
本发明葛根芩连组合物，经药理实验证明，葛根芩连丸能够抑制角叉菜胶致小鼠肺、肝、 尾部血栓形成，增加尾部血流量，降低血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平同时，葛根芩连 丸还降低了血小板与人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的黏附作用，并且降低了HUVECs上清 液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。葛根芩连丸有抑制角叉菜胶所致小鼠炎症反应诱导 的血栓的作用。
附图说明
图1为实验例1各组小鼠尾部血栓图；
图2为实验例1各组小鼠黑尾率（黑尾长/全尾长）统计图；
图3为实验例1治疗组小鼠尾部血流图及血流指数图；
图4为实验例1预防组小鼠尾部血流图及血流速度图；
图5为实验例1葛根芩连丸对血栓小鼠尾部血流量的影响图；
图6为实验例1小鼠尾部切片HE染色图；
图7（A、B）实验例1小鼠肺切片HE染色图；（C、D）实验例1小鼠肝切片HE染色图；
图8（A-D）实验例1各组小鼠外周血细胞计数结果；（E）实验例1各组小鼠TNF-α的表达量；
图9（A-C) 实验例1药物对细胞存活率的影响;（D-E）实验例1葛根芩连汤对LPS诱导的HUVECs与血小板黏附作用的影响；F为无用图谱；
图10为实验例2的小鼠尾部血栓图；
图11为实验例2各给药组黑尾率柱状图；
图12为实验例2各给药组小鼠血浆TNF-α含量柱状图。
具体实施方式
实施例1
葛根芩连组合物由以下原料制成：葛根90kg、黄芩40kg、黄连30kg、炙甘草20kg。
取黄芩，用体积百分比40％乙醇做溶剂，浸渍12小时后进行渗漉，收集相当于黄芩重量 5的漉液，浓缩至80℃下相对密度为1.15的浓缩液a，黄芩渗漉药渣备用；
取黄连，用体积百分比40％％乙醇做溶剂，浸渍12小时后进行渗漉，收集相当于黄连重 量5倍的漉液，浓缩至80℃下相对密度为1.15的浓缩液b，黄连渗漉药渣备用；
葛根加入相当于全部药材重量4倍的水先煎30分钟，再加入黄芩、黄连渗漉药渣及炙甘 草继续煎煮两次，每次1小时，合并煎液，滤过，浓缩至适当相对密度时，加入浓缩液a、浓缩液b；
浓缩至80℃下相对密度为1.03的稠膏，即得；或者，减压低温干燥制成干膏，即得。
实施例2
葛根芩连组合物由以下原料制成：葛根80kg、黄芩20kg、黄连20kg、炙甘草10kg。
取黄芩，用体积百分比60％乙醇做溶剂，浸渍36小时后进行渗漉，收集相当于黄芩重量 15的漉液，浓缩至80℃下相对密度为1.30的浓缩液a，黄芩渗漉药渣备用；
取黄连，用体积百分比60％乙醇做溶剂，浸渍36小时后进行渗漉，收集相当于黄连重量 15倍的漉液，浓缩至80℃下相对密度为1.30的浓缩液b，黄连渗漉药渣备用；
葛根加入相当于全部药材重量12倍的水先煎30分钟，再加入黄芩、黄连渗漉药渣及炙 甘草继续煎煮两次，每次3小时，合并煎液，滤过，浓缩至适当相对密度时，加入浓缩液a、 浓缩液b；
浓缩至80℃下相对密度为1.08的稠膏，即得；或者，减压低温干燥制成干膏，即得。
实施例3
葛根芩连组合物由以下原料制成：葛根120kg、黄芩50kg、黄连50kg、炙甘草40kg。
取黄芩，用体积百分比50％乙醇做溶剂，浸渍22小时后进行渗漉，收集相当于黄芩重量 10的漉液，浓缩至80℃下相对密度为1.20的浓缩液a，黄芩渗漉药渣备用；
取黄连，用体积百分比50％乙醇做溶剂，浸渍30小时后进行渗漉，收集相当于黄连重量 10倍的漉液，浓缩至80℃下相对密度为1.20的浓缩液b，黄连渗漉药渣备用；
葛根加入相当于全部药材重量8倍的水先煎30分钟，再加入黄芩、黄连渗漉药渣及炙甘 草继续煎煮两次，每次2小时，合并煎液，滤过，浓缩至适当相对密度时，加入浓缩液a、浓缩液b；
浓缩至80℃下相对密度为1.06的稠膏，即得；或者，减压低温干燥制成干膏，即得。
实施例4
葛根芩连组合物由以下原料制成：葛根100kg、黄芩37，5kg、黄连37，5kg、炙甘草25kg。
取黄芩，用体积百分比55％乙醇做溶剂，浸渍18小时后进行渗漉，收集相当于黄芩重量 8的漉液，浓缩至80℃下相对密度为1.23的浓缩液a，黄芩渗漉药渣备用；
取黄连，用体积百分比40％-60％乙醇做溶剂，浸渍12-36小时后进行渗漉，收集相当于 黄连重量5-15倍的漉液，浓缩至80℃下相对密度为1.21的浓缩液b，黄连渗漉药渣备用；
葛根加入相当于全部药材重量4-12倍的水先煎30分钟，再加入黄芩、黄连渗漉药渣及 炙甘草继续煎煮两次，每次1-3小时，合并煎液，滤过，浓缩至适当相对密度时，加入浓缩 液a、浓缩液b；
浓缩至80℃下相对密度为1.05的稠膏，即得；或者，减压低温干燥制成干膏，即得。
实验例1
一、葛根芩连丸对角叉菜胶诱导小鼠血栓的作用
1.实验方法
1.1动物实验和取样
雄性Balb/c小鼠，由南方医科大学动物研究中心提供，饲养在无特定病原体(SPF)的条 件下，动物实验通过了南方医科大学动物伦理委员会(2020078)。将小鼠随机分为9组，每组 6只。空白组、模型组均灌以蒸馏水9天；阿司匹林组灌以22.75mg/kg阿司匹林溶液9天； 治疗组灌以蒸馏水7天，然后分别灌以227.5mg/kg、455mg/kg、910mg/kg的实施例4方法制 备的葛根芩连丸溶液2天；预防组灌以227.5mg/kg、455mg/kg、910mg/kg的葛根芩连丸溶液 9天。在第7天，除空白组外，所有小鼠均腹腔注射100mg/kg角叉菜胶(西格玛)溶液。第9天将小鼠用1％戊巴比妥钠麻醉，用激光散斑血流成像仪对小鼠尾巴血流量进行分析，随后 采用摘眼球取血方法收集全血至含有EDTA-2K的试管中，取肝、肺和尾巴加入到含有4％的多 聚甲醛的试管中固定。
1.2尾部血流量的监测
注射角叉菜胶48h后，小鼠用1％戊巴比妥钠完全麻醉，将尾巴放置在吸光垫上，尾巴表 面垂直于激光束。使用RWD RFLSI Pro+激光散斑血流成像系统(LSCI，瑞沃德)在5min内监 测尾巴血流量。监测过程中，LSCI仪器将血流灌注信号显示为血流量单位PU(伏特)和颜色编 码图像，深蓝色为低灌注，亮红色为高灌注。
1.3血细胞计数
使用全自动血细胞分析仪(希森美康)，检测小鼠全血中的红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、 血红蛋白(HGB)和血小板(PLT)的含量。
1.4炎症因子检测
将小鼠全血于室温静置30min，然后在4℃、1600g转速下离心10min，取血浆，使用ELISA 试剂盒(达科为)测定TNF-α。
1.5苏木精、伊红(HE)染色组织切片制作
为了观察小鼠组织中血栓的形成情况，取距尾尖4cm处的尾巴、肝和肺组织，浸泡在4％ 多聚甲醛中固定过夜。将固定后的样品在30％蔗糖溶液中孵育过夜，然后包埋在石蜡溶液中。 取包埋好的组织蜡块5-μm的石蜡切片进行HE染色。使用徕卡DMi8显微镜(徕卡)拍摄HE切 片。
2.实验结果
2.1葛根芩连丸对小鼠黑尾形成率的影响
为了评价葛根芩连丸对角叉菜胶诱导的小鼠血栓形成的影响，实验中测定了各组小鼠的 血栓形成率(血栓形成长度/全尾长度)。如图1和图2所示，葛根芩连丸治疗组和葛根芩连 丸预防组均能显著抑制小鼠的尾部血栓形成，与模型组相比，差异具有统计学意义(P<0.01)， 不同剂量组之间的血栓形成率无显著差异。然而，阿司匹林组和模型组之间无显著差异。
2.2葛根芩连丸对小鼠尾部血流的影响
通过激光散斑血流图检测距尾尖1.5cm处的血流量(PU)，并以彩色编码图像的形式记录 血流灌注信号，深蓝色为低灌注，亮红色为高灌注。结果(图3-5)显示，模型组的血流量 明显低于空白组(P<0.01)，葛根芩连丸逆转了这一趋势。阿司匹林组也增加了血流量，但阿 司匹林组和模型组之间无显著差异。
2.3葛根芩连丸对小鼠组织血栓形成的影响
腹腔注射角叉菜胶48h后，处死小鼠，采集尾部、肝脏和肺组织，分别制作HE染色切片， 显微镜下观察其大体形态。如图6所示，模型组小鼠尾血管完全被血栓占据。葛根芩连丸治 疗组和预防组能显著抑制血栓的形成(P<0.01)，而治疗和预防组中剂量组未检测到血栓形成。
与空白组相比，模型组大鼠肺组织可见静脉血栓形成、广泛的毛细血管出血和中性粒细 胞间质浸润。阿司匹林组仍有出现血栓和炎性浸润。然而，葛根芩连丸组肺血管血栓形成被 抑制，炎症浸润显著减少(图7A、B)。
在肝组织中，肝静脉血栓形成如图(图7C、D)，观察到肝细胞水肿、炎性浸润和血管周围局部聚集。同样，治疗组和预防组抑制了肝静脉血栓形成和肝细胞水肿，并显著抑制了炎症浸润。
2.4葛根芩连丸对小鼠外周血的影响
血液学分析结果显示，模型组小鼠外周血白细胞计数(WBC)、单核细胞计数(Monon)、 血红蛋白(Hgb)均显著高于空白组(P<0.01)。模型组与空白组其他指标差异无统计学意义 (P>0.05)。阿司匹林组和葛根芩连丸预防组降低了WBC和Monon，但对Hgb无明显影响(图 8A-D)。
2.5葛根芩连连丸对小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响
用ELISA试剂盒检测血浆TNF-α水平(图8E)。结果显示，模型组小鼠血清TNF-α水平为5.024±0.149pg/mL，较空白组(1.967±0.5213pg/mL)显著升高(P<0.01)。治疗组和预防组的TNF-α水平明显降低(p<0.01)，与服药前比较差异有显著性(p<0.01)。提示葛根芩连丸可以抑制角叉菜胶诱导的TNF-α的产生。
二、葛根芩连丸对LPS刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的作用
1.实验方法
1.1葛根芩连丸乙醇提取液制备
将实施例4方法制备的12g葛根芩连丸粉末与200ml乙醇混合，在回流装置中微沸4h， 然后用布氏漏斗趁热过滤。滤液在水浴中蒸发除去残留的乙醇。将浓缩物用少量乙醇溶解， 再用PBS溶解。该溶液被命名为“葛根芩连丸乙醇提取液(GQP-EES)”，用于细胞实验。
1.2细胞活性实验
人脐静脉内皮细胞(HUVECs)来自吉妮欧生物公司。HUVECs在含10％胎牛血清和1％青霉 素链霉素的DMEM培养基中培养。将HUVECs以每孔5×103个细胞密度接种于96孔板中，分别 与LPS(5，10，20，40，80μg/ml)、GQP-EES(1，2，4，8，16，32μg/ml)、LPS(5μg/ml) 加GQP-EES(1，2，5μg/ml)、LPS(5μg/ml)加阿司匹林(10μg/ml)、LPS(5μg/ml)加 BoxA(10μg/ml)，孵育24h后，加入CCK-8孵育1h，使用酶标仪在450nm处测量吸光度。
1.3黏附实验
SD大鼠(南方医科大学动物研究中心提供)用戊巴比妥钠麻醉后，从腹主动脉采血，用 含有枸橼酸钠溶液的试管收集血液，室温静置30min后，室温下1600g转速离心10min得到 富含血小板血浆，加入前列腺素E1(1μM)孵育10min，再进行600g转速离心10min得到血 小板，用PBS洗涤，再悬浮在缓冲液A(130mM氯化钠，10mM柠檬酸钠，9mM碳酸氢钠，6mM 葡萄糖，0.9mM二氯化镁，0.81mM磷酸二氢钾，10mM Tris，pH7.4)中，在使用前升温至37℃。 将富集的血小板与1μM的5，6-羧基荧光素二乙酸酯琥珀酰亚胺酯(CFSE)在37℃孵育 30min，用PBS洗涤血小板3次，除去游离的CFSE。
将HUVECs以每孔5×104个细胞密度接种于24孔板中，分别用LPS(5μg/mL)、LPS (5μg/mL)加GQP-EES(5μg/mL)、LPS(5μg/mL)加阿司匹林(10μg/mL)、LPS(5μg/mL) 加BoxA(10μg/mL)处理24h。处理后，每孔加入用CFSE标记的血小板(1×105/孔)孵育 30min。用徕卡DMi8显微镜拍摄血小板黏附情况。
2.实验结果
2.1药物对细胞活性的影响
CCK-8法检测LPS、GQP-EES、阿司匹林和Boxa对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)存活率的 影响。用LPS(5，10，20，40和80μg/mL)，GQP-EES(1，2，4，8，16，32μg/mL)，5μg/mL 的LPS加或不加GQP-EES(1，2，5μg/mL)或阿司匹林(10μg/mL)加5μg/mL的LPS或BOXA (10μg/mL)加5μg/mL的LPS处理，作用24h不影响细胞的存活率(图9A-C)。
2.2葛根芩连丸对LPS诱导的HUVECs与血小板粘附作用的影响
用5μg/mL LPS诱导HUVECs形成炎症，观察葛根芩连丸对HUVECs与血小板黏附的影响(图 9D,E)。结果显示，经LPS处理的HUVECs血小板黏附率较对照组增加近3倍。葛根芩连丸或 阿司匹林可明显抑制血小板黏附率的升高(p<0.01)，且呈剂量依赖性。
2.4葛根芩连丸对LPS诱导的HUVECs产生TNF-α的影响
用LPS处理HUVECs，观察GQP-EES或阿司匹林对HUVECs释放TNF-α的影响。用ELISA试剂盒检测细胞培养上清液中TNF-α的蛋白水平。
四、实验结论
本研究采用Balb/c小鼠腹腔注射角叉菜胶建立急性炎症诱导血栓形成模型，并在注射角 叉菜胶前及注射角叉菜胶同时予以葛根芩连丸治疗，结果表明，预防性和治疗性给药均可抑 制角叉菜胶诱导的血栓形成。在细胞实验中，我们观察了葛根芩连丸和阿司匹林对LPS诱导 的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血小板粘附的影响，结果表明，葛根芩连丸可以显著抑制血小 板黏附。
综上所述，葛根芩连丸可以减少炎症诱导的血栓形成，并减轻血小板的粘附，治疗炎症 诱导的血栓有很大的潜力。
实验例2
葛根、黄芩、黄连、炙甘草提取物和葛根芩连丸对角叉菜胶诱导小鼠血栓的作用
为了评价葛根芩连丸及其所含药材葛根、黄芩、黄连、炙甘草提取物对角叉菜胶诱导的 小鼠血栓形成的作用情况，本研究测定了不同组小鼠尾部血栓形成率及血浆中与血栓形成相 关的炎症因子TNF-α的变化。
一、样品的制备
1.单味药提取物的制备
葛根提取物：葛根1000g加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩稠膏，减压低温干燥，粉碎成最细粉。
黄芩提取物：黄芩375g用50％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，收集漉液，回收 乙醇，并适当浓缩；加水继续煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓成稠膏，减压低温干燥，粉碎成最细粉。
黄连提取物：黄连375g用50％乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，收集漉液，回收 乙醇，并适当浓缩；加水继续煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓成稠膏，减压低温干燥，粉碎成最细粉。
炙甘草提取物：炙甘草250g，加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩稠膏，减压低温干燥，粉碎成最细粉。
2、葛根芩连丸：广西花红药业集团股份有限公司，批号：20191002
二、葛根、黄芩、黄连、炙甘草提取物和葛根芩连丸对角叉菜胶诱导小鼠血栓的作用
1、动物实验和取样
雄性Balb/c小鼠，由南方医科大学动物研究中心提供，饲养在无特定病原体(SPF)的条 件下，动物实验通过了南方医科大学动物伦理委员会(2020078)。将小鼠随机分为7组，每组 6只。适应性饲养7天后，除空白组外，所有小鼠均腹腔注射100mg/kg角叉菜胶溶液进行造 模，造模30min后给药。各给药组分别灌以葛根提取物(相当于原药材1.51g/kg)、黄芩提 取物(相当于原药材0.56g/kg)、黄连提取物(相当于原药材0.56g/kg)、炙甘草提取物(相 当于原药材0.37g/kg)和葛根芩连丸的溶液(相当于葛根原药材1.51g/kg+黄芩原药材0.56g/kg+黄连原药材0.56g/kg+炙甘草原药材0.37g/kg)2天；在第10天(腹腔注射角叉 菜胶溶液48h后)，将小鼠用1％戊巴比妥钠麻醉，尾部拍照后，取全血。
2、小鼠尾部血栓长度测量
第10天将小鼠用1％戊巴比妥钠麻醉，尾部拍照，计算尾部血栓率(血栓长度/尾巴长度)。
3、炎症因子检测
将全血于室温静置30min后，进行1600g转速离心10min，取血浆，使用ELISA试剂盒测定TNF-α。
4、实验结果
4.1葛根芩连丸及各单味药提取物抑制小鼠黑尾形成率
测定了不同组小鼠的血栓形成率(血栓形成长度/全尾长度)，结果见表1、图10和图 11。
图11中，##,与空白组比较P<0.01；**,与模型组比较P<0.01；▽，与葛根芩连丸(GQP) 组比较P<0.05；
结果显示葛根、黄芩、黄连、甘草提取物和葛根芩连丸与模型组相比可以显著抑制小鼠 的尾部血栓形成，差异具有统计学意义(P<0.01)，葛根芩连丸组与葛根、黄芩、黄连、甘 草提取物比效果优于各单味药组，差异具有统计学意义(P<0.05)。
表1 各给药组黑尾率(黑尾长/全尾长)
##,与空白组比较P<0.01；**,与模型组比较P<0.01；▽，与葛根芩连丸(GQP)组比较P<0.05。
4.2葛根芩连丸及各单味药提取物小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量
用ELISA试剂盒检测小鼠血浆TNF-α水平，结果见表2和图12。
图12中，##,与空白组比较P<0.01；**,与模型组比较P<0.01；*,与模型组比较P<0.05；▽，与葛根 芩连丸(GQP)组比较P<0.05
结果显示，模型组小鼠血清TNF-α水平较空白组显著升高(P<0.01)。葛根、黄芩、黄连和葛根芩连丸显著抑制TNF-α水平(p<0.01)，葛根芩连丸组效果优于各单味药，差异具有统计学意义(p<0.05)。
表2 各给药组小鼠血浆TNF-α含量
##,与空白组比较P<0.01；**,与模型组比较P<0.01；*,与模型组比较P<0.05；▽，与葛根芩连丸(GQP) 组比较P<0.05。
Claims (10)
1.葛根芩连组合物在制备治疗血栓药物中的用途，所述的葛根芩连组合物由以下重量份的原料制成：
葛根80-120、黄芩20-50、黄连20-50、炙甘草10-40。
2.葛根芩连组合物在制备抑制炎症反应诱导的血栓药物中的用途，所述的葛根芩连组合物由以下重量份的原料制成：
葛根80-120、黄芩20-50、黄连20-50、炙甘草10-40。
3.葛根芩连组合物在制备抑制炎症反应诱导的肺部静脉血栓药物中的用途，所述的葛根芩连组合物由以下重量份的原料制成：
葛根80-120、黄芩20-50、黄连20-50、炙甘草10-40。
4.如权利要求1-3任何一项所述的用途，其特征在于：所述的葛根芩连组合物为以下重量份的原料制成的葛根芩连提取物：
葛根80-120、黄芩20-50、黄连20-50、炙甘草10-40。
5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述葛根芩连提取物为水提物、乙醇提取物。
6.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述的葛根芩连提取物的制备方法包括以下步骤：
取黄芩，用体积百分比40%-60%乙醇做溶剂，浸渍12-36小时后进行渗漉，收集相当于黄芩重量5-15倍的漉液，浓缩至80℃下相对密度为1.15-1.30的浓缩液a，黄芩渗漉药渣备用；
取黄连，用体积百分比40%-60%乙醇做溶剂，浸渍12-36小时后进行渗漉，收集相当于黄连重量5-15倍的漉液，浓缩至80℃下相对密度为1.15-1.30的浓缩液b，黄连渗漉药渣备用；
葛根加入相当于全部药材重量4-12倍的水先煎30分钟，再加入黄芩、黄连渗漉药渣及炙甘草继续煎煮两次，每次1-3小时，合并煎液，滤过，浓缩至适当相对密度时，加入浓缩液a、浓缩液b；
浓缩至80℃下相对密度为1.03-1.08的稠膏，即得；或者，减压低温干燥制成干膏，即得。
7.葛根芩连组合物与医药学上可接受的载体在制备治疗血栓药物制剂中的用途。
8.葛根芩连组合物与医药学上可接受的载体在制备抑制炎症反应诱导的血栓药物制剂方面的用途。
9.葛根芩连组合物与医药学上可接受的载体在制备抑制炎症反应诱导的肺部静脉血栓药物制剂方面的用途。
10.如权利要求7-9任何一项所述的药物组合物，其特征在于：所述的药物制剂的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、煎膏剂。
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