CN113950320A - 包含含有氰基丙烯酸酯亚单元的共聚或均聚化合物的纳米颗粒 - Google Patents
包含含有氰基丙烯酸酯亚单元的共聚或均聚化合物的纳米颗粒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113950320A CN113950320A CN202080041164.2A CN202080041164A CN113950320A CN 113950320 A CN113950320 A CN 113950320A CN 202080041164 A CN202080041164 A CN 202080041164A CN 113950320 A CN113950320 A CN 113950320A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- heptyl
- nanoparticle
- cyanoacrylate
- pentyl
- group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 title claims abstract description 256
- 229920001651 Cyanoacrylate Polymers 0.000 title claims abstract description 100
- MWCLLHOVUTZFKS-UHFFFAOYSA-N Methyl cyanoacrylate Chemical compound COC(=O)C(=C)C#N MWCLLHOVUTZFKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 83
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 49
- -1 2-ethylhexyl Chemical group 0.000 claims abstract description 210
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims abstract description 91
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 58
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 50
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims abstract description 45
- 125000000094 2-phenylethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 35
- 125000001972 isopentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 31
- 229920001519 homopolymer Polymers 0.000 claims abstract description 30
- 125000001971 neopentyl group Chemical group [H]C([*])([H])C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims abstract description 29
- 125000000740 n-pentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims abstract description 24
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000002059 diagnostic imaging Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 86
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 43
- 238000010539 anionic addition polymerization reaction Methods 0.000 claims description 21
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 claims description 21
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 19
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 claims description 13
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 12
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 claims description 11
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 claims description 11
- 238000010526 radical polymerization reaction Methods 0.000 claims description 11
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 10
- 239000012216 imaging agent Substances 0.000 claims description 10
- 229960005475 antiinfective agent Drugs 0.000 claims description 9
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 claims description 9
- 125000001494 2-propynyl group Chemical group [H]C#CC([H])([H])* 0.000 claims description 7
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 claims description 7
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000003538 pentan-3-yl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 6
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 5
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 5
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 claims description 5
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 claims description 5
- 125000006176 2-ethylbutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])*)C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 claims description 4
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 claims description 4
- 229940125693 central nervous system agent Drugs 0.000 claims description 4
- 239000003576 central nervous system agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 4
- 125000004491 isohexyl group Chemical group C(CCC(C)C)* 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 3
- 125000001280 n-hexyl group Chemical group C(CCCCC)* 0.000 claims description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940121372 histone deacetylase inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003276 histone deacetylase inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- 239000002935 phosphatidylinositol 3 kinase inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- 229940043441 phosphoinositide 3-kinase inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003505 polymerization initiator Substances 0.000 claims description 2
- 239000007870 radical polymerization initiator Substances 0.000 claims description 2
- UQRONKZLYKUEMO-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-1-(2,4,6-trimethylphenyl)pent-4-en-2-one Chemical group CC(=C)CC(=O)Cc1c(C)cc(C)cc1C UQRONKZLYKUEMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N taxane Chemical class C([C@]1(C)CCC[C@@H](C)[C@H]1C1)C[C@H]2[C@H](C)CC[C@@H]1C2(C)C DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 52
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 51
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 40
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 40
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 31
- WXAFTQJQXYGOKV-UHFFFAOYSA-N 2-ethylhexyl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)C(=C)C#N WXAFTQJQXYGOKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 28
- 229950010048 enbucrilate Drugs 0.000 description 26
- 208000036758 Postinfectious cerebellitis Diseases 0.000 description 25
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 24
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 24
- BMQGVNUXMIRLCK-OAGWZNDDSA-N cabazitaxel Chemical compound O([C@H]1[C@@H]2[C@]3(OC(C)=O)CO[C@@H]3C[C@@H]([C@]2(C(=O)[C@H](OC)C2=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=3C=CC=CC=3)C[C@]1(O)C2(C)C)C)OC)C(=O)C1=CC=CC=C1 BMQGVNUXMIRLCK-OAGWZNDDSA-N 0.000 description 23
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 23
- 229960001573 cabazitaxel Drugs 0.000 description 22
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 20
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 19
- JJJFUHOGVZWXNQ-UHFFFAOYSA-N enbucrilate Chemical compound CCCCOC(=O)C(=C)C#N JJJFUHOGVZWXNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L oxaliplatin Chemical compound O1C(=O)C(=O)O[Pt]11N[C@@H]2CCCC[C@H]2N1 DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L 0.000 description 16
- 229960001756 oxaliplatin Drugs 0.000 description 16
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- IQAOUEZDBBBGKY-UHFFFAOYSA-N 2-ethylbutyl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound CCC(CC)COC(=O)C(=C)C#N IQAOUEZDBBBGKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 12
- RPQUGMLCZLGZTG-UHFFFAOYSA-N octyl cyanoacrylate Chemical compound CCCCCCCCOC(=O)C(=C)C#N RPQUGMLCZLGZTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- MINDHVHHQZYEEK-UHFFFAOYSA-N (E)-(2S,3R,4R,5S)-5-[(2S,3S,4S,5S)-2,3-epoxy-5-hydroxy-4-methylhexyl]tetrahydro-3,4-dihydroxy-(beta)-methyl-2H-pyran-2-crotonic acid ester with 9-hydroxynonanoic acid Natural products CC(O)C(C)C1OC1CC1C(O)C(O)C(CC(C)=CC(=O)OCCCCCCCCC(O)=O)OC1 MINDHVHHQZYEEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- GASDVTHQNCFANM-UHFFFAOYSA-N 3-methylbutyl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound CC(C)CCOC(=O)C(=C)C#N GASDVTHQNCFANM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 11
- 229960003128 mupirocin Drugs 0.000 description 11
- 229930187697 mupirocin Natural products 0.000 description 11
- DDHVILIIHBIMQU-YJGQQKNPSA-L mupirocin calcium hydrate Chemical compound O.O.[Ca+2].C[C@H](O)[C@H](C)[C@@H]1O[C@H]1C[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C\C(C)=C\C(=O)OCCCCCCCCC([O-])=O)OC1.C[C@H](O)[C@H](C)[C@@H]1O[C@H]1C[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C\C(C)=C\C(=O)OCCCCCCCCC([O-])=O)OC1 DDHVILIIHBIMQU-YJGQQKNPSA-L 0.000 description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 description 11
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 11
- RLCWYHSDGLVOBG-UHFFFAOYSA-N heptan-2-yl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound CCCCCC(C)OC(=O)C(=C)C#N RLCWYHSDGLVOBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- WVXQYJXDTJWWEA-UHFFFAOYSA-N heptyl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound CCCCCCCOC(=O)C(=C)C#N WVXQYJXDTJWWEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- SXRFXXNXVPFXDU-UHFFFAOYSA-N pentyl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound CCCCCOC(=O)C(=C)C#N SXRFXXNXVPFXDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- YNLJHXFENQDVSS-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylpropyl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound CC(C)(C)COC(=O)C(=C)C#N YNLJHXFENQDVSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LTYWEEUBKYARKZ-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethyl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound N#CC(=C)C(=O)OCCC1=CC=CC=C1 LTYWEEUBKYARKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- FIRBSSWDIDNKQC-UHFFFAOYSA-N heptan-3-yl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound CCCCC(CC)OC(=O)C(=C)C#N FIRBSSWDIDNKQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- SBPXGLQYUALAQV-UHFFFAOYSA-N pentan-2-yl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound CCCC(C)OC(=O)C(=C)C#N SBPXGLQYUALAQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 8
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 8
- CMYFXTNUSQPQNH-UHFFFAOYSA-N pentan-3-yl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound CCC(CC)OC(=O)C(=C)C#N CMYFXTNUSQPQNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 8
- 229920001091 Poly(octyl cyanoacrylate) Polymers 0.000 description 7
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 7
- NLCKLZIHJQEMCU-UHFFFAOYSA-N cyano prop-2-enoate Chemical class C=CC(=O)OC#N NLCKLZIHJQEMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000007720 emulsion polymerization reaction Methods 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 6
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 6
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 6
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 6
- NCNRHFGMJRPRSK-MDZDMXLPSA-N belinostat Chemical compound ONC(=O)\C=C\C1=CC=CC(S(=O)(=O)NC=2C=CC=CC=2)=C1 NCNRHFGMJRPRSK-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 6
- 229960003094 belinostat Drugs 0.000 description 6
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 6
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 6
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 6
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 6
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 6
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 6
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- 239000000126 substance Chemical group 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 5
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 5
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 5
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 5
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- VOFUROIFQGPCGE-UHFFFAOYSA-N nile red Chemical compound C1=CC=C2C3=NC4=CC=C(N(CC)CC)C=C4OC3=CC(=O)C2=C1 VOFUROIFQGPCGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- YIWUKEYIRIRTPP-UHFFFAOYSA-N 2-ethylhexan-1-ol Chemical compound CCCCC(CC)CO YIWUKEYIRIRTPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 4
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- DNORZUSMZSZZKU-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-[5-(4-chlorophenyl)pentyl]oxirane-2-carboxylate Chemical compound C=1C=C(Cl)C=CC=1CCCCCC1(C(=O)OCC)CO1 DNORZUSMZSZZKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 4
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 229920000771 poly (alkylcyanoacrylate) Polymers 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- UVTYYXOSOUBFIW-UHFFFAOYSA-N prop-2-ynyl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical group N#CC(=C)C(=O)OCC#C UVTYYXOSOUBFIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 4
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 229920002730 Poly(butyl cyanoacrylate) Polymers 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 3
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 3
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- STVZJERGLQHEKB-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol dimethacrylate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCOC(=O)C(C)=C STVZJERGLQHEKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 3
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Chemical class 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000001338 self-assembly Methods 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical compound CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TZYRSLHNPKPEFV-UHFFFAOYSA-N 2-ethyl-1-butanol Chemical compound CCC(CC)CO TZYRSLHNPKPEFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZHESMCIWZWYNLC-UHFFFAOYSA-N 2-methylprop-2-enoyloxymethyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCOC(=O)C(C)=C ZHESMCIWZWYNLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JNYFHDVUGOGERY-UHFFFAOYSA-N C(#N)C(=CC(=O)OCCCCCCO)C#N Chemical compound C(#N)C(=CC(=O)OCCCCCCO)C#N JNYFHDVUGOGERY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 231100000416 LDH assay Toxicity 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 238000001016 Ostwald ripening Methods 0.000 description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 2
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 239000011162 core material Substances 0.000 description 2
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 2
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 2
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 2
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DCAYPVUWAIABOU-UHFFFAOYSA-N hexadecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC DCAYPVUWAIABOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002843 lactate dehydrogenase assay Methods 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 210000004324 lymphatic system Anatomy 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- DCUFMVPCXCSVNP-UHFFFAOYSA-N methacrylic anhydride Chemical compound CC(=C)C(=O)OC(=O)C(C)=C DCUFMVPCXCSVNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 238000002552 multiple reaction monitoring Methods 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 2
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 2
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920000056 polyoxyethylene ether Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 229940068965 polysorbates Drugs 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 2
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- IJVRPNIWWODHHA-UHFFFAOYSA-N 2-cyanoprop-2-enoic acid Chemical compound OC(=O)C(=C)C#N IJVRPNIWWODHHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HFQQYIUTYJVYFZ-UHFFFAOYSA-N 4-methylpentyl 2-cyanoprop-2-enoate Chemical compound CC(C)CCCOC(=O)C(=C)C#N HFQQYIUTYJVYFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 101000656751 Haloarcula marismortui (strain ATCC 43049 / DSM 3752 / JCM 8966 / VKM B-1809) 30S ribosomal protein S24e Proteins 0.000 description 1
- WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N Hydroxyethyl methacrylate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCO WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical class CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001028048 Nicola Species 0.000 description 1
- 208000035823 Non-specific autoimmune cerebellar ataxia without characteristic antibodies Diseases 0.000 description 1
- DHUJYGGDOCOHQO-UHFFFAOYSA-N OC(=O)C(C#N)=CCCC1=CC=CC=C1 Chemical compound OC(=O)C(C#N)=CCCC1=CC=CC=C1 DHUJYGGDOCOHQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 1
- BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N Silane Chemical compound [SiH4] BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical class [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N Sulfobutanedioic acid Chemical class OC(=O)CC(C(O)=O)S(O)(=O)=O ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QYKIQEUNHZKYBP-UHFFFAOYSA-N Vinyl ether Chemical class C=COC=C QYKIQEUNHZKYBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AQMHNCQZLQUNJI-UHFFFAOYSA-N [CH2]CCCCCC Chemical compound [CH2]CCCCCC AQMHNCQZLQUNJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000001252 acrylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 229940034982 antineoplastic agent Drugs 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 238000012650 click reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 1
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 1
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 239000003596 drug target Substances 0.000 description 1
- 229940125436 dual inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000000383 hazardous chemical Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 231100000171 higher toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000007154 intracellular accumulation Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000007908 nanoemulsion Substances 0.000 description 1
- 231100000623 nanotoxicology Toxicity 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N octafluoropropane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NMRPBPVERJPACX-UHFFFAOYSA-N octan-3-ol Chemical class CCCCCC(O)CC NMRPBPVERJPACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 238000012634 optical imaging Methods 0.000 description 1
- 150000001282 organosilanes Chemical class 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229960004065 perflutren Drugs 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 229940067107 phenylethyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920001987 poloxamine Polymers 0.000 description 1
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 210000000064 prostate epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Chemical class 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 229910000077 silane Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003894 surgical glue Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000002723 toxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000440 toxicity profile Toxicity 0.000 description 1
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 229920001567 vinyl ester resin Polymers 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0013—Luminescence
- A61K49/0017—Fluorescence in vivo
- A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
- A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
- A61K49/0028—Oxazine dyes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
- A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
- A61K9/5138—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
- A61K31/18—Sulfonamides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
- A61K31/351—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom not condensed with another ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/555—Heterocyclic compounds containing heavy metals, e.g. hemin, hematin, melarsoprol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
- A61K49/0063—Preparation for luminescence or biological staining characterised by a special physical or galenical form, e.g. emulsions, microspheres
- A61K49/0069—Preparation for luminescence or biological staining characterised by a special physical or galenical form, e.g. emulsions, microspheres the agent being in a particular physical galenical form
- A61K49/0089—Particulate, powder, adsorbate, bead, sphere
- A61K49/0091—Microparticle, microcapsule, microbubble, microsphere, microbead, i.e. having a size or diameter higher or equal to 1 micrometer
- A61K49/0093—Nanoparticle, nanocapsule, nanobubble, nanosphere, nanobead, i.e. having a size or diameter smaller than 1 micrometer, e.g. polymeric nanoparticle
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F222/00—Copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by a carboxyl radical and containing at least one other carboxyl radical in the molecule; Salts, anhydrides, esters, amides, imides, or nitriles thereof
- C08F222/30—Nitriles
- C08F222/32—Alpha-cyano-acrylic acid; Esters thereof
- C08F222/324—Alpha-cyano-acrylic acid butyl ester
Abstract
本发明涉及包含共聚或均聚化合物的纳米颗粒，所述共聚或均聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中每个R1独立地选自2‑乙基己基、2‑苯基乙基、新戊基、1‑戊基、2‑戊基、3‑戊基、3,3‑二甲基‑1‑丁基、3‑甲基丁基、1‑庚基、2‑庚基和3‑庚基组成的组；并且其中纳米颗粒进一步包含活性剂。本发明还提供包含所述纳米颗粒的组合物，以及所述纳米颗粒用于治疗或诊断，例如用于在治疗癌症或感染，或用于诊断成像。
Description
技术领域
本发明涉及包含由氰基丙烯酸酯单体形成的共聚或均聚化合物的纳米颗粒。活性剂被封装在纳米颗粒中。本发明还涉及包含所述纳米颗粒的组合物及其在医学(例如药物递送和分子成像)、农业、水产养殖、保健营养品、食品/饲料应用、化妆品、自愈、家庭应用和身体护理中的应用。
背景技术
纳米封装的应用为许多市场提供了令人兴奋的可能性，其中，挥发性的、敏感的或有害的材料/化合物需要受到保护/隐藏/掩蔽/分离和递送/共同递送至所需的目标。这在快速发展的纳米医学领域尤为重要。
纳米颗粒的应用已开始显示出特殊价值的两个领域是药物递送和分子成像。然而，除了医学应用之外，纳米颗粒在各种材料/化合物(例如芳香化合物、香料、调味剂、染料、保健营养品、除草剂和杀虫剂)的纳米封装方面也非常有利。
用于递送治疗剂的纳米颗粒有可能规避与传统递送方法相关的许多挑战，包括患者对处方治疗的依从性不足、不良副作用和由于缺乏靶向递送和次优生物分布而导致的临床疗效不佳。用于药物递送的纳米颗粒的重要技术优势包括递送不溶于水的和不稳定的药物的能力、疏水性和亲水性治疗剂的结合以及运用各种给药途径的能力。纳米颗粒递送系统还可以促进靶向药物递送和控释应用，提高作用部位的药物生物利用度，减少给药频率和总剂量大小，从而最大限度地减少副作用。由于这些潜在优势，已经研究了多种纳米颗粒系统作为药物递送载体的应用。这些包括聚合物胶束、聚合物、聚合物颗粒、脂质体、低密度脂蛋白、固体-脂质体纳米颗粒、树枝状聚合物、亲水性药物-聚合物复合物和陶瓷纳米颗粒。
基于纳米颗粒的显像剂可能具有增加了的循环时间并改变了水溶性，从而避免了快速清除。迄今为止应用的许多微粒成像系统专为血池和淋巴系统成像而设计。靶向成像系统的应用有增加在目标部位积累的可能，从而提高灵敏度，而因此能够实现血池和淋巴系统外的分子成像。预想含有治疗剂和显像剂的靶向纳米颗粒能够使单一载体应用于疾病的诊断、治疗和后续监测。
聚合物纳米颗粒在医学领域受到了极大的关注，特别是那些包含可生物降解的聚合物(如聚(乳酸)、聚(乙醇酸)和聚(氰基丙烯酸烷基酯))的聚合物纳米颗粒，然而由于高清除率以及它们分布于整个身体的倾向，包括进入健康组织，迄今为止开发出的那些聚合物纳米颗粒的效果有限。
因此，应用纳米颗粒实现活性剂的控制递送仍然是一个挑战，并且需要开发能够延长活性剂递送的生物相容性组合物，与单独施用活性剂相比，所述生物相容性组合物提供延长的循环时间和增加的稳定性的。
长循环的纳米颗粒，即在循环系统中具有增强稳定性的纳米颗粒，已被研究并有助于解决这些问题。这些类型的纳米颗粒具有在纳米颗粒周围的亲水壳，称为隐形电晕。正如在Nicolas和Couvreur Rev.Nanomed.Nanobiotechnol.,2009,1,111-127,Storm等人,Adv Drug Deliv Rev 1995,17:31-48和Stolnik,Illum&Davis,Adv Drug Deliv Rev1995,16:195-214中所讨论的，隐形结构的纳米颗粒是众所周知的，并且已经通过各种纳米颗粒核和一系列聚合物壳制备。它们在治疗剂的封装中的应用也在例如US 2002/0034474中描述了。可商购的实例是
其包含含有多柔比星的聚乙二醇化脂质体。
制备纳米颗粒的许多方法是已知的，例如，乳液聚合、自组装和纳米沉淀。在例如US 2008/0138418中描述了阴离子乳液聚合，以及在Chauvierre，C.等人.(2003)Macromolecules 36(16):6018-6027和Lemarchand,C.等人.(2004).58(2)：327-341中描述了自由基聚合。
例如Landfester在Macromol.Rapid Comm.2001,22,896-936和Landfester等人在Macromolecules 1999,32,5222-5228中所公开，已知细乳液法用于生产平均尺寸通常在1-1000nm、最通常为50-500nm范围内的纳米颗粒。该方法首次被Ugelstad等人.(1973)Emulsion polymerization:initiation of polymerization in monomer droplets.JPolym Sci Polym Lett Ed 11:503–513公开。
聚(氰基丙烯酸烷基酯)纳米颗粒，PACA NP，是本领域已知的(Vauthier,C.,JDrug Target.2019 27(5-6)p502-524)。
在US 2008/182776和US 2010/015165中描述了用于制备聚(氰基丙烯酸烷基酯)纳米颗粒的细乳液聚合方法。在WO 2014/191502中还描述了一种用于制备聚(氰基丙烯酸烷基酯)纳米颗粒的有利方法。
聚(氰基丙烯酸烷基酯)(PACA)最初被开发并被批准用作外科胶水，由于其高负载能力和生物降解性，后来被证明是一种很有前途的药物载体，目前正在多个后期临床试验中使用(Kumari A,Yadav SK,Yadav SC,Colloids Surf B Biointerfaces.2010Jan 1；75(1):1-18,Torchilin VP Nat Rev Drug Discov.2014Nov；13(11):813-27)。PACA纳米颗粒满足用作医学或药用产品的基本要求，因为它们是可生物降解的，并且它们在细胞培养中的降解速度从几小时到几天不等，可以通过选择生产方法和所用的单体来控制(SulheimE,Baghirov H,von Haartman E,
A,
AK,
Y,Davies C de L,JNanobiotechnology.2016年1月8日；14():1.)。
PACA纳米颗粒由可聚合的氰基丙烯酸酯单体制成。氰基丙烯酸酯在本领域中被称为强速效粘合剂，具有许多应用，包括工业、医学和家庭应用。由于氰基丙烯酸酯主要用作粘合剂，因此氰基丙烯酸酯的可用性由胶水制造商主导。因此，用于生产应用于医学的纳米颗粒的最常用单体是氰基丙烯酸1-丁酯、氰基丙烯酸2-乙基-丁酯、氰基丙烯酸1-辛酯和氰基丙烯酸异己酯。另一种先前已知的单体是氰基丙烯酸炔丙酯(PPCA)。Baier等人(Macromolecules 2012,45,3419-3427)已经证明，由氰基丙烯酸正丁酯和氰基丙烯酸炔丙酯的组合制成的纳米颗粒可以与基于点击化学反应的铜一起使用，以使此类纳米胶囊功能化。
人们越来越意识到医学递送系统中使用的药物、添加剂和其他化合物的毒性，特别是随着纳米毒理学已成为一个大的研究领域。评估纳米颗粒(NP)的毒性具有挑战性，因为毒性效应可能来自完整的纳米颗粒及其降解产物。对于完整的和部分降解的纳米颗粒，尺寸、形状、表面电荷、表面分子和核材料都可能是毒性作用的来源。此外，预计纳米颗粒的细胞进入的途径和细胞内积累也很重要(Tekle C,Deurs Bv,Sandvig K,Iversen TG NanoLett.2008Jul；8(7):1858-65)。由于NP化学中看似微小的变化会导致效能和安全性的巨大差异，因此表征生物系统中的NP相互作用非常重要。
此外，大多数聚合物纳米颗粒的负载能力有限，通常低于脂质体。因此，为了在疾病部位获得足够剂量的活性剂，通常需要使用更多数量的颗粒。有鉴于此，聚合物的毒性特征很重要，并且对低毒性进行评估以实现良好的风险/收益比。因此，低毒性和提高的负载能力是聚合物纳米颗粒的理想特征。
在Sulheim等人,Int J Mol Sci.2017Nov；18(11):2454中已研究了已知PACA NP的细胞毒性。之前已知单体对其他类似纳米颗粒的毒性有显著影响(Int.J.Pharm.1992；84:13–22.doi:10.1016/0378-5173(92)90210-S)。Sulheim等人于2017年得出的结论是，了解纳米颗粒的毒性具有挑战性，并且没有单一的特性可以解释观察到的PACA纳米颗粒的毒性作用。
本发明的目的是提供新型和改进的纳米颗粒及其在医学中的应用。一个特别的目标是提供低毒性的新型纳米颗粒。此外，如果颗粒表现出改进的负载能力或如果改进范围化合物的负载是可能的，则这是特别令人感兴趣的。
发明内容
本发明涉及由氰基丙烯酸酯单体制备的纳米颗粒，所述单体选自氰基丙烯酸2-乙基己酯(2-EHCA)、氰基丙烯酸2-苯基乙酯(2-PECA)、氰基丙烯酸新戊酯(NPCA)、氰基丙烯酸1-戊酯(1-PCA)、氰基丙烯酸2-戊酯(2-PCA)、氰基丙烯酸3-戊酯(3-PCA)、氰基丙烯酸3,3-二甲基-1-丁酯(3,3-DMBCA)、氰基丙烯酸1-庚酯(1-HPCA)、氰基丙烯酸2-庚酯(2-HPCA)、氰基丙烯酸3-庚酯(3-HPCA)或氰基丙烯酸3-甲基丁酯(3-MBCA)组成的组。
一方面，本发明提供了包含共聚或均聚化合物的纳米颗粒，所述共聚或均聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元：
其中每个R1独立地选自2-乙基己基、2-苯基-乙基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组；并且其中纳米颗粒进一步包含活性剂。
纳米颗粒可由细乳液的阴离子聚合或自由基聚合制成。
纳米颗粒可由包含氰基丙烯酸3-甲基丁酯的细乳液的阴离子聚合制成。
纳米颗粒包含活性剂。活性剂可以是医学成分，例如活性药物成分(API)，即治疗剂或诊断剂。活性剂优选封装在纳米颗粒内。
活性剂可选自阿培利司(alpelisib)、紫杉烷(如卡巴他赛(CBZ)和多西他赛)、铂类(platin)(如奥沙利铂)、莫匹罗星、贝立司他、尼罗红或NR668。
纳米颗粒可包含共聚化合物，该共聚化合物由包含可聚合氰基丙烯酸酯单体和活性剂的细乳液的阴离子聚合制成。
在一个实施方案中，活性剂是卡巴他赛。
在一个实施方案中，活性剂是阿培利司。
在一个实施方案中，活性剂是奥沙利铂。
本发明还提供了一种形成本发明所述纳米颗粒的方法，该方法包括水包油细乳液的阴离子聚合或自由基聚合，其中所述细乳液包含：
(i)根据式2的氰基丙烯酸酯单体
其中每个R1独立地选自2-乙基己基、2-苯基-乙基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组；
(ii)至少一种表面活性剂；
(iii)一种或多种活性剂；
(iv)任选的阴离子聚合引发剂或自由基聚合引发剂；和
(v)任选的阴离子阻聚剂和/或自由基阻聚剂。
本发明还提供一种组合物，其包含一种或多种如本文所定义的纳米颗粒，以及任选的一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
本发明还提供如本文所定义的纳米颗粒，或含有所述纳米颗粒的组合物，在治疗或诊断中的应用。
本发明还提供如本文所定义的纳米颗粒，或包含所述纳米颗粒的组合物，在药物递送中的应用。
本发明还提供如本文所定义的纳米颗粒，或包含所述纳米颗粒的组合物，在治疗癌症中的应用。
本发明还提供如本文所定义的纳米颗粒，或包含所述纳米颗粒的组合物，在治疗人体或动物体的感染中的应用。
本发明还提供如本文所定义的纳米颗粒，或包含所述纳米颗粒的组合物，在(人体或动物体的)诊断成像中的应用。
本发明还提供了一种治疗癌症的方法，该方法包括将(有效量的)如本文定义的纳米颗粒或含有所述纳米颗粒的组合物施用于有需要的受试者，优选人体。
本发明还提供了一种治疗感染的方法，该方法包括将(有效量的)如本文定义的纳米颗粒或含有所述纳米颗粒的组合物施用于有需要的受试者，优选人体。
本发明还提供了如本文所定义的纳米颗粒在(人体或动物体的)分子成像、农业、水产养殖、离体抗菌应用、营养品、食品/饲料应用、化妆品、自愈、家庭应用或身体护理中的应用，优选在分子成像中的应用。
本发明由所附权利要求限定。在下面的详细描述中公开了本发明的进一步可选特征和术语的定义。
定义
如本文所用，缩写“ACA”包括氰基丙烯酸烷基酯和氰基丙烯酸芳基取代的烷基酯，即氰基丙烯酸烷基酯进一步包含芳基侧基。
如本文所用，术语“PACA”是指聚(氰基丙烯酸烷基酯)，即由ACA单体形成的聚合物。
特定的氰基丙烯酸烷基酯单体的聚合将产生特定的聚合物。因此，聚合氰基丙烯酸丁酯(BCA)单体将产生聚(氰基丙烯酸丁酯)，本文称为“PBCA”。
如本文所用，术语“POCA”是指聚(氰基丙烯酸辛酯)，其是由氰基丙烯酸辛酯(OCA)单体形成的聚合物。
如本文所用，术语“PEBCA”是指聚(氰基丙烯酸2-乙基丁酯)，其是由氰基丙烯酸2-乙基丁酯(EBCA)单体形成的聚合物。
如本文所用，术语“NP”是指纳米颗粒。因此，术语“PACA NPs”是指聚(氰基丙烯酸烷基酯)纳米颗粒。如本文所用，术语“纳米颗粒”是指最大尺寸小于1000nm，例如1nm至1000nm的任何颗粒。优选地，术语“纳米颗粒”是指最大尺寸为30至500nm的任何颗粒。
术语“靶向部分”在本文中用于描述可以结合到纳米颗粒表面并导致选择性结合到特定细胞或生物表面的任何分子。
为清楚起见，2-乙基己基、2-苯基-乙基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基的结构如下所示：
如本文所用，术语“2-EHCA”、“2-PECA”、“NPCA”、“1-PCA”、“2-PCA”、“3-PCA”、“3,3-DMBCA”、“1-HPCA”、“2-HPCA”、“3-HPCA”和“3-MBCA”是指氰基丙烯酸2-乙基己酯、氰基丙烯酸2-苯基乙酯、氰基丙烯酸新戊酯、氰基丙烯酸1-戊酯、氰基丙烯酸2-戊酯、氰基丙烯酸3-戊酯，氰基丙烯酸3,3-二甲基-1-丁酯、氰基丙烯酸1-庚酯、氰基丙烯酸2-庚酯、氰基丙烯酸3-庚酯和氰基丙烯酸3-甲基丁酯。
如本文所用，术语“亚单元”是指与其他亚单元一起形成聚合物的单个单元。也就是说，聚合物由许多重复的亚单元组成。术语“亚单元”有时也称为“重复单元”、“单体单元”、“单体残基”或“聚体”。
如本文所用，术语“包含”或“含有”包括术语“由……组成”。本发明涉及包含共聚或均聚化合物的纳米颗粒，所述共聚或均聚化合物包含本文指定的亚单元(例如式2A或式2B的亚单元)。因为“包含”具有开放的解释，其他未指定的亚单元也可能存在于共聚或均聚化合物中。
本发明还包括包含基本上由本文指定的亚单元(例如式2A或式2B的亚单元)组成的共聚或均聚化合物的纳米颗粒。在这种情况下，除了在相关实施方案中具体列举的那些亚单元(例如式2A或式2B的亚单元)之外，特定的另外的亚单元可以存在于共聚或均聚化合物中，即那些没有实质上影响共聚或均聚化合物的基本特性的亚单元。
本发明还包括包含由本文指定的亚单元组成的共聚或均聚化合物的纳米颗粒。在这种情况下，除了相关实施方案中具体列举的那些亚单元(例如式2A或式2B的亚单元)之外，共聚或均聚化合物中不能存在亚单元。
具体实施方式
本发明提供包含聚(氰基丙烯酸酯)均聚物或共聚物的纳米颗粒。
制备聚(氰基丙烯酸酯)纳米颗粒，PACA NPs，的一种方法，是通过以下方案由氰基丙烯酸酯单体(ACA)制备它们：
本文中使用的氰基丙烯酸酯是氰基丙烯酸的各种酯。随着分子量的增加，树脂中的丙烯酰基会迅速聚合形成长链。在生物系统中，PACA纳米颗粒降解为醇类和较短的低分子量水溶性聚(氰基丙烯酸)片段(DR Robello、TD Eldrigdge、MT Swanson、J.Polym Sci.：A部分：Pol.Chem.37,4570-4581(1999).Degradation and Stabilization ofpolycyanoacrylates)。这种降解如下图所示：
测试中使用的氰基丙烯酸酯和对照物，及其缩写和相应的醇，列于表1中。
表1：醇、氰基丙烯酸酯、化学结构和缩写。
本发明提供了包含共聚或均聚化合物的纳米颗粒，所述共聚或均聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元：
其中每个R1独立地选自2-乙基己基、2-苯基-乙基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组；
并且其中纳米颗粒进一步包含活性剂。
本发明还提供了包含根据式1的共聚或均聚化合物的纳米颗粒：
其中每个R2独立地选自具有1至15个非氢原子的基团；
条件是至少一个R2基团是R1基团，如上所定义；
并且其中纳米颗粒进一步包含活性剂。
整数‘n’可为大于1的任何整数。然而，优选n为5或更大，更优选为10或更大。优选地，n为5000或更小，更优选为3300或更小。最优选是10至3300的范围。
因此，本发明的共聚或均聚化合物的分子量优选为1000至1,000,000g/mol，更优选为2000至700,000g/mol。
共聚或均聚化合物的端基一般为-H和-OH，即如下所示：
优选地，每个非氢原子是碳原子。
每个R2基团可以是直链或支链的，并且可以包括芳基。
优选地，每个R2独立地选自具有3至10个非氢原子的基团。
更优选地，每个R2独立地选自具有5至8个非氢原子的基团。
合适的R2基团包括C1-10烷基、C1-10链烯基、C1-10炔基和C1-8烷基-C5-7芳基。
优选的R2基团包括C3-8烷基、C3-8链烯基、C3-8炔基和C1-5烷基-C5-7芳基。
更优选的R2基团包括C5-8烷基、C3炔基和C1-3烷基-C6芳基。
特别合适的R2基团包括本文中作为合适R1基团列出的所有那些基团，以及1-辛基、1-丁基、2-乙基丁基、4-甲基戊基、1-己基、乙基和炔丙基。
本发明中使用的聚合物可以是均聚物或共聚物。
当聚合物是均聚物时，所有的氰基丙烯酸酯亚单元都是相同的。即，纳米颗粒包含由根据式2A的单一重复的氰基丙烯酸酯亚单元组成的均聚化合物。
换言之，在这种情况下，纳米颗粒将包含根据式1A的化合物：
其中R1是2-乙基己基、2-苯基-乙基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基，或3-庚基。
或者，当聚合物为共聚物时，纳米颗粒将包含含有至少两个不同亚单元的共聚化合物。这些亚单元可以是根据式2A的两种或更多种不同的亚单元，或者可以是根据式2A的亚单元和其他(不同的)亚单元。其他亚单元可以是氰基丙烯酸酯亚单元，但也可以是由任何其他合适的共聚单体形成的亚单元。用于形成本发明的聚合物的合适的共聚单体在下面进一步讨论。
额外的亚单元可以是氰基丙烯酸酯亚单元，使得纳米颗粒包含共聚化合物，该共聚化合物包含(i)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，和(ii)其他(不同的)氰基丙烯酸酯亚单元。优选地，这些其他氰基丙烯酸酯亚单元是式2B的氰基丙烯酸酯亚单元：
其中每个R3独立地选自具有1至15个非氢原子的基团，条件是R3与R1不同。即，R3不得为2-乙基己基、2-苯基-乙基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基或3-庚基。
优选地，每个非氢原子是碳原子。
每个R3基团可以是直链或支链的，并且可以包括芳基。
更优选地，每个R3独立地选自具有3至10个非氢原子的基团，更优选地具有5至8个非氢原子的基团。
合适的R3基团包括C1-10烷基、C1-10链烯基、C1-10炔基和C1-8烷基-C5-7芳基。
优选的R3基团包括C3-8烷基、C3-8链烯基、C3-8炔基和C1-5烷基-C5-7芳基。
更优选的R3基团包括C5-8烷基、C3炔基和C1-3烷基-C6芳基。
特别合适的R3基团包括1-辛基、1-丁基、2-乙基丁基、4-甲基戊基、1-己基、乙基和炔丙基，特别优选炔丙基。
优选地，纳米颗粒包含含有两种或更多种、优选两种不同的根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元的共聚化合物。
在本文描述的本发明的所有实施方案中，除非另有说明，优选聚合物中5％或更多、更优选10％或更多、甚至更优选30％或更多的亚单元是根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元。
此外，在本文描述的本发明的所有实施方案中，除非另有说明，优选聚合物中50％或更多，更优选75％或更多，更优选85％或更多，甚至更优选95％或更多，并且最优选99％或更多的亚单元是根据式2A或式2B的氰基丙烯酸酯亚单元，优选根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元。其他亚单元可以是由交联剂形成的亚单元。
当聚合物是均聚物时，式1的所有R2基团都相同，并且选自本文定义的R1基团之一。然而，R1为2-苯基-乙基或新戊基的均聚物在室温和压力下(25℃和1个大气压)为固体。因此，优选当R1是2-苯基-乙基或新戊基时，聚合物是共聚物。
因此优选的是，当R1是2-苯基-乙基或新戊基时，相应的亚单元占聚合物中亚单元的5％至50％，更优选10％至40％。换言之，在这种情况下，优选式1中的R2基团的5％至50％，更优选10％至40％是2-苯基-乙基或新戊基。
如上所述，剩余的亚单元可以是任何合适的(不同的)亚单元。然而，优选其他氰基丙烯酸酯亚单元，最优选不同的式2A或2B的亚单元。即，优选剩余的亚单元是式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1是不同于2-苯基-乙基或新戊基，或式2B的氰基丙烯酸酯亚单元。
相反，当R1是2-乙基己基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基或3-庚基时，优选相应的亚单元占聚合物中亚单元的50％或更多，更优选75％或更多，甚至更优选90％或更多，最优选95％或更多。在该实施方案中，优选所有剩余的亚单元是式2A的亚单元(其中R1是2-苯基-乙基或新戊基)，或式2B的亚单元。
换言之，式1中的R2基团的50％或更多，更优选75％或更多，甚至更优选90％或更多，最优选95％或更多，是2-乙基己基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基或3-庚基。
醇毒性
不同的单体在生物系统中具有不同的毒性。这某种程度上是由于氰基丙烯酸酯的侧链(即烷基或芳基-烷基侧链)，将会生物降解形成不同的醇。基于该知识，发明人提出选择具有低的内在毒性的醇也可以影响PACA聚合物纳米颗粒的整体毒性。
众所周知，单体对其他类似纳米颗粒的毒性有显著影响(Lherm C等人，Int.J.Pharm.1992；84:13–22.doi:10.1016/0378-5173(92)90210-S)。细胞毒性的差异可归因于降解速率和降解产物(醇)的差异，这可以通过由快速降解的纳米颗粒导致释放的聚合物链和醇的局部浓度高进行解释。这将会解释现有技术中的与PEBCA和POCA相比观察到的PBCA更高的毒性。然而，正如在Sulheim,2017(Sulheim et al,Int J Mol Sci.2017Nov；18(11):2454)所报道的那样，所使用的三种材料中降解最慢的聚合物POCA也引起了最高的细胞毒性作用，而具有中等降解的PEBCA，表现出最低的毒性。POCA毒性可以用辛醇的高亲油性来解释，辛醇比更亲水的丁醇和乙基己醇更容易被细胞吸附。然而，正如在Sulheim,2017(Sulheim et al,Int J Mol Sci.2017Nov；18(11):2454)所解释的那样，得出的结论是理解纳米颗粒的毒性具有挑战性，并且没有单一的特性可以解释观察到的PACA纳米颗粒的毒性效应。
本发明人已经选择并筛选了许多醇在相关的国际标准细胞系(例如，人肝细胞癌、Hep G2细胞系和猪肾上皮细胞系LLC-PK1)中的毒性(见表3)。结果证明了可变的毒性。选择在至少1个细胞系中表现出降低毒性的醇(例如，与OCA、BCA和EBCA对照相比，在3％醇条件下细胞活性增加，见表3)被选中作为感兴趣的合成目标用于纳米颗粒制备。请注意，虽然苯乙醇在3％醇中显示出显著的毒性，但它被选择用于测试可以使改善范围的活性剂被封装在包含相应单体的新的PACA纳米颗粒中的结构特征。据推测，在某些情况下，聚(苯基乙基氰基丙烯酸酯)，PPECA，也可以提高API负载。
结果表明，某些醇的毒性远低于其他醇(见表3)。根据毒性测试的结果，确定了最有前途的醇，并选择了相关的ACA单体(表1)来合成纳米颗粒。
通过标准细乳液聚合方法制备空颗粒，用于测定颗粒对国际标准细胞系(Hep G2和LLC-PK1)的毒性。颗粒由单体氰基丙烯酸2-乙基己酯(2-EHCA)、氰基丙烯酸2-苯基乙酯(2-PECA)、氰基丙烯酸新戊酯(NPCA)、氰基丙烯酸1-戊酯(1-PCA)、氰基丙烯酸2-戊酯(2-PCA)、氰基丙烯酸3-戊酯(3-PCA)、氰基丙烯酸3,3-二甲基-1-丁酯(3,3-DMBCA)、氰基丙烯酸1-庚酯(1-HPCA)、氰基丙烯酸2-庚酯(2-HPCA)、氰基丙烯酸3-庚酯(3-HPCA)或氰基丙烯酸3-甲基丁酯(3-MBCA)制成。由氰基丙烯酸1-丁酯(BCA)、氰基丙烯酸1-辛酯(OCA))和氰基丙烯酸2-乙基丁酯(EBCA)制成的颗粒用作对照。结果显示了将细胞活性降低50％(IC50)所需的浓度，并且在不同细胞系之间略有不同。测试表明，在现有技术已知的单体中，由EBCA形成的聚合物的毒性比由BCA形成的聚合物低2倍，而由BCA形成的聚合物的毒性比由OCA形成的聚合物略低。空颗粒的毒性很重要，因为可以使用的无毒性颗粒越多，就可以在不会冒不必要的副作用的风险下输送的活性剂越多。
所提供的包含由氰基丙烯酸2-乙基己酯(2-EHCA)、氰基丙烯酸2-苯基-乙酯(PECA)、氰基丙烯酸新戊酯(NPCA)、氰基丙烯酸1-戊酯(1-PCA)、氰基丙烯酸3,3-二甲基-1-丁酯(3,3-DMBCA)、氰基丙烯酸1-庚酯(1-HPCA)、氰基丙烯酸2-庚酯(2-HPCA)、氰基丙烯酸3-庚酯(3-HPCA)或氰基丙烯酸3-甲基丁酯(3-MBCA)形成的聚合物的纳米颗粒都表现出比市场领先者(例如，包含由OCA形成的聚合物的纳米颗粒)更低的毒性。
特别是，在不同细胞系中的测试表明，与由常用的OCA、BCA、2-EBCA形成的聚合物相比，选自2-EHCA、1-HPCA和3-MPCA组成的组中的氰基丙烯酸酯单体形成的聚合物具有更低或类似的毒性(见表2)。
结果还表明，高达33％的PECA可以共混进入颗粒而不影响颗粒的毒性。
表2：不同细胞系中的颗粒毒性，MTT和LDH测试。
由于它们相对低的毒性，如表2中的结果所示，可以优选纳米颗粒包含共聚或均聚化合物，所述共聚或均聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中每个R1独立地选自2-乙基己基、2-苯基-乙基、新戊基、1-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组。
优选地，每个R1独立地选自2-乙基己基、新戊基、3-甲基丁基、1-庚基和3-庚基组成的组。
更优选地，每个R1独立地选自2-乙基己基、3-甲基丁基和1-庚基组成的组；或选自2-乙基己基、新戊基和3-庚基组成的组。
甚至更优选地，每个R1独立地选自2-乙基己基和1-庚基组成的组。
最优选地，R1是2-乙基己基。
表3：醇毒性测定的结果，以在细胞系中3.00wt％醇的剩余活性(％)给出
由于表3中所示的相应醇的低毒性，可以优选纳米颗粒包含共聚或均聚化合物，所述共聚或均聚化合物包含式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中每个R1独立地选自2-乙基己基、1-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组。
更优选地，每个R1独立地选自3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基和3-庚基组成的组；或选自2-乙基己基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基和3-庚基组成的组；或选自3-戊基、3,3二甲基-1-丁基和3-庚基组成的组。
甚至更优选地，每个R1独立地选自3,3-二甲基-1-丁基和3-庚基组成的组。
可聚合氰基丙烯酸酯单体
本发明的纳米颗粒包含由氰基丙烯酸酯单体形成的聚合物，其聚合形成所述聚合物。在纳米颗粒的制备中应用这些单体来制备可生物降解的聚合物已被广泛报道。氰基丙烯酸酯可以是单官能或双官能丙烯酸酯，即包含单个或多个丙烯酸酯官能团。
在本发明的情况下，与OCA/BCA/EBCA相比，氰基丙烯酸某些直链或支链烷基酯单体和氰基丙烯酸芳基取代的烷基酯已被证明是有优势的。优选的单体是C5或C7和选定的C8ACA的这些。可以使用单一单体，或者可以使用不同ACA的混合物。
优选的ACA包括氰基丙烯酸2-乙基己酯(2-EHCA)、氰基丙烯酸2-苯基乙酯(2-PECA)、氰基丙烯酸新戊酯(NPCA)、氰基丙烯酸1-戊酯(1-PCA)、氰基丙烯酸2-戊酯(2-PCA)、氰基丙烯酸3-戊酯(3-PCA)、氰基丙烯酸3,3-二甲基-1-丁酯(3,3-DMBCA)、氰基丙烯酸1-庚酯(1-HPCA)、氰基丙烯酸2-庚酯(2-HPCA)、氰基丙烯酸3-庚酯(3-HPCA)或氰基丙烯酸3-甲基丁酯(3-MBCA)。
对于侧链的不同选择对纳米颗粒的物理和生理特性开放(open)可变性。特别是，已经证明负载能力和要被封装的活性剂的范围都受到生产纳米颗粒时所用ACA的选择的影响。
如上所解释，与先前已知的用于制备PACA纳米颗粒的单体(例如OCA、BCA和EBCA)相比，优选的ACA在体外研究中表现出较低的毒性。将毒性和性能与最初的醇毒性结果进行比较，并与当今用于药物递送的市场领先者的一个例子，即氰基丙烯酸2-乙基丁酯(PEBCA)进行比较。如所证明的，与PEBCA相比，当纳米颗粒包括由属于2-乙基己基(2-EHCA)、3-甲基丁基(3-MBCA)和1-庚基(1-HPCA)组成的组的ACA形成的聚合物时，在毒性方面可以获得令人惊讶的良好结果。
因此，在一个实施方案中，本发明的纳米颗粒包含含有根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元的共聚或均聚化合物，其中每个R1独立地选自2-乙基己基、3-甲基丁基和1-庚基组成的组。
不希望受理论束缚，有人认为单体的性质也影响聚合物的降解速率。单体越疏水(即烷基链越长)，降解速度越慢，这可能是由于疏水性更强的聚合物中的水含量较低。
因此，在另一个实施方案中，提供了不同链长的ACA的混合物(共混物)，例如，一种具有短烷基链，另一种具有长烷基链，如1-PCA与2-EHCA。不同单体的共混物还可使最终颗粒获得不同的特性。
因此，在一个实施方案中，本发明的纳米颗粒包含共聚化合物，其包含(i)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1是2-乙基己基；(ii)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1是1-戊基。
还证明了所有选定的新单体与氰基丙烯酸炔丙酯(PPCA)都能很好地共混。因此，本发明包括由任意的氰基丙烯酸2-乙基己酯(2-EHCA)、氰基丙烯酸2-苯基乙酯(2-PECA)、氰基丙烯酸新戊酯(NPCA)、氰基丙烯酸1-戊酯(1-PCA)、氰基丙烯酸2-戊酯(2-PCA)、氰基丙烯酸3-戊酯(3-PCA)、氰基丙烯酸3,3-二甲基-1-丁酯(3,3-DMBCA)、氰基丙烯酸1-庚酯(1-HPCA)、氰基丙烯酸2-庚酯(2-HPCA)、氰基丙烯酸3-庚酯(3-HPCA)或氰基丙烯酸3-甲基丁酯(3-MBCA)与氰基丙烯酸炔丙酯(PPCA)的混合物形成的聚合物。
因此，纳米颗粒可包含共聚化合物，其包含(i)根据式2A(其中R1如本文所定义)的氰基丙烯酸酯亚单元；(ii)根据式2B的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R3是炔丙基(即，-CH2-C≡CH)。
当存在根据式2B的氰基丙烯酸酯亚单元时，优选小于25％，更优选0.5％至15％，甚至更优选1％至10％的亚单元是根据式2B的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R3是炔丙基。
因此，优选75％或更多，更优选85％至99.5％，甚至更优选90％至99％的亚单元是根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元。
举个例子，包含这种亚单元共混物的聚合物能够生产纳米颗粒，以与基于点击反应的铜一起使用以使所得的PACA纳米颗粒功能化。这是一个很大的优势，因为这允许纳米颗粒的靶向，例如通过掺入靶向部分进行主动靶向。
纳米颗粒可以包含具有不同有机侧基的类型的ACA的混合物。不同有机侧基包括例如包含烷基链和/或芳基的侧基。2-PECA是为此目的能让人特别感兴趣的单体，因为由于2-PECA是固体而优选与共聚单体共混。由于其结构，包含2-PECA的混合物可以提高所选活性剂的溶解度。
优选的纳米颗粒包括由2-PECA与ACA混合的共混物形成的聚合物，该ACA选自氰基丙烯酸2-乙基己酯(2-EHCA)、氰基丙烯酸新戊酯(NPCA)、氰基丙烯酸1-戊酯(1-PCA)、氰基丙烯酸2-戊酯(2-PCA)、氰基丙烯酸3-戊酯(3-PCA)、氰基丙烯酸3,3-二甲基-1-丁酯(3,3-DMBCA)、氰基丙烯酸1-庚酯(1-HPCA)、氰基丙烯酸2-庚酯(2-HPCA)、氰基丙烯酸3-庚酯(3-HPCA)或氰基丙烯酸3-甲基丁酯(3-MBCA)组成的组。特别优选的是根据本发明的纳米颗粒，其包含由氰基丙烯酸2-苯基乙酯(2-PECA)与2-EHCA或1-HPCA共混形成的聚合物。
其他优选的纳米颗粒包含氰基丙烯酸酯均聚物或由氰基丙烯酸酯均聚物组成，该均聚物是由选自氰基丙烯酸2-乙基己酯(2-EHCA)、氰基丙烯酸1-戊酯(1-PCA)、氰基丙烯酸2-戊酯(2-PCA)、氰基丙烯酸3-戊酯(3-PCA)、氰基丙烯酸3,3-二甲基-1-丁酯(3,3-DMBCA)、氰基丙烯酸1-庚酯(1-HPCA)、氰基丙烯酸2-庚酯(2-HPCA)、氰基丙烯酸3-庚酯(3-HPCA)或氰基丙烯酸3-甲基丁酯(3-MBCA)组成的组中的单一单体形成。
在另一个实施方案中，提供了包含氰基丙烯酸酯共聚物或由氰基丙烯酸酯共聚物组成的纳米颗粒，即由至少两种单体形成的纳米颗粒。在ACA单体的总量中，混合第一ACA单体和第二ACA单体，其中第一单体优选以所用单体总量的1wt％至99wt％的量存在。
在又一个实施方案中，第一ACA单体优选以单体总量的65-99wt％，更优选67-99wt％，更优选75-99wt％，甚至更优选95-99wt％的量存在。
除了所选择的ACA单体之外，纳米颗粒还可以包含由其他共聚单体形成的聚合物。如果这些共聚单体也是生物相容的或可生物降解的，则是优选的。合适的共聚单体包括但不限于丙烯酸酯、乙烯基酯、乙烯基醚、乙烯基环氧化物、环状硅氧烷和内酯。根据所需的颗粒性质，所述共聚单体也可以是交联剂。
交联剂优选为酸酐、丙烯酸酯或双氰基丙烯酸酯，例如单乙二醇二甲基丙烯酸酯或聚乙二醇二甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸酐、1,6-己二醇双氰基丙烯酸酯或亚甲基二甲基丙烯酸酯。
可聚合单体，例如氰基丙烯酸酯单体(例如式2的单体)，优选占油相的25wt％至99.5wt％，更优选30wt％至70wt％。
所选择的活性剂
本发明的纳米颗粒负载有活性剂，即活性剂封装在纳米颗粒内。活性剂可以是治疗剂或诊断剂。治疗剂通常称为API，即活性药剂。由于用于制备本发明纳米颗粒的单体的溶解度，可以封装宽范围的活性剂。
活性剂可以是抗癌剂、抗感染剂、中枢神经系统剂(即影响中枢神经系统的药物)、抗炎剂或诊断/显像剂。
活性剂优选为抗癌剂、抗感染剂(例如抗微生物剂)、中枢神经系统剂或诊断/显像剂。
更优选地，活性剂是抗癌剂、抗感染剂(例如抗微生物剂)或诊断/显像剂。
合适的抗癌剂包括紫杉烷类(例如卡巴他赛和多西他赛)、铂类或基于铂的抗肿瘤药物(例如顺铂、奥沙利铂和卡铂，优选奥沙利铂)、组蛋白脱乙酰酶抑制剂(例如贝立司他)，以及磷酸肌醇3-激酶抑制剂(例如阿培利司)。
合适的抗感染剂包括抗微生物剂和抗真菌剂。优选的抗感染剂是抗微生物剂，优选抗细菌剂如莫匹罗星。
合适的诊断/显像剂包括染色剂，优选亲油性染色剂，例如尼罗红(例如NR668)。
更优选地，活性剂是抗癌剂、抗细菌剂或诊断/显像剂。
甚至更优选地，活性剂是抗癌剂或诊断/显像剂。
最优选地，活性剂是抗癌剂。
活性剂可选自阿培利司；紫杉烷(如卡巴他赛和多西他赛)；铂类(如奥沙利铂)；莫匹罗星；贝立司他；尼罗红；或NR668组成的组。特别优选为紫杉烷，如卡巴他赛。
活性剂的总量优选为油相的0.2wt％至50wt％，更优选0.2wt％至30wt％。因此，纳米颗粒优选包含0.2wt％至50wt％的活性剂，更优选0.2wt％至30wt％的活性剂。
当活性剂为治疗剂(例如抗癌剂、中枢神经系统剂或抗感染剂)时，活性剂的总量优选为油相的1.0wt％至50wt％，更多优选2.5wt％至40wt％，甚至更优选5wt％至30wt％。在这种情况下，纳米颗粒因此优选包含1.0wt％至50wt％活性剂，更优选2.5wt％至40wt％活性剂，甚至更优选5wt％至30wt％活性剂。
当活性剂是诊断剂或显像剂(例如染色剂)时，活性剂的总量优选为油相的0.2wt％至50wt％，更优选0.2wt％至20wt％。在这种情况下，纳米颗粒因此优选包含0.2wt％至5wt％活性剂，更优选0.2wt％至20wt％活性剂。
通过细乳液制备纳米颗粒的方法
在优选的实施方案中，本发明的纳米颗粒通过包含水包油细乳液的阴离子聚合的方法生产。
已知细乳液法用于生产平均尺寸通常在1-1000nm，例如30-500nm范围内的纳米颗粒，例如Landfester in Macromol.Rapid Comm.2001,22,896-936and Landfester et alin Macromolecules 1999,32,5222-5228公开的。该方法首先由Ugelstad等人(1973)Emulsion polymerization:initiation of polymerization in monomer droplets.JPolym Sci Polym Lett Ed 11:503–513描述。
用于制备聚合物纳米颗粒的细乳液技术是通过聚合反应将连续相中分散相的稳定纳米乳液转化为纳米颗粒分散体来制备分散体的技术。该技术包括在与连续相发生乳化之前将分散相中的各种组分混合，从而产生乳液，该乳液中每个液滴具有(活性剂和单体的)相同组成。
在这些液滴纳米反应器中可以应用所有的聚合反应的类型。就聚(氰基丙烯酸烷基酯)纳米颗粒来说，水包油细乳液和液滴界面处的阴离子聚合(通常通过向连续相添加引发剂开始)已被证明是有利的。形成的颗粒在尺寸和尺寸分布方面与制备它们的液滴通常相同或几乎相同，从而导致该过程的高再现性。
如本文所用，术语“细乳液”是指包含典型平均尺寸在30nm至500nm范围内的稳定液滴的特定类型的乳液。颗粒尺寸受许多因素的影响，包括表面活性剂存在的量、整个体系的粘度和用于产生液滴的剪切速率。细乳液的典型颗粒尺寸分布曲线(使用例如动态光散射测量)呈高斯形状并且相对较窄。细乳液优选具有0.3或更小，更优选0.2或更小，例如约0.1的多分散指数(PDI)。
通过表面活性剂和助稳定剂(后者通常称为“疏水物”)的存在，细乳液是理想地稳定。助稳定剂通过增加渗透压来促进乳液的渗透稳定，这抵消了由于液滴的表面张力引起的毛细管压力或开尔文压力，并减少了奥斯特瓦尔德熟化。奥斯特瓦尔德熟化是指分子通过连续相从小液滴扩散到大液滴的过程。这个过程破坏了乳液结构。细乳液可以是直接的(水包油)或反向的(油包水)，尽管为了本发明的该实施方案的目的，术语“细乳液”可被认为仅指直接的细乳液。在这种细乳液中，水形成连续相。如果存在的话，油相通常包含用于阴离子聚合的单体、助稳定剂和活性剂，即，让人感兴趣的负载化合物。
如上所述，用于制备纳米颗粒的细乳液和细乳液聚合是本领域已知的。
细乳液可以通过本领域任何已知的方法制备，例如在US 2009/0297613中描述的方法。过程通常包括形成油相和水相，将它们混合并使混合物经受高剪切力，例如超声处理或均质化，以形成含有单体与表面有稳定剂/表面活性剂的油液滴的稳定乳液，并且随后加入亲水性引发剂。然后单体液滴的聚合通过在液滴界面处引发而发生，以形成与聚合前液滴具有相同尺寸的聚合物颗粒。亲水性引发剂附着在颗粒的表面。或者，通过调节pH值引发聚合。本领域技术人员应当清楚，在本发明的该实施方案的上下文中描述的细乳液聚合过程完全不同于其中聚合物纳米颗粒直接由在溶剂中的单体溶液形成的乳液聚合过程，以及完全不同于其中聚合物纳米颗粒由预先制备的聚合物的自组装形成的乳液聚合过程。
细乳液可包含至少三种组分：包含至少一种ACA单体的可聚合单体；至少一种表面活性剂(选自任何可能的表面活性剂，不限于多糖、生物聚合物、PEG、PPG、葡聚糖，优选选自聚乙二醇(PEG)和聚丙二醇(PPG)或其混合物的聚亚烷基二醇)，以及任选的阻聚剂。细乳液还可任选地包含一种或多种活性剂。在本发明的一个实施方案中，至少一种所述表面活性剂，例如至少一种聚亚烷基二醇，引发可聚合单体的阴离子聚合。
阻聚剂可以是阴离子阻聚剂和/或自由基阻聚剂。因此，阻聚剂可以是可单独使用或与自由基阻聚剂组合使用的阴离子阻聚剂。或者，阻聚剂可以是可单独使用或与阴离子阻聚剂组合使用的自由基阻聚剂。或者，阻聚剂可以是双功能的阴离子和自由基阻聚剂。优选地，阻聚剂占细乳液的0.05wt％至15wt％，甚至更优选地，阻聚剂在0.1wt％至10wt％或0.5wt％至6wt％的范围内。
本发明该实施方案的细乳液可包含至少一种表面活性剂。可以使用本领域已知的任何典型的表面活性剂，然而优选的表面活性剂包括甘油、山梨糖醇和其他多官能醇的脂肪酸，泊洛沙姆，泊洛沙胺，聚山梨醇酯，聚氧乙烯醚和聚氧乙烯酯，乙氧基化甘油三酯、乙氧基化酚和乙氧基化二酚，多糖(例如透明质酸和唾液酸)，蛋白质，脂肪酸的金属盐，脂肪醇硫酸盐的金属盐，十二烷基硫酸钠、磺基琥珀酸盐的金属盐及其混合物。特别优选的表面活性剂包括聚氧乙烯醚和聚山梨醇酯。
表面活性剂优选占细乳液的0.05wt％至5wt％，更优选0.1wt％至2wt％。
除了这些组分之外，细乳液还可在油相中包含助稳定剂。助稳定剂通常是高度不溶于水的，即具有小于5×10-5mol/L，更优选小于5×10-6mol/L和更优选小于5×10-7mol/L的溶解度，并且可以是与可聚合单体相容的任何物质，例如烃、硅烷、有机硅烷、脂肪酸酯、油(例如植物油)、疏水染料或脂质体。合适的助稳定剂的例子包括十六烷、鲸蜡醇、miglyol和橄榄油。特别优选的助稳定剂包括miglyols和植物油。在替代实施方案中，活性剂可以起到助稳定剂的作用。
助稳定剂优选占油相的0.5wt％至5wt％，更优选1wt％至3wt％。
在进一步的实施方案中，所述方法中使用的细乳液包含交联剂(尤其是可生物降解的交联剂)，优选在油相(即不连续相)中。交联剂优选为酸酐、丙烯酸酯或双氰基丙烯酸酯，例如甲基丙烯酸乙二醇酯或聚乙二醇二甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸酐、1,6-己二醇双氰基丙烯酸酯或二甲基丙烯酸亚甲酯。
该实施方案的细乳液的油相含量可以至多50wt％，但通常至多15-25wt％，优选至多15wt％或在5-15wt％的范围内。本领域技术人员将理解，该实施方案的细乳液的油相含量也可称为固体含量。因此，术语“固体含量”和“油相含量”在细乳液技术的上下文中是可互换的。
本发明的纳米颗粒可通过包含水包油细乳液的自由基聚合的方法替代地生产。上述关于阴离子聚合的详述加上必要的变更适用于该实施方案。
制造纳米颗粒的其他方法
虽然使用阴离子聚合的细乳液法证明了单体在实施方案中的适用性，但新的单体能够应用于先前报道的ACA单体的任何纳米颗粒合成方法，例如(但不限于)乳液聚合、自组装和纳米沉淀。可以使用阴离子和自由基引发。
活性剂的负载能力和范围
就通过细乳液法制备的纳米颗粒来说，该技术包括在与连续相发生乳化之前将分散相中的各种组分混合，从而产生乳液，该乳液中每个液滴具有(活性剂和单体的)相同的组成。形成的颗粒通常与制备它们的液滴相同或几乎相同。通过应用这种技术，纳米颗粒的负载能力是受到氰基丙烯酸酯侧链与纳米颗粒中封装的活性剂之间相互作用的影响，并已被证明是特别高的。
侧链的变化(即式2A的亚单元的R1基团的变化)将影响亚单元的疏水性和亲水性，从而影响亚单元侧链与活性剂(例如API)之间的相互作用。这些组分之间的增强的相互作用将提高可实现封装在不同纳米颗粒中的活性剂(例如API)的浓度。
因此，如果要封装疏水性活性剂(例如API)，则必须选择与疏水性活性剂(例如API)相互作用良好的侧链。这方面的示例是将卡巴他赛或阿培利司封装在由氰基丙烯酸2-乙基己酯(2-EHCA)、氰基丙烯酸2-苯基乙酯(2-PECA)、氰基丙烯酸新戊酯(NPCA)、氰基丙烯酸1-戊酯(1-PCA)、氰基丙烯酸2-戊酯(2-PCA)、氰基丙烯酸3-戊酯(3-PCA)、氰基丙烯酸3,3-二甲基-1-丁酯(3,3-DMBCA)、氰基丙烯酸1-庚酯(1-HPCA)、氰基丙烯酸2-庚酯(2-HPCA)、氰基丙烯酸3-庚酯(3-HPCA)或氰基丙烯酸3-甲基丁酯(3-MBCA)中的任一种形成的纳米颗粒中。
因此，优选地，本发明中使用的活性剂是疏水的。
另一方面，如果要封装亲水性活性剂(例如API)，则可选择具有与亲水性活性剂(例如API)良好相互作用的侧链的单体。
活性剂(例如API)的浓度越高，产生的效果是可以使用越低浓度的纳米颗粒，从而导致较少或较不严重的副作用。
类似地，在侧链中包含不同的官能团，例如芳香环，也会改变侧链与活性剂(例如API)之间可获得的相互作用类型，例如通过允许π-π相互作用。这会影响颗粒稳定性和影响具有一些有效负载的颗粒形成。这方面的一个示例是将奥沙利铂封装在PECA和BCA的混合物中(单独使用BCA是不可能的)。因此，活性剂的范围可以通过包含例如2-PECA而拓宽，其已被证明可使改进范围的活性剂溶解。这提供了相对于现有技术的显著改进。
因此，纳米颗粒可包含共聚或均聚化合物，其包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1为2-苯基-乙基。如上所述，优选当R1是2-苯基-乙基时，聚合物是共聚物。即，纳米颗粒包含共聚化合物，所述共聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1是2-苯基-乙基。由于聚合物是共聚物，因此还必须存在其他亚单元。
在这种情况下，优选聚合物中5％至50％，更优选10％至40％的亚单元是根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1是2-苯基-乙基。
其他亚单元可以是任何合适的包括其他氰基丙烯酸酯亚单元的亚单元。例如，共聚物可包含(i)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1是2-苯基-乙基，和(ii)根据式2B的氰基丙烯酸酯亚单元，如上所定义。
例如，共聚物可以包含(i)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1是2-苯基-乙基，和ii)根据式2B的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R3是1-丁基。在这种情况下，活性剂优选为铂类，更优选为奥沙利铂。
或者，共聚物可包含(i)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1为2-苯基-乙基，和(ii)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中每个R1独立地选自2-乙基己基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基。
例如，共聚物可包含(i)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1为2-苯基-乙基，和(ii)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中每个R1独立地选自2-乙基己基和1-庚基，优选2-乙基己基。在这种情况下，活性剂优选为铂类，更优选为奥沙利铂。
举例说明活性剂(例如API)溶解度的变化，但不限于表4中给出的API。API范围的扩展是通过使用PECA/BCA混合物以溶解并因此首次生产含有奥沙利铂、基于铂的API(π-π相互作用)的PACA纳米颗粒来举例说明的。活性剂在具有不同长度和取代模式的烷基侧链的单体中溶解度的变化以莫匹罗星的溶解度为例，莫匹罗星在对照(EBCA、OCA和BCA)中不溶，但在3-PCA和2-HPCA中可溶。同样，贝利司他在2-EHCA中可溶，但在对照2-EBCA不溶。另一方面，阿培利司和卡巴他赛在所有测试的ACA中可溶。
如表4中的数据所示，在对照中，只有BCA能够溶解阿培利司，因此可用于制备负载阿培利司的纳米颗粒。然而，所有示例性单体和单体共混物都能够溶解阿培利司，因此适用于制备负载阿培利司的纳米颗粒。
因此，本发明提供如本文所定义的纳米颗粒，其中所述纳米颗粒包含作为活性剂的阿培利司或卡巴他赛，更优选阿培利司。
还发现没有一个对照能够溶解莫匹罗星，而3-PCA和2-HPCA均能够溶解莫匹罗星。
因此，本发明提供包含共聚或均聚化合物的纳米颗粒，所述共聚或均聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中每个R1独立地为3-戊基或2-庚基。优选地，在这种情况下，纳米颗粒包含作为活性剂的莫匹罗星。
本发明提供了包含共聚或均聚化合物的纳米颗粒，所述共聚或均聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1是3-戊基，并且所述纳米颗粒包含作为活性剂的莫匹罗星。
本发明提供了包含共聚或均聚化合物的纳米颗粒，所述共聚或均聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1是2-庚基，并且所述纳米颗粒包含作为活性剂的莫匹罗星。
本发明提供包含共聚或均聚化合物的纳米颗粒，所述共聚或均聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1为1-庚基。优选地，在这种情况下，纳米颗粒包含作为活性剂的多西他赛。
本发明提供包含共聚或均聚化合物的纳米颗粒，所述共聚或均聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中每个R1独立地为2-乙基己基或1-庚基。优选地，在这种情况下，纳米颗粒包含作为活性剂的贝利司他。
还令人惊讶地发现，PECA和BCA单体的共混物或PECA和2-EHCA单体的共混物能够溶解奥沙利铂，并因此首次生产出含有奥沙利铂、基于铂的API的PACA纳米颗粒。不希望受理论束缚，有人认为这是由于来自PECA的π-π相互作用导致的。
因此，本发明提供了包含共聚化合物的纳米颗粒，所述共聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1是2-苯基乙基；其中纳米颗粒包含作为活性剂的铂类(优选奥沙利铂)。
本发明的纳米颗粒证明可以封装增加范围的活性剂。已经证明2-PECA溶解卡巴他赛(CBZ)、阿培利司和奥沙利铂(见表4)。
因此，纳米颗粒可包含共聚或均聚化合物，其包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1为2-苯基-乙基，其中活性剂选自阿培利司、紫杉烷(如卡巴他赛和多西他赛)、铂类(如奥沙利铂)、莫匹罗星和贝立司他组成的组。优选地，在这种情况下，活性剂是奥沙利铂、卡巴他赛或阿培利司。
如本文所述，细乳液技术可用于生产根据本发明的纳米颗粒。除了其他成分之外，细乳液还可在油相中包含已显示影响聚合前分散体的稳定性以及颗粒稳定性的助稳定剂。当使用细乳液时，在聚合发生之前产生稳定分散体的能力也可能受到要掺入纳米颗粒中的活性剂的存在的影响，因为活性剂可以起到助稳定剂的作用。如现有技术中所述，特别高的卡巴他赛的负载已成功地结合到PEBCA纳米颗粒中。不受理论束缚，据推测，高负载是由于卡巴他赛在反应中作为助稳定剂。
然而，活性剂也可能是反应性的，因此对细乳液和制备的纳米颗粒的稳定性起反作用。
具有不同氰基丙烯酸酯单体的不同药物的溶解度也会影响可以封装在纳米颗粒中的药物的量。因此，本发明的纳米颗粒具有改进的活性负载的优点。
表4：在ACA单体中，不同活性剂的溶解度。
功效
选自氰基丙烯酸2-乙基己酯(2-EHCA)、氰基丙烯酸2-苯基乙酯(2-PECA)、氰基丙烯酸新戊酯(NPCA)、氰基丙烯酸1-戊酯(1-PCA)、氰基丙烯酸2-戊酯(2-PCA)、氰基丙烯酸3-戊酯(3-PCA)、氰基丙烯酸3,3-二甲基-1-丁酯(3,3-DMBCA)、氰基丙烯酸1-庚酯(1-HPCA)、氰基丙烯酸2-庚酯(2-HPCA)、氰基丙烯酸3-庚酯(3-HPCA)或氰基丙烯酸3-甲基丁酯(3-MBCA)组成的组的所有氰基丙烯酸酯单体可用于制备有效的颗粒(见表5)。
还应注意的是，具有更大负载能力和相似功效的毒性较小的颗粒将提高风险/收益比，有利于患者。
因此，如本文所述的本发明的一个巨大优势在于，它提供了包含可以基于所得颗粒的毒性和API的溶解度来选择的单体的新范围的纳米颗粒。
表5：来自成功示例的数据，纳米颗粒批次。
新纳米颗粒的应用
根据一个实施方案，提供了包含如本文所述的新纳米颗粒的组合物或溶液。组合物或溶液可以是包含药学上可接受的赋形剂和稀释剂的药物制剂。
本发明的一个方面包括纳米颗粒在治疗中的应用，以及治疗疾病的方法，其包括向有需要的受试者施用如本文定义的本发明的组合物。示例性受试者包括哺乳动物受试者，例如人类受试者。
本发明还提供了本文所述的纳米颗粒，或包含所述纳米颗粒的组合物或溶液，在治疗中的应用。
本发明还提供了本文所述的纳米颗粒，或包含所述纳米颗粒的组合物或溶液，在诊断中的应用。
本发明还提供了本文所述的纳米颗粒，或包含所述纳米颗粒的组合物或溶液，在治疗癌症中的应用。在这种情况下，活性剂是抗癌剂。
本发明还提供本文所述的纳米颗粒，或包含所述纳米颗粒的组合物或溶液，在治疗感染中的应用。在这种情况下，活性剂是抗感染剂。
本发明还提供本文所述的纳米颗粒，或包含所述纳米颗粒的组合物或溶液，在(人体或动物体的)诊断成像中的应用。在这种情况下，活性剂是诊断剂。
本发明还提供一种用于治疗癌症的方法，该方法包括向有需要的受试者施用(有效量的)本文所述的纳米颗粒或包含所述纳米颗粒的组合物或溶液。在这种情况下，活性剂是抗癌剂。示例性受试者包括哺乳动物，优选人类。
本发明还提供一种用于治疗感染的方法，该方法包括向有需要的受试者施用(有效量的)如本文所定义的纳米颗粒或包含所述纳米颗粒的组合物。在这种情况下，活性剂是抗感染剂。示例性受试者包括哺乳动物，优选人类。
实施例
材料和方法
醇毒性的定量
细胞系：细胞系用于测定醇细胞毒性Hep G2(人肝癌细胞系)、LLC-PK1(猪肾细胞系)和IMR-90(人肺成纤维细胞系)。所有培养基都通过10％(w/v)胎牛血清白蛋白(Sigma)和100单位/ml青霉素/链霉素(
Sigma)进行加强。所有细胞系均从ATCC获得并常规检测支原体。在24-孔板或96-孔板中生长的细胞与连续稀释的醇一起在37℃和5％CO2的气氛中培养24小时。毒性通过常用的MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基溴化四唑)细胞活性试验进行评估。
MTT细胞活性试验。细胞用不同的纳米颗粒/物质培养24小时。然后吸出细胞培养基，并用100μl最终浓度为250μg MTT/ml的培养基更换。在37℃下继续培养3小时以形成甲臜颗粒，将其溶解在含有1％(v/v)NH4Cl的DMSO中。在酶标仪(Biosys Ltd,Essex,UK)中于570nm处读取吸光度，并减去650nm处吸光度的背景。
API/染料在ACA单体中的溶解度
将少量(通常为5.0mg)选定的API/染料与ACA单体(通常为100ul)共混，如果合适，包含双功能阻聚剂(通常为5-10wt％，香草醛，Sigma Aldrich，德国)，以进行测试和监测24小时。目视监测溶解度和聚合度。
纳米颗粒的合成和表征
通过细乳液聚合合成聚乙二醇化的PACA纳米颗粒。制备了由0.8g氰基丙烯酸烷基酯或氰基丙烯酸烷基酯(单体，Cuantum Medical Cosmetics，西班牙或Loctite，爱尔兰)的共混物组成的油相，共混物含有0-5.0％(w/w)双重阻聚剂，通常是香草醛(Sigma Aldrich，德国)和0-5％(w/w)助稳定剂Miglyol 812(Cremer,USA)。用于光学成像的荧光颗粒是通过将NR668(改性尼罗红)40(定制合成化合物)0.59％(w/w)添加到油相中制备的。含有活性药物成分的颗粒通过将0-5％API(w/w)添加至油相中制备，例如，卡巴他赛(CBz，5％(w/w)，Biochempartner Co.Ltd.，China，产品编号BCP02404)。
将由含有Brij L23(8mM，Sigma，美国)和Kolliphor HS15(10.2mM，Sigma，德国)的0.1M HCl(12g)组成的水相添加到油相中，并立即在冰上超声处理3分钟(6×30秒间隔，50％振幅，Branson Ultrasonics数字超声波仪450，美国)。将溶液在室温下旋转(15rpm，SB3旋转器，Stuart，UK)过夜，然后使用1M NaOH将pH值调节至5。在室温下旋转聚合持续5小时。将分散体用水透析(Spectra/Por透析膜MWCO 100,000Da，Spectrum Labs，美国)以除去未反应的PEG。使用Zetasizer Nano ZS(Malvern Instruments,UK)，通过动态光散射和激光多普勒微电泳测量纳米颗粒的尺寸、多分散指数(PDI)和zeta电势(zeta potential)。为了计算封装药物的量，通过将药物溶解在丙酮(1:10)中来将药物从颗粒中提取，并通过液相色谱与质谱联用(LC-MS/MS)进行定量，如下所述。
通过LC/MS对API定量，以CBz的定量为例
通过LC-MS/MS对CBZ进行定量。CBZ作为纯化学品或纳米颗粒的一部分，使用Agilent 1290HPLC系统与Agilent 6490三重四极杆质谱仪联用，通过LC-MS/MS进行定量。HPLC色谱柱是Ascentis Express C8，75×2.1mm，2.7μm粒径，带有5×2.1mm相同材料(Sigma)的保护柱，在40℃下运行。洗脱液A为25mM甲酸水溶液，洗脱液B为100％甲醇，流速为0.5ml/min。流动相梯度为55％B等梯度1.5分钟，然后在1分钟内从55％B到80％B，然后是1分钟的冲洗时间，以及随后是柱重新平衡。进样体积为5.00μl。MS检测采用正ESI模式(安捷伦喷射流)在多反应监测(MRM)模式下使用跃迁m/z 858.3→577.2进行定量。选择母离子作为Na加合物，因为这提供了最好的灵敏度。类似地，在864.4→583.2跃迁处检测到六氘化内标。两种分析物均在380V电压和20V碰撞能量下运行。
参考标准用于准确定量。未标记的CBZ标准品与用于合成(见上文)的标准品相同，在＞98％纯度。六氘化CBZ内标购自Toronto Research Chemicals(多伦多，加拿大；目录号C046502，同位素纯度为99.6％)。标准品溶解在丙酮中，用于构建跨越至少五个浓度点的未标记标准品系列。
定量限度(LOQ)是根据标准曲线中最低浓度点(0.1ng/ml)的六次重复定量计算得出的，特别是平均值加上六个标准偏差；这相当于0.19ng/ml的LOQ(信/噪比＞20)。基于相同标准样品组的准确度为8.8％，精密度为18.0％。
PACA纳米颗粒毒性的定量
细胞系：细胞系用于测定醇细胞毒性Hep G2(人肝癌细胞系)、LLC-PK1(猪肾细胞系)。所有培养基均通过10％(w/v)胎牛血清白蛋白(Sigma)和100单位/ml青霉素/链霉素(
Sigma)进行加强。所有细胞系均从ATCC获得并常规检测支原体。在24-孔板或96-孔板中生长的细胞用连续稀释的醇在37℃和5％CO2的气氛中培养24小时。毒性通过常用的MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基溴化四唑)细胞活性试验和常用的LDH试验进行评估。
MTT细胞活性试验。细胞用不同的纳米颗粒培养24小时。然后吸出细胞培养基，并用100μl最终浓度为250μg MTT/ml的培养基更换。在37℃下继续培养3小时以形成甲臜颗粒，将其溶解在含有1％(v/v)NH4Cl的DMSO中。在读板器(Biosys Ltd,Essex,UK)中于570nm处读取吸光度，并减去650nm处吸光度的背景。
LDH细胞毒性试验。使用LDH细胞毒性试验试剂盒(K311-400，Biovision)。
将细胞用不同的纳米颗粒培养24小时，并将100ul的反应混合物(按照制造商的方法制备)转移到板的每个孔中。将混合物在37℃下培养20分钟。
在酶标仪(Biosys Ltd,Essex,UK)中读取490nm处的吸光度，并减去680nm处吸光度的背景。
PACA纳米颗粒功效的定量，以使用负载CBz的颗粒为例
细胞系：用于确定颗粒功效的细胞系是A549(人肺上皮细胞)、DU-145(人前列腺上皮细胞)。所有培养基均通过10％(w/v)胎牛血清白蛋白(Sigma)和100单位/ml青霉素/链霉素(
Sigma)进行加强。所有细胞系均从ATCC获得并常规检测支原体。在24-孔板或96-孔板中生长的细胞在37℃和5％CO2的气氛中用颗粒的连续稀释液培养24小时。毒性通过常用的ATP测量
试验进行评估。
通过测量ATP评估细胞活性。如供应商所述，通过使用
(Promega,WI,USA)试验测量ATP水平来测试细胞的存活。细胞用纳米颗粒(空的或含有Cbz)培养48小时，然后去除一半体积，用等体积的ATP试剂代替并轻轻混合。培养10分钟后，将细胞裂解物转移到避光的96-孔板中，并在读板器(Biosys Ltd,Essex,UK)中测量发光。
PACA-np稳定微泡的制备
NP-稳定的MB(也称为NPMB)是通过在磷酸盐缓冲盐水中添加0.5％酪蛋白的并使用(
等人，2015年)所述的均质机(T-25，IKAWerke，Staufen，Germany)进行剧烈搅拌，在气-水界面处自组装纳米颗粒(1wt％，10mg/ml)制备的。使用全氟丙烷(F2Chemicals，Preston，Lancashire，UK)。使用光学显微镜和图像分析(ImageJ 1.48v，国立卫生研究院，贝塞斯达，马萨诸塞州，美国)测定平均MB直径、尺寸分布和浓度。NPMB溶液是游离纳米颗粒和NPMB的组合，其中只有一小部分纳米颗粒位于MB上。
结论
上面讨论的方法和材料产生表2-5中报告的结果。
醇毒性在表3中公开：醇毒性通过将细胞暴露于3wt％限度的醇给定浓度下进行评估。24小时后测定细胞活性并与未处理的对照进行比较。数据报告为三种单独细胞系在3％醇中剩余细胞活性的百分比(相对于对照)。剩余活性的百分比越大，对细胞系的醇毒性就越低。因此，暴露于3wt％2-乙基己醇的Hep G2细胞保留了91.2％的活性，而暴露于3wt％2-乙基丁醇的Hep G2细胞仅保留了74.6％的活性。因此，与2-乙基丁醇相比，2-乙基己醇对Hep G2细胞的毒性更小。
颗粒毒性表2中公开：通过将两种细胞系暴露于至多300pg/ml的颗粒浓度范围来评估颗粒毒性。测试的聚合物纳米颗粒不含API，并且是通过上述所给方法使用表2中列出的单体组合制备的。24小时后测定细胞活性，并针对颗粒浓度作图。对于每种颗粒/细胞类型组合，确定了保持50％细胞活性时的颗粒浓度(IC50，pg/ml)。将细胞活性降低到50％所需的颗粒浓度越高，颗粒的毒性就越低。因此，由聚(氰基丙烯酸2-乙基己酯)制成的聚合物颗粒在针对Hep G2细胞进行测试时具有300pg/ml的IC 50，其比当针对Hep G2细胞进行测试时具有32pg/ml的IC 50的聚(氰基丙烯酸辛酯)颗粒高10倍。因此，聚氰基丙烯酸2-乙基己酯颗粒可以以比聚(氰基丙烯酸辛酯)颗粒高10倍的浓度使用而不会引起毒性。
API溶解度的结果在表4中公开：这里，测试中的少量API与给定的ACA单体混合，结果目测确定。当结果为“可溶”时，API可溶于所选单体中，没有可见残留物，并且可以用作组合来制备负载API的纳米颗粒。如果结果显示为不溶或部分可溶，则表明该组合不能用于制备负载API的纳米颗粒。
表5公开了包含API卡巴他赛或阿培利司的纳米颗粒批次的表征。这包括Z-平均颗粒尺寸、相关的多分散指数(PDI)、zeta电势、干重和测量API负载。上面已经讨论了它们优选的范围。最后，将含有卡巴他赛的颗粒对两种细胞系的功效报告为IC 50值，单位为pg/ml。数字越低，颗粒对细胞系的作用就越有效。报告的所有颗粒在显著低于空颗粒固有毒性的浓度下均显示出功效(200至7000倍)，表明给定的纳米颗粒制剂具有广泛的安全系数。
本发明的其他方面和实施方案
实施方案1、一种包含根据式1的共聚或均聚化合物的新型纳米颗粒；
其中，所述化合物包含根据式2的可聚合氰基丙烯酸酯单体：
其中至少一种可聚合氰基丙烯酸酯单体中的R1独立地选自2-乙基己基、2-苯基乙基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组。
实施方案2、根据实施方案1所述的纳米颗粒，其中至少一种可聚合氰基丙烯酸酯单体中的R1独立地选自2-乙基己基、2-苯基乙基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组。
实施方案3、根据实施方案1所述的纳米颗粒，其中至少一种可聚合氰基丙烯酸酯单体中的R1独立地选自2-乙基己基、1-庚基或2-苯基乙基。
实施方案4、根据实施方案1-3中任一项所述的纳米颗粒，其中所述颗粒由细乳液的阴离子聚合制成。
实施方案5、根据实施方案1所述的纳米颗粒，其中所述颗粒由细乳液的阴离子聚合制成，并且至少一种可聚合氰基丙烯酸酯单体中的R1是3-甲基丁基。
实施方案6、根据前述实施方案中任一项所述的纳米颗粒，包含活性剂。
实施方案7、根据前述实施方案中任一项所述的纳米颗粒，其中所述活性剂选自阿培利司、紫杉烷(如卡巴他赛和多西他赛)、铂类(如奥沙利铂)、莫匹罗星、贝立司他、尼罗红或NR668。
实施方案8、一种组合物，其包含如实施方案1至7中任一项所定义的纳米颗粒和任选的一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
实施方案9、根据实施方案1至7中任一项所述的纳米颗粒在医学，优选在药物递送或分子成像中的应用。
实施方案10、根据实施方案1至7中任一项所述的纳米颗粒在农业、水产养殖、抗菌应用、保健营养品、食品/饲料应用、化妆品、自愈、家庭应用和身体护理中的应用。
Claims (28)
1.一种包含共聚或均聚化合物的纳米颗粒，所述共聚或均聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元：
其中每个R1独立地选自2-乙基己基、2-苯基-乙基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组；
并且，其中所述纳米颗粒进一步包含活性剂。
2.根据权利要求1所述的纳米颗粒，其中，所述活性剂是抗癌剂、抗感染剂、中枢神经系统剂，或诊断剂或显像剂。
3.根据权利要求2所述的纳米颗粒，其中，所述活性剂是紫杉烷、铂类、组蛋白脱乙酰酶抑制剂、磷酸肌醇3-激酶抑制剂、抗菌剂或亲油性染色剂。
4.根据前述权利要求中任一项所述的纳米颗粒，其中，每个R1独立地选自2-乙基己基、2-苯基-乙基、新戊基、1-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的纳米颗粒，其中，每个R1独立地选自2-乙基己基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组。
6.根据权利要求5所述的纳米颗粒，其中，每个R1独立地选自2-乙基己基、新戊基、1-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组。
7.根据前述权利要求中任一项所述的纳米颗粒，其中，所述纳米颗粒包含共聚化合物，所述共聚化合物包含(i)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元；和(ii)根据式2B的氰基丙烯酸酯亚单元；
其中每个R3独立地选自具有1至15个非氢原子的基团，条件是R3不是2-乙基己基、2-苯基-乙基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基或3-庚基；优选其中每个R3独立地选自炔丙基、1-丁基、1-辛基、4-甲基戊基、1-己基、乙基和2-乙基丁基组成的组。
8.根据权利要求1至3中任一项所述的纳米颗粒，其中，所述纳米颗粒包含共聚或均聚化合物，所述共聚或均聚化合物包含根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1为2-苯基-乙基，优选共聚化合物。
9.根据权利要求8所述的纳米颗粒，其中，所述纳米颗粒包含共聚化合物，所述共聚化合物包含(i)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1为2-苯基-乙基；和(ii)根据式2B的氰基丙烯酸酯亚单元：
其中每个R3独立地选自具有1至15个非氢原子的基团，条件是R3不是2-乙基己基、2-苯基-乙基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基或3-庚基；优选其中每个R3独立地选自炔丙基、1-丁基、1-辛基、4-甲基戊基、1-己基、乙基和2-乙基丁基组成的组。
10.根据权利要求8所述的纳米颗粒，其中，所述纳米颗粒包含共聚化合物，所述共聚化合物包含(i)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中R1为2-苯基-乙基；和(ii)根据式2A的氰基丙烯酸酯亚单元，其中每个R1独立地选自2-乙基己基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组。
11.根据权利要求1至7中任一项所述的纳米颗粒，其中，每个R1独立地选自2-乙基己基、新戊基、3-甲基丁基、1-庚基和3-庚基组成的组。
12.根据权利要求11所述的纳米颗粒，其中，每个R1独立地选自2-乙基己基、3-甲基丁基和1-庚基组成的组。
13.根据权利要求11所述的纳米颗粒，其中，每个R1独立地选自2-乙基己基、新戊基和3-庚基组成的组。
14.根据权利要求11所述的纳米颗粒，其中，每个R1独立地选自2-乙基己基和1-庚基组成的组。
15.根据权利要求11所述的纳米颗粒，其中，R1为2-乙基己基。
16.根据权利要求1至7中任一项所述的纳米颗粒，其中，每个R1独立地选自2-乙基己基、1-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组。
17.根据权利要求16所述的纳米颗粒，其中，每个R1独立地选自3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基和3-庚基组成的组。
18.根据权利要求16所述的纳米颗粒，其中，每个R1独立地选自2-乙基己基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基和3-庚基组成的组。
19.根据权利要求16所述的纳米颗粒，其中，每个R1独立地选自3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基和3-庚基组成的组。
20.根据权利要求16所述的纳米颗粒，其中，每个R1独立地选自3,3-二甲基-1-丁基和3-庚基组成的组。
21.根据前述权利要求中任一项所述的纳米颗粒，其中，所述颗粒是由细乳液的阴离子聚合或自由基聚合制成。
22.一种形成如权利要求1至20中任一项所述的纳米颗粒的方法，所述方法包括水包油细乳液的阴离子聚合或自由基聚合，其中，所述细乳液包含：
(i)根据式2的氰基丙烯酸酯单体
其中每个R1独立地选自2-乙基己基、2-苯基-乙基、新戊基、1-戊基、2-戊基、3-戊基、3,3-二甲基-1-丁基、3-甲基丁基、1-庚基、2-庚基和3-庚基组成的组；
(ii)至少一种表面活性剂；
(iii)一种或多种活性剂；
(iv)任选的阴离子聚合引发剂或自由基聚合引发剂；和
(v)任选的阴离子阻聚剂和/或自由基阻聚剂。
23.一种组合物，其包含前述权利要求中任一项所述的纳米颗粒和任选的一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
24.权利要求1至21中任一项所述的纳米颗粒或权利要求23所述的组合物，其用于治疗或诊断。
25.权利要求1至21中任一项所述的纳米颗粒或权利要求23所述的组合物，其用于药物递送。
26.权利要求1至21中任一项所述的纳米颗粒或权利要求23所述的组合物，其用于治疗癌症、用于治疗人体或动物体的感染、或用于诊断成像。
27.一种治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用权利要求1至21中任一项所述的纳米颗粒或权利要求23所述的组合物。
28.权利要求1至21中任一项所述的纳米颗粒在分子成像、农业、水产业、抗菌应用、保健营养品、食品/饲料应用、化妆品、自愈、家庭应用或身体护理中的应用，优选在分子成像中的应用。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NO20190491 | 2019-04-10 | ||
| NO20190491 | 2019-04-10 | ||
| PCT/EP2020/055066 WO2020207655A1 (en) | 2019-04-10 | 2020-02-26 | Nanoparticles comprising copolymeric or homopolymeric compounds which comprise cyanoacrylate subunits |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113950320A true CN113950320A (zh) | 2022-01-18 |
Family
ID=69714038
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202080041164.2A Pending CN113950320A (zh) | 2019-04-10 | 2020-02-26 | 包含含有氰基丙烯酸酯亚单元的共聚或均聚化合物的纳米颗粒 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20220160645A1 (zh) |
| EP (1) | EP3952836A1 (zh) |
| CN (1) | CN113950320A (zh) |
| WO (1) | WO2020207655A1 (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2023000739A (ja) * | 2021-06-18 | 2023-01-04 | 三菱鉛筆株式会社 | 抗菌性粒子分散体 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050287216A1 (en) * | 2004-06-29 | 2005-12-29 | Loomis Gary L | Medical imaging agents for injectable compositions |
| US20080138418A1 (en) * | 2006-12-07 | 2008-06-12 | Tong Shen Enterprise Co., Ltd. | Nanoparticles composed of alkyl-cyanoacrylate polymers |
| US20110230561A1 (en) * | 2008-11-25 | 2011-09-22 | Hongbo Liu | Medical adhesive compositions |
| CN104974675A (zh) * | 2014-04-10 | 2015-10-14 | 劲捷生物科技股份有限公司 | 抗菌黏合剂 |
| CN105518031A (zh) * | 2013-05-28 | 2016-04-20 | 挪威科技工业研究院Tto股份公司 | 用于制备隐形纳米颗粒的方法 |
| WO2017085212A2 (en) * | 2015-11-20 | 2017-05-26 | AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG | Surface-modified nanospheres encapsulating antigen-binding molecules |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2218685T3 (es) | 1997-06-13 | 2004-11-16 | Nanodel Technologies Gmbh | Sistema para direccion de farmaco, procedimiento para su preparacion y su utilizacion. |
| FR2891742A1 (fr) * | 2005-10-07 | 2007-04-13 | Oreal | Compostion cosmetique a base de monomeres electrophiles et d'une dispersion de particules de polymere stabilisees en surface |
| EP1815851A1 (en) | 2006-02-03 | 2007-08-08 | NanoDel Technologies GmbH | Nanoparticles designed for drug delivery |
| FR2899801A1 (fr) * | 2006-04-13 | 2007-10-19 | Oreal | Composition cosmetique comprenant au moins une suspension de nanoparticules metalliques, un monomere cyanoacrylate polymerisable et un solvant organique liquide |
| US20070245500A1 (en) * | 2006-04-13 | 2007-10-25 | Gaelle Brun | Cosmetic composition comprising at least one cyanoacrylate monomer, at least one uncolored heat-stable organic particle and at least one liquid organic solvent and process for using it |
| EP1876188A1 (en) | 2006-07-04 | 2008-01-09 | NanoDel Technologies GmbH | Two step miniemulsion process |
| US8679539B2 (en) | 2007-01-31 | 2014-03-25 | Tong Shen Enterprise Co., Ltd. | Drug-loaded poly (alkyl-cyanoacrylate) nanoparticles and process for the preparation thereof |
| TWI516291B (zh) * | 2014-04-10 | 2016-01-11 | 勁捷生物科技股份有限公司 | 抗菌黏合劑 |
-
2020
- 2020-02-26 WO PCT/EP2020/055066 patent/WO2020207655A1/en unknown
- 2020-02-26 EP EP20707409.7A patent/EP3952836A1/en active Pending
- 2020-02-26 US US17/602,344 patent/US20220160645A1/en active Pending
- 2020-02-26 CN CN202080041164.2A patent/CN113950320A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050287216A1 (en) * | 2004-06-29 | 2005-12-29 | Loomis Gary L | Medical imaging agents for injectable compositions |
| US20080138418A1 (en) * | 2006-12-07 | 2008-06-12 | Tong Shen Enterprise Co., Ltd. | Nanoparticles composed of alkyl-cyanoacrylate polymers |
| US20110230561A1 (en) * | 2008-11-25 | 2011-09-22 | Hongbo Liu | Medical adhesive compositions |
| CN105518031A (zh) * | 2013-05-28 | 2016-04-20 | 挪威科技工业研究院Tto股份公司 | 用于制备隐形纳米颗粒的方法 |
| CN104974675A (zh) * | 2014-04-10 | 2015-10-14 | 劲捷生物科技股份有限公司 | 抗菌黏合剂 |
| WO2017085212A2 (en) * | 2015-11-20 | 2017-05-26 | AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG | Surface-modified nanospheres encapsulating antigen-binding molecules |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| EINAR SULHEIM ET AL.: "Cytotoxicity of Poly(Alkyl Cyanoacrylate) Nanoparticles", 《INT. J. MOL. SCI.》, vol. 18, pages 2454, XP055595922, DOI: 10.3390/ijms18112454 * |
| PHILIPPE MERLE ET AL.: "Doxorubicin-loaded nanoparticles for patients with advanced hepatocellular carcinoma after sorafenib treatment failure (RELIVE): a phase 3 randomised controlled trial", 《LANCET GASTROENTEROL HEPATOL》, vol. 4, pages 454 - 465 * |
| 阮传良;: "氰基丙烯酸酯粘合剂的合成及应用", 化工新型材料, no. 10 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2020207655A1 (en) | 2020-10-15 |
| EP3952836A1 (en) | 2022-02-16 |
| US20220160645A1 (en) | 2022-05-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP3721875B1 (en) | Particles coated with hyperbranched polyglycerol and methods for their preparation | |
| Zhang et al. | A pH-sensitive nanosystem based on carboxymethyl chitosan for tumor-targeted delivery of daunorubicin | |
| Yang et al. | Redox-sensitive self-assembled nanoparticles based on alpha-tocopherol succinate-modified heparin for intracellular delivery of paclitaxel | |
| Liu et al. | Preparation and characterization of cationic curcumin nanoparticles for improvement of cellular uptake | |
| Qian et al. | Delivery of doxorubicin in vitro and in vivo using bio-reductive cellulose nanogels | |
| US10967039B2 (en) | Process for preparing stealth nanoparticles | |
| KR20140041522A (ko) | 약물 전달용 중합체 나노입자 | |
| Lu et al. | A hydrazone crosslinked zwitterionic polypeptide nanogel as a platform for controlled drug delivery | |
| Liu et al. | Cell membrane-inspired polymeric micelles as carriers for drug delivery | |
| Zhang et al. | pH-sensitive amphiphilic copolymer brush Chol-g-P (HEMA-co-DEAEMA)-b-PPEGMA: synthesis and self-assembled micelles for controlled anti-cancer drug release | |
| Jazani et al. | Tumor-targeting intracellular drug delivery based on dual acid/reduction-degradable nanoassemblies with ketal interface and disulfide core locations | |
| Curcio et al. | Facile synthesis of pH-responsive polymersomes based on lipidized PEG for intracellular co-delivery of curcumin and methotrexate | |
| Wang et al. | Novel galactosylated biodegradable nanoparticles for hepatocyte-delivery of oridonin | |
| US20100015165A1 (en) | Two Step Miniemulsion Process | |
| Bao et al. | pH-, redox dual-sensitive poly (β-amino ester)-g-TPGS copolymer nanoparticles for drug delivery and inhibition of multidrug resistance in cancer | |
| Wei et al. | Temperature-and pH-sensitive core-shell nanoparticles self-assembled from poly (n-isopropylacrylamide-co-acrylic acid-co-cholesteryl acrylate) for intracellular delivery of anticancer drugs | |
| Rahmani et al. | Synthesis and characterization of pH-responsive PCL-PVA polymersome for dual delivery to breast cancer cells | |
| Patil et al. | Biocompatible tumor micro-environment responsive CS-g-PNIPAAm co-polymeric nanoparticles for targeted Oxaliplatin delivery | |
| Wang et al. | Bioactive saccharide-conjugated polypeptide micelles for acid-triggered doxorubicin delivery | |
| CN113950320A (zh) | 包含含有氰基丙烯酸酯亚单元的共聚或均聚化合物的纳米颗粒 | |
| Li et al. | Chemoenzymatic synthesis of dual-responsive graft copolymers for drug delivery: long-term stability, high loading and cell selectivity | |
| Liu et al. | Hydrolysable core crosslinked particles for receptor-mediated pH-sensitive anticancer drug delivery | |
| Peng et al. | Amphiphilic photocleavable block copolymers based on monomethyl poly (ethylene glycol) and poly (4-substituted-ε-caprolactone): synthesis, characterization, and cellular uptake | |
| Zhaparova | Synthesis of nanoparticles and nanocapsules for controlled release of the antitumor drug" Arglabin" and antituberculosis drugs | |
| Kasmi et al. | Acrylamides with hydrolytically labile carbonate ester side chains as versatile building blocks for well-defined block copolymer micelles via RAFT polymerization |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |