CN113884358A - 一种干血片制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种干血片制备方法，包括以下步骤：指尖血的居家采集：包括准备、按摩、消毒、针刺、试血、吸血和制片；干血片的制备；干血片邮寄；干血片的洗脱；上机检测：将干血片的洗脱液移至样品杯中，按照仪器的操作程序进行设置、检测；本发明的有益效果是：1、指尖血代替静脉血，简便采血程序，不需要专业人员，自己在家即可完成样本采集和血片制备；2、患者完成样本采集、制备后邮寄至检验机构，即可获得检测报告和医学建议，节省了患者资金、时间和精力；3、对检验机构而言，节省了样本采集的人员和设备成本。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种干血片制备方法。
背景技术
目前干血片通常在医院制作，而医院的就医人群较多，环境复杂，对于一些特殊病人来说需要跑好长的路去到采血的地点，很不方便，而且对于抵抗力低的患者来说还存在其他的感染风险，因此，需要一种能够使患者居家采血制成干血片，且不影响其检测结果的干血片制备方法。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供一种干血片制备方法。
本发明采用的技术方案为：
一种干血片制备方法，包括以下步骤：
（1）指尖血的居家采集：包括准备、按摩、消毒、针刺、试血、吸血和制片；
（2）干血片的制备：制片过程中要用到吸血棉，而装吸血棉的装置中设置有干燥剂，在室温放置15小时，使吸血棉充分干燥制成干血片；
（3）干血片邮寄；
（4）干血片的洗脱：在制备好的干血片中加入0.01MPBST洗脱液350ul，室温震荡洗脱一小时；
（5）上机检测：将干血片的洗脱液移至样品杯中，按照仪器的操作程序进行设置、检测。
所述的步骤（1）指尖血居家采集的详细步骤如下：
①准备：取相应吸血棉装置、一次性50ul微量吸管（虹吸原理）、采血针、75%的乙醇或碘伏、棉签等备用；
②按摩∶轻轻按摩左手无名指指端尺侧肌肉较多的中心部位，使局部组织自然充血。避免使用手指侧面或指尖；
③消毒∶用75%乙醇或碘伏棉签擦拭采血部位，待其自然干燥；
④针刺∶用左手拇指、食指和中指固定采血部位使皮肤和皮下组织绷紧，右手持一次性消毒采血针自指端腹尺侧刺入，深度2-3mm，立即出针；
⑤拭血∶待血液自然流出后，用无菌干棉球（棉签）擦去第一滴血；
⑥吸血∶用一次性微量吸管吸血，然后用无菌干棉球（棉签）压住伤口止血，如血流不畅，可用左手自采血部位远端向指端稍施压使血液流出；
⑦制片∶用无菌干棉球（棉签）擦净微量吸管外部，将吸管伸入吸血棉，使微量吸管中血液全部吸入吸血棉中。
所述的步骤（4）中的0.01MPBST洗脱液的制备方法：取Nacl 8.0g、Kcl 0.2g、Na2HPO4 1.44g、K2HPO4 0.24g，用Hcl调PH至7.4，再加入Tween-20 0.5ml，最后用H2O定容至1000ml。
所述的步骤（5）中的仪器为i 1000全自动化学发光免疫分析仪。
本发明的有益效果是：
1、指尖血代替静脉血，简便采血程序，不需要专业人员，自己在家即可完成样本采集和血片制备。2、患者完成样本采集、制备后邮寄至检验机构，即可获得检测报告和医学建议，节省了患者资金、时间和精力。3、对检验机构而言，节省了样本采集的人员和设备成本。
附图说明
图1为卵泡刺激素FSH的原血浆和指尖血回算结果的对比及其回算方程和线性关系图。
图2为促黄体生成素LH的原血浆和指尖血回算结果的对比及其回算方程和线性关系图。
图3为抗缪勒管激素AMH的原血浆和指尖血回算结果的对比及其回算方程和线性关系图。
图4为催乳素PRL的原血浆和指尖血回算结果的对比及其回算方程和线性关系图。
图5为TES的原血浆和指尖血回算结果的对比及其回算方程和线性关系图。
图6为PROG的原血浆和指尖血回算结果的对比及其回算方程和线性关系图。
图7为雌二醇E2的原血浆和指尖血回算结果的对比及其回算方程和线性关系图。
具体实施方式
一种干血片制备方法，包括以下步骤：
（1）指尖血的居家采集：包括准备、按摩、消毒、针刺、试血、吸血和制片；
①准备：取相应吸血棉装置、一次性50ul微量吸管（虹吸原理）、采血针、75%的乙醇或碘伏、棉签等备用；
②按摩∶轻轻按摩左手无名指指端尺侧肌肉较多的中心部位，使局部组织自然充血。避免使用手指侧面或指尖；
③消毒∶用75%乙醇或碘伏棉签擦拭采血部位，待其自然干燥；
④针刺∶用左手拇指、食指和中指固定采血部位使皮肤和皮下组织绷紧，右手持一次性消毒采血针自指端腹尺侧刺入，深度2-3mm，立即出针；
⑤拭血∶待血液自然流出后，用无菌干棉球（棉签）擦去第一滴血；
⑥吸血∶用一次性微量吸管吸血，然后用无菌干棉球（棉签）压住伤口止血，如血流不畅，可用左手自采血部位远端向指端稍施压使血液流出；
⑦制片∶用无菌干棉球（棉签）擦净微量吸管外部，将吸管伸入吸血棉，使微量吸管中血液全部吸入吸血棉中；
（2）干血片的制备：制片过程中要用到吸血棉，而装吸血棉的装置中设置有干燥剂，在室温放置15小时，使吸血棉充分干燥制成干血片；干燥后4°C可保存一年，25°C可保存20天，37℃可保存7天；
（3）干血片邮寄；
（4）干血片的洗脱：在制备好的干血片中加入0.01MPBST洗脱液350ul，室温震荡洗脱一小时；所述的0.01MPBST洗脱液的制备方法：取Nacl 8.0g、Kcl 0.2g、Na2HPO4 1.44g、K2HPO4 0.24g，用Hcl调PH至7.4，再加入Tween-20 0.5ml，最后用H2O定容至1000ml；
（5）上机检测：将干血片的洗脱液移至样品杯中，按照仪器的操作程序进行设置、检测；所述的仪器为i 1000全自动化学发光免疫分析仪。
上机检测的操作：
①开机前准备：
1.1、开机前检查供电是否正常。
1.2、检查底物液、清洗液放置是否正确。
②开机
开启电脑电源，用户软件自动开启并进行开机维护。
③试验前准备：
3.1、清理固体废物：打开仪器左前仓门，清空固体废物.并在软件中点击"清空废料”按钮。
3.2、清理废液：清空废液桶里的废液。
3.3、试剂准备：在仪器待机状态下，将试剂放入试剂仓。
3.4、耗材准备：
3.4.1灣洗液-确认清洗液余量满足本次测试。
3.4.2底物液-确认底物液余量满足本次测试。
3.4.3纯水-确认纯水桶内余量足够。
3.4.4反应杯-确认反应杯余量满足本次测试。
3.5、数据删除：工作—数据浏览—全部删除—是。
④校准
4.1、校准品位置：校准—校准设置，根据架号与位置号分配对应校准品（当校准品条码无法识别时使用）。
4.2、选择：校准—校准概况—选择项目—选择。
4.3、校准品放置：
4.3.1采用位置校准：根据分配的样本架号和校准品位置，在对应架号的样本架位置上放置相应的校准品，并将样本架放置在进样通道上。
4.3.2采用条码校准：将校准品按顺序依次放置在样本架上，并将样本架放置在进样通道上。
4.4、执行：开始一开始。
⑤质控
5.1、质控品设置：
5.1.1手工新增：质控—质控设置—手工—手工添加质控品—确定—编辑—输入对应质控项目靶值、标准差—保存。
5.1.2扫描新增：质控—质控设置—扫描—采用手持式条码枪扫描质控品二维码完成新增。
5.2、质控品位置分配：质控—质控设置根据架号与位置号分配对应质控品。
5.3、质控选择：质控—质控状态—选择项目—选择。
5.4、质控品放置：根据设置的质控品位置在对应架号放置对应质控品，并将样本架放置在进样通道上。
5.5、执行：开始—开始。
⑥样本
6.1、常规样本：
6.1.1样本输入
①单个输入：工作—项目选择—常规—输入样本号—回车—输入架号—输入位置号—选择项目—保存
②批量输入：工作—项目选择—常规—输入样本号—回车—输入架号—输入位置号—选择项目—批量输入—输入末尾样本号或重复次数—保存。
6.1.2将样本架放置在进样通道上。
6.1.3执行：开始—开始。
6.2、急诊样本
6.2.1工作—项目选择—急诊—输入架号—输入位置号—选择项目—保存。
6.2.2将急诊样本放置在对应样本架位置上，并将样本架放置在进样通道上。
6.2.3点击急诊—选择急诊通道一开始。
6.3、复查样本：工作—数据浏览—选择需要复查的样本—项目选择—选择需要复查的项目—复查—输入对应架号和位置号—将样本架放置在进样通道上--开始。
⑦关机
应用—维护—仪器保养—关机维护—运行—维护完成后仪器自动关机。
如图1-如7所示，随机选取几组样本进行原血浆和指尖血的检测结果对比，如表1所示，为卵泡刺激素FSH的原血浆和指尖血回算结果的对比，图1为FSH的指尖血与原血浆浓度值建立的回算方程，以及指尖血回算浓度与原血浆浓度值建立的线性关系图。
如表2所示，为促黄体生成素LH的原血浆和指尖血回算结果的对比，图2为LH的指尖血与原血浆浓度值建立的回算方程，以及指尖血回算浓度与原血浆浓度值建立的线性关系图。
如表3所示，为抗缪勒管激素AMH的原血浆和指尖血回算结果的对比，图3为AMH的指尖血与原血浆浓度值建立的回算方程，以及指尖血回算浓度与原血浆浓度值建立的线性关系图。
如表4所示，为催乳素PRL的原血浆和指尖血回算结果的对比，图4为PRL的指尖血与原血浆浓度值建立的回算方程，以及指尖血回算浓度与原血浆浓度值建立的线性关系图。
如表5所示，为TES的原血浆和指尖血回算结果的对比，图5为TES的指尖血与原血浆浓度值建立的回算方程，以及指尖血回算浓度与原血浆浓度值建立的线性关系图。
如表6所示，为PROG的原血浆和指尖血回算结果的对比，图6为PROG的指尖血与原血浆浓度值建立的回算方程，以及指尖血回算浓度与原血浆浓度值建立的线性关系图。
如表7所示，为E2的原血浆和指尖血回算结果的对比, 图7为E2的指尖血与原血浆浓度值建立的回算方程，以及指尖血回算浓度与原血浆浓度值建立的线性关系图。
初步检测结果表明指尖血制成干血片经洗脱后与静脉血浆的检测结果基本一致，各项结果的相关性均大于0.9。
指尖血的采集和血片制备操作简单，无需专业人员，患者按照操作说明即可完成。干血片的洗脱和上机测试由检验机构专业人员负责，属于常规操作，难度不大。因此该工艺是合理、成熟且可行的。
Claims (4)
1.一种干血片制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）指尖血的居家采集：包括准备、按摩、消毒、针刺、试血、吸血和制片；
（2）干血片的制备：制片过程中要用到吸血棉，而装吸血棉的装置中设置有干燥剂，在室温放置15小时，使吸血棉充分干燥制成干血片；
（3）干血片邮寄；
（4）干血片的洗脱：在制备好的干血片中加入0.01MPBST洗脱液350ul，室温震荡洗脱一小时；
（5）上机检测：将干血片的洗脱液移至样品杯中，按照仪器的操作程序进行设置、检测。
2.根据权利要求1所述的一种干血片制备方法，其特征在于：所述的步骤（1）指尖血居家采集的详细步骤如下：
①准备：取相应吸血棉装置、一次性50ul微量吸管（虹吸原理）、采血针、75%的乙醇或碘伏、棉签等备用；
②按摩∶轻轻按摩左手无名指指端尺侧肌肉较多的中心部位，使局部组织自然充血；
避免使用手指侧面或指尖；
③消毒∶用75%乙醇或碘伏棉签擦拭采血部位，待其自然干燥；
④针刺∶用左手拇指、食指和中指固定采血部位使皮肤和皮下组织绷紧，右手持一次性消毒采血针自指端腹尺侧刺入，深度2-3mm，立即出针；
⑤拭血∶待血液自然流出后，用无菌干棉球（棉签）擦去第一滴血；
⑥吸血∶用一次性微量吸管吸血，然后用无菌干棉球（棉签）压住伤口止血，如血流不畅，可用左手自采血部位远端向指端稍施压使血液流出；
⑦制片∶用无菌干棉球（棉签）擦净微量吸管外部，将吸管伸入吸血棉，使微量吸管中血液全部吸入吸血棉中。
3.根据权利要求1所述的一种干血片制备方法，其特征在于：所述的步骤（4）中的0.01MPBST洗脱液的制备方法：取Nacl 8.0g、Kcl 0.2g、Na2HPO4 1.44g、K2HPO4 0.24g，用Hcl调PH至7.4，再加入Tween-20 0.5ml，最后用H2O定容至1000ml。
4.根据权利要求1所述的一种干血片制备方法，其特征在于：所述的步骤（5）中的仪器为i 1000全自动化学发光免疫分析仪。
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