CN113881591A

CN113881591A - 一种产多糖的副干酪乳酸杆菌slp16及其应用以及利用该菌株制备得到的饲料添加剂

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Publication number: CN113881591A
Application number: CN202111137832.4A
Authority: CN
Inventors: 赵兴秀; 胡容; 何义国; 赵长青; 方春玉; 刘苑皓
Original assignee: Sichuan University of Science and Engineering
Current assignee: Sichuan University of Science and Engineering
Priority date: 2021-09-27
Filing date: 2021-09-27
Publication date: 2022-01-04
Anticipated expiration: 2041-09-27
Also published as: CN113881591B

Abstract

本发明提供了一种产多糖的副干酪乳酸杆菌SLP16及其应用以及利用该菌株制备得到的饲料添加剂，涉及饲料添加剂技术领域。本发明的副干酪乳酸杆菌SLP16为LactobacillusparacaseiSLP16，拉丁文名称为：Lactobacillusparacasei，保藏单位名称为：广东省微生物菌种保藏中心，地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏日期为：2021年7月5日，保藏编号为：GDMCCNo：61769。本发明的SLP16传代后仍然稳定，可以抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌，具有良好的耐胆盐、耐酸的功效，具有凝聚性、疏水性和抗氧化能力，还可产生胞外多糖。

Description

一种产多糖的副干酪乳酸杆菌SLP16及其应用以及利用该菌株制备得到的饲料添加剂

技术领域

本发明涉及饲料添加剂技术领域，尤其涉及一种产多糖的副干酪乳酸杆菌SLP16及其应用以及利用该菌株制备得到的饲料添加剂。

背景技术

在饲料中添加抗生素是传统畜牧业预防家畜疾病、提高养殖效率的重要措施。然而，饲料中长期滥用抗生素会带来动物源食品兽药残留超标、导致细菌产生抗药性、动物机体免疫力下降、兽禽传染病虫害的发生等问题。因此，研究出可以替代抗生素的饲料添加剂成为本领域的大势所趋！现有技术替代抗生素的添加剂配伍不合理，造成其营养价值不高，功效单一。

因此急需一种营养丰富，同时具备抑菌、抗氧化活性，还可以增加饲料适口性的物质作为饲料添加剂满足市场的需求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种营养丰富，同时具备抑菌、抗氧化活性，还可增加饲料适口性的副干酪乳酸杆菌SLP16来制备饲料添加剂，尤其涉及一种产多糖的副干酪乳酸杆菌SLP16及其应用以及利用该菌株制备得到的饲料添加剂。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种产多糖的副干酪乳酸杆菌Lactobacillus paracasei SLP16，所述副干酪乳酸杆菌Lactobacillus paracasei SLP16的保藏单位名称为：广东省微生物菌种保藏中心，地址为：广州市先烈中路100号大院59 号楼5楼，保藏日期为：2021年7月5日，保藏编号为：GDMCC No：61769。

本发明还提供了所述的副干酪乳酸杆菌SLP16在抑制大肠杆菌和/或金黄色葡萄球菌方面的应用。

本发明还提供了所述的副干酪乳酸杆菌SLP16在制备耐胆盐产品方面的应用。

本发明还提供了所述的副干酪乳酸杆菌SLP16在制备具有凝聚性产品方面的应用。

本发明还提供了所述的副干酪乳酸杆菌SLP16在制备具有疏水功效的产品方面的应用。

本发明还提供了所述的副干酪乳酸杆菌SLP16在制备耐酸产品方面的应用。

本发明还提供了所述的副干酪乳酸杆菌SLP16在制备抗氧化产品方面的应用。

本发明还提供了一种饲料添加剂，包括所述的副干酪乳酸杆菌SLP16 和辅料，所述辅料包括豆渣、豆粕和麸皮中的任意一种。

本发明还提供了所述的饲料添加剂的制备方法，包括如下步骤：

(1)将所述辅料与水按重量比1～2:1的比例混合，得到待接种料；

(2)在所述待接种料中接种副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液，培养，得到饲料添加剂。

作为优选，所述待接种料中接种副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液时，待接种料与副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液的体积比为9～10:1；

所述副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液中副干酪乳酸杆菌SLP16的菌浓度为0.5～1.5×10⁸CFU/mL；

所述培养的温度为36～38℃；

所述培养的时间为20～28h。

本发明提供了一种产多糖的副干酪乳酸杆菌SLP16及其应用以及利用该菌株制备得到的饲料添加剂，本发明的副干酪乳酸杆菌SLP16较现有技术的乳酸杆菌的性能提高，同时具有优良的胞外产多糖的能力，具有传代稳定性、抑菌性、耐酸性、耐胆盐、抗氧化、凝聚性和疏水性的功效。可见本发明的副干酪乳酸杆菌SLP16具有优良的益生性。将此菌株制备成饲料添加剂，不仅使饲料添加剂具有其自身的益生性，还能促进动物的消化吸收。是一种安全、无药残、无耐药性、无污染的高品质饲料添加剂，能更好的替代抗生素。

附图说明

图1为不同菌株的耐酸能力图(其中左图为副干酪乳酸杆菌SLP16的耐酸能力，右图为L.rhamnosus GGATCC53103的耐酸能力)。

图2为不同菌株耐胆盐能力图(其中左图为副干酪乳酸杆菌SLP16的耐胆盐能力，右图为L.rhamnosus GGATCC53103的耐胆盐能力)。

图3为不同菌株凝聚性实验结果图。

图4为应用实施例1的饲料添加剂的抑菌稳定性结果图。

保藏说明

副干酪乳酸杆菌SLP16，保藏名称为Lactobacillus paracasei SLP16，拉丁文名称为Lactobacillus paracasei，该菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏日期为2021年7 月5日，保藏编号为GDMCCNo：61769。

具体实施方式

(1)将所述辅料与水按重量比1～2:1优选为1.5:1的比例混合，得到待接种料；

在本发明中，所述待接种料中接种副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液时，待接种料与副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液的体积比为9～10:1，优选为9.5:1；

所述副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液中副干酪乳酸杆菌SLP16的菌浓度为0.5～1.5×10⁸CFU/mL，优选为1×10⁸CFU/mL；

所述培养的温度为36～38℃，优选为37℃；

所述培养的时间为20～28h，优选为22～26h，进一步优选为24h。

在本发明中，所述种子培养液为按如下步骤制备得到：将副干酪乳酸杆菌SLP16固体菌种接种于MRS液体培养基中，36～38℃，优选为37℃，培养42～54h，优选为48h；

所述副干酪乳酸杆菌SLP16固体菌种的接种量为1×1～1.5cm，优选为 1×1.25cm。

在本发明中培养副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液的培养基为MRS 液体培养基；

所述MRS液体培养基以水为溶剂，包括如下质量或体积浓度的组分：

胰蛋白胨9～11g/L，优选为10g/L；

牛肉膏9～11g/L，优选为10g/L；

酵母膏4～6g/L，优选为5g/L；

柠檬酸钠1.5～2.5g/L，优选为2g/L；

葡萄糖18～22g/L，优选为20g/L；

磷酸二氢钾1.5～2.5g/L，优选为2g/L；

乙酸钠4～6g/L，优选为5g/L；

吐温-800.8～1.2mL/L，优选为1.0mL/L；

七水硫酸镁0.56～0.6g/L，优选为0.58g/L；

硫酸锰0.24～0.26g/L，优选为0.25g/L。

在本发明中培养副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液时的培养温度为 36～38℃，优选为37℃；

培养时间为44～52h。

在本发明中，所述副干酪乳杆菌SLP16的筛选鉴定方法如下：

(1)从白酒窖泥中筛选出一株抑菌活性最强的菌株，命名为SLP16；

(2)将SLP16在MRS固体培养基中纯化，得到单菌落；

(3)经单菌落进行革兰氏染色，形态学观察、生理生化反应以及基因序列分析，最终SLP16菌株鉴定为Lactobacillus paracasei。

步骤(2)所述纯化方法为三次划线分离纯化法；

步骤(2)所述纯化时的培养条件为36～38℃，培养20～28h；

步骤(3)所述革兰氏染色的结果为革兰氏阳性菌；

步骤(3)所述的形态学观察结果为菌体呈杆状、革兰氏染色为蓝紫色；

步骤(3)所述基因序列分析为经菌株进行测序后得到的基因序列，进行比对，得到结果。

所述测序为上海杰李生物技术有限公司进行测序；

所述比对方法为：将测序后得到的基因序列在Gene Bank中进行16S rRNA序列比对，利用Clustalx 1.83和Mega 5软件对16S rRNA序列进行多重比较和系统分析，得到本发明菌株的种属。

下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

在本发明实施例和对比例中用到的MRS固体培养基中还包括质量浓度为18～20g/L的琼脂粉。

本发明实施例和对比例中用到的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的来源于实验室保存的菌株。

本发明对比例中所用到的L.rhamnosus GGATCC53103来源于北京生物保藏中心BJMCC。

实施例1

传代稳定性研究

将筛选得到的副干酪乳酸杆菌SLP16作为第1代菌株，以第1代菌株为种子接种于MRS固体培养基中培养得到第2代菌株，以第2代菌株为种子接种于MRS固体培养基中培养得到第3代菌株，以此类推直到得到第10代菌株。采用双层琼脂平板法进行抑菌试验。实验时加入的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的混合菌悬液中，大肠杆菌的菌浓为10⁶CFU/mL，金黄色葡萄球菌的菌浓为10⁶CFU/mL。实验时每孔加入菌浓为10⁸CFU/mL的副干酪乳酸杆菌SLP16的培养液200μL，室温扩散30min后，在37℃下培养12h。观察孔洞周围是否出现抑菌圈并用游标卡尺测量其直径，记录数据。结果见表1。

所述副干酪乳酸杆菌SLP16的培养液的制备方法为：将不同代菌株分别在MRS液体培养基中活化24h后得到种子液，取1mL种子液接种于50mL MRS液体培养基中，37℃培养24h后得到的培养液，利用培养液进行抑菌圈实验。

表1不同代副干酪乳酸杆菌SLP16菌株的抑菌结果

表1显示，本发明副干酪乳酸杆菌SLP16传代10次后，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用仍然很稳定，说明本发明的副干酪乳酸杆菌 SLP16具有传代稳定性。

实施例2

抑菌性实验

采用实施例1的双层琼脂平板法进行抑菌试验。观察副干酪乳酸杆菌 SLP16对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果，观察孔洞周围是否出现抑菌圈并用游标卡尺测量其直径，记录数据。得到副干酪乳酸杆菌SLP16对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果。结果见表2。

实施例3

耐酸实验

利用18％(v/v)的HCI调整MRS液体培养基的pH，得到pH为1、1.5、 2、2.5和3的MRS液体培养基。在不同pH的MRS液体培养基中分别接种活菌数为1×10⁸CFU/mL的第1代副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液，在 37℃条件下培养24h，得到培养液。分别取不同pH条件下的培养液进行倍比稀释，稀释10个浓度得到不同稀释度的培养液，取每个稀释度的培养液1mL涂布于MRS固体培养基中，37℃培养48h后计算菌数，得到副干酪乳酸杆菌SLP16的耐酸情况。结果如图1所示。

在MRS液体培养基中接种第1代副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液时，按MRS液体培养基与第1代副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液体积比为100:1的比例接种。

图1显示，副干酪乳酸杆菌SLP16在pH为1.5～3的条件下仍然能够生长。说明副干酪乳酸杆菌SLP16可以耐受一定程度的强酸。

实施例4

耐胆盐实验

分别用胆盐浓度为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5％的牛胆汁培养第1代副干酪乳酸杆菌SLP16，37℃条件下培养24h后，分别取不同胆盐浓度培养的副干酪乳酸杆菌SLP16进行倍比稀释，共稀释10个梯度，得到不同稀释度的培养液。取不同稀释度的培养液1mL涂布于MRS固体培养基中，37℃培养 48h后计算菌数。得到副干酪乳酸杆菌SLP16耐胆盐情况，结果如图2所示。

图2显示，副干酪乳酸杆菌SLP16在胆盐浓度为0.5％时，仍然可以生长，说明副干酪乳酸杆菌SLP16可以耐受一定浓度的胆盐。

实施例5

凝聚性实验

取第1代副干酪乳酸杆菌SLP16的固体菌种1×1cm，接种于MRS液体培养基中，37℃培养24h得到种子液。将种子液在5000r/min的情况下离心10min。用PBS溶液洗涤两次，收集沉淀的菌体。最后向菌体中加入适量的 PBS，旋涡震荡10s混匀得到PBS重悬菌体，调整A₆₀₀＝0.5(A₀)。PBS重悬菌体每间隔1h测定其OD₆₀₀吸光值(A_t)，每组测定三个平行。按公式计算凝聚性，结果如图3所示。

凝聚性％＝(A₀-A_t)/A₀

式中：A₀为初始吸光值；

At为间隔1h后测定的吸光值(t＝1，2，3，4，5......)。

图3显示，6h后副干酪乳酸杆菌SLP16的凝聚能力急剧上升，说明本发明的副干酪乳酸杆菌SLP16具有一定的凝聚性。

实施例6

疏水性实验

取第1代副干酪乳酸杆菌SLP16的固体菌种1×1cm，接种于MRS液体培养基中，37℃培养24h得到种子液。取10mL种子液接种于100mL MRS 液体培养基中，37℃条件下培养48h，得到发酵液。将发酵液在5000r/min 的条件下离心10min，弃去上清液，收集菌体。在菌体中加入100mL PBS重悬，在5000r/min的条件下离心10min，弃上清液，收集菌体，再重复操作此步骤一次。最后向菌体中加入质量浓度为0.9％的生理盐水，重悬菌体，得到生理盐水菌悬液，用生理盐水菌悬液调整A₆₀₀为0.8，记录为B₀。取该生理盐水菌悬液2mL于5mL离心管中，再加入2mL二甲苯，涡旋振荡2min，于通风橱静置40min。40min后，测水相的A₆₀₀值，记录为B₁，每组测3 个平行。根据疏水性％＝[(B₀-B₁)/B₀]×100％计算副干酪乳酸杆菌SLP16的疏水性。结果如表3所示。

实施例7

抗氧化性实验

DPPH自由基清除能力的测定

取1mL菌浓为10⁸CFU/mL的副干酪乳酸杆菌SLP16的种子液，加入2 mL 0.1mmol/L的DPPH溶液，混合均匀，得到样品组。室温避光40min，测定517nm处的吸光值。以蒸馏水代替副干酪乳酸杆菌SLP16的种子液作为对照组，室温避光40min，测定对照组517nm处的吸光值。根据公式计算DPPH自由基清除活性％。

DPPH自由基清除活性％＝[(A_C-A_S)/A_C]×100

其中，AS为样品组吸光值

AC为对照组吸光值(蒸馏水替代样品)。

所述DPPH溶液的溶剂为无水乙醇。

羟自由基清除能力的测定

取0.75mmol/L的邻二氮菲1mL、10×0.01mol/LpH 7.4的PBS溶液2mL、 0.75mmol/L的FeSO₄1mL充分混匀作为空白对照组。

取0.75mmol/L的邻二氮菲1mL、10×0.01mol/LpH 7.4的PBS溶液2mL、 0.75mmol/L的FeSO₄1mL和0.12％的H₂O₂1 mL作为对照组。

将对照组中加入1mL菌浓为10⁸CFU/mL的副干酪乳酸杆菌SLP16的种子液得到样品组。

在536nm处测量每组的吸光度值。根据公式计算羟自由基清除活性。结果如表4所示。

羟自由基清除活性％＝(As-Ac)/(Ab-Ac)×100％

其中，As为样品组吸光值；

Ac为对照组吸光值；

Ab为空白组吸光值。

还原能力的测定

向0.5mL菌浓为10⁸CFU/mL的副干酪乳酸杆菌SLP16的种子液中加入 0.5mL0.2mol/L的磷酸盐缓冲液和0.5mL1％的三氯化铁，于50℃水浴20 min。冷却后，再加入0.5mL 0.1％的三氯乙酸，混合均匀，10min后在700nm 处测定吸光值。吸光值越大说明待测液体的还原能力越强。结果如表4所示。

表4显示，本发明的副干酪乳酸杆菌SLP16具有很强的DPPH自由基清除能力和羟自由基清除能力和还原能力。

实施例8

产胞外多糖实验

取第1代副干酪乳酸杆菌SLP16的固体菌种1×1cm，接种于MRS液体培养基中，37℃培养24h得到种子液。取100mL种子液接种于1000mLMRS 液体培养基中，37℃条件下培养48h，得到发酵液，苯酚-硫酸法测定发酵液中多糖含量。结果如表5所示。

对比例1

按照实施例2的方法操作本对比例1，得到L.rhamnosus GGATCC53103 菌株对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果。结果如表2所示。

表2不同菌株对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制效果

表2显示副干酪乳酸杆菌SLP16的抑菌能力优于L.rhamnosus GGATCC53103。

对比例2

按照实施例3的方法设计L.rhamnosus GGATCC53103菌株的耐酸实验，结果如图1所示。

图1显示副干酪乳酸杆菌SLP16的耐酸能力优于L.rhamnosus GGATCC53103菌株。

对比例3

按照实施例4的方法设计L.rhamnosus GGATCC53103菌株的耐胆盐实验，结果如图2所示。

图2显示副干酪乳酸杆菌SLP16可以耐受一定浓度的胆盐。

对比例4

按照实施例5的方法设计L.rhamnosus GGATCC53103菌株的凝聚性实验，结果如3所示。

图3显示副干酪乳酸杆菌SLP16具有一定的凝聚性。

对比例5

按照实施例6的方法设计L.rhamnosus GGATCC53103菌株的疏水性实验，结果如表3所示。

表3不同菌株的疏水性

表3所示，副干酪乳酸杆菌SLP16的疏水效果优于L.rhamnosus GGATCC53103。

对比例6

按照实施例7的方法设计L.rhamnosus GGATCC53103菌株的抗氧化活性，结果如表4所示。

表4不同菌株的抗氧化活性

菌株名	DPPH清除率％	HO清除率％	还原力(A700)
				副干酪乳酸杆菌SLP16	49.33±0.2	7.5±0.1	0.521±0.02
L.rhamnosusGGATCC53103	22±0.1	57.73±0.3	0.380±0.01

对比例7

按照实施例8的方法设计L.rhamnosus GGATCC53103菌株的产胞外多糖实验，结果如表5所示。

表5不同菌株产胞外多糖的能力

菌株名	胞外多糖(μg/L)
		副干酪乳酸杆菌SLP16	238.18±2
L.rhamnosusGGATCC53103	156.58±3

应用实施例1

将100g豆渣和100mL水进行混合，得到待接种料。取10mL副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液接种于上述待接种料中，36℃培养28h，得到发酵饲料添加剂。

所述副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液中的菌浓为0.5×10⁸CFU/mL。

应用实施例2

将100g豆粕和100mL水进行混合，得到待接种料。取10mL副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液接种于上述待接种料中，38℃培养20h，得到发酵饲料添加剂。

所述副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液中的菌浓为1.5×10⁸CFU/mL。

应用实施例3

将100g麸皮和100mL水进行混合，得到待接种料。取10mL副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液接种于上述待接种料中，37℃培养26h，得到发酵饲料添加剂。

所述副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液中的菌浓为1.0×10⁸CFU/mL。

实验例1

测定应用实施例1的饲料添加剂中粗蛋白、粗脂肪、粗灰分的含量。与应用实施例1待接种料中粗蛋白、粗脂肪、粗灰分的含量进行比较。结果如表6所示。

粗蛋白、粗脂肪、粗灰分的测定按照GB/T6432-GB/T6438中规定的测定方法测定。

表6应用实施例1的饲料添加剂和待接种料各营养成分含量的比较

名称	粗蛋白％	粗脂肪％	粗灰分％
				应用实施例1待接种料	6.11±0.2	2.53±0.2	1.35±0.2
应用实施例1饲料添加剂	7.0±0.1	1.91±0.1	3.96±0.1

实验例2

测定应用实施例2饲料添加剂的香气成分，与应用实施例2待接种料中所含的香气成分进行比较。结果如表7所示。

所述香气成分测定的方法为：准确称取2.0g绝干物料等量的饲料添加剂，置于20mL固体萃取瓶中并加盖密封。将样品在固相微萃取平台50℃热平衡10min，同时将固相微萃取头在气相色谱仪的进样口，250℃老化3 min，随后将老化好的固相微萃取头插入固相微萃取瓶中，深度适宜，固相微萃取瓶平衡好后，按压手柄推出萃取纤维，吸附45min。最后在气相色谱质谱联用仪(GC-MS)进样口250℃解析3min进行测定。

表7应用实施例2的饲料添加剂和待接种料各营养成分含量的比较

表7显示，经过副干酪乳酸杆菌SLP16发酵处理后的饲料添加剂的主要香气物质为乙酸，占比达到了(31.7％)，成为主要香气成分，增加饲料的酸味香气；同时还产生了乙偶姻(7.14％)，乙偶姻是四甲基吡嗪物质的前体物质，四甲基吡嗪具有扩张血管，改善微循环及抑制血小板积聚作用；经过副干酪乳酸杆菌SLP16发酵处理的饲料添加剂的香气成分中也增加了2,4-二叔丁基苯酚，该物质可以作为抗氧剂。与此同时，经过副干酪乳酸杆菌SLP16发酵后正己醛等特殊臭味物质的占比降低，酯类具有香味的物质增加，提升了发酵饲料添加剂的香味。将发酵饲料添加剂加入饲料中能有效改善了饲料本身的异味，提高养殖动物的采食性，增加饲料中的有益成分，提高饲料的品质。

实验例3

根据实施例7的测定方法检测应用实施例3发酵饲料添加剂的DPPH自由基清除能力和羟自由基清除能力和还原能力，与应用实施例3的待接种料的DPPH自由基清除能力和羟自由基清除能力和还原能力进行比较。结果如表8所示。

表8应用实施例3饲料添加剂的抗氧化活性与应用实施例3待接种料的抗氧化活性进行比较的结果

名称	DPPH清除率％	HO清除率％	还原力(A700)
				实施例3的待接种料	63.38±0.2	7.5±0.1	0.564±0.02
实施例3的饲料添加剂	87.04±0.1	1.23±0.3	0.675±0.01

表8显示，经过副干酪乳酸杆菌SLP16处理后的饲料添加剂赋予了更高的抗氧化活性。

实验例4

双层琼脂平板法测定应用实施例1的饲料添加剂的抑菌能力，以金黄色葡萄球菌为指示菌，发酵饲料添加剂的抑菌圈直径为25±2mm，效价为 37312.02±3.6(IU/mg)，以大肠杆菌为指示菌，发酵饲料添加剂的抑菌圈直径为22±1mm，效价为1677.75±0.44(IU/mg)。

实验例5

双层琼脂平板法测定应用实施例1的饲料添加剂的抑菌能力。连续测定 60天得到发酵饲料添加剂的抑菌稳定性。结果如图4所示。

由图4可知，经过副干酪乳杆菌SLP 16处理后得到的饲料添加剂，在长达60天的常温保存过程中抑菌能力虽稍稍降低，不过抑菌能力一直保持在95％以上。说明副干酪乳杆菌SLP16发酵得到的饲料添加剂具有优良的抑菌稳定性。

由以上实施例可知，本发明提供了一种产多糖的副干酪乳酸杆菌SLP16 及其应用以及利用该菌株制备得到的饲料添加剂，本发明的副干酪乳酸杆菌 SLP16较现有技术的乳酸杆菌的性能提高，同时具有优良的胞外产多糖的能力，具有传代稳定性、抑菌性、耐酸性、耐胆盐、抗氧化、凝聚性和疏水性的功效。可见本发明的副干酪乳酸杆菌SLP16具有优良的益生性。将此菌株制备成饲料添加剂，不仅使饲料添加剂具有其自身的益生性，还能促进动物的消化吸收。本发明提供的饲料添加剂是一种安全、无药残、无耐药性、无污染的高品质新型饲料添加剂，能更好的替代抗生素。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种产多糖的副干酪乳酸杆菌Lactobacillus paracasei SLP16，其特征在于，所述副干酪乳酸杆菌Lactobacillus paracasei SLP16的保藏单位名称为：广东省微生物菌种保藏中心，地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏日期为：2021年7月5日，保藏编号为：GDMCC No：61769。

2.权利要求1所述的副干酪乳酸杆菌SLP16在抑制大肠杆菌和/或金黄色葡萄球菌方面的应用。

3.权利要求1所述的副干酪乳酸杆菌SLP16在制备耐胆盐产品方面的应用。

4.权利要求1所述的副干酪乳酸杆菌SLP16在制备具有凝聚性产品方面的应用。

5.权利要求1所述的副干酪乳酸杆菌SLP16在制备具有疏水功效的产品方面的应用。

6.权利要求1所述的副干酪乳酸杆菌SLP16在制备耐酸产品方面的应用。

7.权利要求1所述的副干酪乳酸杆菌SLP16在制备抗氧化产品方面的应用。

8.一种饲料添加剂，其特征在于，包括权利要求1所述的副干酪乳酸杆菌SLP16和辅料，所述辅料包括豆渣、豆粕和麸皮中的任意一种。

9.权利要求8所述的饲料添加剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述待接种料中接种副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液时，待接种料与副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液的体积比为9～10:1；

所述副干酪乳酸杆菌SLP16的种子培养液中副干酪乳酸杆菌SLP16的活菌浓度为0.5～1.5×10⁸CFU/mL；

所述培养的温度为36～38℃；

所述培养的时间为20～28h。