CN113881574A - 一种薏苡黑穗病菌分离及纯化培养方法 - Google Patents
一种薏苡黑穗病菌分离及纯化培养方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113881574A CN113881574A CN202111237500.3A CN202111237500A CN113881574A CN 113881574 A CN113881574 A CN 113881574A CN 202111237500 A CN202111237500 A CN 202111237500A CN 113881574 A CN113881574 A CN 113881574A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- jobi
- coix
- smut
- coix lacryma
- culture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 21
- 238000000746 purification Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 244000077995 Coix lacryma jobi Species 0.000 title claims description 40
- 235000007354 Coix lacryma jobi Nutrition 0.000 title claims description 27
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title abstract description 17
- 238000012136 culture method Methods 0.000 title abstract description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 28
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims abstract description 26
- 241000209205 Coix Species 0.000 claims abstract description 25
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims abstract description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 36
- 239000001965 potato dextrose agar Substances 0.000 claims description 30
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 25
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 21
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 21
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 20
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims description 19
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims description 19
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 18
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 18
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 11
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 10
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 10
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 238000004080 punching Methods 0.000 claims description 5
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims description 5
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 abstract 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 4
- 235000012015 potatoes Nutrition 0.000 description 4
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 206010018498 Goitre Diseases 0.000 description 3
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 description 3
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 description 3
- 240000006394 Sorghum bicolor Species 0.000 description 3
- 235000011684 Sorghum saccharatum Nutrition 0.000 description 3
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 3
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 3
- 201000003872 goiter Diseases 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 3
- 244000028550 Auricularia auricula Species 0.000 description 2
- 235000000023 Auricularia auricula Nutrition 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 2
- 241000221566 Ustilago Species 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 241000209504 Poaceae Species 0.000 description 1
- 241000893100 Sporisorium Species 0.000 description 1
- 241001250070 Sporisorium reilianum Species 0.000 description 1
- 241000746966 Zizania Species 0.000 description 1
- 235000002636 Zizania aquatica Nutrition 0.000 description 1
- 229940124350 antibacterial drug Drugs 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000005056 compaction Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 1
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/02—Separating microorganisms from their culture media
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明属于微生物培育领域，涉及一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法；本发明方法包括表面消毒、接种、纯化培养及液体培养步骤，实现对薏苡黑穗病菌的迅速分离和纯培养；本发明分离方法操作简单、培养周期短、纯度高纯，适用于薏苡中黑穗病菌的快速分离、培养及鉴定，该发明有利于深入理解薏苡黑穗病发病机制，为薏苡黑穗病的绿色防控提供理论指导。
Description
技术领域
本发明属于微生物培育技术领域，涉及一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法。
背景技术
薏苡为禾本科(Gramineae)薏苡属(CoixL.)植物，属于典型的“药(医)食同源”作物。中国薏苡的生产主要分布在黔、桂、滇、川、浙、闽、台等省份，对当地的区域经济社会发展也起到了举足轻重的作用。在薏苡的种植生产中，黑穗病菌是危害薏苡的重要真菌病害之一，严重影响薏苡的产量和品质。
黑穗病是一种真菌病害，在玉米、甘蔗、高粱等多种禾本类作物中均有发生，但是不同作物中均为不同的生物学属(种)，而且对寄生作物具有专一性，如Sporisoriumscitamineum类群专一寄生甘蔗，Ustilagoesculenta类群寄生菰而膨大成为蔬菜茭白，Sporisorium reilianum为高粱寄生类群。薏苡黑穗病菌(Ustilagocoicis)为担子菌亚门、黑粉菌属真菌，主要危害穗部，也可危害茎、叶，最终导致全株发病，但是却不能使其非寄生植物(甘蔗、高粱、玉米等)发病。
虽然公开号为CN105400890A的专利公开了薏苡黑穗病菌检测的方法，包括薏苡黑穗病病原菌分离：从薏苡植株上剪除含有薏苡黑穗病菌的花苞并对其外表面进行消毒后置于超净工作台上，用无菌小刀划破花苞，出现黑色粉末，即黑穗病病菌孢子，将花苞中的黑穗病病菌抖落到灭过菌的报纸上，然后用无菌解剖针取少许黑穗病病菌孢子，置于无菌水中进行稀释，再接种于马丁氏培养基上，28℃暗培养，直到培养基上长出密生的白色菌丝。挑取单孢菌落接种到马铃薯液体培养基(含30mg/L链霉素)中，28℃，220rpm摇菌，暗培养36h；并利用分子生物学技术建立了基于PCR技术的薏苡黑穗病检测方法，代替了传统的形态学观察和指示植物法，使病原菌的检测快速、准确且易于操作。同时，本方法获得的PCR扩增产物，还可以通过测序对不同来源的病原菌进行分类学或遗传多样性的研究。该方法在表面消毒、接种环节的操作步骤较多，而且缺少必要的重复性纯化培养阶段，极易造成不同菌株或其他菌群的混杂，菌株鉴定也需要借助分子生物学技术。
然而，目前对薏苡黑穗菌的分离培养技术极少，同时对薏苡黑穗菌的生物学和遗传学特征却知之甚少。因此，实现对黑穗病菌快速分离和纯化培养，对于深入阐述薏苡黑穗菌的侵染机理、抗菌药物筛选及薏苡绿色防控等均具有重要实践意义。
发明内容
本发明为实现上述技术目的，提供了一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法。该方法包括表面消毒、接种、纯化培养及液体培养步骤，实现对薏苡黑穗病菌的迅速分离和纯培养，可用于薏苡抗黑穗菌药物筛选、薏苡抗性品种鉴定；此外，也可作为黑穗菌发酵培养的原始菌种，对其活性生理成分的开发和利用具有重要基础性意义。
本发明技术方案的具体如下：
一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，包括如下步骤：
(1)表面消毒：选取合适的薏苡发病总苞，在超净工作台内用酒精擦拭表面消毒；
(2)接种：用镊子剥开表面消毒后的薏苡发病总苞，轻轻挑取总苞内黑粉，即黑穗病病菌孢子，将黑粉接种于PDA固体培养基中，放入20～28℃温室中培养5～10d，直至长出特定菌落；
(3)纯化培养：选取无杂菌污染的特定菌落，用镊子挑取菌落放入新配制的PDA固体培养基中，培养5～10d后再次进行分离提纯，如此重复2～3次，即可得到高纯度的黑穗菌菌落；
(4)液体培养：用5mm菌落打孔器在分离提纯出单菌落上打孔取样，接种于分装体积为100mLPDA液体培养基中，培养温度25～30℃，120～180r/min进行摇床振荡培养3～5d，即得到高浓度菌液。
所述酒精的体积分数为75％。
所述PDA固体培养基的配方为：土豆180-220g/L、琼脂粉13-17g/L和葡萄糖18-22g/L。
优选，所述PDA固体培养基的配方为：土豆200g/L、琼脂粉15g/L和葡萄糖20g/L。
所述固体培养的工作条件为：温度为25℃，培养时间为8d。
所述特定菌落的形态表现为：白色、表面隆起、具褶皱，较湿润且不透明。
所述PDA液体培养基的配方为：土豆180-220g/L、葡萄糖18-22g/L。
优选，所述PDA液体培养基的配方为：土豆200g/L、葡萄糖20g/L。
所述液体培养的工作条件为：温度为28℃，转速140r/min振荡、黑暗培养。
有益效果：
(1)本发明通过对黑穗病的薏苡进行真菌分离和纯培养，操作简单，周期短，可作为薏苡抗黑穗病病鉴定、特定药物筛选等提供技术支撑。
(2)本发明采用固体培养和液体培养两种方式对薏苡黑穗菌进行单孢分离纯化和快速繁殖，能够得到高纯度、高浓度菌液；适用于薏苡黑穗病菌的基础生物学及遗传学等方面研究。
(3)本发明中培养基的配方以及培养控制条件简单，实现了低成本分离与培养。
(4)本发明通过单菌落在固体培养基上继代培养，能够对特定的菌株进行快速纯化，然后进行液体培养，无需分子生物学鉴定过程，更为简洁和高效。
(5)本发明采用的PDA培养基主要以土豆和葡萄糖作为能量物质，配方简单，原料易得，培养基易配制，而本发明的培养基中未含有链霉素、维生素等成分，极大降低了培养基的制作成本。
附图说明
图1为薏苡黑穗病菌固体分离及纯化培养前的效果图；
图2为薏苡黑穗病菌固体分离及纯化培养后的效果图。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明，但本发明并不局限于这些实施方式，任何在本实施例基本精神上的改进或代替，仍属于本发明权利要求所要求保护的范围。
实施例1
一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，包括如下步骤：
(1)表面消毒：选取表面完整、无开裂的薏苡发病总苞(病瘿)，在消毒的超净工作台内用体积分数为75％(V/V)酒精擦拭进行表面消毒；
(2)接种：用镊子剥开表面消毒后的薏苡总苞，轻轻挑取总苞内黑粉(冬孢子)接种于含有土豆200g/L、琼脂粉15g/L和葡萄糖20g/L的PDA固体培养基中，放入20℃温室中培养10d，直至长出形态为白色、表面隆起、具褶皱，较湿润且不透明的特定菌落；
(3)纯化培养：选取上述特定菌落，用镊子挑取无污染的菌落放入新配制的PDA固体培养基中，培养10d后再次进行分离提纯，如此重复2次，即可得到高纯度的黑穗菌菌落；所述PDA固体培养基配方为土豆200g/L、琼脂粉15g/L和葡萄糖20g/L；
(4)液体培养：用5mm菌落打孔器在分离提纯出单菌落上打孔取样，取样后接种于分装体积为100mLPDA液体培养基中，培养温度25℃，120r/min摇床振荡、黑暗培养4d，即得到高浓度菌液；所述PDA液体培养基的配方为：土豆200g/L、葡萄糖20g/L；
实施例2：
一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，包括如下步骤：
(1)表面消毒：选取表面完整、无开裂的薏苡发病总苞(病瘿)，在消毒的超净工作台内用体积分数为75％(V/V)酒精擦拭进行表面消毒；
(2)接种：用镊子剥开表面消毒后的薏苡总苞，轻轻挑取总苞内黑粉(冬孢子)接种于含有土豆220g/L、琼脂粉13g/L和葡萄糖18g/L的PDA固体培养基中，放入25℃温室中培养8d，直至长出形态为白色、表面隆起、具褶皱，较湿润且不透明的特定菌落；
(3)纯化培养：选取上述特定菌落，用镊子挑取无污染的菌落放入新配制的PDA固体培养基中，培养8d后再次进行分离提纯，如此重复3次，即可得到高纯度的黑穗菌菌落；所述PDA固体培养基配方为土豆220g/L、琼脂粉13g/L和葡萄糖18g/L；
(4)液体培养：用5mm菌落打孔器在分离提纯出单菌落上打孔取样，取样后接种于分装体积为100mLPDA液体培养基中，培养温度28℃，140r/min摇床振荡、黑暗培养5d，即得到高浓度菌液；所述PDA液体培养基的配方为：土豆180g/L、葡萄糖22g/L；实施例3：
一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，包括如下步骤：
(1)表面消毒：选取表面完整、无开裂的薏苡发病总苞(病瘿)，在消毒的超净工作台内用体积分数为75％(V/V)酒精擦拭进行表面消毒；
(2)接种：用镊子剥开表面消毒后的薏苡总苞，轻轻挑取总苞内黑粉(冬孢子)接种于含有土豆200g/L、琼脂粉15g/L和葡萄糖20g/L的PDA固体培养基中，放入28℃温室中培养5d，直至长出形态为白色、表面隆起、具褶皱，较湿润且不透明的特定菌落；
(3)纯化培养：选取上述特定菌落，用镊子挑取无污染的菌落放入新配制的PDA固体培养基中，培养5d后再次进行分离提纯，如此重复2次，即可得到高纯度的黑穗菌菌落；所述PDA固体培养基配方为土豆200g/L、琼脂粉15g/L和葡萄糖20g/L；
(4)液体培养：用5mm菌落打孔器在分离提纯出单菌落上打孔取样，取样后接种于分装体积为100mLPDA液体培养基中，培养温度28℃，180r/min摇床振荡、黑暗培养3d，即得到高浓度菌液；所述PDA液体培养基的配方为：土豆200g/L、葡萄糖20g/L；
分别按照实施例1-3的步骤进行培育，初始接种量为直径5mm圆形菌斑，液体培养后的菌丝体体积分数(V/V)为53.5％～68.4％，细胞密实体积为13.4～14.1mL/100mL，鲜重4.88～5.91g/100mL，干重0.53～0.58g/100mL(表1)，能够满足薏苡黑穗病菌的基础生物学及遗传学等方面研究，各实施例培养后所得高浓度菌液的情况具体如表1所示；
表1不同实施例液体培养后的菌丝体浓度情况
注：体积分数为液体菌液静置后菌丝体占总体积的百分比(％)；细胞密实体积为2000r/min离心5min后每100毫升菌液中菌丝体所占的体积(mL/100mL)；鲜重为每100mL菌液过滤后菌丝体的活体重量(g/100mL)；干重为每100mL菌液过滤后菌丝体的烘干重量(g/100mL)。
Claims (10)
1.一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)表面消毒：选取合适的薏苡发病总苞，在超净工作台内用酒精擦拭表面消毒；
(2)接种：用镊子剥开表面消毒后的薏苡发病总苞，轻轻挑取总苞内黑粉，即黑穗病病菌孢子，将黑粉接种于PDA固体培养基中，放入20～28℃温室中培养5～10d，直至长出特定菌落；
(3)纯化培养：选取无杂菌污染的特定菌落，用镊子挑取菌落放入新配制的PDA固体培养基中，培养5～10d后再次进行分离提纯，如此重复2～3次，即可得到高纯度的黑穗菌菌落；
(4)液体培养：用5mm菌落打孔器在分离提纯出单菌落上打孔取样，接种于分装体积为100mL PDA液体培养基中，培养温度25～30℃，120～180r/min进行摇床振荡培养3～5d，即得到高浓度菌液。
2.如权利要求1所述一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，其特征在于，所述酒精的体积分数为75％。
3.如权利要求1所述一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，其特征在于，所述PDA固体培养基的配方为：土豆180-220g/L、琼脂粉13-17g/L和葡萄糖18-22g/L。
4.如权利要求1或3所述一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，其特征在于，所述PDA固体培养基的配方为：土豆200g/L、琼脂粉15g/L和葡萄糖20g/L。
5.如权利要求1所述一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，其特征在于，所述固体培养的工作条件为：温度为25℃，培养时间为8d。
6.如权利要求1所述一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，其特征在于，所述特定菌落的形态表现为：白色、表面隆起、具褶皱，较湿润且不透明。
7.如权利要求1所述一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，其特征在于，所述PDA液体培养基的配方为：土豆180-220g/L、葡萄糖18-22g/L。
8.如权利要求1或7所述一种薏苡黑穗病菌的分离及纯培养，其特征在于，所述PDA液体培养基的配方为：土豆200g/L、葡萄糖20g/L。
9.如权利要求1所述一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，其特征在于，所述液体培养的工作条件为：温度为28℃，转速140r/min振荡、黑暗培养。
10.如权利要求1所述一种薏苡黑穗病菌的分离及纯化培养方法，其特征在于，所述高浓度菌液在薏苡抗黑穗菌药物筛选、薏苡抗性品种鉴定中的应用或用作黑穗菌发酵培养的原始菌种。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111237500.3A CN113881574A (zh) | 2021-10-22 | 2021-10-22 | 一种薏苡黑穗病菌分离及纯化培养方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111237500.3A CN113881574A (zh) | 2021-10-22 | 2021-10-22 | 一种薏苡黑穗病菌分离及纯化培养方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113881574A true CN113881574A (zh) | 2022-01-04 |
Family
ID=79013487
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111237500.3A Pending CN113881574A (zh) | 2021-10-22 | 2021-10-22 | 一种薏苡黑穗病菌分离及纯化培养方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113881574A (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101880720A (zh) * | 2010-07-20 | 2010-11-10 | 云南省农业科学院甘蔗研究所 | 甘蔗黑穗病菌快速检测方法 |
| CN104593288A (zh) * | 2014-12-19 | 2015-05-06 | 广西大学 | 一种防治甘蔗黑穗病的生防菌株zhr0及其应用 |
| CN105400890A (zh) * | 2015-12-22 | 2016-03-16 | 贵州省亚热带作物研究所 | 薏苡黑穗病菌检测的方法 |
| CN106085880A (zh) * | 2016-07-11 | 2016-11-09 | 中国农业科学院麻类研究所 | 一种黑粉菌的分离方法及所用培养基 |
| CN107446824A (zh) * | 2017-08-21 | 2017-12-08 | 湖北省农业科学院植保土肥研究所 | 一种小麦白粉病菌的单孢分离方法 |
-
2021
- 2021-10-22 CN CN202111237500.3A patent/CN113881574A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101880720A (zh) * | 2010-07-20 | 2010-11-10 | 云南省农业科学院甘蔗研究所 | 甘蔗黑穗病菌快速检测方法 |
| CN104593288A (zh) * | 2014-12-19 | 2015-05-06 | 广西大学 | 一种防治甘蔗黑穗病的生防菌株zhr0及其应用 |
| CN105400890A (zh) * | 2015-12-22 | 2016-03-16 | 贵州省亚热带作物研究所 | 薏苡黑穗病菌检测的方法 |
| CN106085880A (zh) * | 2016-07-11 | 2016-11-09 | 中国农业科学院麻类研究所 | 一种黑粉菌的分离方法及所用培养基 |
| CN107446824A (zh) * | 2017-08-21 | 2017-12-08 | 湖北省农业科学院植保土肥研究所 | 一种小麦白粉病菌的单孢分离方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 高雅等: "高粱丝黑穗病菌离体培养技术", 食品与发酵工业, vol. 35, no. 12, pages 97 - 99 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112899201B (zh) | 贝莱斯芽孢杆菌及其应用以及防治香蕉枯萎病的方法 | |
| CN111662828B (zh) | 一株莱氏绿僵菌及其应用 | |
| CN101294137B (zh) | 一种节菱孢菌株及其用途 | |
| CN113025505B (zh) | 一种莱氏绿僵菌及其在草地贪夜蛾蛹期的生物防治方法与应用 | |
| CN113481105B (zh) | 一种拟茎点霉属真菌新菌株、制备方法及用途 | |
| CN108865900B (zh) | 一种爪哇棒束孢菌株及其应用 | |
| CN112725228A (zh) | 一种可防治桃褐腐病的弗吉尼亚链霉菌及其应用 | |
| CN109082396A (zh) | 一种dsf群体感应信号分子淬灭菌及其在植物病害防治中的应用 | |
| CN110317747B (zh) | 一种解淀粉芽孢杆菌jt68及其在防治茶炭疽病的应用 | |
| CN113444651B (zh) | 一种西红花内生真菌及其在防治球茎腐烂病中的应用 | |
| CN108913625B (zh) | 耐盐链霉菌、其菌剂及其菌剂在促进植物生长中的应用 | |
| CN106010987A (zh) | 一种对突背蔗犀金龟具有致病力的白僵菌菌株及其应用 | |
| CN112608860B (zh) | 一株解淀粉芽孢杆菌yb130及其应用 | |
| CN101451108B (zh) | 一种防治蝇类害虫的蜡蚧轮枝菌及其应用 | |
| CN101619291B (zh) | 一种角毛壳菌株及其用途 | |
| CN114806898B (zh) | 一株红棕象甲球孢白僵菌BbKMND202111菌株及其应用 | |
| CN114456973B (zh) | 一株烟草内生娄彻链霉菌及在烟草病害防控中的应用 | |
| CN114480143B (zh) | 防治向日葵菌核病的哈茨木霉m6及其应用 | |
| CN114032182B (zh) | 一株兼具拮抗大蒜根腐病病原菌和促生功能的真菌 | |
| CN105176842A (zh) | 番茄灰叶斑病病原菌的分离方法 | |
| CN115806913A (zh) | 野尻链霉菌（Streptomyces nojiriensis）菌株9-13及应用 | |
| CN113881574A (zh) | 一种薏苡黑穗病菌分离及纯化培养方法 | |
| CN105039179B (zh) | 一种戴氏绿僵菌mtyj141025及其应用 | |
| CN116649374B (zh) | 一株铜绿假单胞杆菌qse-tm7及其在制备防治番茄灰霉病的生物制剂中的应用 | |
| CN114437943B (zh) | 一种高效致病力生防菌斐济曲霉菌株及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |