CN113842344A - 一种具有祛痘功效的护肤品组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有祛痘功效的护肤品组合物及其制备方法，其是由下述重量百分比的原料制得：卡波姆0.2‑0.3％，丁二醇2‑4％，甜菜碱水杨酸盐1‑3％，精氨酸1‑2％，季铵盐‑73，2‑4％，海藻糖0.5‑1.5％，烟酰胺0.5‑1.5％，生育酚乙酸酯1.5‑2.5％，寡肽‑1，4‑6％，金银花复配提取物3‑7％，纤连蛋白4‑6ppm，余量为水。本发明提供了一种含有纤连蛋白同时含有寡肽‑1的护肤品配方，对皮肤刺激性小，修复表皮损伤，祛痘的同时也不易留下痘印。
Description
技术领域
本发明涉及护肤品技术领域，确切地说是一种具有祛痘功效的护肤品组合物及其制备方法。
背景技术
痘，是痤疮的俗称，又叫“面疱”“粉刺”“酒刺”“暗疮”等，是由于皮脂分泌过多、毛囊皮脂腺导管堵塞、细菌感染和炎症反应等因素所引发的一种慢性炎症性皮肤病。青春痘、粉刺、暗疮在医学上统称为痤疮，是常见的一种皮脂腺慢性病，其成因是青春期时，体内的荷尔蒙会刺激毛发生长，皮脂腺分泌旺盛，导致毛孔堵塞。大多数祛痘产品效果平平，容易留下痘印。因此，开发出一种具有显著祛痘功效，对皮肤刺激性小且不易留下痘印的产品是很有意义的。
目前现有的祛痘物质抗衰对皮肤刺激性大、效果不理想、易留下痘印，非常需要具有效果明确、作用安全、无不良反应且不易留下痘印的具有祛痘作用的产品。
发明内容
本发明的目的在于提供一种更易于被皮肤吸收，且具有显著的皮肤祛痘功效的护肤品组合物及其制备方法。
上述目的通过以下方案实现：
一种具有祛痘功效的护肤品组合物，其特征在于，其是由下述重量百分比的原料制得：卡波姆0.2-0.3％，丁二醇2-4％，甜菜碱水杨酸盐1-3％，精氨酸1-2％，季铵盐-732-4％，海藻糖0.5-1.5％，烟酰胺0.5-1.5％，生育酚乙酸酯1.5-2.5％，寡肽-14-6％，金银花复配提取物3-7％，纤连蛋白4-6ppm，余量为水；
一种具有祛痘功效的护肤品组合物，其特征在于，所述的金银花复配提取物是由下述重量份的原料制得：金银花10-15、薄荷叶4-6、葡萄糖酸锌0.1-0.3、视黄醇棕榈酸酯0.2-0.3，水适量。
所述的具有祛痘功效的护肤品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)在金银花复配提取物中加入适量水，加热至30-45℃搅拌5-10min后，得金银花复配提取液备用；
(2)卡波姆、丁二醇、甜菜碱水杨酸盐、精氨酸以及适量水投入搅拌锅中，搅拌均匀，加热至40-50℃，再加入酵母菌溶胞物提取物、干细胞外泌体，均质机均质3-5Min；
(3)在步骤(2)均质后的物料中加入金银花复配提取液以及其余原料，于30-45℃搅拌均匀，冷却，干燥，出料，即得。
所述的具有祛痘功效的护肤品的制备方法，其特征在于：
所述的金银花复配提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)金银花、薄荷叶混匀后，用3-5％的氯化钠溶液浸泡3-5Min,洗净，捣碎，再研磨，得复配研磨粉备用；
(2)将复配研磨粉加入适量水中，加热至40-50℃搅拌5-10min后，加入葡萄糖酸锌、视黄醇棕榈酸酯，离心，去上清液后，干燥，即得。
本发明的有益效果为：
(1)本发明提供了一种含有纤连蛋白同时含有寡肽-1的护肤品配方，对皮肤刺激性小，修复表皮损伤，祛痘的同时也不易留下痘印。
(2)与其他的产品相比，本发明通过受损表皮的修复与再生，重组人纤连蛋白能修复敏感肌、祛除红血丝、祛除色斑、晒斑、改善皮肤弹性；金银花复配提取物具有良好的抗菌效果与消炎效果，可以改善皮肤的敏感问题与长痘问题。甜菜碱水杨酸盐是水杨酸的衍生物，完美的结合了水杨酸祛痘紧肤和甜菜碱滋润保湿的功效，温和不刺激，促进皮肤新成代谢，能有效改善痘痘肌，防止毛孔堵塞；季铵盐-73作为一款强效但安全性极高的抗菌剂，对丙酸痤疮杆菌有极好的效果，还可抑制黑色素形成；烟酰胺作为一种维生素B3的衍生物不仅具有美白、抗糖化的作用，还具有一定的控油作用，可以缩小毛孔，抑制皮肤中分泌的脂肪酸，从而达到祛痘的效果；寡肽-1可以促进皮肤细胞增长，修复受损细胞，调理敏感肌，有很好的祛痘美白效果，在一定程度上还可以预防粉刺；生育酚乙酸酯不仅有锁水保湿抗氧化消除自由基的作用，对皮肤过敏也有一定的抑制作用，安全系数很高。
具体实施方式
实施例1：一种具有祛痘功效的护肤品组合物，其是由下述重量百分比的原料制得：卡波姆0.25％，丁二醇3％，甜菜碱水杨酸盐2％，精氨酸1.4％，季铵盐-73，3％，海藻糖1％，烟酰胺1％，生育酚乙酸酯2％，寡肽-1，5％，金银花复配提取物3％，1ppm纤连蛋白，水余量。
所述的金银花复配提取物是由下述重量份的原料制得：金银花10、薄荷叶5、葡萄糖酸锌0.3、视黄醇棕榈酸酯0.3，水适量。
所述的具有祛痘功效的护肤品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)在金银花复配提取物中加入适量水，加热至45℃搅拌5min后，得金银花复配提取液备用；
(2)卡波姆、丁二醇、甜菜碱水杨酸盐、精氨酸以及适量水投入搅拌锅中，搅拌均匀，加热至50℃，再加入酵母菌溶胞物提取物、干细胞外泌体，均质机均质5Min；
(3)在步骤(2)均质后的物料中加入金银花复配提取液以及其余原料，于45℃搅拌均匀，冷却，干燥，出料，即得。
所述的金银花复配提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)金银花、薄荷叶混匀后，用5％的氯化钠溶液浸泡3-5Min,洗净，捣碎，再研磨，得复配研磨粉备用；
(2)将复配研磨粉加入适量水中，加热至40℃搅拌5min后，加入葡萄糖酸锌、视黄醇棕榈酸酯，离心，去上清液后，干燥，即得。
实施例2：一种具有祛痘功效的护肤品组合物，其是由下述重量百分比的原料制得：卡波姆0.25％，丁二醇3％，甜菜碱水杨酸盐2％，精氨酸1.4％，季铵盐-73，3％，海藻糖1％，烟酰胺1％，生育酚乙酸酯2％，寡肽-1，5％，金银花复配提取物3％，2ppm纤连蛋白，水余量。
所述的金银花复配提取物是由下述重量份的原料制得：金银花15、薄荷叶4、葡萄糖酸锌0.1、视黄醇棕榈酸酯0.2，水适量。
所述的具有祛痘功效的护肤品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)在金银花复配提取物中加入适量水，加热至45℃搅拌5min后，得金银花复配提取液备用；
(2)卡波姆、丁二醇、甜菜碱水杨酸盐、精氨酸以及适量水投入搅拌锅中，搅拌均匀，加热至50℃，再加入酵母菌溶胞物提取物、干细胞外泌体，均质机均质5Min；
(3)在步骤(2)均质后的物料中加入金银花复配提取液以及其余原料，于45℃搅拌均匀，冷却，干燥，出料，即得。
所述的金银花复配提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)金银花、薄荷叶混匀后，用5％的氯化钠溶液浸泡3-5Min,洗净，捣碎，再研磨，得复配研磨粉备用；
(2)将复配研磨粉加入适量水中，加热至40℃搅拌5min后，加入葡萄糖酸锌、视黄醇棕榈酸酯，离心，去上清液后，干燥，即得。
实施例3：一种具有祛痘功效的护肤品组合物，其是由下述重量百分比的原料制得：卡波姆0.25％，丁二醇3％，甜菜碱水杨酸盐2％，精氨酸1.4％，季铵盐-73，3％，海藻糖1％，烟酰胺1％，生育酚乙酸酯2％，寡肽-1，5％，金银花复配提取物3％，5ppm纤连蛋白，水余量。其是采用本领域常规的护肤品制备方法制备即得。
所述的金银花复配提取物是由下述重量份的原料制得：金银花15、薄荷叶5、葡萄糖酸锌0.2、视黄醇棕榈酸酯0.2，水适量。
所述的具有祛痘功效的护肤品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)在金银花复配提取物中加入适量水，加热至45℃搅拌5min后，得金银花复配提取液备用；
(2)卡波姆、丁二醇、甜菜碱水杨酸盐、精氨酸以及适量水投入搅拌锅中，搅拌均匀，加热至50℃，再加入酵母菌溶胞物提取物、干细胞外泌体，均质机均质5Min；
(3)在步骤(2)均质后的物料中加入金银花复配提取液以及其余原料，于45℃搅拌均匀，冷却，干燥，出料，即得。
所述的金银花复配提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)金银花、薄荷叶混匀后，用5％的氯化钠溶液浸泡3-5Min,洗净，捣碎，再研磨，得复配研磨粉备用；
(2)将复配研磨粉加入适量水中，加热至40℃搅拌5min后，加入葡萄糖酸锌、视黄醇棕榈酸酯，离心，去上清液后，干燥，即得。
实施例4：一种具有祛痘功效的护肤品组合物，其是由下述重量百分比的原料制得：卡波姆0.25％，丁二醇3％，甜菜碱水杨酸盐2％，精氨酸1.4％，季铵盐-73，3％，海藻糖1％，烟酰胺1％，生育酚乙酸酯2％，寡肽-1，5％，金银花复配提取物5％，5ppm纤连蛋白，水余量。其是采用本领域常规的护肤品制备方法制备即得。
所述的金银花复配提取物是由下述重量份的原料制得：金银花10-15、薄荷叶4-6、葡萄糖酸锌0.1-0.3、视黄醇棕榈酸酯0.2-0.3，水适量。
所述的具有祛痘功效的护肤品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)在金银花复配提取物中加入适量水，加热至45℃搅拌5min后，得金银花复配提取液备用；
(2)卡波姆、丁二醇、甜菜碱水杨酸盐、精氨酸以及适量水投入搅拌锅中，搅拌均匀，加热至50℃，再加入酵母菌溶胞物提取物、干细胞外泌体，均质机均质5Min；
(3)在步骤(2)均质后的物料中加入金银花复配提取液以及其余原料，于45℃搅拌均匀，冷却，干燥，出料，即得。
所述的金银花复配提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)金银花、薄荷叶混匀后，用5％的氯化钠溶液浸泡3-5Min,洗净，捣碎，再研磨，得复配研磨粉备用；
(2)将复配研磨粉加入适量水中，加热至40℃搅拌5min后，加入葡萄糖酸锌、视黄醇棕榈酸酯，离心，去上清液后，干燥，即得。
实施例5：一种具有祛痘功效的护肤品组合物，其是由下述重量百分比的原料制得：卡波姆0.25％，丁二醇3％，甜菜碱水杨酸盐2％，精氨酸1.4％，季铵盐-73，3％，海藻糖1％，烟酰胺1％，生育酚乙酸酯2％，寡肽-1，5％，金银花复配提取物7％，5ppm纤连蛋白，水余量。其是采用本领域常规的护肤品制备方法制备即得。
所述的金银花复配提取物是由下述重量份的原料制得：金银花12、薄荷叶4、葡萄糖酸锌0.3、视黄醇棕榈酸酯0.3，水适量。
所述的具有祛痘功效的护肤品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)在金银花复配提取物中加入适量水，加热至45℃搅拌5min后，得金银花复配提取液备用；
(2)卡波姆、丁二醇、甜菜碱水杨酸盐、精氨酸以及适量水投入搅拌锅中，搅拌均匀，加热至50℃，再加入酵母菌溶胞物提取物、干细胞外泌体，均质机均质5Min；
(3)在步骤(2)均质后的物料中加入金银花复配提取液以及其余原料，于45℃搅拌均匀，冷却，干燥，出料，即得。
所述的金银花复配提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)金银花、薄荷叶混匀后，用5％的氯化钠溶液浸泡3-5Min,洗净，捣碎，再研磨，得复配研磨粉备用；
(2)将复配研磨粉加入适量水中，加热至40℃搅拌5min后，加入葡萄糖酸锌、视黄醇棕榈酸酯，离心，去上清液后，干燥，即得。
根据如下表格来对本发明的实施例进行进一步的详细说明。
1.促细胞粘附活性测定
试验原理：重组人纤连蛋白重要作用是促进细胞的黏连和粘附，可提高细胞的贴壁率、汇合率，缩短细胞汇合时间，使细胞形态结构良好，代谢率增强及蛋白质合成速度显著提高。而细胞的黏连和粘附是细胞修复、细胞生长完成的必要条件，因此重组人纤连蛋白具有促细胞修复的功效。本实验通过重组人纤连蛋白促MDBK细胞的粘附试验，统计不同重组人纤连蛋白浓度下各孔内细胞数，经四参数拟合得出重组人纤连蛋白的半数有效浓度(ED50)。
试验方法：将重组人纤连蛋白在96孔板中进行2倍梯度稀释，共做10个稀释度，每孔50μl重组人纤连蛋白稀释液，并设立阴性对照，加入50μlPBS作为对照，4℃过夜孵育。
孵育完成后弃去板中PBS，每孔加入100μl30g/LBSA，置于37℃孵育1h后，取出96孔板，弃去板中液体，加入MDBK重悬细胞(用无血清培养基重悬)，细胞接种密度为1.0×105个/ml，每孔接种100μl，温箱孵育3-5h后PBS洗涤3次，镜下观察细胞贴壁情况，选取200倍镜下除边缘处五个点计贴壁细胞数，根据计数结果经四参数拟合计算后得出效价。
结果计算：以稀释倍数为横坐标，贴壁细胞数为纵坐标，在ELISACalc回归/拟合计算程序软件中设定Logistic曲线拟合2(四参数)为回归/拟合模型，输入记录测定的数据进行回归/拟合，可以得到回归曲线及回归方程。
试验数据采用四参数回归计算法进行处理后，按下式计算结果：
试供品生物学活性(U/ml)＝Pr*Ds*Es/Dr*Er
式中Pr为标准品生物学活性，U/ml；
Ds为试供品预稀释倍数；
Es为试供品相当于标准品半效数的稀释倍数；
Dr为标准品预稀释倍数；
Er为标准品半效量的稀释倍数；
表1效价统计结果
| 样品 | 工作效价(U/ml) |
| 实施例1 | 52.76 |
| 实施例2 | 98.54 |
| 实施例3 | 148.22 |
| 实施例4 | 1522.47 |
| 实施例5 | 153.22 |
| 阴性对照 | 13.34 |
本次实验结果表明本发明所涉及的组合物具有促细胞粘附活性。该化合物可以通过促进细胞粘附、迁移来起到皮肤修复效果，可做到祛痘除印。
2.促细胞增殖活性检验
试剂配制
完全培养液 量取小牛血清100ml，加培养液定容至1000ml。
维持培养液 量取小牛血清4ml，加培养液定容至1000ml。
消化液：称取乙二胺四乙酸二钠0.2g、氯化钠8g、氯化钾0.2g、磷酸氢二钠1.152g、磷酸二氢钾0.2g、胰蛋白酶2.5g，加纯化水溶解并定容至1000ml，过滤除菌。
噻唑蓝(MTT)溶液：称取MTT粉末0.10g，加PBS20ml使溶解，经0.22μm滤膜过滤除菌。4℃避光保存。
PBS：称取氯化钠8.0g、氯化钾0.20g、磷酸氢二钠1.44g、磷酸二氢钾0.24g，加纯化水溶解并定容至1000ml，经121℃15分钟灭菌。
细胞株：BALB/C3T3细胞。
rhEGF国家标准品：6800IU/支，研磨粉；
试验操作
标准品制备：取50μl标准品于450μl完全培养液中进行10倍稀释，重复操作直至稀释100倍。取735μl100倍稀释标准品于265μl完全培养液中进行1.36倍稀释。取136倍稀释液在96孔细胞培养板中，从1︰4开始依次做4倍递增梯度稀释(具体操作步骤为首先于96孔细胞培养板中加入150μl完全培养液，取50μl1000倍稀释的供试品溶液加入96孔板中第1列，吹打稀释。充分稀释后于第1列孔中抽取50μl于第2列孔，吹打稀释。充分稀释后于第2列孔中抽取50μl于第3列孔，吹打稀释。重复上述操作，直至第10列)，共做10个稀释度(1～10孔)，每个稀释度同时设置一个复孔。
重组人表皮生长因子供试品制备：取100μl供试品于900μl完全培养液中进行10倍稀释，重复操作直至稀释1000倍。取1000倍稀释液在96孔细胞培养板中，从1︰4开始依次做4倍递增梯度稀释(具体操作步骤为首先于96孔细胞培养板中加入150μl完全培养液，取50μl1000倍稀释的供试品溶液加入96孔板中第1列，吹打稀释。充分稀释后于第1列孔中抽取50μl于第2列孔，吹打稀释。充分稀释后于第2列孔中抽取50μl于第3列孔，吹打稀释。重复上述操作，直至第10列)，共做10个稀释度(1～10孔)，每个稀释度同时设置一个复孔。
注：样品预稀释倍数根据其活性值进行调整。
测定方法
①BALB/C3T3细胞株用完全培养液于37℃、5％二氧化碳培养，控制细胞浓度为每1ml含1.0×105-5.0×105个细胞，传代后24～36小时用于生物学活性测定。
②弃去培养瓶中的培养液，消化和收集细胞用完全培养液配成每1ml含5.0×104～8.0×104个细胞的细胞悬液，接种于96孔板中，接种过程中不停摇匀，保持每孔接种数相同，每孔100μl,于37℃、5％二氧化碳条件下培养。
③24小时后换成维持培养液。置37℃、5％二氧化碳培养24小时。
④制备的细胞培养板弃去维持液，加入标准品溶液和供试品溶液，每孔100μl。置37℃、5％二氧化碳培养64～72小时。
⑤MTT比色法：每孔加入MTT溶液20μl,于37℃、5％二氧化碳培养5小时。以上操作在无菌条件下进行。弃去培养板中的液体后，向每孔中加入DMSO100μl,混匀后在酶标仪上，以630nm为参比波长，570nm为试验波长测定吸光度，记录测定结果。
数据处理
将各个样品及标准品的OD值数据进行四参数拟合。
结果计算
试验数据采用计算机程序或四参数回归计算法进行处理。
供试品工作效价计算公式U＝预稀释倍数*4C(C为四参数方程中C值)
供试品校正效价并按下式计算结果：
校正效价(IU/ml)＝Pr*Ds*Es/Dr*Er
式中Pr为标准品生物学活性，IU/ml；
Ds为试供品预稀释倍数；
Es为试供品相当于标准品半效数的稀释倍数；
Dr为标准品预稀释倍数；
Er为标准品半效量的稀释倍数；
本次实验结果表明本发明所涉及的组合物具有促细胞增长活性。
3.超氧自由基清除率活性测定
实验原理：超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起细胞结构和功能的破坏，与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。
AP-TEMED系统产生超氧阴离子，与盐酸羟胺反应生成NO2－，NO2－与对氨基苯磺酸和α－萘胺的作用生成红色的偶氮化合物，在530nm处有特征吸收峰，样品对超氧阴离子的清除能力与530nm的吸光值呈负相关。
操作步骤
将试剂盒中各试剂按以下顺序加入。
计算公式：超氧阴离子清除率I％＝(A对照管-A测定管)/A对照管×100％
结果：
本次实验结果表明本发明所涉及的组合物具有超氧自由基清除活性，具有抗氧化作用。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
Claims (4)
1.一种具有祛痘功效的护肤品组合物，其特征在于，其是由下述重量百分比的原料制得：卡波姆0.2-0.3％，丁二醇2-4％，甜菜碱水杨酸盐1-3％，精氨酸1-2％，季铵盐-73 2-4％，海藻糖0.5-1.5％，烟酰胺0.5-1.5％，生育酚乙酸酯1.5-2.5％，寡肽-14-6％，金银花复配提取物3-7％，纤连蛋白4-6ppm，余量为水。
2.所述的一种具有祛痘功效的护肤品组合物，其特征在于，所述的金银花复配提取物是由下述重量份的原料制得：金银花10-15、薄荷叶4-6、葡萄糖酸锌0.1-0.3、视黄醇棕榈酸酯0.2-0.3，水适量。
3.一种如权利要求1所述的具有祛痘功效的护肤品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)在金银花复配提取物中加入适量水，加热至30-45℃搅拌5-10min后，得金银花复配提取液备用；
(2)卡波姆、丁二醇、甜菜碱水杨酸盐、精氨酸以及适量水投入搅拌锅中，搅拌均匀，加热至40-50℃，再加入酵母菌溶胞物提取物、干细胞外泌体，均质机均质3-5Min；
(3)在步骤(2)均质后的物料中加入金银花复配提取液以及其余原料，于30-45℃搅拌均匀，冷却，干燥，出料，即得。
4.根据权利要求3所述的具有祛痘功效的护肤品的制备方法，其特征在于：
所述的金银花复配提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)金银花、薄荷叶混匀后，用3-5％的氯化钠溶液浸泡3-5Min,洗净，捣碎，再研磨，得复配研磨粉备用；
(2)将复配研磨粉加入适量水中，加热至40-50℃搅拌5-10min后，加入葡萄糖酸锌、视黄醇棕榈酸酯，离心，去上清液后，干燥，即得。
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