CN113841901A - 一种高活性合生素制剂冻干粉的制备方法 - Google Patents
一种高活性合生素制剂冻干粉的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113841901A CN113841901A CN202111078406.8A CN202111078406A CN113841901A CN 113841901 A CN113841901 A CN 113841901A CN 202111078406 A CN202111078406 A CN 202111078406A CN 113841901 A CN113841901 A CN 113841901A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- glucan
- yeast
- probiotic
- probiotics
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000000843 powder Substances 0.000 title claims abstract description 35
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 235000019722 synbiotics Nutrition 0.000 title claims abstract description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims abstract description 61
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims abstract description 61
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 claims abstract description 44
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 claims abstract description 44
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims abstract description 44
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 5
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 56
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 41
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims description 40
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 39
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 34
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 31
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 31
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 28
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 28
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 claims description 28
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 28
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 28
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 28
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 28
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 28
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 28
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 claims description 28
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 claims description 28
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 claims description 28
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 28
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 claims description 28
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 28
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 28
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 239000001393 triammonium citrate Substances 0.000 claims description 28
- 235000011046 triammonium citrate Nutrition 0.000 claims description 28
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 28
- 101710105825 Protein vein Proteins 0.000 claims description 24
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 24
- 239000010802 sludge Substances 0.000 claims description 24
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 claims description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 16
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 15
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 15
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- 238000005192 partition Methods 0.000 claims description 12
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 10
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 4
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 3
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims 1
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 claims 1
- 241000894007 species Species 0.000 claims 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 abstract description 8
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 abstract description 4
- 230000029087 digestion Effects 0.000 abstract description 3
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 abstract description 2
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 abstract description 2
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 abstract description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 abstract 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 abstract 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 24
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 24
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 24
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 16
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 15
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 15
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 15
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 12
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 12
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 12
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 12
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 10
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 10
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 10
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 description 7
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 description 7
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 description 7
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 5
- 101001065501 Escherichia phage MS2 Lysis protein Proteins 0.000 description 4
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 4
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 2
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000007407 health benefit Effects 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- 230000003832 immune regulation Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007102 metabolic function Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/20—Reducing nutritive value; Dietetic products with reduced nutritive value
- A23L33/21—Addition of substantially indigestible substances, e.g. dietary fibres
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/113—Acidophilus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/123—Bulgaricus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/169—Plantarum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
- A23V2400/249—Thermophilus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
本发明公开了一种合生素制剂冻干粉的制备方法，本方法采用酵母β‑葡聚糖作为益生元与益生菌共混溶液冷冻干燥制得的粉末制剂。由于酵母β‑葡聚糖具有抗病毒、抗肿瘤、抗辐射等功能，并能促进益生菌生长。冷冻干燥期间，酵母β‑葡聚糖对益生菌具有保护作用，同时酵母β‑葡聚糖作为益生元，可避免消化道中胃酸和消化酶对益生菌的消化作用，使益生菌到达肠道时活菌数量增加，且可促进益生菌的生长，具有保护益生菌活性和促进其肠道增殖的双重功效。
Description
技术领域
本发明涉及一种高活性合生素制剂冻干粉的制备方法，属于食品及生物技术领域。
背景技术
人体内的微生物数量庞大且种类繁多，共同构成了机体功能强大的微生物系统。肠道菌群在人类疾病、代谢和营养等方面发挥着重要的作用，其功能主要有以下三个方面：(1)代谢功能；(2)营养功能；(3)免疫调节功能。
在益生菌赋予宿主健康益处之前，它们必须在胃肠道条件下生存，而胃肠道的恶劣条件(高酸，胆盐，消化酶，胆汁盐，蠕动应力等)也会严重影响其活性。益生菌在上述不利条件下存活并保持较高的细菌存活率，才能发挥其功能。因此，合生素的制备，保证了储存和喂养过程期间乳杆菌的生存力，并获得足够的健康效益。合生素是益生菌和益生元的组合，以提高益生菌的存活率和在胃肠道中植入益生菌为目标，以促进有益的细菌群。在各种益生菌中，乳杆菌是最常用的益生菌剂。
市面上常见的合生素制剂通常采用液态益生元和益生菌混合送服的方式，该方式并不能很好地保护益生菌免受胃酸消化，另有部分合生素采用微囊化技术来保护益生菌，此种方式生产的产品形式多为微球制剂，对益生菌的保藏及胃肠道的酸性环境的活性保护作用也十分有限。
发明内容
本发明需要解决的技术问题是提供一种具有高活性的合生素制剂的冻干粉的制备方法，使益生菌能够在胃肠道及低温环境中保持高活性。
为解决上述技术问题，本发明采用了以下技术手段：
一种高活性合生素制剂冻干粉的制备方法，以酵母β-葡聚糖与益生菌泥为原料，添加到生理盐水中得酵母β-葡聚糖与益生菌泥共混溶液，再将酵母β-葡聚糖与益生菌泥共混溶液经真空冷冻干燥后获取高活性合生素制剂冻干粉。
所述的酵母β-葡聚糖是面包酵母β-葡聚糖。
所述的酵母β-葡聚糖是浓度为30％-50％的酵母β-葡聚糖。
所述的生理盐水是质量浓度为0.9％的生理盐水。
所述的益生菌泥与酵母β-葡聚糖按质量比为1:1-3:1来制备。
所述的生理盐水添加量为与益生菌泥及酵母β-葡聚糖及生理盐水混合物的11％(w/v)。
所述的益生菌泥按以下步骤制备：
将益生菌粉用无菌水稀释后，在MRS培养基上分区划线，划线结束后平皿倒置，放入37℃培养箱中恒温培养40-72h；
将平皿培养出的菌落接种至MRS液体培养基中，调整pH至5.5-6.0，放入37℃培养箱中培养48h，得到益生菌培养液；
将益生菌培养液离心浓缩，收集益生菌泥；
所述的益生菌选自乳杆菌属或双歧杆菌属中的可食用菌种，为单一菌株或多菌株的混合物。
所述的MRS培养基按以下组成及浓度配制：蛋白脉10g/L、牛肉膏10g/L、酵母膏5g/L、葡萄糖20g/L、乙酸钠5g/L、吐温1.0mL、柠檬酸三铵2g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸锰0.25g/L、磷酸氢二钾2g/L、琼脂15g/L，其余为无菌水。将各组分混合均匀后调节pH至5.5-6.0。
所述的MRS液体培养基按以下方法制备：
按以下浓度蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，其余为无菌水，混合均匀后调整pH为5.5-6.0，即为MRS液体培养基。
本发明获得的有益效果是：
合生素的发展预示着功能性食品设计的一个有希望的方法，将有助于调节肠道微生物群和传递健康影响。与单独的益生菌或益生元的活性相比，合生素的使用对在食物及饮料的货架期内的长期稳定性以及益生菌对加工的抵抗力等功能产生积极影响。合生素可提高和保持细胞通过胃和小肠后的活力，并提高益生菌菌株在体内消化过程中的生存能力。
由于采用酵母β-葡聚糖，可以减少益生菌在胃肠道中被消化。
与采用酵母β-葡聚糖混合益生菌粉的方式相比，益生菌活菌数显著提高。
附图说明：
图1是本发明的工艺流程图。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明进行说明；
实施例1、2、3、4是以植物乳杆菌为例，对本发明进行说明，实施例1作为对比组，未添加酵母β-葡聚糖。实施例5、6以嗜酸乳杆菌为例对本发明进行说明，实施例5作为对比组，未添加酵母β-葡聚糖。实施例7、8以嗜热链球菌为例对本发明进行说明，实施例7作为对比组，未添加酵母β-葡聚糖。实施例9、10以保加利亚乳杆菌为例对本发明进行说明，实施例9作为对比组，未添加酵母β-葡聚糖。实施例11、12以嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、保加利亚、植物乳杆菌为例对本发明进行说明，实施例11作为对比组，未添加酵母β-葡聚糖。
实施例1
S1、益生菌菌种划线培养(以植物乳杆菌为例)：植物乳杆菌菌粉用无菌水稀释后，在MRS固体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂15g/L)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，37℃培养箱恒温培养48小时；
S2、发酵培养：挑取步骤S2中平皿上的单菌落接种至MRS液体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L)中，温度37℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
S3、培养液离心浓缩，收集菌泥；
S4、将离心后的植物乳杆菌菌泥添加到11％无菌生理盐水(w/v)中，在振荡器中充分混合均匀制备共混溶液，进行真空冷冻干燥后取出。
实施例2
S1、益生菌菌种划线培养(以植物乳杆菌为例)：植物乳杆菌菌粉用无菌水稀释后，在MRS固体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂15g/L)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，37℃培养箱恒温培养48小时；
S2、发酵培养：挑取步骤S2中平皿上的单菌落接种至MRS液体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L)中，温度37℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
S3、培养液离心浓缩，收集菌泥；
S4、将离心后的菌泥按质量比1:1加入酵母β-葡聚糖，添加到11％无菌生理盐水(w/v)中充分混合均匀制备共混溶液，进行真空冷冻干燥后取出。
实施例3
S1、益生菌菌种划线培养(以植物乳杆菌为例)：植物乳杆菌菌粉用无菌水稀释后，在MRS固体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂15g/L)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，37℃培养箱恒温培养48小时；
S2、发酵培养：挑取步骤S2中平皿上的单菌落接种至MRS液体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L)中，温度37℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
S3、培养液离心浓缩，收集菌泥；
S4、将离心后的菌泥按质量比2:1加入酵母β-葡聚糖，添加到11％无菌生理盐水(w/v)中充分混合均匀制备共混溶液，进行真空冷冻干燥后取出。
实施例4
S1、益生菌菌种划线培养(以植物乳杆菌为例)：植物乳杆菌菌粉用无菌水稀释后，在MRS固体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂15g/L)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，37℃培养箱恒温培养48小时；
S2、发酵培养：挑取步骤S2中平皿上的单菌落接种至MRS液体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L)中，温度37℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
S3、培养液离心浓缩，收集菌泥；
S4、将离心后的菌泥按质量比3:1加入酵母β-葡聚糖，添加到11％无菌生理盐水(w/v)中充分混合均匀制备共混溶液，进行真空冷冻干燥后取出。
实施例5
S1、益生菌菌种划线培养(以嗜酸乳杆菌为例)：嗜酸乳杆菌菌粉用无菌水稀释后，在MRS固体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂15g/L)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，37℃培养箱恒温培养48小时；
S2、发酵培养：挑取步骤S2中平皿上的单菌落接种至MRS液体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L)中，温度37℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
S3、培养液离心浓缩，收集菌泥；
S4、将离心后的菌泥，添加到11％无菌生理盐水(w/v)中充分混合均匀制备共混溶液，进行真空冷冻干燥后取出。
实施例6
S1、益生菌菌种划线培养(以嗜酸乳杆菌为例)：嗜酸乳杆菌菌粉用无菌水稀释后，在MRS固体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂15g/L)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，37℃培养箱恒温培养48小时；
S2、发酵培养：挑取步骤S2中平皿上的单菌落接种至MRS液体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L)中，温度37℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
S3、培养液离心浓缩，收集菌泥；
S4、将离心后的菌泥按质量比1:1加入酵母β-葡聚糖，添加到11％无菌生理盐水(w/v)中充分混合均匀制备共混溶液，进行真空冷冻干燥后取出。
实施例7
S1、益生菌菌种划线培养(以嗜热链球菌为例)：嗜热链球菌菌粉用无菌水稀释后，在MRS固体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂15g/L)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，37℃培养箱恒温培养48小时；
S2、发酵培养：挑取步骤S2中平皿上的单菌落接种至MRS液体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L)中，温度37℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
S3、培养液离心浓缩，收集菌泥；
S4、将离心后的菌泥，添加到11％无菌生理盐水(w/v)中充分混合均匀制备共混溶液，进行真空冷冻干燥后取出。
实施例8
S1、益生菌菌种划线培养(以嗜热链球菌为例)：嗜热链球菌菌粉用无菌水稀释后，在MRS固体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂15g/L)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，37℃培养箱恒温培养48小时；
S2、发酵培养：挑取步骤S2中平皿上的单菌落接种至MRS液体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L)中，温度37℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
S3、培养液离心浓缩，收集菌泥；
S4、将离心后的菌泥按质量比1:1加入酵母β-葡聚糖，添加到11％无菌生理盐水(w/v)中充分混合均匀制备共混溶液，进行真空冷冻干燥后取出。
实施例9
S1、益生菌菌种划线培养(以保加利亚乳杆菌为例)：保加利亚乳杆菌菌粉用无菌水稀释后，在MRS固体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂15g/L)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，37℃培养箱恒温培养48小时；
S2、发酵培养：挑取步骤S2中平皿上的单菌落接种至MRS液体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L)中，温度37℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
S3、培养液离心浓缩，收集菌泥；
S4、将离心后的菌泥，添加到11％无菌生理盐水(w/v)中充分混合均匀制备共混溶液，进行真空冷冻干燥后取出。
实施例10
S1、益生菌菌种划线培养(以保加利亚乳杆菌为例)：保加利亚乳杆菌菌粉用无菌水稀释后，在MRS固体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂15g/L)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，37℃培养箱恒温培养48小时；
S2、发酵培养：挑取步骤S2中平皿上的单菌落接种至MRS液体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L)中，温度37℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
S3、培养液离心浓缩，收集菌泥；
S4、将离心后的菌泥按质量比1:1加入酵母β-葡聚糖，添加到11％无菌生理盐水(w/v)中充分混合均匀制备共混溶液，进行真空冷冻干燥后取出。
实施例11
S1、益生菌菌种划线培养(以嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、保加利亚、植物乳杆菌为例)：嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌菌粉按质量比为1:1:1:1称取。同实例1-7质量的混合菌粉用无菌水稀释后，在MRS固体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂15g/L)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，37℃培养箱恒温培养48小时；
S2、发酵培养：挑取步骤S2中平皿上的单菌落接种至MRS液体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L)中，温度37℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
S3、培养液离心浓缩，收集菌泥；
S4、将离心后的菌泥，添加到11％无菌生理盐水(w/v)中充分混合均匀制备共混溶液，进行真空冷冻干燥后取出。
实施例12
S1、益生菌菌种划线培养(以嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、保加利亚、植物乳杆菌为例)：嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌菌粉按质量比为1:1:1:1称取。同实例1-7质量的混合菌粉用无菌水稀释后，在MRS固体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂15g/L)上分区划线，划线结束后，平皿倒置，37℃培养箱恒温培养48小时；
S2、发酵培养：挑取步骤S2中平皿上的单菌落接种至MRS液体培养基(蛋白脉10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏5g/L，葡萄糖20g/L，乙酸钠5g/L，吐温1.0mL，柠檬酸三铵2g/L，硫酸镁0.5g/L，硫酸锰0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L)中，温度37℃，pH5.5-6.0，培养时间48h；
S3、培养液离心浓缩，收集菌泥；
S4、将离心后的菌泥按质量比1:1加入面包酵母β-葡聚糖，添加到11％无菌生理盐水(w/v)中充分混合均匀制备共混溶液，进行真空冷冻干燥后取出。
由实施例1-8制得的合生素制剂，对活菌数进行测量。使用1g合生素粉末配以11％无菌生理盐水(w/v)进行活化。取活化液1mL在0.9％的无菌生理盐水中连续稀释14-15倍，以10-12、10-13、10-14、10-15稀释度进行铺板，并将板在37℃下孵育48小时。每克样品计算菌落形成单位(CFU)。得到如下数据：
表1各实施例测定出的活菌数量表
从表1可以得出，酵母β-葡聚糖促进益生菌高活性生长及繁殖。培养48小时后合生素中的活菌数呈增长趋势，表明酵母β-葡聚糖可促进益生菌增殖。
Claims (10)
1.一种高活性合生素制剂冻干粉的制备方法，其特征在于，以酵母β-葡聚糖与益生菌泥为原料，添加到生理盐水中得酵母β-葡聚糖与益生菌泥共混溶液，再将酵母β-葡聚糖与益生菌泥共混溶液经真空冷冻干燥后获取高活性合生素制剂冻干粉。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的酵母β-葡聚糖是面包酵母β-葡聚糖。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的酵母β-葡聚糖是浓度为30％-50％的酵母β-葡聚糖。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的生理盐水是质量浓度为0.9％的生理盐水。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的益生菌泥与酵母β-葡聚糖按质量比为1:1-3:1来制备。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的生理盐水添加量为与益生菌泥及酵母β-葡聚糖及生理盐水混合物的11％(w/v)。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的益生菌泥按以下步骤制备：
将益生菌粉用无菌水稀释后，在MRS培养基上分区划线，划线结束后平皿倒置，放入37℃培养箱中恒温培养48h；
将平皿培养出的菌落接种至MRS液体培养基中，调整pH至5.5-6.0，放入37℃培养箱中培养48h，得到益生菌培养液；
将益生菌培养液离心浓缩，收集益生菌泥。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的益生菌是乳杆菌属或双歧杆菌属中的可食用菌种，为单一菌株或多菌株的混合物。
9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的MRS培养基按以下组成及浓度配制：蛋白脉10g/L、牛肉膏10g/L、酵母膏5g/L、葡萄糖20g/L、乙酸钠5g/L、吐温1.0mL、柠檬酸三铵2g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸锰0.25g/L、磷酸氢二钾2g/L、琼脂15g/L，其余为无菌水，将各组分混合均匀后调节pH至5.5-6.0。
10.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的MRS液体培养基按以下方法制备：蛋白脉10g/L、牛肉膏10g/L、酵母膏5g/L、葡萄糖20g/L、乙酸钠5g/L、吐温1.0mL、柠檬酸三铵2g/L、硫酸镁0.5g/L、硫酸锰0.25g/L、磷酸氢二钾2g/L、琼脂15g/L，其余为无菌水，将各组分混合均匀后调节pH至5.5-6.0。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111078406.8A CN113841901A (zh) | 2021-09-15 | 2021-09-15 | 一种高活性合生素制剂冻干粉的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111078406.8A CN113841901A (zh) | 2021-09-15 | 2021-09-15 | 一种高活性合生素制剂冻干粉的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113841901A true CN113841901A (zh) | 2021-12-28 |
Family
ID=78973932
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111078406.8A Pending CN113841901A (zh) | 2021-09-15 | 2021-09-15 | 一种高活性合生素制剂冻干粉的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113841901A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115212224A (zh) * | 2022-06-14 | 2022-10-21 | 安琪纽特股份有限公司 | 酵母β葡聚糖在制备抗流感病毒产品中的应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998026787A1 (en) * | 1996-12-19 | 1998-06-25 | The University Of New South Wales | Prebiotics and probiotics |
| CN108606329A (zh) * | 2018-05-03 | 2018-10-02 | 吉林师范大学博达学院 | 一种益生元、益生菌复合微生态制剂及其制备方法 |
| CN110638841A (zh) * | 2019-09-25 | 2020-01-03 | 山东艾克韦生物技术有限公司 | 一种益生菌和益生元复合制剂、其制备方法及其用途 |
-
2021
- 2021-09-15 CN CN202111078406.8A patent/CN113841901A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998026787A1 (en) * | 1996-12-19 | 1998-06-25 | The University Of New South Wales | Prebiotics and probiotics |
| CN108606329A (zh) * | 2018-05-03 | 2018-10-02 | 吉林师范大学博达学院 | 一种益生元、益生菌复合微生态制剂及其制备方法 |
| CN110638841A (zh) * | 2019-09-25 | 2020-01-03 | 山东艾克韦生物技术有限公司 | 一种益生菌和益生元复合制剂、其制备方法及其用途 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| GUEDES J D S，ET AL: "Protective effects of β-glucan extracted from spent brewer yeast during freeze-drying, storage and exposure to simulated gastrointestinal conditions of probiotic lactobacilli" * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115212224A (zh) * | 2022-06-14 | 2022-10-21 | 安琪纽特股份有限公司 | 酵母β葡聚糖在制备抗流感病毒产品中的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108783462B (zh) | 一种肠道益生菌制剂的工业生产方法 | |
| CN114854643B (zh) | 一种促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养基及其应用 | |
| KR101604633B1 (ko) | 유산균 배지 조성물 및 이를 이용한 유산균 분말의 제조 방법 | |
| US12036252B2 (en) | Pairing probiotics and prebiotics, methods for growth and use, separately and in combination | |
| CN108782758B (zh) | 一种发酵型合生元羊奶粉及其制备方法 | |
| CN106635912A (zh) | 复合乳酸菌的联合发酵工艺 | |
| CN116396890B (zh) | 用于防治结肠癌的植物乳杆菌zjuids15及其应用 | |
| CN110959867A (zh) | 母乳化的复合益生菌微胶囊粉及其制备方法和应用 | |
| CN111820419A (zh) | 靶向调控肠道艾克曼菌和短链脂肪酸产生菌的组合物 | |
| CN102077932A (zh) | 一种富含高活性肠道益生菌营养果冻的制作方法 | |
| CN102524794A (zh) | 一种降血清胆固醇马克斯克鲁维酵母冻干菌粉的制备方法 | |
| KR101951893B1 (ko) | 전통발효식품 유래의 프로바이오틱스활성 락토바실러스 파라카제이 srcm102343 균주의 고농도 제조 방법 | |
| CN117025488B (zh) | 一种提高益生菌在肠道定植率的工艺方法及益生菌冻干粉 | |
| CN112715655B (zh) | 一种植物乳杆菌发酵乳粉及其制备方法 | |
| CN113841901A (zh) | 一种高活性合生素制剂冻干粉的制备方法 | |
| CN113424965A (zh) | 一种更适合黄种人群的微生态制剂 | |
| CN116855413B (zh) | 利用鼠李糖乳杆菌YSs069制备调节人体微生态平衡的生物活性物质及其应用 | |
| CN101671637A (zh) | 一种肠道益生菌固态营养载体培养方法 | |
| CN107083342B (zh) | 一种益生菌共生体、培养方法及应用 | |
| CN114984065B (zh) | 一种提高免疫力的益生菌组合物及其制备方法 | |
| CN113397170B (zh) | 一种用于调节人体肠道菌群的海洋益生元组合物的应用 | |
| CN112438404B (zh) | 一种黄参多糖的应用 | |
| CN116355779A (zh) | 长双歧杆菌婴儿亚种b79及其应用 | |
| CN112322531A (zh) | 一种高活性嗜酸乳杆菌冻干粉的生产方法及应用 | |
| CN108060099B (zh) | 一种辅助发酵剂、其制备方法及其在发酵制品中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20211228 |