CN113740453A - 离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法 - Google Patents
离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113740453A CN113740453A CN202110898508.8A CN202110898508A CN113740453A CN 113740453 A CN113740453 A CN 113740453A CN 202110898508 A CN202110898508 A CN 202110898508A CN 113740453 A CN113740453 A CN 113740453A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tartronic acid
- cucumber
- content
- ion chromatography
- test solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- ROBFUDYVXSDBQM-UHFFFAOYSA-N hydroxymalonic acid Chemical compound OC(=O)C(O)C(O)=O ROBFUDYVXSDBQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 141
- 240000008067 Cucumis sativus Species 0.000 title claims abstract description 55
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 37
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 235000009849 Cucumis sativus Nutrition 0.000 title claims abstract description 13
- 235000010799 Cucumis sativus var sativus Nutrition 0.000 claims abstract description 40
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 20
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims abstract description 12
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 15
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 9
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 8
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 5
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 5
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 claims description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 4
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract description 6
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 32
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 27
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 241000219112 Cucumis Species 0.000 description 1
- 235000015510 Cucumis melo subsp melo Nutrition 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 229920012266 Poly(ether sulfone) PES Polymers 0.000 description 1
- FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N [4,6-bis(cyanoamino)-1,3,5-triazin-2-yl]cyanamide Chemical compound N#CNC1=NC(NC#N)=NC(NC#N)=N1 FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001994 activation Methods 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 235000019606 astringent taste Nutrition 0.000 description 1
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000003898 horticulture Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- -1 organic acid anions Chemical class 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004094 preconcentration Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000010117 shenhua Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 239000013585 weight reducing agent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
- G01N30/14—Preparation by elimination of some components
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/30—Control of physical parameters of the fluid carrier of temperature
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/64—Electrical detectors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/86—Signal analysis
- G01N30/8675—Evaluation, i.e. decoding of the signal into analytical information
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
- G01N2030/324—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed speed, flow rate
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Library & Information Science (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明提供离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法,步骤如下:S1、供试液的制备:将待检测黄瓜匀浆后高速冷冻离心,过滤取滤液;S2、采用离子色谱仪分析供试液的峰面积并与丙醇二酸标准曲线进行比较,得到供试液中丙醇二酸的浓度,进而得出待检测黄瓜中丙醇二酸的含量。采用本发明的方法,丙醇二酸含量在0.1~10.0mg/mL范围内呈现良好的线性关系,相关系数为0.9982,检出限为0.3μg/mL,定量限为1μg/mL,回收率为98.15%~99.58%。本发明方法运行时间短、精密度和准确度高、重现性好,不受其他杂质干扰,能够用于黄瓜中丙醇二酸的定量检测,可满足黄瓜育种、品质调控、生产栽培的需要。
Description
技术领域
本发明涉及离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法。
背景技术
丙醇二酸(Propanedioic acid,2-hydroxy)又名羟基丙二酸,是一种小分子有机酸,广泛存在于瓜类蔬菜中,能与人体唾液融合产生发涩的口感。丙醇二酸能有效地抑制体内糖类转化为脂肪,防止脂肪堆积,且不妨碍糖类物质向人们提供热量和能量,还能把多余的脂肪消耗掉,对防治高血压、动脉粥样硬化、减肥有良好的效果。由于人体自身不能合成丙醇二酸,一般是通过饮食获取。黄瓜果实是植物有机型丙醇二酸的重要来源之一。随着人们对健康和美好生活的追求,越来越看重黄瓜在保健、美容、减肥方面的作用,丙醇二酸含量高低也成为了衡量黄瓜及其加工品保健功能的重要指标之一。
目前国内外尚无标准化的丙醇二酸鉴定、检测方法,针对黄瓜中丙醇二酸的含量分析也鲜有报道,唯一采用的高效液相色谱法,存在前处理繁琐,分离度较低、检测耗时等问题。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题,本发明提供了离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法。本发明通过对样品前处理和仪器工作条件进行优化,建立了离子色谱法测定黄瓜中丙醇二酸含量的分析方法。该方法具有样品前处理简单,灵敏度高,稳定性好等优点,适合批量样品的检测,可为黄瓜育种以及生产栽培、品质调控等提供准确可靠的技术手段。
本发明提供离子色谱法测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法,步骤如下:
S1、供试液的制备:将待检测黄瓜匀浆后高速冷冻离心,过滤取滤液;
S2、采用离子色谱仪分析步骤S1所述供试液的峰面积并与丙醇二酸标准曲线进行比较,得到供试液中丙醇二酸的浓度,进而得出待检测黄瓜中丙醇二酸的含量;
所述离子色谱仪的检测条件为:柱温:30℃;进样体积:10-25μL;淋洗液:KOH溶液,流速:1.0mL/min;阴离子分析柱:IonPac AS11-HC(250mm×4mm);保护柱:IonPac AG11-HC(50mm×4mm)。IonPac AS11-HC阴离子交换分离柱用KOH做淋洗液,可用于有机酸阴离子的快速分离,用IonPac AG11作保护柱,做梯度淋洗时可除去来自淋洗液中污染的阴离子。
作为优选,步骤S1中,所述高速冷冻离心是在4℃的条件下,8000-10000r/min离心12-15min。离心机转速过低,液体、固体不能很好地分离;转速过高则有安全隐患。
作为优选,步骤S1中,所述离心后,还包括将上清液通过活化后的CNWBOND LC-C18固相萃取柱的步骤,目的是萃取、分离、浓缩样品,纯化并富集样品中的丙醇二酸。本发明利用固相萃取法降低了黄瓜丙醇二酸提取物中的复杂因素的干扰,提高了检测准确性,且纯化步骤简单和快捷。
作为优选,步骤S1中,所述过滤时,孔径大小为0.22μm。
作为优选,步骤S2中,离子色谱的洗脱方式分为等度洗脱和梯度洗脱,等度洗脱主要针对单个或少数化合物的分离,梯度洗脱主要针对不同种类多个化合物的分离。因本试验要分离的物质比较复杂,所以采用了梯度洗脱的方式。在0-30min的各时间段,从6.0mmol/L-70.0mmol/L,改变淋洗液浓度,以达到丙醇二酸最佳的分离条件,且保证连续进样时不受上一个样品的干扰。淋洗液梯度淋洗程序如下:
作为优选,步骤S2中,所述供试液中丙醇二酸的出峰时间为16.397±0.070min。
作为优选,所述待检测黄瓜中丙醇二酸含量检测范围为0.1~10.0mg/mL。
在黄瓜样品提取过程中,本发明采用了将样品匀浆后直接高速冷冻离心的提取方式,这是因为丙醇二酸含有两个羧基和一个羟基,同时具有酸和醇的性质,易溶于水。黄瓜中95%以上成分是水,采取此方法既简便快捷,又有效地保证了提取效率。在黄瓜样品提取过程中,对离心提取时间(5-20min)、离心机转速(5000-10000r/min)进行了优化,实验表明,离心提取时间为5-11min时样品不能很好地分离,提取时间多于12min才能有效分离液体和固体,多于15分钟则降低了实验效率,故选择最佳离心提取时间为12-15min。离心机转速5000r/min时,样品不能很好地分离,大于8000r/min才能有效分离液体和固体,大于10000r/min则使实验风险提高,故选择最佳离心机转速为8000-10000r/min。
丙醇二酸在高温条件下易分解,所以气相色谱等检测方法均不适合。基于对丙醇二酸理化性状、稳定性等方面的综合考虑,本发明选用离子色谱法分析黄瓜中丙醇二酸含量,对柱温分别25℃、30℃、35℃,进样体积分别为5μL、10μL、15μL、20μL、25μL,淋洗液梯度洗脱进行了优化,实验表明,柱温25℃和35℃,样品的分离效果较差,故最佳柱温选择为30℃;进样体积为5μL时丙醇二酸峰面积较小,积分误差大,进样体积为10μL以上均能满足检测要求,故最佳进样体积选择为10-25μL;淋洗液梯度在0-30min的各时间段,从6.0mmol/L-70.0mmol/L,改变不同淋洗液浓度,以达到丙醇二酸最佳的分离条件,且保证连续进样时不受上一个样品的干扰。淋洗液梯度淋洗程序为:0~5min,氢氧化钾浓度为6.0mmol/L;5~10min,氢氧化钾浓度为40.0mmol/L;10~20min,氢氧化钾浓度为70.0mmol/L;20~25min,氢氧化钾浓度为40.0mmol/L;20~30min,氢氧化钾浓度为6.0mmol/L。
洗脱方式为梯度淋洗,通过试验,采用文中的洗脱梯度即可将黄瓜中不同种类多个化合物逐一分离,可准确地检测出不同黄瓜品种中丙醇二酸含量。
本发明建立了离子色谱法测定黄瓜中丙醇二酸含量的分析方法:选用以氢氧化钾为淋洗液的阴离子高容量分析柱IonPac AS11-HC,抑制型电导检测,样品不用进行复杂的前处理和预浓缩,直接采用高速冷冻离心的提取方式然后进样测定,通过梯度淋洗的洗脱方式,将复杂样品中不同种类多个化合物的逐一分离。通过试验发现,丙醇二酸含量在0.1~10.0mg/mL范围内呈现良好的线性关系,相关系数为0.9982,检出限为0.3μg/mL,定量限为1μg/mL,回收率为98.15%~99.58%。与同类分析方法相比,该方法运行时间短、该方法精密度高、准确度高、重现性好,不受其他杂质干扰,为黄瓜中丙醇二酸的定量检测提供了准确可靠的技术手段,可满足黄瓜育种、品质调控、生产栽培的需要。
附图说明
附图用来提供对本发明的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与本发明的实施例一起用于解释本发明,并不构成对本发明的限制。在附图中:
图1为丙醇二酸标准溶液色谱图。
图2为试样色谱图。
图3为丙醇二酸标准工作曲线。
图4为不同品种黄瓜样品的色谱图。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为市售。
实施例1
1材料与方法
1.1试验材料
供试黄瓜由北京农学院植物科技学院园艺系提供。
1.2仪器与试剂
离子色谱仪(ICS-1100型),配备淋洗液在线发生装置、电导检测器、ASRS型抑制器、25μL定量环、Chromeleon数据处理系统,美国Thermo Fisher公司产品;高速冷冻离心机(H1850R),广州市深华生物技术有限公司生产;组织匀浆机(OMNI Mixer),美国OMNI公司;CNWBOND LC-C18(6.0mL)SPE小柱,上海安谱实验科技股份有限公司;0.22μm水系聚醚砜PES滤膜,颇尔公司。
丙醇二酸标准品,美国阿法埃莎(中国)化学有限公司,纯度98%;实验用水符合GB/T 6682-2008《分析实验室用水规格和试验方法》中一级水的规定。
1.3试验方法
1.3.1样品制备
采用盛果期成熟黄瓜,用组织匀浆机加工成匀浆,将其倒入10mL离心管中,准确称取重量,4℃的条件下,10000r/min离心15min,取上清液通过活化后的CNWBOND LC-C18固相萃取柱(活化过程为:先加2~3mL甲醇,再加2~3mL 1:1的甲醇-水溶液,之后加2~3mL水,2min后再加2~3mL水,静置活化35min),弃去1mL,因前段溶液杂质较多,余下部分通过0.22μm水性滤膜针头滤器,取滤液进行检测。
1.3.2色谱条件
阴离子分析柱:IonPac AS11-HC(250mm×4mm);
保护柱:IonPac AG11-HC(50mm×4mm);
柱温:30℃;
抑制器电流:174mA;
电导检测池温度:35℃;
进样体积:25μL;
淋洗液:KOH溶液,由淋洗液发生器在线产生;
流速:1.0mL/min;
淋洗液梯度淋洗程序见表1。
表1淋洗液梯度淋洗程序
1.3.3标准溶液的制备
1.3.3.1丙醇二酸标准储备液(10mg/mL):准确称取1.0000g丙醇二酸,用水溶解并转移至100mL容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀。
1.3.3.2丙醇二酸标准工作液:移取标准储备液,加水逐级稀释,制成系列标准工作液,浓度分别为0.1mg/mL、0.25mg/mL、1.0mg/mL、2.5mg/mL、5.0mg/mL、7.5mg/mL、10mg/mL。
2结果与分析
2.1检测谱图
在1.3.2色谱条件下,丙醇二酸标准品溶液、试样溶液色谱图见图1~2。
图1为丙醇二酸标准溶液色谱图。
图2为试样色谱图。
试验可知丙醇二酸标准溶液的保留时间16.397min,黄瓜样品中丙醇二酸的出峰时间为16.407min(如图2)。
2.2线性关系、检出限和定量限
将1.3.3配制好的标准溶液,按照1.3.2的色谱条件测定,以丙醇二酸的浓度(mg/L)为横坐标,色谱峰面积值为纵坐标作图(如图3),计算标准曲线的回归方程为:y=73.98x+3.205,R2=0.9982,表明丙醇二酸在0.1~10.0mg/mL的范围内线性关系良好。将对照品溶液逐级稀释后,以信噪比S/N=3时的质量浓度为检出限,S/N=10时的质量浓度为定量下限。计算得出检出限为0.3μg/mL,定量限为1μg/mL。
图3为丙醇二酸标准工作曲线。
2.3精密度
按照1.3.1方法对黄瓜样品进行处理,制备样品溶液,按照1.3.2项的色谱条件进行样品测定,重复测定6次,计算黄瓜样品中丙醇二酸的含量及RSD值(见表2),以考察方法的精密度。结果表明,该黄瓜样品丙醇二酸含量平均值为1.62mg/g,RSD值为3.60%,方法精密度较高。
表2精密度试验(n=6)
2.4加标回收率
取已知丙醇二酸含量的黄瓜匀浆于10mL离心管中,准确称取重量,分别加入精密称取的丙醇二酸10.00mg、20.00mg、50.00mg,按照1.3.1方法进行处理,制备样品溶液,按照1.3.2项的色谱条件进行样品测定,对每个添加水平做3次平行试验,计算丙醇二酸的平均回收率及RSD值(见表3),以考察方法的准确性。结果表明,丙醇二酸的平均回收率在98.15%~99.58%,RSD值为1.44%~1.66%,方法准确度高,符合黄瓜中丙醇二酸含量的分析测定要求。
表3加标回收试验结果
2.5稳定性考察
取黄瓜样品按照1.3.1方法对黄瓜样品进行处理,制备样品溶液,按照1.3.2项的色谱条件分别于0、4、8、12、16、20、24h进样,进行样品测定,计算RSD值为0.83%,表明供试溶液在24h内稳定,结果见表4。
表4稳定性试验
2.6实际试样测定
选取不同品种黄瓜样品10份,经1.3.1制备后按1.3.2色谱条件上机测定,结果见表5和图4。从表5中可知,本试验10个黄瓜品种中丙醇二酸的含量在1.62~6.92mg/g之间。
图4为不同品种黄瓜样品的色谱图。图中A-J按照前后顺序依次为黄瓜样品编号为S1-S10的色谱图。
表5黄瓜中丙醇二酸含量(n=3)
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法,其特征在于:步骤如下:
S1、供试液的制备:将待检测黄瓜匀浆后高速冷冻离心,过滤取滤液;
S2、采用离子色谱仪分析步骤S1所述供试液的峰面积并与丙醇二酸标准曲线进行比较,得到供试液中丙醇二酸的浓度,进而得出待检测黄瓜中丙醇二酸的含量;
所述离子色谱仪的检测条件为:柱温:30℃;进样体积:10-25μL;淋洗液:KOH溶液,流速:1.0mL/min;阴离子分析柱:IonPac AS11-HC(250mm×4mm);保护柱:IonPac AG11-HC(50mm×4mm)。
2.根据权利要求1所述的离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法,其特征在于:步骤S1中,所述高速冷冻离心是在4℃的条件下,8000-10000r/min离心15min。
3.根据权利要求1所述的离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法,其特征在于:步骤S1中,所述离心后,还包括将上清液通过活化后的CNWBOND LC-C18固相萃取柱的步骤。
4.根据权利要求1所述的离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法,其特征在于:步骤S1中,所述过滤时,孔径大小为0.22μm。
6.根据权利要求1所述的离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法,其特征在于:步骤S2中,所述供试液中丙醇二酸的出峰时间为16.397±0.070min。
7.根据权利要求1所述的离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法,其特征在于:所述待检测黄瓜中丙醇二酸含量检测范围为0.1~10.0mg/mL。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110898508.8A CN113740453A (zh) | 2021-08-05 | 2021-08-05 | 离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110898508.8A CN113740453A (zh) | 2021-08-05 | 2021-08-05 | 离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN113740453A true CN113740453A (zh) | 2021-12-03 |
Family
ID=78730268
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202110898508.8A Pending CN113740453A (zh) | 2021-08-05 | 2021-08-05 | 离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN113740453A (zh) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102706994A (zh) * | 2012-06-26 | 2012-10-03 | 东北农业大学 | 黄瓜果实中丙醇二酸的定性定量检测方法 |
US20130095571A1 (en) * | 2010-12-08 | 2013-04-18 | China Tobacco Guangdong Industrial Co., Ltd. | The method for quick and simultaneous determination of 16 inorganic anions and organic acids in tobacco |
-
2021
- 2021-08-05 CN CN202110898508.8A patent/CN113740453A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20130095571A1 (en) * | 2010-12-08 | 2013-04-18 | China Tobacco Guangdong Industrial Co., Ltd. | The method for quick and simultaneous determination of 16 inorganic anions and organic acids in tobacco |
CN102706994A (zh) * | 2012-06-26 | 2012-10-03 | 东北农业大学 | 黄瓜果实中丙醇二酸的定性定量检测方法 |
Non-Patent Citations (11)
Title |
---|
刘文琴 等: "固相萃取-抑制电导离子色谱法测定水产品中有机酸", 《分析试验室》 * |
刘文琴 等: "固相萃取-抑制电导离子色谱法测定水产品中有机酸", 《分析试验室》, vol. 31, no. 8, 31 August 2012 (2012-08-31), pages 108 - 111 * |
叶正祥: "生物大分子离心分离技术", 湖南科学技术出版社, pages: 80 - 81 * |
林华影 等: "淋洗液自动发生-离子色谱法同时测定食品中的21种有机酸", 《色谱》 * |
林华影 等: "淋洗液自动发生-离子色谱法同时测定食品中的21种有机酸", 《色谱》, vol. 25, no. 1, 31 January 2007 (2007-01-31), pages 107 - 111 * |
林华影 等: "淋洗液自动发生-离子色谱法同时测定食品中的21种有机酸", 色谱, vol. 25, no. 1, pages 107 - 111 * |
王红青 等: "离子交换色谱法对8种有机酸含量的同时测定", 《分析测试学报》, vol. 30, no. 9, 30 September 2011 (2011-09-30), pages 1063 - 1066 * |
赵鹤 等: "根际有益微生物不同接种方法对春季塑料大棚黄瓜生长的影响", 《蔬菜》 * |
赵鹤 等: "根际有益微生物不同接种方法对春季塑料大棚黄瓜生长的影响", 《蔬菜》, no. 4, 30 April 2018 (2018-04-30), pages 11 - 18 * |
郭柏坤 等: "离子色谱法测定水果中的有机酸", 《发酵科技通讯》 * |
郭柏坤 等: "离子色谱法测定水果中的有机酸", 《发酵科技通讯》, vol. 47, no. 3, 30 September 2018 (2018-09-30), pages 170 - 174 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN106290682B (zh) | 一种茶叶中烟碱的手性分析方法 | |
CN107202836B (zh) | 一种茶叶鲜样中茶氨酸含量的快速分析方法 | |
CN112730697A (zh) | 一种利用hplc-ms/ms同时检测5种大麻酚化合物的方法 | |
CN104007189A (zh) | 一种检测食品中高氯酸根离子的试剂盒及其测定方法 | |
CN102590411B (zh) | Hplc-icp-ms联用技术检测水产品中二价镉离子的方法 | |
CN112684089A (zh) | 基于超高效合相色谱技术的保健食品中肉碱对映体拆分和测定方法 | |
CN111458442B (zh) | 一种孕马尿中结合雌激素含量的测定方法 | |
CN114720704B (zh) | 一种测定血清中游离睾酮的试剂盒及方法 | |
CN108152425B (zh) | 一种高效液相色谱检测芝麻油木脂素的方法 | |
CN107345946B (zh) | 用于法庭科学毒品检测的甲卡西酮标准物质的纯化制备方法 | |
CN112362798A (zh) | 一种化妆品中大麻二酚的检测方法 | |
CN113740453A (zh) | 离子色谱法定量测定黄瓜中丙醇二酸含量的方法 | |
CN115372534B (zh) | 一种艾叶及其制剂特征图谱的构建方法、特征图谱和应用 | |
CN111122715A (zh) | 利用离子色谱法同时测定羧甲基纤维素钠中多种痕量阴离子含量的方法 | |
CN113759037B (zh) | 南葶苈子和/或北葶苈子配方颗粒特征图谱及其构建方法和鉴别方法 | |
CN115629144A (zh) | 一种百合药材中王百合苷a和王百合苷h的提取及测定方法 | |
CN113267589B (zh) | 一种头发中16种合成大麻素类物质及其代谢物的分析方法 | |
CN110824069B (zh) | 一种银杏叶提取物或其制剂中萜内酯类指纹图谱的构建方法 | |
CN114689738A (zh) | 一种同时检测鹿角中多种核苷类成分的方法 | |
CN110208415A (zh) | 一种面粉中双乙酸钠的检测方法 | |
CN109633015B (zh) | 一种英托利匹特中添加剂的检测方法 | |
CN111398494A (zh) | 一种基于反相二维液相色谱的烟碱旋光异构体分离测定方法 | |
CN114062558B (zh) | 一种食品中二氧化硫的测定方法 | |
CN111595984B (zh) | 一种蚂蚁制品中蚁酸的检测方法 | |
CN113533598B (zh) | 一种小儿肺热咳喘颗粒中黄芩含量的高效液相色谱分析方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20211203 |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |