CN113718008A - 一种美白原料功效评价体系及评价方法 - Google Patents

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Abstract

本发明所提供的一种美白原料功效评价体系及评价方法，体系包括：对美白原料的化学层面的测试、细胞、动物层面的测试以及人体临床测试，其中，所述的化学层面的测试包括自由基清除测试和酪氨酸酶抑制测试，当通过化学层面的测试后进入细胞、动物层面测试，再通过了细胞、动物层面的测试后进入人体临床测试。本发明首次针对美白原料构建出一个多维度的功效评价体系，解决了目前原料单一评价方法的问题。

Description

一种美白原料功效评价体系及评价方法
技术领域
本发明涉及化妆品功效评价技术领域，尤其涉及的是一种美白原料功效评价体系及评价方法。
背景技术
目前，化妆品行业正处于飞速发展的阶段，各类产品功效及质量良莠不齐，许多原料商及品牌方易忽视产品的实际功效作用，同时也出现了产品不能达到甚至不具备所宣称功效的现象。
此外，产品的美白功效检测也较为单一，没有设计“功效-证据”的整体方案。消费者大多不具备专业美白知识，对此类产品认知片面，且容易走进美白的误区，从而被一些急功近利的商家所利用。
因此，现有美白评价体系存在缺陷，有待改进与发展。
发明内容
本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术的上述缺陷，提供一种美白原料功效评价体系及评价方法，旨在解决现有技术中缺少完整的针对美白原料功效进行评价的评价体系的问题。
本发明解决技术问题所采用的技术方案如下：
第一方面，一种美白原料功效评价体系，其中，包括：
高通量初筛功效模块，用于对待评价美白原料的功效进行筛选；
细胞评价模块、动物组织评价模块，用于对通过筛选的所述待评价美白原料作用于细胞和动物组织时，对美白效果进行评价；以及
人体临床评价模块，用于对细胞及动物组织起到美白效果的所述待评价美白原料作用于皮肤时，对皮肤肤色的指标进行评价；
所述高通量初筛功效模块，包括机理研究单元和判断单元；所述机理研究单元，用于对所述待评价美白原料进行自由基清除测试和酪氨酸酶抑制测试；所述判断单元，用于判断所述自由基清除和酪氨酸酶抑制测试的测试值是否大于阈值；以及判断所述待评价美白原料作用于细胞和动物组织时，是否有美白效果；
当所述测试值大于阈值时，进入所述细胞评价模块、动物组织评价模块；
当对细胞和动物组织有美白效果时，进入所述人体临床评价模块；
所述人体临床评价模块包括：评价单元和评价报告输出单元；
所述评价单元，用于评价美白原料人体安全性及使用所述待评价美白原料前、后皮肤肤色的指标结果；
所述评价报告输出单元，用于输出所述评价单元的评价结果。
可选地，所述的美白原料功效评价体系，其中，所述自由基清除测试包括：对氧自由基清除率测定、DPPH自由基清除率测定和ABTS+自由基清除率测定中的一种或多种。
可选地，所述的美白原料功效评价体系，其中，所述酪氨酸酶抑制测试包括：
以酪氨酸为底物，对酪氨酸单酚酶抑制率测定，和/或以左旋多巴为底物，对酪氨酸双酚酶抑制率测定。
可选地，所述的美白原料功效评价体系，其中，所述待评价美白原料用于细胞和动物组织时，对美白效果进行评价包括：体外B16细胞黑素合成抑制测试、细胞内酪氨酸酶抑制测试、3D黑素模型的黑素抑制测试和斑马鱼胚胎黑色素抑制测试中的一种或多种。
可选地，所述的美白原料功效评价体系，其中，对皮肤的肤色指标进行评价，评价的内容包括美白淡斑和/或提亮肤色。
可选地，所述的美白原料功效评价体系，其中，评价所述美白淡斑包括：评价使用所述待评价美白原料前后皮肤黑色素M值和/或红斑E值。
可选地，所述的美白原料功效评价体系，其中，评价所述提亮肤色包括：评价使用所述待评价美白原料前后皮肤颜色ITA°值和/或亮度L值。
可选地，所述的美白原料功效评价体系，其中，在进行细胞、动物组织的美白效果评价之前还包括：
对所述待评价美白原料进行毒性测试，得到所述待评价美白原料的安全使用浓度范围；
所述细胞、动物组织的美白评价，在所述安全使用浓度范围内进行。
第二方面，一种上述所述的美白原料功效评价系统对美白原料的评价方法，其中，方法包括：
对待评价美白原料的功效进行筛选，得到所述待评价美白原料的自由基清除测试值、酪氨酸酶抑制测试值和美白测试值；
当所述美白测试值大于阈值时，将所述待评价美白原料用于细胞、动物组织，对美白效果进行评价；
当所述待评价美白原料用于细胞、动物组织有美白效果时，将所述待评价美白原料用于皮肤，对皮肤的肤色指标进行评价，得到评价报告。
有益效果：本发明首次针对美白原料构建出一个多维度的功效评价体系，解决了目前原料单一评价方法的问题，通过高通量初筛功效模块可以快速的筛选待评价美白原料的功效，当所筛选出的功效满足预设要求时，才进行后续功效测试、评价，避免了全流程评价导致检测成本较高，浪费研发、检测、市场资源。利用该评价系统可以帮助企业完成功效宣称备案的需求。
附图说明
图1是本发明中美白原料功效评价体系结构图；
图2是不同浓度抗坏血酸葡萄糖苷对酪氨酸酶活性的影响；
图3是3T3细胞相对存活率趋势图；
图4 在使用0.2 mg/mL的抗坏血酸葡萄糖苷样品前后对斑马鱼黑色素的影响
图5是受试者使用2% 抗坏血酸葡萄糖苷前后棕斑对比图；
图6是是受试者使用2% 抗坏血酸葡萄糖苷前后可见斑对比图；
图7是受试者使用2% 抗坏血酸葡萄糖苷前后红色特征对比图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚、明确，以下参照附图并举实施例对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明提供了一种美白原料功效评价体系，结合图1，体系包括：高通量初筛功效模块、细胞和动物组织评价模块、人体临床评价模块，其中，所述高通量初筛功效模块，包括机理研究单元和判断单元；所述机理研究单元，用于对所述待评价美白原料进行自由基清除测试和酪氨酸酶抑制测试；高通量初筛功效模块用来对待评价美白原料所具有的功效进行快速的筛选，快速的筛选主要是从待测美白原料的美白的机理上进行筛选。一方面，所述机理上进行筛选指的是对美白原料对自由基的清除率、清除效果，对Fe3+的还原能力测定，对酪氨酸酶（单酚及双酚）抑制率进行测定、评价。另一方面，所述机理上筛选还包括2D细胞、动物层面美白功效筛选。
需要说明的是，细胞层面美白效果评价要依据对酪氨酸酶抑制率效果程度及文献检索该美白原料的细胞、动物层面美白功效。若酪氨酸酶抑制率极低，且文献也明确表示该美白原料的细胞、动物层面美白功效较差，从检测成本出发，则省略该层面的功效评价。通常，细胞层面的功效测试前应首先测定原料的毒性，保证功效检测是在安全浓度范围内进行。
当该美白原料被文献证明有美白效果可证明该美白原料在细胞、动物层面有美白功效，则可进行细胞、动物层面的美白功效验证；文献中无该原料的美白功效，可进行高通量初筛功效评价模块进行筛选后考虑做细胞、动物组织模块。
在本实施例中，所述功效评价模块，用于在所述待评价美白原料用于皮肤时，对皮肤结果进行评价；包括评价单元和评价报告输出单元；所述判断单元，用于判断所述分子层面测试的测试值是否大于阈值；当所述分子层面测试值大于阈值时，进入所述细胞、动物组织评价模块；所述评价报告输出单元，用于输出所述评价单元的评价结果。也即是说，只有在满足了高通量筛选、细胞和动物组织测试值大于阈值时，才进行皮肤效果评价，从而可以避免，出现美白测试值小于阈值还进行皮肤测试造成研发、检测、市场资源浪费的问题发生。需要说明的是，所述阈值指的是美白原料所能达到的最低美白效果，该阈值可以根据行业规定或者实际的使用经验进行设置，通过设置该阈值作为一个衡量标准，可以方便对美白效果进行评价。所述的皮肤结果指的是，志愿者在使用了该美白原料的配方产品后皮肤所发生的变化情况，如皮肤亮度、ITA°、黑色素值、可见斑、不可见斑、棕斑等指标。
在本实施例中，所述评价报告输出单元所输出的结果包括美白原料对自由基的清除效果，酪氨酸酶抑制率以及细胞、动物模型检测的结果、人体安全性及皮肤指标改善情况。
在本实施例中，通过高通量初筛功效模块的快速筛选和细胞和动物组织模板深层次机理筛选，筛选后采用人体使用效果做进一步的评价，所述的人体使用效果评价，即是待评价的美白原料制作成护肤成品，志愿者使用后，对使用周期内的脸部皮肤进行前后对比，来评价该美白原料的美白效果。从而实现了，从美白原料的机理、细胞、动物、人体的多维度、多层级评价，完成“功效-证据”逻辑链，使评价更加全面，帮助企业完成功效宣称备案的需求。
基于相同的发明构思，本发明还提供一种美白原料功效评价方法，该评价方法是基于前述所述的评价体系。所述方法包括：
S10、对待评价美白原料的功效进行筛选，得到所述待评价美白原料的自由基清除测试值和美白测试值。
具体来说，对所述待评价美白原料的功效进行初步筛选，初步筛选的项目包括自由基清除测试和（单/双酚）酪氨酸酶抑制测试；通过测试得出待评价美白原料的自由基清除测试值和（单/双酚）酪氨酸酶抑制测试值。并将所得到的测试值同所设置的阈值进行比较。需要说明的是，此处的阈值可以根据行业中所设定的标准来进行设置，当然也可以根据具体的原材的性能来进行设置。所述的阈值是指当达到或超过该值时，说明有效果。
S20、当所述美白测试值大于阈值时，将所述待评价美白原料用于细胞、动物组织，对美白效果进行评价。
具体来说，对筛选后的（满足初步筛选要求的）待评价美白原料进行细胞、动物组织层面的测试，得到所述待评价美白原料的体外B16细胞黑素合成抑制值、细胞内酪氨酸酶抑制测试值、3D黑素模型的黑素抑制测试值和斑马鱼胚胎黑色素抑制测试值中的一种或多种。
S30、当所述待评价美白原料用于细胞、动物组织有美白效果时，将所述待评价美白原料用于皮肤，对皮肤的肤色指标进行评价，得到评价报告。
在本实施例中，所述提供的评价方法，简单、全面，能够为企业完成功效宣称备案的需求。
下面通过具体的实施例来对本发明所提供的评价体系做进一步的解释说明。待检测美白原料为抗坏血酸葡萄糖苷。
A-1.对于自由基清除的测试方法具体如下所示：
（1）抗坏血酸葡萄糖苷对·OH自由基清除率测定。
邻二氮菲-Fe2+是一种氧化还原指示剂，其呈色变化可反应出溶液中氧化还原状态的改变。H2O2/Fe2+体系，通过Fenton反应所产生的羟自由基（·OH），邻二氮菲-Fe2+水溶液可被羟自由基氧化为邻二氮菲-Fe3+，从而使邻二氮菲-Fe2+在510 nm处的最大吸收峰消失，根据吸光度的变化，可推算出羟自由基的产量。
实验结果如下表所示：
表1 抗坏血酸葡萄糖苷对·OH自由基的清除作用
Figure 385560DEST_PATH_IMAGE002
通过表1可知，在抗坏血酸葡萄糖苷浓度为100 mg/mL时，对·OH自由基的清除率达40.43±2.76%。
（2）抗坏血酸葡萄糖苷对·O2-自由基清除率测定。
超氧阴离子自由基（·O2-）是生命代谢过程中产生的自由基，具有极强的氧化能力，可使蛋白质变性、酶失活等。碱性环境下，邻苯三酚将发生自氧化生成·O2-自由基和中间产物（M）。·O2-自由基可与中间产物（M）继续反应，生成有色中间产物（E），产物（E）在250-325 nm波长范围内有较强吸收。
表2 .抗坏血酸葡萄糖苷对·O2-自由基的清除作用
Figure 293342DEST_PATH_IMAGE003
通过表2可知，随着抗坏血酸葡萄糖苷浓度的增加，对·O2-自由基的清除率也逐渐增加，在质量浓度为18 mg/mL时，对·O2-自由基的清除率可达87.19±0.25%。
（3）抗坏血酸葡萄糖苷对DPPH自由基清除率测定。
1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（简称DPPH）是一种稳定的长寿命自由基，其乙醇溶液呈深紫色，在517 nm附近有强吸收。当有自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使DPPH乙醇溶液光吸收减弱。DPPH乙醇溶液褪色程度与其接受的电子数呈线性关系，由此可评价试验样品清除自由基的能力，即自由基清除活性的大小。
表3. 抗坏血酸葡萄糖苷对DPPH自由基的清除作用
Figure 662007DEST_PATH_IMAGE004
通过表3可知，随着抗坏血酸葡萄糖苷浓度的增加，对DPPH自由基的清除率也逐渐增加，在质量浓度为0.150 mg/mL时，对DPPH自由基的清除率可达65.91±0.80%。
（4）抗坏血酸葡萄糖苷对ABTS+自由基清除率测定。
在氧化剂存在时，ABTS将氧化变为ABTS+自由基，溶液将呈现绿色，在紫外734 nm波长处有强吸收。当体系中加入自由基清除剂时，ABTS+的生成量将减少，溶液颜色将变浅，由墨绿色逐渐变为浅绿色，在734 nm处的吸光度将变小，以此来测定该物质的ABTS+自由基清除率。
具体实验结果如表4所示：
表4 抗坏血酸葡萄糖苷对ABTS+自由基的清除作用
Figure 696959DEST_PATH_IMAGE005
表4 抗坏血酸葡萄糖苷对ABTS+自由基的清除作用（续表）
Figure 733048DEST_PATH_IMAGE006
通过表4可知，随着抗坏血酸葡萄糖苷浓度的增加，对ABTS+自由基的清除率也逐渐增加，在质量浓度为0.125 mg/mL时，对ABTS+自由基的清除率可达77.49±0.36%。
通过多种分子化学实验方法高通量快速检测原料抗坏血酸葡萄糖苷，从而实现多维度、全方面展现抗坏血酸葡萄糖苷的自由基清除功效。结合上述数据，抗坏血酸葡萄糖苷对·OH自由基、·O2-自由基、DPPH及ABTS+均具有显著的清除效果，说明该原料具有良好的自由基清除效果。
A-2.对于酪氨酸酶抑制的测试方法具体如下所示：
（1）抗坏血酸葡萄糖苷对酪氨酸酶（单酚）抑制率测定。
酪氨酸酶是黑色素合成途径中的限速酶，酪氨酸酶能够催化单酚羟化成二酚，表现出单酚氧化活性，即以酪氨酸为底物生成多巴。
表5 抗坏血酸葡萄糖苷对酪氨酸酶（单酚）抑制率测定
Figure 811731DEST_PATH_IMAGE007
通过表5可知，随着抗坏血酸葡萄糖苷浓度的增加，对酪氨酸酶（单酚）抑制率也逐渐增强，在质量浓度为40 mg/mL时，对酪氨酸酶（单酚）抑制率可达87.90±0.16%。
（2）抗坏血酸葡萄糖苷对酪氨酸酶（双酚）抑制率测定。
酪氨酸酶作用于多巴，形成多巴醌，后者自发进行一系列反应最后形成黑色素。酪氨酸酶在pH 6.8的磷酸溶液中，可催化多巴转化成多巴醌，在分光光度计475 nm处可测定吸光值。具有酪氨酸酶活性抑制作用的原料可以减少多巴转化成多巴醌，从而降低吸光值，根据吸光值的变化，评估原料对酪氨酸酶活性的抑制作用。
表6 抗坏血酸葡萄糖苷对酪氨酸酶（双酚）抑制率测定
Figure 402113DEST_PATH_IMAGE008
结合图1，通过表6可知，随着抗坏血酸葡萄糖苷浓度的增加，对酪氨酸酶（双酚）抑制率也逐渐增强，在质量浓度为60 mg/mL时，对酪氨酸酶（单酚）抑制率可达55.43±0.54%。
酪氨酸酶抑制法一般用于测定美白剂对酪氨酸酶活性的抑制率，测定时间短、操作简便、所需费用低，适用于对美白剂进行大通量筛查。
A主要涉及通过化学及生化酶法评价原料的功效，可实现低成本、高通量、更高效筛选出具有显著功效的原料。通过A评价模块的评价，可快速确定原料抗坏血酸葡萄糖苷的自由基清除及美白功效。在此基础上，进一步研究在细胞、动物层面的功效。
B涉及细胞、动物方面的功效检测。
在通过毒性实验确定该原料的安全使用浓度范围后，再进行该层面的美白功效检测。原料对细胞的毒性测试方法如下所示。
B-1.对于体外3T3细胞模型眼刺激性检测方法具体如下所示：
化妆品体外眼刺激性试验中性红吸收法是通过检测化妆品对小鼠成纤维细胞（BALB/c 3T3）吸附中性红能力的抑制效果，由此反映受试物对细胞膜结构、细胞器功能、物质和能量代谢以及由此导致的细胞增殖和存活力的影响，据此推测其眼刺激性强度。
实验结果如表8所示：
表8. 抗坏血酸葡萄糖苷对3T3细胞作用结果
Figure 506335DEST_PATH_IMAGE009
结合图3，由表8可知，抗坏血酸葡萄糖苷浓度为10 mg/mL时，细胞相对存活率为104.71%。故根据中性红吸收法检测结果，最终确定抗坏血酸葡萄糖苷在10 mg/mL范围内，未表现出细胞毒性。
B-2.对人皮肤层纤维细胞FB细胞毒性检测方法具体如下所示：
在FB细胞上开展眼刺激试验，以MTT模型进行检测，评价结果如表9所示：
表9. 抗坏血酸葡萄糖苷对FB细胞作用结果
Figure 865772DEST_PATH_IMAGE010
由表9可知，抗坏血酸葡萄糖苷浓度为10 mg/mL时，细胞相对存活率为384.01%。故根据MTT模型法检测结果，最终确定抗坏血酸葡萄糖苷在10 mg/mL范围内，未表现出细胞毒性，且有促增殖的作用。
B-3.对人永生化角质细胞Hacat细胞毒性检测方法具体如下所示：
样品由低到高设置8个浓度，在Hacat细胞上开展细胞毒性检测，以MTT模型进行检测，检测结果见表10：
表10. 抗坏血酸葡萄糖苷对Hacat细胞作用结果
Figure 383866DEST_PATH_IMAGE011
由表10可知，抗坏血酸葡萄糖苷浓度为10%时，细胞相对存活率为113.07%。故根据MTT模型法检测结果，最终确定抗坏血酸葡萄糖苷在10%范围内，未表现出细胞毒性。
B-4.美白活性评价（细胞层面）方法具体如下所示：
B16小鼠黑素瘤细胞是常用的研究黑素生成的细胞模型，通过测定美白原料作用于黑素细胞后黑素合成量及酪氨酸酶含量的变化，评价原料的美白活性。本试验分为三部分，第一部分基于B16细胞开展毒性检测，确定样品基于B16细胞的半抑制浓度（IC50）以及安全浓度；第二部分基于B16细胞开展胞内酪氨酸酶抑制试验，检测样品的美白功效；第三部分基于B16细胞开展体外黑素合成抑制实验，比较不同样品的美白功效。
第一部分：样品对B16细胞毒性检测，其结果如表11所示：
表11. 抗坏血酸葡萄糖苷对B16细胞作用结果
Figure 195964DEST_PATH_IMAGE012
由表11可知，抗坏血酸葡萄糖苷的浓度为10 mg/mL时，细胞存活率为108.89%，根据MTT模型检测结果，抗坏血酸葡萄糖苷在10 mg/mL范围内未表现出细胞毒性。
第二部分：胞内酪氨酸酶抑制实验检测，其结果如表12所示：
表12. 抗坏血酸葡萄糖苷对B16细胞胞内酪氨酸酶抑制作用结果
Figure 838298DEST_PATH_IMAGE013
结合图2，由表12可知，抗坏血酸葡萄糖苷的浓度为0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.4mg/mL、0.6 mg/mL、0.8 mg/mL、1 mg/mL时，胞内酪氨酸酶抑制率分别为10.07%、11.46%、6.43%、5.21%、6.48%、9.95%。
第三部分：样品对B16细胞体外黑素合成抑制作用检测，其结果如表13所示：
表13. 抗坏血酸葡萄糖苷对B16细胞体外黑素合成抑制作用结果
Figure 317821DEST_PATH_IMAGE014
由表13可知，抗坏血酸葡萄糖苷的浓度为0.078 mg/mL、0.313 mg/mL、1.25 mg/mL、5 mg/mL时，黑素合成抑制率分别为22.51%、18.89%、25.55%、31.33%。
B-5.对斑马鱼胚胎黑色素抑制实验测试方法具体如下所示：
斑马鱼胚胎急性毒检测技术可以一次检测1000种有害物质，当检测到急性有毒物质时，鱼胚胎会在48小时后出现心脏水肿等异常情况，严重时会直接死亡。抗坏血酸葡萄糖苷对斑马鱼胚胎黑色素抑制实验结果如表14所示：
表14. 抗坏血酸葡萄糖苷对斑马鱼胚胎黑色素抑制作用结果
Figure 269465DEST_PATH_IMAGE015
由表14可知，随着抗坏血酸葡萄糖苷的浓度增加，对斑马鱼胚胎的黑色素抑制逐渐增加。
B评价主要涉及细胞、动物方面的功效检测，首先探究了抗坏血酸葡萄糖苷对细胞及动物的毒性研究，在安全毒性范围内对其美白功效进行研究。A、B评价的功效研究均建立在微观层面，还需进一步研究在宏观层面的功效影响。C评价涉及在人体层面评价抗坏血酸葡萄糖苷的美白功效，美白效果测试可使用皮肤颜色测试仪及VISIA-CR面部扫描仪相关参数确定样品的提亮肤色及美白功效。其中，需测定的参数如下所示：
（1）皮肤颜色ITA°；
（2）皮肤亮度L；
（3）皮肤黑色素M值；
（4）皮肤红斑E值；
（5）棕斑数量；
（6）可见斑数量；
（7）红色特征数量；
C-1.皮肤颜色测试结果如表15所示：
表15. 受试者脸部皮肤颜色ITA°测量结果
Figure 568859DEST_PATH_IMAGE016
由表15结果可知：使用2% 抗坏血酸葡萄糖苷和4% 抗坏血酸葡萄糖苷的受试者各个时间点的ITA°均变大，且使用4% 抗坏血酸葡萄糖苷的受试者ITA°值增长率均比使用2%抗坏血酸葡萄糖苷的受试者要高。
C-2.皮肤亮度测试结果如表16所示：
表16. 受试者脸部皮肤亮度L测量结果
Figure 14884DEST_PATH_IMAGE017
由表16可知，使用2% 抗坏血酸葡萄糖苷和4% 抗坏血酸葡萄糖苷的受试者各个时间点的L值均变大，且使用4% 抗坏血酸葡萄糖苷的受试者L值增长率均比使用2% 抗坏血酸葡萄糖苷的受试者要高。
C-3.皮肤黑色素M值测试结果如表17所示：
表17 受试者脸部皮肤黑色素M值测量结果
Figure 348914DEST_PATH_IMAGE018
由表17可知，使用2% 抗坏血酸葡萄糖苷和4% 抗坏血酸葡萄糖苷产品的受试者各个时间点的M值均降低，且使用4% 抗坏血酸葡萄糖苷产品的受试者M值降低率均比使用2%抗坏血酸葡萄糖苷产品的受试者要高。
C-4.皮肤红斑E值测试结果如表18所示：
表18. 受试者脸部皮肤红斑E值测量结果
Figure 205880DEST_PATH_IMAGE019
由表18可知，使用0% 抗坏血酸葡萄糖苷、2% 抗坏血酸葡萄糖苷和4% 抗坏血酸葡萄糖苷的受试者各个时间点的E值变化比率一致，说明抗坏血酸葡萄糖苷没有减少红斑的功效。
C-5.VISIA-CR分析结果：
如图5至图6所示，从VISIA-CR拍摄图对比分析，抗坏血酸葡萄糖苷具有一定程度淡化棕斑及可见斑的功效。
针对抗坏血酸葡萄糖苷原料，本发明从分子水平功效分析出发，高通量筛选该原料的功效作用。并结合细胞、鱼胚胎进一步确定其功效作用，在此数据基础上，设计抗坏血酸葡萄糖苷基础配方并用于人体功效检测。
应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。

Claims (9)

1.一种美白原料功效评价体系，其特征在于，包括：
高通量初筛功效模块，用于对待评价美白原料的功效进行筛选；
细胞评价模块、动物组织评价模块，用于对通过筛选的所述待评价美白原料作用于细胞和动物组织时，对美白效果进行评价；以及
人体临床评价模块，用于对细胞及动物组织起到美白效果的所述待评价美白原料作用于皮肤时，对皮肤肤色的指标进行评价；
所述高通量初筛功效模块，包括机理研究单元和判断单元；所述机理研究单元，用于对所述待评价美白原料进行自由基清除测试和酪氨酸酶抑制测试；所述判断单元，用于判断所述自由基清除和酪氨酸酶抑制测试的测试值是否大于阈值；以及判断所述待评价美白原料作用于细胞和动物组织时，是否有美白效果；
当测试值大于阈值时，进入所述细胞评价模块、动物组织评价模块；
当对细胞和动物组织有美白效果时，进入所述人体临床评价模块；
所述人体临床评价模块包括：评价单元和评价报告输出单元；
所述评价单元，用于评价美白原料人体安全性及使用所述待评价美白原料前、后皮肤肤色的指标结果；
所述评价报告输出单元，用于输出所述评价单元的评价结果。
2.根据权利要求1所述的美白原料功效评价体系，其特征在于，所述自由基清除测试包括：对氧自由基清除率测定、DPPH自由基清除率测定和ABTS+自由基清除率测定中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的美白原料功效评价体系，其特征在于，所述酪氨酸酶抑制测试包括：
以酪氨酸为底物，对酪氨酸单酚酶抑制率测定，和/或以左旋多巴为底物，对酪氨酸双酚酶抑制率测定。
4.根据权利要求1所述的美白原料功效评价体系，其特征在于，所述待评价美白原料用于细胞和动物组织时，对美白效果进行评价包括：体外B16细胞黑素合成抑制测试、细胞内酪氨酸酶抑制测试、3D黑素模型的黑素抑制测试和斑马鱼胚胎黑色素抑制测试中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的美白原料功效评价体系，其特征在于，对皮肤的肤色指标进行评价，评价的内容包括美白淡斑和/或提亮肤色。
6.根据权利要求5所述的美白原料功效评价体系，其特征在于，评价所述美白淡斑包括：评价使用所述待评价美白原料前、后皮肤黑色素M值和/或红斑E值。
7.根据权利要求6所述的美白原料功效评价体系，其特征在于，评价所述提亮肤色包括：评价使用所述待评价美白原料前、后皮肤颜色ITA°值和/或亮度L值。
8.根据权利要求1所述的美白原料功效评价体系，其特征在于，在进行细胞、动物组织的美白效果评价之前还包括：
对所述待评价美白原料进行毒性测试，得到所述待评价美白原料的安全使用浓度范围；
所述细胞、动物组织的美白评价，在所述安全使用浓度范围内进行。
9.一种如权利要求1-8任一所述的美白原料功效评价体系对美白原料的评价方法，其特征在于，方法包括：
对待评价美白原料的功效进行筛选，得到所述待评价美白原料的自由基清除测试值、酪氨酸酶抑制测试值和美白测试值；
当所述美白测试值大于阈值时，将所述待评价美白原料用于细胞、动物组织，对美白效果进行评价；
当所述待评价美白原料用于细胞、动物组织有美白效果时，将所述待评价美白原料用于皮肤，对皮肤的肤色指标进行评价，得到评价报告。
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