CN113712205B - 一种牡蛎肽粉组合物及其制备方法与应用 - Google Patents
一种牡蛎肽粉组合物及其制备方法与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113712205B CN113712205B CN202111061124.7A CN202111061124A CN113712205B CN 113712205 B CN113712205 B CN 113712205B CN 202111061124 A CN202111061124 A CN 202111061124A CN 113712205 B CN113712205 B CN 113712205B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- oyster
- extract
- composition
- peptide powder
- enzymolysis
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000237502 Ostreidae Species 0.000 title claims abstract description 140
- 235000020636 oyster Nutrition 0.000 title claims abstract description 140
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 100
- 239000000843 powder Substances 0.000 title claims abstract description 82
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 65
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 102
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 claims abstract description 70
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 claims abstract description 37
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 claims abstract description 37
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 claims abstract description 35
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 claims abstract description 35
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 claims abstract description 35
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 35
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 claims abstract description 28
- 230000002075 anti-alcohol Effects 0.000 claims abstract description 9
- 230000036039 immunity Effects 0.000 claims abstract description 8
- 235000008584 Hovenia dulcis Nutrition 0.000 claims description 28
- 244000010000 Hovenia dulcis Species 0.000 claims description 28
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 24
- 244000046146 Pueraria lobata Species 0.000 claims description 23
- 235000010575 Pueraria lobata Nutrition 0.000 claims description 23
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 22
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 20
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 16
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 16
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 15
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 15
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 15
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 12
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 11
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims description 9
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 9
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 9
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 claims description 8
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 7
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 7
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 7
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 claims description 7
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 claims description 6
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 claims description 6
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 6
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 claims description 6
- 230000004112 neuroprotection Effects 0.000 claims description 6
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 6
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 6
- 241000219780 Pueraria Species 0.000 claims description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 5
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 4
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims description 3
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 claims description 3
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims description 3
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108091005508 Acid proteases Proteins 0.000 claims description 2
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 claims description 2
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 claims description 2
- 108010004032 Bromelains Proteins 0.000 claims description 2
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 2
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 claims description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims description 2
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 claims description 2
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 claims description 2
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 claims description 2
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 claims description 2
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 2
- 235000019835 bromelain Nutrition 0.000 claims description 2
- 108010007119 flavourzyme Proteins 0.000 claims description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940055729 papain Drugs 0.000 claims description 2
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 2
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 claims description 2
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 claims description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims 2
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 26
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 abstract description 16
- 230000002633 protecting effect Effects 0.000 abstract description 6
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 44
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 17
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 16
- OMFXVFTZEKFJBZ-UHFFFAOYSA-N Corticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 OMFXVFTZEKFJBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- OMFXVFTZEKFJBZ-HJTSIMOOSA-N corticosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@H](CC4)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OMFXVFTZEKFJBZ-HJTSIMOOSA-N 0.000 description 14
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 9
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 9
- 230000034994 death Effects 0.000 description 8
- PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N neutral red Chemical compound Cl.C1=C(C)C(N)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 8
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 5
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 206010019133 Hangover Diseases 0.000 description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 4
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 4
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 3
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 3
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 3
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 3
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 2
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 231100000753 hepatic injury Toxicity 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 2
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 2
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 2
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 2
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- 206010001497 Agitation Diseases 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- 102400000888 Cholecystokinin-8 Human genes 0.000 description 1
- 101800005151 Cholecystokinin-8 Proteins 0.000 description 1
- 206010012374 Depressed mood Diseases 0.000 description 1
- 208000020401 Depressive disease Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010019663 Hepatic failure Diseases 0.000 description 1
- 206010019728 Hepatitis alcoholic Diseases 0.000 description 1
- 238000012449 Kunming mouse Methods 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000028017 Psychotic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 108010087230 Sincalide Proteins 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 206010042458 Suicidal ideation Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 201000003352 adrenal gland pheochromocytoma Diseases 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 208000002353 alcoholic hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 1
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 1
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 238000010609 cell counting kit-8 assay Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 231100000835 liver failure Toxicity 0.000 description 1
- 208000007903 liver failure Diseases 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000008513 turmeric extract Substances 0.000 description 1
- 229940052016 turmeric extract Drugs 0.000 description 1
- 235000020240 turmeric extract Nutrition 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/12—Ketones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
- A61K36/488—Pueraria (kudzu)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/72—Rhamnaceae (Buckthorn family), e.g. buckthorn, chewstick or umbrella-tree
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
- A61K38/012—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/24—Antidepressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Mycology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Botany (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Neurology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及一种牡蛎肽粉的组合物及其制备方法和应用，所述组合物包括姜黄素、葛根提取物和枳椇子提取物中的至少两种，和牡蛎肽粉或牡蛎低聚肽，所述组合物具有显著的神经保护功能、提高免疫力作用和显著的解酒肝保护作用。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种牡蛎肽粉组合物及其制备方法与应用。
背景技术
长期过量摄入酒精引起酒精性肝损伤，进而发展成酒精性肝炎、肝纤维化、肝硬化，甚至肝功能衰竭等，严重危害人民健康。据2018年世界卫生组织发布《酒精消费与健康》报告中统计的数字显示，我国男性中62.6％肝硬化死亡原因是由饮酒造成的。目前学术界公认肝纤维化是可逆过程，肝纤维化的可逆性为治疗肝病提供了有效的早期窗口。近年来，药食同源中医药多途径、多层次、多靶点治疗肝损伤的独特优势，日益受到临床专家的重视和肯定。因此，开发安全有效的肝保护辅助功能食品可带来显著的经济效益和社会效益。
抑郁症是一种常见的慢性精神性疾病，其最主要的临床症状表现为显著而持久性的情绪低落、暴躁易怒和焦虑不安。除此之外，抑郁症状还表现为睡眠生物节律素乱、食欲降低、精力兴趣减退等。抑郁症患者常常表现出无助无望、自问自责、甚至是自我伤害的行为，病情严重者还会有自杀倾向。由于抑郁症患者出现不同程度的脑区受损，研究者们相继提出，治疗抑郁症或许可从神经保护方面着手。文献报道某些天然产物、药食两用中药材具有神经保护等作用。
1976年Greene和Tischle成功建立了具有神经特性的PC12细胞株，它是从大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆出来的。PC12细胞株具有典型的神经细胞特性，传代稳定，是迄今为止国际上公认在体外进行神经生物、神经化学及神经系统疾病研究的理想模型。体外以皮质酮作用于PC12细胞，模拟焦虑症神经细胞损伤状态，通过观察活性产物对皮质酮诱导的PC12细胞凋亡的影响，判断对皮质酮损伤的PC12细胞是否具有保护作用，可从细胞水平上初步探讨活性物质是否有神经保护作用，以期为指导开发具有抗焦虑、改善抑郁症作用的药物提供依据。
专利申请CN105341948A公开了一种牡蛎小分子肽的制备方法，但所得牡蛎小分子肽只是用于蛋白营养补充剂的作用。
专利申请CN111903882A公开了牡蛎肽及其制备方法，并公开了其具有保护肝脏，增强免疫力的作用，但该专利并无相关研究数据，而本申请发明人研究发现，单纯的牡蛎肽在神经保护、肝脏保护等方面的疗效低于本发明所提供的牡蛎肽组合物。
专利申请CN109170843A公开了一种用于缓解酒精中毒的体内酵素及其制备方法，其包含了益生元、膳食纤维、葛根提取物、枳椇子提取物、姜黄提取物、综合果蔬粉、益生菌、植物蛋白酶和甜味剂等。但该专利存在解酒效力低，醒酒速度慢等缺点。
因此，仍亟需一种神经保护作用好、保肝效果好，解酒效力强，醒酒速度快的产品。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供一种组合物及其制备方法和用途。
第一方面，本发明提供一种组合物。
一种组合物，其包括：(a)姜黄素、葛根提取物和枳椇子提取物中的至少两种，和(b)牡蛎肽粉或牡蛎低聚肽。在一些实施例中，一种组合物，其包括：(a)葛根提取物和枳椇子提取物，和(b)牡蛎肽粉或牡蛎低聚肽。在一些实施例中，一种组合物，其包括：(a)姜黄素、葛根提取物和枳椇子提取物，和(b)牡蛎肽粉或牡蛎低聚肽。在一些实施例中，一种组合物，其包括：姜黄素、葛根提取物、枳椇子提取物和牡蛎肽粉。在一些实施例中，一种组合物，其包括：姜黄素、葛根提取物、枳椇子提取物和牡蛎低聚肽。
所述牡蛎肽粉中肽的分子量可以小于2000Da。
以牡蛎肽粉的总质量计算，所述牡蛎肽粉含45.0wt％-60.0wt％的牡蛎低聚肽和5.0wt％-12.0wt％的牡蛎多糖。在一些实施例中，以牡蛎肽粉的总质量计算，所述牡蛎肽粉含50.0wt％-60.0wt％的牡蛎低聚肽和6.0wt％-10.0wt％的牡蛎多糖。在一些实施例中，以牡蛎肽粉的总质量计算，所述牡蛎肽粉含54.0wt％-57.0wt％的牡蛎低聚肽和7.0wt％-9.0wt％的牡蛎多糖。
以牡蛎低聚肽的总质量计算，所述牡蛎低聚肽中含分子量小于或等于1000Da的肽的含量为70wt％-85wt％。在一些实施例中，以牡蛎低聚肽的总质量计算，所述牡蛎低聚肽中含分子量小于或等于1000Da的肽的含量为80wt％-85wt％；以牡蛎肽粉的总质量计算，所述牡蛎肽粉还可以包含800-900mg/kg的钙，500-600mg/kg的镁，120-150mg/kg的锌。
以组合物的总质量计算，所述牡蛎低聚肽含量可以为10.0wt％-50.0wt％。在一些实施例中，以组合物的总质量计算，所述牡蛎低聚肽含量为15.0wt％-20.0wt％。在一些实施例中，以组合物的总质量计算，所述牡蛎低聚肽含量为16.0wt％-19.0wt％。
以组合物的总质量计算，所述牡蛎肽粉的含量可以为20.0wt-74.0wt％。在一些实施例中，以组合物的总质量计算，所述牡蛎肽粉的含量为30.0wt-50.0wt％。在一些实施例中，以组合物的总质量计算，所述牡蛎肽粉的含量为30.0wt-40.0wt％。
以组合物的总质量计算，所述姜黄素的含量可以为1.0wt％-15.0wt％。在一些实施例中，以组合物的总质量计算，所述姜黄素的含量为5.0wt％-10.0wt％。在一些实施例中，以组合物的总质量计算，所述姜黄素的含量为6.0wt％-8.0wt％。
以组合物的总质量计算，所述葛根提取物的含量可以为15.0wt％-50.0wt％。在一些实施例中，以组合物的总质量计算，所述葛根提取物的含量为20.0wt％-40.0wt％。在一些实施例中，以组合物的总质量计算，所述葛根提取物的含量为25.0wt％-35.0wt％。在一些实施例中，以组合物的总质量计算，所述葛根提取物的含量为28.0wt％-32.0wt％。
以组合物的总质量计算，所述枳椇子提取物的含量可以为10.0wt％-50.0wt％。在一些实施例中，以组合物的总质量计算，所述枳椇子提取物的含量为10.0wt％-20.0wt％。在一些实施例中，以组合物的总质量计算，所述枳椇子提取物的含量为14.0wt％-17.0wt％。在一些实施例中，以组合物的总质量计算，所述枳椇子提取物的含量为15.0wt％-16.0wt％。
在本发明的一些实施方式中，一种组合物，其包括：姜黄素、葛根提取物、枳椇子提取物和牡蛎肽粉；以组合物的总质量计算，所述牡蛎肽粉的含量为30.0wt-40.0wt％；所述姜黄素的含量为6.0wt％-8.0wt％；所述葛根提取物的含量为28.0wt％-32.0wt％；所述枳椇子提取物的含量为15.0wt％-16.0wt％。
在本发明的一些实施方式中，一种组合物，其包括：姜黄素、葛根提取物、枳椇子提取物和牡蛎肽粉；以牡蛎肽粉的总质量计算，所述牡蛎肽粉含45.0wt％-60.0wt％的牡蛎低聚肽和5.0wt％-12.0wt％的牡蛎多糖；以牡蛎低聚肽的总质量计算，所述牡蛎低聚肽中含分子量小于或等于1000Da的肽的含量为80wt％-85wt％；以组合物的总质量计算，所述牡蛎肽粉含量为30.0wt-40.0wt％；所述姜黄素的含量为6.0wt％-8.0wt％；所述葛根提取物的含量为28.0wt％-32.0wt％；所述枳椇子提取物的含量为15.0wt％-16.0wt％。
在本发明的一些实施方式中，一种组合物，其包括：姜黄素、葛根提取物、枳椇子提取物和牡蛎低聚肽；以组合物的总质量计算，所述牡蛎低聚肽的含量为16.0wt-19.0wt％；所述姜黄素的含量为6.0wt％-8.0wt％；所述葛根提取物的含量为28.0wt％-32.0wt％；所述枳椇子提取物的含量为15.0wt％-16.0wt％。
所述牡蛎肽粉的制备方法包括：
(1)取牡蛎肉，搅碎，与水混合，加酶，调节pH，酶解反应，灭酶，离心或过滤，得酶解滤液；
(2)所述酶解滤液依次经过陶瓷膜、截留分子量为2000Da的卷式膜分离纯化，得到含分子量低于2000Da的肽的酶解液；
(3)浓缩酶解液至酶解液的固形物含量为5wt％-30wt％，喷雾干燥，得到所述牡蛎肽粉。
所述组合物的制备方法包括：
(1)取牡蛎肉，搅碎，与水混合，加酶，调节pH，酶解反应，灭酶，离心或过滤，得酶解滤液；
(2)所述酶解滤液依次经过陶瓷膜、截留分子量为2000Da的卷式膜分离纯化，得到含分子量低于2000Da的肽的酶解液；
(3)浓缩酶解液至酶解液的固形物含量为5wt％-30wt％；再加入姜黄素、葛根提取物、枳椇子提取物和壁材，喷雾干燥，得到所述组合物。
所述酶可以包括选自碱性蛋白酶、风味蛋白酶、动物蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶和胃蛋白酶中的至少一种。
所述调节pH可以为调节pH至2-9。
所述酶解反应的反应温度可以为40-60℃。
所述酶解反应的反应时间可以为1-10小时。
所述酶解液中固形物与姜黄素的重量比为1:0.01-1:0.2。
所述酶解液中固形物与葛根提取物的重量比为1:0.5-1:3。
所述酶解液中固形物与枳椇子提取物的重量比为1:0.1-1:2。
所述酶解液中固形物与壁材的重量比为1:0.25-1:5。
所述壁材包括选自阿拉伯胶、明胶、麦芽糊精、环糊精、壳聚糖和海藻酸钠等中的至少一种。
所述葛根提取物的制备方法包括：称取一定量的葛根，以重量比葛根:纯水＝1:20加入纯水，于90-95℃条件下提取2h，过滤。往滤渣中加入同比例纯水，于85-90℃条件下二次提取1h，过滤，合并两次滤液，浓缩至近干，冻干，得到葛根提取物，提取率为35.0-45.0％。
枳椇子提取物的制备方法包括：称取一定量的枳椇子，以重量比枳椇子:纯水＝1:50加入纯水，于90-95℃条件下提取2h，过滤。往滤渣中加入同比例纯水，于85-90℃条件下二次提取1h，过滤，合并两次滤液，浓缩至近干，冻干，得到枳椇子提取物，提取率为5.0-7.0％。
所述组合物可以为胶囊剂、微胶囊剂、颗粒剂或片剂。
第二方面，本发明提供一种第一方面所述组合物的用途。
一种第一方面所述组合物在制备提高免疫力、神经保护、肝保护、解酒或辅助肝保护的产品中的用途。在一些实施例中，一种第一方面所述组合物在制备解酒或辅助肝保护的产品中的用途。
在一些实施例中，一种第一方面所述组合物在制备改善抑郁症状的药物中的用途。
有益效果
相比现有技术，本发明至少具有包括以下有益技术效果中的一种：
(1)本发明所提供的牡蛎肽粉和组合物具有显著的神经保护功能、提高免疫力作用和显著的解酒肝保护作用。
(2)含牡蛎肽粉、葛根提取物和枳椇子提取物的组合物具有较好的解酒肝保护作用，相比单独使用牡蛎肽粉，单独使用含葛根提取物、枳椇子提取物和姜黄素的组合物，能显著降低醉酒率和死亡率，说明牡蛎肽粉、葛根提取物和枳椇子提取物之间能起到协同增效的效果。
(3)含牡蛎肽粉、葛根提取物、枳椇子提取物和姜黄素的的组合物具有最好的解酒肝保护作用，相比单独使用牡蛎肽粉，单独使用含葛根提取物、枳椇子提取物和姜黄素的组合物，能显著降低总醉酒率和死亡率；相比含牡蛎肽粉、葛根提取物和枳椇子提取物的组合物，能显著降低总醉酒率，说明牡蛎肽粉、葛根提取物、枳椇子提取物和姜黄素之间能起到协同增效的效果。
附图说明
图1示实施例6中牡蛎肽粉微胶囊及复合物微胶囊对皮质酮引起的PC-12细胞损伤的保护作用；其中，#表示模型组与正常组相比,p<0.05；**表示给药组与模型组相比,p<0.01；***表示给药组与模型组相比,p<0.001；****表示给药组与模型组相比,p<0.0001。
术语定义：
本发明中，“wt％”表示重量百分比。“Da”表示分子量单位“道尔顿”。
本发明中，“低聚肽”表示分子量＜3000Da的肽。
本发明中，“室温”表示室内环境温度，由大约10℃到大约40℃。在一些实施例中，“室温”指的是温度由大约20℃到大约30℃；在另一些实施例中，“室温”指的是温度由大约25℃到大约30℃；在又一些实施例中，“室温”指的是10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃等。
在本发明的上下文中，当使用或者无论是否使用“大约”或“约”等字眼时，表示在给定的值或范围的10％以内，适当地在5％以内，特别是在1％以内。或者，对于本领域普通技术人员而言，术语“大约”或“约”表示在平均值的可接受的标准误差范围内。
具体实施方式
为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面进一步披露一些非限制实施例以对本发明作进一步的详细说明。
本发明所使用的试剂均可以从市场上购得或者可以通过本发明所描述的方法制备而得。
实施例1：牡蛎肽粉的制备
取清洗后牡蛎肉20kg，粉碎，加入40kg水，调pH至7，加入动物蛋白酶0.4kg，搅拌，50℃反应6小时，升温至90℃10分钟灭活酶，降温至室温，反应料液经离心机离心后所得滤液依次经陶瓷膜、卷式膜(2000Da)过滤，滤液经单效浓缩至浓缩液约10kg，经喷雾干燥，得到牡蛎肽粉0.75kg。取所得牡蛎肽粉进行检测，结果为：以牡蛎肽粉的总质量计算，牡蛎多糖含量为8.0wt％，钙900mg/kg，镁500mg/kg，锌145mg/kg，牡蛎低聚肽含量为55.0wt％，牡蛎低聚肽中分子量≤1000Da的多肽占牡蛎低聚肽的81.5wt％。
实施例2：牡蛎肽粉微胶囊(1#)的制备
取清洗后牡蛎肉10kg，粉碎后加入到100L的反应釜中，以料液比1:3加入30kg水，调pH至7，加入动物蛋白酶和胰蛋白酶各0.1kg，搅拌均匀升温至50℃反应4小时，反应结束后升温至90℃，灭活酶10分钟，冷却降温至室温，反应料液经离心机离心后所得滤液依次经陶瓷膜、卷式膜(2000Da)过滤，滤液经单效浓缩至浓缩液约10kg，加入麦芽糊精0.2kg，搅拌溶解，混合液经喷雾干燥得到牡蛎肽粉微胶囊(1#)0.60kg。取所得牡蛎肽粉微胶囊(1#)进行检测，结果为：以牡蛎肽粉微胶囊(1#)总质量计算，牡蛎低聚肽的含量为40.0wt％，所述牡蛎低聚肽中分子量≤1000Da的多肽占牡蛎低聚肽的84.5wt％。
实施例3：复合物微胶囊(2#)的制备(含葛根提取物、枳椇子提取物和姜黄素)
称取纯水10kg，依次加入麦芽糊精0.2kg、葛根提取物0.4kg、枳椇子提取物0.2kg和姜黄素0.1kg，搅拌均匀，混合液经喷雾干燥得到含葛根提取物、枳椇子提取物、姜黄素的复合物微胶囊(2#)0.85kg。取所得复合物微胶囊(2#)进行检测，结果为：以复合微胶囊(2#)总质量计算，葛根提取物的含量为44.5wt％，姜黄素的含量为9.8wt％，枳椇子提取物的含量为22.1wt％。
实施例4：复合物微胶囊(3#)的制备(含牡蛎肽粉、葛根提取物和枳椇子提取物)
取清洗后牡蛎肉10kg，粉碎后加入到100L的反应釜中，以料液比1:3加入30kg水，调pH至7，加入动物蛋白酶0.2kg，搅拌均匀升温至50℃反应6小时，反应结束后升温至90℃，灭活酶10分钟，冷却降温至室温，反应料液经离心机离心后所得滤液依次经陶瓷膜、卷式膜(2000Da)过滤，滤液经单效浓缩至浓缩液约15kg，加入麦芽糊精0.2kg，葛根提取物0.4kg，枳椇子提取物0.2kg，搅拌溶解，混合液经喷雾干燥得到复合物微胶囊(3#)1.2kg。取所得复合物微胶囊(3#)进行检测，结果为：以复合物微胶囊(3#)的总质量计算，葛根提取物的含量为32.5wt％，枳椇子提取物的含量为16.7wt％，牡蛎低聚肽的含量为18.3wt％，牡蛎低聚肽中分子量≤1000Da的多肽占牡蛎低聚肽的82.5wt％。
实施例5：复合物微胶囊(4#)的制备(含牡蛎肽粉、葛根提取物、枳椇子提取物和姜黄素)
取清洗后牡蛎肉10kg，粉碎后加入到100L的反应釜中，以料液比1:3加入30kg水，调pH至7，加入动物蛋白酶0.2kg，搅拌均匀升温至50℃反应6小时，反应结束后升温至90℃，灭活酶10分钟，冷却降温至室温，反应料液经离心机离心后所得滤液依次经陶瓷膜、卷式膜(2000Da)过滤，滤液经单效浓缩至浓缩液约15kg，加入麦芽糊精0.2kg，葛根提取物0.4kg、枳椇子提取物0.2kg和姜黄素0.1kg，搅拌均匀，混合液经喷雾干燥得到复合物微胶囊(4#)1.3kg。取所得牡蛎肽粉复合物微胶囊进行检测，结果为：以复合物微胶囊(4#)的总质量计算，葛根提取物的含量为30.8wt％，枳椇子提取物的含量为15.4wt％，姜黄素的含量为7.5wt％，牡蛎低聚肽的含量为17.2wt％，牡蛎低聚肽中分子量≤1000Da的多肽占牡蛎低聚肽的83.7wt％。
实施例6：牡蛎肽粉及其复合物微胶囊对皮质酮引起的PC-12细胞损伤的保护作用
取未分化的PC-12细胞以含5％胎牛血清，10％马血清，和1％双抗的RPMI 1640培养基培养。为考察牡蛎肽对PC-12细胞的保护作用，实验设计六组：
正常对照组：不加皮质酮和微胶囊；
模型组：加入400μM皮质酮(CORT)；
1#组：加入400μM皮质酮和100μg/mL牡蛎肽粉微胶囊(1#)；
2#组：加入400μM皮质酮和100μg/mL复合物微胶囊(2#)；
3#组：加入400μM皮质酮和100μg/mL复合物微胶囊(3#)；
4#组：加入400μM皮质酮和100μg/mL复合物微胶囊(4#)。
取96孔板，PC-12细胞按每孔1×104个细胞铺板，24h后，除去培养基，将细胞在无血清培养基中继续培养，并分别与上述分组中所述加入物质共孵育，24h后，每孔分别加入10μL CCK-8试剂,37℃孵育2h后,测定每孔在450nm处的OD值。每组各设6个复孔,取各组平均OD值。按以下公式计算PC-12细胞的细胞活力：细胞活力(％)＝(A实验孔-A空白孔)/(A对照孔-A空白孔)×100％，结果如图1。
由图1实验结果可知，模型组中，400μM皮质酮给药使PC-12细胞活力明显下降，而1#组、2#组、3#组、4#组中的微胶囊均能使PC-12细胞活力得到显著提高，且复合物微胶囊(4#)细胞活力提高尤为显著。可见，本发明所提供的牡蛎肽粉及其复合物微胶囊均可以有效保护皮质酮引起的PC-12细胞损伤，其中，含牡蛎肽粉、葛根提取物、枳椇子提取物和姜黄素的复合物微胶囊(4#)具有最优的保护效果。因此，牡蛎肽粉及其复合物微胶囊具有显著的神经保护功能。
实施例7：牡蛎肽粉提高免疫力作用
1、牡蛎肽粉对小鼠脾细胞增殖作用
(1)实验方法
将小鼠脱臼处死，立即置于75％酒精中浸泡5分钟，无菌取脾，于PBS中清洗2遍，置于盛有4℃预冷PBS的200目细胞筛中，用5ml注射器内芯研磨，研磨后透过细胞筛的即为脾细胞悬液。于1500r/min，4℃离心5min，弃上清；加入3ml Tris-NH4Cl溶液混匀，于1500r/min，4℃离心5min，弃上清，加入1640RPMI-FBS液重悬细胞，稍静置，转移上清液到新的离心管，以4～5x106/ml、200ul/孔铺96孔板，2h后加入待测样品及阳性药ConA和LPS处理，46h后，以1:10的比例加入CCK8(20ul/200ul)，2h后检测OD450nm吸光度，620nm为参比波长。
(2)实验结果
表1牡蛎肽粉对小鼠淋巴细胞增殖的影响
与对照组比较，***p<0.001
实验结果表明牡蛎肽粉可以显著的促进脾淋巴细胞的增殖。
2、牡蛎肽粉的中性红吞噬的功能
(1)实验方法
中性红法是通过巨噬细胞对中性红的吞噬量来衡量细胞的吞噬能力。
用含10％胎牛血清的DMEM培养基培养小鼠巨噬细胞(Raw264.7)，调整细胞浓度，将其接种于96孔细胞培养板中，使得细胞浓度为2×104个/孔，加入不同浓度牡蛎粉及阳性药LPS，以空白培养基为对照。培养24小时之后吸去培养基，用PBS洗涤多余的培养基，加入0.33％中性红，37℃下，5％CO2孵育30min，PBS洗净多余中性红，加细胞裂解液(无水乙醇：冰醋酸＝1:1，体积比)，震荡10-15mim后，在酶标仪上540nm处测吸光度值，通过吸光值的大小评价样品促进巨噬细胞吞噬中性红能力。
吞噬率＝OD样品组/OD空白组。
表2牡蛎肽粉对巨噬细胞(Raw264.7)吞噬中性红能力的影响
与对照组比较，*p<0.05,***p<0.001
实验结果表明牡蛎肽粉增加了小鼠巨噬细胞吞噬中性红的能力。
3、小鼠免疫器官增重功能
(1)实验方法
实验动物采用Balb/C小鼠(雄性，SPF级)，每组10只动物，适应性饲养五天后，分成四组：正常对照组、免疫低下模型组、牡蛎粉低剂量及高剂量组；免疫低下模型组采用隔日腹腔注射地塞米松，40mg/kg/d,连续10次,建立小鼠免疫低下模型，正常对照组腹腔注射生理盐水。首次腹腔注射地塞米松次日，开始灌胃给予牡蛎粉样品，给药21天，正常组、模型组给予同体积的水。给药结束后，称小鼠体重，取胸腺及脾脏称重，计算胸腺及脾脏指数。
(2)实验结果
表3牡蛎肽粉对小鼠免疫器官的影响(n＝10)
***p<0.001vs.阴性；#p<0.05，###p<0.001vs.模型
实验结果表明牡蛎肽粉增加了免疫力低下小鼠免疫器官的重量。
结论：以上三个指标提示，制备的牡蛎肽粉有提高免疫力作用。
实施例8：牡蛎肽粉及其复合物微胶囊的解酒肝保护作用
(1)实验方法
本实验采用急性酒精损伤的方法评价样品是否具有解酒、保肝的功效，实验数据采用SPSS19.0软件进行统计处理，各组数据通过t-检验分析进行组间比较。
72只SPF级雄性昆明小鼠检疫合格后转入饲养室，明暗交替(12h:12h)饲养，温度23±2℃，湿度55±5％，自由饮食，适应性喂养5天后，随机分为6组，分别为：阴性对照组(不给药也不给予酒精)，模型组，1#组(以300mg/kg的给药量给药复合物微胶囊(1#))，2#组(以300mg/kg的给药量给药复合物微胶囊(2#))，3#组(以300mg/kg的给药量给药复合物微胶囊(3#))、4#组(以300mg/kg的给药量给药复合物微胶囊(4#))。各给药组给予相应药物预防，模型组给予等量纯水，给药30min后，模型组与给药组灌胃给予56％酒精，剂量为15ml/kg，给酒后，观察小鼠在2h内每30min的醉酒率及2h内总醉酒率，观察小鼠给酒后死亡率。
(2)实验结果
表3：牡蛎肽粉及其复合物微胶囊对小鼠醉酒率及死亡率的影响
实验结果表明：牡蛎肽粉及其复合物微胶囊具有降低小鼠2h内总醉酒率及死亡率等作用，提示牡蛎肽粉及其复合物具有解酒肝保护作用，其中，含牡蛎肽粉、葛根提取物和枳椇子提取物的复合物微胶囊(3#)具有较好的解酒肝保护作用，相比单独使用牡蛎肽粉微胶囊(1#)，单独使用含葛根提取物、枳椇子提取物和姜黄素的复合物微胶囊(2#)，能显著降低醉酒率和死亡率；含牡蛎肽粉、葛根提取物、枳椇子提取物和姜黄素的复合物微胶囊(4#)具有最好的解酒肝保护作用，相比单独使用牡蛎肽粉微胶囊(1#)，单独使用含葛根提取物、枳椇子提取物和姜黄素的复合物微胶囊(2#)，能显著降低总醉酒率和死亡率；相比含牡蛎肽粉、葛根提取物和枳椇子提取物的复合物微胶囊(3#)，能显著降低总醉酒率。
本发明的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明内。
Claims (10)
1.一种组合物，其包括：（a）姜黄素、葛根提取物和枳椇子提取物；或者葛根提取物和枳椇子提取物，和（b）牡蛎肽粉；所述牡蛎肽粉含45.0wt%-60.0wt%的牡蛎低聚肽和5.0wt%-12.0wt%的牡蛎多糖；
以牡蛎低聚肽的总质量计算，所述牡蛎低聚肽中含分子量小于或等于1000Da的肽的含量为70wt%-85wt%；
以组合物的总质量计算，所述牡蛎肽粉的含量为30.0wt-40.0wt%，或者所述牡蛎低聚肽的含量为16.0wt%-19.0wt%；
以组合物的总质量计算，所述姜黄素的含量为6.0wt%-8.0wt%；所述葛根提取物的含量为28.0wt%-32.0wt%；所述枳椇子提取物的含量为15.0wt%-16.0wt%；
所述葛根提取物的制备方法包括：称取一定量的葛根，以重量比葛根:纯水=1:20加入纯水，于90-95℃条件下提取2 h，过滤；往滤渣中加入同比例纯水，于85-90℃条件下二次提取1 h，过滤，合并两次滤液，浓缩至近干，冻干，得到葛根提取物；
所述枳椇子提取物的制备方法包括：称取一定量的枳椇子，以重量比枳椇子:纯水=1:50加入纯水，于90-95℃条件下提取2 h，过滤；往滤渣中加入同比例纯水，于85-90℃条件下二次提取1 h，过滤，合并两次滤液，浓缩至近干，冻干，得到枳椇子提取物。
2.根据权利要求1所述的组合物，所述牡蛎肽粉的制备方法包括：
（1）取牡蛎肉，搅碎，与水混合，加酶，调节pH，酶解反应，灭酶，离心或过滤，得酶解滤液；
（2）所述酶解滤液依次经过陶瓷膜、截留分子量为2000Da的卷式膜分离纯化，得到含分子量低于2000Da的肽的酶解液；
（3）浓缩酶解液至酶解液的固形物含量为5wt%-30wt%，喷雾干燥，得到所述牡蛎肽粉。
3.根据权利要求1所述的组合物，所述组合物的制备方法包括：
（1）取牡蛎肉，搅碎，与水混合，加酶，调节pH，酶解反应，灭酶，离心或过滤，得酶解滤液；
（2）所述酶解滤液依次经过陶瓷膜、截留分子量为2000Da的卷式膜分离纯化，得到含分子量低于2000Da的肽的酶解液；
（3）浓缩酶解液至酶解液的固形物含量为5wt%-30wt%；再加入姜黄素、葛根提取物、枳椇子提取物和壁材，喷雾干燥，得到所述组合物。
4.根据权利要求2-3任一项所述的组合物，所述酶包括选自碱性蛋白酶、风味蛋白酶、动物蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶和胃蛋白酶中的至少一种。
5.根据权利要求3所述的组合物，所述壁材包括选自阿拉伯胶、明胶、麦芽糊精、环糊精、壳聚糖和海藻酸钠中的至少一种。
6.根据权利要求2-3任一项所述的组合物，所述调节pH为调节pH至2-9；所述酶解反应的反应温度为40-60℃；所述酶解反应的反应时间为1-10小时。
7.根据权利要求3所述的组合物，所述酶解液中固形物与姜黄素的重量比为1:0.01-1:0.2；和/或所述酶解液中固形物与葛根提取物的重量比为1:0.5-1:3；和/或所述酶解液中固形物与枳椇子提取物的重量比为1:0.1-1:2。
8.根据权利要求3所述的组合物，所述酶解液中固形物与壁材的重量比为1:0.25-1:5。
9.一种权利要求1-8任一项所述的组合物在制备提高免疫力、神经保护或解酒的产品中的用途。
10.一种权利要求1-8任一项所述的组合物在制备改善抑郁症状的药物中的用途。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111061124.7A CN113712205B (zh) | 2021-09-10 | 2021-09-10 | 一种牡蛎肽粉组合物及其制备方法与应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111061124.7A CN113712205B (zh) | 2021-09-10 | 2021-09-10 | 一种牡蛎肽粉组合物及其制备方法与应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113712205A CN113712205A (zh) | 2021-11-30 |
| CN113712205B true CN113712205B (zh) | 2024-02-06 |
Family
ID=78683161
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111061124.7A Active CN113712205B (zh) | 2021-09-10 | 2021-09-10 | 一种牡蛎肽粉组合物及其制备方法与应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113712205B (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113332314B (zh) * | 2021-06-23 | 2023-06-02 | 广西云康健健康管理有限公司 | 一种牡蛎壳肉酶解物及其在制备治疗抑郁症的药物中的应用 |
| CN114395603A (zh) * | 2022-02-11 | 2022-04-26 | 福建大众健康生物科技有限公司 | 一种用复合酶水解牡蛎蛋白制备小分子肽的方法 |
| CN114747768A (zh) * | 2022-05-19 | 2022-07-15 | 大闽食品（漳州）有限公司 | 一种包含pqq的保肝组合物 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105200105A (zh) * | 2015-09-10 | 2015-12-30 | 烟台源力德海洋生物有限公司 | 一种牡蛎蛋白的保肝护肝肽制剂的制备方法 |
| KR101919839B1 (ko) * | 2018-07-06 | 2018-11-19 | 주식회사 한미양행 | 귀뚜라미 효소처리물을 함유하는 간보호 또는 숙취해소용 조성물 |
| CN110916197A (zh) * | 2019-12-16 | 2020-03-27 | 荣成市海洋绿洲生物科技有限公司 | 一种具有护肝功能的牡蛎肽粉及其制备方法和应用 |
| CN110946280A (zh) * | 2019-12-09 | 2020-04-03 | 董金龙 | 一种解酒护肝健脑的*酒肽及解酒护肝健脑*酒肽保健食品 |
| CN111772196A (zh) * | 2020-07-20 | 2020-10-16 | 陕西沐亿康美生物科技有限公司 | 一种辅助性保护化学性肝损伤的食品组合物及其制备方法 |
| CN112586698A (zh) * | 2020-12-03 | 2021-04-02 | 山东腾贵医药有限公司 | 一种保肝护肝组合物及制备方法 |
-
2021
- 2021-09-10 CN CN202111061124.7A patent/CN113712205B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105200105A (zh) * | 2015-09-10 | 2015-12-30 | 烟台源力德海洋生物有限公司 | 一种牡蛎蛋白的保肝护肝肽制剂的制备方法 |
| KR101919839B1 (ko) * | 2018-07-06 | 2018-11-19 | 주식회사 한미양행 | 귀뚜라미 효소처리물을 함유하는 간보호 또는 숙취해소용 조성물 |
| CN110946280A (zh) * | 2019-12-09 | 2020-04-03 | 董金龙 | 一种解酒护肝健脑的*酒肽及解酒护肝健脑*酒肽保健食品 |
| CN110916197A (zh) * | 2019-12-16 | 2020-03-27 | 荣成市海洋绿洲生物科技有限公司 | 一种具有护肝功能的牡蛎肽粉及其制备方法和应用 |
| CN111772196A (zh) * | 2020-07-20 | 2020-10-16 | 陕西沐亿康美生物科技有限公司 | 一种辅助性保护化学性肝损伤的食品组合物及其制备方法 |
| CN112586698A (zh) * | 2020-12-03 | 2021-04-02 | 山东腾贵医药有限公司 | 一种保肝护肝组合物及制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113712205A (zh) | 2021-11-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113712205B (zh) | 一种牡蛎肽粉组合物及其制备方法与应用 | |
| KR101343038B1 (ko) | 발효 옥수수 단백질 가수분해물 및 이의 제조방법 | |
| CN101485789A (zh) | 金花茶多糖含片及其生产方法 | |
| JP5658479B2 (ja) | 脂肪減少等の活性を示す組成物 | |
| CN102648751B (zh) | 一种具有解酒护肝功能工程米及其制备方法 | |
| CN111040044B (zh) | 一种蛹虫草胞内多糖及制备方法及其在调节肠道菌群中的应用 | |
| Chen et al. | The immunomodulatory effects of Carapax Trionycis ultrafine powder on cyclophosphamide‐induced immunosuppression in Balb/c mice | |
| CN111685286A (zh) | 一种具有降血脂功能的牡蛎肽及其制备方法和应用 | |
| CN104783185B (zh) | 一种具有增强免疫力、缓解体力疲劳功能的保健食品及其制备方法 | |
| CN101664180A (zh) | 一种具有保健功效的营养复合剂及其制备方法 | |
| CN102940650B (zh) | 用于解酒的蜂胶乙醇提取物、制备方法及在生产肠溶片中的应用 | |
| CN112586698A (zh) | 一种保肝护肝组合物及制备方法 | |
| CN102048169A (zh) | 一种增强儿童免疫力的保健食品及其制备方法 | |
| CN103054906B (zh) | 用于解酒的蜂胶乙醇提取物、制备方法及在生产口含片中的应用 | |
| CN109806285A (zh) | 一种具有降尿酸活性的辣木叶提取物及其制备方法与应用 | |
| CN101940284B (zh) | 甘薯提取物及其应用 | |
| JP2002275087A (ja) | 抗糖尿病剤および糖尿病予防食品 | |
| Estiasih et al. | Increasing health benefit of wild yam (Dioscorea hispida) tuber by red mold (Angkak) Fermentation | |
| CN113768028A (zh) | 一种从高粱黑粉菌中分离蛋白的方法及其应用 | |
| CN107267585A (zh) | 一种具有保肝作用的富硒玉米小肽及其制备方法 | |
| WO2020052073A1 (zh) | 一种促进肝脏脂质代谢、抗炎降酶的提取物及其制备方法 | |
| CN111686139A (zh) | 一种松子壳水提物降血脂类药物或降血脂保健品中的应用 | |
| CN110613089A (zh) | 具有降血脂、改善胃肠道功能的组合物及其制备方法 | |
| CN109907242B (zh) | 一种基于微囊化红曲降低内脏脂肪的组合物及其制备方法 | |
| CN108354086A (zh) | 含有贻贝多糖对虾诱食剂的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |