CN113670914B - 一种油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素检测方法 - Google Patents
一种油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113670914B CN113670914B CN202110953443.2A CN202110953443A CN113670914B CN 113670914 B CN113670914 B CN 113670914B CN 202110953443 A CN202110953443 A CN 202110953443A CN 113670914 B CN113670914 B CN 113670914B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- vaccine
- bacterial endotoxin
- water phase
- detection
- endotoxin content
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 title claims abstract description 66
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 28
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 title abstract description 16
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 title abstract description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 38
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 29
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 25
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims abstract description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical group CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 9
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 8
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 6
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 6
- 238000011082 depyrogenation Methods 0.000 claims description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 3
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 claims description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 abstract description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 19
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 7
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 4
- 238000010008 shearing Methods 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 241000239218 Limulus Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 238000005375 photometry Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000011265 semifinished product Substances 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 208000001953 Hypotension Diseases 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000034486 Multi-organ failure Diseases 0.000 description 1
- 208000010718 Multiple Organ Failure Diseases 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- 206010051379 Systemic Inflammatory Response Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010044248 Toxic shock syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000650 Toxic shock syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 210000003837 chick embryo Anatomy 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 208000009190 disseminated intravascular coagulation Diseases 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000036543 hypotension Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 208000029744 multiple organ dysfunction syndrome Diseases 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 230000010355 oscillation Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
- G01N21/82—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a precipitate or turbidity
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/38—Diluting, dispersing or mixing samples
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/38—Diluting, dispersing or mixing samples
- G01N2001/386—Other diluting or mixing processes
- G01N2001/387—Other diluting or mixing processes mixing by blowing a gas, bubbling
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Plasma & Fusion (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明提供一种油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素检测方法，是将待检测的疫苗样品加入破乳剂后，振荡后离心；再将下层水相和沉淀重悬后，取重悬的水相溶液进行内毒素含量检测。本发明的方法首次明确指出细菌内毒素存在于破乳离心后产生的沉淀中，将沉淀重悬后再检测水相中细菌内毒素的含量即为疫苗中真实的细菌内毒素含量；从而保证了检测方法的准确性。
Description
技术领域
本发明属于油乳剂灭活疫苗检测领域，具体涉及一种油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素检测方法。
背景技术
热原是指临床上能引起哺乳动物发热反应的物质，细菌内毒素是热原的一种，由革兰氏阴性菌产生一种可滤过的、热稳定的代谢副产物，是革兰氏阴性菌细胞壁的产物，是高分子量脂多糖(LPS)的复合物。
细菌在生活状态时不释放细菌内毒素，只有当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时，才表现其毒性。内毒素大量进入血液就会引起发热反应(热原反应)。
在机体内，细菌内毒素可激活单核/巨噬细胞、中性粒细胞、内皮细胞及补体系统，先后诱导产生大量肿瘤坏死因子、白介素等细胞因子，引起内皮细胞的损伤和屏障功能的改变，导致全身性炎症反应综合征和脓毒症发生；严重者可导致低血压、中毒性休克、弥漫性血管内凝血、急性呼吸窘迫综合征、多器官功能衰竭甚至死亡。因此，细菌内毒素是目前医药工业中最普遍和最主要的外源性热原，在GMP条件下控制细菌内毒素污染就等于控制热原污染。
目前细菌内毒素检查法主要包含有凝胶法和光度法。凝胶法是通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理进行限度检测或半定量检测内毒素的方法。光度法又分为动态法和终点法，其中动态法分为动态浊度法和动态显色法，终点法分为终点浊度法和终点显色法。
但因油乳剂灭活疫苗检测细菌内毒素需先进行破乳，使其油水分离后检测水相中的细菌内毒素含量。但申请人发现，直接取澄清水相检测细菌内毒素会导致检测结果与实际结果存在偏差。
发明内容
本发明的目的是提供一种油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素检测方法，能够准确的检测疫苗中的细菌内毒素含量；从而弥补现有技术的不足。
本发明所提供的油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素检测方法，是将待检测的疫苗样品加入破乳剂后，振荡后离心；再将下层水相和沉淀重悬后，取重悬的水相溶液进行内毒素含量检测；
所述的破乳剂，作为实施例的具体记载，为含有20％吐温-80的乙醇溶液；
所述的含有20％吐温-80的乙醇溶液与待检测的疫苗样品的体积比，优选为2:1；
所述的离心，是在3000rpm离心15分钟；
本发明的方法，是在动态试管检测仪中检测内毒素的含量。
本发明的方法，一种具体的操作步骤如下：
1)向无热原的15ml玻璃离心管中加入待检测的疫苗样品和破乳剂，用1800rpm的旋涡振荡器剧烈震荡1分钟，然后将离心管置于3000rpm的台式离心机中离心15分钟；
2)将步骤1)中破乳后的疫苗用除热原的枪头穿过上层油将下层水相吹打重悬，吸取重悬均匀的水相进行适当倍数稀释，加入动态试管检测仪中进行检测；
3)通过动态试管检测仪的数据分析系统得出疫苗中细菌内毒素含量。
本发明的方法通过将沉淀重悬后再检测水相中细菌内毒素的含量，从而使检测的结果与疫苗中真实的细菌内毒素含量值更接近；从而有效的解决了现有技术中检测疫苗成品内毒素含量准确率不高的问题。
具体实施方式
油乳剂灭活疫苗中的细菌内毒素能使动物发生发热等副反应，严重的甚至造成动物死亡，因此对油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素进行检测是非常有必要的，但是截止目前为止没有一种能准确检测出油乳剂灭活疫苗细菌内毒素的方法。在现有技术中，采用破乳剂将疫苗破乳后，直接取澄清水相检测细菌内毒素，导致测定的疫苗成品的内毒素含量与检测的半成品的细菌内毒素含量不一致。
而本发明使用含有20％吐温-80的乙醇溶液作为破乳剂，将破乳剂与疫苗按比例震荡混匀，通过离心使破乳后的疫苗油水分离；并且离心后将底部的沉淀与水相溶液重悬均匀后，再进行检测；从而能够测出真实的细菌内毒素含量。
本发明采用破乳剂将疫苗破乳，将水相中的沉淀重悬，采用光度法——动态浊度法，检测水相中细菌内毒素含量，与半成品的细菌内毒素含量一致。
对本发明方法的所使用的仪器、试剂和方法进行如下的记载：
1、主要仪器
动态试管检测仪，型号：LKL064-03-045，生产厂家：Lab Kinetics,LLC；漩涡振荡器，型号：MS3，生产厂家：BioCote；台式离心机，型号：L600，生产厂家：长沙高新技术产业开发区湘仪离心机仪器有限公司；剪切机，型号：T25，生产厂家：IKA。
2、试剂
细菌内毒素工作标准品，效价：10EU/支，湛江安度斯生物有限公司；鲎试剂，规格：10～0.03EU/ml，湛江安度斯生物有限公司；细菌内毒素检查用水，规格：50ml/瓶，湛江安度斯生物有限公司。
下面结合实施例对本发明的细菌内毒素检验方法过程进行详细的描述。
实施例1：检测用于制备油乳剂灭活疫苗的细菌中的内毒素含量
(1)注射用白油样品细菌内毒素含量检测
取2ml道达尔注射用白油(批号：1148790014317)，加入2ml细菌内毒素检查用水，1400rpm旋涡振荡1分钟，取下层水相按动态浊度法进行检测，结果表明检测用水中细菌内毒素含量＜0.063EU/ml。
(2)4种灭活病毒的鸡胚尿囊液样品细菌内毒素含量检测
将4种尿囊液分别用细菌内毒素检查用水稀释100倍，按动态浊度法进行检测，细菌内毒素含量如下表1所示：
表1：4种尿囊液细菌内毒素检测结果表
| 序号 | 尿囊液病毒种类 | 细菌内毒素检测结果(EU/ml) |
| 1 | H7N9 H7-Re3株 | 25.514 |
| 2 | H5N1 Re-11株 | 13.572 |
| 3 | H5N1 Re-12株 | 80.935 |
| 4 | H5N1 Re-11株 | 6.723 |
实施例2：检测油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素含量
(1)油乳剂灭活疫苗的制备
将上述4种尿囊液按照2:1:2:1的比例混合制成水相，取水相300ml待用；取450ml道达尔注射用白油(批号：1148790014317)作为油相；先将油相倒入烧杯中，将剪切机转速调至8000rpm，再缓慢倒入尿囊液，倒完后再将剪切机转速调至12000rpm，用手将烧杯逆时针缓慢摇动，剪切3.5分钟既得乳化后疫苗。
(2)油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素含量检测
向无热原的15ml玻璃离心管中分别加入待检测的疫苗样品2ml和4ml 20％吐温80乙醇溶液，用1800rpm的旋涡振荡器剧烈震荡1分钟，然后将离心管置于3000rpm的台式离心机中离心15分钟；
取油水分离后水相中澄清液体，按常规的动态浊度法进行检测，细菌内毒素含量＜3.750EU/ml；
采用本发明的方法，将破乳后的疫苗用除热原的枪头穿过上层油相将下层水相吹打重悬，将重悬均匀的水相按动态浊度法进行检测，细菌内毒素含量为38.872EU/ml。
(3)检测结果如表2所示。
表2：制备的油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素含量检测表
总结如下：由于4种尿囊液按照2:1:2:1比例混合，混合后的尿囊液的细菌内毒素含量为38.866EU/ml，而白油中细菌内毒素含量可以忽略，故疫苗理论上细菌内毒素含量应为38.866EU/ml；
按已有方法检测破乳后澄清水相的细菌内毒素含量＜3.750EU/ml；
按本发明方法将水相中沉淀重悬后水相中细菌内毒素含量为38.872EU/ml，实测值与理论值基本一致，因此本发明方法检测出疫苗中细菌内毒素含量更准确。
Claims (6)
1.一种油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素检测方法，其特征在于，所述的方法是将待检测的疫苗样品加入破乳剂后，振荡后离心；再将下层水相和沉淀重悬后，取重悬的水相溶液进行内毒素含量检测。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的破乳剂为含有20％吐温-80的乙醇溶液。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的含有20％吐温-80的乙醇溶液与待检测的疫苗样品的体积比为2:1。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的离心是在3000rpm离心15分钟。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法是在动态试管检测仪中检测内毒素的含量。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：
1)向无热原的15ml玻璃离心管中加入待检测的疫苗样品和破乳剂，用1800rpm的旋涡振荡器剧烈震荡1分钟，然后将离心管置于3000rpm的台式离心机中离心15分钟；
2)将步骤1)中破乳后的疫苗用除热原的枪头穿过上层油将下层水相吹打重悬，吸取重悬均匀的水相进行适当倍数稀释，加入动态试管检测仪中进行检测；
3)通过动态试管检测仪的数据分析系统得出疫苗中细菌内毒素含量。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110953443.2A CN113670914B (zh) | 2021-08-19 | 2021-08-19 | 一种油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110953443.2A CN113670914B (zh) | 2021-08-19 | 2021-08-19 | 一种油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113670914A CN113670914A (zh) | 2021-11-19 |
| CN113670914B true CN113670914B (zh) | 2024-03-08 |
Family
ID=78543863
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110953443.2A Active CN113670914B (zh) | 2021-08-19 | 2021-08-19 | 一种油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113670914B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115078347B (zh) * | 2022-05-31 | 2024-06-18 | 中国食品药品检定研究院 | 一种检测二棕榈酰磷脂酰胆碱细菌内毒素的方法 |
Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5616328A (en) * | 1991-11-15 | 1997-04-01 | Pfizer Inc. | Method of preparing gram-negative bacterial vaccines |
| CN1788823A (zh) * | 2005-10-17 | 2006-06-21 | 南开大学 | 适用于生物脱硫后形成的油水乳状液的破乳方法 |
| CN104258404A (zh) * | 2014-09-11 | 2015-01-07 | 长春长生生物科技股份有限公司 | 疫苗冻干保护剂、冻干水痘减毒活疫苗及其制备方法 |
| CN104762362A (zh) * | 2015-02-15 | 2015-07-08 | 上海市食品药品检验所 | 一种细胞系法检测热原的方法及其试剂盒 |
| CN106596875A (zh) * | 2016-12-08 | 2017-04-26 | 申联生物医药（上海）股份有限公司 | 一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法 |
| CN108042798A (zh) * | 2017-12-22 | 2018-05-18 | 吉林冠界生物技术有限公司 | 一种悬浮细胞生产重组禽流感病毒灭活疫苗的方法 |
| CN108181470A (zh) * | 2017-09-09 | 2018-06-19 | 广东医科大学 | 一种检测黄疸血样中内毒素和(1-3)-β-D-葡聚糖含量的试剂盒及检测方法 |
| CN108707626A (zh) * | 2018-04-10 | 2018-10-26 | 中国科学院微生物研究所 | 一种可检测热原的单克隆细胞系的制备方法 |
| RU2691413C1 (ru) * | 2017-12-26 | 2019-06-13 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный технический университет имени Н.Э. Баумана (национальный исследовательский университет)" (МГТУ им. Н.Э. Баумана) | Способ определения бактериального эндотоксина в биологических жидкостях |
| CN110794140A (zh) * | 2019-11-15 | 2020-02-14 | 浙江华海药业股份有限公司 | 一种难溶注射剂细菌内毒素的检测方法 |
| WO2020083261A1 (zh) * | 2018-10-21 | 2020-04-30 | 厦门鲎试剂生物科技股份有限公司 | 一种用革兰氏阴性细菌感染快速检测脓毒病的新方法 |
| CN111228859A (zh) * | 2020-02-28 | 2020-06-05 | 山东信得科技股份有限公司 | 一种重组蛋白油乳剂亚单位疫苗的破乳方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US10987416B2 (en) * | 2016-12-28 | 2021-04-27 | Beijing Minhai Biotechnology Co., Ltd. | Purification of recombinant EV71 virus-like particle and method for preparing vaccine thereof |
-
2021
- 2021-08-19 CN CN202110953443.2A patent/CN113670914B/zh active Active
Patent Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5616328A (en) * | 1991-11-15 | 1997-04-01 | Pfizer Inc. | Method of preparing gram-negative bacterial vaccines |
| CN1788823A (zh) * | 2005-10-17 | 2006-06-21 | 南开大学 | 适用于生物脱硫后形成的油水乳状液的破乳方法 |
| CN104258404A (zh) * | 2014-09-11 | 2015-01-07 | 长春长生生物科技股份有限公司 | 疫苗冻干保护剂、冻干水痘减毒活疫苗及其制备方法 |
| CN104762362A (zh) * | 2015-02-15 | 2015-07-08 | 上海市食品药品检验所 | 一种细胞系法检测热原的方法及其试剂盒 |
| CN106596875A (zh) * | 2016-12-08 | 2017-04-26 | 申联生物医药（上海）股份有限公司 | 一种油佐剂疫苗的快速定性定量检测方法 |
| CN108181470A (zh) * | 2017-09-09 | 2018-06-19 | 广东医科大学 | 一种检测黄疸血样中内毒素和(1-3)-β-D-葡聚糖含量的试剂盒及检测方法 |
| CN108042798A (zh) * | 2017-12-22 | 2018-05-18 | 吉林冠界生物技术有限公司 | 一种悬浮细胞生产重组禽流感病毒灭活疫苗的方法 |
| RU2691413C1 (ru) * | 2017-12-26 | 2019-06-13 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московский государственный технический университет имени Н.Э. Баумана (национальный исследовательский университет)" (МГТУ им. Н.Э. Баумана) | Способ определения бактериального эндотоксина в биологических жидкостях |
| CN108707626A (zh) * | 2018-04-10 | 2018-10-26 | 中国科学院微生物研究所 | 一种可检测热原的单克隆细胞系的制备方法 |
| WO2020083261A1 (zh) * | 2018-10-21 | 2020-04-30 | 厦门鲎试剂生物科技股份有限公司 | 一种用革兰氏阴性细菌感染快速检测脓毒病的新方法 |
| CN110794140A (zh) * | 2019-11-15 | 2020-02-14 | 浙江华海药业股份有限公司 | 一种难溶注射剂细菌内毒素的检测方法 |
| CN111228859A (zh) * | 2020-02-28 | 2020-06-05 | 山东信得科技股份有限公司 | 一种重组蛋白油乳剂亚单位疫苗的破乳方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 电导率法研究W/O微乳液中Pd纳米微粒的化学破乳负载;周永华;叶红齐;钟宏;;过程工程学报;20081215(第06期);全文 * |
| 禽流感油乳佐剂疫苗质量快速检测方法的建立;司兴奎;陈建红;张济培;谢海燕;杨德胜;;中国家禽;20070720(第14期);全文 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113670914A (zh) | 2021-11-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Desai et al. | Separation, identification, and characterization of microorganisms by capillary electrophoresis | |
| CN113670914B (zh) | 一种油乳剂灭活疫苗的细菌内毒素检测方法 | |
| Kitikoon et al. | Hemagglutinin inhibition assay with swine sera | |
| BRPI0200585B1 (pt) | processo para a identificação e contagem de células biológicas em uma amostra de sangue. | |
| US8765397B2 (en) | Cell dispersion method, cell dispersing agent and cell measurement method | |
| CN110487706A (zh) | 一种人外周血淋巴细胞的检测方法 | |
| CN103627638A (zh) | 一种用于裂解红细胞的组合物、红细胞裂解试剂及应用 | |
| TW201348707A (zh) | 一種輸血前配合試驗之試劑組及其試驗方法 | |
| CN111323581A (zh) | 一种流感血凝抑制试验检测方法 | |
| Williams et al. | Macromolecular Weights Determined by Direct Particle Counting. II. The Weight of the Tobacco Mosaic Virus Particle1 | |
| CN106086208A (zh) | 用于检测食品中副溶血性弧菌和整合子的试剂盒与方法 | |
| CN103424294B (zh) | 一种检测猪外周血和脾脏淋巴细胞膜表面分子的样品制备试剂盒及其制备方法 | |
| Doubrovski et al. | Ultrasonic wave action upon the red blood cell agglutination in vitro | |
| CN102192848A (zh) | 一种用凝集素芯片同时分析甲型流感病毒亚型及其毒力的方法 | |
| EP1742037A1 (en) | Process to adjust the particle size in the preparation of colloidal gold | |
| EP0844482A2 (en) | Process for enhancing the aggregation and/or agglutination of erythrocytes prior to centrifugation | |
| Liu et al. | Development of a SYBR-based real-time PCR to detect rabbit hemorrhagic disease virus (RHDV) and analyze its tissue distribution in experimentally infected rabbits | |
| CN105203724A (zh) | 一种检查布洛芬原料细菌内毒素的方法 | |
| CN1287152C (zh) | 定量检测人绒毛膜促性腺激素胶体金冻干品及制备方法 | |
| CN104569398B (zh) | 检测乙氧基喹啉的酶联免疫试剂盒及其应用 | |
| CN101560560B (zh) | 一种检测鼠疫菌的基因液相芯片及其检测方法 | |
| CN116430039A (zh) | 一种用于检测新型冠状病毒的受体试剂及其应用 | |
| JPH01245155A (ja) | 分析方法 | |
| CN104865379B (zh) | 一种抗链球菌溶血素“o”检测方法 | |
| CN1526073A (zh) | 液态烃燃料中微生物的检测 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB02 | Change of applicant information | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Country or region after: China Address after: 266000 No.21 Dongnan Road, Hongdao street, Hongdao Economic Zone, Qingdao, Shandong Province Applicant after: YEBIO BIOENGINEERING Co.,Ltd. OF QINGDAO Address before: 266109 No.260 Heyuan Road, high tech Zone, Chengyang District, Qingdao City, Shandong Province Applicant before: YEBIO BIOENGINEERING Co.,Ltd. OF QINGDAO Country or region before: China |
|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |