CN113663821B - 一种富血小板纤维蛋白凝胶的分离方法 - Google Patents

一种富血小板纤维蛋白凝胶的分离方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了医疗器械领域内的一种富血小板纤维蛋白凝胶的分离方法，用一次性无菌专用离心分装管路采集静脉全血，用离心机对采集有静脉全血的一次性无菌专用离心分装管路进行离心，用一次性无菌专用离心分装管路将离心后的红细胞和血清分离存放，血清在一次性无菌专用离心分装管路中自动凝结成富血小板纤维蛋白凝胶。本发明可解决现有技术中制备富血小板纤维蛋白凝胶的技术缺乏的问题。

Description

一种富血小板纤维蛋白凝胶的分离方法
技术领域
本发明涉及医疗器械领域，具体涉及一种富血小板纤维蛋白凝胶的分离方法。
背景技术
至今，血小板浓缩制品主要有第1代富血小板血浆(PRP)、第2代富血小板纤维蛋白凝胶(PRF)、第3代浓缩生长因子(CGF)。其中富血小板血浆制备技术发展最早，配套设备及耗材相对较多；第三代浓缩生长因子只需要在第一代富血小板血浆产品的基础上促凝释放生长因子。富血小板纤维蛋白凝胶(PRF)：2001年由Choukroun等学者提出的第2代富血小板浓缩物，主要由聚合的纤维蛋白、白细胞、血小板、循环干细胞及细胞因子构成，不用抗凝剂，制备程序简单，富血小板纤维蛋白凝聚是一个缓慢自然的聚合过程，和天然凝血过程较为相似，制备获取的纤维蛋白凝胶分子结构和天然血凝块中的纤维蛋白十分相似。富血小板纤维蛋白产生的纤维蛋白主要为立体网状，属于三分子结构，凝胶相对疏松，弹性较好，且孔隙大，方便细胞增殖和迁徙，所以在促进伤口愈合及组织修复方面价值较为理想，为一种富含大量生长因子、血小板、白细胞的血液制品，其内包含的白细胞免疫学价值十分的高。可压制成膜状、块状或剪成碎片等方式供不同组织缺损使用，在修复组织中能够为细胞生长、迁徙提供支架和空间，降低局部炎症反应，促进软硬组织的再生修复。
但是制备PRF由于在采集血液时未使用阻止血小板聚集的药剂，在凝集成胶时也未添加促凝药物，与PRP及CGF有较大的差别，制备技术及配套耗材缺乏。
发明内容
本发明意在提供一种富血小板纤维蛋白凝胶的分离方法，以解决现有技术中制备富血小板纤维蛋白凝胶的技术缺乏的问题。
为达到上述目的，本发明的基础技术方案如下：一种富血小板纤维蛋白凝胶的分离方法，用一次性无菌专用离心分装管路采集静脉全血，用离心机对采集有静脉全血的一次性无菌专用离心分装管路进行离心，用一次性无菌专用离心分装管路将离心后的红细胞和富血小板血清分离存放，富血小板血清在一次性无菌专用离心分装管路中自动凝结成富血小板纤维蛋白凝胶。
本方案的原理及优点是：实际应用时，一种情况是提前制备使用，用全血离心管采集静脉全血，用离心机进行离心处理，红细胞沉降在全血离心管下端，血小板混悬在上层血清中、与白细胞均在红细胞上方，通过导管将上层血清(即富含血小板血清)导入连接管中，热合导管，静置一段时间后凝胶自动形成，完成制备，可根据使用需要取出裁剪使用。另一种情况是实时制备使用，全血离心管离心处理后，将连接管与堵头连接，将上层富血小板血清转移到分装管中，取下连接管后与分装管一起在手术台上实时凝集成型后压模使用。
进一步，离心过程以50g、22℃离心15min。作为优选离心条件，这样可对采集的静脉全血充分有效的离心，可使全血中≥80％的血小板上浮并混悬于上层血清中，将红细胞与含有血小板的血清有效分离。
进一步，一次性无菌专用离心分装管路包括离心管路，离心管路包括全血离心管和尾管，全血离心管开口端连接有堵头，尾管连接有与堵头可拆卸连接的导管，用全血离心管进行静脉全血的采集和离心，用尾管分离盛装全血离心管中离心出来的富血小板血清制备富血小板纤维蛋白凝胶。作为优选全血离心管用于采集静脉全血并进行离心，堵头用于对全血离心管开口进行封闭，导管用于将分离出的富血小板血清导出到尾管中，尾管用于暂存富血小板血清即时制备富血小板纤维蛋白凝胶，可在采集静脉全血后快速便捷的制备富血小板纤维蛋白凝胶。
进一步，将富血小板血清从全血离心管经导管分离到尾管后，热合导管，静置10-15分钟富血小板纤维蛋白凝胶自动形成。作为优选这样富血小板血清与红细胞分离彻底，热合导管将尾管与全血离心管可靠分隔，富血小板血清既可与红细胞分离又可在同一套采血结构上随时转移，分离制备富血小板纤维蛋白凝胶方便快捷。
进一步，一次性无菌专用离心分装管路还包括分装管路，分装管路包括分装管，分装管连接有与堵头可拆卸连接的连接管，用连接管与全血离心管的堵头连接将富血小板血清导出到分装管中，富血小板血清在分装管中即时凝集生成富血小板纤维蛋白凝胶在手术台上即时使用。作为优选通过分装管路可在富血小板血清凝固呈富血小板纤维蛋白凝胶前转移，便于直接在手术台等洁净度要求高的条件下使用。
进一步，尾管和分装管上一体成型有锯齿状撕裂纹，沿锯齿状撕裂纹撕开尾管或分装管，取出形成的富血小板纤维蛋白凝胶裁剪成需要的形状即刻使用。作为优选这样在尾管和分装管完成对富血小板纤维蛋白凝胶的制备后，通过锯齿状撕裂纹可便捷的在尾管和分装管产生撕裂口，进而可便捷的将富血小板纤维蛋白凝胶取出使用。
进一步，连接管的长度为20-30cm，连接管上夹持有止流夹，在将血清从全血离心管中导出到分装管的过程中用止流夹控制富血小板血清的流动。作为优选这样更便于对富血小板血清的导出控制。
本发明具有以下优势：
1.采集简便，微创，采用一次性无菌专用离心分装管路；耗材成本低，不会额外增加患者负担。
2.采集环境要求不高，普通‖类环境即可。
3.设备需求灵活，适用于任何具有适宜离心力的离心机。
4.制备步骤简化，一次离心即达成。与自体PRP相比较，患者使用等待时间显著缩短，30min内可用到产品，扩大了患者适用人群，特别是门诊患者提供了便利。
5.耗材有专用分装配套负压产品管，产品直接在手术台上形成，无菌技术及产品质量跟贴合术者需求，手术台上使用有保证。
6.可分装、可冰冻、可分次使用。
7.该配套管路同样适宜于制备PRP,只需在管路中加入相应剂量的血液保存液，制备方法相通。
附图说明
图1为本发明实施例中全血离心管与尾管连接示意图；
图2为本发明实施例中分装管的结构示意图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式进一步详细说明：
说明书附图中的附图标记包括：全血离心管1、尾管2、分装管3、导管4、连接管5、堵头6、锯齿状撕裂纹7、硬质穿刺头8、止流夹9。
实施例基本如附图1、图2所示：一种富血小板纤维蛋白凝胶的分离方法，用一次性无菌专用离心分装管路采集静脉全血，用离心机对采集有静脉全血的一次性无菌专用离心分装管路进行离心，以50g、22℃离心15min，用一次性无菌专用离心分装管路将离心后的红细胞和富血小板血清分离存放，富血小板血清在一次性无菌专用离心分装管路中自动凝结成富血小板纤维蛋白凝胶。
一次性无菌专用离心分装管路包括全血离心管1、尾管2和分装管3，全血离心管1为负压无菌软管，全血离心管1开口端插接有堵头6，堵头6为橡胶塞，尾管2连接有与堵头6可拆卸连接的导管4，导管4一体成型在尾管2上，分装管3连接有与堵头6可拆卸连接的连接管5，连接管5的长度为20-30cm，连接管5中部夹持有止流夹9，连接管5一体成型在分装管3上，尾管2、分装管3、导管4和连接管5均为软管。导管4和连接管5的端部均热压连接有硬质穿刺头8，通过硬质穿刺头8可穿刺连接在堵头6上。尾管2和分装管3上均设有开口结构，开口结构为一体成型在导管4、分装管3上的锯齿状撕裂纹7。
一种情况是提前制备使用，用全血离心管1采集静脉全血，用离心机进行离心处理，红细胞沉降在全血离心管1下端，血小板混悬在上层血清中、与白细胞均在红细胞上方，通过导管4将上层富血小板血清导入连接管5中，热合导管4，静置10-15分钟富血小板纤维蛋白凝胶自动形成，完成制备，可根据使用需要取出裁剪使用。另一种情况是实时制备使用，全血离心管1离心处理后，将连接管5与堵头6连接，取下止流夹9将上层血清转移到分装管3中，取下连接管5后与分装管3一起在手术台上实时凝集成型后压模使用，适合在手术台等洁净度要求高的条件下使用。全血离心管1、尾管2、分装管3、导管4、连接管5等均采用一次性塑料材料无菌化处理，耗材成本低，不会额外增加患者负担，采集环境要求不高，普通‖类环境即可，设备需求灵活，适用于任何具有适宜离心力的离心机。制备步骤简化，一次离心即达成，与自体PRP相比较，采用本装置制备富血小板纤维蛋白凝胶更加高效，患者使用等待时间显著缩短，30min内可用到产品，扩大了患者适用人群，特别是为门诊患者提供了便利。
以上所述的仅是本发明的实施例，方案中公知的具体结构及特性等常识在此未作过多描述。应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明结构的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本申请要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准，说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。

Claims (3)

1.一种富血小板纤维蛋白凝胶的分离方法，其特征在于：用一次性无菌专用离心分装管路采集静脉全血，用离心机对采集有静脉全血的一次性无菌专用离心分装管路进行离心，用一次性无菌专用离心分装管路将离心后的红细胞和血清分离存放，血清在一次性无菌专用离心分装管路中自动凝结成富血小板纤维蛋白凝胶；
所述一次性无菌专用离心分装管路包括离心管路，离心管路包括全血离心管和尾管、分装管路，全血离心管开口端连接有堵头，尾管连接有与堵头可拆卸连接的导管；分装管路包括分装管，分装管连接有与堵头可拆卸连接的连接管，用连接管与全血离心管的堵头连接将富血小板血清导出到分装管中，富血小板血清在分装管中凝集生成富血小板纤维蛋白凝胶；连接管上夹持有止流夹，在将富血小板血清从全血离心管中导出到分装管的过程中用止流夹控制富血小板血清的流动；分装管上一体成型有锯齿状撕裂纹，沿锯齿状撕裂纹撕开分装管，取出形成的富血小板纤维蛋白凝胶裁剪成需要的形状即刻使用；
提前制备使用时，用全血离心管进行静脉全血的采集和离心，用尾管分离盛装全血离心管中离心出来的富血小板血清制备富血小板纤维蛋白凝胶；将富血小板血清从全血离心管经导管分离到尾管后，热合导管，静置10-15分钟，富血小板纤维蛋白凝胶自动形成；尾管上一体成型有锯齿状撕裂纹，沿锯齿状撕裂纹撕开尾管，取出形成的富血小板纤维蛋白凝胶裁剪成需要的形状即刻使用；
实时制备使用时，全血离心管离心处理后，将连接管与堵头连接，取下止流夹将上层血清转移到分装管中，取下连接管后与分装管一起实时凝集成型后压模使用。
2.根据权利要求1所述的一种富血小板纤维蛋白凝胶的分离方法，其特征在于：所述离心过程以50g、22℃离心15min，使血小板上浮于上层血清中形成富血小板血清。
3.根据权利要求2所述的一种富血小板纤维蛋白凝胶的分离方法，其特征在于：所述连接管的长度为20-30cm。
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