CN113576992B - 一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分，所述的皮肤修复活性成分为积雪草总苷，所述的积雪草总苷由通过纤维素酶解，大豆卵磷脂辅助，超声提取，并与胆固醇、多相嵌段纳米聚合物、维生素E醋酸酯二次乳化，经滤膜挤压，得多嵌段积雪草总苷脂质体，同时提供了一种由多嵌段积雪草总苷脂质体与芦荟、红参、白薇、金黄洋甘菊、马齿苋、甘草酸二钾、水解小麦蛋白等其他组分的制备的积雪草护肤液。该提取方法简便，提取率高；所制备的多嵌段积雪草总苷脂质体，常温下，不易泄露，稳定性好；所制备的积雪草护肤液对于轻度痤疮皮肤有显著的修复和消炎功效，并且能够激活皮肤生长因子，调节皮肤细胞代谢，促进皮肤从深层次修护，改善皮肤环境。

Description

一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分
技术领域
本发明涉及植物提取领域，特别是涉及一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分。
背景技术
积雪草为伞形科积雪草属植物，全草入药，是我国最早应用的中药之一，中医中药采用积雪草内服和外用已有两千多年的历史，最早记载于《神农本草经》。2015年版《中国药典》将积雪草收载为常用中药材，记载其具有清热利湿、解毒消肿的功效，主要用于湿热黄疸、中暑腹泻、痈肿疮毒、跌打损伤等的治疗。现代药理学研究发现，积雪草主要含有多种α-香树脂醇型的三萜成分，积雪草苷类物质为积雪草的主要活性成分，积雪草苷类物质具有显著的促进创面愈合、抑制瘢痕形成作用。用于化妆品中，积雪草活性成分可以增加皮肤表皮的抵抗力，具有抗发炎、镇静、解毒、消肿的效果，赋予肌肤弹性，强化肌肤的柔软度，可以延缓老化。但由于积雪草苷的分子量大，水溶性与脂溶性均较差，外用时不易通过皮肤屏障，导致吸收少，生物利用度较低。
近年来，对积雪草结构鉴定和活性研究取得诸多进展，但有很多问题尚待解决，如其主要活性成分在天然产物中含量偏低、提取利用率低等。目前积雪草总苷的提取方法主要有回流法、超声波法、微波法等。研究表明，以超声提取、索氏回流和加热回流3种提取方法提取积雪草总苷，发现超声提取积雪草总苷质量分数最高，提取率为0.427％，但提取效率仍不高；以药材与75％乙醇的料液比为1∶20时，超声提取积雪草总苷含量最高，为1.25％，但此提取方法相关要求较多。因此，积雪草中提取积雪草总苷的方法仍需探究改进。
发明内容
针对上述情况，本发明之目的在于提供一种积雪草总苷的提取方法，提取方便，提取率高，同时将该提取积雪草总苷应用于护肤品中，皮肤吸收快，修复效果好。
其解决的技术方案是：
一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分，所述的皮肤修复活性成分为积雪草总苷，所述的积雪草总苷由以下步骤提取：S1，取积雪草粉末，先加入纤维素酶，再加入乙醇溶液，45-55℃下600-800rpm搅拌加热40-60min，然后置于100℃下水浴3-5min将酶灭活，得积雪草酶解液；S2，称取大豆卵磷脂加入到积雪草酶解液中，70-80℃下20KHz-30KHz的频率超声提取30-40min，减压过滤，活性炭脱色，然后减压蒸馏除去乙醇，得积雪草提取物；S3，将积雪草提取物用磷酸盐缓冲溶液稀释1倍，然后滴加到500-700rpm速度搅拌的胆固醇、多相嵌段纳米聚合物、维生素E醋酸酯、二氯甲烷的混合液中，滴加完成后，1000-1200rpm搅拌20-30min，形成W/O初乳液；S4，再将W/O初乳液加入到磷酸盐缓冲溶液中，以同样转速搅拌后，于28-30℃下旋转蒸发并真空干燥，除去少量的二氯甲烷，得W/O/W复乳；S5，将W/O/W复乳500W超声1-2min后，经注射器挤压通过0.45µm的聚碳酸酯滤膜，得多嵌段积雪草总苷脂质体。
进一步的，所述的积雪草粉末:纤维素酶:乙醇溶液:大豆卵磷脂的质量体积比为：5-7g:1-1.2g:40-55mL:1-1.7g。
进一步的，所述的乙醇溶液中乙醇的含量为70%；所述的维素酶的酶活力为40000U/g。
进一步的，所述步骤S3中的积雪草提取物:胆固醇:多相嵌段纳米聚合物:维生素E醋酸酯:二氯甲烷的质量体积比为：10-14mL:0.1-0.3g:0.5-0.7g:0.2-0.4g:10-14mL；所述步骤S4中的W/O初乳液:磷酸盐缓冲溶液的质量体积比为：12-16mL:8-10mL。
进一步的，所述的多相嵌段纳米聚合物的制备方法如下：（1）N2，0℃下，将引发剂AIBN 50mg、４-氰酸-4[（十二烷基硫烷基硫羰基）硫烷基］戊酸150mg、N-4-乙烯基苯-N，N-二乙基胺 5g加入到1，4-二氧六环50mL中，升温至70℃，搅拌反应20h后迅速降温，终止反应，然后将反应液滴入在55%的乙醇60mL中，得沉淀物，用55%的乙醇洗涤沉淀物，加入乙醚10mL溶解，真空干燥，得粉末状P-VEA；（2）N2，0℃下，将引发剂AIBN 50mg、４-氰酸-4[（十二烷基硫烷基硫羰基）硫烷基］戊酸150mg、甲基丙烯酸叔丁酯8.2g加入到60mL甲苯中，升温至80℃，反应9h后迅速降温使反应终止，然后将反应液滴入在90%的甲醇60mL中，得沉淀物，用90%的甲醇洗涤沉淀物，真空干燥，得粉末状P-tBMA；（3），N2，0℃下，将P-VEA 2g、P-tBMA4g、AIBN 1.2g、苯乙烯3.1g，加入到95%的乙醇50mL，置于70℃下反应24小时，然后迅速降温终止反应，将反应液滴入正己烷80mL中，得到沉淀物，离心洗涤，于40℃下真空干燥，即得淡黄色的粉末状的多相嵌段纳米聚合物。
进一步的，所述的多嵌段积雪草总苷脂质体在护肤品中的应用如下：A相：水45-55份、甘油8-10份、尿囊素0.2-0.3份、透明质酸钠0.05-0.1份、烟酰胺0.5-1份、泛醇0.5-1份、1,2-己二醇0.4-0.6份、羟苯甲酯0.1-0.3份、苯氧乙醇0.5-1份、氯苯甘醚0.8-1份；B相：芦荟提取物2-6份、红参提取物0.01-0.05份、白薇提取物1-2份、金黄洋甘菊提取物1-2份、马齿苋提取物2-3份、水溶性神经酰胺0.08-0.12份、甘草酸二钾0.01-0.12份、多嵌段积雪草总苷脂质体3-5份；C相：香精0.0004-0.0006份、甜菜碱2-4份、海藻胶0.2-0.3份、水解小麦蛋白提取物0.2-0.8份。
进一步的，所述的多嵌段积雪草总苷脂质体在护肤品中的添加步骤如下：准确称取A相中各成分的量，混合在一起，高速均质5-10min，分散均匀，升温到80-85℃，保温20-30min；将B相原料按比例混合均匀，升温到75-80℃，然后加入到A相中乳化，乳化温度80-85℃，80℃下高速均质3-5min，800-1000rpm搅拌10min，降温至40-45℃；最后加入C相，高速均质3-5min，800-1000rpm搅拌均匀，检测合格后出料、灌装，得积雪草护肤液。
针对积雪草总苷在醇水中超声提取效率不高的问题，本申请采用先用纤维素酶酶解积雪草粉中的纤维素，然后加入大豆卵磷脂后进行超声提取，大豆卵磷脂的主要成分磷脂酰胆碱为两性表面活性剂，同时也是生物细胞膜的重要组成成分，其分子中含有磷酸型阴离子和季铵盐型阳离子的极性部分，以及2个非极性长碳氢链疏水基团，使其具有极强的增溶乳化能力，加入大豆卵磷脂后，可增加积雪草总苷的溶解度，积雪草酶解后，通过超声将积雪草总苷释放出来，不断被大豆卵磷脂包裹，最终得到积雪草脂质体，即积雪草提取物，既可以大大增加积雪草总苷提取率，同时又能保护积雪草总苷不被氧化失活。然而，磷脂易被氧化，氧化后会降低膜的流动性，增加坚硬性和负电荷数量，使膜变得易脆易破，不仅会导致被包封的药物泄漏，甚至使脂质体发生聚集，产生沉淀和毒性。此外，脂质体的膜，随着外界温度的升高，会出现由“胶晶”态转变为“液晶”态的变化过程，并伴随有膜的横切面增加、厚度减少、流动性增加等现象，最终使活性成分流失。
为了解决积雪草总苷脂质体氧化易流失并增强积雪草总苷作用时间的问题，本申请通过加入AIBN为引发剂，４-氰酸-4[（十二烷基硫烷基硫羰基）硫烷基］戊酸为分散聚合剂，制备了以聚苯乙烯为核心，以P-VEA和P-tBMA为突起微区的多相嵌段纳米粒子，４-氰酸-4[（十二烷基硫烷基硫羰基）硫烷基］戊酸为两亲性嵌段聚合物，聚合物P-VEA能在极性溶剂中发生LCST型相转变，聚合物P-tBMA能在极性溶剂中发生UCST型相转变，多相嵌段纳米粒子可以根据溶剂极性和温度的改变重新转变为核-冠状的混合冠层的纳米粒子，将积雪草提取物、胆固醇、多相嵌段纳米聚合物、维生素E醋酸酯混合，制备成W/O初乳液，积雪草提取物通过多相嵌段纳米聚合物，并经过胆固醇加固，形成W/O/W复乳，最终将积雪草总苷包裹于多相嵌段纳米脂质体内，形成多嵌段积雪草总苷脂质体。
多嵌段积雪草总苷脂质体在应用于于护肤品中，仍具有较高的稳定性，并且其中的多嵌段的P-VEA和P-tBMA可以提供多个微区段，吸收护肤品中红参提取物、白薇提取物、金黄洋甘菊提取物、马齿苋提取物、决明子提取物等相似极性的活性物质，多嵌段积雪草总苷脂质体常温时为固体纳米颗粒，当作用于人体皮肤时，会随着水份的流失和温度的变化，较小极性的P-tBMA舒展开来，形成凝胶液体，同时释放出积雪草总苷和其它活性物质，并于大豆磷脂一起作用于皮肤，在大豆磷脂的协助下，能够快速通过皮肤表层，促进成纤维细胞和表皮细胞合成层黏连蛋白、整合素、胶原蛋白、纤维连接蛋白和透明质酸等基质修护所需要的成分，分泌至细胞外空间，参与基质的修护，激活皮肤生长因子，调节皮肤细胞代谢，促进皮肤从深层次修护，从而改善皮肤环境，达到优异的护肤功效。
由于以上技术方案的采用，本发明与现有技术相比具有如下优点；
本发明的一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分为积雪草总苷，积雪草总苷的提取方法通过大豆卵磷脂和酶解-超声联用的方法提取积雪草总苷，提取率高，方法简便；
本发明通过将所提取的积雪草提取物通过多相嵌段纳米聚合物修饰，胆固醇加固、最终获得多嵌段积雪草总苷脂质体，常温下，不易泄露，稳定性好。
本发明将所制备的多嵌段积雪草总苷脂质体与其它植物活性成分以及辅料共同制备的积雪草护肤液对于轻度痤疮皮肤有显著的修复和消炎功效，并能够促进生成纤维细胞和表皮细胞修护所需要的成分，分泌至细胞外空间，激活皮肤生长因子，调节皮肤细胞代谢，促进皮肤从深层次修护，长期改善皮肤环境。
具体实施方式
实施例1
一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分，所述的皮肤修复活性成分为积雪草总苷，所述的积雪草总苷由以下步骤提取：S1，取积雪草粉末5g，先加入纤维素酶1g，再加入70%的乙醇溶液40mL，45℃下600rpm搅拌加热40min，然后置于100℃下水浴3min将酶灭活，得积雪草酶解液；S2，称取大豆卵磷脂1g加入到积雪草酶解液中，70℃下20KHz的频率超声提取30min，减压过滤，活性炭脱色，然后减压蒸馏除去乙醇，得积雪草提取物；S3，将积雪草提取物10mL用磷酸盐缓冲溶液稀释1倍，然后滴加到500rpm速度搅拌的胆固醇0.1g、多相嵌段纳米聚合物0.5g、维生素E醋酸酯0.2g、二氯甲烷10mL的混合液中，滴加完成后，1000rpm搅拌20min，形成W/O初乳液；S4，再将W/O初乳液12mL加入到8mL磷酸盐缓冲溶液中，以同样转速搅拌后，于28℃下旋转蒸发并真空干燥，除去少量的二氯甲烷，得W/O/W复乳；S5，将W/O/W复乳500W超声1min后，经注射器挤压通过0.45µm的聚碳酸酯滤膜，得多嵌段积雪草总苷脂质体。
所述的维素酶的酶活力为40000U/g。
所述的多相嵌段纳米聚合物的制备方法如下：（1）N2，0℃下，将引发剂AIBN50mg、４-氰酸-4[（十二烷基硫烷基硫羰基）硫烷基］戊酸150mg、N-4-乙烯基苯-N，N-二乙基胺5g加入到1，4-二氧六环50mL中，升温至70℃，搅拌反应20h后迅速降温，终止反应，然后将反应液滴入在55%的乙醇60mL中，得沉淀物，用55%的乙醇洗涤沉淀物，加入乙醚10mL溶解，真空干燥，得粉末状P-VEA；（2）N2，0℃下，将引发剂AIBN50mg、４-氰酸-4[（十二烷基硫烷基硫羰基）硫烷基］戊酸150mg、甲基丙烯酸叔丁酯8.2g加入到60mL甲苯中，升温至80℃，反应9h后迅速降温使反应终止，然后将反应液滴入在90%的甲醇60mL中，得沉淀物，用90%的甲醇洗涤沉淀物，真空干燥，得粉末状P-tBMA；（3）N2，0℃下，将P-VEA2g、P-tBMA4g、AIBN1.2g、苯乙烯3.1g，加入到95%的乙醇50mL，置于70℃下反应24小时，然后迅速降温终止反应，将反应液滴入正己烷80mL中，得到沉淀物，离心洗涤，于40℃下真空干燥，即得淡黄色的粉末状的多相嵌段纳米聚合物；所得的P-VEA的聚合度与P-tBMA聚合度相似。
所述的多嵌段积雪草总苷脂质体在护肤品中的应用如下：A相：水45份、甘油8份、尿囊素0.2份、透明质酸钠0.05份、烟酰胺0.5份、泛醇0.5份、1,2-己二醇0.4份、羟苯甲酯0.1份、苯氧乙醇0.5份、氯苯甘醚0.8份；B相：芦荟提取物2份、红参提取物0.01份、白薇提取物1份、金黄洋甘菊提取物1份、马齿苋提取物2份、水溶性神经酰胺0.08份、甘草酸二钾0.01份、多嵌段积雪草总苷脂质体3份；C相：香精0.0004份、甜菜碱2份、海藻胶0.2份、水解小麦蛋白提取物0.2份。
所述的多嵌段积雪草总苷脂质体在护肤品中的添加步骤如下：准确称取A相中各成分的量，混合在一起，高速均质5min，分散均匀，升温到80℃，保温20min；将B相原料按比例混合均匀，升温到75℃，然后加入到A相中乳化，乳化温度80℃，80℃下高速均质3min，800rpm搅拌10min，降温至40℃；最后加入C相，高速均质3min，800rpm搅拌均匀，检测合格后出料、灌装，得积雪草护肤液。
实施例2
一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分，所述的皮肤修复活性成分为积雪草总苷，所述的积雪草总苷由以下步骤提取：S1，取积雪草粉末6g，先加入纤维素酶1.1g，再加入70%的乙醇溶液50mL，50℃下700rpm搅拌加热50min，然后置于100℃下水浴4min将酶灭活，得积雪草酶解液；S2，称取大豆卵磷脂1.3g加入到积雪草酶解液中，75℃下25KHz的频率超声提取35min，减压过滤，活性炭脱色，然后减压蒸馏除去乙醇，得积雪草提取物；S3，将积雪草提取物12mL用磷酸盐缓冲溶液稀释1倍，然后滴加到600rpm速度搅拌的胆固醇0.2g、多相嵌段纳米聚合物0.6g、维生素E醋酸酯0.3g、二氯甲烷112mL的混合液中，滴加完成后，1100rpm搅拌25min，形成W/O初乳液；S4，再将W/O初乳液14mL加入到9mL磷酸盐缓冲溶液中，以同样转速搅拌后，于29℃下旋转蒸发并真空干燥，除去少量的二氯甲烷，得W/O/W复乳；S5，将W/O/W复乳500W超声2min后，经注射器挤压通过0.45µm的聚碳酸酯滤膜，得多嵌段积雪草总苷脂质体。
所述的维素酶的酶活力为40000U/g。
所述的多相嵌段纳米聚合物的制备方法如下：（1）N2，0℃下，将引发剂AIBN50mg、４-氰酸-4[（十二烷基硫烷基硫羰基）硫烷基］戊酸150mg、N-4-乙烯基苯-N，N-二乙基胺5g加入到1，4-二氧六环50mL中，升温至70℃，搅拌反应20h后迅速降温，终止反应，然后将反应液滴入在55%的乙醇60mL中，得沉淀物，用55%的乙醇洗涤沉淀物，加入乙醚10mL溶解，真空干燥，得粉末状P-VEA；（2）N2，0℃下，将引发剂AIBN50mg、４-氰酸-4[（十二烷基硫烷基硫羰基）硫烷基］戊酸150mg、甲基丙烯酸叔丁酯8.2g加入到60mL甲苯中，升温至80℃，反应9h后迅速降温使反应终止，然后将反应液滴入在90%的甲醇60mL中，得沉淀物，用90%的甲醇洗涤沉淀物，真空干燥，得粉末状P-tBMA；（3）N2，0℃下，将P-VEA2g、P-tBMA4g、AIBN1.2g、苯乙烯3.1g，加入到95%的乙醇50mL，置于70℃下反应24小时，然后迅速降温终止反应，将反应液滴入正己烷80mL中，得到沉淀物，离心洗涤，于40℃下真空干燥，即得淡黄色的粉末状的多相嵌段纳米聚合物；所得的P-VEA的聚合度与P-tBMA聚合度相似。
所述的多嵌段积雪草总苷脂质体在护肤品中的应用如下：A相：水50份、甘油9份、尿囊素0.3份、透明质酸钠0.08份、烟酰胺0.8份、泛醇0.8份、1,2-己二醇0.5份、羟苯甲酯0.2份、苯氧乙醇0.8份、氯苯甘醚0.9份；B相：芦荟提取物4份、红参提取物0.03份、白薇提取物2份、金黄洋甘菊提取物1.5份、马齿苋提取物3份、水溶性神经酰胺0.1份、甘草酸二钾0.05份、多嵌段积雪草总苷脂质体4份；C相：香精0.0005份、甜菜碱3份、海藻胶0.2份、水解小麦蛋白提取物0.5份。
所述的多嵌段积雪草总苷脂质体在护肤品中的添加步骤如下：准确称取A相中各成分的量，混合在一起，高速均质8min，分散均匀，升温到82℃，保温25min；将B相原料按比例混合均匀，升温到78℃，然后加入到A相中乳化，乳化温度82℃，80℃下高速均质4min，900rpm搅拌10min，降温至42℃；最后加入C相，高速均质4min，9000rpm搅拌均匀，检测合格后出料、灌装，得积雪草护肤液。
实施例3
一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分，所述的皮肤修复活性成分为积雪草总苷，所述的积雪草总苷由以下步骤提取：S1，取积雪草粉末7g，先加入纤维素酶1.2g，再加入70%的乙醇溶液55mL， 55℃下800rpm搅拌加热60min，然后置于100℃下水浴5min将酶灭活，得积雪草酶解液；S2，称取大豆卵磷脂1.7g加入到积雪草酶解液中， 80℃下30KHz的频率超声提取40min，减压过滤，活性炭脱色，然后减压蒸馏除去乙醇，得积雪草提取物；S3，将积雪草提取物14mL用磷酸盐缓冲溶液稀释1倍，然后滴加到700rpm速度搅拌的胆固醇0.3g、多相嵌段纳米聚合物0.7g、维生素E醋酸酯0.4g、二氯甲烷14mL的混合液中，滴加完成后，1200rpm搅拌30min，形成W/O初乳液；S4，再将W/O初乳液16mL加入到10mL磷酸盐缓冲溶液中，以同样转速搅拌后，于30℃下旋转蒸发并真空干燥，除去少量的二氯甲烷，得W/O/W复乳；S5，将W/O/W复乳500W超声2min后，经注射器挤压通过0.45µm的聚碳酸酯滤膜，得多嵌段积雪草总苷脂质体。
所述的维素酶的酶活力为40000U/g。
所述的多相嵌段纳米聚合物的制备方法如下：（1）N2，0℃下，将引发剂AIBN50mg、４-氰酸-4[（十二烷基硫烷基硫羰基）硫烷基］戊酸150mg、N-4-乙烯基苯-N，N-二乙基胺5g加入到1，4-二氧六环50mL中，升温至70℃，搅拌反应20h后迅速降温，终止反应，然后将反应液滴入在55%的乙醇60mL中，得沉淀物，用55%的乙醇洗涤沉淀物，加入乙醚10mL溶解，真空干燥，得粉末状P-VEA；（2）N2，0℃下，将引发剂AIBN50mg、４-氰酸-4[（十二烷基硫烷基硫羰基）硫烷基］戊酸150mg、甲基丙烯酸叔丁酯8.2g加入到60mL甲苯中，升温至80℃，反应9h后迅速降温使反应终止，然后将反应液滴入在90%的甲醇60mL中，得沉淀物，用90%的甲醇洗涤沉淀物，真空干燥，得粉末状P-tBMA；（3）N2，0℃下，将P-VEA2g、P-tBMA4g、AIBN1.2g、苯乙烯3.1g，加入到95%的乙醇50mL，置于70℃下反应24小时，然后迅速降温终止反应，将反应液滴入正己烷80mL中，得到沉淀物，离心洗涤，于40℃下真空干燥，即得淡黄色的粉末状的多相嵌段纳米聚合物；所得的P-VEA的聚合度与P-tBMA聚合度相似。
所述的多嵌段积雪草总苷脂质体在护肤品中的应用如下：A相：水55份、甘油10份、尿囊素0.3份、透明质酸钠0.1份、烟酰胺1份、泛醇1份、1,2-己二醇0.6份、羟苯甲酯0.3份、苯氧乙醇1份、氯苯甘醚1份；B相：芦荟提取物6份、红参提取物0.05份、白薇提取物2份、金黄洋甘菊提取物2份、马齿苋提取物3份、水溶性神经酰胺0.12份、甘草酸二钾0.12份、多嵌段积雪草总苷脂质体5份；C相：香精0.0006份、甜菜碱4份、海藻胶0.3份、水解小麦蛋白提取物0.8份。
所述的多嵌段积雪草总苷脂质体在护肤品中的添加步骤如下：准确称取A相中各成分的量，混合在一起，高速均质10min，分散均匀，升温到85℃，保温30min；将B相原料按比例混合均匀，升温到80℃，然后加入到A相中乳化，乳化温度85℃，80℃下高速均质5min，1000rpm搅拌10min，降温至45℃；最后加入C相，高速均质5min，1000rpm搅拌均匀，检测合格后出料、灌装，得积雪草护肤液。
对比例1
S1，取积雪草粉末5g，先加入纤维素酶1g，再加入70%的乙醇溶液40mL，45℃下600rpm搅拌加热40min，然后置于100℃下水浴3min将酶灭活，得积雪草酶解液；S2，将积雪草酶解液于70℃下20KHz的频率超声提取30min，减压过滤，活性炭脱色，然后减压蒸馏除去乙醇，得积雪草提取物。
所述的维素酶的酶活力为40000U/g。
对比例2
将实施例1中所述的积雪草总苷的提取步骤中的多相嵌段纳米聚合物替换成温敏PECE水凝胶，其余步骤不变。
对比例3
将实施例1中所述的胆固醇去掉，其余步骤不变。
对比例4
将实施例1中护肤品成分中所添加的多嵌段积雪草总苷脂质体替换成同样含量的积雪草总苷，在护肤品中的添加步骤不变。
实验例1
试验以积雪草苷和羟基积雪草苷的提取率来表示积雪草总苷提取率：（1）对照品贮备液的制备：分别取积雪草苷和羟基积雪草苷加甲醇制成每1mL含积雪草苷300μg、羟基积雪草苷300μg的溶液，离心（12000r/min，离心半径为6.032cm，下同）15min，取上清液即得对照品贮备液；（2）供试品溶液的制备：精密称取积雪草苷提取物，加甲醇超声（功率：300W，频率：40KHz）溶解，制备成含积雪草总苷为5mg/mL的溶液，12000r/min离心15min，取上清液即得供试品溶液；（3）色谱条件：色谱柱：ZORBAXSB-C18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-2mmol/Lβ-环糊精溶液（25∶75，V/V）；流速：1.0mL/min；检测波长：205nm；柱温：30℃；进样量：10μL；（4）精密吸取积雪草苷和羟基积雪草苷贮备液，加甲醇摇匀制得含积雪草苷和羟基积雪草苷质量浓度均为15、30、60、90、105、120、240μg/mL的混合对照品溶液，进样测定。以混合对照品质量浓度为横坐标（x）、峰面积为纵坐标（y），得二者的回归方程y＝2.2814x（r＝0.9996，n＝7）、y＝1.911x（r＝0.9994，n＝7）。结果表明，积雪草苷和羟基积雪草苷检测质量浓度线性范围均为15～240μg/mL；（5）分别取同实施例1-3和对比例1的积雪草提取物，加甲醇制成供试品，进样6次，测定峰面积，确定积雪草苷质量分数和羟基积雪草苷质量分数，计算积雪草总苷提取率：积雪草总苷提取率＝[积雪草苷质量分数（g/g）+羟基积雪草苷质量分数（g/g）]×提取物的质量（g）/积雪草质量（g）×100％，所得数据如表1；
Figure 841011DEST_PATH_IMAGE001
从以上结果可以看出，添加大豆卵磷脂大大提高了积雪草粉末中积雪草总苷的提取率，这是由于大豆卵磷脂的加入，使得积雪草总苷在溶剂中的溶解度增大，同时酶解纤维素和超声，使积雪草总苷的释放更充分，因而积雪草总苷的提取率得到了提高。
实验例2
（1）透析袋用蒸馏水加热处理后备用，精确称取实施例1-3和对比例2的多嵌段积雪草总苷脂质体100mg（平行样为3份）于一端密封好的透析袋中，另一端密封好后置于盛有250ml蒸馏水的透明塑料瓶中，拧紧瓶盖；（2）将瓶子放在集热式恒温加热磁力搅拌器上，100rpm，控制温度使多嵌段积雪草总苷脂质体为固体时，水浴透析至透析袋内外两侧羟基积雪草苷浓度达到平衡，再用高效液相来测定透析液中MA的浓度，计算渗漏率：渗漏率=贮存后渗漏到介质中的药物量/贮存前包封的药物量×100%；然后控温使多嵌段积雪草总苷脂质体为液体，水浴透析至透析袋内外两侧羟基积雪草苷浓度达到平衡，再用高效液相来测定透析液中MA的浓度，然后计算载药量：载药量=包封于脂质体中的药物量/ (脂质体中的药物量+脂质体质量)×100%，包封率=（总药量-介质中未包入的药量）/总药量×100%，所得数据如表2；
Figure 683065DEST_PATH_IMAGE002
从表 2中可以得出，相比于温敏PECE水凝胶，本申请添加多相嵌段纳米聚合物获得的多嵌段积雪草总苷脂质体包封率有所提高、渗漏率更低，载药量相对提高；胆固醇的加入可起到加固脂质双层膜的作用，从而减少膜流动，增加脂质体的稳定性，降低渗漏率。
试验例3
临床试验：志愿者：有轻度痤疮且症状相近的20-35岁的100名志愿者，平均分配为5组(每组男10名，女10名)。组1：本申请实施例1制得的积雪草护肤液、组2：本申请实施例2制得的积雪草护肤液、组3：本申请实施例3制得的积雪草护肤液、组4：本申请对比例4制得的积雪草护肤液精华液，对照组：普通护肤液(注：即为非本发明的配方的护肤品，尤其不含芦荟提取物、红参提取物、白薇提取物、金黄洋甘菊提取物、马齿苋提取物、甘草酸二钾、多嵌段积雪草总苷脂质体、水解小麦蛋白提取物的护肤液)，使用方式：清洗痤疮周围后对痤疮周围涂抹，一天两次，全程使用20天，观察使用效果，并对比使用前的皮肤状况，得出试验数据如表4：
Figure 671749DEST_PATH_IMAGE003
从表4结果可以看出，相比于对照组，添加积雪草总苷成分可有效对抗痤疮皮肤，消除炎症，修护问题肌肤，且效果显著；相比于直接添加积雪草总苷成分，添加多嵌段积雪草总苷脂质体的积雪草护肤液对于对痤疮周围皮肤修护的有效率更高，消炎效果增加，这是由于多嵌段积雪草总苷脂质体在积雪草护肤液中利用多嵌段的P-VEA和P-tBMA可以提供多个微区段，同时包裹护肤液中多种植物提取物的活性物质，且常温时为固体纳米颗粒，稳定性好，当作用于人体皮肤时，会随着水份和温度的变化，较小极性的P-tBMA不同程度舒展开来，形成凝胶液体，同时缓慢释放出积雪草总苷和其它活性物质，并在大豆磷脂的协助下，能够快速通过皮肤表层，能够有效清除自由基，修护破裂的细胞膜和细胞壁，抑制细胞释放组胺，阻止外周神经的感觉传导从而去除各种过敏炎症，减轻皮肤刺痛、红斑的发生，缓解因痤疮护理不当而造成的皮损，并促进生成纤维细胞和表皮细胞修护所需要的成分，分泌至细胞外空间，参与基质的修护，激活皮肤生长因子，调节皮肤细胞代谢，促进皮肤从深层次修护，长期改善皮肤环境。
以上所述是结合具体实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明具体实施仅局限于此；对于本发明所属及相关技术领域的技术人员来说，在基于本发明技术方案思路前提下，所作的拓展以及操作方法、数据的替换，都应当落在本发明保护范围之内。

Claims (6)

1.一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分，其特征在于，所述的皮肤修复活性成分为多嵌段积雪草总苷脂质体，所述的多嵌段积雪草总苷脂质体由以下步骤制备：S1，取积雪草粉末，先加入纤维素酶，再加入乙醇溶液，45-55℃下600-800rpm搅拌加热40-60min，然后置于100℃下水浴3-5min将酶灭活，得积雪草酶解液；S2，称取大豆卵磷脂加入到积雪草酶解液中，70-80℃下20KHz-30KHz的频率超声提取30-40min，减压过滤，活性炭脱色，然后减压蒸馏除去乙醇，得积雪草提取物；S3，将积雪草提取物用磷酸盐缓冲溶液稀释1倍，然后滴加到500-700rpm速度搅拌的胆固醇、多嵌段纳米聚合物、维生素E醋酸酯、二氯甲烷的混合液中，滴加完成后，1000-1200rpm搅拌20-30min，形成W/O初乳液；S4，再将W/O初乳液加入到磷酸盐缓冲溶液中，以同样转速搅拌后，于28-30℃下旋转蒸发并真空干燥，除去少量的二氯甲烷，得W/O/W复乳；S5，将W/O/W复乳500W超声1-2min后，经注射器挤压通过0.45µm的聚碳酸酯滤膜，得多嵌段积雪草总苷脂质体；
所述的多嵌段纳米聚合物的制备方法如下：（1）N2，0℃下，将引发剂AIBN 50mg、４-氰酸-4[（十二烷基硫烷基硫羰基）硫烷基］戊酸150mg、N-4-乙烯基苯-N，N-二乙基胺 5g加入到1，4-二氧六环50mL中，升温至70℃，搅拌反应20h后迅速降温，终止反应，然后将反应液滴入在55%的乙醇60mL中，得沉淀物，用55%的乙醇洗涤沉淀物，加入乙醚10mL溶解，真空干燥，得粉末状P-VEA；（2）N2，0℃下，将引发剂AIBN 50mg、４-氰酸-4[（十二烷基硫烷基硫羰基）硫烷基］戊酸150mg、甲基丙烯酸叔丁酯8.2g加入到60mL甲苯中，升温至80℃，反应9h后迅速降温使反应终止，然后将反应液滴入在90%的甲醇60mL中，得沉淀物，用90%的甲醇洗涤沉淀物，真空干燥，得粉末状P-tBMA；（3）N2，0℃下，将P-VEA 2g、P-tBMA 4g、AIBN 1.2g、苯乙烯3.1g，加入到95%的乙醇50mL，置于70℃下反应24小时，然后迅速降温终止反应，将反应液滴入正己烷80mL中，得到沉淀物，离心洗涤，于40℃下真空干燥，即得淡黄色的粉末状的多嵌段纳米聚合物。
2.根据权利要求1所述的一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分，其特征在于，所述的积雪草粉末:纤维素酶:乙醇溶液:大豆卵磷脂的质量体积比为：5-7g:1-1.2g:40-55mL:1-1.7g。
3.根据权利要求1所述的一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分，其特征在于，所述的乙醇溶液中乙醇的含量为70%；所述的维素酶的酶活力为40000U/g。
4.根据权利要求1所述的一种用于爽肤水中的皮肤修复活性成分，其特征在于，所述步骤S3中的积雪草提取物:胆固醇:多嵌段纳米聚合物:维生素E醋酸酯:二氯甲烷的质量体积比为：10-14mL:0.1-0.3g:0.5-0.7g:0.2-0.4g:10-14mL；所述步骤S4中的W/O初乳液:磷酸盐缓冲溶液的质量体积比为：12-16mL:8-10mL。
5.一种包含权利要求1所述的用于爽肤水中的皮肤修复活性成分的护肤品，其特征在于，所述护肤品由以下组分组成：A相：水45-55份、甘油8-10份、尿囊素0.2-0.3份、透明质酸钠0.05-0.1份、烟酰胺0.5-1份、泛醇0.5-1份、1,2-己二醇0.4-0.6份、羟苯甲酯0.1-0.3份、苯氧乙醇0.5-1份、氯苯甘醚0.8-1份；B相：芦荟提取物2-6份、红参提取物0.01-0.05份、白薇提取物1-2份、金黄洋甘菊提取物1-2份、马齿苋提取物2-3份、水溶性神经酰胺0.08-0.12份、甘草酸二钾0.01-0.12份、多嵌段积雪草总苷脂质体3-5份；C相：香精0.0004-0.0006份、甜菜碱2-4份、海藻胶0.2-0.3份、水解小麦蛋白提取物0.2-0.8份。
6.一种包含权利要求1所述的用于爽肤水中的皮肤修复活性成分的护肤品的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：准确称取A相中各成分的量，混合在一起，高速均质5-10min，分散均匀，升温到80-85℃，保温20-30min；将B相原料按比例混合均匀，升温到75-80℃，然后加入到A相中乳化，乳化温度80-85℃，80℃下高速均质3-5min，800-1000rpm搅拌10min，降温至40-45℃；最后加入C相，高速均质3-5min，800-1000rpm搅拌均匀，检测合格后出料、灌装，得积雪草护肤液。
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