CN113499470B - 一种可视化抗菌导电敷料的制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种可视化抗菌导电敷料的制备方法及应用，该制备方法中，原料包括聚乙烯醇、硼砂、1‑乙烯基‑3‑丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵；方法包括：步骤一、得到含聚乙烯醇和硼砂的混合溶液Ⅰ；步骤二、向混合溶液Ⅰ中加入1‑乙烯基‑3‑丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵，得到混合溶液Ⅱ；步骤三、聚合反应，得到敷料预备液；步骤四、循环低温冷冻，得到可视化抗菌导电敷料。采用本发明制备方法得到的可视化抗菌导电敷料可联合外源性电刺激特异性针对慢性伤口因患者皮肤阻抗较大所带来的治疗效果不佳等问题，促进成纤维细胞增殖和迁移。

Description

一种可视化抗菌导电敷料的制备方法及应用
技术领域
本发明属于生物医用材料技术领域，具体涉及一种可视化抗菌导电敷料的制备方法及应用。
背景技术
由于具有微生物群发生率很高且中性粒细胞(PMNs)对入侵的微生物无法做出有效的应对等特性，混合伤口往往愈合速率低下，同时，由于上述慢性伤口中细菌和内毒素均可刺激炎症细胞分泌促炎细胞因子(IL-1、TNF-α)，更进一步延长炎症期。在慢性创伤的治疗方面，医疗系统和患者都面临巨大的负担。
正常皮肤具有内源性电位和经皮电流电位，皮肤受损后，会有损伤电流产生，即通过伤口通路的电流产生的横向电场。研究表明，应用外源性电刺激模拟伤口处的自然电流，可促进血液流动、增加组织氧合、促进细胞增殖和迁移、血管生成和胶原沉积来影响伤口愈合。一些研究也证明了电刺激(ES)对治疗慢性创面有积极作用。现存的外源性电刺激治疗使用位于不同位置的两个电极将电流传输到伤口组织，往往存在治疗效果有限、创面不可再生等缺陷。
当下，许多不释放抗菌剂的生物材料已被报道用于抗菌治疗，如壳聚糖、氧化石墨烯、碳纳米管、季铵化合物、稀土元素和抗菌肽。然而目前并没有一种可针对慢性伤口愈合的具有优异抗菌性、稳定性、细胞相容性和其他更适用于临床的生物特性的慢性伤口愈合用生物材料和愈合方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种可视化抗菌导电敷料的制备方法及应用。本发明的制备方法以聚乙烯醇、硼砂、1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵为原料，利用循环低温冷冻制备得到该可视化抗菌导电敷料，具有可高度贴合创面、有效保湿和吸收渗液、高电导率、高透光率、高抗菌性和高相容性的特点，可联合外源性电刺激特异性针对慢性伤口因患者皮肤阻抗较大所带来的治疗效果不佳等问题，通过促进成纤维细胞的增殖和迁移，营造创面理想再生环境，提高治疗效果。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，其特征在于，原料包括聚乙烯醇、硼砂、1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵；
所述方法包括以下步骤：
步骤一、将聚乙烯醇和硼砂溶解于水中，得到混合溶液Ⅰ；
步骤二、向步骤一所述混合溶液Ⅰ中加入1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵，得到混合溶液Ⅱ；
步骤三、氮气保护气氛中，60℃～100℃温度条件下，将步骤二所述混合溶液Ⅱ进行聚合反应，得到敷料预备液；
步骤四、将步骤三所述敷料预备液倒入模具，将装有敷料预备液的模具静置10min～40min后进行循环低温冷冻处理，得到可视化抗菌导电敷料。
上述的一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，其特征在于，步骤一溶解聚乙烯醇和硼砂的温度为80℃～100℃。
上述的一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，其特征在于，步骤一所述混合溶液Ⅰ中，聚乙烯醇的质量百分含量为5％～20％，硼砂的质量百分含量为1％～8％，所述聚乙烯醇的数均分子量为70000～140000。
上述的一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，其特征在于，步骤二所述混合溶液Ⅱ中，1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的质量百分含量为3％～15％，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的质量百分含量为0.1％～0.8％，过硫酸铵的质量百分含量为0.05％～0.5％。
上述的一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，其特征在于，所述聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的平均分子量为750。
上述的一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，其特征在于，步骤三所述聚合反应的时间为10min～80min。
上述的一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，其特征在于，步骤四所述循环低温冷冻处理的处理次数为2次～5次，每次循环低温冷冻处理均包括低温冷冻和解冻，低温冷冻的温度为-20℃～-40℃，时间为2h～30h，解冻的温度为20℃～30℃，时间为2h～12h。
此外，本发明提供一种采用上述可视化抗菌导电敷料的制备方法制备得到的可视化抗菌导电敷料的应用方法，其特征在于，所述应用方法包括将可视化抗菌导电敷料联合外源性电刺激促进细胞增殖和迁移。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
1、本发明提供一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，该方法以聚乙烯醇、硼砂、1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵为原料，利用循环低温冷冻制备得到该可视化抗菌导电敷料，具有可高度贴合创面、有效保湿和吸收渗液、高电导率、高透光率、高抗菌性和高相容性的特点，可联合外源性电刺激特异性针对慢性伤口因患者皮肤阻抗较大所带来的治疗效果不佳等问题，通过促进成纤维细胞的增殖和迁移，营造创面理想再生环境，提高治疗效果。
2、采用本发明的制备方法制备得到的可视化抗菌导电敷料在联合外源性电刺激进行促进细胞增殖迁移的过程中，可以直接观察伤口恢复情况，避免繁杂治疗护理程序。
3、本发明的制备方法中，包括制备含有聚乙烯醇和硼砂的混合溶液Ⅰ，之后将混合溶液Ⅰ与1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵混合，硼砂作为聚乙烯醇的交联剂，二者反应形成具有比非共价键更稳定的硼酸酯键可逆动态共价键第一网络，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯作为1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的交联剂，可促进形成更加稳定的共价交联第二网络，第一网络的硼酸根阴离子与第二网络中的咪唑阳离子通过物理交联(离子键)构成双网络三交联体系。
4、本发明的制备方法中，原料包括1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐，离子液体(1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐)作为不释放抗菌材料，可有效减少抗生素滥用，避免伤口二次感染，有利于伤口的抗菌消炎和愈合。同时可将1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的优异导电性能引入材料中，赋予材料高电导率。
5、本发明的制备方法中，包括1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐和聚乙二醇二甲基丙烯酸酯共价交联形成稳定聚离子液体链，通过与硼酸根阴离子物理交联，可有效提高材料机械性能和自愈合性能，此外，咪唑阳离子的高空间位阻可降低结晶度，限制微域形成，赋予敷料高透光性。
下面结合附图和实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。
说明书附图
图1为实施例1的可视抗菌化导电敷料的傅里叶变换红外光谱图。
图2为实施例1的可视化抗菌导电敷料的扫描电镜图。
图3为实施例1的可视化抗菌导电敷料的保湿性能图。
图4为实施例1的可视化抗菌导电水凝胶材料与皮肤的黏附性能图。
图5为实施例1的可视化抗菌导电敷料的蛋白吸附图。
图6为实施例1的可视化抗菌导电敷料的光学透过率图。
图7为实施例1的可视化抗菌导电敷料的电导率图。
图8为实施例1的可视化抗菌导电敷料的抗菌实验结果图。
图9为经实施例1的可视化抗菌导电敷料处理过的抗菌实验中细菌形态扫描电镜图。
图10为实施例1的可视化抗菌导电敷料细胞实验中电刺激电流和频率的优化图。
图11为实施例1的可视化抗菌导电敷料细胞实验中电刺激时间的优化图。
图12为实施例1的可视化抗菌导电敷料细胞实验中细胞迁移图示。
图13为实施例1的可视化抗菌导电敷料细胞实验中细胞迁移率图。
具体实施方式
实施例1
本实施例提供一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、80℃温度条件下，将聚乙烯醇和硼砂溶解于水中，至完全澄清，得到混合溶液Ⅰ；所述混合溶液Ⅰ中，聚乙烯醇的质量百分含量为5％，硼砂的质量百分含量为2％；所述聚乙烯醇的数均分子量为80000，所述硼砂的相对分子量为300；
步骤二、向步骤一所述混合溶液Ⅰ中加入1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵，搅拌至完全溶解，得到混合溶液Ⅱ；所述混合溶液Ⅱ中，1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的质量百分含量为3％，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的质量百分含量为0.1％，过硫酸铵的质量百分含量为0.05％；所述1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的分子量为220，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的平均分子量为750，过硫酸铵的分子量为200；
步骤三、氮气保护气氛中，60℃温度条件下，将步骤二所述混合溶液Ⅱ进行聚合反应10min，得到敷料预备液；
步骤四、将步骤三所述敷料预备液倒入模具，将装有敷料预备液的模具于室温条件下静置10min，将静置后敷料预备液进行循环低温冷冻处理，得到可视化抗菌导电敷料；所述室温为20℃～25℃；所述循环低温冷冻处理的处理次数为2次，具体为：将静置后的装有敷料预备液的模具置于冰箱中进行低温冷冻，取出进行解冻，将上述低温冷冻-解冻的步骤进行2次，低温冷冻的温度为-20℃，时间为2h，解冻的温度为20℃，时间为2h。
性能评价：
实施例1的可视化抗菌导电敷料(试样1)、聚乙烯醇和1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的傅里叶变换红外光谱如图1所示，由图1可知，本实施例的可视化抗菌导电敷料中，1468cm-1和1338cm-1处出现的吸收峰对应-B-O-C的伸缩振动，羟基的吸收峰3300cm-1峰强度也随之减弱，表明本实施例的视化抗菌导电敷料中具有硼酸酯键。与聚乙烯醇和1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐相比，本实施例的视化抗菌导电敷料在1530～1580cm-1处出现特征峰，与咪唑阳离子的伸缩振动有关，本实施例的视化抗菌导电敷料中在3045cm-1处未出现-C＝CH2的振动峰，说明1-乙烯基-3-丁基咪唑单体和聚乙二醇二甲基丙烯酸酯单体聚合完成，没有单体残留，本实施例的可视化抗菌导电敷料水凝胶成功合成。
实施例1的可视化抗菌导电敷料扫描电镜图如图2所示，由图2可知，本发明的可视化抗菌导电敷料具有孔径结构均匀致密的特点。
图3为实施例1的可视化抗菌导电敷料的保湿性能图，由图3可知，本发明的可视化抗菌导电敷料48小时之后保水率仍为50％左右，保水性能较优异，表明本发明的可视化抗菌导电敷料具备良好的保湿性能。
图4为实施例1的可视化抗菌水凝胶敷料与皮肤的黏附性图，其中A是敷料贴附于手腕图示，B是贴附敷料手腕向上弯曲图示，C是贴附有敷料的手腕向下弯曲示意图，表明本发明的可视化抗菌水凝胶材料具有良好的皮肤黏附性，可以很好的附着与手腕并且随之弯曲。
图5为实施例1的可视化抗菌水凝胶材料对蛋白的吸附情况。以牛血清白蛋白(BSA)为模型蛋白进行敷料蛋白吸附量的评价。具体操作包括：将敷料样品切成片用PBS缓冲液平衡，然后将样品与BSA溶液在37℃下振荡孵育24小时，根据吸附前后BSA溶液的浓度变化计算吸附量，利用紫外光谱仪在595nm处测量溶液中残留的BSA吸附蛋白量(mg/mL)的计算公式如下：
Figure BDA0003149150990000071
其中C0和Ca分别为吸附前后的BSA浓度(mg/mL)，w为水凝胶的初始重量(g)，V是BSA溶液的初始体积(mL)。结果如图5所示，根据图5可见，本发明的可视化抗菌导电敷料BSA吸附量达到100mg/g左右，该敷料可有效吸附伤口的渗出液，保持创面清洁。
图6为实施例1的可视化抗菌导电水凝胶的透光率。透光率为在紫外可见分光光度计UV-2600上测试而来。根据图6可知，在可见光范围内，本发明的敷料(试样1)透光率达到了90％，说明本发明的敷料具有高透光率，更有利于医护或患者直接观察伤口恢复情况，减少护理程序，避免创面二次损伤。
图7为实施例1的可视化抗菌导电敷料的电导率图，根据图7可知，并本实施例敷料电导率均值达到0.09S/m，与皮肤电导率接近，表明本发明的可视化抗菌导电敷料可平稳进行与创面之间脉冲电信号传递，促进创面处细胞增殖和迁移，促进创面恢复。
图8为实施例1的可视化抗菌导电敷料的抗菌实验结果图，图9为24h后细菌形态扫描电镜图。抗菌性能的评价方法包括将对数为1×108CFU/mL(500uL)的细菌溶液接种到无菌LB或PDA液体培养基中，将消毒过的敷料放入LB或PDA培养基中，并在温度为37℃或28℃的温度培养箱中以120rpm培养24小时，将所得到的细菌悬浮液用酶标仪测定600nm处的光密度(OD)，按照以下公式表征其存活率：
Figure BDA0003149150990000072
根据图8和图9可知，相对于对照组，本发明的可视化抗菌导电敷料(试样1)具有更强的抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌生长能力。
图10为实施例1的可视化抗菌导电敷料细胞实验中电刺激电流和频率的优化结果图，图11为实施例1的可视化抗菌导电敷料细胞实验中电刺激时间的优化结果图。细胞实验中电刺激的条件优化是通过评估细胞的增殖来估计电刺激的最佳条件，具体操作包括：取生长状态良好的小鼠成纤维细胞细胞(L929)，用培养基稀释并接种于48孔板中，细胞贴壁后，将灭菌后的敷料置于细胞层上，将铂电极插入水凝胶的两端，用鳄鱼夹固定在孔板上，然后连接至电刺激器上(KX-3C，痉挛肌低频治疗仪，中国)，每天以0.5Hz～10Hz的频率以及0.05V～0.5V的电流进行0.5h的交流电刺激，48h后采用CCK-8法评估在不同参数电刺激下对细胞存活的影响。结果如图10。图10表明当电流达到0.25Ma、频率达到2Hz时，细胞增殖达到最大。选定最佳电刺激参数后，再以同样的方法对电刺激时长进行优化，结果如图11，图11表明当电刺激时间为0.5h时，细胞增殖效果最好。
图12为实施例1的可视化抗菌导电敷料促进细胞迁移结果图，图13为实施例1的可视化抗菌导电敷料浸提液促进细胞划痕的迁移率。具体操作包括：将L929个细胞接种在导电玻璃表面，在导电玻璃上划开单层细胞，模拟切口伤口，用PBS清洗单层细胞以清除细胞碎片，在细胞培养的第6h和18h施加电刺激脉冲(2Hz，0.25mA，30min)，然后分别于0h和24h在显微镜下观察创面愈合过程，结果如图12。用ImageJ(x64)对划痕区域进行分析，结果如图13，其中，显著性差异用t检验分析，显著性如下：*，p<0.05；**，p<0.01；***，p<0.001)。
细胞迁移率计算公式如下:
Figure BDA0003149150990000081
其中A0为初始划痕面积，A1为培养24h后的划痕面积。
根据图12和图13可知，相对于对照组，电刺激组和电刺激+试样1组有更好的促进小鼠成纤维细胞迁移的能力，其迁移率最大，表明本发明的可视化抗菌导电敷料联合外源性电刺激可有效促进细胞增殖迁移，促进伤口愈合。
实施例2
本实施例提供一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、95℃温度条件下，将聚乙烯醇和硼砂溶解于水中，至完全澄清，得到混合溶液Ⅰ；所述混合溶液Ⅰ中，聚乙烯醇的质量百分含量为7％，硼砂的质量百分含量为4％；所述聚乙烯醇的数均分子量为100000，所述硼砂的相对分子量为300；
步骤二、向步骤一所述混合溶液Ⅰ中加入1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵，搅拌至完全溶解，得到混合溶液Ⅱ；所述混合溶液Ⅱ中，1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的质量百分含量为9％，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的质量百分含量为0.7％，过硫酸铵的质量百分含量为0.1％；所述1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的分子量为220，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的平均分子量为750，过硫酸铵的分子量为200；
步骤三、氮气保护气氛中，90℃温度条件下，将步骤二所述混合溶液Ⅱ进行聚合反应80min，得到敷料预备液；
步骤四、将步骤三所述敷料预备液倒入模具，将装有敷料预备液的模具于室温条件下静置15min，将静置后敷料预备液进行循环低温冷冻处理，得到可视化抗菌导电敷料；所述室温为20℃～25℃；所述循环低温冷冻处理的处理次数为4次，具体为：将静置后的装有敷料预备液的模具置于冰箱中进行低温冷冻，取出进行解冻，将上述低温冷冻-解冻的步骤进行4次，低温冷冻的温度为-40℃，时间为7h，解冻的温度为25℃，时间为4h。
本实施例可视化抗菌导电敷料性能与实施例1的可视化抗菌导电敷料性能基本一致，具有高的透光率和杀菌率，以及良好的导电性能，将本实施例的可视化抗菌导电敷料联合外源性电刺激，可有效促进细胞增殖和迁移，具有良好的促进伤口愈合的功效。
实施例3
本实施例提供一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、85℃温度条件下，将聚乙烯醇和硼砂溶解于水中，至完全澄清，得到混合溶液Ⅰ；所述混合溶液Ⅰ中，聚乙烯醇的质量百分含量为15％，硼砂的质量百分含量为8％；所述聚乙烯醇的数均分子量为110000，所述硼砂的相对分子量为300；
步骤二、向步骤一所述混合溶液Ⅰ中加入1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵，搅拌至完全溶解，得到混合溶液Ⅱ；所述混合溶液Ⅱ中，1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的质量百分含量为14％，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的质量百分含量为0.3％，过硫酸铵的质量百分含量为0.25％；所述1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的分子量为220，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的平均分子量为750，过硫酸铵的分子量为200；
步骤三、氮气保护气氛中，100℃温度条件下，将步骤二所述混合溶液Ⅱ进行聚合反应50min，得到敷料预备液；
步骤四、将步骤三所述敷料预备液倒入模具，将装有敷料预备液的模具于室温条件下静置30min，将静置后敷料预备液进行循环低温冷冻处理，得到可视化抗菌导电敷料；所述室温为20℃～25℃；所述循环低温冷冻处理的处理次数为5次，具体为：将静置后的装有敷料预备液的模具置于冰箱中进行低温冷冻，取出进行解冻，将上述低温冷冻-解冻的步骤进行5次，低温冷冻的温度为-30℃，时间为15h，解冻的温度为30℃，时间为8h。
本实施例可视化抗菌导电敷料性能与实施例1的可视化抗菌导电敷料性能基本一致，具有高的透光率和杀菌率，以及良好的导电性能，将本实施例的可视化抗菌导电敷料联合外源性电刺激，可有效促进细胞增殖和迁移，具有良好的促进伤口愈合的功效。
实施例4
本实施例提供一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、100℃温度条件下，将聚乙烯醇和硼砂溶解于水中，至完全澄清，得到混合溶液Ⅰ；所述混合溶液Ⅰ中，聚乙烯醇的质量百分含量为6％，硼砂的质量百分含量为5％；所述聚乙烯醇的数均分子量为80000，所述硼砂的相对分子量为300；
步骤二、向步骤一所述混合溶液Ⅰ中加入1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵，搅拌至完全溶解，得到混合溶液Ⅱ；所述混合溶液Ⅱ中，1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的质量百分含量为6％，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的质量百分含量为0.6％，过硫酸铵的质量百分含量为0.3％；所述1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的分子量为220，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的平均分子量为750，过硫酸铵的分子量为200；
步骤三、氮气保护气氛中，90℃温度条件下，将步骤二所述混合溶液Ⅱ进行聚合反应40min，得到敷料预备液；
步骤四、将步骤三所述敷料预备液倒入模具，将装有敷料预备液的模具于室温条件下静置35min，将静置后敷料预备液进行循环低温冷冻处理，得到可视化抗菌导电敷料；所述室温为20℃～25℃；所述循环低温冷冻处理的处理次数为4次，具体为：将静置后的装有敷料预备液的模具置于冰箱中进行低温冷冻，取出进行解冻，将上述低温冷冻-解冻的步骤进行4次，低温冷冻的温度为-20℃，时间为2h，解冻的温度为20℃，时间为2h。
本实施例可视化抗菌导电敷料性能与实施例1的可视化抗菌导电敷料性能基本一致，具有高的透光率和杀菌率，以及良好的导电性能，将本实施例的可视化抗菌导电敷料联合外源性电刺激，可有效促进细胞增殖和迁移，具有良好的促进伤口愈合的功效。
实施例5
本实施例提供一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、80℃温度条件下，将聚乙烯醇和硼砂溶解于水中，至完全澄清，得到混合溶液Ⅰ；所述混合溶液Ⅰ中，聚乙烯醇的质量百分含量为18％，硼砂的质量百分含量为6％；所述聚乙烯醇的数均分子量为130000，所述硼砂的相对分子量为300；
步骤二、向步骤一所述混合溶液Ⅰ中加入1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵，搅拌至完全溶解，得到混合溶液Ⅱ；所述混合溶液Ⅱ中，1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的质量百分含量为7％，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的质量百分含量为0.8％，过硫酸铵的质量百分含量为0.45％；所述1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的分子量为220，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的平均分子量为750，过硫酸铵的分子量为200；
步骤三、氮气保护气氛中，80℃温度条件下，将步骤二所述混合溶液Ⅱ进行聚合反应20min，得到敷料预备液；
步骤四、将步骤三所述敷料预备液倒入模具，将装有敷料预备液的模具于室温条件下静置20min，将静置后敷料预备液进行循环低温冷冻处理，得到可视化抗菌导电敷料；所述室温为20℃～25℃；所述循环低温冷冻处理的处理次数为2次，具体为：将静置后的装有敷料预备液的模具置于冰箱中进行低温冷冻，取出进行解冻，将上述低温冷冻-解冻的步骤进行2次，低温冷冻的温度为-20℃，时间为2h，解冻的温度为20℃，时间为2h。
本实施例可视化抗菌导电敷料性能与实施例1的可视化抗菌导电敷料性能基本一致，具有高的透光率和杀菌率，以及良好的导电性能，将本实施例的可视化抗菌导电敷料联合外源性电刺激，可有效促进细胞增殖和迁移，具有良好的促进伤口愈合的功效。
实施例6
本实施例提供一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、90℃温度条件下，将聚乙烯醇和硼砂溶解于水中，至完全澄清，得到混合溶液Ⅰ；所述混合溶液Ⅰ中，聚乙烯醇的质量百分含量为20％，硼砂的质量百分含量为1％；所述聚乙烯醇的数均分子量为90000，所述硼砂的相对分子量为300；
步骤二、向步骤一所述混合溶液Ⅰ中加入1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵，搅拌至完全溶解，得到混合溶液Ⅱ；所述混合溶液Ⅱ中，1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的质量百分含量为12％，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的质量百分含量为0.2％，过硫酸铵的质量百分含量为0.5％；所述1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的分子量为220，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的平均分子量为750，过硫酸铵的分子量为200；
步骤三、氮气保护气氛中，60℃温度条件下，将步骤二所述混合溶液Ⅱ进行聚合反应30min，得到敷料预备液；
步骤四、将步骤三所述敷料预备液倒入模具，将装有敷料预备液的模具于室温条件下静置40min，将静置后敷料预备液进行循环低温冷冻处理，得到可视化抗菌导电敷料；所述室温为20℃～25℃；所述循环低温冷冻处理的处理次数为2次，具体为：将静置后的装有敷料预备液的模具置于冰箱中进行低温冷冻，取出进行解冻，将上述低温冷冻-解冻的步骤进行2次，低温冷冻的温度为-20℃，时间为2h，解冻的温度为20℃，时间为8h。
本实施例可视化抗菌导电敷料性能与实施例1的可视化抗菌导电敷料性能基本一致，具有高的透光率和杀菌率，以及良好的导电性能，将本实施例的可视化抗菌导电敷料联合外源性电刺激，可有效促进细胞增殖和迁移，具有良好的促进伤口愈合的功效。
实施例7
本实施例提供一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、95℃温度条件下，将聚乙烯醇和硼砂溶解于水中，至完全澄清，得到混合溶液Ⅰ；所述混合溶液Ⅰ中，聚乙烯醇的质量百分含量为7％，硼砂的质量百分含量为4％；所述聚乙烯醇的数均分子量为70000，所述硼砂的相对分子量为300；
步骤二、向步骤一所述混合溶液Ⅰ中加入1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵，搅拌至完全溶解，得到混合溶液Ⅱ；所述混合溶液Ⅱ中，1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的质量百分含量为15％，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的质量百分含量为0.7％，过硫酸铵的质量百分含量为0.1％；所述1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的分子量为220，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的平均分子量为750，过硫酸铵的分子量为200；
步骤三、氮气保护气氛中，90℃温度条件下，将步骤二所述混合溶液Ⅱ进行聚合反应80min，得到敷料预备液；
步骤四、将步骤三所述敷料预备液倒入模具，将装有敷料预备液的模具于室温条件下静置15min，将静置后敷料预备液进行循环低温冷冻处理，得到可视化抗菌导电敷料；所述室温为20℃～25℃；所述循环低温冷冻处理的处理次数为4次，具体为：将静置后的装有敷料预备液的模具置于冰箱中进行低温冷冻，取出进行解冻，将上述低温冷冻-解冻的步骤进行4次，低温冷冻的温度为-20℃，时间为30h，解冻的温度为25℃，时间为12h。
本实施例可视化抗菌导电敷料性能与实施例1的可视化抗菌导电敷料性能基本一致，具有高的透光率和杀菌率，以及良好的导电性能，将本实施例的可视化抗菌导电敷料联合外源性电刺激，可有效促进细胞增殖和迁移，具有良好的促进伤口愈合的功效。
实施例8
本实施例提供一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一、90℃温度条件下，将聚乙烯醇和硼砂溶解于水中，至完全澄清，得到混合溶液Ⅰ；所述混合溶液Ⅰ中，聚乙烯醇的质量百分含量为9％，硼砂的质量百分含量为4％；所述聚乙烯醇的数均分子量为140000，所述硼砂的相对分子量为300；
步骤二、向步骤一所述混合溶液Ⅰ中加入1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵，搅拌至完全溶解，得到混合溶液Ⅱ；所述混合溶液Ⅱ中，1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的质量百分含量为9％，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的质量百分含量为0.7％，过硫酸铵的质量百分含量为0.2％；所述1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的分子量为220，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的平均分子量为750，过硫酸铵的分子量为200；
步骤三、氮气保护气氛中，90℃温度条件下，将步骤二所述混合溶液Ⅱ进行聚合反应80min，得到敷料预备液；
步骤四、将步骤三所述敷料预备液倒入模具，将装有敷料预备液的模具于室温条件下静置15min，将静置后敷料预备液进行循环低温冷冻处理，得到可视化抗菌导电敷料；所述室温为20℃～25℃；所述循环低温冷冻处理的处理次数为3次，具体为：将静置后的装有敷料预备液的模具置于冰箱中进行低温冷冻，取出进行解冻，将上述低温冷冻-解冻的步骤进行3次，低温冷冻的温度为-40℃，时间为7h，解冻的温度为30℃，时间为4h。
本实施例可视化抗菌导电敷料性能与实施例1的可视化抗菌导电敷料性能基本一致，具有高的透光率和杀菌率，以及良好的导电性能，将本实施例的可视化抗菌导电敷料联合外源性电刺激，可有效促进细胞增殖和迁移，具有良好的促进伤口愈合的功效。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明做任何限制，凡是根据发明技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效结构变化，均仍属于本发明技术方案的保护范围内。

Claims (5)

1.一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，其特征在于，原料包括聚乙烯醇、硼砂、1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵；
所述方法包括以下步骤：
步骤一、将聚乙烯醇和硼砂溶解于水中，得到混合溶液Ⅰ；步骤一所述混合溶液Ⅰ中，聚乙烯醇的质量百分含量为5%~20%，硼砂的质量百分含量为1%~8%，所述聚乙烯醇的数均分子量为70000~140000；
步骤二、向步骤一所述混合溶液Ⅰ中加入1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯和过硫酸铵，得到混合溶液Ⅱ；步骤二所述混合溶液Ⅱ中，1-乙烯基-3-丁基咪唑溴盐的质量百分含量为3%~15%，聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的质量百分含量为0.1%~0.8%，过硫酸铵的质量百分含量为0.05%~0.5%；所述聚乙二醇二甲基丙烯酸酯的平均分子量为750；
步骤三、氮气保护气氛中，60℃~100℃温度条件下，将步骤二所述混合溶液Ⅱ进行聚合反应，得到敷料预备液；
步骤四、将步骤三所述敷料预备液倒入模具，将装有敷料预备液的模具静置10min~40min后进行循环低温冷冻处理，得到可视化抗菌导电敷料。
2.根据权利要求1所述的一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，其特征在于，步骤一溶解聚乙烯醇和硼砂的温度为80℃~100℃。
3.根据权利要求1所述的一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，其特征在于，步骤三所述聚合反应的时间为10min~80min。
4.根据权利要求1所述的一种可视化抗菌导电敷料的制备方法，其特征在于，步骤四所述循环低温冷冻处理的处理次数为2次~5次，每次循环低温冷冻处理均包括低温冷冻和解冻，低温冷冻的温度为-20℃~-40℃，时间为2h~30h，解冻的温度为20℃~30℃，时间为2h~12h。
5.一种采用如权利要求1所述可视化抗菌导电敷料的制备方法制备得到的可视化抗菌导电敷料的应用方法，其特征在于，所述应用方法包括将可视化抗菌导电敷料联合外源性电刺激促进细胞增殖和迁移。
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