CN113493819B - 富士系列苹果特异性分子标记位点及其筛选方法和应用 - Google Patents

富士系列苹果特异性分子标记位点及其筛选方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了8种富士系列苹果特异性分子标记位点及其筛选方法和应用，包括下列步骤：（1）取叶片提取基因组DNA；（2）按照简化基因组测序技术Super‑GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；（3）对测序数据进行过滤后，筛选，验证，获得准确鉴定8种富士系列苹果的74个SNP标记位点；（4）在74个SNP标记位点当中筛选到几组能够高效鉴别8种富士系列苹果的SNP位点标记群；（5）基于这些位点标记群开发出一种简便、快速、准确鉴定8种富士系列苹果的PCR鉴定方法，为从源头准确控制苹果品种奠定技术基础。

Description

富士系列苹果特异性分子标记位点及其筛选方法和应用
技术领域
本发明涉及8种富士系列苹果特异性分子标记及其筛选方法和应用，属于生物技术领域。
背景技术
苹果为蔷薇科(Rosaceae)苹果亚科(Maloideae)苹果属(Malus MILL.)植物。富士苹果由日本农林水产省果树试验场盛冈分场育成的，国光为母本，元帅为父本，1962年正式命名。
富士苹果目前是我国的主栽苹果品种，数据显示，我国红富士苹果的产量占苹果总产量的65％。自引进富士苹果至今，50多年不断有新品系培育成功并推广种植，但由于富士系列苹果的品种是基于株变或者芽变的方式进行选育获得，基因差异非常小，品种差异甚至被个体差异所掩盖，因此区分特别困难，在我国种苗市场上，常出现品种混杂，农户购买种植的品种与实际需求不同等问题。随着我国农业集约型种植改革进程的发展，大面积种植逐渐取代了农户的分散种植，农户小面积种植对于品种的维权等问题的诉求相对较少，而大面积种植的新型农业公司具有较高的维权意识，这就给种苗繁育企业提出更高的要求，但富士系列品种形态差异、品质差异等方面特别细微，很容易混淆，2001富士、阿森泰克、富布瑞斯、红将军、首富3号、烟富10号、烟富3号和烟富6号8个品种占据我国富士品种种植量的80％以上，因此开发2001富士、阿森泰克、富布瑞斯、红将军、首富3号、烟富10号、烟富3号和烟富6号8种富士系列品种的鉴定方法对于种苗繁育、销售、果园种植的企业和果农具有重要的应用价值。
发明内容
针对现有技术中8种富士系列苹果及其不易鉴定的缺陷，本发明提供一种8种富士系列苹果的特异性分子标记位点及其筛选方法和应用，共筛选到74个品种特异性的SNP标记，基于这些标记开发出一种简便、快速、可靠鉴定8种富士系列苹果的PCR鉴定方法，为从源头上准确控制苹果品种奠定技术基础。
为解决上述技术问题，本发明采用下述技术方案予以实现：
首先，本发明提供一种利用简化基因组测序技术Super-GBS筛选8种富士苹果的特异性分子标记的方法，包括如下步骤：
(1)利用品种已知且准确的3株2001富士、7株阿森泰克、2株富布瑞斯、4株红将军、2株首富3号、4株烟富10号、3株烟富3号和7株烟富6号苹果为样品，取叶片提取基因组DNA；
(2)按照简化基因组测序技术Super-GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；
(3)对测序数据进行过滤后，使用GATK获得SNP位点；
(4)对SNP进行过滤，过滤条件为：SNP测序深度不低于4；剔除MAF小于0.01的位点；剔除SNP分型缺失率高于20％的位点；剔除所有样品中分型一致的位点；
(5)根据每个品种的分型结果，筛选每个品种内所有个体分型完全一致、分型一致位点没有个体缺失，且与其他品种不同的位点；最终筛选到74个SNP位点，具体见表1：
Figure BDA0003127070080000021
Figure BDA0003127070080000031
Figure BDA0003127070080000041
Figure BDA0003127070080000051
Figure BDA0003127070080000061
(6)根据74个苹果特异的SNP分子标记，可以组合出几组高效的鉴定8种富士系列苹果的SNP位点组合群，其中一组鉴定8种富士系列苹果的SNP位点组合，其群特征在于，位点信息如表2。
表2能够准确鉴定8种富士系列苹果的一组SNP位点信息
Figure BDA0003127070080000062
进一步的，上述表2中SNP位点鉴定引物信息如表3所示：
表3表2中SNP位点鉴定引物信息
Figure BDA0003127070080000071
本发明的有益效果：
富士系列苹果品种基因差异小，有些品种只是另外一个品种的芽变产物，因此在外观形态上不能明显区分，本发明在SNP筛选过程中需要剔除大量个体差异位点并科学准确验证，才能获得准确鉴定8种富士系列苹果的SNP位点，因此本发明利用简化基因组测序技术Super-GBS方法过滤出的SNP位点包含大量个体差异位点，可以对占市场份额80％以上的8种富士系列苹果进行简便、快速、准确的鉴定。
本发明对外部形态和基因水平都很难鉴定的8种富士系列苹果的组培苗、嫁接苗、成品苗能够准确的区分，确保育种企业对品种的把控，减少繁育过程中误差造成的经济损失。实践证明本发明筛选到的SNP位点能够准确进行8种富士系列苹果的鉴定。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明。
图1附图为利用筛选到的2001富士、阿森泰克、富布瑞斯、红将军、首富3号、烟富10号、烟富3号和烟富6号8种富士系列苹果的74个特异SNP标记(SNP标记见表1)构建进化树，能够准确的区分8种富士系列苹果。
说明，本发明的图1中，样品编号对应的品种如下表所示：
序号 品种 样品数量 样品编号
1 2001富士 3 A-80，A-62，A-98
2 阿森泰克 7 A-99，A-30，A-155，A-141，A-136，A-118，A-122
3 富布瑞斯 2 A-47，A-100
4 红将军 4 A-75，A-93，A-135，A-154
5 首富3号 2 A-69，A-87
6 烟富10号 4 A-114，A-68，A-77，A-95
7 烟富3号 3 A-151，A-132，A-26
8 烟富6号 7 A-35，A-39，A-52，A-56，A-111，A-123，A-142
具体实施方式
实施例1
本实施例提供一种利用简化基因组测序技术Super-GBS筛选2001富士、阿森泰克、富布瑞斯、红将军、首富3号、烟富10号、烟富3号和烟富6号共8种富士系列苹果特异性SNP分子标记的方法，包括如下步骤：
(1)利用品种已知的3株2001富士、7株阿森泰克、2株富布瑞斯、4株红将军、2株首富3号、4株烟富10号、3株烟富3号和7株烟富6号苹果样品，取叶片提取基因组DNA；
(2)按照简化基因组测序技术Super-GBS方法构建文库，文库质检合格后上机测序；
(3)对测序数据进行过滤后，使用GATK获得SNP位点；
(4)对SNP进行过滤，过滤条件为：SNP测序深度不低于4；剔除MAF小于0.01的位点；剔除SNP分型缺失率高于20％的位点；剔除所有样品中分型一致的位点。
(5)根据每个品种的分型结果，筛选每个品种内所有个体分型完全一致、分型一致位点没有个体缺失，且与其他7种苹果品种中至少一个品种位点不同，最终仅筛选到74个能够用于品种区分的SNP位点。
(6)利用74个SNP位点构建进化树和聚类分析。
具体的操作步骤如下：
本实施例主要包含以下步骤，即酶切、连接、纯化、扩增、混库和分析。
1.酶切：
对本公司购买的标准机构提供的品种准确的3株2001富士、7株阿森泰克、2株富布瑞斯、4株红将军、2株首富3号、4株烟富10号、3株烟富3号和7株烟富6号苹果进行Super-GBS建库，具体过程如下(以下为每个样品酶切试剂使用量)：
Figure BDA0003127070080000091
所有成分混匀后37℃酶切2h，然后75℃保温20min使酶灭活。
2.连接：
在40μL体系中连接adapter，barcode及酶切片段。
Figure BDA0003127070080000092
所有成分混匀后22℃酶切2h，然后65℃保温20min使酶灭活。
3.纯化
取连接产物35μL加入0.7倍体积的Sera-Mag beads(GE Healthcare LifeSciences)，室温静置5min，以去除300bp以下小片段。从上清中回收磁珠，并用200μL70％酒精洗脱3遍。最后用40μl 10mM Tris.HCl(pH 8.0)从磁珠中回收DNA。
4.扩增
Figure BDA0003127070080000093
所有成分混匀后置于PCR仪中，反应条件为95℃预变性30s，扩增16个循环，每个循环95℃变性30s，62℃退火20s，68℃延伸15s，最后在68℃延伸5min，4℃保存。
5.混库
使用Qubit测定每个样品的文库浓度，浓度大于5ng/μl的样品用于混库测序。通过加入0.7倍体积的Sera-Mag beads去除文库中的引物和小片段，然后根据测序量需求进行混样测序，测序平台为Illumina Nova PE150。建库过程所用的接头和引物序列详见下表4。
表4 Super-GBS测序文库构建接头及引物序列
Figure BDA0003127070080000101
6.分析
对8种富士系列苹果品种，共32个样品进行Super-GBS测序，一共得到97M高质量reads。将高质量reads比对到参考基因组上，比对率为77.85％～87.38％，所有样品的平均测序深度为37.62×。利用GATK(v3.8-1)软件得到SNP位点，然后筛选8个品种间至少有一个品种与其它品种不同的SNP位点，并通过标样进行植株个体差异位点的删减，最终获得74个SNP位点，采用treebest软件分析，利用R包ggtree绘图，这些位点可用于8种富士系列苹果品种的准确鉴定，鉴定结果见图1。
实施例2
本实施例提供按照本发明的74个SNP位点筛选少数几个SNP位点，并根据位点所在基因组的位置设计相对应的PCR检测引物，对山东大丰园农业有限公司品种圃随机采集的多份富士系列苹果基因组DNA进行PCR扩增，并通过一代测序的方法进行8种富士系列苹果的品种鉴定，同时加入已知品种的8种苹果标准样品作为阳性对照进行试验和验证。包括如下步骤：
(1)本公司购买的标准机构提供的品种准确的2001富士、阿森泰克、富布瑞斯、红将军、首富3号、烟富10号、烟富3号和烟富6各取2株，提取基因组DNA；
(2)从山东大丰园农业有限公司品种圃随机采集2001富士、阿森泰克、富布瑞斯、红将军、首富3号、烟富10号、烟富3号和烟富6各2株，提取基因组DNA；
(3)从74个SNP位点中挑取位点组成能够准确鉴定8种富士系列苹果的一组SNP位点群，见表2；
(4)根据挑取的SNP位点所在的基因组位置设计PCR扩增的上下游引物，见表3；
(5)利用表3中8种富士系列苹果的通用引物进行PCR扩增；
(6)对扩增的序列进行一代测序；
(7)参照所用的SNP位点信息，根据测序结果中对应的位点的序列进行富士系列品种的分型判读。
表2能够准确鉴定8种富士系列苹果的一组SNP位点信息
Figure BDA0003127070080000111
进一步的，上述表2中SNP位点鉴定引物信息如表3所示：
表3表2中SNP位点鉴定引物信息
Figure BDA0003127070080000112
Figure BDA0003127070080000121
具体的操作步骤如下：
本实施例主要包含以下步骤，即PCR、测序、比对和分析。
1、PCR扩增：
根据表2中的位点所在位置设计PCR扩增引物，引物序列见表3。扩增条件为94℃3min,94℃30sec,55℃45sec,72℃45sec,37个循环，72℃7min,12℃30min。
Figure BDA0003127070080000122
2.测序：
将获得的PCR扩增产物利用1％琼脂糖凝胶电泳进行检测，在预计位置获得特异扩增条带的样品寄送上海生工生物有限公司进行测序。
3.序列比对：
测序获得的结果利用DNAMAN软件或者SnapGene进行序列比对，利用本发明74个SNP位点中筛选的一个SNP位点标记群(见表2)进行8种富士系列苹果的分型。
4.分析：
序列比对鉴定结果发现，8种富士系列苹果2001富士、阿森泰克、富布瑞斯、红将军、首富3号、烟富10号、烟富3号和烟富6号共计16株鉴定结果与实际品种情况相符。从74个SNP位点中挑取其他SNP位点标记群，同样可以准确鉴定8种富士系列苹果2001富士、阿森泰克、富布瑞斯、红将军、首富3号、烟富10号、烟富3号和烟富6号。以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。
序列表
<110> 山东大丰园农业有限公司
潍坊科技学院
<120> 富士系列苹果特异性分子标记位点及其筛选方法和应用
<160> 14
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
ggtgaccctc ttggcatgaa 20
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
gagaacccac aaccgtcgat 20
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
atacgagtgc ctgcgacttc 20
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
gctcgggatc tttctgtgct 20
<210> 5
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
gccacctggt tcagagtgtt 20
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
gggcatgttt acgggtcagt 20
<210> 7
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
cgatgcggag gtcgataagt 20
<210> 8
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
atcgcagaat aacccgcctt 20
<210> 9
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
taactcccac aaaagggccg 20
<210> 10
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
ggcagcctat agctgggaac 20
<210> 11
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 11
cagctgcagt aacgacctga 20
<210> 12
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 12
tacattccgg tgagggttgc 20
<210> 13
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 13
cacgaccaca tggccagtta 20
<210> 14
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 14
ggcccacaac cacaaaagat 20

Claims (1)

1.检测表2中SNP位点的引物在准确鉴定8种富士系列苹果中的应用，其特征在于，所述8种富士系列苹果为苹果2001富士、阿森泰克、富布瑞斯、红将军、首富3号、烟富10号、烟富3号和烟富6号；
所述SNP位点信息见表2，所述引物信息见表3：
表2能够准确鉴定8种富士系列苹果的一组SNP位点信息
Figure FDA0003962671900000011
表3所述表2中SNP位点鉴定引物信息
Figure FDA0003962671900000012
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KR101905458B1 (ko) * 2017-05-29 2018-10-08 충북대학교 산학협력단 사과 품종 판별용 caps 마커 및 이의 용도
CN111560463B (zh) * 2020-06-15 2022-08-26 山东丰沃植物研究院有限公司 三种嘎啦苹果特异性分子标记及其筛选方法和应用
CN112126699B (zh) * 2020-09-15 2022-03-01 中国农业大学 一种苹果属植物全基因组InDel标记基因型数据库及其在种质资源特异性鉴定上的应用

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