CN113493456A

CN113493456A - 一类含中环四氢咔啉-四氢异喹啉化合物的制备和用途

Info

Publication number: CN113493456A
Application number: CN202010258549.6A
Authority: CN
Inventors: 刘站柱; 马艳涛; 潘璇; 贯宝和; 张广艳; 于瑞
Original assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Current assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Priority date: 2020-04-03
Filing date: 2020-04-03
Publication date: 2021-10-12
Anticipated expiration: 2040-04-03
Also published as: CN113493456B

Abstract

本发明属于医药技术领域，公开了一类含中环的四氢咔啉‑四氢异喹啉化合物的制备和用途。具体包括具有通式Ⅰ所示的化合物及其药学上可接受的盐，这类化合物的制备方法，本发明还涉及含有通式Ⅰ的化合物的药物组合物及其制备方法，这类化合物和药物组合物在抗肿瘤方面的应用。

Description

一类含中环四氢咔啉-四氢异喹啉化合物的制备和用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一类抗肿瘤海洋天然产物ecteinascidin的结构类似物及其药学上可以接受的盐，以及含有上述化合物及其药学上可接受盐的抗肿瘤制剂。

背景技术

癌症被世界卫生组织列为世界五大绝症之一，据世界卫生组织统计，到2030年全球死于癌症的人数将突破1310万。在我国，每65个人当中就有1名癌症患者每年有超过400万人被确诊癌症每天有超过1万人确诊癌症每分钟就有超过5人死于癌症。中国的癌症死亡率在过去30年中增长了80％左右，癌症目前是我国人民健康的头号杀手。手术、放疗、化疗和分子靶向药物是治疗癌症的几大主要手段。其中化疗为全身治疗，是目前常用的癌症治疗手段。然而由于癌细胞的耐药性和抗癌药物的毒副作用，临床迫切需要开发疗效好，副作用低的抗癌药物。

四氢异喹啉生物碱是具有广泛的生物活性的一类天然产物，尤其是具有很强的抗肿瘤和抗菌活性。按其结构分类可分为单四氢异喹啉类和双四氢异喹啉类。其中双四氢异喹啉天然产物Saframycins,Ecteinascidins,Renieramycins等具有很强的抗肿瘤活性。，目前Ecteinascidin-743(简称ET-743)已经上市，商品名为曲贝替定，用于治疗卵巢癌和软组织肉瘤。由其进行结构改造的化合物Zalypsis，目前正处于II期临床研究，发现其对肉瘤，子宫内膜瘤，骨髓瘤等均表现出治疗效果。由于双四氢异喹啉类化合物表现出的优秀的抗肿瘤活性，是具有良好开发前景的抗癌先导物，因而对该类化合物的合成，开发与改造成为抗肿瘤药物研究领域的热点。

由于双四氢异喹啉类天然产物在自然界中含量极低难以靠天然提取来提供药物因此这类双四氢异喹啉天然产物的全合成和结构改造已成为新型抗肿瘤药物研究开发的热点领域。

有关这类双四氢异喹啉生物碱的改造方法的文献如下所示：E.J.Corey,et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.1999,96,3496报道合成了大量Ecteinasicdin结构类似物，通过筛选发现了结构简单但与Et-743活性相似的简化物Pt-650；A.G.Myers,et al.,J.Am.Chem.Soc.2001,123,5114；报道了与Saframycin A相比，双氢醌二甲醚分子骨架同样具有强效的抗肿瘤活性。S.Aubry,M.Lemaire,et al.,Bioorganic&Medicinal ChemistryLetters.2007,17,2598报道了一系列五环简化物的活性研究；C.Avendano,et al.,Bioorganic&Medicinal Chemistry 2007,15,112报道了一类C-3，4位含有碳碳双键的Pt-650类似物的合成及体外抗肿瘤活性；Z.Z.Liu,et al.,Bioorganic&Medicinal ChemistryLetters.2006,16,1282报道了对天然产物五环骨架芳环上的取代基进行了简化；Z.Z.Liu,et al.,Tetrahedron.2015,71,4296报道了拓扑构型是影响(–)-renieramycin G发挥抗肿瘤作用的一个重要因素，S型活性优于L构型C.Avendano,et al.,Bioorganic&MedicinalChemistry,2008,16,9065对三环简化物进行了研究，报道了三环简化物C-1位半缩醛按结构并非活性必须基团；C.Avendano,et al.,Bioorganic&Medicinal Chemistry,2010,18,6813和文献N.Saito,et al.,Tetrahedron,2014,70,6529先后报道了该类双四氢异喹啉天然产物的三环简化物，通过简化天然产物分子骨架复杂的环系，寻找结构简单的强效抗肿瘤化合物。体外活性显示，该类三环简化物的活性均在μM水平。Lu X,Pan X,Yang Y,etal.European Journal of Medicinal Chemistry,2017,135,260-269和Lu X,Pan X,GuanB,et al.Organic&biomolecular chemistry,2020,18(2),237-249报道了通过引入四氢咔啉片段将五并环延长到六并环和七并环，完善了构效关系。

发明内容

本发明的要解决的技术问题是提供一类具有通式I的ecteinascidin结构类似物及其药学上可接受的盐；

本发明的要解决的另一个技术问题是提供含有通式I的化合物及其药学上可接受的盐的药物组合物；

本发明的要解决的再一个技术问题是提供通式I的化合物及其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的具有通式Ⅰ的化合物及其药学上可接受的盐，结构特点之一是比天然产物ecteinascidins、renieramycins以及saframycins多出B环同时将D环改造成中环；本发明所涉及的这类化合物的另一个结构特点是27位的羧酸是芳基甲酸类、芳基丙烯酸类和脂肪酸类。

本发明所涉及的具有通式Ⅰ的化合物分子中1、3、15和17位的手性中心和相关的天然产物ecteinascidins分子中的绝对构型一致，且为光活体。

其中，n＝1，2，3；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈相互独立的选自：H、卤素、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、NO₂、CN、C₁-C₈的直链或支链的烷基、C₂-C₈直链或支链的烯基、C₂-C₄的炔基、C₁-C₈直链或支链的烷氧基；

R₉相互独立的选自：H，C₁-C₈的直链或带支链的烷基、C₂-C₈的烯基、C₂-C₄的炔基、C₁-C₈的烷基酰基、C₁-C₈的磺酰基、C₁-C₈的烷氧酰基；

R₁₀选自C₆-C₁₀的芳基，C₄-C₁₀的杂芳基，C₆-C₁₀芳基取代的C₁-C₄烷基、C₄-C₁₀杂芳基取代的C₁-C₄烷基、C₆-C₁₀芳基取代的C₀-C₄烷基乙烯基、C₁-C₁₀的直链或带支链的烷基，C₅-C₆环烷基并苯基；这些芳基、杂芳基、C₅-C₆环烷基并苯基上又可以具有一个或多个取代基，取代基选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₈直链或支链的烷基、C₁-C₈直链或支链烷氧基、C₁-C₈直链或支链烷基胺基、C₂-C₈直链或支链烯基、C₂-C₄炔基、C₆-C₈的芳基、C₄-C₈的杂环芳基；

X选自O、NH、S、CH₂、N；当X选自N时，N直接与R₁₁相连构成C₆-C₁₀芳基并五元二甲酰亚胺环或C₄-C₁₀杂芳基并五元二甲酰亚胺环；这些芳基、杂芳基上又可以具有一个或多个取代基，取代基选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₃直链或支链的烷基、C₁-C₃直链或支链烷氧基、C₁-C₃直链或支链烷基氨基、C₂-C₃烯基、C₂-C₃炔基。

优选的R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈相互独立的选自：H、卤素、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、NO₂、CN、C₁-C₆的直链或支链的烷基、C₂-C₆直链或支链烯基、C₂-C₄的炔基、C₁-C₆直链或支链烷氧基；

R₉相互独立的选自：H，C₁-C₆的直链或支链的烷基、C₂-C₆直链或支链烯基、C₂-C₄的炔基、C₁-C₆直链或支链烷基酰基、C₁-C₆直链或支链磺酰基、C₁-C₆直链或支链烷氧酰基；

n选自1，2，3；

R₁₀选自C₆-C₁₀的芳基、C₄-C₁₀的杂芳基、C₆-C₁₀芳基取代的C₁-C₂烷基、C₄-C₁₀杂芳基取代的C₁-C₂烷基、C₆-C₈芳基取代的C₀-C₂烷基乙烯基、C₁-C₆的直链或带支链的烷基、C₅-C₆环烷基并苯基；这些芳基、杂芳基、C₅-C₆环烷基并苯基上又可以具有一个或多个取代基，取代基选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₆直链或支链的烷基、C₁-C₆直链或支链烷氧基、C₁-C₆直链或支链直链或支链烷基氨基、C₂-C₆直链或支链烯基、C₂-C₄炔基、C₆-C₈的芳基、C₄-C₈的杂环芳基；

X选自O、NH、CH₂、N；当X选自N时，N直接与R₁₁相连构成C₆-C₁₀的芳基并五元二甲酰亚胺环或C₄-C₁₀的杂芳基并五元二甲酰亚胺环；这些芳基、杂芳基上又可以具有一个或多个取代基，取代基选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₃直链或支链的烷基、C₁-C₃直链或支链烷氧基、C₁-C₃直链或支链烷基氨基、C₂-C₃烯基、C₂-C₃炔基。

更优选的R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈相互独立的选自：H、卤素、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、NO₂、CN、C₁-C₄的直链或支链的烷基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃的炔基、C₁-C₄直链或支链烷氧基；

R₉相互独立的选自：H，C₁-C₄的直链或支链的烷基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃的炔基、C₁-C₄直链或支链烷基酰基、C₁-C₄直链或支链磺酰基、C₁-C₄直链或支链烷氧酰基；

n选自1，2；

R₁₀选自C₆-C₁₀的芳基、C₄-C₁₀的杂芳基、C₆-C₁₀芳基取代的C₁-C₂烷基、C₄-C₁₀杂芳基取代的C₁-C₂烷基、C₆-C₈芳基取代的C₀-C₂烷基乙烯基、C₁-C₄的直链或带支链的烷基、C₅-C₆环烷基并苯基；所述的芳基如：苯基、萘基；所述的杂芳基如：呋喃基、噻吩基、吡啶基、喹啉基、吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基；所述的C₅-C₆环烷基并苯基如：四氢萘基；这些芳基、杂芳基、C₅-C₆环烷基并苯基上又可以具有一个或多个取代基，取代基选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基、C₆-C₈的芳基、C₄-C₈的杂环芳基；

最优选的R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈相互独立的选自：H、卤素、OH、SH、NH₂、CF₃、醛基、氨基甲酰基、CN、甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、C₁-C₂的烷氧基；R₉相互独立的选自：H，甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、C₁-C₂的烷基酰基、C₁-C₂的磺酰基、C₁-C₂的烷氧酰基；

n选自1，2；

最优选的发明化合物选自下列小组：

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈相互独立的选自：H、卤素、OH、SH、NH₂、COOH、醛基、氨基甲酰基、NO₂、CN、-CH₃、-C₂H₅、-OCH₂CH₃、-OCH₃；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

n选自1；

X选自O、NH、N；当X选自N时，N直接与R₁₁相连构成C₆-C₁₀的芳基并五元二甲酰亚胺环或C₄-C₁₀的杂芳基并五元二甲酰亚胺环；这些芳基、杂芳基上又可以具有一个或多个取代基，取代基选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₃直链或支链的烷基、C₁-C₃直链或支链烷氧基、C₁-C₃直链或支链烷基氨基、C₂-C₃烯基、C₂-C₃炔基。R₁₀可分别取自下列基团：

1、苯基-：苯环上的取代基可以是一个或多个；例如苯环可以是单取代，也可以是二取代和三取代；单取代苯环上的取代位置为2-，3-或4-位；二取代苯环上取代基的位置为2，4-、3，4-、2,3-或3,4-；三取代苯环的取代位置为2，3，4-或3，4，5-位；这些取代基分别独立，可选自下列取代基：

H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基；当二取代苯环上的取代基为相邻位置时，相邻的两个取代基可以相互连接成C₅-C₆环烷基并苯基，取代基选自-CH₂CH₂-、-CH₂-。如：四氢萘基。

2、2-吡啶基：2-吡啶环上的取代基可以是一个或多个；例如吡啶环上可以是单取代也可以是二取代；单取代吡啶环上取代基的位置为4-和6-位；二取代吡啶环上取代基的位置为3，5-、3，4-、3，6-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基；

3、4-吡啶基：4-吡啶环上的取代基可以是一个或多个；例如吡啶环上可以是单取代也可以是二取代；单取代吡啶环上取代基的位置为2-和3-位；二取代吡啶环上取代基的位置为2，3-、3，5-、2，6-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

4、3-吡啶基：3-吡啶环上的取代基可以是一个或多个；例如吡啶环上可以是单取代也可以是二取代；单取代吡啶环上取代基的位2-、4-、5-和6-位；二取代吡啶环上取代基的位置为4，6-、5，6-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

5、α-萘基：α-萘基环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在萘环上4-、5-、或8-位上；二取代基为萘环上的4，5-、4，8-或5，8-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

6、β-萘基：β-萘基环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在萘环上1-、4-、5-、或8-位上；二取代基为萘环上的1，4-、4，5-、4，8-或5，8-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

7、4-喹啉基：4-喹啉环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在喹啉环上2-、5-、6-、7-或8-位上；二取代基为喹啉环上的5，6-、5，7-、5，8-或6，7-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

8、3-喹啉基：3-喹啉环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在喹啉环2-、4-、5-、6-、7-或8-位上；二取代基为喹啉环上的5，6-、5，7-、5，8-或6，7-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

9、2-喹啉基：2-喹啉环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在喹啉环3-、4-、5-、6-、7-或8-位上；二取代基为喹啉环上的5，6-、5，7-、5，8-或6，7-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

10、3-吲哚基：3-吲哚环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在吲哚环2-、4-、5-、6-或7-位上；二取代基为吲哚环上的4，5-、5，6-、5，7-、4，6-、4，7-或6，7-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基；R’为H、C₁-C₄直链或支链的烷基。

11、2-吲哚基：2-吲哚环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在吲哚环3-、4-、5-、6-或7-位上；二取代基为吲哚环上的4，5-、5，6-、5，7-、4，6-、4，7-或6，7-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基；R”为H、C₁-C₄直链或支链的烷基。

12、2-苯并呋喃基：2-苯并呋喃环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在苯并呋喃环3-、4-、5-、6-或7-位上；二取代基为苯并呋喃环上的4，5-、5，6-、5，7-、4，6-、4，7-或6，7-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

13、3-苯并呋喃基：3-苯并呋喃环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在苯并呋喃环2-、4-、5-、6-或7-位上；二取代基为苯并呋喃环上的4，5-、5，6-、5，7-、4，6-、4，7-或6，7-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

14、2-苯并噻吩基：2-苯并噻吩环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在苯并噻吩环3-、4-、5-、6-或7-位上；二取代基为苯并噻吩环上的4，5-、5，6-、5，7-、4，6-、4，7-或6，7-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

15、3-苯并噻吩基：3-苯并噻吩环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在苯并噻吩环2-、4-、5-、6-或7-位上；二取代基为苯并噻吩环上的4，5-、5，6-、5，7-、4，6-、4，7-或6，7-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

16、2-呋喃基：2-呋喃环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在呋喃环3-、4-或5-位上；二取代基为呋喃环上的3，4-、3，5-或4，5-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基；

17、3-呋喃基：3-呋喃环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在呋喃环2-、4-或5-位上；二取代基为呋喃环上的2，4-、2，5-或4，5-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基；

18、2-噻吩基：2-噻吩环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在噻吩环3-、4-或5-位上；二取代基为噻吩环上的3，4-、3，5-或4，5-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基；

19、3-噻吩基：3-噻吩环上的取代基可以是一个或多个；例如单取代基在噻吩环2-、4-或5-位上；二取代基为噻吩环上的2，4-、2，5-或4，5-位，这些取代基分别独立，选自下列取代基：

20、苯乙烯基-：烯烃碳碳双键可以为Z-构型或E-构型；苯环上的取代基可以是一个或多个；例如苯环可以是单取代，也可以是二取代和三取代；单取代苯环上的取代位置为2-，3-或4-位；二取代苯环上取代基的位置为2，4-、3，4-、2,3-或3,4-；三取代苯环的取代位置为2，3，4-或3，4，5-位；这些取代基分别独立，可选自下列取代基：

H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基；当二取代苯环上的取代基位置为2,3-或3,4-时，相邻的两个取代基可以相互连接成五元或六元环，取代基选自-CH₂CH₂-、-CH₂-。

21、烷基-：C₁-C₄的直链或带支链的烷基；例如，甲基、乙基、异丙基、叔丁基等。

最优选的式I所示的化合物包括但不限定于I C所示的化合物

所述的

选自苯基、吡啶基、呋喃基、噻吩基、萘基、喹啉基、吲哚基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯乙烯基，C₁-C₆的直链或支链烷基；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH、N；当X选自N时，N直接与R₁₁相连构成C₆-C₁₀的芳基并五元二甲酰亚胺环或C₄-C₁₀的杂芳基并五元二甲酰亚胺环；这些芳基、杂芳基上又可以具有一个或多个取代基，取代基选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₃直链或支链的烷基、C₁-C₃直链或支链烷氧基、C₁-C₃直链或支链烷基氨基、C₂-C₃烯基、C₂-C₃炔基。

R₁₃表示一个或多个取代基、这些取代基可以和

在任意适宜的位置相连接，这些取代基独立的选自H、OH、SH、NH₂、COOH、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。最优选的式I C所示的化合物包括但不限定于I C1所示的化合物

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

R₁₃₁选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基；当二取代苯环上的取代基为相邻位置时，相邻的两个取代基可以相互连接成C₅-C₆环烷基并苯基，取代基选自-CH₂CH₂-、-CH₂-。如：四氢萘基。

最优选的式I C所示的化合物包括但不限定于I C2所示的化合物

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

R₁₃₂选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

最优选的式I C所示的化合物包括但不限定于I C3所示的化合物

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

R₁₃₃选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

最优选的式I C所示的化合物包括但不限定于I C4所示的化合物

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

R₁₃₄选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

最优选的式I C所示的化合物包括但不限定于I C5所示的化合物

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

R₁₃₅选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

最优选的式I C所示的化合物包括但不限定于I C6所示的化合物

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

R₁₃₆选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

最优选的式I C所示的化合物包括但不限定于I C7所示的化合物

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

R₁₃₇选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基；

R”为H、C₁-C₄直链或支链的烷基。

最优选的式I C所示的化合物包括但不限定于I C8所示的化合物

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

R₁₃₈选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

最优选的式I C所示的化合物包括但不限定于I C9所示的化合物

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

R₁₃₉选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

最优选的式I C所示的化合物包括但不限定于I C10所示的化合物

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

R₁₃₁₀选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基氨基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

最优选的式I C所示的化合物包括但不限定于I C11所示的化合物

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

R₁₃₁₁选自C₁-C₆的直链或带支链的烷基；例如，甲基、乙级、异丙基、叔丁基等。

最优选的式I所示的化合物包括但不限定于I D所示的化合物

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、N；当X选自N时，N直接与R₁₁相连构成C₆-C₁₀的芳基并五元二甲酰亚胺环或C₄-C₁₀的杂芳基并五元二甲酰亚胺环；这些芳基、杂芳基上又可以具有一个或多个取代基，取代基选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₃直链或支链的烷基、C₁-C₃直链或支链烷氧基、C₁-C₃直链或支链烷基氨基、C₂-C₃烯基、C₂-C₃炔基。

R₁₄表示一个或多个取代基、这些取代基可以在邻苯二甲酰亚胺基的芳环上任意适宜的位置相连接，这些取代基独立的选自H、OH、SH、NH₂、COOH、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₃直链或支链的烷基、C₁-C₃直链或支链烷氧基、C₁-C₃直链或支链烷基氨基、C₂-C₃烯基、C₂-C₃炔基。

本发明的C₁-C₈直链或支链烷基中优选的是C₁-C₆直链或支链烷基。本发明的C₁-C₆直链或支链烷基中优选的是C₁-C₄直链或支链烷基。本发明的C₁-C₄直链或支链烷基中优选的是甲基或乙基。

本发明的C₂-C₈烯基中优选的是C₂-C₆烯基。本发明的C₂-C₆烯基中优选的是C₂-C₄烯基。本发明的C₂-C₄烯基中优选的是乙烯基。

本发明的C₂-C₆炔基中优选的是C₂-C₄炔基。本发明的C₂-C₄炔基中优选的是C₂-C₃炔基。本发明的C₂-C₃炔基中优选的是乙炔基。

优选的C₁-C₆直链或支链烷基选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、戊基、异戊基。

优选的是C₁-C₄直链或支链烷基选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基。

优选的芳基选自苯基、萘基。

优选的杂芳基选自吡啶基、呋喃基、噻吩基、喹啉基、吲哚基、苯并噻吩基、苯并呋喃基。

所述的卤素选自、F、Cl、Br、I。

以上优选化合物与酸形成的药学上可接受的盐也构成本发明的一部分，本发明中的化合物分子中的碱性氮原子可以与酸形成盐，只要是与碱能够成盐，且是药学上可以接受的酸都可以，对此没有特别限制。可列举盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸等无机酸，草酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、柠檬酸、酒石酸、甲磺酸和对甲苯磺酸等有机酸。

本发明中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中：所述的化合物选自

本发明中的具有通式(Ⅰ)的ecteinascidins类似物及其药学上可接受的盐的某些步骤的合成方法在下列有关文献中已有所涉及，可参考文献Corey,E.J.etal.J.Am.Chem.Soc.1996,118,9202；Fukuyama,T.et al.,J.Am.Chem.Soc.2002,124,6552；Cuevas,C.et al.,Org.Lett.2000,2,2545；Cuevas,C.et al,J.Org.Chem.2003,68,8859；Zhu,J.et al,J.Am.Chem.Soc.2006,128,87；Danishefsky,S.J.et al.,Angew.Chem.Int.Ed.2006,45,1754；Chandrasekhar,S.et al.,Tetrahedron,2006,62,12098；Williams,R.M.et al.,Org.Lett.2006,8,3299；Williams,R.M.et al.,J.Org.Chem.2008,73,9594；Avendano,C.et al.,Tetrahedron,2005,61,7447；Avendano,C.et al.,Tetrahedron,2009,65,2201；Liu,Z.Z.et al.,Tetrahedron Lett.2003,44,7091；Liu,Z.Z.et al.,Bioorg.Med.Chem.Lett.2006,16,1282。Lu X,Pan X,Yang Y,etal.European Journal of Medicinal Chemistry,2017,135,260-269；Lu X,Pan X,GuanB,et al.Organic&biomolecular chemistry,2020,18(2),237-249。

具体的制备路线如下：

其中，n＝1，2，3；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈相互独立的选自：H、卤素、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、NO₂、CN、C₁-C₈的直链或支链的烷基、C₂-C₈的直链或支链烯基、C₂-C₄的炔基、C₁-C₈的直链或支链烷氧基；

R₉相互独立的选自：H，C₁-C₈的直链或支链的烷基、C₂-C₈的直链或支链烯基、C₂-C₄的炔基、C₁-C₈的直链或支链烷基酰基、C₁-C₈的直链或支链磺酰基、C₁-C₈的直链或支链烷氧酰基；

R₁₀选自C₆-C₁₀的芳基，C₄-C₁₀的杂芳基，C₆-C₁₀芳基取代的C₁-C₄直链或支链烷基、C₄-C₁₀杂芳基取代的C₁-C₄直链或支链烷基、C₆-C₁₀芳基取代的C₀-C₄直链或支链烷基乙烯基、C₁-C₁₀的直链或支链烷基，C₅-C₆环烷基并苯基；这些芳基、杂芳基、C₅-C₆环烷基并苯基上又可以具有一个或多个取代基，取代基选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₈直链或支链的烷基、C₁-C₈直链或支链烷氧基、C₁-C₈直链或支链烷基胺基、C₂-C₈直链或支链烯基、C₂-C₄直链或支链炔基、C₆-C₈的芳基、C₄-C₈的杂环芳基；

X选自O、NH、S、CH₂、N；当X选自N时，N直接与R₁₁相连构成C₆-C₁₀芳基并五元二甲酰亚胺环或C₄-C₁₀杂芳基并五元二甲酰亚胺环；这些芳基、杂芳基上又可以具有一个或多个取代基，取代基选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₃直链或支链烷基、C₁-C₃直链或支链烷氧基。

步骤一：采用原料Fmoc-Trp-OH，与酰氯化试剂反应生成A’-1，酰氯化试剂包括氯化亚砜，草酰氯；

步骤二：采用中间体A’-1，通过Arndt-Eistert反应得到A’-2；

步骤三：采用中间体A’-2，溶于甲醇与苯甲酸银与适宜的碱反应得到A’-3，优选的碱为碳酸钠；

步骤四：采用中间体A’-3，在碱性条件下脱除Fmoc保护基，得到A’-4，适宜的碱包括二乙胺、哌啶；

步骤五：采用A’-4，与苄氧乙醛在酸性条件下反应得到A’-5，适宜的酸性条件包括三氟乙酸，三氟甲磺酸；

步骤六：采用A’-5，在氢化铝锂存在下还原酯得到A’-6；

步骤七：将中间体A’-6溶于有机溶剂中，加入TBSCl和有机碱，得到A’；反应可选择的溶剂包括二氯甲烷、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、丙酮；

步骤八：采用四氢咔啉前体化合物A’和羧酸前体化合物B’在BOPCl的作用下室温反应48h，得中间体化合物1’；适宜的缩合剂包括DCC、EDCI、HATU；适宜的反应温度为-30℃～30℃；最适的反应温度为25℃；反应可选择的溶剂包括二氯甲烷、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、丙酮；

步骤九：采用中间体化合物1’，在四丁基氟化铵的作用下，脱去氧原子的叔丁基二甲基硅基保护基团，得到中间体化合物2’；

步骤十：采用中间体化合物2’，通过Swern氧化或戴斯马丁氧化等方法，得到中间体化合物3’；

步骤十一：采用中间体化合物3’，在三氟乙酸、三氟甲磺酸、冰乙酸、无水甲酸、以及路易斯酸的作用下，脱掉氮原子上的叔丁氧羰基保护基团，之后发生分子内的PS环合反应，得到中间体化合物4’；

步骤十二：采用中间体化合物4’，在甲醛水溶液和氰基硼氢化钠的作用下，对氮原子进行甲基化，得到中间体化合物5’；

步骤十三：采用中间体化合物5’，在10％氢氧化钯/碳催化下，通入氢气，在50psi的压力下，室温脱掉氧原子上的苄基保护基团，得到中间体化合物6’；

步骤十四：采用中间体化合物6’，在偶氮二羧酸二异丙酯、三苯基膦和邻苯二甲酰亚胺的作用下，发生Mitsunobu反应，得到中间体化合物7’，即为具有通式I B的目标产物。；

步骤十五：采用中间体化合物7’，在水合肼的作用下，使邻苯二甲酰亚胺基发生肼解，得到前体胺C’；

步骤十六：采用前体胺C’或6’，在缩合剂EDCI的作用下，和取代基R₁₀为前面通式I所列举情况的羧酸进行脱水缩合，得到具有通式I的目标产物。R₁₀的定义和前述相同。

本发明再一方面还涉及以本发明化合物作为活性成份的药物组合物。该药物组合物可根据本领域公知的方法制备。可通过将本发明化合物与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅剂结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。本发明化合物在其药物组合物中的含量通常为0.1-95重量％。

本发明化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等。

给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。

本发明化合物可以制成普通制剂、也制成是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。

为了将本发明化合物制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；湿润剂可以是水、乙醇、异丙醇等；粘合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与枸橼酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠等；润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。

还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。

为了将给药单元制成胶囊剂，可以将有效成分本发明化合物与稀释剂、助流剂混合，将混合物直接置于硬胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物先与稀释剂、黏合剂、崩解剂制成颗粒或微丸，再置于硬胶囊或软胶囊中。用于制备本发明化合物片剂的各稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、助流剂品种也可用于制备本发明化合物的胶囊剂。

为将本发明化合物制成注射剂，可以用水、乙醇、异丙醇、丙二醇或它们的混合物作溶剂并加入适量本领域常用的增溶剂、助溶剂、pH调剂剂、渗透压调节剂。增溶剂或助溶剂可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羟丙基-β-环糊精等；pH调剂剂可以是磷酸盐、醋酸盐、盐酸、氢氧化钠等；渗透压调节剂可以是氯化钠、甘露醇、葡萄糖、磷酸盐、醋酸盐等。如制备冻干粉针剂，还可加入甘露醇、葡萄糖等作为支撑剂。

此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其它添加剂。

为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。

本发明中的化合物可以和其他抗癌药物一起用于治疗肿瘤，这也是本发明的一部分，这些抗癌药物包括：taxol,paclitaxel,taxotere,docetaxel,vincristine,vinblastine,5-fluorouracil,cytarabine,gemcitabine,pentostatin,methotrexane,cyclophosphamide,ifosphamide,adriamycin,doxorubicin,pharmorubicin,epirubicin,etoposide,tamoxifen,flutamide,leuprorelin,goserelin,cyorotrone,octreotide,herceptin,cis-platin,carboplatin,oxaplatin,dexamethasone等。

本发明的化合物还可与属于以下各类抗肿瘤药物中的化合物联合使用，这也是本发明的一部分，这些药物包括：紫杉醇类、鬼臼毒素类、长春碱类、氮芥类、蒽醌类、雌激素类、抗雌激素类、雄激素类、抗雄激素类、抗体衍生物类、铂类、基质蛋白酶抑制剂类等。

本发明的化合物也可以和属于下列各类抗肿瘤药物的化合物联合使用，这也构成本发明的一部分，这些抗肿瘤药物包括：微管蛋白调节剂、抗代谢药物、烷基化药物、以DNA为靶标的抗肿瘤药物、以拓扑异构酶为靶标的药物、激素类和激素激动剂或拮抗剂、以癌细胞内信号传导为靶标的药物、基因治疗或反义治疗药物、抗体治疗药物、海洋来源的活性化合物、激素类似物、抗炎药物或止吐药物。

本发明的化合物单独或作为药用活性成分可用于治疗患有自白血病、黑色素瘤、胃癌、肺癌、乳腺癌、肾癌、肝癌、口腔表皮癌、宫颈癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌等病人。

本发明化合物药物组合物的给药剂量依照所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的个体情况，给药途径和剂型等可以有大范围的变化。一般来讲，本发明化合物的每天的合适剂量范围为0.001-150mg/Kg体重，优选为0.1-100mg/Kg体重，更优选为1-60mg/Kg体重，最优选为2-30mg/Kg体重。上述剂量可以一个剂量单位或分成几个剂量单位给药，这取决于医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。

本发明的化合物或组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用。当本发明的化合物与其它治疗药物存在协同作用时，应根据实际情况调整它的剂量。

有益技术效果：本发明的化合物均为未报道过的化合物，丰富了化合物库，完善了这类天然产物的构效关系，对该类型天然产物的开发提供了有力的数据支持。经过体外抗肿瘤测试发现本发明大部分化合物具有良好的抗肿瘤效果，在医药领域有利于对抗肿瘤新药的开发。

具体实施方式

下面列举实施例对本发明进行更为详细的说明，但本发明并不仅限于这些实施例。

化合物1-19的制备

可由共同前体胺C经一步酰化反应制备，前体胺C是经由四氢咔啉中间体A和羧酸中间体B经多步反应制备的。其中羧酸中间体B的制备方法可参考文献Liu,Z.Z.et al.,Bioorg.Med.Chem.Lett.2006,16,1282。

1、四氢咔啉中间体A的制备：

a:SOCl₂,DCM,reflux；b:TMSCH₂N₂,DCM；c:Silver benzoate,Na₂CO₃,MeOH；d:DEA,DCM；e:BnOCH₂CHO,TFA,CH₂Cl₂；f:LiAlH₄,THF；g:TBSCl,Imidazole,CH₂Cl₂

中间体A-1的制备：将5g的Fmoc-L-色氨酸溶于60mL二氯甲烷中，冰浴冷却至0℃，缓慢滴加0.85mL氯化亚砜，滴毕，升温至回流，反应2h。减压蒸干溶剂，残留固体用无水二氯甲烷溶解再减压蒸干，反复三次，得粗产物5g，直接用于下步反应。

中间体A-2的制备：将22g中间体A-1溶于165mL无水二氯甲烷，温度降至-60℃，缓慢滴加TMSCH₂N₂,滴加完毕降温至-15℃反应3h。减压蒸干溶剂，硅胶柱层析得白色固体粉末19.4g，两步收率75％。¹H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ8.12(s,1H),7.78–7.71(m,2H),7.63(d,J＝7.0Hz,1H),7.53(dd,J＝12.5,7.5Hz,2H),7.38(t,J＝7.5Hz,2H),7.34(d,J＝8.0Hz,1H),7.28(s,2H),7.20(t,J＝7.5Hz,1H),7.14(d,J＝7.0Hz,1H),6.97(s,1H),5.45(s,1H),5.07(s,1H),4.56(s,1H),4.42(d,J＝5.5Hz,2H),4.17(s,1H),3.22(tt,J＝20.5,14.0,11.5Hz,2H).

中间体A-3的制备：将19.2g中间体A-2溶于390mL无水甲醇中，依次加入13.5g碳酸钠和3.9g苯甲酸银，避光超声2h。过滤，减压蒸干滤液，硅胶柱层析得16g白色粉末，收率83％。¹H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ8.10(s,1H),7.74(d,J＝6.5Hz,2H),7.67–7.60(m,1H),7.54(s,2H),7.38(t,J＝6.0Hz,2H),7.33(d,J＝8.0Hz,1H),7.28(d,J＝6.0Hz,2H),7.17(d,J＝7.0Hz,1H),7.11(s,1H),6.95(s,1H),5.38–5.26(m,1H),4.41–4.33(m,3H),4.18(s,1H),3.65(s,3H),3.16–2.97(m,2H),2.54(s,2H).

中间体A-4的制备：将30g中间体A-3溶于68mL二氯甲烷，0℃下缓慢加入68mL二乙胺，室温反应3h。蒸干溶剂，快速硅胶柱层析得粗品15g，直接用于下步反应。

中间体A-5的制备：将13.2g中间体A-4溶于200mL二氯甲烷中，加入17g苄氧乙醛和5g粉末状

分子筛，冰浴冷却至0℃，缓慢滴加4.2mL三氟乙酸，滴毕，0℃搅拌1小时，再缓慢滴加2.5mL三氟乙酸，0℃搅拌4小时。过滤，饱和碳酸氢钠溶液调pH值至8，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，硅胶柱层析得棕红色油状液体15.4g，收率74％。¹H NMR(500MHz,Chloroform-d)δ8.53(s,1H),7.45(d,J＝7.0Hz,1H),7.37(s,5H),7.28(d,J＝7.5Hz,1H),7.14(t,J＝7.0Hz,1H),7.08(d,J＝7.0Hz,1H),4.62(s,2H),4.47–4.42(m,1H),3.81–3.77(m,1H),3.73(s,3H),3.66(t,J＝8.0Hz,1H),3.48–3.42(m,1H),2.82(d,J＝15.0Hz,1H),2.74(d,J＝15.0Hz,1H),2.66(dd,J＝15.0,7.5Hz,1H),2.58(m,J＝12.5Hz,1H).

中间体A-6的制备：将14g中间体A-5溶于134mL无水四氢呋喃中，冰浴冷却至0℃，缓慢加入1.46g四氢铝锂，在0℃反应5分钟。冰浴下缓慢滴加饱和碳酸氢钠水溶液淬灭反应，抽滤，滤液减压蒸除大部分四氢呋喃，残留物用二氯甲烷溶解，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，硅胶柱层析得白色固体8.4g，收率65％。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.44(s,1H),7.46(d,J＝7.6Hz,1H),7.36(t,J＝6.8Hz,5H),7.28(d,J＝8.0Hz,1H),7.19–7.12(m,1H),7.08(t,J＝7.6Hz,1H),4.62(s,2H),4.35(dq,J＝6.4,2.0Hz,1H),3.91(dt,J＝7.2,3.6Hz,2H),3.84(dd,J＝8.4,4.0Hz,1H),3.57(t,J＝8.8Hz,1H),3.21(ddt,J＝10.8,8.4,4.0Hz,1H),3.13(s,2H),2.84(ddd,J＝15.6,4.0,1.6Hz,1H),2.52(ddd,J＝15.6,10.8,2.4Hz,1H),1.84(dhept,J＝9.6,4.8,4.0Hz,2H),1.25(s,1H).

四氢咔啉中间体A的制备：将12.7g中间体A-6溶于180mL二氯甲烷中，加入9.1g咪唑室温搅拌5分钟，加入11.4g叔丁基二甲基氯硅烷，室温搅拌4小时。反应毕，饱和食盐水洗涤，减压蒸干，硅胶柱层析得棕红色油状液体15.3g，收率90％。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.37(s,1H),7.37(d,J＝7.6Hz,1H),7.28(d,J＝3.6Hz,5H),7.25–7.21(m,1H),7.17(d,J＝8.0Hz,1H),7.05–6.94(m,2H),4.52(s,2H),4.30–4.23(m,1H),3.78(dt,J＝10.4,5.2Hz,1H),3.71(ddd,J＝10.4,8.0,4.8Hz,1H),3.62(dd,J＝8.8,4.8Hz,1H),3.58–3.50(m,2H),3.05(ddt,J＝11.6,8.0,4.4Hz,1H),2.73–2.63(m,1H),2.39(ddd,J＝14.8,10.8,2.4Hz,1H),2.24(s,1H),1.81–1.63(m,2H),0.80(s,9H),-0.03(s,6H).

2、前体胺C的制备：

a:BOPCl,Et₃N,CH₂Cl₂；b:(Boc)₂O,DMAP,Et₃N,CH₂Cl₂；c:TBAF,THF；d:(COCl)₂,DMSO,Et₃N,CH₂Cl₂,-78℃；e:TFA；f:HCHO(37％),NaBH₃CN,CH₃COOH,CH₃OH；g:Pd(OH)₂,H₂(50psi),CH₃COOH,CH₃OH；h:Phthalimide,(Ph)₃P,DIAD,THF；i:N₂H₄·H₂O；j:R₁₀COOH,EDCI,DMAP,DCM.

中间体1的制备：将5g四氢咔啉中间体A与4g羧酸中间体B溶于50mL二氯甲烷中，依次加入3.4g BOPCl和3mL三乙胺，氩气保护，室温搅拌三天。加入二氯甲烷稀释反应液，饱和NaHCO3水溶液淬灭反应，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，硅胶柱层析得无色油状液体3.5g，收率42％。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.56(s,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,1H),7.41(s,2H),7.40(s,2H),7.37–7.34(m,1H),7.30(d,J＝8.0Hz,1H),7.20–7.14(m,1H),7.10(t,J＝7.2Hz,1H),6.64(p,J＝8.4Hz,3H),5.61(d,J＝8.4Hz,1H),5.45(d,J＝7.2Hz,1H),5.09–4.94(m,1H),4.75(d,J＝11.6Hz,1H),4.61(d,J＝11.6Hz,1H),4.46(q,J＝6.4Hz,1H),3.95(dd,J＝8.0,3.6Hz,1H),3.85(d,J＝10.8Hz,1H),3.76(s,3H),3.68(s,3H),3.59(dd,J＝12.4,7.6Hz,2H),3.11(dd,J＝13.6,6.8Hz,1H),2.96(dd,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.78(d,J＝15.6Hz,1H),2.49(d,J＝14.4Hz,1H),1.75–1.66(m,2H),1.45(s,9H),0.90(s,9H),0.06(s,6H).

中间体2的制备：将6.4g中间体1溶于96mL二氯甲烷中，加入2.8g(Boc)₂O,0.2gDMAP和2.4mL三乙胺，室温搅拌5小时。饱和NaHCO₃洗涤，饱和NaCl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得棕红色油状液体中间体2粗品，产物无需纯化直接用于下步反应。

中间体3的制备：将4g中间体2粗品溶于60mL四氢呋喃中，向其中加入9.4mlL(1mol·L^-1)四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液，室温反应2小时。加入饱和氯化铵水溶液淬灭反应，减压蒸除大部分四氢呋喃，加入二氯甲烷溶解浓缩物，饱和NaCl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，硅胶柱层析得淡黄色油状液体2.8g，两步总收率81％。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.10(d,J＝8.0Hz,1H),7.31(s,1H),7.30–7.28(m,1H),7.28–7.27(m,1H),7.25–7.24(m,1H),7.23(s,1H),7.22(d,J＝1.6Hz,1H),7.19(d,J＝2.0Hz,1H),6.77(d,J＝1.6Hz,1H),6.68(dd,J＝8.0,2.0Hz,1H),6.59(d,J＝8.0Hz,2H),5.50(d,J＝9.6Hz,1H),5.42–5.30(m,1H),4.49(s,1H),4.38(d,J＝12.4Hz,1H),3.85(s,2H),3.81(dd,J＝11.2,3.2Hz,1H),3.77(s,3H),3.73(dd,J＝10.4,3.2Hz,1H),3.67(s,3H),3.64–3.56(m,1H),3.50–3.44(m,1H),3.15(ddd,J＝16.4,8.0,1.6Hz,1H),2.98(dd,J＝13.6,8.0Hz,1H),2.88(dd,J＝13.6,6.8Hz,1H),2.47(d,J＝16.4Hz,1H),2.22(ddd,J＝16.0,7.6,1.6Hz,1H),2.08(ddd,J＝15.6,9.2,2.8Hz,1H),1.63(s,9H),1.40(s,9H).

中间体4的制备：将0.57mL草酰氯溶于100mL无水二氯甲烷中，氩气保护下，降至-78℃，将1mL二甲基亚砜用20mL二氯甲烷稀释，缓慢滴加二甲基亚砜的二氯甲烷溶液，滴毕，反应30分钟后，将2.5g中间体3用20mL二氯甲烷稀释，缓慢滴加中间体3的二氯甲烷溶液，滴毕，反应1小时，滴加2.3mL三乙胺，反应30分钟，缓慢升至室温。饱和NaCl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，产物不经纯化直接用于下步反应。

中间体5的制备：冰浴中将6.5g中间体4粗品溶于80mL无水二氯甲烷，缓慢加入15mL三氟乙酸中，冰浴搅拌4小时。反应毕，蒸除大部分三氟乙酸，乙酸乙酯稀释，饱和NaHCO₃将反应液pH值调至8，饱和NaCl洗，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，硅胶柱层析得白色固体2.1g，两步总收率47％。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.41(s,1H),7.50(d,J＝7.6Hz,1H),7.32–7.22(m,5H),7.14(h,J＝7.2Hz,4H),6.59(s,1H),6.48(s,1H),5.53(dd,J＝8.8,3.2Hz,1H),5.00(dt,J＝11.6,6.4Hz,1H),4.37(dd,J＝10.8,6.4Hz,3H),4.17(d,J＝11.6Hz,1H),3.84(s,3H),3.79(s,3H),3.25(dd,J＝12.0,3.6Hz,3H),3.19(dd,J＝15.6,6.8Hz,1H),2.89(t,J＝8.8Hz,1H),2.80(dd,J＝15.6,6.8Hz,1H),2.45(dd,J＝13.6,10.0Hz,1H),2.08(ddd,J＝14.8,11.2,4.0Hz,1H).

中间体6的制备：将1g中间体5溶于20mL无水甲醇中，依次加入2mL 37％的甲醛水溶液，0.25g氰基硼氢化钠和2mL冰醋酸，室温反应30分钟。反应毕，冰浴下饱和Na₂CO₃淬灭反应，并调pH至9，乙酸乙酯萃取，饱和NaCl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，硅胶柱层析得白色固体0.87g，收率85％。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.80(s,1H),7.51(d,J＝8.4Hz,1H),7.34(d,J＝7.6Hz,1H),7.21–7.03(m,8H),6.68(s,1H),6.56(s,1H),5.59(dd,J＝8.0,3.6Hz,1H),4.63(td,J＝10.0,5.6Hz,1H),4.38(d,J＝12.0Hz,1H),4.26(d,J＝12.0Hz,1H),3.96–3.90(m,1H),3.87(s,3H),3.86(s,3H),3.77–3.66(m,2H),3.48–3.34(m,2H),3.05(dd,J＝14.8,5.6Hz,1H),2.91(dd,J＝17.4,3.6Hz,1H),2.75(dd,J＝14.8,10.8Hz,1H),2.47(dd,J＝15.2,9.6Hz,1H),2.29(s,3H),1.86(dt,J＝15.2,8.8Hz,1H).

中间体7的制备：将2.2g中间体6置于氢化瓶中，加入30mL无水甲醇溶解，依次加入2.2g Pd(OH)₂/C和1mL冰醋酸，通入氢气，于50psi压力下反应24小时。过滤，滤液于冰浴下用饱和Na₂CO₃水溶液调pH值至9，整除大部分甲醇，乙酸乙酯溶解，饱和NaCl洗涤，减压蒸干，硅胶柱层析得白色固体1.3g，收率71％。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.15(s,1H),7.51(d,J＝7.6Hz,1H),7.38(d,J＝7.6Hz,1H),7.15(dtd,J＝21.2,7.2,1.2Hz,2H),6.69(s,1H),6.60(s,1H),5.75–5.57(m,1H),4.54(ddt,J＝12.0,8.8,5.2Hz,1H),4.42(s,1H),3.98–3.92(m,1H),3.89(s,3H),3.88(s,3H),3.81(dd,J＝10.8,6.8Hz,1H),3.74–3.62(m,3H),3.46(dd,J＝17.6,10.4Hz,1H),3.07(dd,J＝15.2,5.2Hz,1H),2.98(dd,J＝17.6,3.2Hz,1H),2.77(dd,J＝15.2,11.6Hz,1H),2.56(dd,J＝15.2,9.6Hz,1H),2.27(s,3H),1.96(dt,J＝15.6,9.2Hz,1H).

中间体8(化合物19)的制备：将0.65g中间体8溶于10mL无水四氢呋喃中，加入0.43g邻苯二甲酰亚胺和0.76g三苯基膦，降温至-30℃，将0.59g偶氮二甲酸二异丙酯用3mL无水四氢呋喃稀释，氩气保护下，向其中缓慢滴加偶氮二甲酸二异丙酯的四氢呋喃溶液，滴毕，于-10℃反应1小时。在冰浴中用饱和NaHCO₃水溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，饱和NaCl洗涤，减压蒸干，硅胶柱层析得白色固体0.7g，收率83％。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.83(s,1H),7.67(tdd,J＝8.8,5.6,3.6Hz,2H),7.57–7.44(m,2H),7.35(d,J＝8.0Hz,1H),7.20–7.09(m,2H),6.63(s,1H),6.45(s,1H),6.10(dd,J＝8.4,3.6Hz,1H),4.59(s,1H),4.03(dd,J＝14.4,3.6Hz,1H),3.97(d,J＝8.8Hz,1H),3.94(s,4H),3.85(s,3H),3.75(d,J＝6.4Hz,2H),3.24–3.05(m,2H),3.01–2.86(m,1H),2.69(d,J＝16.8Hz,1H),2.53(dd,J＝15.6,9.6Hz,1H),2.30(q,J＝8.4,7.6Hz,1H),2.22(s,3H).

前体胺C的制备：将0.1g中间体9溶于无水5mL无水乙醇中，加入1mL水合肼，升温至50℃，反应1小时。减压蒸除大部分溶剂，乙酸乙酯溶解，饱和NaCl洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，硅胶柱层析得白色固体0.06g，收率77％。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.32(s,1H),7.32–7.23(m,1H),7.18(d,J＝7.6Hz,1H),7.10–7.03(m,1H),6.99(t,J＝7.6Hz,1H),6.67(s,1H),6.44(s,1H),5.28–5.14(m,1H),4.42(d,J＝9.6Hz,1H),4.21–4.12(m,2H),3.97(d,J＝4.4Hz,1H),3.93(s,3H),3.84(ddt,J＝11.6,6.8,2.8Hz,1H),3.77(s,3H),3.56–3.43(m,1H),2.90(dt,J＝14.8,4.8Hz,1H),2.73–2.69(m,4H),2.10(t,J＝14.4Hz,2H),1.94–1.80(m,1H).

2、化合物1-19的制备

化合物1的制备：

将10mg前体胺C溶于1mL二氯甲烷中，室温下加入3.5mg苯并呋喃-2-羧酸，6mgEDCI和8.5mgDMAP，氩气保护下室温反应30分钟。二氯甲烷稀释反应液，饱和NaHCO₃水溶液洗涤，减压蒸干，硅胶柱层析，得白色固体8mg，收率66％。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.97(s,1H),7.50(d,J＝7.6Hz,1H),7.42(s,1H),7.37(d,J＝7.2Hz,1H),7.14(dt,J＝19.2,7.2Hz,2H),6.97(d,J＝3.2Hz,1H),6.60(s,1H),6.58(s,1H),6.44(dd,J＝3.2,1.6Hz,1H),5.67–5.52(m,1H),4.79–4.54(m,1H),4.08–3.94(m,1H),3.87(s,3H),3.86(s,3H),3.82–3.69(m,1H),3.41(dt,J＝12.4,6.4Hz,2H),3.08(dd,J＝15.2,4.8Hz,1H),2.95(s,1H),2.85–2.74(m,1H),2.49(dd,J＝15.2,9.6Hz,1H),2.33(s,3H),2.05–1.91(m,1H),1.74–1.51(m,1H).

化合物2的制备：

化合物2的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成间三氟甲基苯甲酸。¹HNMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.06(s,1H),8.06(s,1H),7.94(d,J＝7.6Hz,1H),7.73–7.64(m,2H),7.56–7.50(m,2H),7.46(td,J＝7.6,2.4Hz,2H),7.35(s,1H),7.14(q,J＝8.0,7.2Hz,2H),6.57(d,J＝7.2Hz,2H),5.77(dd,J＝8.0,4.4Hz,1H),4.67(dd,J＝15.6,8.8Hz,1H),4.04–3.92(m,1H),3.87(s,3H),3.82(s,3H),3.67(dt,J＝13.6,4.4Hz,2H),3.58(dd,J＝14.8,6.8Hz,1H),3.40(dd,J＝17.6,10.0Hz,1H),3.12(dd,J＝14.8,4.4Hz,1H),2.96–2.77(m,2H),2.58(dd,J＝15.2,9.2Hz,1H),2.30(s,3H),2.04–1.88(m,1H),1.76–1.53(m,1H).

化合物3的制备：

化合物3的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成对氯苯甲酸。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.09(s,1H),7.73(s,1H),7.64(d,J＝8.4Hz,2H),7.51(d,J＝7.2Hz,1H),7.33(d,J＝8.4Hz,2H),7.13(q,J＝7.6,6.8Hz,2H),6.57(s,1H),6.52(s,1H),5.85–5.71(m,1H),4.83–4.54(m,1H),4.00–3.91(m,1H),3.87(s,3H),3.84(s,3H),3.75–3.62(m,2H),3.58(dd,J＝12.8,5.6Hz,1H),3.35(dd,J＝17.2,10.0Hz,1H),3.11(dd,J＝15.2,4.8Hz,1H),2.97–2.69(m,2H),2.56(dd,J＝15.2,10.0Hz,1H),2.30(s,3H),2.08–1.84(m,1H),1.73–1.53(m,1H).

化合物4的制备：

化合物4的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成苯甲酸。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.92(s,1H),7.72(d,J＝7.2Hz,2H),7.54–7.43(m,2H),7.38(t,J＝7.2Hz,2H),7.13(q,J＝8.0,6.8Hz,2H),6.57(s,1H),6.54(s,1H),5.69(dd,J＝7.2,3.6Hz,1H),4.70(s,1H),4.06–3.92(m,1H),3.87(s,3H),3.83(s,3H),3.79–3.69(m,1H),3.50(dt,J＝12.8,6.4Hz,1H),3.36(dd,J＝17.2,10.0Hz,1H),3.10(dd,J＝15.2,4.8Hz,1H),2.95–2.77(m,2H),2.54(dd,J＝15.2,9.6Hz,1H),2.32(s,3H),2.04–1.88(m,1H),1.76–1.51(m,1H).

化合物5的制备：

化合物5的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成对甲氧基苯甲酸。¹HNMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.42(s,1H),7.66(d,J＝8.8Hz,2H),7.55(s,1H),7.51(d,J＝7.6Hz,1H),7.36(d,J＝7.6Hz,1H),7.19–7.07(m,2H),6.84(d,J＝8.8Hz,2H),6.62–6.50(m,2H),5.85–5.68(m,1H),4.63(t,J＝12.0Hz,1H),3.92(d,J＝8.4Hz,1H),3.87(s,3H),3.83(s,3H),3.81(s,3H),3.74–3.64(m,2H),3.55(ddd,J＝13.6,8.0,5.6Hz,1H),3.37(dd,J＝17.6,10.0Hz,1H),3.07(dd,J＝15.2,5.2Hz,1H),2.94–2.76(m,2H),2.53(dd,J＝15.2,9.6Hz,1H),2.27(s,3H),1.95(dt,J＝16.4,8.8Hz,1H).

化合物6的制备：

化合物6的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成吡啶-2-羧酸。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.99(s,1H),8.49(d,J＝4.4Hz,1H),8.45(s,1H),7.99(d,J＝7.6Hz,1H),7.75(t,J＝7.6Hz,1H),7.51(d,J＝7.6Hz,1H),7.39(d,J＝8.0Hz,1H),7.37–7.33(m,1H),7.15(dt,J＝21.6,7.2Hz,2H),6.56(s,2H),5.69(s,1H),4.66(s,1H),4.04–3.93(m,2H),3.87(s,3H),3.84(s,3H),3.75(s,1H),3.57(dt,J＝12.0,5.2Hz,1H),3.39(dd,J＝17.6,10.0Hz,1H),3.07(dd,J＝15.2,5.2Hz,1H),2.99(d,J＝17.2Hz,1H),2.89–2.77(m,1H),2.46(dd,J＝15.2,9.6Hz,1H),2.30(s,3H),1.95(dt,J＝16.4,8.8Hz,1H).

化合物7的制备：

化合物7的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成喹啉-2-羧酸。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.24(s,1H),8.62(s,1H),8.14(d,J＝8.4Hz,1H),8.05(d,J＝8.4Hz,1H),7.95(d,J＝8.4Hz,1H),7.77(d,J＝8.0Hz,1H),7.66(t,J＝7.2Hz,1H),7.54(d,J＝7.2Hz,2H),7.42(d,J＝8.0Hz,1H),7.17(dt,J＝21.6,7.2Hz,2H),6.52(s,1H),6.31(s,1H),5.91(s,1H),4.67(s,1H),4.04–3.92(m,2H),3.85(s,3H),3.81(d,J＝8.8Hz,1H),3.75–3.68(m,1H),3.64(s,3H),3.35(dd,J＝17.6,10.0Hz,1H),3.10(dd,J＝15.2,5.6Hz,1H),3.01(d,J＝16.8Hz,1H),2.92(dd,J＝14.8,12.0Hz,1H),2.50(dd,J＝15.2,9.6Hz,1H),2.27(s,3H),1.96(dt,J＝16.4,8.8Hz,1H).

化合物8的制备：

化合物8的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成苯并噻吩-2-羧酸。¹HNMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.06(s,1H),7.80(t,J＝6.4Hz,2H),7.70(s,1H),7.52(d,J＝7.6Hz,1H),7.37(p,J＝7.2,6.4Hz,3H),7.15(dt,J＝14.8,6.8Hz,2H),6.55(s,1H),6.40(s,1H),5.92–5.68(m,1H),4.64(s,1H),3.94(d,J＝6.8Hz,1H),3.87(s,3H),3.75(d,J＝13.6Hz,2H),3.65(s,4H),3.35(dd,J＝17.6,10.4Hz,1H),3.10(dd,J＝15.2,5.2Hz,1H),2.97–2.79(m,2H),2.55(dd,J＝15.2,9.6Hz,1H),2.27(s,3H),2.08–1.87(m,2H),1.76–1.50(m,1H).

化合物9的制备：

化合物9的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成2-萘甲酸。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.10(s,1H),8.24(s,1H),7.91–7.84(m,1H),7.83–7.75(m,4H),7.52(q,J＝7.6,7.2Hz,3H),7.36(d,J＝6.4Hz,1H),7.15(dt,J＝15.2,6.8Hz,2H),6.54(s,1H),6.36(s,1H),5.92–5.72(m,1H),4.80–4.59(m,1H),4.06–3.94(m,1H),3.85(s,3H),3.83–3.72(m,2H),3.70–3.64(m,1H),3.62(s,3H),3.32(dd,J＝17.6,10.8Hz,1H),3.11(dd,J＝15.2,5.2Hz,1H),2.95–2.80(m,2H),2.54(dd,J＝15.2,9.2Hz,1H),2.29(s,3H),2.09–1.93(m,1H).

化合物10的制备：

化合物10的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成噻吩-2-羧酸。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.00(s,1H),7.60(d,J＝7.2Hz,1H),7.49(d,J＝7.6Hz,1H),7.42(dd,J＝13.2,3.6Hz,2H),7.38–7.30(m,1H),7.20–7.07(m,2H),7.06–6.98(m,1H),6.67–6.48(m,2H),5.69(dd,J＝7.6,4.4Hz,1H),4.79–4.54(m,1H),3.84(d,J＝11.6Hz,7H),3.77–3.63(m,2H),3.56–3.43(m,1H),3.34(d,J＝9.2Hz,1H),3.08(dd,J＝15.6,5.2Hz,1H),2.97–2.75(m,2H),2.53(dd,J＝15.2,9.1Hz,1H),2.28(s,3H),2.11–1.88(m,1H),1.81–1.51(m,1H).

化合物11的制备：

化合物11的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成间三氟甲基肉桂酸。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.24(s,1H),7.74(s,1H),7.63(dd,J＝12.7,7.9Hz,2H),7.56–7.47(m,2H),7.43–7.35(m,1H),7.23–7.09(m,2H),6.63(d,J＝6.6Hz,2H),6.46(d,J＝15.6Hz,1H),5.62(s,1H),4.91–4.68(m,1H),4.08(dd,J＝20.4,18.1Hz,1H),3.90(s,3H),3.80(s,3H),3.61–3.40(m,2H),3.14(d,J＝14.4Hz,1H),2.92–2.79(m,1H),2.70–2.30(m,4H),2.18–1.99(m,1H),1.68(s,3H)

化合物12的制备：

化合物12的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成对氟苯甲酸。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.96(s,1H),7.72(dd,J＝8.4,5.6Hz,2H),7.51(d,J＝6.8Hz,1H),7.40–7.30(m,1H),7.21–7.09(m,2H),7.05(t,J＝8.4Hz,2H),6.56(s,1H),6.52(s,1H),5.73(dd,J＝8.0,4.4Hz,1H),4.84–4.54(m,1H),3.85(d,J＝16.4Hz,6H),3.77–3.62(m,2H),3.59–3.50(m,1H),3.36(dd,J＝17.6,10.8Hz,1H),3.11(dd,J＝15.2,4.8Hz,1H),2.97–2.71(m,2H),2.56(dd,J＝14.8,9.6Hz,1H),2.30(s,3H),2.07–1.85(m,1H),1.74–1.51(m,1H).

化合物13的制备：

化合物13的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成对乙基苯甲酸。¹HNMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.10(s,1H),7.64(d,J＝7.2Hz,2H),7.49(d,J＝6.4Hz,1H),7.38–7.30(m,1H),7.19(d,J＝7.6Hz,2H),7.16–7.08(m,2H),6.57(d,J＝6.8Hz,2H),5.68(s,1H),4.84–4.61(m,1H),4.08–3.95(m,1H),3.87(s,3H),3.83(s,3H),3.74(d,J＝8.4Hz,1H),3.54–3.42(m,1H),3.37(dd,J＝17.2,10.0Hz,1H),3.09(dd,J＝15.2,4.4Hz,1H),3.02–2.88(m,1H),2.87–2.76(m,1H),2.66(q,J＝7.6Hz,2H),2.52(dd,J＝15.2,9.6Hz,1H),2.33(s,3H),2.01(d,J＝7.2Hz,1H),1.75–1.58(m,1H),1.23(t,J＝7.6Hz,3H).

化合物14的制备：

化合物14的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成肉桂酸。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.37(s,1H),7.51(d,J＝6.4Hz,1H),7.47–7.41(m,2H),7.39(d,J＝7.6Hz,1H),7.32(s,3H),7.14(dq,J＝14.0,6.4Hz,2H),6.79(s,1H),6.55(d,J＝13.6Hz,2H),6.34(d,J＝15.6Hz,1H),5.61(s,1H),4.68(s,1H),3.95(s,1H),3.86(d,J＝2.4Hz,3H),3.72(s,4H),3.57–3.47(m,1H),3.42(dd,J＝16.8,9.6Hz,1H),3.15–3.05(m,1H),2.99(d,J＝15.6Hz,1H),2.90–2.78(m,1H),2.51(dd,J＝14.6,9.6Hz,1H),2.30(s,3H),2.06–1.89(m,1H),1.80–1.55(m,1H).

化合物15的制备：

化合物15的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成2-吲哚甲酸。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.47(s,1H),9.06(s,1H),7.77–7.47(m,3H),7.33(s,2H),7.24–7.18(m,1H),7.18–7.04(m,3H),6.85(s,1H),6.53(s,1H),6.38(s,1H),5.83(s,1H),4.59(s,1H),4.06–3.91(m,1H),3.85(s,3H),3.67(s,5H),3.43–3.22(m,1H),3.08(d,J＝14.4Hz,1H),2.85(d,J＝12.0Hz,2H),2.50(d,J＝10.8Hz,1H),2.25(s,3H),2.00–1.85(m,1H),1.83–1.51(m,1H).

化合物16的制备：

化合物16的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成5,6,7,8-四氢-1-萘甲酸。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.49(s,1H),7.51(d,J＝7.6Hz,1H),7.37(d,J＝7.6Hz,1H),7.14(dt,J＝22.0,7.2Hz,2H),7.07–7.01(m,2H),6.85(s,1H),6.62(s,1H),6.57(s,1H),5.58(s,1H),4.74(s,1H),3.92(d,J＝7.6Hz,1H),3.86(s,3H),3.85(s,3H),3.81–3.66(m,2H),3.37(dd,J＝17.2,9.2Hz,2H),3.11(dd,J＝15.2,5.2Hz,1H),2.97(d,J＝16.0Hz,1H),2.86(dd,J＝15.2,10.4Hz,1H),2.73(t,J＝6.0Hz,2H),2.63(t,J＝5.6Hz,2H),2.60–2.48(m,1H),2.32(s,3H),1.98(dt,J＝16.0,7.6Hz,1H),1.77–1.65(m,2H),1.64–1.54(m,2H)

化合物17的制备：

化合物17的制备方法同化合物1，将苯并呋喃-2-羧酸替换成呋喃-2-羧酸。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.97(s,1H),7.50(d,J＝7.6Hz,1H),7.42(s,1H),7.37(d,J＝7.2Hz,1H),7.14(dt,J＝19.2,7.2Hz,2H),6.97(d,J＝3.2Hz,1H),6.60(s,1H),6.58(s,1H),6.44(dd,J＝3.2,1.6Hz,1H),5.67–5.52(m,1H),4.79–4.54(m,1H),4.08–3.94(m,1H),3.87(s,3H),3.86(s,3H),3.82–3.69(m,1H),3.41(dt,J＝12.4,6.4Hz,2H),3.08(dd,J＝15.2,4.8Hz,1H),2.95(s,1H),2.85–2.74(m,1H),2.49(dd,J＝15.2,9.6Hz,1H),2.33(s,3H),2.05–1.91(m,1H),1.74–1.51(m,1H).

化合物18的制备：

将10mg前体胺C溶于2mL二氯甲烷中，室温下加入2.7mg乙酸酐，3mg三乙胺和0.6mgDMAP，氩气保护下室温反应30分钟。二氯甲烷稀释反应液，饱和NaHCO3水溶液洗涤，减压蒸干，硅胶柱层析，得白色固体10mg，收率91％。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.24(s,1H),7.50(d,J＝8.4Hz,1H),7.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.15(t,J＝7.2Hz,1H),7.09(t,J＝7.2Hz,1H),6.56(s,1H),6.44(s,1H),5.11–4.96(m,1H),4.28(d,J＝10.0Hz,1H),3.82(s,3H),3.75(s,3H),4.04–3.92(m,2H),3.41–3.36(m,2H)3.20(dd,J＝15.2,7.2Hz,1H),2.88–2.78(m,2H),2.64–2.58(m,1H),2.40(dd,J＝17.6,8.8Hz,1H),2.27(s,3H),2.04–1.95(m,1H),1.70(s,3H).

化合物19的制备：

化合物19的制备方法及数据参见中间体8的制备。

药理实验：

实验材料：

K562(人白血病细胞)、MCF-7(人乳腺癌细胞)、HCT8(人结肠癌细胞)、H-460(人肺癌细胞):购于中国医学科学院基础医学研究所细胞中心。RPMI 1640培养基(批号10-040-CVR)；DMEM培养基(10-013-CVR)，均为Corning公司产品。

CCK8法测定体外抗肿瘤活性:

选取人实体瘤细胞株：K562(人白血病细胞)、MCF-7(人乳腺癌细胞)、HCT8(人结肠癌细胞)、H-460(人肺癌细胞)。操作步骤：将5000个细胞(K562,MCF-7)或7000个细胞(HCT-8，H460)接种在96孔板中，在37°细胞培养箱中过夜培养。次日将96孔板中的培养基轻轻吸出，加入200μL浓度为100μM、50μM、25μM、12.5μM、6μM、1.5μM的药物溶液，在细胞培养箱中培养48小时。每孔加入20μL的CCK Solution。在细胞培养箱中继续培养4小时，具体培养时间根据细胞密度而定。用酶标仪测定450nm处的吸光值。

实验结果：

表1.化合物对四种人体肿瘤细胞株的体外抑制活性

体外活性研究结果分析与讨论：

该类化合物的抗肿瘤活性主要在10^-4～10^-6mol/L的范围，其中化合物15抗肿瘤活性最强，由以上活性数据可以看出，该类含中环的四氢咔啉-四氢异喹啉杂合结构为母体的化合物活性保持在微摩尔水平。

本发明化合物C-27位取代基的改变对抗肿瘤活性影响明显，其中C-26位为吲哚甲酰胺衍生物时有较好的抗肿瘤活性；对比化合物4，化合物9和化合物16，苯环上的位阻改变对于抗肿瘤活性影响不大；对比化合物2，3，4，5，12，13改变苯环上取代基电性对于抗肿瘤活性影响不大。C-26位为芳基丙烯酰胺时，对H460人肺癌细胞选择性较好。

Claims

1.通式I所示的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，n＝1，2，3；

2.根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

n＝1，2；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈相互独立的选自：H、卤素、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、NO₂、CN、C₁-C₆的直链或支链的烷基、C₂-C₆直链或支链的烯基、C₂-C₃的炔基、C₁-C₆直链或支链的烷氧基；

R₉相互独立的选自：H，C₁-C₆的直链或带支链的烷基、C₂-C₆直链或支链的烯基、C₂-C₃的炔基、C₁-C₆直链或支链的烷基酰基、C₁-C₆直链或支链的磺酰基、C₁-C₆直链或支链的烷氧酰基；

R₁₀选自C₆-C₁₀的芳基、C₄-C₁₀的杂芳基、C₆-C₁₀芳基取代的C₁-C₂烷基、C₄-C₁₀杂芳基取代的C₁-C₂烷基、C₆-C₈芳基取代的C₀-C₂烷基乙烯基、C₁-C₆的直链或带支链的烷基、C₅-C₆环烷基并苯基；这些芳基、杂芳基、C₅-C₆环烷基并苯基上又可以具有一个或多个取代基，取代基选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₆直链或带支链的烷基、C₁-C₆直链或支链烷氧基、C₁-C₆直链或支链烷基氨基、C₂-C₆直链或支链烯基、C₂-C₃炔基、C₆-C₈的芳基、C₄-C₈的杂环芳基；

X选自O、NH、CH₂、N；当X选自N时，N直接与R₁₁相连构成C₆-C₁₀的芳基并五元二甲酰亚胺环或C₄-C₁₀的杂芳基并五元二甲酰亚胺环；这些芳基、杂芳基上又可以具有一个或多个取代基，取代基选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷氧基。

3.根据权利要求1-2中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IA所示

所述的

n＝1，2；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈相互独立的选自：H、卤素、OH、SH、NH₂、COOH、醛基、氨基甲酰基、NO₂、CN、-CH₃、-C₂H₅、-OCH₃、-OC₂H₅；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH；

R₁₁表示一个或多个取代基、这些取代基可以和

环在任意适宜的位置相连接，这些取代基独立的选自H、OH、SH、NH₂、CF₃、COOH、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基胺基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

4.根据权利要求3中的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IA 1所示

n＝1，2；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇、R₈相互独立的选自：H、卤素、OH、SH、NH₂、COOH、醛基、氨基甲酰基、NO₂、CN、-CH₃、-C₂H₅、-OCH₃、-OCH₂CH₃；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH；

R₁₁₁选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基胺基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基；当二取代苯环上的取代基为相邻位置时，相邻的两个取代基可以相互连接成C₅-C₆环烷基并苯基。

5.根据权利要求3中的化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IA2所示

n＝1，2；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH；

R₁₁₂选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基胺基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

6.根据权利要求3中的化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IA3所示

n＝1，2；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH；

R₁₁₃选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基胺基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

7.根据权利要求3中的化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IA4所示

n＝1，2；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH；

R₁₁₄选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基胺基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

8.根据权利要求3中的化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IA5所示

n＝1，2；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH；

R₁₁₅选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基胺基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

9.根据权利要求3中的化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IA6所示

n＝1，2；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH；

R₁₁₆选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基胺基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

10.根据权利要求3中的化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IA7所示

n＝1，2；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH；

R₁₁₇选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基胺基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基；

R’为H、C₁-C₄直链或支链的烷基。

11.根据权利要求3中的化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IA8所示

n＝1，2；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH；

R₁₁₈选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基胺基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

12.根据权利要求3中的化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IA9所示

n＝1，2；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH；

R₁₁₉选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基胺基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

13.根据权利要求3中的化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IA10所示

n＝1，2；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH；

R₁₁₁₀选自H、OH、SH、NH₂、COOH、CF₃、醛基、氨基甲酰基、F、Cl、Br、I、NO₂、CN、C₁-C₄直链或支链的烷基、C₁-C₄直链或支链烷氧基、C₁-C₄直链或支链烷基胺基、C₂-C₄直链或支链烯基、C₂-C₃炔基。

14.根据权利要求3中的化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IA11所示

n＝1，2；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

X选自O、NH；

R₁₁₁₁选自C₁-C₆的直链或支链的烷基。

15.根据权利要求1-2中任一项的化合物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的化合物如式IB所示

n＝1，2；

R₉相互独立的选自：H，-CH₃、-COCH₃、-COOC(CH₃)₃；

R₁₂表示一个或多个取代基、这些取代基可以和苯环在任意适宜的位置相连接，这些取代基独立的选自H、OH、SH、NH₂、COOH、醛基、氨基甲酰基、卤素、NO₂、CN、C₁-C₃直链或支链的烷基、C₁-C₃直链或支链烷氧基、C₁-C₃直链或支链烷基胺基、C₂-C₃烯基、C₂-C₃炔基。

16.根据权利要求1-2中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其中：所述的化合物选自

17.一种药物组合物，其特征在于，含有权利要求1-16中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，及药学上可接受的载体。

18.根据权利要求17中任一项的药物组合物，其还包含可与所述化合物及其药学上可接受的盐联合给药的其它活性成分。

19.权利要求1～16中任一项的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗下列疾病的药物中的应用，其特征在于，所述疾病选自：白血病、黑色素瘤、胃癌、肺癌、乳腺癌、肾癌、肝癌、口腔表皮癌、宫颈癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌或结肠癌。