CN113475388B - 一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法 - Google Patents

一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN113475388B
CN113475388B CN202110968399.2A CN202110968399A CN113475388B CN 113475388 B CN113475388 B CN 113475388B CN 202110968399 A CN202110968399 A CN 202110968399A CN 113475388 B CN113475388 B CN 113475388B
Authority
CN
China
Prior art keywords
phalaenopsis
pollination
rhynchophylla
flower
waxy
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202110968399.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113475388A (zh
Inventor
陈和明
吕复兵
李佐
肖文芳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Environmental Horticulture Institute of Guangdong Academy of Agricultural Sciences
Original Assignee
Environmental Horticulture Institute of Guangdong Academy of Agricultural Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Environmental Horticulture Institute of Guangdong Academy of Agricultural Sciences filed Critical Environmental Horticulture Institute of Guangdong Academy of Agricultural Sciences
Priority to CN202110968399.2A priority Critical patent/CN113475388B/zh
Publication of CN113475388A publication Critical patent/CN113475388A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113475388B publication Critical patent/CN113475388B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H1/00—Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
    • A01H1/02—Methods or apparatus for hybridisation; Artificial pollination ; Fertility
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/002—Culture media for tissue culture
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/005—Methods for micropropagation; Vegetative plant propagation using cell or tissue culture techniques

Abstract

本发明涉及兰花杂交育种技术领域，特别是涉及一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法。本发明所述方法包括以下步骤：1)利用海南钻喙兰的花粉对开蜡质花的蝴蝶兰杂交品种进行授粉；2)授粉1～2d后，对蝴蝶兰进行重复授粉；3)采收发育时间达到100～130d的果荚进行无菌播种，得到萌发的杂交种子。本发明通过选择开蜡质花的蝴蝶兰杂交品种作为远缘杂交的母本，对比非蜡质花蝴蝶兰杂交品种，显著地提高了远缘杂交受精结实率和杂交成功率。

Description

一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法
技术领域
本发明涉及兰花杂交育种技术领域，特别是涉及一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法。
背景技术
蝴蝶兰(Phalaenopsis)因其花形奇特、花色艳丽、色泽丰富、花序整齐、花期长，素有“洋兰皇后”的美称。1887年，第1个蝴蝶兰属的人工杂交种Phalaenopsis Harriettiae(P.amabilis×P.violacea)在英国皇家园艺学会正式注册登录，至今共在英国皇家园艺学会上登录有37399个杂交组合。因此，蝴蝶兰经过130多年的杂交育种取得了巨大的育种成就，在产业发展上作出了重大贡献，但蝴蝶兰长期属内种间、种内杂交，导致蝴蝶兰杂交品种遗传基础越来越窄，适应性、观赏性及抗性等方面有待改进。海南钻喙兰(Rhynchostylisgigantea)为兰科(Orchidaceae)钻喙兰属(Rhynchostylis)多年生植物，其花朵芳香，花色丰富，花序饱满，花朵数多，植株抗性强，具有很高的观赏价值和利用价值。因此，如果能充分利用杂种优势将蝴蝶兰与海南钻喙兰(Rhynchostylisgigantea)进行远缘杂交，则会使蝴蝶兰在花香、花色、适应性与抗性等方面有跨越性提高、质的飞跃，突破种与属的界限，创造出新的变异类型或新种质，扩大遗传变异。但是，蝴蝶兰与海南钻喙兰存在远缘杂交亲和性障碍的问题。
发明内容
为了解决上述问题，本发明提供了一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法，具有杂交成功率高、质量好的优点，同时克服远缘杂交障碍，扩大遗传变异，创造出新的变异类型或新种质。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
本发明提供了一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法，包括以下步骤：
1)利用海南钻喙兰的花粉对开蜡质花的蝴蝶兰杂交品种进行授粉；
2)授粉1～2d后，对蝴蝶兰进行重复授粉；
3)采收发育时间达到100～130d的果荚进行无菌播种，得到萌发的杂交种子；
所述无菌播种用的萌发培养基包括以下组分：花宝1号2.0～3.0g/L、6-苄氨基腺嘌呤2.0～3.0mg/L、萘乙酸1.0～2.0mg/L、10.0wt.％～20.0wt.％椰子汁、蔗糖30g/L和琼脂7g/L。
优选的，所述开蜡质花的蝴蝶兰杂交品种包括：Phalaenopsis Frigdaas HuangChan、Phalaenopsis Brother Sara Gold、Phalaenopsis Frigdaas Red Fairy、Phalaenopsis Tying Shin Cupid和Phalaenopsis Frigdaas Heishan中的一种或多种。
优选的，步骤1)所述的花粉包括盛花期采集的新鲜花粉。
优选的，若蝴蝶兰的盛花期与海南钻喙兰的盛花期不同，则通过调控使蝴蝶兰的盛花期与海南钻喙兰的盛花期相同。
优选的，所述调控包括高山催花和/或空调催花。
优选的，所述授粉的方式包括人工授粉。
优选的，所述授粉的时机包括盛花期且花朵活力旺盛的晴天。
优选的，所述无菌播种的方法包括：对所述果荚进行清洗和灭菌，得到无菌种子；将无菌种子播种在萌发培养基上；
所述灭菌包括将清洗的果荚在0.1wt.％的HgCl2溶液中浸泡10～15min。
优选的，所述无菌种子在萌发培养基上培养的时间为120～150d。
有益效果：
本发明提供了一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法，包括以下步骤：1)利用海南钻喙兰的花粉对开蜡质花的蝴蝶兰杂交品种进行授粉；2)授粉1～2d后，对蝴蝶兰进行重复授粉；3)采收发育时间达到100～130d的果荚进行无菌播种，得到萌发的杂交种子；所述无菌播种用的萌发培养基包括以下组分：花宝1号2.0～3.0g/L、6-苄氨基腺嘌呤2.0～3.0mg/L、萘乙酸1.0～2.0mg/L、10.0％～20.0％椰子汁、蔗糖30g/L和琼脂7g/L。本发明通过选择开蜡质花的蝴蝶兰杂交品种作为远缘杂交的母本，对比非蜡质花蝴蝶兰杂交品种，显著地提高了远缘杂交受精结实率和杂交成功率；同时，本发明提供的方法能够利用杂种优势将蝴蝶兰与海南钻喙兰两个不同属的优良性状结合起来，扩大遗传变异，创造出新的变异类型或新种质。
具体实施方式
本发明提供了一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法，包括以下步骤：
1)利用海南钻喙兰的花粉对开蜡质花的蝴蝶兰杂交品种进行授粉；
2)授粉1～2d后，对蝴蝶兰进行重复授粉；
3)采收发育时间达到100～130d的果荚进行无菌播种，得到萌发的杂交种子；
所述无菌播种用的萌发培养基包括以下组分：花宝1号2.0～3.0g/L、6-苄氨基腺嘌呤2.0～3.0mg/L、萘乙酸1.0～2.0mg/L、10.0wt.％～20.0wt.％椰子汁、蔗糖30g/L和琼脂7g/L。
本发明利用海南钻喙兰的花粉对开蜡质花的蝴蝶兰杂交品种进行授粉。在本发明中，所述的花粉优选包括盛花期采集的新鲜花粉；所述盛花期优选为每年的1～2月；若蝴蝶兰的盛花期与海南钻喙兰的盛花期不同，则优选通过调控使蝴蝶兰的盛花期与海南钻喙兰的盛花期相同；所述调控优选包括高山催花和/或空调催花。本发明通过调控蝴蝶兰的盛花期与海南钻喙兰一致，确保在盛花期授粉，提高了远缘杂交的成功率。
在本发明中，所述开蜡质花的蝴蝶兰杂交品种包括：Phalaenopsis FrigdaasHuang Chan、Phalaenopsis Brother Sara Gold、Phalaenopsis Frigdaas Red Fairy、Phalaenopsis Tying Shin Cupid和Phalaenopsis Frigdaas Heishan中的一种或多种。本发明所述开蜡质花的蝴蝶兰杂交种公开于英国皇家园艺学会上，网址为：http://apps.rhs.org.uk/horticulturaldatabase/orchidregister/orchidregister.asp；本发明所述蝴蝶兰优选购自广东省佛山市陈村花卉世界以及自主选育的品种。
在本发明中，所述授粉的方式优选包括人工授粉；所述人工授粉优选包括：用消毒过的镊子去除母本(蝴蝶兰)唇瓣及母本合蕊柱上的花粉块，同时取出父本(海南钻喙兰)新鲜的花粉块轻轻地置入母本蕊腔内，并对授粉杂交的花朵挂上标签并注明杂交组合和杂交时间；所述授粉的时机优选包括盛花期且花朵活力旺盛的晴天。
授粉1～2d后，本发明对蝴蝶兰进行重复授粉。在本发明中，优选对10株以上的蝴蝶兰进行重复授粉；本发明所述重复授粉优选为对未进行授粉的蝴蝶兰花朵进行授粉。本发明所述重复授粉的方法优选与上述人工授粉的方法相同，在此不再赘述。本发明通过重复授粉的方式，提高了远缘杂交的受精结实率，从而提高了远缘杂交的成功率。
重复授粉后，本发明采收发育时间达到100～130d的果荚进行无菌播种，得到萌发的杂交种子；所述无菌播种用的萌发培养基包括以下组分：花宝1号2.0～3.0g/L、6-苄氨基腺嘌呤2.0～3.0mg/L、萘乙酸1.0～2.0mg/L、10.0～20.0％椰子汁、蔗糖30g/L和琼脂7g/L；所述无菌种子在萌发培养基上培养的时间优选为120～150d。在本发明中，所述无菌播种的方法优选包括：对所述果荚进行清洗和灭菌，得到无菌种子；将无菌种子播种在萌发培养基上；所述清洗优选包括：先用水将果荚冲洗干净，然后用75wt.％乙醇溶液擦洗干净；所述灭菌优选包括将清洗的果荚在0.1wt.％的HgCl2溶液中浸泡10～15min；浸泡后优选用无菌水冲洗3～5次。本发明通过适宜的清洗和消毒方式可以避免杂菌对种子萌发的影响，从而提高了远缘杂交的成功率。
本发明通过将杂交种子播种于适宜的萌发培养基上，可以提高杂交种子的萌发率，从而提高了远缘杂交的成功率。本发明对所述种子萌发培养基的各组分来源没有特殊要求，采用本领域技术人员所熟知的市售商品即可。
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
以开蜡质花的蝴蝶兰‘黄蝉’(Phalaenopsis Frigdaas Huang Chan)为母本，海南钻喙兰(Rhynchostylisgigantea)为父本进行属间远缘杂交，具体步骤如下：
(1)母本花朵：1～2月份，母本处于盛花期且花朵活力旺盛；
(2)父本花朵：1～2月份，父本处于盛花期且花朵活力旺盛；
(3)人工授粉：在双亲盛花期的温室大棚内，选择晴朗天气的10:00～12:00点进行远缘杂交；杂交时，以蝴蝶兰‘黄蝉’为母本，海南钻喙兰为父本，用消毒过的镊子去除母本唇瓣及母本合蕊柱上的花粉块，同时取出父本新鲜的花粉块轻轻地置入母本蕊腔内，并对授粉杂交的花朵挂上标签并注明杂交组合和杂交时间；
(4)重复授粉：双亲在盛花、花朵活力旺盛时对30株母本进行重复授粉。
(5)杂交果荚：采收发育时间达到120d的成熟果荚进行无菌播种。
(6)无菌播种：果荚经流水冲洗，在超净工作台上用75wt.％酒精擦洗干净，再用0.1wt.％HgCl2溶液灭菌12min，无菌水冲洗4次，无菌滤纸吸干残余水分后切开果荚，然后将种子播种于以下萌发培养基：花宝1号3.0g/L+6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)3.0mg/L+NAA(萘乙酸)1.0mg/L+10.0wt.％椰子汁+蔗糖30g/L+琼脂7g/L。
(7)种子萌发：种子在萌发培养基上培养120d后陆续萌发。
对比例1
一种与实施例1相似的杂交方法，唯一区别在于，母本为开非蜡质花的蝴蝶兰杂交品种‘小飞象’(Phalaenopsis Sogo Vivien)。
对比例2
一种与实施例1相似的杂交方法，唯一区别在于，未进行步骤(4)中的重复授粉。
对比例3
一种与实施例1相似的杂交方法，唯一区别在于，母本为开蜡质花的蝴蝶兰非杂交种安曼蝴蝶兰(Phalaenopsis amboinensis)。
应用例1
观察实施例1和对比例1种子萌发的果荚数，并计算杂交成功率，其中杂交成功率＝种子萌发的果荚数/杂交花朵数*100％，计算结果见表1。
表1蜡质花和非蜡质花蝴蝶兰杂交品种作母本时对远缘杂交的影响
Figure GDA0003510093620000051
由表1可知，通过选择开蜡质花的蝴蝶兰杂交品种作为远缘杂交的母本，以及重复授粉的方式可以提高远缘杂交的成功率，从而解决蝴蝶兰与海南钻喙兰存在远缘杂交亲和性障碍的问题。
综上所述，本发明提供的方法能够突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍，具有杂交成功率高、质量好的优点，能够利用杂种优势将蝴蝶兰与海南钻喙兰两个不同属的优良性状结合起来，扩大遗传变异，创造出新的变异类型或新种质。
虽然本发明已以较佳的实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可以做各种改动和修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (8)

1.一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）利用海南钻喙兰的花粉对开蜡质花的蝴蝶兰杂交品种进行授粉；所述开蜡质花的蝴蝶兰杂交品种为：PhalaenopsisFrigdaas Huang Chan；
2）授粉1~2d后，对蝴蝶兰进行重复授粉；
3）采收发育时间达到100~130d的果荚进行无菌播种，得到萌发的杂交种子；
所述无菌播种用的萌发培养基由以下组分组成：花宝1号2.0~3.0g/L、6-苄氨基腺嘌呤2.0~3.0mg/L、萘乙酸1.0~2.0mg/L、10.0wt.%~20.0wt.%椰子汁、蔗糖30g/L和琼脂7g/L。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1）所述的花粉包括盛花期采集的新鲜花粉。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，若蝴蝶兰的盛花期与海南钻喙兰的盛花期不同，则通过调控使蝴蝶兰的盛花期与海南钻喙兰的盛花期相同。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述调控包括高山催花和/或空调催花。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述授粉的方式包括人工授粉。
6.根据权利要求1或5所述的方法，其特征在于，所述授粉的时机包括盛花期且花朵活力旺盛的晴天。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述无菌播种的方法包括：对所述果荚进行清洗和灭菌，得到无菌种子；将无菌种子播种在萌发培养基上；
所述灭菌包括将清洗的果荚在0.1wt.%的HgCl2溶液中浸泡10~15min。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述无菌种子在萌发培养基上培养的时间为120~150d。
CN202110968399.2A 2021-08-23 2021-08-23 一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法 Active CN113475388B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110968399.2A CN113475388B (zh) 2021-08-23 2021-08-23 一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110968399.2A CN113475388B (zh) 2021-08-23 2021-08-23 一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113475388A CN113475388A (zh) 2021-10-08
CN113475388B true CN113475388B (zh) 2022-04-05

Family

ID=77946023

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110968399.2A Active CN113475388B (zh) 2021-08-23 2021-08-23 一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113475388B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111758559A (zh) * 2020-07-24 2020-10-13 广东省农业科学院环境园艺研究所 一种蝴蝶兰与钻喙兰远缘杂交种子无菌播种及其育苗的方法
CN111758560A (zh) * 2020-07-24 2020-10-13 广东省农业科学院环境园艺研究所 一种蝴蝶兰新品种快速育成的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111758559A (zh) * 2020-07-24 2020-10-13 广东省农业科学院环境园艺研究所 一种蝴蝶兰与钻喙兰远缘杂交种子无菌播种及其育苗的方法
CN111758560A (zh) * 2020-07-24 2020-10-13 广东省农业科学院环境园艺研究所 一种蝴蝶兰新品种快速育成的方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
蝴蝶兰（Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓ ｓｐｐ．）与钻喙兰（Ｒｈｙｎｃｈｏｓｔｙｌｉｓ ｒｅｔｕｓａ）远缘杂交种子无菌播种及后代表型分析;陈和明等;《中国农业大学学报》;20210304;第26卷(第3期);全文 *
蝴蝶兰与火焰兰远缘杂交育种初探;陈和明等;《中国农业大学学报》;20191231;第24卷(第8期);全文 *
蝴蝶兰杂交育种研究进展;丁朋松等;《安徽农业科学》;20141231;第42卷(第7期);全文 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN113475388A (zh) 2021-10-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Miyoshi Callus induction and plantlet formation through culture of isolated microspores of eggplant (Solanum melongena L.)
WO2015003408A1 (zh) 一种石斛兰试管内杂交育种方法
CN111758559B (zh) 一种蝴蝶兰与钻喙兰远缘杂交种子无菌播种及其育苗的方法
Jacquard et al. Anther culture in barley
Ishizaka et al. Interspecific hybrids of Cyclamen persicum Mill. and C. purpurascens Mill. produced by ovule culture
Andersen et al. Carrot (Daucus carota L.): In Vitro Productionof Haploids and Field Trials
CN101690461A (zh) 一种制备植物三倍体植株的方法
CN107306793B (zh) 一种软枣猕猴桃花药培养成单倍体植株的方法
CN107278891B (zh) 一种杏梅组织培养快速繁殖方法
CN105123528B (zh) 新铁炮百合远缘杂交早期不同发育阶段胚拯救方法
Chen et al. Production of allohexaploid Brassica hybrid between tuber mustard (Brassica juncea L. var. crassicaulis Chen &Yang) and Chinese kale (Brassica oleracea var. alboglabra Bailey)
CN108077061A (zh) 一种酿酒用籼糯两系不育系的选育方法
CN107306788A (zh) 一种获得甜瓜属野生种与栽培厚皮甜瓜杂交种的方法
CN113475384B (zh) 一种种间杂交培育玫瑰的方法
CN102239801A (zh) 一种兰科植物试管内授粉及结实的方法
CN106613908A (zh) 一种绣球花杂交育种授粉的方法
US8344229B2 (en) Argyranthemum intergeneric hybrid plants and methods of production
CN113475388B (zh) 一种突破蝴蝶兰与海南钻喙兰远缘杂交障碍的方法
US20190200553A1 (en) Method for Producing Rice Haploid by Rice X Maize Hybridization
WO2020135712A1 (zh) 培育芦竹植株的方法
CN105010123B (zh) 通过离体挽救培养获得草莓远缘杂种的方法及培养基
Reed Development of an in ovolo embryo culture procedure for Hydrangea
CN1234265C (zh) 百合三倍体的培育方法
CN108184650B (zh) 一种预防切花菊杂交种子病变和提高种子出苗率的方法
CN101341854A (zh) 蜜橘成年树营养器官离体丛生芽培养方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant