CN113440511A - Hotair-prc2阻断剂及其复合制剂在制备治疗子宫内膜癌药物中的用途 - Google Patents

Hotair-prc2阻断剂及其复合制剂在制备治疗子宫内膜癌药物中的用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种HOTAIR‑PRC2阻断剂及其复合制剂在制备治疗子宫内膜癌药物中的用途。本申请提供了HOTAIR‑PRC2特异性阻断剂及将其与EZH2抑制剂联用均能够抑制子宫内膜癌的进展，尤其是将HOTAIR‑PRC2特异性阻断剂及EZH2抑制剂联合应用，可以增效EZH2抑制剂在子宫内膜癌中的治疗效果，降低EZH2抑制剂的抗肿瘤用药剂量。本申请提供的含有HOTAIR‑PRC2特异性阻断剂和EZH2抑制剂的复合制剂可有效抑制肿瘤的增殖，侵袭和迁移，改善肿瘤免疫微环境，为子宫内膜癌的治疗提供了新的治疗思路。

Description

HOTAIR-PRC2阻断剂及其复合制剂在制备治疗子宫内膜癌药 物中的用途
技术领域
本发明涉及医药技术领域，特别涉及一种HOTAIR-PRC2阻断剂及其复合制剂在制备治疗子宫内膜癌药物中的用途。
背景技术
子宫内膜癌(Endometrial cancer，EC)是常见的女性生殖系统恶性肿瘤，国内外研究数据显示EC发病率及死亡率呈持续上升趋势，是少数死亡率不断攀升的人类恶性肿瘤之一，其预后与组织学分级有显著相关。组织学分级是无转移患者最显著的预后特征，组织学分级越高，患者5年生存率越低，复发相对风险越高。虽然早期诊断的子宫内膜癌可以通过手术辅以放疗或化疗进行治疗，多预后良好。但复发性，晚期及特殊病理类型(如浆液性腺癌、透明细胞癌)的治疗效果及预后差，手术难度大，5年生存率低，治疗也面临更少的选择。对于无法手术的患者临床上大多采用以放化疗为主的治疗方案，然而放化疗的效果已进入瓶颈期。因此，进一步拓展子宫内膜癌的治疗药物种类和治疗方案有助于子宫内膜癌治疗水平的提高。
越来越多的研究表明，表观遗传失调是大多数肿瘤的共同特征之一，表观遗传靶点已成为抗肿瘤治疗研究的新领域。Zeste增强子同源物2(EnhancerofZeste Homolog 2，EZH2)是近些年研究最为活跃的表观遗传靶点之一，为多梳蛋白抑制复合物2(PolycombRepressive Complex 2，PRC2)的核心催化亚基，通过对组蛋白H3的第27位赖氨酸三甲基化(Trimethylation of Lysine 27on Histone H3，H3K27me3)使染色体结构发生凝集，促进相关抑癌基因的转录抑制，在多种肿瘤的发生发展中发挥重要作用。HOTAIR(Homeobox(HOX)transcript antisense RNA,HOTAIR)作为长链非编码RNA(Long non-coding RNAs,lncRNAs)的一员，其5’端功能结构域能与PRC2发生相互作用，并募集其入核完成特定基因的H3K27me3修饰，使基因发生沉默。
因此，针对表观遗传靶点找到更好的治疗方案，从而更为有效的治疗子宫内膜癌，是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
本发明为了解决上述技术问题，提供了一种HOTAIR-PRC2阻断剂及其复合制剂在制备治疗子宫内膜癌药物中的用途。
第一方面，本发明提供了一种HOTAIR-PRC2阻断剂在制备治疗子宫内膜癌药物中的用途，通过以下技术方案得以实现的。
一种HOTAIR-PRC2阻断剂在制备治疗子宫内膜癌药物中的用途，所述HOTAIR-PRC2阻断剂的化学结构式为
Figure BDA0003151217960000021
本申请上述化合物的名称为化合物36806或AC1Q3QWB(简称AQB)
PubChem CID:36806；
ChemicalNames:N-[(5,7-dichloro-2,3-dihydro-1-benzofuran-2-yl)methyl]propan-2-amine。
第二方面，本发明提供了一种HOTAIR-PRC2阻断剂与EZH2抑制剂联合用于制备治疗子宫内膜癌药物的用途，通过以下技术方案得以实现的。
一种HOTAIR-PRC2阻断剂与EZH2抑制剂联合用于制备治疗子宫内膜癌药物的用途，所述HOTAIR-PRC2阻断剂的化学结构式为
Figure BDA0003151217960000022
进一步的，所述EZH2抑制剂选自小分子化合物、干扰RNA或抗体。
本申请所述的EZH2抑制剂是指对EZH2具有抑制效果的分子。对EZH2具有抑制效果包括但不限于：抑制EZH2活性、抑制EZH2基因转录或表达、抑制EZH2通路。
进一步的，所述小分子化合物选自EPZ6438、CPI-1205、GSK2816126和GSK343中的一种或多种。优选的，所述小分子化合物为EPZ6438。
EPZ6438的英文名称为Tazemetostat，分子式是C34H44N4O4，分子量为572.74g/mol，CAS号为1403254-99-8，化学结构式如下：
Figure BDA0003151217960000031
进一步的，HOTAIR-PRC2阻断剂与EZH2抑制剂的摩尔比为(20-160):(5-80)。
优选的，HOTAIR-PRC2阻断剂和EZH2抑制剂的摩尔比为(1:2)–(16:1)；更优选的，HOTAIR-PRC2阻断剂和EZH2抑制剂的摩尔比为(1:1)-(8:1)；进一步优选的，HOTAIR-PRC2阻断剂和EZH2抑制剂的摩尔比为(2:1)-(4:1)；最优选的，HOTAIR-PRC2阻断剂和EZH2抑制剂的摩尔比为4：1。
进一步的，子宫内膜癌细胞来源于哺乳动物，所述哺乳动物选自啮齿目动物、偶蹄目动物、奇蹄目动物、兔形目动物或灵长目动物。优选的，所述灵长目动物选自猴、猿或人。
本申请的子宫内膜癌细胞也可以是离体的哺乳动物细胞。
第三方面，本发明提供了一种复合制剂，通过以下技术方案得以实现的。
一种复合制剂，包括HOTAIR-PRC2阻断剂和EZH2抑制剂，HOTAIR-PRC2阻断剂的化学结构式为
Figure BDA0003151217960000032
优选的，本申请的复合制剂以靶向HOTAIR-PRC2连接的阻断剂和靶向EZH2的抑制剂为有效成分，还可包括其他起到肿瘤治疗作用的药效成分。
优选的，本申请的复合制剂以靶向HOTAIR-PRC2连接的阻断剂和靶向EZH2的抑制剂为有效成分，还可以加入药学上可接受的辅助性成分。
进一步的，所述EZH2抑制剂选自小分子化合物、干扰RNA或抗体。
本申请所述的EZH2抑制剂是指对EZH2具有抑制效果的分子。对EZH2具有抑制效果包括但不限于：抑制EZH2活性、抑制EZH2基因转录或表达、抑制EZH2通路。
进一步的，所述小分子化合物选自EPZ6438、CPI-1205、GSK2816126和GSK343中的一种或多种。优选的，所述小分子化合物为EPZ6438。
EPZ6438的英文名称为Tazemetostat，分子式是C34H44N4O4，分子量为572.74g/mol，CAS号为1403254-99-8，化学结构式如下：
Figure BDA0003151217960000041
进一步的，HOTAIR-PRC2阻断剂与EZH2抑制剂的摩尔比为(20-160):(5-80)。
优选的，HOTAIR-PRC2阻断剂和EZH2抑制剂的摩尔比为(1:2)–(16:1)；更优选的，HOTAIR-PRC2阻断剂和EZH2抑制剂的摩尔比为(1:1)-(8:1)；进一步优选的，HOTAIR-PRC2阻断剂和EZH2抑制剂的摩尔比为(2:1)-(4:1)；最优选的，HOTAIR-PRC2阻断剂和EZH2抑制剂的摩尔比为4：1。
第四方面，本发明提供了一种复合制剂在制备治疗子宫内膜癌药物中的用途，通过以下技术方案得以实现的。
一种上述复合制剂在制备治疗子宫内膜癌药物中的用途。
本申请治疗子宫内膜癌的药物的施用对象可以为哺乳动物或哺乳动物的肿瘤细胞。所述哺乳动物选自啮齿目动物、偶蹄目动物、奇蹄目动物、兔形目动物、灵长目动物等；所述灵长目动物选自猴、猿或人。所述肿瘤细胞可以为离体肿瘤细胞。进一步的，所述施用对象可以是罹患肿瘤的患者或者期待治疗的肿瘤的个体，或者所述施用对象为肿瘤患者或者期待治疗肿瘤的个体的离体肿瘤细胞。
本申请治疗子宫内膜癌的药物可以在接受肿瘤治疗前、中、后对对象施用。
本申请具有以下有益效果。
本申请HOTAIR-PRC2特异性阻断剂或EZH2抑制剂均能够抑制子宫内膜癌的进展，尤其是将HOTAIR-PRC2特异性阻断剂及EZH2抑制剂联合应用，其抑制作用比任一单药的作用都更为显著，低剂量的HOTAIR-PRC2特异性阻断剂能够增强EZH2抑制剂的治疗效果，在保证药效的前提下，可使EZH2抑制剂的用药剂量降低1/2，减少了EZH2抑制剂的副作用，并且取得了更加显著的子宫内膜癌细胞增殖体外抑制效果和体内肿瘤抑制效果。
附图说明
图1是本发明AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对子宫内膜癌细胞体外增殖能力的影响图；其中，A：AQB与EPZ6438不同浓度组合抑制HEC-1B细胞增殖能力色阶图；B：AQB与EPZ6438不同浓度组合抑制HEC-1B细胞增殖能力的折线图；C：AQB与EPZ6438不同浓度组合抑制KLE细胞增殖能力色阶图；D：AQB与EPZ6438不同浓度组合抑制KLE细胞增殖能力的折线图；E：AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对HEC-1B细胞单克隆形成能力的影响图；F：AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对KLE细胞单克隆形成能力的影响图；
图2是本发明AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对子宫内膜癌细胞体外迁移、侵袭影响图；其中，A：AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对HEC-1B细胞迁移能力的影响图；B：AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对KLE细胞迁移能力的影响图；C：AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对HEC-1B细胞侵袭能力的影响图；D：AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对KLE细胞侵袭能力的影响图；
图3是本发明AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对子宫内膜癌细胞p21、APC2、NLK、PCDH10蛋白水平影响图；其中，A：免疫印迹检测AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预HEC-1B细胞对抑癌基因APC2、NLK、PCDH10及p21蛋白表达水平的影响图；B：免疫印迹检测AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预KLE细胞对抑癌基因APC2、NLK、PCDH10及p21蛋白表达水平的影响图；
图4是本发明AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对子宫内膜癌细胞基因表达的影响图；其中，A：AQB处理HEC-1B细胞与DMSO对照组的差异基因表达热图；B：EPZ6438处理HEC-1B细胞与DMSO对照组的差异基因表达热图；C：AQB与EPZ6438联合干预HEC-1B细胞与DMSO对照组的差异基因表达热图；D：AQB处理HEC-1B细胞与DMSO对照组的差异基因表达火山图；E：EPZ6438处理HEC-1B细胞与DMSO对照组的差异基因表达火山图；F：AQB与EPZ6438联合干预HEC-1B细胞与DMSO对照组的差异基因表达火山图；
图5本发明AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对子宫内膜癌细胞抑癌基因p21、SOX17、GADD45G、NKD2、BBC3的mRNA表达水平的影响图；其中，A：qRT-PCR检测AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预HEC-1B细胞对抑癌基因的mRNA表达水平的影响图；B：qRT-PCR检测AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预KLE细胞对抑癌基因的mRNA表达水平的影响图。
图6是本发明AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对肿瘤细胞裸鼠皮下移植瘤增殖能力影响图；其中，A：裸鼠皮下肿瘤生长曲线图；B：AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合作用于HEC-1B细胞异种移植瘤模型小鼠得到的肿瘤实物图；C：处死裸鼠后瘤体重量图；
图7是本发明AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联合干预对子宫内膜癌肿瘤组织APC2、β-catenin、p21及Ki-67蛋白水平影响图；其中，A：免疫组织化学检测HEC-1B细胞异种移植瘤模型小鼠不同干预组皮下肿瘤组织中APC2蛋白水平表达变化图；B：免疫组织化学检测HEC-1B细胞异种移植瘤模型小鼠不同干预组皮下肿瘤组织中β-catenin蛋白水平表达变化图；C：免疫组织化学检测HEC-1B细胞异种移植瘤模型小鼠不同干预组皮下肿瘤组织中p21蛋白水平表达变化图；D：免疫组织化学检测HEC-1B细胞异种移植瘤模型小鼠不同干预组皮下肿瘤组织中Ki-67蛋白水平表达变化图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明做进一步的说明。
本申请HOTAIR-PRC2阻断剂的化学结构式为
Figure BDA0003151217960000061
化合物名称为化合物36806或AC1Q3QWB(简称AQB)，PubChem CID:36806；ChemicalNames:N-[(5,7-dichloro-2,3-dihydro-1-benzofuran-2-yl)methyl]propan-2-amine；由药明康德新药开发有限公司合成。
本申请EZH2抑制剂选用EPZ6438，EPZ6438的英文名称为Tazemetostat，分子式是C34H44N4O4，分子量为572.74g/mol，CAS号为1403254-99-8，购自Selleck公司，货号S7128，化学结构式如下：
Figure BDA0003151217960000071
本申请的子宫内膜癌细胞选用HEC-1B细胞、KLE细胞。
应用例1
观察不同浓度AQB及EPZ6438的组合对子宫内膜癌细胞增殖的影响
采用不同浓度的AQB(0μM、20μM、40μM、80μM、160μM)和EPZ6438(0μM、5μM、10μM、20μM、40μM)单药或联合处理HEC-1B细胞48h后，CCK8实验检测细胞活性。再采用不同浓度的AQB(0μM、20μM、40μM、80μM、160μM)和EPZ6438(0μM、20μM、40μM、60μM、80μM)单药或联合处理KLE细胞48h后，CCK8实验检测细胞活性。
色阶图显示AQB与EPZ6438联用比单独使用AQB或者EPZ6438能显著增强抑制细胞增殖效果(如图1A、图1C所示)。利用CalcuSyn 2.0软件计算AQB与EPZ6438不同浓度组合的抑制效应(Fa)和联合指数(CI)(如图1B、图1D所示)，结果显示AQB与EPZ6438联用时CI值均小于0.85，证明AQB与EPZ6438联用时具有明显的协同效应。
观察联合使用AQB与EPZ6438对子宫内膜癌细胞克隆形成能力的影响
对HEC-1B细胞分别采用DMSO对照组、20μM AQB单药组、20μM EPZ6438单药组、40μMEPZ6438单药组、20μM AQB+20μM EPZ6438联合组处理；对KLE细胞分别采用DMSO对照组、20μM AQB单药组、40μM EPZ6438单药组、80μM EPZ6438单药组、20μM AQB+40μM EPZ6438联合组处理，分别用药物处理约2周后，4％多聚甲醛固定，结晶紫染色，拍照、计数。
结果显示AQB与EPZ6438联用比单独使用AQB或者EPZ6438能更显著地抑制细胞的克隆形成，AQB(20μM)与EPZ6438(20μM)联用抑制HEC-1B的克隆形成能力优于双倍剂量的EPZ6438(40μM)单药，AQB(20μM)与EPZ6438(40μM)联用抑制KLE克隆形成的能力与双倍剂量的EPZ6438(80μM)单药相当(如图1E、图1F所示)，证明AQB与EPZ6438联用对抑制子宫内膜癌细胞的克隆形成具有协同效应。
应用例2
观察联合使用AQB与EPZ6438对子宫内膜癌细胞迁移和侵袭能力的影响
实验分为DMSO对照组、AQB单药组(5μM)、EPZ6438单药组(5μM)、联合组(5μM AQB+5μM EPZ6438),HEC-1B细胞和KLE细胞分别采用药物处理24或48小时后，将transwell小室取出，棉签拭去未穿过的细胞，然后4％多聚甲醛固定，结晶紫染色，拍照、计数。
实验结果显示在不明显影响细胞增殖的浓度下，AQB、EPZ6438及AQB与EPZ6438联用均能显著抑制子宫内膜癌细胞的迁移和侵袭，且AQB与EPZ6438联用比单独使用AQB或者EPZ6438的抑制效果更为显著(如图2A、图2B、图2C、图2D所示)，证明AQB与EPZ6438联用对抑制子宫内膜癌细胞的迁移和侵袭能力具有协同效应。
应用例3
观察联合使用AQB与EPZ6438对子宫内膜癌细胞内抑癌基因p21、APC2、NLK及PCDH10蛋白表达水平的影响
实验分为DMSO对照组、AQB单药组(20μM)、EPZ6438单药组(5μM)、联合组(20μM AQB+5μM EPZ6438)，HEC-1B细胞和KLE细胞分别采用药物处理48小时后，提取细胞总蛋白并进免疫印迹实验。
结果显示AQB与EPZ6438联用比单独使用AQB或者EPZ6438更能显著激活抑癌基因p21、APC2、NLK及PCDH10蛋白表达水平(如图3A、图3B所示)，证明AQB与EPZ6438联合干预对激活抑癌基因p21、APC2、NLK及PCDH10蛋白表达水平具有协同效应。
应用例4
观察联合使用AQB与EPZ6438对子宫内膜癌细胞基因表达水平的影响
实验分为DMSO对照组、AQB单药组(20μM)、EPZ6438单药组(5μM)、联合组(20μM AQB+5μM EPZ6438),每组做三个生物学重复，各组HEC-1B细胞药物处理48小时后，提取样品总RNA，由上海欧易生物医学有限公司进行Agilent芯片测序并进行数据处理、绘图。
结果显示AQB与EPZ6438联用比单独使用AQB或者EPZ6438能使更多基因发生上调或下调(如图4所示)，证明AQB与EPZ6438联合干预对子宫内膜癌细胞基因表达的影响具有协同效应。
应用例5
观察联合使用AQB与EPZ6438对子宫内膜癌细胞抑癌基因的mRNA表达水平的影响
根据Agilent芯片测序筛选出上调的5个抑癌基因(p21、SOX17、GADD45G、NKD2、BBC3)并设计引物
引物序列为：
P21-Forwardprimer:TCCTCATCCCGTGTTCTCCT；
P21-Reverseprimer:ACAAGTGGGGAGGAGGAAGT；
SOX17-Forwardprimer:AGCAGAATCCAGACCTGCAC；
SOX17-Reverseprimer:CTCTGCCTCCTCCACGAAG；
GADD45G-Forwardprimer:TCTGGCTGTCAGTGTGTTCG；
GADD45G-Reverseprimer:GCAACTCATGCAGCGCTTTC；
NKD2-Forwardprimer:TTGCAGGATGGAGGGTGAAC；
NKD2-Reverseprimer:AGGTAGTGGTTTCTGCGCTC；
BBC3-Forwardprimer:GAAAGGCTGTTGTGCTGGTG；
BBC3-Reverseprimer:AGGCTAGTGGTCACGTTTGG；
实验分为DMSO对照组、AQB单药组(20μM)、EPZ6438单药组(5μM)、联合组(20μM AQB+5μM EPZ6438),HEC-1B细胞和KLE细胞分别采用药物处理48小时后，提取样品总RNA逆转录为cDNA，然后进行qRT-PCR实验。
结果显示AQB与EPZ6438联用比单独使用AQB或者EPZ6438更能显著激活抑癌基因p21、SOX17、GADD45G、NKD2、BBC3的mRNA表达水平(如图5A、图5B所示)，证明AQB与EPZ6438联合干预对激活抑癌基因p21、SOX17、GADD45G、NKD2、BBC3的mRNA表达水平具有协同效应。
应用例6
观察联合使用AQB与EPZ6438对子宫内膜癌细胞裸鼠皮下移植瘤增殖能力的影响
人源子宫内膜癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型构建与药物干预：使用含10％胎牛血清的MEM培养基体外培养状态良好的子宫内膜癌HEC-1B细胞，逐步扩大培养至10cm细胞培养皿，用于裸鼠皮下种植；当获得足够数量细胞时用胰酶消化细胞，温和吹打分散细胞，收集细胞悬液，800rpm离心5min弃上清，然后用预冷PBS洗涤细胞至少三遍；PBS重悬细胞，细胞计数板计数后调整细胞密度至5×107个/mL；细胞消化后0.5小时内接种到5-6周龄裸鼠皮下，用注射器将细胞悬液按每只裸鼠200μL(即1×107个细胞)接种在BALB/c裸鼠腋窝中后部皮下；当裸鼠皮下移植瘤平均体积达50-100mm3时随机分为4组进行化学干预，每组5只。其中：对照组(DMSO)、AQB组(40mg/kg)、EPZ6438(80mg/kg)及联合治疗组(20mg/kg AQB+40mg/kg EPZ6438)，每隔天给药一次，持续治疗32天(植瘤后第8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38天给药，共16次给药)。每隔4天称量裸鼠体重、游标卡尺测量皮下瘤瘤体积大小绘制裸鼠皮下肿瘤生长曲线。
结果表明与DMSO对照组相比，单独给予40mg/kg AQB组、单独给与80mg/kgEPZ6438组和给予20mg/kg AQB+40mg/kg EPZ6438联合治疗组均能明显抑制肿瘤生长，差异具有统计学意义，AQB组(**，P<0.01)、EPZ6438组(****，P<0.0001)及联合治疗组(****，P<0.0001)；进一步分析联合治疗组与两个单药组之间的差异，结果显示20mg/kg AQB+40mg/kg EPZ6438联合治疗组比40mg/kg AQB组对肿瘤的抑制作用更强(*，P<0.05)，其抑瘤效果与给与80mg/kg EPZ6438组相当，表明AQB联合EPZ6438干预子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤具有协同杀伤肿瘤效应，并且低剂量的AQB能显著增强EPZ6438的抑瘤效果，降低其用药剂量(如图6A，每隔4天测量皮下肿瘤大小一次，公式为：V＝0.5×a×b2；a为长径，b为短径)。给药结束后处死裸鼠，剥离肿瘤组织拍照并称重，肉眼可见与DMSO对照组相比，AQB组、EPZ6338组及AQB+EPZ6438联合治疗组治疗结束后肿瘤体积变小，尤其以联合干预组体积变小最为明显(如图6B)。通过称量离体肿瘤组织重量证实AQB组(**，P<0.01)、EPZ6438组(***，P<0.001)及AQB+EPZ6438联合治疗组(****，P<0.0001)治疗结束后肿瘤重量显著变小，并且联合治疗组肿瘤体积比AQB单药组更小(**，P<0.01)，与EPZ6338单药组相当(如图6C)。
应用例7
观察联合使用AQB与EPZ6438对子宫内膜癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织中APC2、β-catenin、p21及Ki-67蛋白表达水平的影响
人源子宫内膜癌细胞或组织裸鼠皮下移植瘤模型化学干预(给药)结束后处死裸鼠，剥离肿瘤组织，切取一部分肿瘤组织进行石蜡包埋，切片后进行免疫组织化学染色，分析子宫内膜癌组织APC2、β-catenin、p21及Ki-67蛋白水平在不同干预组之间表达变化。
免疫组织化学检测结果表明：AQB单药、EPZ6338单药及AQB+EPZ6438联合干预均可以有效增加裸鼠皮下肿瘤靶基因APC2、p21的蛋白表达水平，且AQB+EPZ6438联合干预组相比AQB、EPZ6338单药组作用更明显(如图7A、图7C所示)。APC2为β-catenin破坏复合物的成员之一，APC2的增加降低了裸鼠皮下肿瘤β-catenin蛋白的水平(如图7B所示)。AQB单药、EPZ6338单药及AQB+EPZ6438联合干预均可以有效抑制裸鼠皮下肿瘤增殖相关蛋白Ki-67的表达，且AQB+EPZ6438联合干预组相比AQB、EPZ6338单药组作用更明显(如图7D所示)。
本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例，并非依此限制本发明的保护范围，故：凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化，均应涵盖于本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种HOTAIR-PRC2阻断剂在制备治疗子宫内膜癌药物中的用途，其特征在于，所述HOTAIR-PRC2阻断剂的化学结构式为
Figure FDA0003151217950000011
2.一种HOTAIR-PRC2阻断剂与EZH2抑制剂联合用于制备治疗子宫内膜癌药物的用途，其特征在于，所述HOTAIR-PRC2阻断剂的化学结构式如权利要求1所示。
3.根据权利要求2所述的一种HOTAIR-PRC2阻断剂与EZH2抑制剂联合用于制备治疗子宫内膜癌药物的用途，其特征在于，所述EZH2抑制剂选自小分子化合物、干扰RNA或抗体。
4.根据权利要求3所述的一种HOTAIR-PRC2阻断剂与EZH2抑制剂联合用于制备治疗子宫内膜癌药物的用途，其特征在于，所述小分子化合物选自EPZ6438、CPI-1205、GSK2816126和GSK343中的一种或多种。
5.根据权利要求2所述的一种HOTAIR-PRC2阻断剂与EZH2抑制剂联合用于制备治疗子宫内膜癌药物的用途，其特征在于，HOTAIR-PRC2阻断剂与EZH2抑制剂的摩尔比为(20-160):(5-80)。
6.根据权利要求2所述的一种HOTAIR-PRC2阻断剂与EZH2抑制剂联合用于制备治疗子宫内膜癌药物的用途，其特征在于，子宫内膜癌细胞来源于哺乳动物，所述哺乳动物选自啮齿目动物、偶蹄目动物、奇蹄目动物、兔形目动物或灵长目动物。
7.一种复合制剂，其特征在于：包括化学结构式为权利要求1所示的HOTAIR-PRC2阻断剂和EZH2抑制剂。
8.根据权利要求7所述的一种复合制剂，其特征在于：所述EZH2抑制剂选自小分子化合物、干扰RNA或抗体。
9.根据权利要求7所述的一种复合制剂，其特征在于：HOTAIR-PRC2阻断剂与EZH2抑制剂的摩尔比为(20-160):(5-80)。
10.一种权利要求7-9任一所述的复合制剂在制备治疗子宫内膜癌药物中的用途。
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