CN113337272B - 一种红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器及其制备和应用 - Google Patents

一种红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器及其制备和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN113337272B
CN113337272B CN202010135843.8A CN202010135843A CN113337272B CN 113337272 B CN113337272 B CN 113337272B CN 202010135843 A CN202010135843 A CN 202010135843A CN 113337272 B CN113337272 B CN 113337272B
Authority
CN
China
Prior art keywords
fluorescence
imprinting
red
green
microspheres
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010135843.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113337272A (zh
Inventor
李金花
杨倩
李楚瑶
陈令新
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Yantai Institute of Coastal Zone Research of CAS
Original Assignee
Yantai Institute of Coastal Zone Research of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Yantai Institute of Coastal Zone Research of CAS filed Critical Yantai Institute of Coastal Zone Research of CAS
Priority to CN202010135843.8A priority Critical patent/CN113337272B/zh
Publication of CN113337272A publication Critical patent/CN113337272A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113337272B publication Critical patent/CN113337272B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
    • C09K11/02—Use of particular materials as binders, particle coatings or suspension media therefor
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G01N2021/6432—Quenching

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)

Abstract

本发明属于分析化学以及快速检测领域，具体涉及一种以荧光目标物为印迹模板并基于后印迹混合法的红‑绿‑蓝荧光发射分子印迹传感器及其制备和在精确可视化检测荧光目标物质中的应用。传感器为以具有红、绿、蓝三色中任意一荧光色的目标物作为印迹模板，再分别合成包埋另外两色荧光源的含印迹空穴的印迹微球，而后通过后印迹混合法混合两种荧光印迹微球，即获得红‑绿‑蓝荧光发射分子印迹传感器。本发明方法制备得到的传感器能够高灵敏、高选择、自校正地检测荧光目标物，且提供的荧光颜色变化较传统双荧光发射分子印迹传感器范围更宽、更丰富，可对荧光目标物进行更精确的裸眼可视化检测。

Description

一种红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器及其制备和应用
技术领域
本发明属于分析化学以及快速检测领域，具体涉及一种以荧光目标物为印迹模板并基于后印迹混合法的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器及其制备和在精确可视化检测荧光目标物质中的应用。
背景技术
现如今，快速可视化检测在环境检测、食品安全、临床诊断等多个领域都发挥着重要作用。对大量待测样品的快速可视化检测，结合对可疑样品的大型仪器(如高效液相色谱)精确检测往往构成一个完整的检测流程，既节约检测的金钱和时间花费又保证检测结果的可靠性。因此，往往要求快速可视化检测方法具有高灵敏性与高选择性。
荧光检测法具有高灵敏性的优势，有利于痕量物质浓度的检测。其中，双荧光发射检测法在识别目标物后呈现出两个发射峰不同程度的变化，因此可实现自校正定量检测、克服各种目标物不相关的因素干扰，而且可随目标物浓度变化展示荧光颜色的变化，更利于裸眼可视化检测目标物。分子印迹技术可用于制备具有高选择性识别位点的分子印迹聚合物，分子印迹聚合物的物理、化学稳定性以及价格廉价性远远优于抗体类同样具有特异性识别功能的物质。因此，双荧光发射分子印迹传感器可结合二者的高灵敏性、自校正功能、荧光演变功能、以及高选择性，将其应用于复杂基质中目标物的快速可视化检测。然而，双荧光发射分子印迹传感器只具有两个发射峰，检测目标物时提供的荧光颜色变化范围狭窄，可视化检测结果缺乏一定的准确性。同时，为优化双峰荧光强度比例，选择合适的发射峰强度比值，以达到最优的可视化检测效果，常需要多次制备多种传感器，过程复杂且繁琐。
三原色“红、绿、蓝”模式荧光传感器可提供更宽范围、更丰富的荧光颜色变化，因此期望制备红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器实现对目标物质更精确的裸眼可视化检测。然而，针对任意一个要求检测的目标物制备红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器，要求同时找到三个合适的荧光源并提供相应的合适的荧光信号变化，如随目标物浓度增强一个荧光峰增强而另外两个荧光峰猝灭，或一个荧光峰猝灭而另外两个荧光峰增强，这是很难实现的。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明目的在于提供一种以荧光目标物为印迹模板并基于后印迹混合法的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器及其制备和在精确可视化检测荧光目标物质中的应用。
为实现上述目的，本发明采用技术方案为：
一种红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器，传感器为以具有红、绿、蓝三色中任意一荧光色的目标物作为印迹模板，再分别合成包埋另外两色荧光源的含印迹空穴的印迹微球，而后通过后印迹混合法混合两种荧光印迹微球，即获得红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器。
所述传感器为将以具有红、绿、蓝三色中任意一荧光色的目标物作为印迹模板，通过溶胶-凝胶聚合法分别合成包埋另外两色荧光源的含印迹空穴的印迹微球，而后由后印迹混合法混合两种荧光印迹微球于缓冲液中；
所述缓冲液的pH值范围需根据目标物以及荧光光源的种类进行限定；
其中，印迹模板为具有自发蓝色荧光时，且绿色荧光源猝灭率较红色荧光源高(或低)时，体系内绿色荧光印迹微球与红色荧光印迹微球用量调整至使传感器初始荧光颜色，即未添加目标物时靠近黄绿色(或红橙色)；
进一步的说，印迹模板(即目标分子)导致的绿色荧光源猝灭率较红色荧光源高时，按体积百分比计，绿色荧光印迹微球与红色荧光印迹微球使用量之比应该足够高，使红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器初始荧光颜色靠近黄绿色，如4.5-6.5％:3.0-4.0％，余量为磷酸缓冲液；印迹模板导致的绿色荧光源猝灭率较红色荧光源低时，按体积百分比计，绿色荧光印迹微球与红色荧光印迹微球使用量之比应该足够低，使红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器初始荧光颜色靠近红橙色；
印迹模板为具有自发绿色荧光时，且蓝色荧光源猝灭率较红色荧光源高(或低)时，体系内蓝色荧光印迹微球与红色荧光印迹微球用量调整至使传感器初始荧光颜色，即未添加目标物时靠近蓝紫色(或红紫色)；
进一步的说，印迹模板为具有自发绿色荧光时，印迹模板导致的蓝色荧光源猝灭率较红色荧光源高时，按体积百分比计，蓝色荧光印迹微球与红色荧光印迹微球使用量之比应该足够高，使红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器初始荧光颜色靠近蓝紫色；印迹模板导致的蓝色荧光源猝灭率较红色荧光源低时，按体积百分比计，蓝色荧光印迹微球与红色荧光印迹微球使用量之比应该足够低，使红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器初始荧光颜色靠近红紫色；
印迹模板为具有自发红色荧光时，且蓝色荧光源猝灭率较绿色荧光源高(或低)时，体系内蓝色荧光印迹微球与绿色荧光印迹微球用量调整至使传感器初始荧光颜色，即未添加目标物时靠近蓝色(或绿色)；
进一步的说，印迹模板为具有自发红色荧光时，印迹模板导致的蓝色荧光源猝灭率较绿色荧光源高时，按体积百分比计，蓝色荧光印迹微球与绿色荧光印迹微球使用量之比应该足够高，使红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器初始荧光颜色靠近蓝色；印迹模板导致的蓝色荧光源猝灭率较绿色荧光源低时，按体积百分比计，蓝色荧光印迹微球与绿色荧光印迹微球使用量之比应该足够低，使红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器初始荧光颜色靠近绿色；
所述荧光印迹微球为通过溶胶-凝胶聚合法在二氧化硅纳米粒子表面进行模板印迹，印迹层内分别包埋另外两色荧光源，洗脱模板后的空穴为识别位点，即分别得到具有核壳结构的不同荧光印迹微球；其中，蓝色荧光源可为碳量子点、石墨烯量子点或7-羟基香豆素等；绿色荧光源可为碳量子点、碲化镉量子点或异硫氰酸荧光素酯等；红色荧光源可为碳量子点、碲化镉量子点或金纳米团簇等。
所述传感器为将以荧光目标物为印迹模板，以具有自发蓝色荧光的叶酸为例，通过溶胶-凝胶聚合法分别合成绿色荧光叶酸印迹微球和红色荧光叶酸印迹微球，由后印迹混合法混合于磷酸缓冲液(最终浓度为0.01M,pH 8.0)中；其中，按体积百分比计，绿色荧光叶酸印迹微球4.5-6.5％，红色荧光叶酸印迹微球3.0-4.0％，余量为磷酸缓冲液(最终浓度为0.01M,pH 8.0)。
所述荧光叶酸印迹微球为通过溶胶-凝胶聚合法在二氧化硅纳米粒子表面进行叶酸印迹，印迹层内分别包埋绿色荧光碲化镉量子点和红色荧光碲化镉量子点，洗脱叶酸后的空穴为识别位点，即分别得到具有核壳结构的绿色荧光叶酸印迹微球和红色荧光叶酸印迹微球。
一种红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器的制备方法，以具有红、绿、蓝三色中任意一荧光色的目标物作为印迹模板，通过溶胶-凝胶聚合法分别合成包埋另外两色荧光源的含印迹空穴的印迹微球，而后由后印迹混合法混合两种荧光印迹微球于缓冲液中，即获得红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器，其可在识别荧光目标物后发射出红、绿、蓝三种荧光。
所述荧光印迹微球为通过溶胶-凝胶聚合法在二氧化硅纳米粒子表面进行模板印迹，印迹层内分别包埋另外两色荧光源，洗脱模板后的空穴为识别位点，即分别得到具有核壳结构的不同荧光印迹微球，而后将上述获得微球分别分散于超纯水中；其中，蓝色荧光源可为碳量子点、石墨烯量子点或7-羟基香豆素等；绿色荧光源可为碳量子点、碲化镉量子点或异硫氰酸荧光素酯等；红色荧光源可为碳量子点、碲化镉量子点或金纳米团簇等。
所述绿色荧光印迹微球为向含有二氧化硅微球的水溶液中加入印迹模板和3-氨基丙基三乙氧基硅烷，搅拌1-2小时后，再加入绿色荧光源，混匀后继续加入正硅酸乙酯和氨水在黑暗环境下进行溶胶-凝胶聚合反应10-12小时，反应后将产物用离心法沉淀，弃上清液，洗脱液(例如，甲醇、乙腈、乙醇/乙腈(体积比4:1))洗脱模板分子，得到具有核壳结构的绿色荧光印迹微球，而后再将微球重新分散于超纯水中。
所述红色荧光印迹微球为向含有二氧化硅微球的水溶液中加入印迹模板和3-氨基丙基三乙氧基硅烷，搅拌1-2小时后，再加入红色荧光源混匀后继续加入正硅酸乙酯和氨水在黑暗环境下进行溶胶-凝胶聚合反应10-12小时，反应后将产物用离心法沉淀，弃上清液，洗脱液(例如，甲醇、乙腈、乙醇/乙腈(体积比4:1))脱模板分子，得到具有核壳结构的红色荧光印迹微球，而后再将微球重新分散于超纯水中。
所述蓝色荧光印迹微球为向含有二氧化硅微球的水溶液中加入印迹模板和3-氨基丙基三乙氧基硅烷，搅拌1-2小时后，再加入蓝色荧光源混匀后继续加入正硅酸乙酯和氨水在黑暗环境下进行溶胶-凝胶聚合反应10-12小时，反应后将产物用离心法沉淀，弃上清液，洗脱液(例如，甲醇、乙腈、乙醇/乙腈(体积比4:1))脱模板分子，得到具有核壳结构的蓝色荧光印迹微球，而后再将微球重新分散于超纯水中。
所述传感器为将以荧光目标物为印迹模板，以具有自发蓝色荧光的叶酸为例，向磷酸缓冲液(最终浓度为0.01M,pH 8.0)中加入绿色荧光叶酸印迹微球和红色荧光叶酸印迹微球，混匀，即获得红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器可在识别荧光目标物叶酸后发射出红、绿、蓝三种荧光。
通过溶胶-凝胶聚合法分别合绿色荧光叶酸印迹微球和红色荧光叶酸印迹微球，而后将所得微球由后印迹混合法混合于磷酸缓冲液(最终浓度为0.01M,pH 8.0)中；其中，按体积百分比计，绿色荧光叶酸印迹微球4.5-6.5％、红色荧光叶酸印迹微球3.0-4.0％，余量为缓冲液。
所述荧光叶酸印迹微球为通过溶胶-凝胶聚合法在二氧化硅纳米粒子表面进行叶酸印迹，印迹层内分别包埋绿色荧光碲化镉量子点和红色荧光碲化镉量子点，洗脱叶酸后的空穴为识别位点，即分别得到具有核壳结构的绿色荧光叶酸印迹微球和红色荧光叶酸印迹微球，而后将上述获得微球分别分散于超纯水中。
进一步的说，绿色荧光叶酸印迹微球为向含有二氧化硅微球的水溶液中加入叶酸和3-氨基丙基三乙氧基硅烷，搅拌1-2小时后，再加入绿色荧光碲化镉量子点，混匀后继续加入正硅酸乙酯和氨水在黑暗环境下进行溶胶-凝胶聚合反应10-12小时，反应后将产物用离心法沉淀，弃上清液，甲醇洗脱模板分子，得到具有核壳结构的绿色荧光叶酸印迹微球，而后再将微球重新分散于超纯水中。所述红色荧光叶酸印迹微球制备过程与绿色荧光叶酸印迹微球制备过程相同，区别在于使用红色荧光碲化镉量子点，并用乙腈洗脱模板分子。
再进一步的说，所述绿色荧光叶酸印迹微球溶胶凝胶聚合反应体系总体积控制在18-22mL；其中，二氧化硅、叶酸、3-氨基丙基三乙氧基硅烷、绿色荧光碲化镉量子点、正硅酸乙酯和氨水用量分别为8-12mg，6-10mg，30-40μL，2-4mL，40-60μL和40-60μL；所述红色荧光叶酸印迹微球溶胶凝胶聚合反应体系总体积控制在18-22mL；其中，二氧化硅、叶酸、3-氨基丙基三乙氧基硅烷、红色荧光碲化镉量子点、正硅酸乙酯和氨水用量分别为8-12mg，6-10mg，30-40μL，5-7mL，180-220μL和180-220μL。
一种所述的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器的应用，所述传感器在高灵敏、高选择、自校正地定量/可视化定性检测荧光目标物中的应用。
以叶酸为例，所述传感器于待测液中，传感器内的绿色荧光碲化镉量子点、红色荧光碲化镉量子点和蓝色荧光目标物叶酸都作为荧光响应信号，其荧光强度随目标物浓度增加而分别降低、降低和增强，通过三处发射峰强度不同程度的变化，产生红-绿-蓝范围内的丰富的荧光颜色变化实现对待检测液中叶酸的可视化检测；而后通过荧光分光光度计测定溶液的荧光光谱，读取三个发射峰峰强，计算三个峰强比值的变化与叶酸浓度存在的计量关系，进而进行叶酸的定量检测。
检测原理：本发明传感器是借助荧光目标物的自身荧光，同时结合额外两种荧光源，构建“红、绿、蓝”三荧光发射分子印迹传感器，并在目标物识别过程中，目标物自身荧光强度增强而额外两种荧光源荧光强度下降，进而呈现宽范围、丰富的荧光颜色变化，实现荧光目标物的精确可视化检测。
以蓝色荧光叶酸为例，本发明传感器可视化检测叶酸的机理在于，叶酸通过光致激发电子转移猝灭绿色荧光碲化镉量子点和红色荧光碲化镉量子点；而叶酸自身蓝色荧光增强。所采用的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器，能够通过三处发射峰强度不同程度的变化，产生红-绿-蓝范围内的丰富的荧光颜色变化，实现对待检测液中叶酸的精确可视化检测。
本发明的有益效果为：
本发明传感器是借助荧光目标物的自身荧光，同时结合额外两种荧光源，构建“红、绿、蓝”三荧光发射分子印迹传感器，并在目标物识别过程中，目标物自身荧光强度增强而额外两种荧光源荧光强度下降，进而呈现宽范围、丰富的荧光颜色变化，实现荧光目标物的精确可视化检测。
本发明红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器与荧光目标物(以蓝色荧光叶酸为例)作用后可在同一波长(如365nm)激发下发射三个不同波长的荧光，分别对应红色、绿色、蓝色荧光，且随荧光目标物叶酸浓度增加，该三荧光发射峰发生不同的变化，分别为荧光猝灭、荧光猝灭和荧光增强，通过测量三个不同发射波长处的荧光强度，以其比值为信号参量可测定目标物的含量。同时，通过红-绿-蓝三处发射峰不同的变化，能够产生丰富的荧光颜色变化，进而拓宽分子印迹技术在快速精确可视化检测荧光目标物质中的应用；具体为：
1)本发明首次以荧光目标物(以叶酸为例)为印迹模板合成三荧光(红、绿、蓝)发射的分子印迹传感器，可在识别荧光目标物叶酸后发射出红、绿、蓝三种荧光。其中红色、绿色荧光随叶酸浓度增强而荧光强度降低，叶酸自身蓝色荧光反而增强，进而提供丰富的荧光颜色变化以及更高的灵敏度和更大的印迹因子，进而将获得的传感器用于叶酸的精确可视化检测；
2)本发明通过后印迹混合法，首先合成绿色和红色荧光发射的叶酸印迹微球，然后按照适合比例混匀，简化了红、绿、蓝三种荧光峰发射强度比例的优化过程，避免多次合成分子印迹聚合物，大大缩短了实验周期，减少了实验花费。
3)本发明通过以荧光目标物后(以叶酸为例)为印迹模板合成红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器，借助荧光目标物的自身荧光，以及额外的两个荧光源实现与目标物浓度相关的宽范围、丰富的荧光颜色变化，实现荧光目标物的精确可视化检测。荧光目标物自身荧光的引进，降低了三荧光发射传感器要求同时找到三个合适的荧光源并提供相应的合适的荧光信号变化，如随目标物浓度增强一个荧光峰增强而另外两个荧光峰猝灭，或一个荧光峰猝灭而另外两个荧光峰增强的难度，即只需额外寻找两个因目标物而猝灭的荧光，而这是很容易实现的。
4)本发明传感器通过印迹位点对叶酸的特异性识别可以高选择性地识别、重结合叶酸，进而同时猝灭红色、绿色荧光，提高蓝色荧光；即在检测中绿色荧光碲化镉量子点和红色荧光碲化镉量子点和目标物叶酸之间发生光致电子转移，随着叶酸浓度的增大，绿色和红色荧光逐渐猝灭；而叶酸自身蓝色荧光增强，从而使荧光颜色发生黄色-橙色红色-紫红色-紫色-蓝色的宽范围变化，实现叶酸的精确可视化检测。
5)本发明传感器充分发挥了分子印迹聚合物高选择性以及红-绿-蓝三发射荧光检测技术高灵敏性、自校正抗干扰、颜色演变丰富等优势，建立了一种方便快捷且可靠的定量方法用于复杂样品中荧光目标物质叶酸的检测，且提供丰富的颜色变化能用于定性检测，本发明传感器能检测0.01-50ppm的叶酸，检测限低达0.0052ppm；本发明克服了传统的比率荧光分子印迹传感器颜色演变范围窄、制备复杂等缺点，在荧光目标物质的检测中具有重要应用价值。
附图说明
图1(i)为本发明实施例提供的色荧光叶酸印迹微球(g-MIPs)和红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)的合成过程，及(ii)红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器的构建过程及其识别荧光目标物叶酸的识别作用示意图。
图2A为本发明实施例提供的绿色荧光叶酸印迹微球(g-MIPs)、红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)的荧光光谱图及红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器荧光识别叶酸前后的荧光光谱图；其中，a为红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)的荧光光谱图、b为绿色荧光叶酸印迹微球(g-MIPs)的荧光光谱图、c为识别前红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器的荧光光谱图；d为红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器在加入5ppm叶酸之后的荧光光谱图；
图2B为本发明实施例提供的二氧化硅纳米微球的形貌图；
图2C为本发明实施例提供的绿色荧光叶酸印迹微球(g-MIPs)的形貌图；
图2D为本发明实施例提供的绿色荧光非印迹聚合物(g-NIPs)的形貌图；
图2E为本发明实施例提供的红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)的形貌图；
图2F为本发明实施例提供的红色荧光非印迹聚合物(r-NIPs)的形貌图。
图3为本发明实施例提供的传感器(总体积为1mL)中含有相同用量5％(即50μL)绿色荧光叶酸印迹微球(g-MIPs)以及不同用量红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)条件下检测不同浓度叶酸的荧光光谱图与荧光颜色演变图；其中，A-F红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)用量从0％增加到8％时，即分别为0、5、20、35、50、80μL。
图4为本发明实施例提供的不同传感器检测叶酸的荧光光谱图与荧光颜色演变图；其中，A为红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器，插图为荧光比值强度变化与叶酸浓度的拟合曲线；B为红-绿-蓝荧光发射非印迹传感器，插图为消除蓝色发射峰造成的光谱重叠的影响后绿色荧光和红色荧光发射光谱；C为绿-蓝双荧光发射分子印迹传感器，插图为荧光比值强度变化与叶酸浓度的拟合曲线；D为红-蓝双荧光发射分子印迹传感器，插图为荧光比值强度变化与叶酸浓度的拟合曲线；A-D中箭头表示荧光强度随叶酸浓度增加的变化趋势：增强或猝灭。
图5为本发明实施例提供的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器(MIPs)与红-绿-蓝荧光发射非印迹传感器(NIPs)识别叶酸、甲氨喋呤、甲氧苄啶、维生素B1、维生素C和葡萄糖后的荧光比值强度变化以及相应的荧光颜色；其中，各识别物质浓度均为5ppm。
具体实施方式
以下结合实例对本发明的具体实施方式做进一步说明，应当指出的是，此处所描述的具体实施方式只是为了说明和解释本发明，并不局限于本发明。
本发明方法制备得到的传感器能够高选择、高灵敏地检测荧光目标物，如叶酸，且提供颜色演变与自校正功能；传感器制备过程中引进荧光目标物的自身荧光，配合额外两个随目标物而猝灭的荧光源，降低荧光源寻找的难度，且应用的后印迹混合构建传感器的方法，可有效简化三种荧光峰发射强度比例的优化过程，大大缩短实验周期，减少实验花费，可更广泛地应用于各种荧光目标物的精确可视化检测，为荧光目标物的检测提供重要应用价值。
本发明实施例传感器以具有自发蓝色荧光的叶酸作为印迹模板为例，绿色荧光碲化镉量子点、红色荧光碲化镉量子点和蓝色荧光目标物叶酸分别提供绿色、红色和蓝色荧光，发射波长依次分别为540nm、644nm和465nm，各自因叶酸的识别产生不同的荧光强度变化，即荧光猝灭、荧光猝灭和荧光增强，通过三处发射峰强度不同程度的变化，从而使荧光颜色发生丰富的演变：从最初的黄色到橙色到红色到紫红色到紫色到最后的蓝色，荧光颜色丰富且演变范围宽，可用于精确可视化检测叶酸。
实施例1
红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器的制备：
以具有自发蓝色荧光的叶酸作为印迹模板为例：
(1)制备绿色荧光叶酸印迹微球和红色荧光叶酸印迹微球，参见图1(i)：
制备绿色荧光叶酸印迹微球(g-MIPs)：将1mL SiO2纳米颗粒(10mg/mL)分散于16mL超纯水中，添加8mg叶酸和37μL APTES，搅拌1h后，加入3mL绿色荧光碲化镉量子点(g-QDs)，混匀后再加入50μL氨水(NH3·H2O)和50μL正硅酸乙酯(TEOS)，在黑暗中反应12h。最后，通过离心收集产物(g-MIPs)，用甲醇洗脱模板后，分散在20mL超纯水中备用。该绿色荧光叶酸印迹微球(g-MIPs)分散液在365nm激发下发射绿色荧光，发射波长为540nm(参见图2A)。作为对比，在不添加叶酸模板的情况下，运用相同的方法制备绿色荧光非印迹聚合物(g-NIPs)。
制备红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)与对照的红色荧光非印迹聚合物(r-NIPs)：将1mL SiO2纳米颗粒(10mg/mL)分散于13mL超纯水中，添加8mg叶酸和37μL APTES，搅拌1h后，加入6mL红色荧光碲化镉量子点(r-QDs)，混匀后再加入200μL氨水(NH3·H2O)和200μL正硅酸乙酯(TEOS)，在黑暗中反应12h。最后，通过离心收集产物(r-MIPs)，用乙腈洗脱模板后，分散在20mL超纯水中备用。该红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)分散液在365nm激发下发射红色荧光，发射波长为644nm(参见图2A)。作为对比，在不添加叶酸模板的情况下，运用相同的方法制备绿色荧光非印迹聚合物(r-NIPs)。
(2)制备红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器，参见图1(ii)：
将50μL上述获得绿色荧光叶酸印迹微球(g-MIPs)分散液和35μL上述红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)分散液混合后均匀分散在100μL磷酸缓冲溶液(0.1M,pH8.0)中，而后使用超纯水将最终体积定容至1mL；得到红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器。
将上述获得传感器在365nm激发下发射黄色荧光，发射波长为540nm和644nm(参见图2A)，可在识别荧光目标物叶酸(如5ppm)后发射出绿、红、蓝三种荧光，发射波长为540nm、644nm和465nm，同时荧光图像颜色变为红色(参见图2A)。
取上述实施例制备获得绿色荧光叶酸印迹微球(g-MIPs)、绿色荧光非印迹聚合物(g-NIPs)、红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)和红色荧光非印迹聚合物(g-NIPs)溶液各100μL，而后分别经超纯水分别进行稀释1000倍，稀释后分别分散在经过乙醇清洗的铜网上，干燥之后，将载有上述各稀释后物质的铜网用透射电镜进行观察(参见图2C-F)。
由图2可知，叶酸印迹微球和非印迹微球都呈球形且具有粗糙表面，可见模板分子对传感器的形貌和尺寸没有很大影响；绿色荧光叶酸印迹与非印迹微球平均粒径约为85nm，红色荧光叶酸印迹与非印迹微球平均粒径约为93nm，同时SiO2核平均粒径约为75nm(参见图2B)，计算可知印迹层小于10nm(计算公式：(印迹微球平均粒径-SiO2核平均粒径)÷2)，超薄的印迹层使得大多数识别位点接近或甚至在壳层表面，从而降低了传质阻力，易于接近位点。
同时，将目标物换成如具有红色荧光的罗丹明B、藻蓝蛋白，选择合适的蓝色荧光源和绿色荧光源，按照上述制备方法，即可以制备检测罗丹明B或藻蓝蛋白的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器；或将目标物换成如具有绿色荧光的绿色荧光蛋白，选择合适的蓝色荧光源和红色荧光源，按照上述制备方法，即可以制备检测绿色荧光蛋白的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器。
其中，蓝色荧光源可为碳量子点、石墨烯量子点、7-羟基香豆素等；绿色荧光源可为碳量子点、碲化镉量子点、异硫氰酸荧光素酯等；红色荧光源可为碳量子点、碲化镉量子点、金纳米团簇等。
上述实施例中应用的二氧化硅和各种荧光源可市购，其中二氧化硅还可参照文献：X.Wu,Z.Zhang,J.Li,H.You,Y.Li and L.Chen,Molecularly imprinted polymers-coated gold nanoclusters for fluorescent detection of bisphenolA.Sens.Actuators B:Chem.,2015,211,507–514.合成；绿色和红色荧光碲化镉量子点可参照文献：M.Y.Gao,S.Kirstein,H.Mohwald,A.L.Rogach,A.Kornowski,A.Eychmuller andH.Weller,Strongly photoluminescent CdTe nanocrystals by proper surfacemodification.J.Phys.Chem.B,1998,102,8360–8363.合成。
实施例2
将50μL上述获得绿色荧光叶酸印迹微球(g-MIPs)分散液和不同量的上述获得红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)分散液混合后均匀分散在100μL磷酸缓冲溶液(0.1M,pH8.0)中，再使用超纯水将最终体积定容至1mL即获得传感器；其中，绿色荧光叶酸印迹微球(g-MIPs)分散液用量固定占传感器总体积(1mL)的5％(即50μL)，红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)分散液用量分别占传感器总体积(1mL)0、0.5％、2％、3.5％、5％、8％(即，添加量分别为0、5、20、35、50、80μL)；而后向上述传感器中加入不同量的叶酸，使其终浓度达到0、0.5、1、5、10、20、30、50ppm，并反应7分钟，在激发波长365nm，狭缝宽度10/10nm的条件下测定荧光光谱，相应的荧光图像于365nm紫外灯下观察(参见图3)。
由图3所示，当传感器仅由5％的g-MIPs组成时(图3A)，显示出逐渐减少的绿色荧光峰和增长的蓝色荧光峰，观察到狭窄的颜色从绿色到蓝色。当r-MIPs体积分数从0.5％增加到8％时(即5-80μL)，显示出红色荧光峰在增强(图3B-F)，传感器的初始颜色发生从橄榄绿到黄色到橙红色的明显变化，同时亮度提高。但是，在传感器中，极低含量(0.5％)r-MIPs的加入无法提高丰富的颜色变化，缺失红色荧光图像部分(图3B)；5％和8％r-MIPs的过量使用则导致黄色部分缺失(图3E和F)。令人满意的是，当5％的g-MIPs与2％或3.5％的r-MIPs混合时，呈现一个理想的宽范围的荧光颜色变化：黄色-橙色-红色-紫色-蓝色(图3C和D)。与添加体积分数2％r-MIPs的传感器(图3C)比较，含3.5％r-MIPs的传感器(图3D)具有相对更明亮的图像，而且在红色拐点(对应于识别5ppm叶酸)前后拥有更细致而丰富的荧光颜色。该结果表明，可视化检测叶酸的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器中两种印迹微球的最佳配比为：g-MIPs:r-MIPs＝5％:3.5％，即1mL红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器含有50μL绿色荧光叶酸印迹微球(g-MIPs)分散液和35μL红色荧光叶酸印迹微球(r-MIPs)分散液。
实施例3
根据上述记载的传感器制备方法制备不同传感器，具体将上述获得的不同微球按一定比例混合，即获得不同选择和不同比例的不同传感器；其中红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器中g-MIPs:r-MIPs＝5％:3.5％(体积百分比)、红-绿-蓝荧光发射非印迹传感器中g-NIPs:r-NIPs＝5％:3.5％(体积百分比)、绿-蓝双荧光发射分子印迹传感器中g-MIPs＝5％(体积百分比)、红-蓝双荧光发射分子印迹传感器中r-MIPs＝3.5％(体积百分比)。
向上述获得的不同传感器中加入不同量的叶酸，使其终浓度达到0、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、15、20、30、40和50ppm，并反应7分钟，在激发波长365nm，狭缝宽度10/10nm的条件下测定荧光光谱，相应的荧光图像于365nm紫外灯下观察(参见图4)。
如图4A所示，加入叶酸之前，红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器在365nm激发下仅发出绿色和红色发射峰，发射波长分别为540nm和644nm，在365nm紫外灯下呈黄色。当叶酸浓度从0增至1ppm，绿色荧光的强度大幅度下降至初始值的一半，而红色荧光仅微弱地被猝灭，荧光目标物叶酸的自身蓝色荧光几乎没有出现。因此，绿色荧光发射峰导致起主要作用并导致传感器荧光颜色由红色向橙色过渡。随着叶酸浓度增加至5ppm，大部分绿色荧光被猝灭，同时少量红色荧光猝灭，荧光目标物叶酸的自身蓝色荧光峰出现但作用不大。因此，传感器荧光颜色继续转变为红色，该颜色极容易被裸眼识别。当叶酸浓度进一步增加至50ppm，绿色荧光的猝灭空间受限，几乎不存在，同时红色荧光也几乎完全被猝灭，而叶酸的自身蓝色荧光则大大增强，因此红色荧光与蓝色荧光的动态相互作用使得传感器颜色进一步演变至紫色与最终的蓝色。红、绿、蓝三个发射峰强度的比值变化，即(I644*I540/I465)/(I644*I540/I465)0与目标物叶酸浓度存在的一定计量关系(遵循logistic函数)，相关系数r2为0.9988，检测限低达0.0052ppm。
而如图4B所示，随着叶酸浓度的增加，红-绿-蓝荧光发射非印迹传感器的蓝色和绿色荧光增强，而红色荧光不受影响。显然，蓝色荧光的增强是由叶酸的重结合造成。如图4B插图所示，消除蓝色发射峰造成的光谱重叠的影响后，可以观察到绿色荧光和红色荧光随叶酸浓度的增加而猝灭，但是猝灭效果很弱，造成红-绿-蓝荧光发射非印迹传感器仅当叶酸浓度高于30ppm时才从黄色变为粉紫色。对比红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器的分析性能(包括光谱变化与图像颜色变化)，可见红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器中存在大量的特异性识别位点发挥对叶酸的识别作用，而非印迹传感器(NIPs)中没有。
同时观察双荧光发射分子印迹传感器，即绿-蓝双荧光发射分子印迹传感器(图4C)和红-蓝双荧光发射分子印迹传感器(图4D)，同样地，加入叶酸后，绿色和红色荧光发射峰被猝灭而蓝色荧光发射峰会增强，导致相似的荧光比值变化趋势，以及对应的荧光颜色变化，分别为：绿色-蓝色和红色-紫色。与双荧光发射分子印迹传感器对比，三荧光发射分子印迹传感器的荧光颜色变化范围更宽，颜色更丰富，具有精确可视化检测目标物的能力。
实施例4
向上述实施例获得的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器(又称MIPs传感器)和红-绿-蓝荧光发射非印迹传感器(又称NIPs传感器)中分别加入5ppm的叶酸、叶酸结构类似物(如甲氨喋呤、甲氧苄啶)及其他可能共同存在的物质(如维生素B1、维生素C、葡萄糖)，并反应7分钟，在激发波长365nm，狭缝宽度10/10nm的条件下测定荧光光谱，相应的荧光图像于365nm紫外灯下观察(参见图5)；其中红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器中g-MIPs:r-MIPs＝5％:3.5％(体积百分比)、红-绿-蓝荧光发射非印迹传感器中g-NIPs:r-NIPs＝5％:3.5％(体积百分比)。
如图5所示，因MIPs传感器含有大量识别位点可在大小、形状和功能基团上与目标物质叶酸互补进而重结合叶酸，造成绿色荧光和红色荧光的猝灭，故荧光比值强度变化(I644*I540/I465)/(I644*I540/I465)0值变小，荧光颜色转变为红色。然而，除甲氨喋呤外，其他物质对(I644*I540/I465)/(I644*I540/I465)0的影响可以忽略，荧光颜色变化也不明显。该结果表明，MIPs传感器中叶酸印迹位点无法与其他物质互补，因此不发生结合行为。而甲氨喋呤与叶酸的结构相似，故小部分甲氨喋呤的重结合导致了绿色和红色荧光一定程度的猝灭，但不明显。同时，NIPs传感器对任何物质都没有特定的识别位点，包埋的g-QDs和r-QDs不受影响，因此没有明显的荧光比值强度变化和荧光颜色变化。此外，叶酸自身蓝色荧光会导致蓝色荧光增强，故荧光比值强度变化(I644*I540/I465)/(I644*I540/I465)0值变小，然而，增强的蓝色荧光对NIPs传感器的荧光颜色影响不大。

Claims (9)

1.一种红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器，其特征在于：传感器为以具有红、绿、蓝三色中任意一荧光色的目标物作为印迹模板，通过溶胶-凝胶聚合法分别合成包埋另外两色荧光源的含印迹空穴的印迹微球，而后由后印迹混合法混合两种荧光印迹微球于缓冲液中，即获得红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器；
所述印迹模板为叶酸。
2.按权利要求1所述的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器，其特征在于：
印迹模板为具有自发蓝色荧光时，且绿色荧光源猝灭率较红色荧光源高或低时，体系内绿色荧光印迹微球与红色荧光印迹微球用量调整至使传感器初始荧光颜色，即未添加目标物时的荧光颜色靠近黄绿色或红橙色；
印迹模板为具有自发绿色荧光时，且蓝色荧光源猝灭率较红色荧光源高或低时，体系内蓝色荧光印迹微球与红色荧光印迹微球用量调整至使传感器初始荧光颜色，即未添加目标物时的荧光颜色靠近蓝紫色或红紫色；
印迹模板为具有自发红色荧光时，且蓝色荧光源猝灭率较绿色荧光源高或低时，体系内蓝色荧光印迹微球与绿色荧光印迹微球用量调整至使传感器初始荧光颜色，即未添加目标物时的荧光颜色靠近蓝色或绿色。
3.按权利要求1或2所述的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器，其特征在于：所述荧光印迹微球为通过溶胶-凝胶聚合法在二氧化硅纳米粒子表面进行模板印迹，印迹层内分别包埋另外两色荧光源，洗脱模板后的空穴为识别位点，即分别得到具有核壳结构的不同荧光印迹微球；其中，蓝色荧光源为碳量子点或7-羟基香豆素；绿色荧光源为碳量子点、碲化镉量子点或异硫氰酸荧光素酯；红色荧光源为碳量子点、碲化镉量子点或金纳米团簇。
4.一种权利要求1所述的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器的制备方法，其特征在于：以具有红、绿、蓝三色中任意一荧光色的目标物作为印迹模板，通过溶胶-凝胶聚合法分别合成包埋另外两色荧光源的含印迹空穴的印迹微球，而后由后印迹混合法混合两种荧光印迹微球于缓冲液中，即获得红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器，其可在识别荧光目标物后发射出红、绿、蓝三种荧光。
5.按权利要求4所述的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器的制备方法，其特征在于：所述荧光印迹微球为通过溶胶-凝胶聚合法在二氧化硅纳米粒子表面进行模板印迹，印迹层内分别包埋另外两色荧光源，洗脱模板后的空穴为识别位点，即分别得到具有核壳结构的不同荧光印迹微球，而后将上述获得微球分别分散于超纯水中；其中，蓝色荧光源为碳量子点或7-羟基香豆素；绿色荧光源为碳量子点、碲化镉量子点或异硫氰酸荧光素酯；红色荧光源为碳量子点、碲化镉量子点或金纳米团簇。
6.按权利要求5所述的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器的制备方法，其特征在于：所述绿色荧光印迹微球为向含有二氧化硅微球的水溶液中加入印迹模板和3-氨基丙基三乙氧基硅烷，搅拌1-2小时后，再加入绿色荧光源，混匀后继续加入正硅酸乙酯和氨水在黑暗环境下进行溶胶-凝胶聚合反应10-12小时，反应后将产物用离心法沉淀，弃上清液，洗脱液洗脱模板分子，得到具有核壳结构的绿色荧光印迹微球，而后再将微球重新分散于超纯水中。
7.按权利要求5所述的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器的制备方法，其特征在于：所述红色荧光印迹微球为向含有二氧化硅微球的水溶液中加入印迹模板和3-氨基丙基三乙氧基硅烷，搅拌1-2小时后，再加入红色荧光源混匀后继续加入正硅酸乙酯和氨水在黑暗环境下进行溶胶-凝胶聚合反应10-12小时，反应后将产物用离心法沉淀，弃上清液，洗脱液脱模板分子，得到具有核壳结构的红色荧光印迹微球，而后再将微球重新分散于超纯水中。
8.按权利要求5所述的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器的制备方法，其特征在于：所述蓝色荧光印迹微球为向含有二氧化硅微球的水溶液中加入印迹模板和3-氨基丙基三乙氧基硅烷，搅拌1-2小时后，再加入蓝色荧光源混匀后继续加入正硅酸乙酯和氨水在黑暗环境下进行溶胶-凝胶聚合反应10-12小时，反应后将产物用离心法沉淀，弃上清液，洗脱液脱模板分子，得到具有核壳结构的蓝色荧光印迹微球，而后再将微球重新分散于超纯水中。
9.一种按权利要求1所述的红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器的应用，其特征在于，所述传感器在高灵敏、高选择、自校正地定量/可视化定性检测荧光目标物中的应用。
CN202010135843.8A 2020-03-02 2020-03-02 一种红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器及其制备和应用 Active CN113337272B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010135843.8A CN113337272B (zh) 2020-03-02 2020-03-02 一种红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器及其制备和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010135843.8A CN113337272B (zh) 2020-03-02 2020-03-02 一种红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器及其制备和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113337272A CN113337272A (zh) 2021-09-03
CN113337272B true CN113337272B (zh) 2022-09-27

Family

ID=77467207

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010135843.8A Active CN113337272B (zh) 2020-03-02 2020-03-02 一种红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器及其制备和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113337272B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114518358B (zh) * 2022-02-16 2023-10-27 四川农业大学 农药残留检测用三色传感探针及其制备方法、应用和深度学习的视觉智能监测装置及方法
CN115266665A (zh) * 2022-07-18 2022-11-01 华南理工大学 一种基于分子印迹比色法构建的随机森林检测模型及其应用
CN115356308B (zh) * 2022-07-27 2024-08-02 宁波大学 一种基于分子印迹量子点荧光探针高通量检测邻苯二甲酸二丁酯的方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109655442A (zh) * 2019-03-14 2019-04-19 中国科学院烟台海岸带研究所 一种三荧光发射分子印迹传感器及其制备和应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109655442A (zh) * 2019-03-14 2019-04-19 中国科学院烟台海岸带研究所 一种三荧光发射分子印迹传感器及其制备和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
分子印迹材料的先进制备技术与策略;王晓艳等;《中国科学》;20191231;第64卷(第13期);第1352-1367页 *
新型分子印迹荧光传感器的构建与应用;贾梦凡等;《中国科学》;20171231;第47卷(第3期);第300-314页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN113337272A (zh) 2021-09-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN113337272B (zh) 一种红-绿-蓝荧光发射分子印迹传感器及其制备和应用
Yang et al. Rational construction of a triple emission molecular imprinting sensor for accurate naked-eye detection of folic acid
US8168447B2 (en) Multiple component nanoparticles for multiplexed signaling and optical encoding
CN110186884B (zh) 一种可视化分子印迹纳米传感器及其制备和应用
CN109239045B (zh) 一种分子印迹比率荧光传感器及制备和应用
CN109655442B (zh) 一种三荧光发射分子印迹传感器及其制备和应用
Pu et al. Artificial tongue based on metal–biomolecule coordination polymer nanoparticles
Turel et al. Detection of nanomolar concentrations of copper (II) with a Tb-quinoline-2-one probe using luminescence quenching or luminescence decay time
CN108517208A (zh) 稀土比率荧光探针的制备方法及其Cu2+检测应用
Jiang et al. Fluorescent Nanomaterials for Color‐Multiplexing Test Papers toward Qualitative/Quantitative Assays
Liang et al. Electron transfer and fluorescence “turn-off” based CdTe quantum dots for vancomycin detection at nanogram level in aqueous serum media
Trinquet et al. Fluorescence technologies for the investigation of chemical libraries
Zhang et al. Fluorimetric identification of sulfonamides by carbon dots embedded photonic crystal molecularly imprinted sensor array
Lu et al. A novel dual response ratiometric fluorescent probe for the determination of H 2 O 2 and glucose via etching of silver nanoparticles
Xu et al. A simple synthesis method of microsphere immunochromatographic test strip for time-resolved luminescence detection of folic acid
Shen et al. Detection of DNA using an “off-on” switch of a regenerating biosensor based on an electron transfer mechanism from glutathione-capped CdTe quantum dots to nile blue
Ferris et al. An ionophore-based persistent luminescent ‘Glow Sensor’for sodium detection
KR20130104779A (ko) 양자점 기반의 경쟁 면역분석법 및 다중 유세포 분석법을 이용한 시료 중 오염물질의 검출 방법
CN108333158B (zh) 双掺杂荧光碳量子点及合成方法
Ma et al. A luminescent sensor based on in-situ formed copper nanocluster-loading terbium coordination polymer with multicolor response for identification of antibiotics
Liu et al. A fluorescence sensing method for brilliant blue with gold nanoclusters based on the inner filter effect
TWI830913B (zh) 使用金奈米粒子之精胺的直接比色法檢測
CN111138313B (zh) 一种具有聚集诱导发光特性的席夫碱化合物及其用于制备比率荧光探针的方法
CN115015207A (zh) 食品色素的双模比色检测荧光试纸及其制备方法和应用
CN107629786B (zh) 2-甲基咪唑啉作为pH值和Fe3+双功能荧光探针的应用及其荧光探针

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant