CN113287621A

CN113287621A - 咪唑衍生物a在制备防治香蕉枯萎病菌的农药杀菌剂的应用

Info

Publication number: CN113287621A
Application number: CN202110495495.XA
Authority: CN
Inventors: 彭程; 陆育生; 李春雨; 邱继水; 常晓晓
Original assignee: Pomology Research Institute Guangdong Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Pomology Research Institute Guangdong Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2021-05-07
Filing date: 2021-05-07
Publication date: 2021-08-24

Abstract

本发明首次公开了阿苯达唑在制备防治香蕉枯萎病菌的农药杀菌剂的应用，防治由香蕉枯萎病病原菌Fusariumoxysporum f.sp.cubense 4号生理小种引起的农作物病害，显著高于商品化杀菌剂咪鲜胺。

Description

咪唑衍生物A在制备防治香蕉枯萎病菌的农药杀菌剂的应用

技术领域：

本发明涉及咪唑衍生物A在制备防治香蕉枯萎病菌的农药杀菌剂的应用。

背景技术：

香蕉是世界四大水果之一，在国内和国际鲜果市场上占有重要地位。2017年全球香蕉总产量1.12亿吨,采收面积550万公顷；我国栽培面积和产量分别为40.5万公顷和1117万吨,仅次于印度，成为世界第二大生产国。相比其他热带作物,香蕉的经济效益更高，是我国热区农民增收的重要经济作物。但是，香蕉枯萎病的大规模爆发和流行，已严重危及到该产业的可持续发展。香蕉枯萎病是由一种土传真菌---尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusariumoxysporum Schlect.f.sp.cubense(E.F.Smith)Snyder and Hansen，Foc)侵染香蕉根部引起的病害，已知有4个生理小种,其中致病力最强、寄主更为广泛的Foc TR4严重影响了我国香蕉优势产区的布局,造成巨大经济损失，广东、广西两省损失了近200多万亩的种植面积，迫使香蕉栽培迁移至次适宜区云南省，而后者现今也有大规模爆发的趋势，每年因枯萎病导致的的直接经济损失高达50多亿元。

虽然培育抗性品种是防控该类病害最为经济、环保的方法，但在缺少抗性品种或抗性不完整的情况下,使用化学药剂仍将是防控作物真菌病害的主要手段。阿苯达唑在医学上可用于驱蛔虫、蛲虫、绦虫、鞭虫、钩虫、粪圆线虫等。但目前尚无阿苯达唑在抗香蕉枯萎病菌病害方面的相关研究。

发明内容：

本发明的目的是提供咪唑衍生物A阿苯达唑在制备防治香蕉枯萎病菌的农药杀菌剂的应用。

本发明是通过以下技术方案予以实现的：

式1所示的阿苯达唑在制备防治香蕉枯萎病菌的农药杀菌剂的应用：

使用时阿苯达唑浓度为2.5μg/mL-10μg/mL。香蕉枯萎病病原菌为香蕉枯萎病病原菌Fusariumoxysporum f.sp.cubense 4号生理小种。

本发明的有益效果如下：本发明首次发现了咪唑衍生物A阿苯达唑作为农药杀菌剂在防治香蕉枯萎病菌的新用途。能在植物体内输导，防治由香蕉枯萎病病原菌Fusariumoxysporum f.sp.cubense 4号生理小种引起的农作物病害，显著高于商品化杀菌剂咪鲜胺。

附图说明：

图1是72h不同化合物(10μg/mL)对香蕉枯萎病菌生长的影响；其中，化合物1为白皮杉醇；化合物2为喷昔洛韦；化合物3为酮酪酸；化合物4为咪酰胺；化合物5为异土木香内酯；化合物6为芝麻素；化合物7为咯喹酸；化合物8为阿苯达唑；化合物9为氰戊菊酯；化合物10为苯达松；化合物11为吡虫啉；化合物12为泼尼松龙；化合物13为地尔硫卓；化合物14为哌唑嗪；化合物15为替宁酸。

图2是48h不同浓度阿苯达唑对香蕉枯萎病菌生长的影响。

具体实施方式：

以下是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

实施例1：阿苯达唑对香蕉枯萎病菌的抑制作用

(1)受试药物

阿苯达唑，咪鲜胺、白皮杉醇、喷昔洛韦、酮酪酸、咪酰胺、异土木香内酯、芝麻素、咯喹酸、氰戊菊酯、苯达松、吡虫啉、泼尼松龙、地尔硫卓、哌唑嗪、替宁酸(阳性对照化合物)。

(2)供试真菌菌种

供试真菌菌种有1个，为香蕉枯萎病病原菌Fusariumoxysporum f.sp.cubense 4号生理小种。

(3)抗植物真菌活性测定

供试菌平板的制备：在无菌条件下，将纯种供试菌以密波线划法分别接种至无菌PDA培养基平板上，27℃培养一周左右，平板上长满菌苔，待用。

培养基的制备及其灭菌：培养基为PDA固体培养基，配方为：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、自来水1000mL。具体配制过程为：将去皮马铃薯切至5mm见方大小片状，加入自来水，煮沸20min，8层纱布过滤，在滤液中加入相应量的葡萄糖和琼脂粉，加热搅拌使其溶解，最后加自来水定容至相应量，分装在250mL的三角瓶中并加塞封口(每瓶装100mL培养基)，用高压灭菌锅115℃灭菌30min。

药液的配制：称取化合物咪鲜胺、白皮杉醇、喷昔洛韦、酮酪酸、咪酰胺、异土木香内酯、芝麻素、咯喹酸、氰戊菊酯、苯达松、吡虫啉、泼尼松龙、地尔硫卓、哌唑嗪、替宁酸、阿苯达唑各1.00mg于1.5mL无菌离心管中，分别加入1mLDMSO将其溶解。

带药培养基的制备：将灭好菌的三角瓶内的培养基加热溶化并冷却至50℃左右，在超净工作台上经无菌操作分别加入上述准备好的药液，轻轻摇动三角瓶使药液均匀分布于培养基中，阿苯达唑配成终浓度为10μg/mL的带药培养基，随即趁热倒入5个无菌培养皿(每个培养皿20mL培养基)中制成薄厚均匀的平板，并做好标记，其中咪鲜胺为阳性对照；以相同操作，制备阴性对照DMSO(0.1mL直接加入100mL无菌培养基中)的平板，做标记。

抑菌率测试：在无菌条件下，将供试菌平板用无菌打孔器打出一定数量的菌饼，用接种环托取菌饼置于准备好的带药培养基上，菌丝一面向下，每皿1个菌饼(做三个重复)，做好标记，置于27℃恒温箱中培养72h后取出培养物，用卡尺测量菌落直径(须十字交叉量取两次，三个重复平板都测量，取其平均数)，按照公式(1)计算抑菌率，在10μg/mL的浓度下，阿苯达唑抗植物真菌活性的计算结果见表1。

抑菌率＝(阴性对照生长直径-处理生长直径)/(阴性对照生长直径-5)×100％…(1)。

由表1可见，本发明化合物阿苯达唑对香蕉枯萎病菌有较好的杀菌效果，其中浓度为10μg/mL时能达到100％。其他化合物除咪鲜胺以外未见明显的抑菌效果。

表1化合物阿苯达唑和咪鲜胺对植物真菌的抑菌率

化合物	抑菌率(％)
		咪鲜胺	100
阿苯达唑	100

实施例2：

参考实施例1，不同之处在于，带药培养基的制备：将灭好菌的三角瓶内的培养基加热溶化并冷却至50℃左右，在超净工作台上经无菌操作分别加入上述准备好的药液，轻轻摇动三角瓶使药液均匀分布于培养基中，阿苯达唑配成终浓度分别为10μg/mL、5μg/mL、2.5μg/mL、1.25μg/mL、0.625μg/mL、0.3125μg/ml的带药培养基，随即趁热倒入5个无菌培养皿(每个培养皿20mL培养基)中制成薄厚均匀的平板，并做好标记；以相同操作，制备阴性对照DMSO(0.1mL直接加入100mL无菌培养基中)的平板，做标记。不同浓度阿苯达唑对香蕉枯萎病菌的抑制活性的计算结果见表2和3。

表2不同浓度阿苯达唑抑制香蕉枯萎病菌的抑制活性(48h)

毒力方程为：y＝2.2024x+4.8766，相关系数R²＝0.9448，EC₅₀＝1.138μg/ml

表3不同浓度阿苯达唑抑制香蕉枯萎病菌的抑制活性(72h)

毒力方程为y＝3.1728x+5.0574，相关系数为R²＝0.9871，EC₅₀＝0.9592μg/ml

由图2以及表2和表3结果可知，本发明涉及的阿苯达唑对香蕉枯萎病菌表现出优异的抑制作用，其EC₅₀值平均为1.05μg/mL。综上所述，本发明所述的阿苯达唑对香蕉枯萎病菌表现出显著的抑制活性。

实施例3：阿苯达唑能够从香蕉的生长环境中经根部内吸到香蕉根内部，并向上输导从而抑制香蕉枯萎病

将阿苯达唑用乙酸溶解，配成10000μg/mL的母液，再用0.5mM CaCl₂水溶液将母液稀释成100μg/mL的培养液。将事先培育好的香蕉幼苗(6叶期，此前未经阿苯达唑处理)放在0.5mM CaCl₂水溶液中预培养2小时后移入上述已准备好的阿苯达唑培养液中，48小时取香蕉根、茎、老叶及嫩叶各0.5克，捣碎后溶于2mL 80％甲醇中，用高效液相色谱仪可检测到此提取液中含有阿苯达唑，经计算，阿苯达唑在香蕉根、茎、老叶及嫩叶的含量分别为76.96μg/g FW、6.47μg/g FW、1.29μg/g FW、5.98μg/g FW。

Claims

1.式1所示的阿苯达唑在制备防治香蕉枯萎病菌的农药杀菌剂的应用：

2.根据权利要求1所述的阿苯达唑在制备防治香蕉枯萎病菌的农药杀菌剂的应用，其特征在于，使用时阿苯达唑浓度为2.5μg/mL-10μg/mL。

3.根据权利要求1或2所述的阿苯达唑在制备防治香蕉枯萎病菌的农药杀菌剂的应用，其特征在于，香蕉枯萎病病原菌为香蕉枯萎病病原菌Fusariumoxysporum f.sp.cubense 4号生理小种。